Development of Allotriploid Embryos from Female Olive Flounder Paralichthys olivaceus Crossed with Male Starry Flounder Platichthys stellatus

(1)

628 Copyright © 2016 The Korean Society of Fisheries and Aquatic Science pISSN:0374-8111, eISSN:2287-8815

서 론

넙치

(Paralichthys olivaceus)

는한국

,

^일본^및^중국을^포함하 는동북아지방및중남미에서양식대상종으로각광받고있으 며

,

^{우리나라는}

2004

^년부터^{국립수산과학원}^{육종연구센터에} 서선발육종기법을통하여생산한

‘

^킹넙치

(KingNupchi)’

^를^어 민에게보급하고있다

(NFRDI, 2013).

넙치는성장이빠르고맛이좋은장점을가지고있으나비브 리오병

,

에드워드병등세균성질병과함께특히

,

스쿠티카섬모 충

(Philasterides dicentrarchi)

감염에매우취약하고

(Jin et al.,

2003),

^동절기에 ^성장이^느려지며^{저염분도의}^해수에서 ^종묘

생산및사육이어려운문제점을지니고있다

(Do et al., 2014).

강도다리

(Platichthys stellatus)

는가자미목

(Pleuronectiformes),

가자미과

(Pleuronectidae)

에속하는저서성어류로

,

한국을비

롯한일본

,

^{오호츠크해}

,

^{베링해에서}^{캘리포니아만에}^이르는^북 태평양의전해역에광범위하게분포한다

(Lim et al., 2007).

이 들은성장이넙치에비해느린단점을지니고있으나

,

^냉수성^어 종으로강한내병성및광염성등의특징을가지고있어우리

나라에서 양식생산량이점차증가되고있다

(Kim, 2012; Do

et al., 2014).

어류에서잡종유도는우량형질을가진두종간교배를통해 단기간내최소한의노력으로산업성획득형질인잡종강세를 얻기위해시도된다

(Kim et al., 1995).

이에따라국립수산과학 원에서는환경변화에강하고성장이빠른품종을개발하기위

해넙치와강도다리두종간의잡종을유도하여특허

(Korean

intellectual property office, 2006))

를출원한바있으나

,

이들

잡종은부화율이대조군에비해

20.0%

^정도로^보고된^바^있다

(Do et al. 2014).

그러나이러한잡종의낮은생존율은잡종

3

배

넙치(Paralichthys olivaceus)와 강도다리(Platichthys stellatus)간 유도된 잡종 3배체의 난발생

정효선·고민균·이효빈·김동수

¹

*

부경대학교 수산생물학과, ¹부경대학교 해양바이오신소재학과

Development of Allotriploid Embryos from

Female Olive Flounder Paralichthys olivaceus Crossed with Male Starry Flounder Platichthys stellatus

Hyo Sun Jung, Min Gyun Ko, Hyo Bin Lee and Dong Soo Kim

¹

*

Department of Fisheries Biology, Pukyong National University, Busan 48513, Korea

1

Department of Marine Bio-Materials & Aquaculture, Pukyong National University, Busan 48513, Korea

We investigated the characteristics and rate of development of allotriploid embryos derived from a cross between female olive flounder Paralichthys olivaceus and male starry flounder Platichthys stellatus . The allotriploidy was induced by cold shocking fertilized eggs three minutes post-fertilization at 3°C for 45 minutes. The average cellular DNA content of the allotriploid embryos was 2.06±0.03 pg/cell, which is equal to the sum of the cellular DNA content of a diploid olive flounder (1.42 pg/cell) and a haploid starry flounder (0.66 pg/haploid cell). The first cleavage, mid- blastula, gastrula and Kupffer's vesicle appearance stages of the allotriploid eggs began at 1.5, 8, 13 and 26 hours after cold shocking at 18°C, respectively. The developmental rate of allotriploid eggs was equivalent to that of diploid and triploid olive flounder eggs at 10, 14 and 18°C. However, the hatching times of allotriploid eggs, 7 h at 10°C, 5 h at 14°C and 4 h at 18°C, were earlier than those of diploid and triploid olive flounder.

