Vol. 7, No. 1, March, 2000
전신성 홍반성 루푸스와 류마티스 관절염에서
CTLA-4 exon 1과 p romoter 유전자 다형성에 대한 연구
고려대학교 의과대학 내과학교실
이영호・최성재・김예리・지종대・송관규
─A b s t r a c t─
Polymorphisms of CTLA-4 Exon 1 and Promoter Genes in Systemic Lupus Erythematosus and Rheumatoid Arthritis
Young Ho Lee, M.D., Seong Jae Choi, M.D.,
Ye Ree Kim, M.D., Jong Dae Ji, M.D., Gwan Gyu Song, M.D.
Division of Rheumatology, Departments of Internal Medicine, College of Medicine, Korea University, Seoul, Korea
O b j e c t i v e : Strong genetic evidence has shown an association between cytotoxic T lymphocyte associated antigen-4 (CTLA-4) and autoimmune diseases.
This study was set out to determine whether the polymorphisms of the CTLA-4 exon 1 and promoter are associated with susceptibility to systemic lupus erythe- matosus (SLE) and rheumatoid arthritis (RA) and their clinical features.
M e t h o d s : Polymerase chain reaction of genomic DNA-restriction fragment length polymorphism using Bst E II and Tru9 I was used to determine genotypes of the CTLA-4 exon 1 and promoter in 80 SLE, 86 RA patients and 86 healthy control subjects. Clinical manifestations were analyzed in each patient and cor- related with the genotypes.
＜접수일 : 2000년 1월 16일, 심사통과일 : 2000년 2월 14일＞
※통신저자 : 송 관 규
서울특별시 성북구 안암동 126-1 고려대학교 의과대학 안암병원 내과학교실
Tel : 02) 920-5344, Fax : 02) 920-5974, E-mail : [email protected] 본 연구는 고려대학교 교내특별연구비 지원으로 이루어 졌음.
서 론
세포독성 T 세포 연관 항원-4(Cytotoxic T lym- phocyte associated antigen-4, CTLA-4)는 활성 화된 T 세포의 표면에 발현되어 항원제시세포의 B 7 분자와 반응하여 음성적 신호를 T 세포에 전달하여 T 세포의 분화, 사이토카인 생성 및 면역 반응에 관 여한다1 ). CTLA-4 결손 쥐의 경우 림프구의 심한 조직 침착으로 인한 조직 파괴, 비장비대증, 림프구 증식, 림프선 비대 및 혈중 면역글로블린의 상승 등 이 관찰되고 3 - 4주 내에 죽게 된다2 ). CTLA-4-면 역글로블린( C T L A - 4의 세포외 영역과 인간 I g G 1의 Fc 부분의 키메릭 결합 단백질)을 루푸스동물에 투 여하면 루푸스 활성을 억제하여 생존기간을 연장시 키고, 콜라겐 유발 동물모델에서는 콜라겐 유도 관
절염의 생성이 억제되는 것이 관찰되는데3 , 4 ), 면역반 응에 관여하는 C T L A - 4의 발현이나 기능의 장애로 인한 CTLA-4-B7 반응경로의 이상은 자가면역질환 의 발생과 연관이 있을 수 있다5 ).
전신성 홍반성 루푸스(이하 루푸스)는 다클론성 B 세포의 활성으로 자가항체 및 면역 복합체 생성이 증가하여 여러 장기에 손상을 입히는 대표적인 자가 면역질환이며 류마티스 관절염은 면역장애로 인해 활액막내 T 세포의 침착 및 활액막의 증식으로 관절 손상이 특징인 만성 염증성 자가 면역질환이다. 루 푸스와 류마티스 관절염의 원인은 아직 뚜렸하게 밝 혀져 있지않지만 발병기전에 유전적 요인 및 환경적 요소가 복합적으로 작용한다.
