외부정도관리 표준화를 위한 4종의 혈액정도관리물질의 수행능 평가

외부정도관리 표준화를 위한 4종의 혈액정도관리물질의 수행능 평가

송정훈¹․권계철¹․김지명²․박지영³․이영경³․윤수영⁴․장윤환⁵․구선회¹

충남의대 진단검사의학과¹, 을지의대 진단검사의학과², 한림의대 진단검사의학과³, 고려의대 진단검사의학과⁴, 원자력병원 진단검사의학과⁵

Performance Evaluation of Four Hematologic Quality Control Materials for the Standardization of External Quality Assessment

Jung Hoon Soon¹, Gye Cheol Kwon¹, Ji Myung Kim², Ji Young Park³, Young Kyung Lee³, Soo Young Yoon⁴ Yoon Hwan Jang⁵, and Sun Hoe Koo¹

Department of Laboratory Medicine, Chungnam University College of Medicine

, Daejeon;

Eulji University College of Medicine

, Daejeon;

Hallym University College of Medicine

, Seoul;

Korea University College of Medicine

, Seoul; Korea Cancer Center Hospital

, Seoul, Korea

Background: Since various hematology analyzers apply common or different principles in complete blood counting, difference between measured values could developed according to the control material used in external quality assessment. Diagnostic Hematology Subcommittee has been using formalin fixed blood and Liquichek^TM Hematology-16 (Bio-Rad, USA) as control material of external quality assessment alternately but recently significant difference of test results was found in some analyzers. We intended to select adequate control material showing similar test results in most analyzers.

Methods: Using fresh whole blood, formalin fixed blood, Liquichek^TM Hematology-16 and CBC-4K (R&D, USA), 5 parameters (WBC, RBC, Hb, Hct, platelet) were measured in 4 hematology analyzers; CELL-DYN sapphire (Abbott Diagnostics, USA), Coulter LH750 (Beckman Coulter, USA), ADVIA 2120 (Siemens Diagnostics, USA) and Sysmex XE-2100 (Sysmex Co., Japan). Linearity, within-run precision and between-day precision of 4 materials for each parameter were evaluated at different analyzers.

Results: The between-day precisions for WBC of formalin fixed blood showed very high CVs of 6.5～13.5% in all 4 hematology analyzers. The within-run and between-day precisions for WBC and platelet of Liquichek^TM Hematology-16 showed high CVs of 9.3%, 16% and 19.8%, 18%, respectively in CELL-DYN analyzer. But, CBC-4K showed a good linearity (r²=0.9953～

0.9993) and precision (within-run CVs, 0～1.5% and between-day CVs, 0～2.0%) in all analyzers.

Conclusions: Fresh whole blood, formalin fixed blood and Liquichek^TM Hematology-16 are not appropriate for standardization of external quality control materials because of some different test results among analyzers. We conclude that CBC-4K with good performance in all hematology analyzer is adequate as external quality control material.

Key Words：External quality assessment, Quality control material, Complete blood count

교신저자：권계철

우) 301-040 대전광역시 중구 대사동 640 충남대학교병원 진단검사의학과

전화：042)220-7799, 팩스：042)257-5365 E-mail： [email protected],kr

서 론

자동혈액분석기는 Coulter 등이 처음 전기저항법의 자동

혈구분석기를 개발한 후 많은 발전이 있어서 현재는 전기저

(B) Hematocrit

1

proficiency test 2

proficiency test 3

proficiency test 4

proficiency test

Mean CV(%) Mean CV(%) Mean CV(%) Mean CV(%)

CD-3500 39.53 2.71 50.39 2.22 40.53 2.44 41.78 2.06

ADVIA-120/2120 36.83 2.31 43.10 2.81 37.83 2.41 32.76 3.88

LH-700,750,755,780 38.68 1.96 48.87 2.01 39.36 1.83 40.20 1.39

XE-2100 38.12 2.33 51.56 1.76 39.30 2.47 42.35 1.46

All instruments 38.48 4.26 48.88 6.63 39.27 3.62 39.99 8.53

*unit; %.

