임상검사와 정도관리：제26권 제1호 2004
J. Lab. Med. & Quality Assuarance 2004：26：193-196 193
한국인 산모, 신생아 및 제대혈에서 Helicobacter pylori IgG 및 IgM 항체가 조사
장은아․서인범*․마경란*
고려대학교 의과대학 진단검사의학교실, 강원대학교 의과대학 진단검사의학교실*
The Seroprevalence of IgM and IgG Antibodies to Helicobacter pylori Among Maternal, Neonatal, and Cord Bloods in Korea
Eun Ah Chang, In Bum Suh*, and Kyung Ran Ma*
Department of Laboratory Medicine, Korea University College of Medicine, Seoul; Department of Laboratory Medicine, Kangwon National University College of Medicine, Chuncheon, Korea*
Background: Helicobacter pylori (H. pylori) infection has been known closely related with gastritis, duodenal ulcer and gastric cancer and is prevalent among Koreans. However, the infec- tion route and the time are unclear, especially during perinatal period. The aim of this study is to investigate the relationship of H. pylori IgG and IgM antibody prevalences and titers between maternal, neonatal, and cord blood.
Methods: We collected 45 simultaneous maternal, neonatal, and cord bloods and 150 single cord bloods during delivery. The specific H. pylori IgG and IgM antibody levels were measured by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) method.
Results: The H. pylori IgG antibody-positive rate for maternal, neonatal, and cord bloods were equal as 35.6% (16/45). The H. pylori IgG antibody levels of neonatal and cord bloods were 52.7% and 70.7% of maternal blood level. The H. pylori IgG antibody levels between maternal and cord bloods (r2 = 0.9725, p<0.05), maternal and neonatal bloods (r2 = 0.8569, p<0.05), and neonatal and cord bloods (r2 = 0.9437, p<0.05) were well correlated. Only one case of maternal blood was H. pylori IgM antibody positive and it's antibody level was 52.3 U/mL.
Conclusions: In this study, we provided the sero-prevalence of H. pylori IgG and IgM anti- bodies and the relationship of antibody level of H. pylori IgG in maternal, neonatal and cord bloods. To elucidate the exact route and time of H. pylori infection, further studies including serial measurement of H. pylori IgG and IgM level in neonates will be needed.
Key Words：H. pylori infection, H. pylori IgG antibody, H. pylori IgM antibody, Cord blood, Seroprevalence.
교신저자：서인범
우) 200-947) 강원도 춘천시 효자3동 17-1 강원대학교병원 진단검사의학과
전화：033)258-2446, FAX：033)242-1329 E-mail：[email protected]
서 론
Helicobacter pylori (H. pylori) 감염은 국내뿐만 아 니라 개발도상국을 포함한 외국에서도 널리 확산되어 있으 며, 주로 소아기에 감염이 되는 것으로 알려져 있다. 특이
항체의 형성을 유도하지만 자연 치유되는 경우가 거의 없고 평생 감염된 상태로 지내며, 성인이 될수록 위염, 소화성궤 양, 위암 등을 일으키는 위험인자가 된다[1]. 성인에서는 H. pylori 감염이 십이지장궤양의 약 90%와 연관성이 있 고, 소아에서는 십이지장궤양의 65%, 위궤양의 32%가 H.
pylori 양성인 것으로 보고[2]되고 있으며, 영유아에서 H.