최근 CTLA-4 유전자 다형성이 그레이브씨 병과 제 1형 당뇨병 같은 자가면역질환과 연관 있음이 밝 혀지고 있고6 , 7 )C T L A - 4는 자가면역질환의 후보유전 R e s u l t s : The genotype frequency of the CTLA-4 exon 1 differed between SLE patients and controls (chi-squared＝6.74, 2 degrees of freedom (df), p＝
0.03). The CTLA-4 AG genotype occurred more frequently in patients with SLE (46.3% vs. 33.7% controls). On the other hand, the CTLA-4 AA genotype as well as the CTLA-4 GG genotype was less frequent among SLE patients than among control subjects (1.3% vs. 9.3% and 52.5% vs. 57.0% respectively). The genotype distribution of the CTLA-4 promoter differed between SLE patients and control subjects (CT, TT, CC genotypes 27.5%, 0%, 72.5% vs. 16.3%, 4.7%, 79.1% controls respectively, chi-squared＝6.36, 2 df, p＝0.04). When the associa- tion was analyzed with respect to sex, the distribution of the CTLA-4 exon 1- promotor genotypes was significantly different between female SLE patients and females in the control group (chi-squared＝8.16, 3 df, p＝0.04). The frequencies of the CTLA-4 exon 1 and promoter genotypes, allele and phenotypes and exon 1-promotor genotypes were not significantly different between RA patients and control subjects. Clinically, there were no significant differences in patients with SLE and RA according to the CTLA-4 polymorphisms.
C o n c l u s i o n: The polymorphisms within the CTLA-4 exon 1 and promoter appear to play a role in susceptibility to SLE, but not to be associated with clin- ical features of SLE, susceptibility to RA and its clinical features.
Key Words : Systemic Lupus Erythematosus, Rheumatoid Arthritis, CTLA-4 P o l y m o r p h i s m s
자(candidate gene) 중의 하나로 알려졌으나 CTLA-4 유전자 다형성과 루푸스 및 류마티스 관절 염과의 관계는 아직 명확히 알려져 있지 않다. 저자 들은 CTLA-4 유전자 다형성과 루푸스 및 류마티스 관절염의 유전적 감수성 및 임상양상과의 관계에 대 해 알아보고자 하였다.
대상 및 방법
1. 대상
고려대학교 병원 류마티스 내과에서 치료중인 루푸 스 환자 8 0명(77 여자, 3 남자, 나이 1 6 ~ 6 2세)과 류마티스 관절염 8 6명(72 여자, 14 남자, 나이 1 6 ~ 7 2세)을 대상으로 하였고 이들은 모두 각각의 미국 류마티스 학회의 진단기준을 만족하였다8 , 9 ). 대 조군은 자가면역질환이 없는 건강한 성인 8 6명( 6 7 여자, 19 남자, 나이 1 8 ~ 7 0세)을 대상으로 하였다.
임상적인 분석으로 루푸스 환자에서 신장침범은 신조 직 검사로 확진 되거나 일일 단백뇨가 5 0 0㎎/day 이 상인 경우로 하였고 혈중 항 dsDNA 항체와 C3 는 가장 심한 수치를 이용하였다. 루푸스 진단기준 만족 개수, 루푸스 활성도( S L E D A I )1 0 ) 및 루푸스 손상지 수( S L I C C / A C R )를 구하였고1 1 ) 자가항체는 항 R o , La, RNP, Sm, cardiolipin 항체, lupus antico- agulant 및 류마티스 인자 등의 유무를 조사하였다.
류마티스 관절염 환자에서는 적혈구 침강속도, C- 반응 단백질, 류마티스 인자, 기능적 상태1 2 ), 심한 질환 유무 및 의사의 전반적 평가를 조사하였다. 심 한 질환은 1) 관절수술을 받거나, 2) 관절수술이외의 류마티스 관절염 때문에 입원하거나, 3) 류마티스 결 절, 혈관염, 폐침범 같은 관절외 증상이 나타나거나, 4) 경부척추를 침범한 경우 중 한가지 이상 있을 경 우 심한 질환으로 정의하였고 의사의 전반적 평가는 0 (심하지 않음)에서 10 (가장 심함) 범위에서 환자 의 심한 정도를 의사의 판단에 따라 평가하였다.
