래한엄상뱅리사회치 : 제 13펀 제 1 호 1981
時間경과에 따라 면하는 백혈쿠 형태에 관한 연쿠
고려대학교 부속뱅원 임상뱅리과 지도 : 김안선， 벡승롱- 교수
라종석-김광석·장재신
A Study on the Morphologic C끓anges of Leukocytes with time.
Jae Sin Jang
,
Kwang Seok Kim,
and Jong Seok Rha.Dept. 01 Cliγzical Pathology, Korea U싸versity Hospita (Director: Inst. In Sun Kim and Prof. Seung Yong Paik)
=Abstract=
Itlis=obvious that the differential count of the leukocytes is c10sely related with the diagn- osis and treatment of the various diseases of the patients. Also the fact that the anticoagu- lants used for prevention of blood coagulation may affect the morphology of the leukocytes- has been wel1 known.
So authors studied the morphoIogic changes of the leukocytes using the anticoaguIants, EDTA and doubIe oxalate. The peripheral blood smear was made immediately and 1,2,3,5, and 24 hours after blood collection.
서 론
각 질환의 진단 및 치료어1 있어서 백혈쿠의 백분율 검사는 매우 重要한 의의를 갖는다.
이 벡분율검사에 있어서， 혈액응고를 방지하기 위하 여 使用되어 지는 항응고처1 가 혈쿠의 행태를 변형시키 고， 또 채첼후 혈액의 땅치로 말마암아 역시혈쿠의 형 태를 변형시킨마는 事實은 이마 잘 알려져 있마.
그러냐 大部分의 병원검사살에서는 각검체마마 채혈 후의 경과시간을 고려함이 없이， 또 항응고저l 의 영향 을 고려하지 않고， 백분율검사플 시행하게 되묘로 오 랜시간 경과된 검체에서는 살처1 와는 다른 結果블 초래 할수도 있었을 것이다.
짜라서 금벤 저자들은 一般的으로 각 검사살 혈액부 에 서 많이 使用되 고 있 는 EDTA용액 과 Double oxalate 용액을 항응고제로 하여 시간경과어1 짜라 백혈구의 Differential Count플 시 행 하연서 핵 과 세 포질의 파립
의 變化상을 판찰한 바 의의있는 結果를 얻었기어1 보 고하는 바이다.
연구재료 및 방법
1. 재료
a. Double oxalate;
Ammonium oxalate 1. 2gm Potassium oxalate O.8gm
Disti l1εd Water 100rr피
b. EDTA
EDTA-2K 1.1gm Distil1ed Water 100ml
처1 조된 향응고저1 블 각 Bottle어i1 O.2ml씩 분주하여 70--800C에 서 건조시 키 고， 使用時 정 확하게 2cc씩 의 혈액을 넣고 흔합하였다.
2. 方、뿔
건강한 成A의 혈액 4cc를 채혈하여 즉시 두장의 도
- 33-
말표본을 민-듣고， 니-머 지 의 혈 액 을 EDTA 및 Dcuble oxalate BottlE 씬 킥-각 2cc씩 분주하여 흔합하였 다.
그後 1시간， 2시간， E시깐， ， 5시간 맞 24시간경괴-딴 뒤에 각각 한장씩 도발표본을 만듣셔사 "\Yrigh'L 염색하 여 검천하였다.
향응고제니- 채혈수 시간청과에 관계없이， 유등이 심 하띤 세포행태의 띤획-가 생각되어 血滾같 운반-하거나 必맺以上으료 :\I;x 릎 하지 않았다.
연구성적
1 . 시간갱파적 따른 백혈구형태위 헌화 A. SεgD'"lεnt l‘; eutro;Jhil
채 헐즉시 의 혈텍 도갈표본에 서 핵 은 purple-color의 chromatin-Cî.ε55 커 부풍 3---4개 로 분걸되 어 서 가느다 란 bridgε후 違감펀 것이 蘇明하기] 브렀‘고 제 !I:..섣 (cytoýlasm)은 짤色바탕에 연한 pink-color의 크고 작 은 gr8. Dulε고 착 있았다. Membrane은 蘇맺파고 흠이 없았다.
採血싫 1사 간 펀過펀 血滾도닫표븐ι3 서 는 Dou상Iε oxal:::.te 릎- 한응고객로 찮 FE 했、을 경우， 팩은 채헐즉시 와 크꺼} 변 한 짐 운 없 었 으나 chromatin-mass의 둡절 이 5711 j:J，上으드로 變化된 cell야 가픔 보였 다 bridge 는 採血콕시꼬마는 렀폈_E_니- 핵파 連껍된 상띄는 여건하 였다. 二L 녁나 써포;샅 (cjtoplasm)은 /상단히 확장되어있 었 고， 세 포철 (cytoplasm) 內 vacuoles 이 거 의 모든 Segment에 나타나 있었다.