Table 1. Results of hematologic parameters classified by instrument groups in 2008 Hematologic proficiency tests (A) WBC count

1

proficiency test 2

proficiency test 3

proficiency test 4

proficiency test

Mean* CV(%) Mean CV(%) Mean CV(%) Mean CV(%)

CD-3500 5.38 4.65 18.84 22.08 5.60 10.18 8.96 18.42

ADVIA-120/2120 5.57 3.05 21.16 13.61 5.88 4.08 9.85 5.08

LH-700,750,755,780 5.52 1.63 21.39 2.99 5.92 2.36 9.92 2.02

XE-2100 5.36 2.99 20.42 3.82 5.40 3.15 9.18 3.70

All instruments 5.45 6.24 20.15 12.75 5.67 5.82 9.34 9.42

*unit; x10

/μL.

(C) Platelet count

1

proficiency test 2

proficiency test 3

proficiency test 4

proficiency test

Mean CV(%) Mean CV(%) Mean CV(%) Mean CV(%)

CD-3200 189.17 7.22 567.88 8.15 193.90 10.38 385.17 19.26

CD-3500,3700 193.54 5.92 649.44 4.86 193.53 7.81 270.15 4.99

ADVIA-120/2120 195.57 6.39 459.82 8.72 206.41 6.05 239.48 4.24

LH-700,750,755,780 182.61 2.95 532.21 2.21 186.50 3.61 227.03 2.40

XE-2100 167.23 3.12 550.33 2.99 168.56 3.95 222.67 3.30

All instruments 180.43 7.67 574.87 12.4 183.14 9.17 244.98 9.85

*unit; x10

/μL.

항 이외에도 광산란 등의 다양한 원리를 이용하여 혈구수를 측정함으로써 보다 정확한 결과를 나타낸다[1,2]. 최근 많 이 사용되고 있는 자동혈구분석기 중에서 CELL-DYN Saphire (Abbott Diagnostics, Santa clara, CA, USA)는 무시안화물 혈색소측정, 수력 집중화, 전기저항, 4 차원 광학 산란과 488 nm 청색다이오드 레이저 형광법의 원리를 이용하며[3], ADVIA 2120 (Siemens Health- care Diagnostics, Deerfield, IL, USA)는 무시안화물 혈색소측정,  광산란과 세포화학의 원리를 이용한다[4]. 또 한, Beckman Coulter LH 750 (Beckman Coulter, Miami, FL, USA)는 광산란, 전기저항 및 전도율의 원리를 이용하며, Sysmex XE-2100 (Sysmex Co., Kobe, Japan) 는 광산란과 전도율의 원리를 이용한다[5]. 네 종의 기기는 모두 유세포분석기법의 원리를 이용하지만 적혈구 용혈과 백혈구 감별계산에는 서로 다른 분석기술과 고유의 시약을 사용하고 있다[2,6]. 하지만, 현재 대한임상검사정도관리협회 진단혈액분과에서는 기기의 종류에 관계없이 외부정도관리 평가물질을 통일하여 각 기관에 보내고 있으며, 외부정도관 리 평가물질은 Reardon등의 방법[7]을 이용하여 포르말린 과 항생제를 섞어 제조한 포르말린 고정 전혈(formalin- fixed blood)과 Liquichek

Hematology-16 (Bio-Rad, Hercules, CA, USA)를 교대로 사용하고 있

다.

