대한엄상영리사회지
:
제 7 권 제 1 호1975
광 전 l:l l 색 계 에 의 한 Cephalin Cholesterol Floccula tion
검사의 1 시간 방법
국립원호뱅원 임상벙러과
리
서 론
칸 세포 손상과 괴사에서 볼 수 있는 생화학적 변화 는 혈청 감마구로부린 (Gamma globulin) 의 증가, 알 파
1
그료부련 (Alphal1 Globulin) ,
알부만(Albumin)
및 뮤코 푸로테 안 (M ucoproteins.) 의 감소와 같은 단백 합성의 변화로 나타날 수 있다. 이러한 혈청 단백의 변화는 전기 영동 (Electrophoretically) 에 의해 서 측정 될 수 있£벽 이는C.C.F.
검사에 이상적인 결과를 일 S키는 근본이다. 혈청내의 효소 측정이나 혈청 단백 의 전기영동법파 같은 간 손상을 조사하기 위한 어떤 민감하고 더욱 복잡한 방법으로 더욱더 득이성이 있는 Data를 얻을 수도 있지만 최근 문헌을 보연 아직도C.C.F.
검사가 자주 이용되는 방볍오로지적되어 있다.4시간의
C.C.F.
방법은 과거에 보고되었는데 이는 Hanger의 48시 간엽 과 동등한 것 으로 보고되 어 있 다.그러으로 이벤 연구에 있어서 하루에 약 100 명의 환자 혈청우루 신속한 1시간 방법을 적용하여 이 방법의 이 용도를 뒷받침하기 위해 약간의 Data를 비교해 보았다.
재료 및 방법
렬청은 시험하기 전에 만듯이 실온에 보관하여야 한 다. 헐청을 냉장고나 냉동기에 보판해서는 않되며 그 이유는 잘뭇된 결과를 보알 수 있기 해문이다.
시 약
Stock cephalin cholesterol antigen
시판되는 제품은 대개 건조된 가루로 되어 있다. 설 명서 에 지시된 되로 Ether후 용해시 켜서 쓰는데
1unit
에 대하여 먼저
1. 5ml
정도의 Ether를 넣어서 용해시 킨다. 눈금이 든 10ml짜리 마개가 있는 Cylinder에 옮 겨 담고 다시 비 슷한 량의 Ether로 두세 벤 분말을 완전 히 용해시키고 부셔서 Cylinder 에 옮기고 천체량이 정정 오 「
확히 5ml가 되도록 조철한 후 마개를 단단히 막아 냉 장고에 보관한다.
Working
emulsion을 만들기 위 하여 일정 량썩 쓰고 난 후에는 액층의 높이를 표시하여 보판도중 증발한 Ether는 표시 된 눈금까지 보충하여 사용한마.Working
emulsion저| 법50ml짜리
Wide mouth test
tube 에 증류수 30ml릎 담고 그 높이 를 금그어 둔다. 5ml의 증류수를 더 낼 고 가열 하여 65 ,..., 700C가 되 면Stock Antigen
1ml를 한방울썩 천천히 잘 저어가면셔 가한다. 다시 강열한 불꽃위에셔 가열하여30ml
눈금까지 증발시킨다. 실온 에서 식힌 다음 냉장고에 보판하면 1""'2주일간는 사용 할수있다.검사방법
1.
원 침 관(Centrifuge tube)
2개 에 U와 C의 표새 를한다.2.
U판에0.9% Saline 4.0ml
환자 헐청0.2mL
흔합.
3.
C관에0.9% Saline 4.2m l.
4.
U와 C판에C.C.F
시약1.
Oml썩 넣고 거꾸로(Inversion)
하면 서 혼합.5.
U와 C판을 4-100C의 냉 장고에 넣 고 정 확히I
시간처리.
6.
C판은 실온에 조용히 세워두고 U판은 10분간 2000rpm으로 원침.
7.
U관의 상층액을 침사에 손살이 없게 가능한 많 이 Pipet블 써서 제거한다.8.
U판에Saline 5.
Oml를 넣 고 마개 를 한다음 거 꾸 로 하면서 흔합한다. 이해 C판도 같은 방법오로 흔합 한다.※ 이검체는 측정시까지 30분간은 실온에 안정하다.
9.
Spectrophotometer의 파장 415nm 에 서 증류수를 Blank로 하여 흡광도를 읽 는다.- 7 3 -
계산
-L U-판판-격-의--흡 흡-광과-도 투?- X 100= % Flocculation
Flocculation % Report
0-20 Nagative
21-40 1+
41+60 2+
61-80 3+
81-100 4+
결과 및 고찰
500명의 환자 혈청£로 4시간 및 1시간 법에서 얻은 결과를 종합하여 비교하였더니 아래와 같았다.