Key words: Embryonic development, Allotriploid, Olive flounder

This is an Open Access article distributed under the terms of the Creative Commons Attribution Non-Commercial Licens (http://creativecommons.org/licenses/by-nc/3.0/) which permits unrestricted non-commercial use, distribution, and reproduction in any medium, provided the original work is properly cited.

http://dx.doi.org/10.5657/KFAS.2016.0628 Korean J Fish Aquat Sci 49(5) 628-634, October 2016

Received 30 June 2016; Revised 19 October 2016; Accepted 25 October 2016

*Corresponding author: Tel: +82. 51. 629. 5914 Fax: +82. 51. 629. 5908

E-mail address: [email protected]

(2)

체의유도에의해회복되는경향을보이는것으로보고되고있 다

(Piferrer et al., 2009).

이에본연구에서는두종간잡종

3

^배체의^양식^{대상종으로써} 가능성을알아보고자넙치암컷과강도다리수컷을이용하여 잡종

3

^배체를^{유도하였고}^이들의^난발생을^넙치의

2

^배체^및

3

배체와비교분석하였다

.

재료 및 방법

실험어

본연구에대조군으로사용된넙치

2

^배체와

3

^배체는^국립수산 과학원육종연구센터에서선발육종기법을통하여생산된킹넙 치

(KingNupchi)

^의^난과^{자성발생성}

2

^배체^킹넙치^수컷의^정자 를사용하였다

.

잡종

3

배체유도에사용된강도다리정자는거 제도의민간양식장과부산시남천동의수산시장에서구입한어 체중

400-600 g

^의^{강도다리를}^동^센터에서

1

^년간^사육한^후^이 중

6

마리를선별하여이들의정자를사용하였다

.

배수체 유도 및 분석

넙치의

3

배체및잡종

3

배체유도에사용된난과정자는

1

회 처리시암컷

6

^미로부터^{복부압박법으로}^확보된^난^중^난질이^우 수한

4

^미의^난과^{자성발생성}

2

^배체^킹넙치^수컷^및^강도다리^수 컷

3

미로부터채정한정자를모두섞어수정에사용하였으며

, 3

반복으로실험을수행하였다

.

^제

2

^극체^방출^억제를^위해

Kim et al. (1994)

방법에의거하여수정

3

분후

3℃

의온도조건하에 서

45

^분간^저온^처리를^하였다

.

배수체 분석은유세포 분석기

(flow cytometry)

^를 ^이용하여

DNA

함량을측정하였다

.

각 실험군의단일세포

(single cell)

를확보하기위해부화자어

3

^미를^균질기

(homogenizer)

^로^조 직을파쇄한뒤

nucleic extraction buffer (CyStain DNA 2 step;

Partec Co., Münster, Germany)

^에서^반응을^{수행하였고}

, DNA staining buffer (CyStain DNA 2 step; Partec Co., Münster, Germany)

로염색하였다

.

염색된시료들은

PA II flow cytom- etry (Partec Co., Münster, Germany)

^를^이용하여

DNA

^함량을 분석하였다

.

유도된넙치

3

배체및잡종

3

배체의

DNA

함량을 측정하기위해서넙치

2

^배체^부화자어^및^성체^{강도다리의}^꼬리 지느러미를대조군으로사용하였다

.

난발생 관찰

잡종

3

^배체의^난발생은

18±1℃

^의^수온에서^발생을^유도하

였고

,

해부현미경

(AZ100; Nikon Co., Japan)

과이에부착된디 지털카메라

(DS-Ril; Nikon Co., Tokyo, Japan)

^를^이용하여^관 찰과촬영을하였다

. Kimmel et al. (1995)

^및

Jung et al. (2015)

의난발생단계를기준으로관찰하였으며

,

저온처리가끝난시 기를

0

^시

(time 0)

^로^하여^수정란의

90%

^이상이^동일한^단계에 도달하는시기를기준으로각발생단계별소요시간과특징을

기록하였다

.

^수온별^넙치

2

^배체

, 3

^배체^및^잡종

3

^배체의^수온별 난발생속도를조사하기위해각실험군의수정란들을

10, 14

및

18℃

^의^{부화조에서}^발생을^{유도하였다}

.

결 과

배수체 분석

넙치

2

^배체

(0.71 pg/haploid cell; Animal genome size data-

base, 2016)

부화자어를대조군으로사용하여강도다리꼬리지

느러미

,

^넙치

3

^배체^부화자어^및^넙치와^강도다리^잡종

3

^배체^부 화자어의

DNA

^함량을^분석한^결과는

Fig. 1

^과^같다

.