세 3:_겉 막(λIemhane)은 대 단히 弱해 컸 고 때 료는 걱 으나마 部分쉰안 파괴가 온 r써도 있었다.
EDTA뜰 항응고제로 使댐하였슬 경우헤는- 핵운 採 血즉시파 펀다흔 장쓸化가 없었고 Bridge도蘇템하였다.
세 포쉰 (cytoplasm) 은 D. oxalate와 비 숫하케 확강되 었 지 깐 v8. cuole은 현저 하게 적 은 펀이 었 다. l\lembrane 도 어~:_:건도-는 採lÙl즉시와 비슷하였지만 그 自짧가 약 해걱 있있다.
평血폈 2시 깐 덴핑띈 D. Cxalat적 血滾드말표본에 서는 핵은 짧化기- 침치-로 성해쳤고， 핵의 븐걷이 3,....,4 캐 청드 였건 것이 !j，....， f캐 청드가 되어 있었다. 그러 나 간흑 bridgε가 선명 한 cell드 닙-아있 상 다.
싸표작( cytoplas:n)슨 더 이상 늘어날수 없월 정도로 환상되 상으나， 저1 포;설內의 Vacuole응 오히 려 1시 간 청 파시프디，- 줄어을었、음을 볼수 샀였다 granulε획 分布 는 CytoplasTIi의 확장으르 多小 척 어 진뭇 하탔 킥 만 二 다차 큰 變化는 없 렀 다. 이 해 부터 Ì\~_ Segmεnt의 파 괴르 Count 카 되지 않는 變形血球가 나오치 시칙-
혔다.
EDTA의 경우에서는 핵의 變化가 오기 시작한 것은
事쫓이 없 우냐 D. oxalate섹 比해 서 는 그대 로 전형 적 안 5'...양오로 보안펀이 었 고， bridge 도 解明한 cell이 많이 부였다. 反힘 헥꾀 분섣現象。 l 증가되섰고 칸흑 핵이 서로 영5'1 어 band오-양을 이푼 cell도 볼 수 있었다.
제도질도 극도로 확장되 었고， cytoplasm 內의 Vacuole- 도 증가되었으며， 세포막획 파괴가 온 cell도 볼수 있 었다.
採血後 3시 간 經過시 의 D. oxalate로 척 리 한 칭 우에 서 는 大多數의 cell이 핵 과 체 포갚위 5J 離로 Segment-
form의 cell들이 band-form 이 나 Metamyelocyte-form
으로 보이 는 경 우가 있 았 다， 핵 의 chromatin 당운 Red-
vi이라色으로 變化하쉰서， 핵사 획-상되였고 핵막야 잃 어지는 現象• 즉 파괴되기 시작하는 ce Il듬이 보였다.
세포질의 막도 역시 파괴된 경우가 많앓다. EDTA의 경우에서는 大體的￡로 분핵되었던 핵이 점차걱으로 하나로 짧形되는 파정을 읍수가 있었고 간흑 평化가 /심 한 cell응 N. tand-form으로 보이 는 갱 우가 았 었 다. 세 포질 (cytoplasm)은 Membrane이 部分的으로 확 정을 시작하껴 파괴가 오기 시착하였다.
採血後 5시 간 經過時뛰 D. oxalate로 처 리 한 血波도 발표본은， 펙이 머욱농축되어서 本챈、의 形態는찾아볼 수 얹었고 分離 흑은 흔합되는 짧象을 보였다. 확장되 있던 세포갚도 수축이 얼어나지 않으연 완전히 파괴되 어 있었다.
EDTA로 처리된 경우에서는 펙은 적자색을 띠고 많 이 확장되어 있었고 더욱- 부풀어서 파괴가 일어난 cell 은 LE body와 같은 짧줬을 띄게 되았다. 세포잘도최 대위 획장을 이루어 있었무역 거의 모든 cell의 Mem-
b1'εne은 파괴되어 있았마.
採血後 2.( 間時 經過時의 D. oxalate르 처 리 한 경 우 어}는 핵이 분핵된 상태료 흑은 흔함되어 完全히 풍쳐 걱 /:1 l:and form 이 나 l\1 etamyelocyte와 같은 形」뤘로 變化되어 였거나 핵이 마치 L-E cod)'외- 갚아 되였고
Membr:::ne이 터져 있는 cell이 大部分이 었다. 세포짚 은 l\ ~emhanc이 어 느정 도 유지 되 어 있 었 는데 이 것 은 획
잔텍서 파괴되었던 것이 다-시 뭉쳐져서 다시 Membran 윤 形成하석 수축펀 것 같다. Granule응 써포잘의 파 괴로 인히-여 찾아읍 수 없었다.
