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1대한엄상뱅리사회지 : 제 7 권 제 l 호， 1975

Pa panicolaou

쏠山 福 音 病 院 (指導:李 重 達)

훌R 基相·尹決亨

序 論

組織學的 및 細脫學的 檢곁f課程에 있 어 서 檢좁物의 휩定이 第一 첫 段階로 始fF된다고 할수있다. 그 다음

의 複雜한 여 러 操作을 거 쳐 梁色課程을 마침 ￡로서 -連의 標本製作 課程이 끝나는 것 이 다. 이 〕連의 標 本製作課程을 昭究하여 經濟的이 고 j표速하게 , 나아가 서는 이 課程을 簡素化 시키는것은 이 分野에 從事하 는 사람듣에게 큰 도움을 준다고 生覺한다.

脫落細 9힘의 固定과 梁色에 對한 義意는 우리 들이 。l 미 잔 알고 있다. 現在 우리들은 組成。] 서료 相異한

Papanicolaou 梁色波을 各 臨皮檢홈室에 서 使用하고

있 다. 이 梁色波의 組成의 差異로 오는 制離細뼈의 梁 色↑生도 서로 다르러리-고 생각한 저자들은 各梁色滾의 組成의 差異를 檢討하고 各梁色滾에 依한 制離細뼈의 梁色↑生을 比較 觀察함으로서 가장 흘륭한 梁色法이 라 고 生覺되는 方法을 여기에 報告하는 바이다.

試驗方法

가) 固定;홉에 對한 檢討

固定被으혹서 는 Papan.icolaou 에 依해 紹介된 Ether-

•Alcohol 等量滾을 비 룻하여 다음의 固定波들이 市飯되

벼 使用되고 었다.

Ether-Alcohol Mixture Acetone

Methanol Ethanol(95%) Isopropy 1 Alcohol 10% Formalin Cytospray

이들중 저자들이 檢討한 固定波은 Papanicolaou의 Ether-alcohol 等量 混合被， 95% Ethyl alcohol, 10%

Formalin 그러 고 Cytospray等이 다. 同一 愚者로부터 採取한 睡 뚫技標本을 여 러 장 만들어 同時에 上記의 固

定被에 固定하였 다. 그리 고 固定펀 옳技標本을 같은 條件으로 梁色하여 현마경적 檢흉를 實施하고 各 固定 被의 差異에 起因한 梁色性의 差異를 料明하였다.

各 固定滾에 依한 梁色性의 比較

Slide 1. Ether-alcohol 固定에 依한 梁色標本

" 2. 95 % Alcohol 에 ” ”

" 3. 10% Formalin에 " "

Slide 4. Cytospray 固 定에 依한 梁色標本 (Slide 없음)

Slide 1-4에 서 보는바와 같이 固定效果에 있 어 셔 는 별 差異블 發見할 수 없 었 다. Ether-alcohol 混合滾의 使用을 禁하는것 은 아니 나 이 固定波은 火씻↑生이 고 高 價안 缺點이있다. 손쉽게 구할수 있고 安定하며 도 보 다 값이 싼 95% Ethyl-alcohol 이 固定波으로 適當하다 고 著者들은 生覺한다. 한펀 集團檢該用으록는 固定派 을 많이 準備하는 煩雜性을 피 하고 固定俠의 運搬等의 不便을 덜기 寫하여 Spray法이 便利한 固定法이리-고 生覺되어진다.

그리고 略俠， 體被等의 多量을 寫한 固定에는 10%

Formalin滅을 미 리 準備하였 다가 被檢波파 1 : 1의 比率 로 混合固定한 다음 smear하는것 이 좋다고 생 각된다.

Slide 1

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Slide 2

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Slide 3

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용‘

나) 梁色滾에 對한 梁色性으l 檢討

Papanicolaou 梁色法이 높이 許憶되는 點은 1. 透微↑生이 좋커 폐문에 어느정도 두껍게 f옳妹되어 도 各細 R힘들의 觀察。1 容易한데 셨고.

2. 梁色{生。1 多樣하여 各鐘 細 5힘들의 細뾰質융 잘 分 別梁色하여 준다. Superflc:al cell, Intermed:ate cell, Parabasal cell, 、및 Ea<:al cell等의 細뼈가 各己 그 細

R힘質 梁色怪을 달리 하고 그 區別이 容易하다.