^강도다리 꼬리지느러미의

DNA

함량은

1.32±0.06 pg/cell,

넙치

3

배체 부화자어는

2.14±0.03 pg/cell

^이었으며

,

^넙치와^강도다리^잡종

3

배체부화자어는

2.06±0.01 pg/cell

으로나타났다

.

잡종 3배체 난발생 및 자어 발달

잡종

3

^배체의^난발생^과정은

Fig. 2

^와^같다

.

^수정란은^구형이 며분리부성란으로난황과난막은무색투명하였다

.

저온처리 후

1.5

^시간에^첫 ^번째^난할

(cleavage)

^이^이루어져 ^배반

(blas-

todisc)

의중앙부위가수직으로이등분되어

2

세포기가되었고

(Fig. 2b),

^난할이^계속되어

2

^시간^후

4

^세포기

(Fig. 2c), 2.5

^시간 후

8

^세포기

(Fig. 2d), 3.3

^시간^후

16

^세포기

(Fig. 2e)

^가^되었다

.

계속적인난할이일어나저온처리후

8

시간에높고두꺼운형태 의배반엽

(blastoderm)

^을^형성하는^포배기^중기

(mid-blastula)

가되었다

(Fig. 2f).

저온처리후

12

시간에난황세포가돔형태 가되고배반엽이얇아지기시작하였고

(Fig. 2g), 13

^시간에^배 환

(germ ring)

^이^{형성되었으며}

(Fig. 2h), 14

^시간에^배방패

(em- bryonic shield)

가형성되었다

(Fig. 2i).

배반엽이식물극방향으 로계속확장되어저온처리후

18

^시간에

60%

^피포

(epiboly)

^가 형성되었고

(Fig. 2k), 22

시간에

90%

피포가형성되었다

(Fig.

2l). Kupffer’s vesicle

^은^저온처리^후

26

^시간부터^작은^크기로 관찰되기시작하여

30

^시간에^최대^크기로^{발생하였고}

, 35-36

시간에소멸되었으며

(Fig. 2m-2o), Kupffer’s vesicle

이소멸된 후꼬리가형성되기시작하여저온처리후

53

^시간에^부화하기 시작하였다

(Fig. 2p, 2q).

잡종

3

^배체^부화^자어의^형태적^특징을^관찰하기^위해^넙치

3

배체부화자어와비교한결과

,

^잡종

3

^배체는^넙치

3

^배체와^동 일하게입과항문은열려있지않았고

,

막지느러미

(primordial

finfold)

^의^위쪽과^아래쪽에^색소포

(chromatophores)

^가^관찰되 었다

(Fig. 2q, 2t).

잡종

3

배체자어의미부중앙부막지느러미 내색소포는점차발달하여부화

1

^일째^색소포는^그^크기^및^수 가증가하였고

(Fig. 2r),

^부화

2

^일째^{막지느러미의}^색소포는^더 넒은부위까지분화되어색소포띠를형성하는것으로관찰되 었다

(Fig. 2s).

^넙치

3

^배체^자어^역시^발생이^{진행될수록}^미부^중 앙부의막지느러미내색소포가발달하여색소포의분포가넓 어지면서색소포띠를형성하였으나

(Fig. 2u, 2v),

^이는^잡종

3

(3)

배체의색소포분포부위에비해좁은것으로관찰되었으며

,

그 크기및진하기역시작고

엹

^은^것으로^{관찰되었다}

. 수온별 난발생

잡종

3

^배체와^넙치

2

^배체^및

3

^배체의^수온별^난발생은

Table 1

^과^같다

.

잡종

3

^배체의^경우

,

^첫번째^난할이^{이루어지는}

2

^{세포기까지}

10℃

는저온처리후

4

시간

, 14℃

는

2

시간

, 18℃

는

1.5

시간이소 요되었고

,

^포배기^중기까지

10℃

^는^저온처리^후

15

^시간

, 14℃

는

10

시간

, 18℃

는

8

시간이소요되었다

.

배반엽이난황을감싸 는낭배기의경우

10℃

^는^저온처리^후

34

^시간

, 14℃

^는

17

^시간

, 18℃

^는

13

^시간에^{시작되었으며}

, Kupffer’s vesicle

^의^형성^및^소 멸은

10℃

는저온처리후

69

시간및

98

시간

, 14℃

는

35

시간및

53

^시간

, 18℃

^는

26

^시간^및

36

^시간에^{관찰되었다}

.