pylori 감염이 위암발생의 위험인자가 된다는 보고도 있다 [3]. 1994년 NIH Consensus Development Confe- rence에서는 H. pylori와 관계된 소화성 궤양은 감염질환 으로 규정하고 위암과 H. pylori를 위선암의 제1군 발암물
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Table 1. The seroreactivity of H. pylori IgG Ab according to samples (U/mL)
Sample(n=45) IgG positive(mean ± SD) IgG negative(mean ± SD)
Mother 102.6 ± 30.7 4.1 ± 4.6
Cord Blood 71.6 ± 29.6 3.7 ± 3.9
Infant 52.4 ± 28.8 3.5 ± 3.2
Table 2. The relationship of H. pylori IgG Ab reactivity according to samples
Sample(n=45) r2 value and equation by regression analysis
Mother-Cord Blood IgG 0.9725 y = 1.3394x + 2.5560
Cord Blood-Infant IgG 0.9437 y = 1.2315x + 2.7415
Mother-Infant IgG 0.8569 y = 0.5376x - 0.4871
질로 분류하였다[4]. 위암과 H. pylori와의 연관성 및 발 생기전을 밝히기 위해서는 자연경과나 역학적인 연구가 중 요하며, 특히 위궤양, 위암 및 H. pylori 감염율이 높은 국 내에서는 이러한 연관성을 밝히기 위해서는 소아기를 비롯 한 영 유아기부터의 연구가 시행되어야 한다[5]. 영유아에 서의 H. pylori 감염은 대부분이 모체 또는 가족간의 감염 상태에 의해 영향 받는 것[6-9]으로 알려져 있다. 국내에서 연구된 결과들은 주로 소아들을 대상으로 H. pylori 감염 유병율에 관한 보고[2, 10-12]가 있으나, 제대혈과 신생아 를 대상으로 한 산모, 태아간의 감염율에 대한 연구는 찾기 어려웠다.
이에 본 연구자는 산모, 신생아 및 제대혈에서 H. pylo- ri IgG 및 IgM 항체를 측정하여 한국인에서의 산모, 신생 아 및 제대혈에서 H. pylori IgG 및 IgM 항체 양성율 및 항체가의 관계를 알아보고자 하였다.
대상 및 방법 1. 대 상
2003년 5월부터 2004년 2월까지 고려대학교 안산병원 및 강원대학교병원에서 분만을 시행한 743예 중, 산모(평 균연령; 27.8 ± 4.0)의 혈액, 제대혈 및 신생아(출생후 3 일 이내)의 혈액 모두 수집이 가능하였던 45예와 제대혈만 수집이 가능하였던 150예를 대상으로 하였다. 검체는 K3EDTA 시험관 및 heparin 모세관에 채취하고 원심분리 하여 혈장을 -80℃ 냉동고에 보관 후, 동시에 검사하였다.
2. 방 법
각 검체에 대하여 H. pylori IgG 및 IgM 항체를 Ac- cuBind Microplate ELISA kit (Monobind Inc, CA, USA)를 이용하여 측정하였다.
1) H. pylori IgG 및 IgM의 측정
H. pylori IgG 및 IgM의 측정은 지침서에 따라 환자의 검체를 100배 희석하여 IgG는 25 μL 그리고 IgM은 50 μ
L와 conjugate 용액 각 100 μL를 microplate에 분주하 여 배양하였으며, horse radish peroxidase (HRP)가 부 착된 항인 IgG 및 IgM 항체를 각각 100 μL씩 분주, 배양 한 후, 발색제로 TMB와 H2O2를 첨가하고 1N HCl로 반 응을 정지시키고, 460 nm에서 흡광도를 측정(Coda ELI- SA processor, Biorad, Swiss)하였다. H. pylori IgG는 20 U/ml 그리고 IgM은 40 U/ml 이상일 경우를 양성으 로 판정하였다.
2) 통계처리
결과처리는 컴퓨터 통계 프로그램인 SPSS-Win95를 이 용하여 H. pylori IgG 및 IgM의 양성율과 항체값에 대하 여 회귀분석을 시행하여 산모, 제대혈 및 신생아에서의 상 관관계를 분석하였다.
결 과
1. H. pylori에 대한 산모, 신생아 및 제대혈의 IgG 항체 산모, 신생아 및 제대혈 모두 채취가 가능하였던 45예 중 16예(35.6%)에서 H. pylori에 대한 IgG 항체에 일치 된 양성소견을 보였으며, 불일치된 예는 없었다. IgG 항체 양성인 산모, 신생아 및 제대혈의 항체가(평균 ± 표준편차) 는 각각 102.6 ± 30.7 U/mL, 52.4 ± 28.8 U/mL 및 71.6 ± 29.6 U/mL였다(Table 1). 제대혈만 채취가 가 능했던 150예에서 H. pylori에 대한 IgG 항체 양성율은 34.0%(51/150)이며, 항체 양성인 제대혈의 항체가(평균
± 표준편차)는 45.7 ± 13.2 U/mL였다.