EDTA의 경우센서도 평形을 가진 cell은 거의 찾아 봉수 없었으며， 핵도 분절되었띤 것이 다시 놓측현상 윷 이 루섰 다. 또 간혹 헥 이 SvVεlling 되 어 L-E body의 形態로 나타냐는 cell 도 있었다. 세포질은 완전히 피-괴 되였고 grande 도 찾아플수가 없였다.
N. segment
Fig. 1.
B. Band Neutro iJ l쉰 i
採血즉시 의 도말표본에 서 뒤 hmd-ce l1의 핵 은 elong- ate가 蘇明하였고， 大部分이 단순한 C 形이었으며， 세 포질은 無色바탕에 pink-color의 크고 작은 granule로 차 있었고， membrane도 蘇맺하고 흠이 없는 상태였다.
1 時間 經過時의 D. oxεhte로 처리된 도말표본에서 의 핵은 採血즉시와 크게 變化가 없는 상태이었고， 세 포갚은 약간 확장이 되였윷뿐 과힘슨 變化가 되지 않 은 상태였다.
EDTA .i응 처리한 경우랜서는 핵이 약간 확장되었즈L 나 커다란 차이는 없었고， 제포질이나 세포막이 모두 원상태와 비슷하였다.
探血後 2時間 經過時의 D. oxalate후 처 리 한 경 우에 서는 핵이 많은 變化릎 보이치 시작렀다. 原形대로의 band ce Il은 많이 줄어들고 N. segment의 핵파는 反 對로 핵위 분절이 시작되고 있음을 불수 있었다. 세포 걷도 확장이 되었고 Vacuolε이 부이기도 하였다.
membrane이 파괴 가 있 는 cell드 간휴 볼수 있 었 다.
EDTA로 처리한 경우에서는 택의 캉제 성숙무로 안 N. Band
하여 분걸現象을 블수 있었지만 1:部分은 천형적안 band-ceII 이 었 다. 세 포칠은 확장이 심 하였 고 Vr.cuole:
도 블수 있 었 다. 파립 (grεnule)이 나 membrane운 눈셔1 투이도폭 큰 變化는 없었다.
採血後 3시 간 經過時위 D. ox갑 lo. te료 치 리 한 경 우에 는 핵 응 變形되 어 Segment形오르 變化된 ceIl듣이 많 았다. 세포짚과 핵모두가 分離뚫象을 보이고 았으며 membrane도 파괴 가 되 었 다.
EDTA로 처리된 경우어]는 핵위 분핵현상이 2시간 經過時보다 좀더 進行펀 상태였다. 채포짚응 곱G셨‘的우 로 I\Iemtïane의 파괴 가 우고 있 칭、 다.
採血後 E時間야 經過펀 D. oxalate료 섣 뉘 띈 도갈표 본에서 핵은 더욱 분핵이 일어 나 치읍상태의 tand-form 은 찾아볼수 없었다. 세포길운 싱. SE:gment와 동일딴 形態로 變化되어 있었마.
EDTA로 처 리 된 경 우섹 서 는 bnd-form의 形판는 거의 볼수가 없었고 Sεgment취 핵이 뭉쳐진 상태가 band-form 으로 보인것 갚다. 제포갚응 거의 피-괴되았 다. 採血後 ~4 時問 院過時위 D. Oxalate_로 처 리 한 7j
1\'. Bar.d
- 3 5 -
우에서는 採血즉시의 1::and form은 잔핵 찾아 블수가 없었고 써포질은 5 時間 經過時와 마찬가지로 N. Sεg
ment에서의 경우와 등일하게 變化되어 있었다.
EDTA의 경 우해 서 도 N. Segment와 마찬가지 로 N.
Segment위 핵 이 ‘뚱처 져 1:: and로 보였 고 세 포걸 역 시 거 의 파괴 된 상태 였 다. (N. Eand에 속함)
C. EosinophiI.
採血後 즉시 의 EosinophiI의 形態는 거 의 大部分。l Eσsinoptilic Segment이 었 고， 핵 운 大多數가 2-1obe 혹 되 어 있 있 마. 처1 포짚은 eosinophilic granule로 차 있었으며 핵과 세포질의 區分이 蘇明하였고 membrane 도 역시 蘇8)j하였다.
l 時間 칩過時 D. oxalate로 처리한 경우에는 핵은 거의 정상 ce l1파 비슷하였다. 마만 차이점을 치적한 다면 약간 농축된 듯이 보였을 뿐이었다. 세포질 역시 커 다란 變化는 없 었 고 간흑 membrane 이 파괴 된 cell 이 보이기도 하였다.