2. CTLA-4 exon 1과 promoter 유전자 다형성 검사
대상 환자와 대조군에서 혈액을 채취한 후 DNA 추 출키트(Dr. GenTLE, Takara, Japan)를 이용하여 D N A를 추출하였다. 분리한 DNA 표본의 C T L A - 4 exon 1의 유전자 다형성 검사를 위해 5 0 n g의 D N A ( 2㎕)와 각각 20 pmole의 전방 시발체 5’- A A G- G C T C A G C T G A A C C T G G T - 3’ 와 후방 시발체 5’- C T G C T G A A A C A A A T G A A A C C C - 3’를 PCR Pre- Mix 키트(Bioneer, Korea) 튜브(1U Taq DNA polymerase, 250μM dNTP, 10mM Tris-HCl (pH9.0), 40mM KCl, 1.5mM MgCl2)에 넣고 총 부피가 2 0㎕가 되도록 삼차증류수를 넣은 후 P e r k i n - Elmer-Cetus 9600 thermal cycler에서 중합효소연
Fig. 1. CTLA-4 exon and promoter genotypes by PCR-RFLP
Fig. 1.
The genotype GG (152 bp), AG(152, 130 bp), AA (130 bp) CC (226bp), CT (226, 130, 96 bp), and TT (130, 96 bp) are shown쇄반응( P C R )을 하였다. 94℃에서 4분간 변성 시킨 이후에 9 4℃에서 3 0초간 변성 시킨 후 5 8℃에서 3 0초 간 아닐링 시킨 다음 7 2℃에서 3 0초간 시발체 연장반 응을 3 0회 반복한 후 7 2℃에서 4분간 최종 연장반응을 하였다. 증폭된 152bp PCR 생성물을 1 0 U의 B s t E II 제한효소를 이용하여 6 0℃에서 9 0분간 처리하여 분 해하였다. 구아닌(G) 대립유전자는 분해되지 않고 아 데닌(A) 대립유전자는 1 3 0 b p와 22bp 단편으로 분해 된다. 이후 BstE II로 처리한 단편을 3% 아가로스 겔 에 전기영동 한 후 ethidium bromide로 염색하여 자 외선 아래에서 CTLA-4 exon 1의 유전자 다형성을 검사하였다(그림 1 ) .
CTLA-4 promoter 유전자 다형성 검사를 위해 5 0 n g의 DNA (2㎕)와 각각 20 pmole의 전방 시발 체 5’- A A A T G A A T T G G A C T G G A T G G T - 3’ 와 후방 시발체 5’- T T A C G A G A A A G G A A G C- C G T G - 3’를 PCR PreMix 키트(Bioneer, Korea) 튜브(1U Taq DNA polymerase, 250μM dNTP, 10mM Tris-HCl (pH9.0), 40mM KCl, 1.5mM M g C l2)에 넣고 총 부피가 2 0㎕가 되도록 삼차증류 수를 넣은 후 Perkin-Elmer-Cetus 9600 thermal c y c l e r에서 중합효소연쇄반응( P C R )을 하였다. 94℃
에서 4분간 변성 시킨 이후에 9 4℃에서 3 0초간 변성 시킨 후 5 8℃에서 3 0초간 아닐링 시킨 다음 7 2℃에 서 3 0초간 시발체 연장반응을 3 0회 반복한 후 7 2℃
에서 4분간 최종 연장반응을 하였다. 증폭된 P C R 생성물을 1 0 U의 Tru9 I 제한효소를 이용하여 3 7℃
에서 9 0분간 처리하여 분해하였다. 사이토신(C) 대 립유전자는 21bp 자리만 분해되고 타이미딘(T) 대 립유전자는 130bp, 96bp와 21bp 단편으로 분해된 다. Tru9 I 제한효소로 처리한 단편을 2% 아가로스 겔에 전기영동 한 후 ethidium bromide로 염색하 여 자외선 아래에서 CTLA-4 promoter의 유전자 다형성을 검사하였다(그림 1 ) .
3. 통계 분석
대상군에서 CTLA-4 exon 1과 promoter 유전자 의 유전형, 대립유전자, 표현형 및 임상양상의 통계 적 분석은 chi-square, Wilcoxon, 또는 K r u s k a l - Wallis 검정을 이용하였다. p 값이 0 . 0 5이하인 경
우를 의의 있는 경우로 하였다.
결 과
1. CTLA-4 exon 1 유전자 다형성
루푸스 군에서 CTLA-4 exon 1의 유전형은 대조 군에 비해 의의 있는 분포의 차이를 보였다(χ2＝6 . 7 4 , 2df, p＝0.03). CTLA-4 AG 유전형은 루푸스 군에 서 대조군에 비해 흔히 관찰되었으나(46.3% vs.
