약학회지제
42
권제3
호319~323(1998)
Yakhak HoejiVol. 42, No. 3
선퇴에 의한 죽시형 알레르기 반응의 억제
신태용
" ■
김성화■
김형민*
우석대학교약학대학.
*원광대학교 약학대학(Received April 30. 1998)
Inhibition of Immediate Allergic Reaction by
Cryptotympana atrataTae-Yong Shin*, Seong-Hwa Kim and Hyung-Min Kim
College o f Pharmacy, Woosuk University, Chonju, 565-701, Korea
^College o f Pharmacy, W onkwang University, Iksa n ,570-749, Korea
Abstract~ Effects of the aqueous extract of Cryptoh/mpam atrata Fabricius (CAF) on the allergic reac
tions were investigated. In the present study, we examined the effect of CAF on compound 48/80-in
duced anaphylaxis in vivo and histamine release from rat peritoneal mast cells in vitro. CAF dose-de
pendently inhibited systemic anaphylaxis induced by compound 48/80 in mice. CAF significantly in
hibited serum histamine levels induced by compound 48/80. CAF also inhibited histamine release from the rat peritoneal mast cells activated by compound 48/80. These results suggest that CAF may be use
ful for the prevention and treatment of aller^ related disease.
Keywords □ Cryptotympana atrata, Anaphylaxis, Compound 48/80, Histamine, Mast cells.
선 뢰
(Oypfofympflnfl atrata F a b r
. ) 는 매 미 과(Ci~
cadidae
) 에 속 하 는 매 미 의 유 층 이 성 층 으 로 번 화 할 때 탈 괴 한 껍 질 로 서 진 경 작 용.
진 정 작 용.
해 열 작 용 이 있 으 며 임 상 에 서 는 소 아 외 감 기 에 외 한 발 열,
파 상 풍.
각 막 흔 탁 및 담 마 진 등 의 알 레 르 기 성 피 부 질 환 에 이 용 되 고 있 는 샘 약 이 다.**
이 에 관 한 약 리 학 적 연 구 로 는H siech
등 ® 이 흰 쥐 를 이 용 한 실 험 에 서 진 경 작 용.
진 정 작 용 등 을 보 고 하 였 으 며M a
등 ® 은 이 종 수 동 피 부 아 나 필 락 시 를 이 용 한 실 험 으 로 항 알 레 르 기 작 용 을 보 고 하 였 다.
알 레 르 기 는 일 반 적 으 로 네 가 지 형 으 로 분 류 되 어 지 고 있 으 며***
그 중 제I
형 알 레 르 기 가 임 상 에 있 어 서 주 요 부 분 을 차 지 하 고 있 다.
비 만 세 포 는 아 나 펄 락 시 와 알 레 르 기 반 응 중 에 일 어 나 는 다 양 한 생 리 적 번 화 에 중 요 한 역 할 을 하 는 것 으 로 알 려 져 있 으 며* I sh-
*
본논문에관한문의는이저자에게로(
전화) 0652-290-1572 (
팩스) 0652-290-1567
iza k a
등 * ^ 은 비 만 세 포 로 부 터 히 스 타 민 의 유 리 가 제I
형 알 레 르 기 의 병 리 학 적 진 행 과 정 에 있 어 서 의 필 수 적 인 단 계 임 을 밝 혔 다
.
