황뚫

(1)

대한임상병리사회지 : 제 19권 제 1 호 1987

Primary Benign M-Proteinemia

아산재단부속 보령병원 임상병리과 서 덕 규

Primary Benign M - Proteinemia

Duck Kyu Seo

Department 01 Clinical Pathology, Bo-Ryung Hospital

= Abstract =

M-proteinemia is a rare disease, when it is found at the test procedure of zone electrophoresis.

Author performed the agarose gel electrophoresis about nine thousands of serum samples of healthy adult and the primary M-proteinemia were found 4 cases in old adults^, 59, 62, 64,

and 65 years old men.

1 . 서 론

M-단백 이 란 monoclonal protein의 머 리 글자의 M을 따서 명명한 것으로서 단일 클론성 면역글로불 런을 뜻한다. 단백전기영동을 하면 단일의 면역글로 불린이 좁은 폭으로 염색되어 나타나고 (band 상) densitography상 날카로운 peak 가 그려지 게 된다.

또한 이 런 검 체 를 immunoelectrophoresis를 하면

특이한 M-bow 침강상(선)으로서 나타나게 된다.

일반적으로 생각할 때 혈청단백 전기영동은 건강 인을 대상으로 다량의 겸체를 분석실시하는 경우란 아주 특별한 경우를 제외하면 거의 없다고 보겠다.

즉 정상 참고치를 구하고자 하는 경우라든가 노인층 또는 소아의 정상 참고치를 구하여 청년 빛 장년층 의 성적과 비교하기 위한 경우 등을 예로 들 수 있 겠다. 저자는 이와같은 경우에서 대상자 자신은 건 강하다고 느끼고 있는 건강진단 대상자를 9， 000여명 가량 실시하는 기회를 가졌으며 이때에 발견된

primary benign M-proteinemia의 출현을 보았기 에 보고하는 바이다.

11. 방법 및 대상

1 . 대 상

건강진단을 목적으로 내원한 대상자와 보건사회 부의 노인 건강진단을 목적으로 병의원을 찾은 대상 자에서 정맥채혈을 하였다. 채펠은 공복 또는 섭식 후와 관계없이 5ml의 혈액을 채취하고 시험관에 분 주하고， 응고가 완결될 때를 기다렸다가 혈청을 분 리하여 4⁰C 의 냉장고에 보관히-면서 검사블 실시했 으며 늦어도 48시간 이내에 전 71 영동분석과 혈청단 백량 정량을 완료하였다. 면역전기영동은 모았다가

2 주 이내에 실시하였다.

2. 전기영동 방법

전 기 영 동은 agarose gel electrophoresis의 방볍 을 실 시 하였 다 1) Buffer solution은 tris-barbital, pH 8.6-8.8, 이온강도 0.05활 사용하였다 .2) A- garose gel plate 조제 는 세 로 76mm, 가로 60mm, 두께 1mm 이내에 유리판을 준비했고 gel 용액준비 는 우선 100ml의 tris-barbital buffer액 에 Gibco회

… …

(2)

사의 agarose 1 9m를 청량하여 넣고 끓는 중탕전에 서 agarose powder granule이 완전히 녹을 때까지 가열하였다. 완전히 액화상태가 되면 작업대의 평면 이 완전히 수평상태인 곳에 유리판(넓은 별도의 판) 을 깔고 이 위 의 agarose gel plate를 만들 유리 판을 놓고 여기에 가열된 agarose gel액을 2ml를 놓아 고르게 퍼져 평판이 되도록 하고 웅고가 되게 하였 다. 이와같이 만들면 대략 0.45mm 두께의 gel

plate가 만들어 진다. 이 gel plate는 습윤상자에 넣 고 4t 의 냉장고에 보관하면서 사용하였다.

검 체 혈 청 도포는 Helena well plate ^hole에5 ul

의 혈 청 을 넣 고 Helena applicator로 agarose gel

plate상에 0.8 ul 내외의 serum을 도포하고 electrophoresis ^chamber에^서200 volts 10mA로 15분

간 전기영동하였다. 영동시간이 완료되면 hair

dryer를 사용하여 agarose gel을 완전 건조시 킨 후

Ponceau S dye solution(0.2% ponceau S, 3.5%

trichloroacetic acid, 3.5% sulfosalicylic acid ^농

도의 용액)에서 15분간 염색한 다음 5 % acetic

acid액에서 탈색과정을 1 분간씩 2-3 번 옮겨 가며

실시하였다.

