위해 구성되었으며 y 그 결과 생성되는 하이드록실기와 카복실기는 고유의 토 양 미생물에 의해 이용되므로 환경상 영향은 미미할 것으로 예측
.
그러나 오 염지역에 따라 다양한 대상 독성물질의 종류와 토양상 조건에 의해 대사산물 의 환경상 영향은 바뀔 수 있으므로 이를 명확히 결론짓는 것은 어렵다고 EPA 는 최종 결정함o 숙주 플라스미드 PX
씩표立
anspo son돼
4431 의 sement 로부터의잠재적안
혈량 : 플라스미드 P UTK21 에 삽입된 효소는 자연적으로 발생한 nah7 플라스
미드에서의 효소와 유사합
.
단 예외는 salk) 쩌 te 대사에서 첫 단계인 nahG 의 불활성화로 y 이는 lux 유전자의 삽입으로 인해 불활성화 되었음. 그러나 수용
자 미생물의 염색체가 sal 유전자를 포함하고 있어 s 떠 icyIate 를 대사할 수 있 음. 따라서 유전자 재조합된 PMN 개체에 의한 PAHs 의 분해는
y자연적으로
발생한 nah7 플라스미드를 함유하는 미생물체에 의한 분해 과정과 결과가 유 사할 것으로 예측@ 유전적 전이 평가
。 제출자가 제공한 정보 및 유전적 요소와 관련된 정보를 평가한 결과 유전자 전이의 가능성이 있으며r 이는 pUTK21 의 특성 및 nah7 을 포함한 기존 플라스 미드와의 유사성로부터 발생
-
즉/ 유전자의 전이는 플라스미드 pTUK21 또는Tn4431(Iux+, Te) 같은 대체물에서 발생가능함
。 테트라사이클린과 같은 항생제 저항성 유전자가 병원성 수용체에 전이시킬 가 능성이 있으며y 이와 같은 저항성은 항생물질이 존재할 때 병원성 수용체에 유리하게 작용할 수가 있음
。 생물발광성 유전자는 유전자 전이된 생물체에 명확한 이익을 제공하지 못하며/ 오히려 에너지 유출 작용을 하여 전이 생물체의 성장과 활동을 방해할 수 있음
。 따라서 PAHs 의 분해와 관련된 pUTK21 유전자는 자연계에 이미 존재하므로 천연 nah7 에서 발견되는 것과 그 기능이 매우 유사할 것으로 예측되므로
LMOs!!.! 환걷뮤혜징평가 댄구회 161
pUTK21 의 유전자 전이에 따른 부정적인 효과는 발생하지 않을 것으로 최종 예측됨
@ 인체 위해성평가
@ 병원성 미생물과 독소
A.
잠재적 병원성애 영향을 미치는 요소와 PS. fluori 앙cellS HK44 의 저항성 :PseudomonaB 종과 Escherichia coli 는 유전물질을 서로 교환하는 것으로 알려 져
있으나
,
Iysimeter 조건에서의P. f
HK44 와 일반 환경 미생물간의 유전자 전이는 쉽게 발생하지 않을 것으로 예측
. 또한 I ysimeter 조건은 건조된 토양이
아닌 물과 섞여 있는 슬러리( 흔탁액 ) 형태이므로
y 독소가 에어로졸 형태로 대 기중으로 방출될 가능성은 거의 없다고 예상B.
인체내에서 복제할 가능성 :
P.f
흡입으로 인한 흡입 감염이 보고되지 않았고 PMN strain
이 3TC 에서 성장하지 못한다고 가정하면
/ 이 현장 시험의 결과로 인해 인체에 불리한 건강상의 악영향은 발생하지 않을 것으로 예측
C. PMN 개체의 성장 요구사항 : 시험조건하에서는 시간의 경과함에 따라 나프 탈렌은 감소되고 salicylate 는 증가하게 되고 이는 2-oxo-4-pentenoate 로 전환 됨
.