EDTA 릎 使用한 경우에서 헥은 약간의 농축現象。l
있렀、을 뿐 세포철파 membance은 變化가 없었다.
採血後 ;時間 經過時의 D. oxalate로 처 리 한 경 우에 서 도 헥 응 Segment-form이 단 것 이 합쳐 져 band-form 으로띈 건우와 bridge 가 完全허 띈어져 分核만으로 펀
견우료 燮形區分되어 있었으며 체포걸內 놔립은 原形 그대 르 保存되 아 있 었 지 만 mernbrane은 파괴 된 cell도 었었다.
EDTA의 경 우에 서 의 EosinophiI은 1 시 간 經過時와 디}체적으로 비슷하였다.
S 時間。1 經過하였 을 혜 먼저 D.Oxalat e.에 서 는 2時間 건과시와 비슷하였지만 핵은점차적으로分核의 血球가 줄어들고 Band-form으로 變하는 現象을 -볼수 있었다.
EDTA의 경우에는거의 前時間의 形態와비슷하였다.
5 時間 經過時 D. cxalate로 처 리 한 경 우에 는 Segment Eosinophilic
form이 었 던 핵 이 band-form이 나 Metamyelocyte-form 으로 되 어 있 었 으녁 서1 Æ.칠의 membrane은 파괴 또는 수축現象을 이루고 있음을 불수 있었마.
EDTA의 경 우에 도 역 시 Segement-form으로얀 보야 던 核이 간혹 EosinophiIic band form으로 보이 는 것 이 나타났다. 그러 냐 간혹 Membrane이 파괴 펀 것 이 나타나는 것 以外에는 세포질이냐 granule 릎이 大部分 그대로 保存되어 있는 편이었다.
24 時間이 경 파펀 後에 D. oxalate로 처 리 된 경 우에 는 핵 은 처 음상태 의 Segment form은 하나도 없 었 고 한덩어리로 뭉쳐진 상태이었으며， 세포칠은 거의 다파 괴되었으나 간혹 농축現象으로 membrane을 形成한것 도보였다.
EDTA의 경우에서는 핵이 完全히 뭉쳐져서 뿔形으 로 덩 어 러 블 이 루였 거 나 Metamyelocyte 상태 를 이 루 고 있었으며 세포칠은 完全히 핵주위에 있는 granule 로 감벨이 가능하였다.
D. Lymphocyte. (다음 p와 연결 됨 )
採血즉시 의 혈액 도말표본에 서 의 임 피-구(Lymphocyte) 는 大部分이 smaJl Lymphocyte 이 었 고 핵 은 round하 였고 red-purple color 였으며， 세포질은 밝은 청색으로 보였으며 , membrane은 蘇明하였다.
援血後 1 時間 經過時에 D. oxalate로 처리한 표본에 서는 채혈즉시보마 핵이 약간 농축되어 있었으켜 간혹 크로바形의 分核야 나타나기 도 하였 다.
세 포질 內에 는 Segment보다는 심 하지 않지 만 Vacuole 이 보이 는 lymphocyte도 있 었 다. EDTA로 처 리 한 경 우에는 핵이 약간 농축되어 있을 뿐， 세포질파 세포막 은 變化가 없는 상태이었다. D. oxalate와는 섬세한 면 에서의 차이를 볼수 있었다.
採血後 2 時間 경 과시 에 D. oxalate로 처 리 한 경 우에 서 lymphocyte의 랙은 前時間파 별다른 차이를 보。1
Eosinophilic
Fig. 3.
지는 않았지만 가끔 어떤 celH즌 굴곡이 있거나 흑은 크로바형으로 分核現象을 일으키기드 하였다. 세포질 파 세포막은 大部分이 正常的이었다.
EDTA의 견우에서는 핵이 조금 더 확장펴었고 간혹 파꾀된 ce11 이 보이는 것야외에는 커다관 變化는 불수 없었고 세포철도 마찬가지로 파괴띈 cell이 가끔 보였 을 뿐 커다란 變化는 찾아 블수 없었다.
3시 간後에 D. oxalate로 처 려 한 갱 우에 서 는 2시 간해 와 거의 131 슷하였다. 핵은 分核이 되기 시작한 cε1101 조듬더 증가하였고， 세포막의 파괴가 심히-여진것 이외 에는 달리 뚜렸한 變化는 찾아쏠수 없었다.
EDTA의 경우에서는 핵은 前時間쐐와 바교하여 53IJ 다른 차이가 없었지만 제포칠은 더욱더 확장되였고 혜 로는 파괴 된 것 도 있 었 다. 하지 만 Iarge-lγmpnocyte의 granule은 오히려 解明한 인상을 주고 있었다. 이는 두드러 진 확장現象으로 보여 진마.