한 편com pound 48/80
은N - m ethyl-p -m ethoxyphen ylethylam in e
과formal - dehyde
의 측 합 에 외 해 합 성 된 고 분 자 물 질 의 복 합 체 로 서 비 만 세 포 탈 과 럽 물 질 로 알 려 져 있 다/®
고 농 도 의compound 48/80
은 비 만 세 포 로 부 터 약90
% 의 히 스 타 민 을 유 리 시 키 는 것 으 로 알 려 져 있 으 며 적 당 량 의compound 48/80
은 아 나 필 락 시 반 응 의 기 전 을 연 구 하 기 위 해 히 스 타 민 유 리 촉 진 제 로 서 가 장 널 리 사 용 되 고 었 다.*"*
저 자 들 은 선 뢰 가 담 마 진 등 의 알 레 르 기 피 부 질 환 외 치 료 에 이 용 되 고 있 는 점 에 주 목 하 여 그 약 리 작 용 의 특 성 을 규 명 하 기 위 해 대 표 적 인 즉 시 형 알 레 르 기 반 응 시 험 법 을 이 용 하 여 그 억 제 작 용 을 검 토 하 였 다
.
즉 선 퇴 외 물 추 출 물 을 검 체 로 하 여compound 48/80
유 발 아 나 필 락 시 및 흰 쥐 복 강 버 만 세 포 로 부 터 히 스 타 민 방 출 에319
320 신태용 ■ 김성화■김형민
미 처 는 영 향 을 검 토 하 였 다
.
실 험 방 법
시 약 및 기 기
Compound 48/80, metrizamide, a-minimum es
sential medium (a-MEM)
및o-phthaldialdehyde (OPA
) 는Sigma
에 서 구 입 하 였 으 며 기 타 시 약 은 시 관 시 약 특 급 을 사 용 하 였 다.
기 기 는spectrofluorometer (Shimadzu. RF-5300PC, Japan
) 를 사 용 하 였 다.
실 험 동 물
W istar
계 수 컷 흰 쥐 및ICR
계 수 컷 생 쥐 는 대 한 실 험 동 물 센 타 에 서 구 입 하 여 실 험 에 용 하 였 다.
사 용 약 제
선 뢰
(C A F
) 는 시 중 한 외 원 에 서 구 입 하 여 물 추 출 물 을 실 험 에 사 용 하 였 다.
즉 선 뢰 를 증 류 수 로 수 욕 상 에 서5
시간2
회 추 출 하 여 감 압 하 에 서 농 측 한 다 옴 동 결 건 조 하 여-20°C
에 서 보 관 하 였 다.
이 추 출 물 을 사 용 직 전 에 생 체 내 실 험 에 서 는 생 리 식 염 수 틀 사 용 하 고 생 체 외 실 험 에 서 는Tyrode buffer A
를 사 용 하 여 일 정 농 도 로 조 제 하 였 다.
생 체 내 실 험
Am ir
등 ^^의 방 법 에 따 라 실 험 하 였 다.
즉 버 만 세 포 의 탈 과 럽 제 로compound 48/80(8 ^ig/g,
체 중 ) 을 생 쥐 복 강 내 에 투 여 하 기60
분 전 에 생 러 식 염 수 로 조 제 한CAF
틀
0.025, 0.05, 0.10, 0.25, 0.50
및1.0(mg/g.
체 중 )의 용 량 으 로 복 강 내 에 주 사 하 였 다.
치 사 율 은 아 니 필 락 시 를 유 발 시 킨 후
60
분 동 안 관 찰 하 였 다.
한 편compound 48/80
투 여60
분 전, 5
분 후 및10
분 후 에C A F (lm g/g,
체 중 ) 를 복 강 내 에 투 여 하 고compound 48/80
을 복 강 내 에 주 사 한15
분 후 에 심 장 에 서 채 혈 하 고 혈 청 을 분 리 하 여 히 스 타 민 을 정 량 하 였 다,
시 험 관 내 실 험
환 쥐 복 강 버 만 세 포 의 분 러
- Kanemoto
등 "^ 의 방 법 에 따 라 흰 쥐 복 강 비 만 세 포 를 분 리 하 였 다.