33.7% 대조군) CTLA-4 AA와 CTLA-4 GG 유전 형은 루푸스 군에서 적게 관찰되었다(AA: 1.3% vs.
9.3%, GG: 52.5% vs. 57.1%). 그러나 C T L A - 4 exon 1의 대립유전자 및 표현형의 빈도는 루푸스군 과 대조군 간에 유의한 차이를 보이지 않았다(표 1 ) .
류마티스 관절염 군에서 CTLA-4 AG와 AA 유전 형은 대조군에 비해 흔히 관찰되었고(AG: 40.0%
vs. 33.7%, AA: 11.6% vs. 9.3%) CTLA-4 GG 유전형은 적게 관찰되었으나(47.7% vs. 57.0% 대 조군) 의의 있는 차이는 아니었다(χ2＝1.50, 2df, p＝0.47). CTLA-4 exon 1의 대립유전자 및 표현 형의 빈도는 류마티스 관절염군과 대조군 간에 유의 한 차이를 보이지 않았다(표 2 ) .
2. CTLA-4 promoter 유전자 다형성
루푸스 군에서 CTLA-4 promoter 유전형은 대조 군에 비해 의의 있는 분포의 차이를 보였다(χ2＝6 . 3 6 , 2df, p＝0.04). CTLA-4 CT 유전형은 루푸스 군에 서 대조군에 비해 흔히 관찰되었으나(27.5% vs.
16.3% 대조군) CTLA-4 TT와 CTLA-4 CC 유전형 은 루푸스 군에서 적게 관찰되었다(TT: 0% vs.
4.7%, CC: 72.5% vs. 79.1%). 그러나 C T L A - 4 p r o m o t e r의 대립유전자 및 표현형의 빈도는 루푸스군 과 대조군 간에 유의한 차이를 보이지 않았다(표 3 ) .
류마티스 관절염 군에서 CTLA-4 CT 유전형은 대 조군에 비해 흔히 관찰되었으나(22.1% vs. 16.3% 대 조군) CTLA-4 TT와 CTLA-4 CC 유전형은 류마티 스 관절염 군에서 적게 관찰되었으나(TT: 2.2% vs.
4.7%, CC: 75.6% vs. 79.1%) 의의 있는 차이는 아 니었다(χ2＝1.29, 2df, p＝0.47). CTLA-4 exon 1의 대립유전자 및 표현형의 빈도도 류마티스 관절염 군과
Table 1. CTLA-4 exon 1 polymorphism in patients with SLE and controls
S L E C o n t r o l s ( n＝8 0 ) ( n＝8 6 ) Genotype frequenciesa
G G 42 (52.5) 49 (57.0)
A G 37 (46.3) 29 (33.7)
A A 1 (2.3) 8 (9.3)
Allele frequenciesb
G 121 (75.6) 127 (73.8)
A 39 (24.4) 45 (26.2)
Phenotype frequenciesc
G positive 79 (98.8) 78 (90.7) A positive 38 (47.6) 37 (43.0) Values given are the number of subjects(%).
aχ2 test of heterogeneity between SLE and con- trols. χ2＝6.74, 2 degrees of freedom; p＝0 . 0 3 .
bχ2 test of heterogeneity between SLE and con- trols. χ2＝0.04, 1 degrees of freedom; p＝0 . 8 5 .
cOdds ratio for G phenotype (SLE)＝0.97 (95%
C I＝0.54~1.75, p＝0 . 9 7 ) .
Table 2. CTLA-4 exon 1 polymorphism in patients with RA and controls
R A C o n t r o l s ( n＝8 6 ) ( n＝8 6 ) Genotype frequenciesa
G G 41 (47.7) 49 (57.0)
A G 35 (40.7) 29 (33.7)
A A 10 (11.6) 8 (9.3)
Allele frequenciesb
G 117 (68.0) 127 (73.8)
A 55 (32.0) 45 (26.2)
Phenotype frequenciesc
G positive 76 (88.4) 78 (90.7) A positive 45 (52.3) 37 (43.0) Values given are the number of subjects(%).
aχ2 test of heterogeneity between RA and con- trols. χ2＝1.50, 2 degrees of freedom; p＝0 . 4 7 .
bχ2 test of heterogeneity between RA and con- trols. χ2＝1.14, 1 degree of freedom; p＝0 . 2 9 .
cOdds ratio for G phenotype (RA)＝0.80 (95%
C I＝0.45~1.42, p＝0 . 5 0 ) .