Result
1시간검사 f 4시간검사
(Flocculation unit)
0-2+ 381 384
3-4+ 119 116
벌 의의가 없는 범위
(0-2+
)로부터 양성 또는 의 의가 있는 범위(빠~빼)로의 변화는 단지 3개의 혈청 에서만 일어났다.No. j 1시 간 검 사 r 4시 간 검 사
1 } 3+ I 1+
2 I 3+ I 2+
3
r3+ 2+
Hanger의 48시간법과 4시간 법에 의해서 얻어진 결 과의 비교는 과거에 보고되었다. 이들의 결과에서는
2
+
이상에서만 의의가 있는 것£로 간주되었다. 그럼 A로 이 한시간 냉동법에 의해서 얻어진 결과도 같은 방법으로 해석할 수 있다. 1시간법과 4시간법에서 얻 어진 결과블 보면 일치하는 률이 대단히 우수하다.Complete r Disagreement I Disagreement 2 Agreement I 1 unit I or more units
86. 8 I 13. 0 I O. 2 2 Flocculation unit
이 상 변화를 일오킨 것 은 단지0.2%
뿐이였고1 Floccutation unit
만큼 차이가 나는 것응 주로 의의가 없는 변화였다.더욱 만감한 헐청검사(효소 측정과 천기영동)에 있 어서의 변화가 의의가 없을혜 일지라도 칸 세포 손상 외 감벌에 있어서
C.C.F.
검사가 가치가 있음을Casey
는 보고하였다.
1800 명 에 서 신속한 1시 간 방법 을 포함한 26종의 갖 가지 화학반응을 분석 한 결과 감마쿠로부란 알파
1
구 로부란 버리루빈 알차라인 포스파데스 류신 아마노 펠 티데스 및 쿠루코스 사이에 직접적안 판련이 있는 것£로 나타났으며 코레스토롤 알부만 베타 쿠로부란 아 미 레 스 칼숨 유레 아나이 트로젠과는 역 관계 로 나타났다.
심한 간 침해가 있는 전염성 단핵쿠 증가증에 있어
서
SGOT
알카란포스파데스 빛 바리루반이 정상4로돌아간 후에도
C.C.F.
검사가 지속된다는 보고도 있다.간 질환에 있어서 혈청 얄부만은 감소될 수 있우며 반 면에 감마 쿠로부련은 증가된다. 그러고 이 단백질의 변화는
Flocculatlon
test 에 있 어 서 양성 반응에 관계 된 다고 생각된다.간과 전 염 성 인자에 의 한
Hyper globuline
mia를 일 i키 는 질 환과Flocculation test
양성 과의 판계 는 찰알려져 있는 사실이며 간염, 간경화증 및 만성울혈
(Chronic pa ssive
congestion) 은 이 상적 안 간-단백 합 성 혜 문에Flöcculation
양성 을 나타내 고 반면 에 전염 성 질환에 있어서는 순환하는 감마구로부란(항체)의 증가로부터 양성 반응을 나타낸다.간경화증에 있어셔는 혈청 만벡의 전치영등상이 얼 정하지 않지만
C.C.F.
Test는 계속되는 간 세포 손상 의 정도에 짜리-서50%
이상에서 계속 의의가 있다.만약에 현청을 검사하치 전에 냉장고에 두면 위양성이 나타날 수 있 고
Coldprecipitate
protein 파 이 러 한 。1 상 결파 사이의 판계가 생각되어야 한다. 냉소에서 침 천하는 경 향응 감마쿠로부런의 득정 이 며 마찬가지 로Cryo
globulin파 하이 펴 구로부란 내 마 아Hyper glo-
bulinemia) 도
C.C.F.
Test에 판계 가 되 는데 이 들은 어떤 간 질환에서는 함께 나타난다. 이 신속한 1시간 법에서는 비리루빈과 Lipid는 별문제가 되지 않는다.왜냐하면 판독하기전에 제거되기 해문이다. 또한 육안 으로 판독하는데 있어저 뿐만 아니랴 다른 방해안자들 로부터 생각할 수 있는 가능한 오차를 제거한다.
참고문헌
1) Charles R., Ratliff , Ph. D. FACG Phillip E. , Warren , B S MT (ASCP) , Albert E Ca sey , MD : Am J
Gastroeη trol55. 589 1971.
2) John D Bauer , Philip G Ackermann , Gelson toro: Clinical laboratory methods 8 ed. Mosby CO Saint Louis 1974.
3)
이 삼열:
임상벙리 검사법 제 3 판 연세대학 출판 부 서 울.p 213 , 1972.
A
4 I