대한임상병리사회지 : 제 17권 제 1 호 1985
=Abstract=
백 혈 뱅 환자의 ALP 및 ACP활성 에 관하여
원광보건천문대학 임상병리파
오현숙 • 최영자 • 김종호
Study on the Phosphatase .Activities of Leukemic Blood
Hyun Sook Oh
,
Young Ja Choi and Jong Ho KimDepartment 01 Clinical Pathology Woη Kwaηg Public Health .liμnior College
A biochemical analyses were performed on 4 types of leukemic blood which were obtained from hospitals in Jun Buk from august, 1, 1985 to august, 30, 1985.
The results were as follow:
1. In a view of peripheral blood finding, each hemoglobin valuse of acute myelocytic leukemia (AML), acute myelomonocytic leukemia (AMMoL), acute lymphocytic leukemia(ALL) and chronic myelocytic leukemia (CML) was evaluated as 8.9gjdl, 9.1gjdl, 8. 5gjdl and 9.6gjdl,respectively.
The leukocyte counts in AML, AMMoL, ALL and CML were 26,100jcu.mm, 53,000jcu.mm,
75,100jcu.mm and the blast frequences of the differential white cell count in AML, AMMoL.
ALL and CML were 95%, 46%, 69% and 8%, respectively.
The platelet counts in AML, AMMoL, ALL and CML were 31,400jcu.mm, 41,000jcu.mm,
28,000jcu.mm and 728,000jcu.mm, respectively.
2. The alkaline phosphatase (ALP) activities of AML patients were increased to 241. 0% in plasma but decreased to 65. 2% in red blood cell (RBC) and 42. 2% in white blood cell (WBC) and the acid phosphatase (ACP) activities of AML patients increased highly to 241. 0% in plasma, 139.3% in RBC and 467.1% in WBC compared with healthy persons.
3. The ALP activities of AMMoL patients were increased to 285.3% in plasma and 181. 6%
in RBC but decreased to 86. 1 % in WBC and the ACP activities in plasma, RBC and WBC were increased significantly to 283.6%
,
456.1% and 766.2%,
respectively.4. The ALP activities of ALL patients showed 344. 3% in plasma, 128. 1 % in RBC and 109. 2
% in WBC and ACP activities were increased to 234.4% in plasma but decreased to 65.1% in RBC and 83. 3 % in WBC.
5. The ALP activities of CML patients showed 252.5% in plasma, 158.2% in RBC and 32.3%
in WBC and the ACP activities in plasma, RBC and WBC were 298.4%,141. 4% and 738.5%
of~control value. respectively.
6. The tartrate-resistant ACP activities were shown a similar pattern such as total ACP acti- vities in 4 types of leukemia.
서 론
혈청의 ALP와 ACP활성도 측정은 골질환, 간, 담도 질환, 전립선질환등 임상진단에 많이 。1 용되고 있우 며 1)2) 백혈쿠의 ALP와 ACP 염색방업윤 백혈뱅의 분류 및 치료, 예후 결정에 많이 이용되고 있다. 3)4)
Yam5) 등응 모경 세 도성 백 헬 병 (Hair cell leukemia,
HCL)의 hairy cell에 서 tartaric acid처 리 에 역 제 되 지 않는 ACP가 강한 양성만응을 보였다고 했우며 Catov-
Sky 6)파 Brouef)등은 T 세 포급성 임 파아쿠성 백 혈 병 (T- cell acute lymphoblastic leukεmia , T-ALL)의 아세 표 에서 Golgi체에 국한되어 ACP 양성만응을 나타낸 것으 록 보고 하였 다. 또 Hayhoe8)등응 만성 골수성 백 혈병
c(Chronic myelocytic leukemia, CML)의 성 숙한 파럽 랙 혈쿠에 서 ALP활성 이 심 하게 감소하여 ALP활성 이 높은 골수중식 성 잘환 (proliferative disease)오로 부터 만성골수성랙혈병을 간렐하는데 도움이 된마고 보고
하였다. 9)10)
이와같이 백혈병진단에 있어서 백혈구의 ALP및 ACP -활성을 염색어1 위한 제표화학적 분석망볍이 이용되고
있£나 본 연구에서는 혈액을 혈장및 적혈쿠, 백혈쿠 후 분리하여 생화학걱 검사망법으로 ALP 및 ACP활성 을 각각 측정하고 건강인과 비교하였던바 의의있는 결 파를 얻었기에 이어1 부고 하는 바이다.