이러한 외부정도관리 평가물질은 대부분의 기기에서 도

출되는 검사값에 큰 차이를 나타내지 않을 것으로 예측되었

으나 각 기관의 외부정도관리 평가물질의 검사값을 분석한

결과 포르말린 고정 전혈은 기기별 의미있는 차이를 나타내

지 않은 반면 Liquichek

은 일부 기종에서 혈색소/헤마

토크릿 비율이 부적절하게 도출되고, 백혈구수 결과값에 영

향을 주는 것으로 분석되어 이에 대한 문제점을 시정하려는

노력이 진행되었다.  2008년 11월27일에 외부정도관리물

질이 전혈구계산치(complete blood count, CBC) 측정

결과 차이에 미치는 영향과 대안에 대한 회의가 주요한 4

종의 자동혈구분석기기회사 담당자가 참석한 가운데 충남대

학교병원 진단검사의학과에서 개최되었다. Sysmex사에서

는 한 기종(SE-9000)이 Liquichek

을 사용하였을 때

백혈구감별계산에 문제점이 있고, ADVIA사의 ADVIA

120 및 2120는 Liquichek을 사용하면 헤마토크릿이 전체

그룹보다 낮게 측정된다고 밝혔고, Abbott사의 CELL-

DYN의 경우에는 포르말린 고정 전혈과 Liquichek 모두에

서 백혈구수와 혈소판수 측정에 문제가 있음을 밝혔고, 이

러한 결과들이 2008년 외부정도관리 시행결과에서 확인되

었다(Table 1)[8]. 회의 후 각 제조사에 자사 기기에 문제

가 없는 상품화된 정도관리물질의 목록을 받아 비교한 결과

각 제조사의 모든 자동혈액분석기종에 적합한 상품화된 정 도관리물질은 찾을 수 없었다. 각 peer group별로 외부정 도관리물질을 다르게 선택하여 보내자는 의견도 있었으나, 외부정도관리 물질의 구입비용과 일관성 있는 사업진행을 위해서는 정도관리물질을 하나로 통일하는 것이 바람직할 것으로 사료되었다.

이에 신선혈액(EDTA fresh whole blood)과 현재 외부 정도관리물질로 사용중인 포르말린 고정 전혈과 Liquichek

Hematology-16 정도관리물질 (Bio-Rad, Hercules, CA, USA) 그리고 CAP에서 Abbott CELL- DYN의 외부정도관리 물질로 추천한 CBC-4K 정도관리물 질 (R&D Systems, Minneapolis, MN, USA)를 미국 임상검사실 표준위원회(Clinical and Laboratory Standards Institute, CLSI)의 가이드라인[9,10]에 따 라 분석하여 모든 자동혈액분석기에서 만족할 수 있는 정도 관리물질을 찾고자 하였다.

재료 및 방법

1. 재료

포르말린 고정 전혈과 Liquichek

Hematology-16 정도관리물질, 추천물질인 CBC-4K정도관리물질, 그리고 EDTA 신선 전혈을 검사하였다.  Liquichek

과 CBC- 4K는 저농도와 고농도 정도관리물질을 준비하였고, 포르말 린 고정 전혈과 EDTA 신선 전혈은 건강한 성인 5명(남성 4, 여성1)으로부터 얻은 혈액으로 준비하였다. 포르말린 고 정 전혈과 EDTA 신선 전혈의 고농도 및 저농도 정도관리 물질 제조하기 위하여 triple bag을 사용하여 헌혈자로부터 혈액을 채취한 후 원심분리하여 농축적혈구, 농축혈소판, 농축백혈구, 혈장으로 성분 분리하였다. 혈장을 제외하고 나머지 혈구성분들을 섞어서 EDTA 신선 전혈의 고농도 정 도관리물질을 제조하였고, 혈장을 섞어서 저농도 정도관리 물질을 만들었다. 포르말린 고정 전혈은 trisodium 26 g, 25% glutaraldehyde 1.5 mL, 포르말린 원액 6.75 mL, 증류수 100 mL로 고정액을 만들고 방부제인 sodium azide 1.6 mg, gentamicin 1 vial, benzasyl penicillin 1 vial을 고정액과 혼합한 후 혈액 100 mL당 2 mL를 섞어서 제조하였다[7]. 만들어진 물질은 사용 전 까지 냉장 보관하였다.

위의 방법으로 제조한 물질들은 4개의 회사에서 추천 받 은 자동혈구분석기인 CELL-DYN sapphire, Coulter LH750, ADVIA 2120, Sysmex XE-2100을 이용하여 백혈구수, 적혈구수, 혈색소, 헤마토크릿, 혈소판수의 5가 지 항목을 측정하였다.

2. 직선성(linearity)

백혈구수, 적혈구수, 혈소판수, 혈색소, 헤마토크릿에 대

한 직선성을 평가하기 위하여 Liquichek

, CBC-4K, 포르말 린 고정 전혈, 신선 전혈의 고농도 물질을 저농도 물질로 6단 계 희석하고 2회 반복 검사하여 상관계수를 구하였다.

3. 정밀도(imprecision)

정밀도를 검사간 변이(within-run precision)와 일간 변이(between-day precision)로 나누어 구하였다.

CELL-DYN sapphire, ADVIA 2120, Coulter LH750, Sysmex XE-2100에 대해 Liquichek

, CBC-4K, 포르말린 고정 전혈, EDTA 신선 전혈의 고농도 물질과 저농도 물질 을 각각 2번씩, 20회 반복 검사하였고 이를 두 번 시행하여 검사간 변이를 구하였고, 일간변이는 EDTA 신선 전혈을 제외한 Liquichek

, CBC-4K, 포르말린 고정 전혈의 고농 도 물질과 저농도 물질을 오전과 오후에 각 1회당 2번씩 20 일 동안 검사하여 변이계수를 구하였다. 평가항목은 직선성 과 동일하게 측정하였다.