Table 3. CTLA4 promoter polymorphism in patients with SLE and controls
S L E C o n t r o l s ( n＝8 0 ) ( n＝8 6 ) Genotype frequenciesa
C C 58 (72.5) 68 (79.1)
C T 22 (27.5) 14 (16.3)
T T 0 (0) 4 (4.7)
Allele frequenciesb
C 138 (86.2) 150 (87.2)
T 22 (13.8) 22 (12.8)
Phenotype frequenciesc
C positive 80 (100) 82 (95.4)
T positive 22 (27.5) 18 (21.0) Values given are the number of subjects(%).
aχ2 test of heterogeneity between SLE and con- trols. χ2＝6.36, 2 degrees of freedom; p＝0 . 0 4 .
bχ2 test of heterogeneity between SLE and con- trols. χ2＝0.75, 1 degrees of freedom; p＝0 . 3 9 .
cOdds ratio for G phenotype (SLE)＝1.26 (95%
C I＝0.63~2.55, p＝0 . 2 9 ) .
Table 4. CTLA-4 promoter polymorphism in patients with RA and controls
R A C o n t r o l s ( n＝8 6 ) ( n＝8 6 ) Genotype frequenciesa
C C 65 (75.6) 68 (79.1)
C T 19 (22.1) 14 (16.3)
T T 2 (2.3) 4 (4.7)
Allele frequenciesb
C 149 (86.6) 150 (87.2)
T 23 (13.4) 22 (12.8)
Phenotype frequenciesc
C positive 84 (97.7) 82 (95.4) T positive 21 (24.4) 18 (21.0) Values given are the number of subjects(%).
aχ2 test of heterogeneity between RA and con- trols. χ2＝1.49, 2 degrees of freedom; p＝0 . 4 7 .
bχ2 test of heterogeneity between RA and con- trols. χ2＝0.00, 1 degree of freedom; p＝1 . 0 0 .
cOdds ratio for G phenotype (RA)＝1.37 (95%
C I＝0.69~2.73, p＝0 . 4 3 ) .
대조군 간에 유의한 차이를 보이지 않았다(표 4 ) .
3. CTLA-4 exon 1-promoter 유전자 다형성 CTLA-4 exon 1-promoter 유전형의 분포는 루 푸스 군과 대조군 간에 의의 있는 분포의 차이는 없 었다(χ2＝13.7, 7df, p＝0 . 0 7 ) (표 5). 그러나 남녀로 나누어 여성 루푸스 군과 여성 대조군 간의 비교에서 는 CTLA-4 exon 1-promoter 유전형은 의의 있는 분포의 차이를 보였다(χ2＝8.16, 3df, p＝0 . 0 4 ) .
류마티스 관절염 군과 대조군 간에 CTLA-4 exon 1-promoter 유전형의 빈도분포는 유의한 차이를 보 이지 않으며(χ2＝6.38, 7df, p＝0.50) 남녀로 성을 나누어 분석하여도 CTLA-4 유전자 다형성과 류마 티스 관절염간에 의의 있는 연관은 없었다(표 6 ) .
4. CTLA-4 유전자 다형성에 따른 임상양상의 분석 루푸스 군에서 CTLA-4 exon 1, CTLA-4 pro- moter 및 CTLA-4 exon 1-promoter 유전형에 따 른 임상적 분석에서 발병나이, 신장침범, C3농도, 항 dsDNA 항체, 루푸스 진단기준 만족 개수, 루푸스 활성도(SLEDAI), 루푸스 손상지수( S L I C C / A C R ) 및 항 Ro, La, RNP, Sm, cardiolipin 항체, lupus anticoagulant 및 류마티스 인자 등의 자가 항체의 빈도등에 있어서 유의한 차이가 관찰되지 않 았다.
류마티스 관절염에서도 CTLA-4 exon1, promot- er, exon 1-promoter 유전자 다형성에 따른 임상적 분석에서 발병나이, 적혈구 침강속도, C-반응 단백 질, 류마티스 인자, 기능적 등급, 심한 질환유무 및 의사의 전반적 평가에서 의의 있는 차이는 없었다.