재료 및 방법
1. 재료
1985 년 8월 1 일부터 30 일까지 전라북도 00 병 원 임 상검사파에서 말측렐액및 골수검사에 의하여 벡혈병으 로 진단뱉은 여 자증에 서 급성 골수성 벡 헐 랭 (Acute my- ,elocytic leukemia, AML) 1 예 , 급성 을수단텍 쿠성 벡 혈
병 (Acute myelomonocytic leukemia, AMMoL) 1 예 ,
급성 임 파쿠성 백 혈 뱅 (Acute lymphocytic 1εukemia,
ALL) 1 예 , 만성 골수 성 백 혈 병 (Chronic myelocytic 1εu
kemia, CML) 1 예 와 건강딴 여 자 4명 을 대 상으로 정 맥 채혈하여 말초혈액검사을 살시하고 혈액을 분러시쳐서 얻응 혈장및 석혈쿠 벡혈구로 부터 ALP와 ACP활성도 을 측정하였마.
2. 방볍
백혈병환자와 건강안의 혈액에서 혈장및 적혈쿠, 백 τ혈쿠의 분리는 말초혈액을 10ml채취하여 heparin (10u
nits)O.lml으로 응고 방지 한 후 시 험 판을 parafilm~
혹 막아 40C에서 1,,-,1. 5시간 세워 두고 자연 부하로
침강된 척혈쿠층과 많은 양의 백혈쿠를 표함하는 상청 과의 사이에 뚜렷한 계면이 형성되면 침강된 적혈쿠층 에서 적혈쿠를 취하고 적혈쿠층 바로 위까지 상청을 채 집 하여 4, 000rpm으로 30분간 원섬 분러 시 커 백 혈구 첨사와 혈장을 쿠한 다음 11) 생리적식엽수로 적혈쿠와 벡혈구를 각각 부유시키고 ACP측정용 혈쿠부유액은 5mM Tris-HCl완충액 (pH 5.0) 으로, ALP와 Protein측 정 용 혈쿠부유액 응 5mM Tris-HCl완충액 (pH 10.0) 우 로 혈쿠를 파괴 시 켜 서 12) kind and king 면 볍 13)으록 ALP및 ACP, tartrate-resistant ACP활성 을 측정 하였 고 Biuret법 14)으로 총단백을 정량하여 측정된 효소의 활 성도릎 K.A unitjprotein gram으로 표시하였고 건강 인의 효소활성도에 대한 환자의 효소활성도을 상대치 (%)로 나타냈마.
성 적
백혈병으로 진단 받은 환자 4여1 와 건강안 4예릎 대 상오로 말초혈액검사와 혈액을 혈장및 적혈쿠, 백혈구 로 각각 분리하여 ALP와 ACP의 활성도를 측정하여 건강안과 비교 분석한 결파 Table 1, Table 2, Fig.
1, Fig. 2, Fig. 3을 얻 었 다.
1. 말초혈액소견
Table 1에서 나타난 바와 같이 혈색소량은 AML 8.
9gjdl, AMMoL 9.1gjdl, ALL 8.5gjdl, CML 9.6gjdl 으혹 급, 만성백혈병에서 모두 중등도의 빈혈을 나타 냈 A며 백 혈구수는 AML 26, 100j cu. mm, AMMoL 53, OOO/cu.mm, ALL 75,100/cu.mm, CML 149,OOO/cu.
mm으로 급성백혈병보마 만성골수성백혈병에서 백혈쿠 수의 증가가 집하였고 백혈쿠감별계산에서 아형 (blast) 반도는 AML 95%, AMMoL 46%, ALL 69%, CML 8% 으로 급성백혈병이 만성골수성벡혈병보다 아형빈도 가 높았으며 호중구의 마성숙한 세포(immature neutr-
ophil)는 ALL 11 %, CML 48%~로 판찰되 었고 혈소 판수는 AML 31,400jcu.mm, AMMoL 41, OOOjcu.mm, ALL 28,OOOjcu.mm, CML 728, OOOjcu.mm으로 읍성 백혈병에서는 감소하였우나 만성골수성벡혈병에서 혈 소판수의 증가가 있 었다.