이 를 간 략 히 기 술 하 면 흰 쥐 를 에 테 르 로 마 취 시 킨 후 실 온 에 서Tyrode buffer B
약20 m
/를 복 강 내 에 주 입 하 고90
초 간 복 벽 을 가 볍 게 마 사 지 한 후 복 벽 중 앙 선 을 약 간 절 개하 여 복 강 내 액 을
pasteur pipette
로 채 취 하 여150x g
로
10
분 간 썩3
회 반 복 원 침 시 킨 후 상 층 부 유 액 을 제 거 하 고I m
/의Tyrode buffer B
에 재 부 유 시 켰 다.
이 세 포 부 유 액 중 비 만 세 포 는22.5%(W/V) metrizamide
를 이 용 하 여Yurt
등*®의 방 법 으 로 분 러 정 제 하 였 다.
Compound 48/80
에 의 한 허 스 타 민 유 리- CO
2in- cubator
에 서 미 리37°C
에 서10
분 간 배 양 시 킨 흰 쥐 복 강 비 만 세 포 부 유 액(2x10= cells/m
/ ) 에Tyrode buff
er A
로 조 제 한C A F
를 첨 가 하 여 최 중 농 도 를 각 각0.05, 0.1, 0.5
및1,0 mg/m
/로 하 고37°C
에 서10
분 간 배 양 시킨 후compound 48/80(5 Hg/mZ
) 을 가 하 여 다 시10
분 동 안 배 양 시 킨 다 옴400X
평로4°C
에 서5
분 간 원 심 분 리 하 여 상 층 액 을 분 리 하 였 다.
허 스 타 민 의 정 량
세 포 배 양 상 층 액 및 혈 청 중 에 있 는 히 스 타 민 은
Shore
등*®*의 방 법 에 따 라O PA
로 히 스 타 민 을 형 광 유 도 체 화 시 킨 후X,,=353nm , ^em=438nm
에 서 상 대 형 광 강 도 틀 측 정 하 여 정량 하 였 다.
이 를 간 략 히 기 술 하 면 에펜 돌 프 튜 브 에 시 료500 n
；를 취 하 고0.1 M- HC1 4501-1
/와60%
과 염 소 산 용 액50
나/
를 혼 합 후 원 심 분 리(400Xg, 20 min)
하 고 그 상 징액800
박 를 취 해5 M-NaOH
용 액500
나/,
증 류 수3 m ； , n-bu
tanol 10 m l
및N aCl 1.2
담을혼 합 한 시험 관 에 넣 고 진 탕 후 원 심 분 리(500xg, 10 min)
하 였 다. butanol
층8 m/
를 취 하 고0.1 M-HC1 3 m/
와n-heptane 10 m/
를 가 하 여 진 탕 후 원 심 분 리(500Xg, 10 min)
하 였 다.
여 기 에 서 얻 어 진 수 층2 m/
에1 M -NaOH
용 액400 M7
와1% OPA
용 액100 ^i
/률 가 하 고37°C
수 욕 상 에 서3
분 동 안 반 응 시 킨 다 움3 M-HC1
용 액200
를 가 하 여 흔 합 하 고2
분 동 안 방 치 한 후?L,,=353nm, X,^=438 nm
에 서 형광 광 도 률 측 정 하 였 다.
허 스 타 민 유 리 억 제 율
히 스 타 민 유 리 억 제 율 은 다 옴 식 에 외 하 여 구 하 였 다
.
히 스 타 던 유 러 억 제 율
(%) =
스 그 르XlOO A
A
：C A F
를 부 가 하 지 않 았 을 때 외 히 스 타 민 의 양B
：CA F
를 부 가 하 였 을 때 의 히 스 타 민 외 앙통 계 학 적 분 석
실 험 결 과 는
m e a n iS .E
로 표 시 하 였 으 며Student s
Pharm. Soc. Korea
lOOl
80-
60
40
20
-60 min +5 min +10 min Groups of mice (n = 10/group) were intraperitoneally
pretreated w ith 200 M-/ of saline or drugs. The drugs were given 5 m in or 10 m in after the compound 48/80 injection. The compound 48/80 solution was in traperitoneally given to mice. M otality(% ) w ithin 60 m in follow ing com pound 48/80 injection was represented as No. of dead m ice/total No. of ex
perim ental mice X 100
Fig. 1 — Inhibitory effect of CAF on serum histamine release 15 m in after compound 48/80 injection.