4. 통계

Excel 2007 (Microsoft, Redmond, WA, USA)을 이 용하여 직선성의 상관계수, 정밀도의 변이계수를 구하였다.

결 과

1. 직선성

신선 전혈, 포르말린 고정 전혈, Liquichek

, CBC- 4K에 대한 백혈구수, 적혈구수, 헤모글로빈, 헤마토크릿의 직선성은 4기종 모두에서 상관계수가 0.95이상의 결과를 보였고, 혈소판의 직선성은 다른 물질들에서는 0.84부터 0.99 의 상관계수를 보였으나, Liquicheck

는 CELL-DYN sapphire로 측정한 결과 상관계수가 0.769였다(Fig. 1).

2. 정밀도 1) 검사간 변이

CELL-DYN sapphire로 Liquichek

을 검사한 결과 백 혈구수와 혈소판 수에서 각각 9.3%와 19.3%의 변이계수를 보이고 있었으나, 신선 전혈과 포르말린 고정 전혈, CBC-4K에서는 각각 2.1%, 1.0%와 0.9%, 1.15%의 변이계수 를 보였다. 나머지 ADVIA 2120, Coulter LH750 및 Sysmex XE-2100에서는 모든 정도관리 물질에 대해서 2.0% 이하의 변이계수를 나타내고 있었다(Table 2, Fig. 2).

2) 일간 변이

일간변이의 경우에는 신선 전혈은 저장하는 동안 용혈이 일어나므로 일간 정밀도를 측정할 수 없었다.  

CELL-DYN sapphire으로 포르말린 고정 전혈을 측정한

결과 백혈구수의 변이계수는 13.5%였고, 혈소판수, 헤마토

(b) Formalin-fixed blood

CELL-DYN sapphire

Fig. 1. Linearity of platelet count in 4 automated analyzers.

(a) EDTA Fresh whole blood

CELL-DYN sapphire

(c) Liquichek

CELL-DYN sapphire

(d) CBC-4K

CELL-DYN sapphire

Fig. 1. Linearity of platelet count in 4 automated analyzers (Continued).

Table 2. Within-run precision (CV%) of hematologic parametes in 4 automated analyzers (A) WBC count