2. ALP 및 ACP활성 도
각 혈뱅환자의 혈장빛 적혈구, 백혈쿠에서 ALP 및 ACP, tartrate-resistant ACP외 활성 을 건 캉인 과 비 교 해 본 결과 ALP활성응 혈장에서 AML(241. 0%), AMMoL (285.3%)
,
ALL (344.3%),
CML (252.5%) 은 건강인의 활성보다 모두 높은 활성을 나타냈£며 적 혈쿠에 서 는 AMMoL (181. 6%), ALL (128. 1 %), CML (158.2%) 은 약간 높았으나 AML (65.2%) 은 낮- 6 2 -
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Table 1. Peripheral blood findings
CML 8.5 9.6 751. 0 1,490. 0
69.0 11. 0 13.0 23.0 280.07,280.0 8. 0 48.0 ALL
Hb(g/dl) WBC(x102/
cu.mm) Blast(%) lmm. cell(%) Seg. N(%) Plt. (x 102/ .cu.mm)
530.0 46.0
15.0 410.0 AMMoL
9. 1 8. 9
261. 0 95.0
1.0 314.0 ALL
*
AML: Acute myelocytic leukemia AMMoL: Acute my리omonocytic leukemia ALL: Acute lymphocytic leukemia CML: Chronic myelocytic leukemiaWBC Fig. 2. Relative activities of the ACP in the various
leukemic blood compared with normal blood.
The control activities in the plasma, RBC and WBC are 0.61 (unit/protein gram), 15.
25 (unit/protein gram) and 16.25 (unit/pr- otein gram) respectively.
Plasma RBC 200
10。
었고 백혈쿠에서는 ALL(109. 2%) 에서 약간 높았A 나 AML (41. 2%), AMMoL (86.1%), CML (309.2%)
윤 낮은 활성을 나타내었다. (Fig. 1).
총 ACP활성응 혈장에서 AML (241. 0%), AMMoL (283.6%), ALL (234.4%), CML (298.4%) 은 건강 언보다 모두 높은 활성을 나타내었오먹 적혈쿠에서는
벡혈쿠외 형태학적 차아와 제도내 존재하는 여러가 지 불질을 세포화학적및 생화학적 땅법으로 측정하고 그 차이에 따라 백혈병세표위 헝 (type)을 쿠별하여 꽉 렬명의 분류및 진단에 이용되고 있다 15)16)
팩혈병의 말초혈액소견은 골수의 백혈병세포 침윤에 의한 적혈쿠 생성장애가 주된 원인무로 적혈쿠의 용혈 파 수명 단축£로 빈혈을 나타내며 17) 생화학검사상의 이상소견등은 백혈병세표위 장기침윤에 짜르는 장기의 71 능장애 정도와 세표파괴로 안한 세포성분이 혈액내 AML (139.3%), AMMoL (456.1%), CML(141. 1 %)
은 높았으나 ALL (65.1%) 은 낮았고 백혈쿠에서는
AML (467.1%), AMMoL (766.2%), CML(738.5%)
응 현저하케 높았으나 ALL (83.3%) 은 약간 낮은 활 성 을 나타내 었 마. (Fig. 2).
렐장갖 적 혈구, 백 혈구에 서 tartrate-resistant ACP활 성운 총ACP활성 결과와 비슷하였다. (Fig. 3).
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§ 304
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P ]a ;:;π1‘ 3. HBC WBC Fig. 1. Relative activities of the ALP in the various
leukemic blood compared with normal blood.