Mice (n=7/group) were intraperitoneally ad
ministered with 200 |x/ of saline or CAF. Com
pound 48/80 solution (8 fi-g/g, body weight) were intraperitoneally given to mice. Each bar shows the mean±S.E. Significantly different from the control(*p<0.05).
Vol. 42, No. 3, 1998 None(Saline)
0.025 0.05 0.10 0.25 0.50 1.00 1.00
사 율 을 관 찰 한 결 과
0.025(mg/g,
체 중)
농 도 로 투 여 하 였 을 때 는 처 사 율 이100%
이 었 으 나0.05, 0.10
및0.25(mg/g,
체 중)
농 도 로 투 여 하 였 을 때 는 처 사 율 이 각 각80%. 60%
및40%
였 으 며0.50
및1.0(mg/g,
체 중)
에 서 는 치 사 율 이
0%
이 었 다.
한 편compound 48/80
을 투 여 하 고5
분 및10
분 후 에C A F (1 mg/g,
체 중 ) 을 복 강 내 에 투 여 한 결 과Table II
에 서 와 같 이5
분 후 에C A F
를 투 여 한 군 은 치 사 율 이
20%, 10
분 후 에C A F
를 투 여 한 군 에 서 는 치 사 율 이40%
이 었 다.
Compound 48/80
에 의 한 아 나 필 락 시 반 응 은 비 만 세 포 로 부 터 히 스 타 민,
부 라 디 키 닌 및 세 로 토 닌 과 같 은 혈 관 작 용 성 물 질 의 ■유리에 의 한 것 이 다.™
이 결 과 는C A F
가 비 만 세 포 에 작 용 하 여 이 와 같 은 물 질 의 유 리 를 억 제 함 을 의 미한 다.
혈 청 중 허 스 타 민 유 리 에 머 처 는
CAF
의 효 과- Compound 48/80
을 투 여 하 기60
분 전, 5
분 후 및10
분 후 에 각 각CAF(1 mg/g,
체 중 ) 을 복 강 내 에 투 여 하 고 생 쥐 의 심 장 에 서 채 혈 하 여 혈 청 을 분 리 한 다 음 허 스 타 민 양 을 측 정 하 였 다(n = 7/gro u p ). F ig . 1
에 서 와 같 이compound 48/80
투 여60
분 전 투 여 군 의 혈 청 중 히 스 타 민 유 리 억 제 율 은67.7±7.2%, 5
분 후 투 여 군 온62.6
Groups of mice (n = 10/group) were intraperitoneally pretreated w ith 200 M-/ saline or drugs. The drugs were given at various doses 60 m in before the com
pound 48/80 injection. The compound 48/80 solution was intraperitoneally given to mice. M ortality i% ) w ithin 60 m in following compound 48/80 injection was represented as No. of dead m ice/total No. of ex
perim ental mice X 100
Table II — Effect of time administered the CAF on compound 48/80 induced anaphylaxis
CAF treatm ent Compound 48/80_
(mg/g, body (8 |ig/g, body
weight) weight)
M ortality(% ) 5 m in 10 m in
later later None(Saline)
1.0 1.0
100 100
20 40
0 0
test
에 의 해 유 의 성 을 검 정 하 여p<0.05
인 결 과 를 얻 었 을 때유 외 성 이 있 는 것 으 로 하 였 다.
결 과 및 고 찰
Compound 48/80
에 의 해 유 도 된 아 나 필 락 시 반 응 에 미 처 는CAF
의 효 과-
즉 시 형 과 민 반 응 에 대 한C A F
외 효 과 를 검 토 하 기 위해compound 48/80
을 사 용 하 여 전 신 성 아 나 필 락 시 를 유 도 하 였 다.