Background가 완전무색이 되도록 탈색이 되었으 면 hair dryer로 건조시킨 후 500 - 520nm (Coming 720 densitometer 520nm) 의 파장에서 densitome-

try를 하여 각 fraction의 농도 백 분율을 구하였고，

serum protein 농도에 각 분획 백분융을 곱하여 단 백농도를 구하였다.

2. 혈첨단백 정량

Biuret법을 이용하였다 3) 즉 혈청 0.1ml와 Bi-

uret시약 5ml를 섞어 실온에서 30분간 발색이 완료 되도록 두었다가 540nm 파장에서 Stasar III

spectrophotometer 로 측정하였다. 혈청단백 표준은

Versatol contr이 serum을 사용하였고 blank는 중 류수 0.1ml와 Biuret 시약 5ml를 섞어 썼다.

3. 면역전기 명동

Coming 회사에서 공급되는 필름으로서 agarose

Table ^1.M-proteinemia의 분류

1. Malignant M-proteinemia (Malignant monoclonal immunoglobulinemia) 1) Myeloma

2) Primary macroglobulinemia (Waldenstrðm) 2. Benign(essential) M-proteinemia

1) Lymphoproliferative disease; Malignant lymphoma

Chronic lymphocytic leukemia Others

2) Inflammatory disease or nonreticular neoplasms

; Chronic inflammatory disease Autoimmune diseases

Liver & biliary diseases Chronic renal diseases Cancers

Amyloidosis Others 3) Normal person(primary benign)

; The old men ^&women Femilial cases

Others 3. 불완천 분자 M-proteinemia

1) Heavy chain diseases

2) Solomon-Kunkel diseases(7S IgM disease) 3) IgG, IgA 반분자혈증

4 ) 기타 불완전 분자혈중

(3)

universal electrophoresis film을 사용하여 M-

protein 이 나타난 serum 검 체 와 normal human

serum을 동시에 전기영동하였다 4) 완료된 후 Ha- milton syringe로 anti-human whole serum (sheep) 을 필름 중간 홈에 채우고 24시간 동안 실온에서 반 응시켜 M-bow를 확인하였다. 종별구분을 위한

anti L-chain 똥rum(x 빛 η) 은 사용하지 않았다.

川. 성적 및 고찰

대상인원의 연령은 19세에서 66세까지였으나 50 세 미만의 대상자 중에서는 M-protein이 출현되지 않았으며， 51세에서 66세까지의 대상자 1， 092명 중 4 예에서 발견되었으며 출현율은 0.3663% 가 되었 다. 이 런 증례는 모두 y-globulin 영역에서 나타났 으며 각 증례의 연령은 59세， 62세， 64세， 65세 등 으로 다같이 고령자에서 발견되었다. 또한 M

-protein 량은 다같이 낮아서 y-globulin 총량이 1.

46gm/100ml 내지 1.69gm/100ml 범위였으므로 이 의 1/3 가량의 적은 량으로 계산되었다.

일반적으로 양성 M-단백혈증은 악성 M-단백혈 증과 더불어 자주 발견된다고는 볼 수 없다. 악성 M

-단 백 혈 증 (malignant M-proteinemia) ^{이 라 면} myeloma 나 primary macroglobulinemia (Wal-

den-ström) 등의 질명을 의심하여 검사가 진행되

지 만 양성 M-단백 혈증 (benign M-proteinemia) 이 라면 여러 가지 질병과 연관되어 나타나기도 하고 또한 완전히 건강한 사람에게세 나타나는 primary benign M -proteinemia를 생 각하 게 된 다 5)

Benign 또는 essential M-proteinemia를 고찰하

여 볼 때 첫 째 로 lymphoproliferative disease에 연 관되어 나타나는 경우 (malignant lymphoma, chronic lymphocytic leukemia 및 그 밖의 질 환) 와

inflammatory disease, nonreticular neoplasm, autoimmune disease, Iiver 및 bi1iary disease, chronic renal disease^, cancers, amyloidosis, 그 밖에 여러 질환에서 나타난다고 보고되고 있다. 또 한 불완전 분자 M-단백혈중으로 구분되는 heavy chain disease, Salomon-Kunkel disease (7S IgM 병)， IgG 또는 IgA 반분자혈중， 기타 불완전 반분 자혈중 둥에서 나타난다고 한다 (Table 1^,Fig. 1, 2

참조) .