陸 f옳技標本의 경 우 上記 細§힘들의 細R힘質의 梁色{生 이 다르게 나타나71 해문에 Cytohormonal study에 Papanicolaou梁色法은 매 우 좋은 梁色法이 다.

1. 梁色滾의 邊度에 對한 檢討

Papanicolaou 梁色은 核梁色과 細脫質 梁色 ò 료 區分 할수있 마. 核梁色으로서 Hematoxylin 梁色은 그 梁色 에 所몇되 는 時間， Hcl alcohol 및 Ammonia water 等의 處理에 숙달되면 이 核梁色은 어렵지 않고 그러 고 核梁色의 差異는 벨로 나타나지 않는다. 細뼈質의 梁色課程에는 먼저 OG-6블 梁色한 다음， EA-36(또는 EA-65) 에 梁色한다. OG-6 에 梁色되었든 細뼈質이 마 음 課程에서 脫色되어 나타나지 않는 境遇가 있고， 또 EA (Eosin -Azure) 溶滅에 는 36， 50， 65等 그 組成에 差異 가 있으며 같은 먼호에도 그 組成灌度가 셔루 다르다.

따리-서 Papanicolaou 梁色法의 위 표에 서 보는바와 같 이 EA-65의 境遇 그 各 梁色試藥의 、農度가 Gradwhol

파 Papanicolaou의 組成은 같았우나 이삼열의 경우는 1/2量으효 적 게 함유되 어 있 었 마. 그러 고 EA-36 (50) 의 境遇는 Koss와 Lynch等의 處方이 같은만연 Grah- am, 小酒井， 이삼열의 處方파는 各各 그 含量이 다르 다. 또 Gradwhol의 Papanicolaou 梁色 變法 따 Pharr

等의 法은 Bismark brown을 전혀 넣지 않았다. 그러 고 Koss와 이삼열은 精度管理를 寫하여 AFIP 와 日本 의 11頂天堂大學 敎室에 서 는 까다로운 EA溶滾을 自 빨하 여 使用하는것 보다 Ortho會社의 製品을 권하고 있다.

이와같이 細脫質의 梁色은 어렵고 이의 精度管理가 곤 란항을 알수있다. 여러 著者들에 依한 EA策色滾의 i農 度를 比較하면 다음파 같다 ((Table 2 참조) .

EA-36은 健逢妹標本의 梁色을 寫해 셔 EA-65는 體 波쏠妹標*等의 梁色을 寫해 권장하고 있 다. Papanic- olaou, Gradwhol _{等은 뽑파 體波 途妹標本의 區別없}

이 EA-65 만을 紹介하였고 Graham은 EA-36 만을 紹 介 하였다.

Table 2. Concentrati.on of EA working soluti.on for papanicolaou stain

꿇싫는심펴r맏펀펄밸빨f펀띈띈빨r밸띈텍rt쓸t뎌tj繼:웠랬魔E혈靈?혈靈鐵鐵魔鋼z뚫魔鐵魔魔5헬隱魔鋼魔링혔麗隱魔總E$댐합魔z강양빨;?뀐aoωu맘{L。이1 삼캡싫꽤열넬꽤

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Pharr et, al.

0.26%

0.00

0.52

考 案

우아한 Par:anicolaou 梁色은 Hematoxylin의 梁色 에 依한 核物質 分別。1 찰되 어 야 한다.

그러 나 Hematoxylin은 Papanicolaou 梁色에 서 그 含量이 各 處方마다 同一하고 그 梁色課程이 簡便하다.

따리-서 特記할만한 기 술을 必要로 하지 아니 한다. 한 펀 Papanicolaou梁色의 特{生이 라고 할수있 는 多樣한 梁色↑生은 細脫質에서 觀察된다. 위에서 본바와같이 細 臨質을 梁色하는 梁料는 Eosin, Orange G, Light green, _및 Bismark brown 等이 다. 이 梁料들이 適當 하게 配合되 어 細뼈質을 梁色하는데 各 梁料들이 選擇 的으로 細뼈質을 梁色한다. ^.Þ1P 細뼈의 種類에 짜다 그 細뼈質의 集色이 相異하다 偏平上많의 Basal & Para- basal cell들과 같은 未成熟細 R힘들은 Light green 에 著 色되 어 그 細脫質이 푸료게 나타난다. 偏平上皮의 Int- ermediate cell과 같은 中間段階의 成熟細뼈들은 Light green 에 微弱하게 梁色되 는 反面 Eosin Y 에 梁色되 어 장마 색 으로 나타나고 偏平上皮의 Superficial cell파 같 은 成熟한 細脫의 細뼈質은 Bismark brown 및 Orange G 에 梁色되 어 갈색 내 지 鐘色으로 나타난다.