^넙치

3

^배체와

2

배체또한

3

가지의각온도조건에서잡종

3

배체와동일한시 기에난할

,

^포배기

,

^낭배기

, Kupffer’s vesicle

^형성^및^소멸의^발 생이관찰되었다

.

잡종

3

배체의최초부화는

10℃

는저온처리후

114

시간

, 14℃

는

75

^시간

, 18℃

^는

53

^시간에^{시작되었다}

.

^그러나^넙치

2

^배체와

3

배체는잡종

3

배체보다각온도조건에따라최소

2

시간에서

최대

7

^시간^늦게^부화하기^시작하여

, 10℃

^는

121

^시간

, 14℃

^는

80

^시간

, 18℃

^는

55

^시간에^최초의^부화가^{관찰되었다}

.

고 찰

생물은고유한

DNA

^양을^가지고^있어^이를^{측정함으로써}^단

시간에종고유의특성을분석하는데유용하게사용될수있다

(Byrappa, 2003).

^{일반적으로}

3

^배체는^모계

2n DNA

^함량과^부 계

n DNA

함량을가지게된다

(He et al., 2013).

본연구에서도 잡종

3

^배체는^넙치

2n DNA

^함량과^강도다리

n DNA

^함량을^가 지고있는것으로확인되었으며

,

^넙치

3

^배체는^넙치

n DNA

^함

량의약

3

^배의

DNA

^함량을^가지고^있는^것으로^{확인되었다}

.

저온처리후잡종

3

^배체^수정란을

18±1℃

^수온에서^난발생

을유도관찰한결과

, 1.5

시간후에난할기

(cleavage period)

가 시작되어

8

^시간^후에^중기^포배기

(mid-blastula period), 13

^시간 후에낭배기

(gastrula period), 26

^시간^후에

Kupffer’s vesicle

^이 형성되는것으로관찰되었다

(Fig 2a-2p).

^이들^{난할기에서}^분할 기에이르는잡종

3

^배체의^난발생은^넙치

3

^배체와^유사한^형태 로발생이진행되었으며

,

그발생시간또한동일한것으로확

인되었다

(Table 1).

^{강도다리와}^넙치^잡종은^{부화시기를}^제외

한난발생시기가모계로사용된넙치와동일하게나타나는것 으로보고된바있어

(Do et al., 2014),

^모계로^사용된^넙치^형질 의영향으로넙치

3

^배체와^잡종

3

^배체가^동일한^시기에^발생하 는것으로보여진다

.

잡종

3

^배체^난발생^과정^중^초기^난할기에^{이형적으로}^할구

(blastomere)

^가^형성되어

3

^세포기가^{관찰되었다}

.

^그러나^이는

You et al. (2001)

^와

Zhu et al. (2006)

^가^넙치

3

^배체의^초기^난할 기에

3

^세포기^또는

5

^세포기의^이형적^할구가^형성되는^개체가 있음을보고한바있어

,

본연구에서관찰된이형적인난할현상 은잡종유도에의한결과가아닌

3

^배체^{유도과정에서}^확인될 수있는기형적발생인것으로판단된다

.

잡종

3

^배체는^넙치

3

^배체와^유사한^형태^및^속도로^난발생이 진행되었으나

,

^부화^시간^및^{부화자어의}^형태에서^차이가^나는 Fig. 1. Flow cytometric histograms of DNA contents of diploid (a)

and triploid(c) of olive flounder Paralichthys olivaceus and hybrid (b) and allotriploid (d) of female olive flounder and male starry flounder Platichthys stellatus.

(4)

것으로확인되었다

(Table 1, Fig. 2).

^넙치

3

^배체는

18±1℃

^수 온에서

55

^시간째에^최초^부화가^{시작되었으나}

,

^잡종

3

^배체는

53

^시간째에^최초의^부화가^관찰되어^잡종

3

^배체의^부화가

2

^시

간이빠른것으로확인되었다

(Table 1).