  FB FFB Liquichek CBC-4K

  Low High total Low High total Low High total Low High total

CELL-DYN 3.1 1.0 2.05 1.3 0.7 1.00 11.4 7.2 9.30 1.0 0.9 0.95

ADVIA 2120 1.0 1.0 1.00 1.0 1.0 1.00 1.00 2.0 1.50 1.0 1.0 1.00

Coulter LH750 2.0 1.0 1.50 1.0 1.0 1.00 1.00 1.0 1.00 1.0 1.0 1.00

XE-2100 1.0 1.0 1.00 1.0 1.0 1.00 1.00 1.0 1.00 1.0 1.0 1.00

(B) RBC count

  FB FFB Liquichek CBC-4K

  Low High total Low High total Low High total Low High total

CELL-DYN 0.5 0.3 0.40 0.6 0.6 0.60 0.5 1.6 1.05 0.4 0.5 0.45

ADVIA 2120 0.0 1.0 0.50 1.0 1.0 1.00 0.0 1.0 0.50 0.0 1.0 0.50

Coulter LH750 0.0 0.0 0.00 0.0 0.0 0.80 0.0 0.0 0.00 0.0 0.0 0.00

XE-2100 0.0 1.0 0.50 0.0 0.0 0.00 1.0 0.0 0.50 0.0 0.0 0.00

(C) Hemoglobin

  FB FFB Liquichek CBC-4K

  Low High total Low High total Low High total Low High total

CELL-DYN 0.2 0.2 0.20 0.2 0.3 0.25 0.4 0.3 0.35 0.3 0.3 0.30

ADVIA 2120 0.0 1.0 0.50 0.0 0.0 0.00 1.0 0.0 0.50 0.0 0.0 0.00

Coulter LH750 0.0 0.0 0.00 0.0 0.0 0.00 0.0 0.0 0.00 0.0 0.0 0.00

XE-2100 0.0 0.0 0.00 1.0 0.0 0.50 0.0 0.0 0.00 0.0 0.0 0.00

(D) Hematocrit

  FB FFB Liquichek CBC-4K

  Low High total Low High total Low High total Low High total

CELL-DYN 0.4 0.3 0.35 0.6 0.5 0.55 0.5 1.6 1.05 0.4 0.4 0.40

ADVIA 2120 1.0 1.0 1.00 1.0 1.0 1.00 1.0 0.0 0.50 1.0 1.0 1.00

Coulter LH750 0.0 0.0 0.00 0.0 0.0 0.00 0.0 0.0 0.00 0.0 1.0 0.50

XE-2100 1.0 1.0 1.00 0.0 0.0 0.00 1.0 0.0 0.50 0.0 0.0 0.00

(E) Platelet count

  FB FFB Liquichek CBC-4K

  Low High total Low High total Low High total Low High total

CELL-DYN 1.0 0.8 0.90 1.2 1.1 1.15 17.3 22.3 19.8 1.4 1.4 1.40

ADVIA 2120 1.0 2.0 1.50 2.0 2.0 2.00 2.0 1.0 1.50 2.0 1.0 1.50

Coulter LH750 1.0 2.0 1.50 1.0 1.0 1.00 3.0 1.0 2.00 1.0 1.0 1.00

XE-2100 1.0 1.0 1.00 1.0 1.0 1.00 2.0 1.0 1.50 2.0 1.0 1.50

Abbreviations: FB, fresh whole blood; FFB, formalin fixed blood.

Table 3. Between-day precision (CV%) of hematologic parametes in 4 automated analyzers (A) WBC count

FFB Liquichek CBC-4K

  Low High total Low High total Low High total

CELL-DYN 9.0 18.0 13.50 25.0 7.0 16.00 2.0 1.0 1.50

ADVIA 2120 5.0 11.0 8.00 2.0 1.0 1.50 2.0 1.0 1.50

Coulter LH750 2.0 18.0 10.00 1.0 1.0 1.00 1.0 0.0 0.50

XE-2100 2.0 11.0 6.50 1.0 1.0 1.00 1.0 1.0 1.00

(B) RBC count

  FFB Liquichek CBC-4K

  Low High total Low High total Low High total

CELL-DYN 1.0 1.0 1.00 1.0 3.0 2.00 0.0 1.0 0.50

ADVIA 2120 2.0 2.0 2.00 1.0 1.0 1.00 1.0 1.0 1.00

Coulter LH750 0.0 0.0 0.00 1.0 0.0 0.50 0.0 0.0 0.00

XE-2100 1.0 0.0 0.50 0.0 0.0 0.00 0.0 0.0 0.00

(C) Hemoglobin

  FFB Liquichek CBC-4K

  Low High total Low High total Low High total

CELL-DYN 1.0 1.0 1.00 1.0 1.0 1.00 1.0 0.0 0.50

ADVIA 2120 2.0 1.0 1.50 1.0 1.0 1.00 1.0 1.0 1.00

Coulter LH750 1.0 0.0 0.50 0.0 0.0 0.00 0.0 0.0 0.00

XE-2100 2.0 1.0 1.50 1.0 0.0 0.50 1.0 1.0 1.00

(D) Hematocrit

  FFB Liquichek CBC-4K

  Low High total Low High total Low High total

CELL-DYN 4.0 2.0 3.00 1.0 2.0 1.50 1.0 1.0 1.00

ADVIA 2120 2.0 2.0 2.00 1.0 1.0 1.00 1.0 1.0 1.00

Coulter LH750 4.0 4.0 4.00 1.0 0.0 0.50 1.0 1.0 1.00

XE-2100 6.0 3.0 4.50 1.0 1.0 1.00 1.0 1.0 1.00

(E) Platelet cout

  FFB Liquichek CBC-4K

  Low High total Low High total Low High total

CELL-DYN 4.0 4.0 4.00 13.0 23.0 18.00 1.0 2.0 1.50

ADVIA 2120 2.0 2.0 2.00 2.0 1.0 1.50 2.0 1.0 1.50

Coulter LH750 2.0 3.0 2.50 3.0 1.0 2.00 3.0 1.0 2.00

XE-2100 3.0 6.0 4.50 3.0 1.0 2.00 2.0 1.0 1.50

Abbreviations: See Table 2.