The control activities in the plasma, RBC and WBC are 0.61 (unit/protein gram), 3. 59 (unit/protein gram) and 2.94 (unit/protein gram) respectively.
normal and
blood
11r V'arious leukemic tartrate-resistant ACP
Table 2. The activities of ALP, ACP and blood. (k-A unit/protein gram)
Tartrate-resistant ACP Total ACP
ALP
WBC 20.25
61. 73 9.28 17.42
64.31 121. 20 11. 94 71. 81 RBC
Plasma 1. 47
1. 73 1. 43 1. 82
1. 39 0.66 1. 02 0.91 WBC 75. 9 124. 5 13.5 120.0 RBC
21. 25 69.56 9.92 21. 51 Plasma
WBC 1. 21 2.53 3.21 0.95 Plasma RBC
Al\1L 1. 47 2. 34 AMMoL 1. 74 6. 52
ALL 2.10 4.6
CML 1. 54 5. 68
15. 73 14.96
0‘55 16.25 15.25
0.61 2.94 3.59 0.61
효움 Normal
님을하기 위 해 서 살시 되 었 다. Abia26)등은 백 혈구의 ALP 활성 증가는 말초혈액에서 성숙한 호증구의 절대수어1 만비례하고 과립을 함유한 마성숙한 세표의 증가와 판 련된다고 하였무며 성숙한 과립백혈쿠수가 적은 HCL
에서 ALP 가 높은 활성을 나타냈다고 하였고 Valentine
과 Beck27)는 CML에서 벡헐구수외 증가와 미성숙한 세 표의 증가에 판계 없 이 낮은 ALP활성 을 나타내 드로 다른 호중주의 증가가 있는 걸환으로 부터 감벌이 가 능하다고 하였 으며 28)29) ~VV achstein30)괴- Hayhoe31)등응 곱성 백 혈 탱 에 서 나타나는 primitive cel은 ALP활성 이 없마고 보고 하였마.
Löffler와 Berghoff3 2)는 Gomori 염 색 방법 33) 이] 외 하면 모든 백혈쿠가 ACP펠성읍 나타냈£며 곱수쿠(rnyelo
cyte)와 전골수쿠(promyelocyte) 에 서 가강 캉한- 활성 을 착였 고 대 부분의 호산구(eosinophil) 에 서 캉한 촬정 을 부인다고 히-였£며 Goldberg34)는 단펙쿠(monocyte)와 호중쿠헤서 가장 강한 활성을 보였고 임파쿠 (lympho
cyte)에 서 는 가장 활성 이 낮았마고 하였 으며 Valentine 과 Beck27)는 항상 백헐주수가 4 예에서 모두 중등도되 반혈과 백 혈쿠수의 증가릅 나타냈、으며 행소핀-수는 급 성백혈벙 3여1 에서 캄소되었고 C1\1L에서 증가하였다.
또한 벡혈병환자위 헐 C뇌」즈후 쑤터 갚러한 헐장및 적혈 구, 백렐쿠에서 ALP 딪 ACP펜-성을 측정한 결파는 Fig. 1 파 Fig.2헤서 관찰되듯이 렬정-의 경우 펙헐병 증려1 4여l 에 서 £두 ALP 및 AεP촬성 이 높았!!__며 (그중 ALP는 ALL, ACP는 CML 이 기 장 높았다) 적 혈쿠의 경우 ALP활성윤 Al\1MoL, ALL, CML에서 높았고(그 중 AMMoL이 가장 높았마) AML에서 낮았무며 ACP 활성은 AML, AMMoL, CML에서 높았고(그중 AMM- oL이 가장 높았다) ALL에서는 낮게 나타냈다.
백혈쿠의 경우 Fig. 1 에서 관찰되듯이 ALP활성은 ALL에서 높았고 Al\1L, AMMoL, C1\1L에서 낮았오며 ACP활성 은 Fig. 2에 서 판찰되 듯이 AML, AMMoL,
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Fig. 3. Relative activities of the tartrate-resistant ACP in the various leukemic blood compared
\vith normal blood. The control activities in the plasma, RBC and WBC are 0.55(unit/
protein gram), 14.96 (unit/protein gram) and 15. 73 (unit/protein gram) respectively.