2. H. pylori에 대한 산모, 신생아 및 제대혈의 IgM 항체 H. pylori에 대한 IgM 항체는 단 한 개의 산모혈액에서 양성으로 관찰되었는데 동시에 채취한 신생아 및 제대혈은 음성으로 판정되었으며 항체가는 각각 52.3 U/mL, 7.8 U/mL 및 8.5 U/mL였다. 제대혈만 채취가 가능했던 150 예에서 H. pylori에 대한 IgM 항체 양성인 경우는 한 예 도 없었고, IgM 항체가의 평균은 3.1 ± 3.6 U/mL였다.
한국인 산모, 신생아 및 제대혈에서 Helicobacter pylori IgG 및 IgM 항체가 조사 195 3. 산모, 신생아 및 제대혈 간의 H. pylori에 대한 IgG
및 IgM 항체의 관계
H. pylori에 대한 IgG 항체 양성은 산모, 신생아 및 제 대혈 모두에서 일치된 결과(35.6%)를 보였으나, 각 항체 가는 산모에 비해 제대혈은 70.7%, 신생아는 52.7%로 감 소되어 있었다. 항체가의 관계를 회귀분석한 결과, 상관계 수(r2)는 산모와 제대혈간 0.9725(p<0.05), 산모와 신생 아간 0.8569(p<0.05) 및 제대혈과 신생아간 0.9437 (p<0.05)로 산모와 제대혈간에 상관계수가 가장 높았다 (Table 2).
고 찰
H. pylori는 1983년 Warren 등[13]에 의해 위점막에 서 나선형의 세균으로 발견된 이후, 위염, 십이지장궤양 [14], 위암[15], MALT (mucosa-associated lymphoid tissue) 림프종[16]과 연관성이 있음이 밝혀졌고 각 나라 및 지역에 따라 H. pylori의 감염율은 차이가 있으며[17], 사회 경제적 수준이 낮을수록 나이가 많아질수록 증가한다 고 알려져 있다[18]. H. pylori는 성인뿐만 아니라 소아에 서도 만성 활동성 위염과 관련이 있으며, 소아의 만성 반복 성 복통의 원인중 하나일 것이라 보고[19] 되고 있으며, H. pylori 감염의 대부분은 만성이고 한번 감염되면 치료 하지 않는 한 평생 동안 지속된다[13]. H. pylori가 위 점 막에 감염되면 대부분의 경우 면역반응을 일으켜 항체를 형 성하나 아직까지는 이로 인한 균의 제거나 이에 대한 면역 획득의 증거는 없으며, 실제로 H. pylori에 대한 IgG의 존 재는 성인에 있어서는 만성적인 감염을 의미한다. 따라서 H. pylori에 대한 혈청 항체의 존재는 진단적 의미를 가지 며 이의 측정을 위해 enzyme linked immunosorbent assay (ELISA)를 포함한 여러 방법들이 개발되었지만, 이는 체액면역반응 기능에 의하여 영향을 받아 환자의 연 령, 면역결핍상태, 감염의 기간, 세균의 수에 따라 달라지 며, 다른 감염에 의한 교차반응으로 인한 진단상의 단점도 있다. H. pylori 감염의 경우에 감염 초기에는 충분한 항 체를 가지고 있지 못할 수 있으나, 일단 감염이 지속되면 H. pylori에 대한 항체의 농도는 균수와도 관계가 있을 것 이다. 소아에 있어서는 H. pylori에 대한 면역반응은 성인 과는 차이가 있다고 알려져 있으며[20] 출생전인 태아와는 더 큰 차이가 있을 것으로 예상된다.
본 연구는 이러한 H. pylori 검사법 중 효소면역법을 이 용하여 산모, 신생아 및 제대혈에서의 H. pylori IgG 및 IgM 항체 양성율을 분석한 결과, 산모, 신생아 및 제대혈 에서 H. pylori IgG 항체 양성율은 일치하여 Gold 등 [21]의 보고와 같았다. 추가로 본 연구에서는 산모와 제대 혈 간의 IgG 항체가 및 신생아와 제대혈 간의 IgG 항체가 는 높은 상관관계를 보였고 산모혈액의 IgG 항체 중, 약
70%가 제대혈, 그리고 약 53%가 신생아로 이동되었다.