^이는^동일^{수온조건에} Fig. 2. External morphology of the egg development stages (a-p) of the allotriploid of female olive flounder Paralichthys olivaceus and male starry flounder Platichthys stellatus, and yolk-sac larvae of the allotriploid (q-s) and triploid olive flounder (t-v). a: Blastodisc formed. b: 2 cell stage, 1.5 h. c: 4 cell stage, 2.0 h. d: 8 cell stage, 2.5 h. e: 16 cell stage, 3.3 h. f: midblastrula stage, 8 h. g: 30% epliboly stage, 12 h. h:

germ ring stage, 13 h. i: embryonic shield stage, 14 h. j: 40-45% epiboly stage, 16 h. k: 60% epiboly stage, 18 h. l: 90-95% epiboly stage, 22 h. m: Kupffer's vesicle appearance, 26 h. n: Kupffer's vesicle stage, 30 h. o: Kupffer's vesicle disappearance, 35-36 h. p: pre-hatching, 53 h.

q: hatched larva of allotriploid. r: yolk-sac larva of allotriploid, 1 day after hatching. s: yolk-sac larva of allotriploid, 2 days after hatching.

t: hatched larva of triploid. u: yolk-sac larva of triploid, 1 day after hatching. v: yolk-sac larva of triploid, 2 days after hatching. Arrows:

chromatophores. All scale bars indicate 200 μm.

(5)

서강도다리가넙치보다부화시기가빠른것으로보고된바있 어

(Do et al., 2014),

^잡종

3

^배체는^강도다리^형질의^영향으로^넙 치

3

배체보다이른시간에부화한것으로판단된다

.

잡종

3

^배체와^넙치

3

^배체^{부화자어는}^{막지느러미}^내^색소포 의위치및분포범위에서뚜렷한차이가나는것으로관찰되었 다

.

잡종

3

배체와넙치

3

배체부화자어모두미부중앙부막지 느러미위쪽과아래쪽에색소포띠가관찰되었으나

,

^잡종

3

^배 체가넙치

3

배체에비하여분포범위가넓고진한것으로확인 되었다

(Fig. 2q-2v). Byun et al. (2007)

^은^강도다리^자어의^색 소포가별모양및나뭇가지모양으로생성되어점차몸의전면 에발달한다고보고한바있다

.

이에잡종

3

배체와넙치

3

배체 의색소포분포차이는부계로사용된강도다리의영향에기인 한것으로보여진다

.

어류의발생에서수온은성장및생존에영향을미치는중요 한요인중하나로각어종은생태적인특징에따라적정수온을 가지게되며

,

적정수온범위내에서수온이높아질수록발생속

도는빨라지게된다

(Rana, 1990).

^{강도다리는}^냉수성^어종으로

적정수온은

13-18℃

이고

(NFRDI, 2009),

넙치는온수성어종 으로적정수온은

10-24℃

^인

(NFRDI, 2006)

^것으로^보고되고 있다

.

^이에^잡종

3

^배체의^적정^수온범위^및^수온별^난발생^속도 를확인하고자대조군으로넙치

2

배체와

3

배체를사용하여

10, 14

^및

18℃

^에서^발생을^{비교하였다}

.

^그^결과

3

^가지^수온^모두 에서잡종

3

배체는정상적으로발생하는것으로확인되었고

, 18℃

^{발생결과와}^동일하게^잡종

3

^배체는

10℃

^와

14℃

^에서도 난할기

,

^포배기

,

^낭배기^및^분할기에^이르는^난발생^단계에서^넙 치

2

배체및

3

배체와동일한속도로발생하는것으로관찰되었 다

.

^그러나

You et al. (2001)

^은^넙치

2

^배체의^발생이^난할기에

3

배체보다조금빠른것으로확인되나

,

발생이진행될수록동일 한속도로발생되며동일한시기에부화한다고보고한바있다

.

이는

3

배체의발생을저온처리전수정시기부터관찰하여초 기난할기에

3

^배체가

2

^배체보다^발생이^느리게^관찰된^것으로 서저온처리직후를발생시작시점으로관찰한본연구와는발 생관찰시작시점차이에의해동일한관찰결과를다르게분석 한것으로판단된다

.

^그러나^무지개^송어

3

^배체를^비롯한^어류 에서유도된

3

배체난은일반적으로

2

배체에비하여발생이빠 르게진행되어부화시간이단축되는것으로이미보고된바있 다

(Thorgaard, 1986).

잡종

3

^배체의^부화는

18℃

^발생에서^관찰된^것과^동일하게

10℃

^및

14℃

^에서도^넙치

3

^배체보다

5

^시간^및

2

^시간^빨리^부 화하는것으로관찰되어

,

수온이낮을수록그부화시간의차이 가커지는것으로확인되었다

(Table 1).