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Plasma i
유입되는 양에 확우펀다고 보고 되었다.뼈19)
Kay20)는 백혈쿠내에 인산효소가 존재한다고 보고 하였 고 Roch21), Haan22), Iwatsuru23)등은 백 렬쿠의 인 산효소의 활성 을 측정 하였 고 Rabinovitch24) HaighF5) 등응 안산효소의 만응 지적 pH에 따라 구별되는 ALP 와 ACP의 활성을 측정하였다. 그러고 혈쿠에서 ALP 활성에 대한 측정은 골수증식질환을 포함한 다양한 질 환에서 살시되어 왔고 ACP활성응 특별한 백혈병을 감
- 6 4 -
Cf\1L에서 높았고(그중 AMMoL이 가장 높았다) ALL 에서 낮게 나타냈다.
본 연쿠에서는 백혈병 분류및 진단을 위하여 벡혈쿠 뿐만 아니라 혈장및 척혈구에서 ALP와 ACP활성을측 정해 보므로서 의의를 가졌고 벡혈병환자의 혈장및 걱 혈쿠, 백혈구에서 ALP와 ACP활성이 득이적으로증감 되는 기천은 앞으로 더욱 연쿠찰 과제이며 보다 백헐병환자-를 태상으로 한 연구가 우구된다.
결 론
바으
"LOO-CC
1985 년 8월 1 암부터 30 알까지 전라북도 00 병 원 임 상걷사파에서 백혈병으로 진단펀 4예블 대상으로 말초 혈액 검사꾀:- ALP 및 ACP활성을 측정하여 건캉인과 비 교한 결과 다음파 갇은 결픈을 얻였다.
1. 말초헐액소견에서 혈색소량은 AML(8.9gjdl), AMMoL(9.1gjdl), ALL (8.5gjdl), CML (9.6gjdl)
1 에서 감소하였고 백혈구수는 AML (26,100jcu.mm), AMMoL (53,000jcu.mm), ALL (75,100jcu.mm), CML (149, OOOjcu.mm) 에서 증가하였고 백혈구간별계 산에 서 아형 빈도는 AML (95%), AMMoL (46%),
ALL (69%), CML (8%) 에서 나타났고 혈소판수는
AML (31,400jcu.mm), AMMoL (41,000jcu.mm), ALL (28,000jcu.mm) 에 서 갇소하였 으나 CML (728, OOOjcu.mm) 은 증가하였다.
2. 급성긁수성백혈병 (AML) 환자의 ALP활성은 혈장
(241. 0%) 싸서 높았오나 척혈구 (65.2%) 와 백헐쿠 (4 1.
2S~) 에서는 낮았으며 ACP활성은 혈장 (241. 0%) 파 척 혈구 (139.3%) , 백렬구 (467.1%) 에서 모두 높게 나타
냈다.
3. 급성꼴수단핵쿠성벡혈병 (AMMoL) 환자의 ALP활 정은 헐칭[-(285.3%) 파 적헬구(1 81. 6%) 에서 높았으나 백렬구 (86.1%) 에서는 낮았으며 ACP활성은 혈장 (283.
6~S) 과 걱 혈구 (456.1%) , 백 헐구 (766.2%) 에 서 모두 현착하케 좋은케 나타냈다.
4. 급성 염 파구성 백 렬 병 (ALL)환자의 ALP활성 은 혈 장 (344.3%) 과 적혈쿠(1 28.1%) , 벡혈쿠 (109.2%) 에서
£두 높았으며 ACP촬성응 렬강 (234.4%) 에서 높았무 나 걱혈구 (65.1 %)와 백혈구 (83.3%) 에서는 낮게 나타 냈다.
5. 만성끌수성백혈병 (CML)환자의 ALP활정은 첼장 (252.5%) 파 척 혈구(1 58.2%) 에 서 높았으나 벡 힐구 (32.3%) 에서는 낮았£며 ACP활성은 혈장 (298.4%) 과 걱혈쿠(14 1. 1 %), 렉혈구 (738.5%) 에서 모두높게 나 타녔다.
6. .Tartrate-resÎ-stant ACP활성 은 총 ACP활성 과 바 슷한 결과릎 나타냈다.
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