採血後 5 時間 경 과시 의 D. oxalat로 처 리 펀 도말표 본에서 lymphocyte의 핵은 커다딴 變化는 없었지만 가끔은 적자색으로 부푼 分核現象을 일오킨 ce11도 보 였다. 세포질은 파괴 흑은 수축현상을 보였으며 완전 히 파괴 된 cell도 보였 다.
EDTA의 경우에서는 핵이 간혹 크로바행오로 變한 것이외에는 커다란 變化가 없었다. l\lembrane은 大部 分이 파꾀되어 있었다.
採血後 24 時間 경 파시 D. oxalate 로 처 리 한 경 우에 서는 다른 cell에 比하여 變化가 적었다.
EDTA의 경우에서는 핵의 파괴現象이 태체걱으로 척었다. 反面 핵이 부풀어진 現象은 가끔 보이기도 하 였다. 세포질은 거의 파괴되었지만 그돼도 다른 cell어1 土h해서는 캄별하기가 容易하였다.
E. Basophil
採血즉시의 혈액도말표본에서의 Basophil의 形態는 Lymphocyt
핵의 분칠형태를 분간할수 없었으나 그 自융앓는 解明하 였고， 세포겉은 그內部어1 Dark-blue color의 크고 작 은 과립플로 덮여 있였고 Membrane은 蘇탬하-였다.
採血後 1 時間 ~æ過時의 D. oxalate로 처 리 한 도말표 본에 서 BasophiI은 다른 ce11파 比交하여 , 핵 , 세 포칠 , 파럽등 모든 成分룹이 採血즉시와 別 카이릎 보이지않 았다.
EDTA로 처리한- 경우에서드 마찬가지료 커다관 變 化를 찾아볼수 없었다.
2시간 經過時 D. oxalate로 처리한 져우에서 핵의變 化는 없었지만 세포막아 파괴된 cell 이 증기-하였고 시1 포질 內 Vacole도 생 기 기 시 착하였 다.
EDTA의 경우에서는 아직까지 뚜렷깐 燮化가 없였다.
3 時間 經過時 D. oxalate로 처 리 한 경 우에 서 는 Me- mbrane이 많은 cell에서 파괴된 것을 블수 샀셨고 랙 은 밸다른 變化른 보이지 않았다.
EDTA로 처리한 경우에는 前時間돼획 형태와 다른 청。1 없었다.
援血後 5 時間。1 經過된 D. oxalate혈액에서 헥은 Monocyte와 같이 파괴 되 었 고， Membrane도 완잔허 파괴되였으며， 과렵도 겨우 감밸할 정드였다.
EDTA에서는 前時間까지 變化가 없다가 세포절과 Membrane이 파괴되어 있는 것을 볼수 았었다. 하지 만 핵파 파립 (granule)르 감별하기 ffl 쥔하였다.
24時間이 경파된 後 D. oxalate로 처리한 경우 핵이 나 세포질은 完全히 파괴되어 있었고， 變形된 形態위 에 Basophilic granule이 보일 뿐이 었 다.
EDTA의 경 우에 도 granule만 파괴 된 잔핵 위 에 存左 할 뿐 핵이냐 세포질은 감벨이 블가능한 상태였다. <사
진
5>
참고F. Monocyte. (마음 p. 에 쉰결 돼 야 됩 )
採血즉시 의 Monocyte形態는 핵 이 굴곡있 는 여 러 形 Lymphocyt
Fig.4.
- 3 7 -
態로 區分하기 用利하였고 세포질은 Blue-gray color- 카끔 보였다. 핵은 크로바모양의 分核現象을 보였고 였￡며 섬세한 granule로 차 있었고 Mernbrane은 蘇 세포질의 Mernbrane은 파괴가 짐했다.
明하였다. 5 時間 經過된 後의 D. oxalate로 처리한 경우에서는
採血後 1 時間야 經過한 D. oxalate혈액에서는 핵의 前時間파 마찬가지로 다른 cell에 比하여 核과 세포질 크기가 커서 그렌지는 모르겠지만 대부분이 採血즉시
와 크게 차이는 없었지만， 다른 cell보다 대체적으로 크로바形으로 分核。l 되 어 쿠분하는데 어 려 움을 주는 경우도 간혹 있었다. 제포질에는 큰 變化는 없었지만 청 상 Monocyte에 나타나는 Vacuole보다 많은 Vacuole 이 있음을 판찰할수 있었다.
EDTA의 경우에서는 핵이나 세포질이 모두 採血즉 시와 벼슷하였는데 다만 핵의 分核現象이 다른 白血球 보다는 먼저 일어나고 있었다.