^{강도다리는}

10.5℃

^에 서수정후

110

시간에최초의부화되는것으로보고된바있고

(Orcutt, 1950),

^본^연구^결과에서

10℃

^에서^넙치

2

^배체가^수정

121

^시간^후에^부화되는^것으로^{확인됨으로써}

,

^잡종

3

^배체는^친 어로사용된강도다리와넙치의중간형질을띄게되어

10℃

에 서

114

^시간에^부화한^것으로^판단된다

.

일반적으로잡종의형질은대부분친어로사용된두종의중 간형질을나타내는것으로보고되고있다

(Garrett, 2005). Ya- mashita et al. (2014)

^는^{강도다리와} ^돌가자미

(Kareius bicol-

oratus)

의잡종유도시두종의중간형질을나타내는것으로확

인한바있으며

, Do et al.(2014)

^는^넙치와^강도다리^잡종^또한 친어로사용된두종의중간형질을나타낸다고보고한바있다

.

반면에잡종

3

^배체는^친어로^사용된^두^종의^중간^형질을^나타 내지만모계의형질이더많이나타나는것으로보고되고있다

. Hu et al. (2012)

는

M. amblycephala

와

Xenocypris davidi

의 잡종

3

^배체를^유도한^결과^두^종의^중간^형질을^가지지만^모계 의특징에가까운것으로보고한바있고

, Park (1992)

는미꾸리

(Misgurnus anguillicaudatus)

와미꾸라지

(M. mizolepis)

잡종 Table 1. Embryonic development of diploid olive flounder Paralichthys olivaceus, triploid olive flounder and allotriploid of female starry flounder Platichthys stellatus and male starry flounder at different water temperatures

Experimental Fish

Water temperature

(℃)

Development stages

Cleavage blastula Gastrula Segmentation

hatching 2 cell 8 cell 32 cell Mid-blastula Germring 80-90%

epiboly Kupffer's vesicle

apearance Kupffer's vesicle disapearance Diploid

10 4 h 6 h 9 h 15 h 34 h 52 h 69 h 98 h 121 h

14 2 h 4 h 6 h 10 h 17 h 27 h 35 h 53 h 80 h

18 1.5 h 2.5 h 4 h 8 h 13 h 21 h 26 h 36 h 55 h

Triploid

10 4 h 6 h 9 h 15 h 34 h 52 h 69 h 98 h 121 h

14 2 h 4 h 6 h 10 h 17 h 27 h 35 h 53 h 80 h

18 1.5 h 2.5 h 4 h 8 h 13 h 21 h 26 h 36 h 55 h

Allotriploid

10 4 h 6 h 9 h 15 h 34 h 52 h 69 h 98 h 114 h

14 2 h 4 h 6 h 10 h 17 h 27 h 35 h 53 h 75 h

18 1.5 h 2.5 h 4 h 8 h 13 h 21 h 26 h 36 h 53 h

(6)

3

^배체는^모계로^사용된^미꾸리에^가까운^중간^형질을^가지는^것 으로보고한바있다

.

본연구의넙치와강도다리잡종

3

배체는 수정란은모계로사용된넙치의형태를가지지만

,

^{부화자어는} 부계로사용된강도다리에가까운중간형질을나타내는것으로 확인되었다

.

^또한^난발생^속도의^경우^넙치와^동일한^난발생^속 도를가지는것으로나타났으나

,

^최초^{부화시간은}^{강도다리와} 넙치의중간형질을나타내는것으로확인되었다

.

이에잡종

3

배체는넙치와강도다리의중간형질을띄는것으로확인되지 만

,

기존보고와동일하게모계에가까운중간형질을가지는지 여부를확인하기위해서는자치어의성장및성체의형태및습 성에대한추가적인연구가필요할것으로보인다

.

넙치와강도다리잡종

3

배체의정상적인발생및생존가능성 은확인되었으나산업적가능성을판단하기위해서는성장력

,

생식력

,

성비및친어로사용된두종의우량형질획득유무분 석등에대한추가적인연구가필요하며

,

^잡종

3

^배체의^생산력 증대를위해연중산란이가능한넙치와달리

3

^월

-6

^월까지만^확 보가능한강도다리정자의냉동보존등의연구가추가적으로 이루어져야할것이다

.

사 사

본 연구는 농림축산식품부

·

^{해양수산부}

·

^{농촌진흥청}

·

^산림청

의지원과제수출용킹넙치배수체종자개발

(

과제번호

213004-

04-4-SB220)

^에^의해^{수행되었습니다}

.

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