M-단백의 생성기전에 관하여는 여러 학자들의 통 잊된 정셜은 확적되었다고는 볼 수 없지만 일반적으 로 생각할 때 M-단백은 단일 clone에 속하는 항체 생성 세포군에 의하여 생성되는 것으로 판단된다.

또한 어떤 유전적인 요소가 가해져서 선천적으로 불 안정한 상태에 있는 망내계 조끽을 갖고있는 사람이 있는 것으로 우선 생각된다. 한편 후천적인 것을 생 각한다면 어떤 명적인 자극이 가해지면 방내계 조직 에 불안정한 상태가 되어 발생된다고도 본다. 어쨌 든 망내계 조직 특히 면역글로.불린 생성 근원에서 c10ne구성의 혼란이 생기는 상태가 선행된다면 이와 같은 상태에서 연령증가라든가 특정유인이 첨가되 어(예 : 악성럼프중， 백혈병， 면역부전중후군， 염중 질 환 등) 특정 c10ne만이 폭주꾀 고 반면 다른 c10ne

이 제한당한다던가 하는 상황이 생겨서 M-단백혈증 이 발생된다고 생각하는 경향이 강하다.

저 자는 primary benign M-proteinemia에 해 당하 는 고령자이면서 자각적 타각적 무증상 대상에서 발

Fig. 1. The densitograms of benign M-proteinemias(primary)

Peokno 1(105’ê5’ ^migralÔl)^이^때hIôt^prolile

Case 1.

Alb.

a,-glob. I 0.2-0.4(4. 깐 7.2%) 획-g빼 I o. 웅α9(6. 용 12%) β-영。b. I α 6- 1.1 (9. 운 15%) Y-glòb. I α7- 1. 7(1운23%) T. protein ! 5. 동8.0(100%)

-234-

Hosp

(4)

Peakno. ’^(f05’^e5’ ^m써rolor)⁰¹^{때배이 p찌i’e}

Case 2.

\'J\'에‘￥e

Peokno ’ (f05’e51migrolα)olrig메 이 proflle

Case 3.

Peakno ’⁽¹⁰⁵’^e5’ migrolor) 이 때에 이 pr'이le

Case μ.

Name 1^J,’ ^Hosp

Normal- range g% I % T. protein I ^gm/l00ml.

Alb. 3. 90-5. 00 (54. 3-69. 5%)

<<,-glob. 0.13-0.32 (1. 8-4. 4%)

<<,-glob. O. 33-0. 76 (4. 6-10. 6%)

ß-glob. 0.42-0.91 (5. 9-12. 7%) y-glob. 0.92-1. 68 (12. 8-23. 4%) T. protein 6.2-8.0(100%)

N ormal- range μ%1

Alb. 3.5-5.5(50-60%)

<<,-glob. 0.2-0.4<4.2-7.2%)

<<,-glob. O. 5-0. 9 (6. 8-12%)

β-glob. 0.6-1.1 (9. 3-15%) y-glob. 0.7-1. 7(13-23%) T. proteill ! 5.5-8.0 (l어)%)

Hosp

% T. protein 1!II1/100ml.

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y-glob. 0.92-1. 68 (12. 8-23. 4%) 까/까 2 1₁6q

T. protcin 6.2-8.0(100%) 낀 [_0

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(5)

Fig. 2. The Densitograms of benign M-proteinemias(inflammatory and lymphoproliferative diseases)

깐χrI‘

Peokr P ’(fostest rigrc 。r’‘’”‘ ^h’ ^。fbrofile

Peok no 1 (Iostest migrotor) 01 right 01 prolile

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Normal-ra빠 Alb. I 3.5-5.5(50-60%) a,-glob‘ I 0.2-0. 4{4. 2-7. 2%)

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T. protein 5.5-8.0 (1배%) μ ~p 11 /

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Àlk. Phos.