採血後 2時間 經過時 D. oxalate로 처 리 한 경 우에 서 핵은 大多數의 celI이 파괴되어 크로바形象을 이루고있
었고 Mernbrane 自體도 많은 數가 파괴되어 첨차적으
로 區分하치 곤란한 cell이 증가하고 있음을 불수있었 고 간혹 파괴되지 않은 cell도 本來보다 더 커지고 수 가 증가된 Vacuole 이 나타났다.
EDTA로 처 리 한 경 우에 서 Monocyte의 핵 은 다른 cell에 比해 약한 느낌 을 주었 다 D. oxalate와 같이 심 하지 는 않았어 도 Segrnent-forrn으로 分核이 오고 있 었고 세포질內에는 以前에 불수 없었던 Vacuole의 증 가가 있었으며 Mernbrane의 파괴가 많이 일어났다.
3時間 經過時 D. oxalate로 처 리 한 경 우에 서 核은 크로바形으로 파괴가 되어 감옐하기 곤란한 cell이 大 部分이었고， 세포질도 Mernbraneol 파괴되어 있는 cell이 역시 大多數。1 고 핵파 세포질이 한덩어리프로 보 이는 경우가 많았다.
EDTA로 처 리 한 경 우에 서 도 大多數의 cell이 變形되 어 있 었 고 Count할수 없 는 cell도 나타났지 만 D. oxa- late에 비 해 서 는 變形야 적 었 고 原形에 가까운 cell도
rnonocyt
은 모두 變形되어 있는 상태였고 그中 겨우 감별할수 있 는 cell은 Monocyte 中 20 ... 30%에 불파하였 다.
EDTA로 처리한 경우에서는 핵과 셰포질이 펀채 • 분리 현상을 보이고 있었고 大部分의 Mernbrane이 파 괴된 상태였다. 하지얀 前時間혜와 마찬가지로 D.ox- alate로 처리한 경우에서 보다는 그 變化가 섬하지 않 았으며 간혹 청 상 cell파 비 슷한 Monocyte형 태 를 띈 cell도 보였다.
24時間 經過時 D. oxalate로 처 리 한 경 우에 서 는 핵 야 나 세 포질은 거 의 파괴 되 고 농축펴 어 Count불능의 cell
이 되어 있었다.
EDTA로 치려한 경우에서 거의 모든 celI이 파괴되 어 대 강의 윤곽으로 마 루어 Monocyte로 보이 는 것 을 Count하였다. <사진
6>
참고TI. 시간경과에 따른 백혈구백분율 검사의 變↑5 採血즉시 시 행 한 백 혈구 백 분율은 N. Segment 카 43
%, N. band 가 4%, Lyrnphocyte가 43%, Monocyte 가 5%, Eosinophil이 4% 및 Basophil 이 1% 로 정 상범 위에 속하였다.
1시 간 經過後 시 챙 한 結果는 EDTA와 D. oxalate블 使用한 경우에서 두가지 모두 즉시 시행한 結果와 별 다른 차이가 없었지만， 2시간 경과후에는 N. Segrnent 가 D. oxalate 使用時와 EDTA 使用時에 各各 37% 및 39% 로 감소되 면서 Count하기 어 려 운 cell들이 각각 5
% 및 4% 로 출현하였다.
3時間 經過時에 는 N. Segrnent 가 더 욱 감소하면서 , N. band가 각각 6% 및 8% 였고 Count할수없는 세포
rnonocyt
Fig. 5
- 38-
Table 1. Differential Count of Leukocyte According to “Time"
Uncountable O O O 5 4 1 5 5 2 2 3
1i
1i
1i
nJ
9ι
Baso.
1li
--4
1,i 1,4
1’
4 1l4
n”
U 1lA
1l4
n”
v 1l4
Eosino.
4 4
14
3 7 3 2 4 2 5 2 Mono.
-n
nU PU
。。
pU n4 nU PU PO -i 9“
Lympho.
검 심 때 μH ”와 깎
”%
μH mω 깎 왜
N. band.
4 4 5 2 2 6 8 3
m
3 2 N. seg.
때 μ% 갱 ”이 m갱 mω
$
감 mω
8
앙
D.C.C%) J Hrs
Immediate 1 D.O.*
EDTA 2 D.O.
EDTA D.O.
EDTA D.O.
EDTA D.O.
EDTA 3
5
24
WBC를 변형시키기 때문에 백혈쿠 백분율검사를 시행 하는데 어 러 움을 주고 있 다. 反面 EDTA So l.은 Pla-
telet의 융칩 을 방지 해 줄 뿐만 아니 라 D. oxalate보 다 혈액 세 포성 분을 잘 保存 2) 해 주기 해 문에 Dipotas- sium Salt의 헝 태 로 最近 많은 검 사살에 서 D.oxalate
보다는 널리 使用되어지고 있다.