고 찰
C T L A - 4는 자가면역질환의 후보유전자로 염색체 2 q 3 3에 위치하고1 3 ) 3개의 유전적 다형성이 알려져 있 다. 첫번째로는 exon 1의 lead sequence ＋4 9위치에 아데닌과 구아닌의 치환으로 인한 아미노산의 변환 (Threonine to Alanine)을 초래하는 다형성이고 두 번째로는 p r o m o t e r의 －3 1 8위치에 사이토신과 타이 미딘과의 다형성이고 세 번째로는 exon 3의 u n t r a n - slated 부위 6 4 2번 위치에(AT)n microsatellite이다
7 , 1 4 , 1 5 ). CTLA-4는 T 세포의 활성에 관여하여 C T L A -
4 유전자 다형성들이 자가면역 질환과의 강한 유전적 감수성이 있음이 밝혀지고 있다6 , 7 ).
루푸스의 발병기전에 환경적 요소와 유전적 요소 가 복합적으로 작용하여 관여하는데 아직 정확한 원 인은 불명확하지만 강한 유전적 요소가 관여한다.
C4Anull, Fcγ수용체, HLA-DR2, DR3 등이 루 푸스의 후보유전자로 알려져 있지만1 6 ) 루푸스와 Table 6. CTLA-4 exon 1-promoter genotypes in
patients with RA and controls
R A C o n t r o l s p * ( n＝8 6 ) ( n＝8 6 )
A A - C C 3 (3.5) 1 (1.2) A A - C T 5 (5.8) 4 (4.7) A A - T T 2 (2.3) 3 (3.5) A G - C C 21 (24.4) 20 (23.3) A G - C T 14 (16.3) 8 (9.3)
A G - T T 0 (0) 1 (1.2
G G - C C 41 (47.7) 47 (54.7) G G - C T 0 (0) 2 (2.3)
T o t a l 86 (100) 86 (100) 0 . 5 0 Values given are the number of subjects(%),
* : χ2＝6.38, 7 degrees of freedom.
Table 5. CTLA-4 exon 1-promoter genotypes in patients with SLE and controls
S L E C o n t r o l s p * ( n＝8 0 ) ( n＝8 6 )
A A - C C 0 (0) 1 (1.2) A A - C T 1 (1.3) 4 (4.7) A A - T T 0 (0) 3 (3.5) A G - C C 23 (28.8) 20 (23.3) A G - C T 14 (17.5) 8 (9.3) A G - T T 0 (0) 1 (1.2) G G - C C 35 (43.8) 47 (54.7) G G - C T 7 (8.8) 2 (2.3)
T o t a l 80 (100) 86 (100) 0 . 0 7 Values given are the number of subjects(%),
* : χ2＝13.0, 7 degrees of freedom.
CTLA-4 유전자 다형성과의 관계에 대해서는 아직 까지 정확히 밝혀져 있지 않으며 현재까지 2개의 연 구가 보고되었다. 하나는 CTLA-4 exon 1의 유전 자 다형성에 대한 것이고1 7 ) 다른 하나는 C T L A - 4 exon 3의 m i c r o s a t e l l i t e에 대한 연구였다1 8 ). 비록 이들 연구에서 루푸스와 C T L A - 4와의 연관이 나타 나지는 않았지만, CTLA-4는 인종과 지리적 차이에 따른 유전적 다형성의 차이가 관찰되고 루푸스의 임 상양상과 CTLA-4 유전자 다형성과의 관계에 대해 서는 아직까지 연구된 바가 없으며 CTLA-4 pro- moter 유전자 다형성과 루푸스와의 관계에 대해서 도 보고된 바가 없다.
본 연구의 대조군에서 CTLA-4 exon 1의 유전자 다형성은 Hardy-Weinberg 법칙에 부합되었으나 (χ2＝3.14, 1 df, 0.05＜p＜0.10), CTLA-4 pro- moter 유전자 다형성은 Hardy-Weinberg 평형에 서 벗어났다(χ2＝7.38, 1 df, p＜0.05). Hardy- Weinberg 법칙은 돌연변이가 없고(no mutations) 자연도태가 일어나지 않는 가정을(no natural selections) 전제로 하기 때문에 CTLA-4 promot- er 유전자 다형성이 Hardy-Weinberg 평형을 만족 하지 않는 이유로는 CTLA-4 promoter 유전자의 돌연변이나 자연도태의 가능성을 고려해 볼 수 있다.