냐 -11M

Peokno. ’ ^(fas’esl migralor) 이 righl 01 proflle

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견된 4 증례를 경험하였다.

증례 1 은 62세된 교직자로서 본인의 자각적 증상 으로서 잦은 피 로감을 호소하지 만 충분한 수면 후는 아무런 이상을 느끼지 않는다고 하는 것 이외에는 내과 검진상 특기할만한 것이 없었다. 임상병리검사 성 적 은 urinalysis, parasite, feces occult blood 등 이 정 상이 였고， hematology에 서 는 RBC 4.12x 10⁶/ul, WBC 6.3x10³/ul, Hb 12.1gm/dl^, Ht 39%, platelet 30.6 ^X10⁴/ul 였고 blood smear상 이 상 없 었 다 . Blood chemistry에 서 glucose, BUN, creatinine^, serum protein^, AST, ALT, ALP,

LDH^,빛 VDRL 등에서 이상을 인정할 수 없었으나 단지 protein electrophoresis에 서 gamma globu-

lin의 백분율에서 약간의 상승과 albumin 분획량의 감소가 나타났을 뿐이다. 또한 방사선과 진단상으로 서도 이상이 없었다.

증례 2 는 노인 건강진단을 위하여 내원한 경우로 서 자각증상은 요통과 피 로를 호소하고 내 과적 진 찰 소견은 특별한 것은 없었다. Urinalysis parasi-

tology는 정상이였으며， RBC 3.96 ^X10⁶/ul, WBC 7.2 X 10³/ul, Hb 11.6gm/dl^,Ht 38%^,platelet 21.

4 X 10⁴/ul 였고， VDRL, HBsAg, 및 Ab도 negative

The serum of normal control

였다. 이 경우도 blood chemistry상 albumin 량의 감소와 gamma globulin 백분율의 상승이 인정될 뿐

glucose^, BUN, creatinine^, AST, ALT, LDH,

ALP 등에서 이상이 발견되지 않았다.

증례 3 은 증례 2 와 같은 경우로서 노인정에서 소 일하고 자각증상으로서는 특기할만한 것이 없었다.

Urinalysis, parasitology에 서 정 상 이 고 hematology 결 과는 RBC, 4.06 x 10⁶/ul, WBC 5.5 x 10³^/ ul, Hb 12. Ogm/dl^,Ht 38%, platelet 24.0 X 10⁴/ul

였고 blood chemistry ^{및 VDRL에}^서^{도 정 상이}^였

다. 이 경우는 특히 slow-gammaglobulin 위치에 spike 가 인정되어 좀 더 유의하여 조사하였으나 여 타의 이상이 발견되지 않았다.

증례 4 는 59세된 노무직 공무원으로서 외모상 건 장한 체구였고 자각증상으로서 피로감 외에는 내과 적 이 상 이 없 었 다 Urinalysis, parasitology, hematology, blood chemistry 상 이 상이 없었다.

이상의 4 증례는 benign M-proteinemia ^중에서

도 특별히 건강자에서 볼 수 있는 primary benign M -proteinemia로 볼 수 있는 경 우라고 추측되 며 이 외 에 여 러 증례의 inflammatory disease에서 일시 적 M-protein 이 나타났지만 증상이 호전됨에 따라

•

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Anti-human all serum

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The serum of M-protein

Fig. 3. Immunoelectrophoresis of M-protein

씨

(7)

소실되는- 것을 볼 수 있었다 (Fig. 2).

IV. 결 론

건강진단을 목적으로 내원한 고령자 51세에서 66 세까지의 1 ， 092명 대상자 중에서 무증상 건강인에게 서 볼 수 있는 primary benign M -proteinemia 4 례를 경험하였기에 benign M-proteinemia에 관한 노령층에서의 발생빈도 (0.366%) 와 증례를 고찰하 여 보았다.

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