本 병 원 검 사살에 사 는 이 마 D. oxalate와 EDTA를 항응고제로 使用하여 RBC의 변화를 연쿠한바 채혈후 2시 간이 경 과하면서 RBC가 수축되 고 Crenation 이 얼 어난다는 事實을 밝힌바 있다 3)
이먼 연구에서 각 時間마다의 실험結果를 살펴보면 먼저 1 時間 경과시에 D. Oxalate 로 처리한 경우에서 는 럭러기-지 cell의 변화를 판찰할 수 있었지만 특히 N.
Sεgment의 세포질이 나 Monocyte의 핵의 변화가 뚜렷 확였다. EDTA의 경우에서는 D. Oxalate와 비교하여 커다란 變化는 없었다. 그러나 EDTA의 경우도 시간 경파로 인한 變化가 있음을 不定할수는 없었다.
2時間 경파시 D. oxalate로 처리한 경우에서는 지금 까지 볼수 없었던 변형된 백혈구， 즉 Count불능의 cell
이 5% 정 도로 보였 다. 이 로 마 푸어 Count된 cell 이 라 도 핵이나 세포질의 변형을 가허 짐작할 수 있었다.
핵이나 세포질의 형태플 좀 더 세말하게 판찰해 보연 파괴 판 cell의 大部分은 Neutrophil계 동의 cell인 것 a
로 보인마. EDTA의 캉 우에 서 도 D. oxalate와 마찬가 지였다.
3시간 경과시에 D. oxalate 후 처리한 경우에서는 도 는 혈쿠가 헌헝되었지만 그 중에서도 가장 심하거j 변 화된 것은 Neutrophil파 .rvlonocyte 였고， 이 둔혈구의 변확로 인하여 Count할수 없는c ce!l이 증가하였무며 이 러한 변화로 말 ]]1 암아 백분율의 수치도 점차적인 차이 가 오고 있었다. 또 위의 두혈구의 파괴로 변화가 척
- 3 9 -
찰
임상검사살에서 使用되는 항응고제는 검사하고자 하 는 종목에 따라서 적절한 항응고제의 선택과 적당량의 항응고제을 使用해야 한마는 것은 잘 알려진 事實。l 다
항응고제 中 Double Oxalate는 Pot. Oxalate가 RBC 를 수축시 키 고， Am Oxalate는 cell을 Swelling시 키 기 해 문에 각각을 따로 使用하기 보다는 두종류의 혼합액 을 使用하여서 RBC의 형태를 유지시켜 Hct등을 측정 하는데 使用되어지는 항응고제로 한때는 혈액걷자살에
서 많。 l 애용되었다 .1)
그러 나 D. oxalate는 platelet플 응칩 과파괴 듭촉진시 켜 Pla telet-count블 할 “경 우에 부적 텅- 할뿐 아니 라，
*1. D.O.=Double oxalate
들이 D. oxalate blood에 서 15%, EDT A lood에 서 5
%로 증가되었오녁 5 時間 경과시에 N. Segment 가 D.
oxalate 사용시에 27% EDTA 사용시 30% 였고， N.
band는 EDTA 사용시 10% 로 증가되었다. 또한 Count
하기 어 려 운 cell들이 D. oxalate에 서 15% 였 고 EDTA
에서는 12% 로 현저하게 증가하였다.
24時間 經過時어1 D. oxalate블 使 ffl 한 경 우에 서 는
N. segment 가 8%, N. band 가 3% Lymphocyte 47
%, Monocyte 1% 및 Eosinophil 5% 였고 Count할 수 없 는 cell이 32% 로 N. Segment와 주로 현저 하게 變 化된 것을 얄수 있었다.
한편 EDTA를 使用한 경 우에 는 N. Segrnent 23%
N. band 2%, Lymphocyte 49%, Monocyte 2%, Eosinophil 2% 및 Basophil이 1% 였고 Count하기 어 려 운 cell은 23% 로 N. Segment의 감소와 함께 Lym- phocyte와 Count하기 어 려 운 cell의 증가를 판찰할 수 있었다.
고
은 Lymphocyte가 상대 적 으로 증가하였 다.
EDTA에서도 마찬가지로 모든 혈구의 변화가 삼하 여 이미 백분율은 그 의의를 상살한 상태였다.
5 時間。l 경 과한 후 D. oxalate로 처 리 된 경 우에 서 모 든 혈구가 변형， 파괴되어 있었다. Count上 Lympho-
cyte가 증가한 것은 다른 ce lI의 파괴로 인한 상대척안 증가로 보인다.