결국 1) 꾀meter 가 오래되어 나프탈렌의 수준이 감소되면 생존가능한 개체 의 수는 거의 0 으로 감소됨.
따라서 에어로졸을 통한 감염될 만큼의 미생물은 존재하지 않으므로 사실상 기회성 병원균으로 인체에 감염을 일으킬 가능 성은 거의 없는 것으로 예측
D. 항생물질 및 소독제에 대한 저항성 : HK44 종은 항생제인 gentamycin 과 소
독제인 치아염소산나트륨에 충분히 민감하므로 인체에 대한 영향을 최소화할/- ,-,1 。
T 入‘1'1
Q Pseudomonas fIuore
원랜를일」갈북길휠
: 폐 또는 피부 경로를 통한 감염 속도를 측정하기 위하여 Ps. fluoresces 를 사용한 실험결과는 거의 발표된 적이 없음
.
보고된 통물 연구의 모든 경우 P‘잉udomonas spp 또는 관련 미생물 에 의한 colony 형성의 어떠한 정후를 확인하는데는 매우 높은 미생물 수준이 필요하였으며/ 이는 일반적으로 생존가능한 미생물의 고농도로는 건강한 동물 들에게 colony 를 형성이나 감염되지 않음을 의미함162 LMOs 의 환경뮤해징평가 연구화
@ 생태계 위해성평가
@ 제공자 미생물과 관련된 위해성
.
t
생물발광성에 대한 lux 유전자는 해양 세균 Vibrio fischeri 로부터 얻은 것으로yteleost 어류 등의 특정 발광 기관에서 주로 발견됨
.
Vibrio 종의 몇몇은 인간과어류에 병원성인 것이 있으나 V. fischeri
은
병원성 또는 발병 특성이 없는 것으로 알려져 있음
’ Transposon Tnl721 에 운반된 테트라사이클린 저항성 유전자는 원래 Escherichia
coli 에서 얻어진 것이나/ 운반된 플라스미드와 유전자는 병원성과 관련된 다른 유전자의 도입을 막기에 충분히 특성화되어 있음
} 따라서 lux 유전자와 테트라사이클린 저항성 유전자는 환경상 위해성은 없는 것으로 예측
Q
수용제 미생물과 관련된 위해성 : 제출된 자료에 의하면 수용체 미생물은P.
fluorescens Biovar II로 표기되어 있으나 , EPA
는 수용체가P.
chlororaphis 의분류적 특성도 포함하는 것을 확인함
.
따라서 수용체 미생물에 대한 생태계위 해성 평 가는 P. jJlloreSCells Biovar II
와 P. chlororaphis
에 대 해 각각 수행 됨A.
P. fluorescens Biovar IT1.
식물에 대한 영향 :‘ 형광성 pseudomonads 는 자연계에 널리 분포되어 있으며/ 대부분 해로운 영
향이 없는 關生生物 (saprophytes)
’ 또한 일부 형광성 pseudomonads 는 다양한 농작물의 근권에서 많은 식물 병
원균을 억제하는 생물방제약제로 이용
’
그러나 P.
jluorescclls 의 여 러 종은 식물성 병원균이며 y 특히 oxidase-posi tive발광성 Pseudomonads 는 당근/ 양배추 등의 많은 식물의 부패병을 일으킴
‘
또한 P.
jllloreSCClls Biovar II 는 Dieffenbacllia amoena 의 고조병과 오이 마름병 (Ohta et a1., 1976) 의 원인 세균입
2.
동물에 대한 영향 :’ 어류에 대한 영향은 주로 양어장에서 질병과 관련된 것으로
, P. βuorescens 는
유럽산 장어
/ 잉어류r 벙어류 등에서 출혈성 패혈증의 원인균으로 밝혀짐F 닭에 대한 연구결과에 의하연
P.
jluores α'115 의 한 계통을 1mI 의 1010au/
mlbroth 를 닭의 복강내에 주입시 4 주된 레그혼 닭의 10% 가 사망하는 것으로 나타남
LMOs 의 환킹뮤혜징쟁가 앤구회 163
B. Psued, αnail αs chlorOi ‘aphis: 지금까지 발표된
P.
c1z1ororaphis 에 대한 문헌조사 를 한 결과 이 종의 병원성 또는 독성에 대한 밝혀진 연구결과는 없으므로P.
chlororaphis 의 독성은 거의 없을 것으로 예측됨o
PMN 민셋물의 셋태 위해섯A.