크릿은 4.0%, 3.0%로 나타났다. Liquichek

의 경우 백혈구수와 혈소판수의 변이계수가 각각 16%와 18%로 측 정되었으나 적혈구수, 혈색소 및 헤마토크릿은 3.0% 이하 의 값을 보이고 있었다.

ADVIA 2120, Coulter LH750 및 Sysmex XE-2100 의 경우 포르말린 고정 전혈을 측정한 결과 백혈구수의 변 이계수가 각각 8.0%, 10.0%, 6.5%로 Liquichek

이 나 CBC-4K를 측정한 결과보다 높은 값을 보이고 있었으 며, 헤마토크릿과 혈소판수의 변이계수도 Liquichek

이나  CBC-4K에 비해 높은 변이계수를 보였다(Table 3, Fig. 3).

고 찰

일반혈액검사는 환자의 진단, 치료 및 경과 관찰 시 가장 기본적인 검사이자 중요한 검사이다. 따라서 혈액검사 결과 가 검사기관과의 차이가 없이 정확하고 정밀하게 측정되는 지를 관리하기 위해서 주기적인 Calibration과 정도관리 물질을 이용한 정도관리가 필요하다. 정도관리 물질은 측정 하는 검체와 같은 조성을 가진 물질 즉, 사람의 신선전혈이 가장 이상적이지만, 이것을 충분한 양으로 준비하는 것도 어렵고 신선전혈의 불안정성도 문제가 된다. Reardon 등 에 의해서 자동혈구분석기에 안정적인 정도관리물질로 포르 말린 고정 전혈을 개발하였는데, 이 정도관리 물질은 사람 으로부터 많은 양을 빠른 시간 내에 적은 비용으로 준비할 수 있다는 장점이 있었다. 포르말린 고정 전혈은 triso- dium, glutaraldehyde, 포르말린, 증류수로 고정액을 만 들고, 방부제인 sodium azide, gentamicin, benzasyl penicillin을 고정액과 혼합한 후 헌혈자로부터 채취한 혈 액 100 mL당 2 mL를 섞어서 제조하였다. 제조한 포르말 린 고정 전혈을 전기저항과 광산란을 이용한 자동혈구분석 기에서 각각 재현성과 안정성을 조사하였는데 재현성에서 모든 분석항목에서 EDTA 신선전혈과 유사한 수준의 변이 계수을 보이고 있었고, 일간변이를 조사한 결과 전기저항을 이용한 자동혈구분석기와 광산란을 이용한 자동분석기 모두 에서 MPV를 제외하고는 첫째날의 변이계수와 비교하여 큰 변화를 보이고 있지 않아서 안정성도 높은 것으로 분석되었 다[7]. 이렇듯 포르말린 고정전혈은 적은 비용으로 상용 정 도관리물질을 대체할 정도의 안정성과 재현성을 보여 대한 임상검사정도관리협회에서는 상용 정도관리물질인 Liqui- chek

Hematology-16 control과 더불어 외부정도관리 물질로 사용해왔다[11,12]. 그런데 Abbott사의 CELL- DYN과 ADVIA 2120의 경우 포르말린 고정전혈과 Liquichek

Hematology-16 control에서 측정 결과의 문제점이 보고되어 대부분의 기기에 가장 적합한 정도관리 물질을 찾고자 하였다.

직선성의 경우 Liquicheck

Hematology-16 control은 CELL-DYN sapphire기종에서 혈소판수의 상관계수가 약간

낮게 측정되었고, 신선전혈의 경우 ADVIA 2120에서 혈소 판수의 상관계수가 약간 낮게 측정되었으나 포르말린 고정 전혈과, CBC-4K의 경우 모든 기기에서 측정항목 모두에서 상관계수가 0.94 이상으로 우수한 직선성을 보였다. 정밀도 의 경우 검사간 변이에서는 Liquichek

Hematology-16 control을 제외한 신선전혈, 포르말린 고정 전혈, CBC-4K는 모든 기기에서 측정항목 모두에서 변이계수가 2.05% 미만으 로 높은 정밀도를 보이고 있었고, 일간변이의 경우 CBC-4K 만이 모든 기기에서 측정항목 모두에서 변이계수가 2.05%