처 사 율 은compound 48/80(8 M-g/g,
체 중 ) 을 생 쥐 에 주 사 한 후1
시 간 동 안 관 찰 하 여 결 정 하 였 다(n = 10/group). Table I
에 서 와 같 이 생 리 식 염 수200^1
/를 투 여 한 대 조 군 은100
% 처 사 율 을 나 타 내 었 다.
그 러 나compound 48/80
을 투 여 하 기1
시 간 전 에CAF
를 계 열 희 석 하 여 복 강 내 에 투 여 한 후 처Table I — Effects of CAF on compound 48/80 induced __________anaphylaxis________________________________
CAF treatment Compound 48/80 M ortality (mg/g. body weight) (8 |ig/g, body weight) i% )
선뢰에 의한 죽시형 알레르기 반응외 억제 321
{%}9sea|djau!Ee}s!LIioUBIqlMul
o o o o o- 2피864
+
+
+
+
+
C A F ( m g /m l)
Fig. 2
— Inhibitory effect of CAF on compound 48/80 in
duced histamine release from rat peritoneal m ast cells. R at peritoneal mast cells (2 x l(f cells/m/) were pretreated with saline or CAF for 10 min. Each bar shows the mean±S.E. (n
=3). Significantly different from the control(*p
<0.05).
±5.8% . 10
분 후 투 여 군 은37.8±4.1
% 로 억 제 율 을 나 타 내 었 으 며 그 중60
분 전 투 여 군 이 가 장 효 과 적이 었 다.
이러한 결 과 들 은
C A F
가compound 48/80
투 여 에 의 해 유 도 된 아 나 펄 락 시 예 방 에 효 과 적임 을 시 사 하 고 있 다.
시 험 관 내 에 서
compound 48/80
에 으|한환 취 복 강 버 만 세 포 의 허 스 타 민 유 리 에 머 처 는CAF
의 효 과-
비 만 세 포 에compound 48/80
을 처 러 하 면 세 포 막 이 파 괴 되 면 서 세 포 내 에 함 유 되 어 있 는 각 종 화 학 적 매 개 물 질 이 방 출 된 다.
그 러 나 비 만 세 포 를C A F
로 전 처 러 하 고com
pound 48/80
을 처 리 하 면 히 스 타 민 유 리 가 일 어 나 지 않 는 다. C A F
가 복 강 비 만 세 포 에 미 처 는 영 향 을 검 토 하 기 위 하 여compound 48/80
처리10
분 전 에C A F
를 처러 한 결 과Fig. 2
에 서 와 같 이C A F
외 농 도 가0.05 mg/
mZ
일 때 는24/7±3.9%, 0.1 mg/m
/ 일 때 는36/7±
4.1% . 0 .5 m ^ n i
；일 때 는47.4±5.4%, 1.0 mg/m
/ 일 때 는82.3±7.6
% 로 히 스 타 민 유 리 를 억 제 시 켰 다.
결 론
C A F
의 즉 시 형 알 레 르 기 반 응 의 억 제 효 과 실 험 을 통하 여 다 옴 과 같 은 결 과 를 얻 었 다
.
1. C A F
는com pound 48/80
에 외해 유 도 된 전 신 아 나 필 락 시 를 억 제 하 였 다.
2. C A F
는co m pound 48/80
에 외 한 흰 쥐 외 복 강 비 만 세 포 외 히 스 타 민 유 리 를 억 제 하 였 다.
3. C A F
는com pound 48/80
에 의 해 유 도 된 전 신 아 나 펄 락 시 에 서 혈 청 중 히 스 타 민 의 유 러 룰 억 제 하 였 다.
감 사 의 말 씀
이 논 문 은
1998
년 도 우 석 대 학 교 학 술 연 구 조 성 비 에 외 하 여 연 구 되 었 옴.
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322 신태용 • 김성화• 김형민
kill
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