CTLA-4 유전자 다형성이 CTLA-4 발현과 기능 에 영향을 미치는 지에 대해서는 알려져 있지 않지만 본 연구에서 CTLA-4 exon 1, promoter 및 e x o n 1-promoter 유전자 다형성은 루푸스 환자 군에서 대조군에 비해 의의 있는 분포의 차이를 보였고 임상 적으로는 CTLA-4 유전자 다형성에 따른 의의 있는 차이는 없었다. 이는 CTLA-4 유전자 다형성이 한 국인 루푸스 환자의 유전적 감수성에 관여하지만 루 푸스의 임상양상과는 연관이 없는 것으로 생각된다.
류마티스 관절염에서 H L A - D R 4가 류마티스 관절 염 환자의 3 0 ~ 6 0 %에서 관찰되고 심한 질환의 경과 및 유전적 감수성과 연관이 있는 것으로 알려져 있으
나1 9 , 2 0 )H L A - D R 4이외의 다른 유전자들도 류마티스
관절염과 연관이 있을 수 있는데 아직 H L A이외의 다른 유전자들과의 관계에 대해서는 정확히 밝혀져 있지 않다. CTLA-4 유전자다형성과 류마티스 관절 염과의 관계에 대해서 현재까지 두 편의 논문이 보고
되었는데2 1 , 2 2 )
이들 연구에서 CTLA-4 exon 1 유전자 다형성이 H L A - D R이나 성에 따라 류마티스 관절염 의 유전적 감수성과 연관이 있다고 보고하였으나 아 직 CTLA-4 유전적 다형성과 류마티스 관절염의 임 상적인 관계 및 CTLA-4 promoter 유전자 다형성 에 대해서는 보고된 바 없다. 본 연구에서 H L A - D R 에 따른 분석은 없지만 CTLA-4 exon 1 과 p r o- moter 유전자 다형성과 류마티스 관절염의 유전적 감수성 및 임상 양상과의 관계에 대해 분석하였는데 CTLA-4 유전자 다형성과 류마티스 관절염과의 의의 있는 연관은 관찰되지 않았다.
본 논문에서 자료는 제시하지 않았지만 질병 대조 군으로 기관지 천식환자에서도 CTLA-4 exon 1과 promoter 유전자 다형성을 조사하였는데 루푸스군 만 류마티스 관절염, 천식 환자 군 및 대조군에 비해 의의 있는 CTLA-4 유전자 다형성 분포의 차이를 보였다. 이는 루푸스가 대표적이고 전형적인 자가면 역 질환이고 류마티스 관절염이나 천식의 발병기전 과 다르므로 루푸스에서만 CTLA-4 유전자 다형성 의 의의 있는 차이를 보인 것은 CTLA-4 유전자 다 형성이 루푸스의 유전적 감수성에 관여한다는 것을 시사하는 소견으로 생각된다.
CTLA-4 exon 1과 promoter 유전자 다형성 이외 에 m R N A의 안정성에 기여할 가능성이 있는 e x o n 3의(AT)n microsatellite 유전자 다형성도2 3 ) 자가면 역질환과의 관련이 있음이 알려지고 있지만2 4 ) 루푸스 와 류마티스 관절염과의 관계에 대한 연구는 없어 앞 으로 이에 대한 연구도 필요할 것으로 생각된다.
결론적으로 CTLA-4 exon 1과 promoter 유전자 다형성은 한국인 루푸스 환자의 유전적 감수성에 관 여하나 루푸스의 임상양상과 류마티스 관절염의 유 전적 감수성 및 임상양상과는 연관이 없을 것으로 판단된다.
결 론
CTLA-4 exon 1과 promoter 유전자 다형성은 한국인 루푸스 환자의 유전적 감수성에 관여하나 루 푸스의 임상양상 과 류마티스 관절염의 유전적 감수 성 및 임상양상과는 연관이 없는 것으로 판단된다
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