미만으로 높은 정밀도와 안정성을 보이고 있었다. 포르말린 고정 전혈의 일간변이의 경우 고농도 정도관리물질이 백혈 구수 측정에서 매우 큰 변이계수를 보여서 각 기기별로 포 르말린 고정 전혈의 시간에 따른 백혈구수의 변이계수를 비 교한 결과 ADVIA 2120, Coulter LH 750, Sysmex XE-2100에서 검사 3일째까지는 각각 1%, 1%, 3%로 비교 적 안정된 결과를 보였으나 9일째는 6%, 9%, 6%, 15일째는 9%, 13%, 9%로 변이계수가 점차 높아지는 것으로 보아 안 정성 면에서 Reardon 등의 연구와는 다른 결과를 보이고 있었다[13]. 위의 결과에서 보듯이 현재 외부정도관리 물질 로 사용중인 포르말린 고정 전혈과 Liquichek

Hematology-16 control은 모든 기기를 만족시키는 외부정도 관리물질로 부적절함을 확인할 수 있었고, CBC-4K의 경우 4기종 모두에서 검사간 변이, 일간 변이, 직선성에서 모두 양호한 결과를 보이고 있으므로 외부정도관리물질로 사용하 기에 적합할 것으로 사료되었다.

CAP (Collage of American Pathologists)에서는 측 정방법의 차이에 따른 영향을 최소화하기 위하여 비교가 가 능한 측정방법, 측정기계, 시약을 기준으로 나뉜 peer group별로 외부정도관리를 시행하고 있다. 또한 peer group의 참가기관수에 따라 peer group의 평균값을 대상 값으로 하여 비교하는 peer group target, 비슷한 측정방 법을 가진 peer group의 평균값을 대상값으로 하는 method mean target, 혹은 비교방법의 평균값을 대상값 으로 하는 comparative method target으로 나누어 대상 값을 달리하여 참가기관의 수행능을 비교하고 있다[14]. 현 재 대한임상검사정도관리협회에서는 비용적인 면과 통계적 일관성을 위해서 기기, 측정방법, 시약에 관계없이 같은 외 부정도관리 물질로 외부정도관리를 실시하고 있으나, 향후 참여기관수가 더 증가되고, 측정방법이 다양화 된다면 보다 정확한 외부정도관리를 위해서 CAP과 같은 peer group별 외부정도관리가 도입되어야 할 것으로 생각된다.

결론적으로 현재 대한임상검사정도관리협회에서 외부정

도관리물질로 사용하고 있는 포르말린 고정 전혈은 4종의

대표적 자동혈구분석기 모두에서 백혈구수의 일간 변이계수

가 높았고, Liquichek

Hematology-16 control의 경우

Abbott사의 CELL-DYN sapphire에서 백혈구수의 검사간

변이와 일간변이, 혈소판수의 일간변이계수가 매우 높았다.

그러나, CBC-4K는 직선성, 정밀도(검사간 변이, 일간 변이) 에서 네 가지 기종 모두 양호한 결과를 보이고 있어 추후 CBC-4K를 외부정도관리물질로 사용하는 것이 적절할 것으 로 사료된다.

요 약

배경: 다양한 혈액분석기는 CBC검사를 수행함에 있어 공통되거나 혹은 서로 다른 원리를 적용하므로 외부정도관 리시 이용되는 정도관리물질에 따라 측정값의 차이가 발생 할 수 있다. 진단혈액분과에서는 외부정도관리사업의 평가 물질로 포르말린 고정 전혈과 Bio-Rad사의 Liquichek

Hematology-16을 교대로 이용하여 왔는데 최근 일부 기종 에서 의미있는 검사 결과의 차이가 관찰되었다. 이에 대부 분의 기종에서 비슷한 검사 결과를 낼 수 있는 외부정도관 리사업의 적절한 정도관리물질을 찾고자 하였다.

방법: 신선 전혈, 포르말린 고정 전혈, Liquichek

Hematology-16 (Bio-Rad, USA), 추천물질인 CBC-4K (R&D, USA)를 선택하여 4종의 혈액분석기 CELL-DYN sapphire (Abbott Diagnostics, USA), Coulter LH750 (Beckman Coulter, USA), ADVIA 2120 (Siemens Diagnostics, USA), Sysmex XE-2100 (Sysmex Co., Japan)을 대상으로 백혈구수, 적혈구수, 혈색소, 헤마토크릿, 혈소판수의 다섯 가지 항목을 측정하 였다. 이를 통해 4종의 평가물질의 기종별 각 검사항목의 직선성, 검사간 변이, 일간 변이를 구하였다.