본 연구에서는 신생아에 대한 추가 IgG 항체 검사는 시행 하지 못하였지만 Bunn 등[11]과 Blecker 등[22]에 의하 면 생후 6개월까지 점차적으로 IgG 항체가가 산모의 1/5 까지 감소하므로 H. pylori IgG 항체가 태반을 통해 모체 에서 태아로 이동되는 것이 확실하지만, 이렇게 이동된 항 체가 신생아의 H. pylori 감염을 예방하지는 못한다고 보 고하였다. 본 연구에서 검사한 H. pylori IgM 항체는 양 성검체가 적어 비교하기가 어려웠으며 추후 더 많은 검체들 을 대상으로 연구가 필요하다.
150예의 단일제대혈을 대상으로 한 H. pylori IgG 항 체의 양성율은 34.0%였으며, 이는 서정기 등[10]이 보고 한 국내 학동기 아동의 혈청 H. pylori IgG 항체 양성율인 28.0% 보다는 높은 결과를 보였으나 이는 H. pylori IgG 항체 양성인 산모에서 항체가 태반을 통하여 수동적으로 이 동된 결과로 생각된다.
본 연구는 국내에서 아직 보고되지 않은 제대혈 내의 혈 청 H. pylori IgG 와 IgM을 측정하여 항체양성율을 알 수 있었고, 비록 H. pylori에 대한 감염경로의 규명을 위한 항체가의 변화는 검사하지 못하였지만 산모의 혈액과 태반 을 통한 제대혈 및 신생아에서의 H. pylori IgG 항체가의 관계를 알 수 있었다. 추가로 신생아의 혈청 H. pylori IgG와 IgM에 대한 추적검사를 하여 국내의 H. pylori 소 아 유병율과 감염경로의 규명을 위한 연구가 필요하다고 생 각된다.
요 약
배 경: Helicobacter pylori (H. pylori) 감염은 위염, 십이지장궤양, 위암 등과 관련이 있다고 알려져 있으며, 국 내에도 널리 퍼져 있으나 감염경로와 시기는 아직 확실치 않고 산모와 신생아간의 감염 전파에 대해서도 논란이 많 다. 본 연구는 산모, 신생아 및 제대혈에서 H. pylori IgG 및 IgM 항체를 측정하여 한국인에서의 산모, 신생아 및 제 대혈에서 H. pylori IgG 및 IgM 항체 양성율 및 항체가의 관계를 알아보고자 하였다.
방 법: 분만시 산모, 신생아 및 제대혈 세가지 모두 수집 가능하였던 45예와 제대혈만 수집이 가능하였던 150예를 대상으로 H. pylori IgG 및 IgM 항체를 효소면역측정법으 로 측정하여 비교, 분석하였다.
결 과: H. pylori에 대한 IgG 항체 양성율은 45예를 대 상으로 실시한 산모, 신생아 및 제대혈에서 35.6% (16/
45)였으며, 양성인 산모는 신생아 및 제대혈 모두에서 양성 으로 일치되는 결과를 보였다. H. pylori에 대한 IgG 항체 가는 산모에 비해 신생아는 52.7%, 제대혈은 70.7%로 감 소되어 있었으며, 항체가의 관계를 회귀분석한 결과, 상관 계수(r2)는 산모와 제대혈간 0.9725(p<0.05), 산모와 신
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생아간 0.8569(p<0.05) 및 신생아와 제대혈간 0.9437 (p<0.05)로 높았다. IgM 항체의 양성은 산모 혈액 1예에 서만 관찰되었으며 항체가는 52.3 U/mL였다.
결 론: 본 연구 결과, 산모, 신생아 및 제대혈에서의 H.
pylori 항체 양성율 및 항체가의 관계를 알 수 있었다. 추 가로 신생아에서 혈청 H. pylori IgG 와 IgM에 대한 추적 검사를 하여 국내의 H. pylori 소아 유병율과 감염경로의 규명을 위한 연구가 필요하다고 생각된다.
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