EDTA의 경우에서는 D. oxalate보다는 양호한 펀。1 었지만 역시 5시간 경과뭔 검체로는 백혈구 백분율의 의의는 이미 상살된 상태라고 볼수 있었다.
24시간 경과시에서 혈구의 형태는 파괴되거나 심하 게 변형되지 않은 ceII야 하나도 없었다. 그래서 이혜 의 Count는 핵이나 세포질 그러고 파립의 형태로 미 루어서 계산한것이다.
짜라서 D. oxalate를 항응고제 로 使用한 blood블 2
시 간내 지 3시 간동안 방치 하연 N. Segment나 Monocyte
가 소위 “Oxalate effect"를 보여 핵 과 세 포질 內에
Vacuoleol 생 치 고 핵 의 out-line이 불규칙 하게 되 며
~분옐 내지는 함을이 생겨 Rosette 형태를 보임으로써 백혈구의 감벨을 어렵게 만든다는 사실 1)을 이먼 연구 에 서 관찰할수 있 었 다. 또 EDTA도 그청 도가 D.oxa-
late보다는 털심하였으나 거의 바슷한 형태의 영향을 미치기 해문에 모든 검사살에서는 백혈쿠 백분율을 시 행하고자 할애에는 採血後 시간을 경과시키지 말고 가 능하면 속히 실시하는것이 타당할 것으로 사려된다.
結 힘움
금먼 살험을 通하여 벡혈구의 형태를 原形매료 보려 면 가급적 채혈 즉시나 늦어도 30分 以內에 실시하지 않으면 백혈구의 형태변화로 인한 진단이나 치료에 커 다란 혼선을 초래하게 될 것으로 사려된다.
핵응 당장의 큰 變化는 없지만 채혈후 1시간만 경파 하더 라도 셰프E질의 확장과 동시 에 많은 Vacuole야 생 치는 것을 알수 있었다.
이러한 상태는 本來 환자의 상태가 어떤 질명의 중 -증도 상태라고 불수 있기 혜문에， 시간연장으로 인하 얘 정상상태를 이러한 환자의 상태로 만들수 있는 오 )류를 범해서는 안되겠다.
2시간後에는 백혈구의 全體的안 面에 變化가 오기시 작했고， 3시간 경과시 부터는 celI의 변형파 파괴로 인 하여 계산할수 없는 celI도 나타났고， 백분율도차이가
!많아지기 시착하였다.
항응고제 는 D. oxalate보다 EDTA가 조금은 양호한 펀이었으나， 시간경과에 짜라 形態가 變化하는데는 커
다란 차이가 없었다.
굳이 두가지 를 비 교해 본다면 D. oxalate로 처 리 한 혈액은 변화가 빨리오고 수축현상을 보이는 反面 EDTA로 처리한 검체에서는 혈구변화는 종 늦였지만 시간경과에 짜라 혈구를 확장시키고 파괴되는 현상을 볼수 있었다.
벡혈구의 變化가 늦고 빠름보다는 형태학척 變化가 오기천， 즉 채혈후 30분以內에 조작을 해애 백혈구 백 분률 캠사의 의의았는 結果를 얻을수 있다고 하겠다.
References
1. John D. Bauer, Philip G. Ackermann, and GeIson Toro: ClinicaI Laboraøtory Methods. C.V. Mosby Comp., Saint Louis, 1974, 8th ed., p. 87,....88.
2. George J. Race; Laboratory Medicine. Harper &
Row Pub., New York, 1976, voI. 2, p.2.
3. 나종석， 엠희자， 류근선 : 채혈후 시간경파와 항응 고제 종류에 따른 세포형태의 변화에 판한 연구， 엄 상뱅 리 사회 지 1980. 제 12권 1 호 p.52,....55.
Explanation for figures
Fig. 1. The morphologic changes of segmented neutrophiIs using double oxalate(Ieft) and EDT A (right). Clumping and fragmentation of the nucIeus are moreevident in double- oxalate blood. (Wright stain, x64이.
Fig. 2. The morphologic changes of band neutrop.
hils usingdouble oxalate (left) and EDT A (right) showing cytoplasmic vacuoles and disruption of the cytoplasmic membrane.
(Wright stain, X640).
Fig. 3. The morphologic changes of lymphocyte in double oxalate (left) and EDT A (right).
NucIear cIefting and lobulation are noted on double oxalate blood smear. (Wright stain, X 649).
Fig. 4. The marked nucIear Iysis and Iobulation of monocy.tes featuring of cIover-shape, espe- cialIy in double-oxalate blood(Ieft),(Wright stain, X 640).
Fig. 5. The morphologic changes of eosinophils showing nudear clumping and fragmenta- tion with relatively preserved granules.
(Wright stain, X640).
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