결과: 포르말린 고정 전혈은 4종의 자동혈구분석기 모두 에서 백혈구수의 일간 변이계수가 6.5～13.5%로 나타났 고, Liquichek

Hematology-16은 CELL-DYN sapphire 기종에서 백혈구수 및 혈소판수의 검사간 및 일 간 변이계수가 9.3%, 16%, 19.8%, 18%로 나타났다.

CBC-4K는 모든 기종에서 양호한 직선성(r

=0.9953～

0.9993)과 정밀도(검사간 변이계수 0～1.5%, 일간 변이 계수 0～2.0%)를 보였다.

결론: 신선 전혈, 포르말린 고정 전혈, Liquichek

Hematology-16은 기종별 일부 검사값의 차이가 있음이 확인되어 표준화된 외부정도관리물질로 부적절하였다.

CBC-4K는 모든 기종에서 좋은 수행능을 보여 외부정도관 리물질로 적절하리라 사료된다.

참 고 문 헌

1. Park H, Moon KH, Kim G. Basic evaluation of ADVIA 120 Hematology System. J Clin Pathol Qual Control 1999;21:321-7. (박효순, 문금희, 김진규. 자동혈구분석기 ADVIA 120의 평가. 임상병리와 정도관리 1999;21:321-7.) 2. Kang SH, Kim HK, Ham CK, Lee DS, Cho HI.

Comparison of four hematology analyzers, CELL-DYN Sapphire, ADVIA 120, Coulter LH 750, and Sysmex

XE-2100, in terms of clinical usefulness. Int J Lab Hematol 2008;30:480-6.

3. Park Y, Song J, Song S, Song KS, Ahn MS, Yang MS, et al. Evaluation of the Abbott Cell-Dyn Sapphire hematology analyzer. Korean J Lab Med 2007;27:162-8. (박윤희, 송재 우, 송성욱, 송경순, 안미숙, 양미숙 등. 자동혈구분석기 Cell-Dyn Sapphire의 평가. 대한진단검사의학회지 2007;27 :162-8.)

4. Bauer N and Moritz A. Evaluation of three methods for measurement of hemoglobin and calculated hemoglobin variables with the ADVIA 120 and ADVIA 2120 systems in goats. J Vet Diagn Invest 2008;20:593-7.

5. Ruzicka K, Veitl M, Thalhammer-Scherrer R, Schwarzinger I. The new hematology analyzer Sysmex XE-2100:

performance evaluation of a novel white blood cell differential technology. Arch Pathol Lab Med 2001;

125:391-6.

6. Ward PC. The CBC at the turn of the millennium: an overview. Clin Chem 2000;46:1215-20.

7. Reardon DM, Mack D, Warner B, Hutchinson D. A whole blood control for blood count analysers, and source material for an external quality assessment scheme. Med Lab Sci 1991;48:19-26.

8. Kwon GC, Kim SH, Kim YG, Park YB, Park JW, Park CJ, et al. Annual report on external quality assessment in hematology in Korea (2008). J Lab Med Qual Assur 2009;31:29-47. (권계철, 김선희, 김용구, 박연보, 박종우, 박찬정 등. 혈액학검사 신빙도조사 결과보고(2008). 임상 검사와 정도관리 2009;31:29-47.)

9. Clinical and Laboratory Standards Institute, ed. Evaluation of the linearity of quantitative measurement procedures: a statistical approach; approved guideline. Document EP6-A.

Wayne: Clinical and Laboratory Standards Institute, 2003.

10. Clinical and Laboratory Standards Institute, ed. Evaluation of precision performance of quantitative measurement methods; approved guideline. Document EP5-A2. Wayne:

Clinical and Laboratory Standards Institute, 2004.

11. Müller MM. Implementation of reference systems in laboratory medicine. Clin Chem 2000;46:1907-9.

12. Narayanan S. The preanalytic phase. An important component of laboratory medicine. Am J Clin Pathol 2000;113:429-52.

13. Imeri F, Herklotz R, Risch L, Arbetsleitner C, Zerlauth M, Risch GM, et al. Stability of hematological analytes depends on the hematology analyser used: a stability study with Bayer Advia 120, Beckman Coulter LH 750 and Sysmex XE 2100. Clin Chim Acta 2008;397:68-71.

14. 2009 Excel manual, College of American Pathologists.

http:// www.cap.org.