위의 서로 다른 處方에 依한 細脫質梁色波을-製造하 여 著者들이 梁色을 實施하였든바 Bismark brown이나 EosinY는 그 量이 大同小異하고梁色住에 있어서도큰 差異가 相互間에 없 었 다. 이 와 反對료 Light green梁 色에 많은 差異를 ?나타내 였 다. Light green의 含量。1 많은 梁色波 일일수록 梁色操作이 煩雜하였다. 著者들 은 이 點 留意하여 Light green의 量을 낮거1 한 處方을 考察해보았다. 또한 著者들은 OG-6에 梁色된 細뼈質 이 Alcohol을 通過하는 동안 脫色됨을 알았다. 前述한 바와같이 成熟의 程度에 짜라 各 細 R힘들의 細뼈質이 混 合된 色素에 選擇的으로 梁色띈다는 事實을 觀察하였 다. 짜리-셔 著者들은 OG-6와 EA-65를 混合해 서 梁色 을 試圖했다. 여 러 處方에 依한 混合波으료 梁色하여 본 결과 다음과 같은 處方이 가장 이상적이었음을 著 者들은 觀察할수가 있 었 다.

結 論

著者들은 該斷細 8包學的 檢흉物의 여 러 固定滾파 박 리 細R힘들의 細뼈質 榮色滾에 對한 檢討를 實施하고 다음과 같은 結論을 얻었다.

1. 뽑 및 口院 쫓技標本의 固定滾오로셔는 普通 市 飯되는 95% Ethyl-Alcohol 이 가장 理想的이다. 體滾，

小便 및 Q客俠의 固定에 는 10% Formalina 에 먼저 固 定 保存하는것 이 좋았다.

2. 脫落細뼈들의 細脫質을 梁色하는 Orange-G와 EA溶滾을 混合하여 梁色하여도 榮色↑生에 差異가 없다.

3. Orange G와 EA混合滾의 處方을 考案하였고 이

混合波의 使用으로 因한 長點을 檢討한바 조작이 간펀 하고 經濟的이 였 다. 다음에 考案된 處方과 操作法을紹 介한다.

PAPANCOLAOU 염색의 복음 변법

Reagent 1) Harris Hematoxylin

2) OG-EA mixture for Papanicolaou stain Mixture A.

Light green O.Olgm

Bismark brown O. 02 Eosin Y

Orange G Distilled water 95% Ethyl alcohol

m

m

m , M g

딛

O O 2 2

|

j

μ

nU nU

O O

1 ‘

9 Phosphotungstic acid 1. 0 gm Mixture B.

OG-6 solution 1 part

EA-65 solution 1 part

OG-6와 EA-65는 Fapanicolaou윈 법 의 처 방에 의 한 것 이 다. 상기 A. B. mixture증 어 느 하나를 택 해 서 사용 한다.

Staining procedure using

OG一EA mixture

1. 80%, 70%, 50, % Ethyl alcohol each 5 dips

2. Distilled water 5 "

3. Harris Hema toxy lin 6 min

4. Distilled water 5 dips

5. 0.5% HCl in 75% alcohol 2-3"

6. Tap v; a~er 5 "

7. 50%, 70%, 80%, 95% Alcohol each 5"

8. OG-EA mixture 8 min

9. 95% Alcohol 5 dips

10. 95% Alcohol 5 "

11. Absolute alcohol 5 "

12. Xy lene 1. 2. 3. each 5 ^11' 13. Balsam mounting

REFERENCE

1) Par;.anicolaou : Atlas of Exfoliatizαytology.

2) Grah^2.m: Cytologic diagnosis of caηcer.

3) AFIP. ; Maημal of Histologic methods of Arm^‘ ed forces 1ηstitzιte of Pathology.

4) GradwhoL : Clinical laboratory method ^aηd di-

agη OSlS.

5) Lynch : Medical laboratory technology.

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