항생제 저항성 ter 유전자가 환경에서 다른 미생물로 전이될 가능성은 낮은 것으로 예측B. 알려지지 않은 기질 범위 : 모든 PHAs 화합물에 대상으로 PMN 미생물을
시험한 것이 아니므로 nah 유전자의 기질 범위는 명확히 알려지지 않읍.
그러나 현재까지 보고된 바에 의하면
,
HK44에서 nah 유전자는 나프탈렌과 3- ring
PAH 화합물 phenanthrene, anthracene 을 분해 할 수 있는 효소를 코드화한다 고 알려 져 있음c. 알려지지 않은 토양 / 독성 대사산물 :
‘ 여러 성분이 혼합된 폐기불과 substituted ring 화합물의 존재는 대사 중간산
물의 예측을 어렵게 하며/ 간혹 분해 산물
/
대사 중간산물이 독성을 나타낼 경우가 있음Lysimeters 에 사용되는 토양에 존재하는 오염물질과 parent 화합물에 대한
정보 뿐 아니 라 substituted ring 구조가 존재 하는지 에 대한 정보가 없으면/ 생성될 대사 중간산물을 예측하는 것은 불가능함
.
그러나 제출자는 이에 대 한 충분한 자료를 제출하지 않읍’ 따라서 paren t 화합물보다 더 독성이 있는 독성 대사산물이 생성될 잠재적
위해성이 있음
.
최종 평가결과QJ 종 분류의 어려움 : Psucdomollas 껴uorescellse 와 Psuedomollas chlororaplzis 의 특성을 갖고 있어 정확한 분류가 어렵다
.
@ 유전자 삽입의 안정성 명가 : 다른 생물체로 발광성 유전자
,
항생물질 저항성유전자/ 나프탈렌 분해유전자 퉁이 전이될 가능성이 있다
.
@ 구성에서 항생물질 저항성 marker 의 사용 : 항생물질 저항성이 다른 병원성 생물로 전이될 경우 인체건강에 큰 위협이 될 수 있다
.
164 LMOs 의 환킹유해징명가 연구회
@ 식물병리학적인 문제 : 만약 미생물이
P.
βuorescellse 로 확인될 경우/ 여러 식 물에 위해한 영향이 나타날 수 있다.
@ 변형된 개체로부터 토양 오염의 대사로 인한 독성물질 생산 가능성 : 자연 생태계는 매우 다양하므로/ 미생물의 분해기질의 종류와 방출될 토양의 특성 동을 예측하기가 쉽지 않다
.
따라서 재조합 미생물로 인해 발생가능한 중간 또는 최종 대사산물을 예측하기가 어렵다.
*
그러나 환경방출시험이Oak Ridge National Lab. 라는 매우 제한된 장소에서 시행될 예정이라 다른 환경과 차단될 수가 있음.
즉, 이 실험실은 농경지뿐아니라 주민들의 주거지와도 상당히 떨어져 있으므로 생태계와 인체건강에 위해를 미칠 가능성은 낮은 것으로 예측합
.
또한 제출서에 언급된 시험방법 , 시험에 사용될 장비 및 처리방법 등을 적용하여 시험을 수행한다면 재조합 미생물의 위해는 훨씬 감소될 것으로 예측*
따라서 PHAs 분해 미생물의 환경상 위해 가능성이 있음에도 EPA 는 P.t.HK44 미생물의 환경방출 시힘을 최종 허용함
LMOs 의 환경뮤혜징용가 연구회 165