(2) 육안검사
① 장기 및 질환에 따른 육안검사 계획 수립
② 절제된 조직 검체의 크기, 무게 등 수치를 측정한다. 이때 조직 의뢰서에 기술된 내용과 상이할 경우 즉시 의뢰한 곳에 연락을 취한다.
③ 절제된조직검체의겉모양및병리학적병변에대한육안소견기술(녹음후전사혹은메모한후서술함)
④ 육안 사진 촬영(필요한 경우)
⑤ 작은 검체(펀치 생검 등)는 렌즈페이퍼에 해당 레이블과 함께 싸서 조직 캡슐이나 카세트에 넣어 분실 및 손상을 방지한다.
⑥ 보다 큰 검체는 연속 절제 하에 절단면을 검사하고 병변 부위의 조직 절편을 채취한다. 병변이 육안 으로 확인되지 않는 경우 가장 의심되는 곳에서 조직 절편을 채취하거나 작은 조직은 조직 전체를 연속 절편으로 카세트에 넣는다.
⑦ 검체의 방향 혹은 절연면을 확인해야 할 경우 인디아 잉크로 방향표기
⑧ 채취한 절편을 파라핀 침투 과정을 위하여 병리번호가 표기된 카세트에 넣어 포르말린 용기에 보관
⑨ 카세트에 병리번호 표시 및 카세트 개수 확인 (3) 파라핀 침투 과정
① 자동 침투기의 첫 단계를 10% 중성 포르말린(Neutral buffered formalin) 용액으로 하여 육안 절편 된 조직을 마지막으로 한 번 더 고정시킨다.
② 탈수 과정은 70% 에탄올 - 80% 에탄올 - 95% 에탄올 - 100% 에탄올 과정을 거친다.
③ 투명 과정은 자일렌(또는 Histo-clear)으로 4단계를 거친다.
④ 마지막은 파라핀 침투 단계로서 60℃가 유지되도록 하여야 한다.
⑤ 검체 조직 처리양과 시약 교체 시기를 기록지에 매일 표시하여 시약을 제때에 갈아 주어야 파라핀이 조직 내로 침투가 잘 되어 박절 과정에서 어려움이 없다.
(4) 포매 과정
① 파라핀이 침투된 조직을 박절이 용이하게 파라핀으로 카세트 블록을 만든다.
② 병소 부위를 하향되도록 포매한다.
③ 내시경 조직은 포매용 핀셋으로 한 번에 여러 개를 잡지 말고 한 개씩 최소한 거리를 두고 포매한다.
④ 다른 파라핀 블록에 조직 부스러기가 오염되지 않도록 포매용 핀셋 끝 부분을 열을 가하여 털어준다.
(5) 박절 과정
① 2~4㎛ 두께로 연속적 박절을 한다.
② 연속적으로 연결된 절편을 부유온수조(적정온도 45~50℃) 위에 띄운다.
Ⅵ. 조직진단 질관리
③ 파라핀 블록의 병리번호와 유리 슬라이드의 병리번호가 잘 일치하는지 확인하고, 잘 펴진 절편을 선 택 하여 유리슬라이드에 붙인다.
④ 잘 떨어지는 절편으로 예상되는 검체는 코팅이 되어있는 슬라이드(Silan-coated slide)를 사용한다.
⑤ 조직 절편이 붙은 유리 슬라이드를 드라이오븐에 넣고 파라핀을 녹인다. 이 과정에서 조직 절편이 유 리 슬라이드에 강하게 붙게 된다.
(6) 일반 염색(Hematoxylin and Eosin stain)
① 염색 전 탈 파라핀 과정(자일렌 4단계), 함수 과정(고농도 알코올 - 저 농도 알코올 - 수세)을 거친다.
② 헤마톡실린(Hematoxylin) 용액은 제조 후 바로 사용 가능하며 1~2분 염색하고 0.5%~1% 산성 알코 올로 탈색 시킨다. 암모니아수로 중화시킨 후 수세한다.
③ 에오진(Eosin) 용액은 제조 후 하루 이상 숙성시키는 것이 염색이 잘 된다.
④ 탈수 과정(저농도 알코올 - 고농도 알코올), 투명 과정(자일렌 또는 Histo-clear)을 거쳐 봉입할수 있는 상태가 되도록 한다.
(7) 봉입 과정
① 자일렌 과정을 거친 유리슬라이드는 비수용성 봉입제로 봉입한다.
② 커버슬라이드 바깥쪽으로 봉입제가 넘치지 말아야 하고 공기 방울이 보이면 핀셋 끝으로 제거한다.
(8) 특수 염색
병리의사가 필요하다고 판단한 경우 필요한 특수 염색을 시행한다. 특수염색의 질관리를 위하여 대한병 리학회 정도관리위원회에서 주관하는 숙련도 평가에 참가하여야 한다.
(9) 면역조직 화학 염색
면역병리 검사는 항원-항체 반응을 이용하여 세포의 단백질 발현양상을 분석하여 진단하는 것으로 암 의 기원, 분류, 전이암 분석 등에서 다양하게 사용되는 검사이다. 조직병리 검사를 한 환자의 약 10-20%에서 면역병리 검사가 시행되고 있다. 환자에서 진단을 위해 면역병리 검사를 추가로 할 것인가, 어 떤 종류의 검사를 할 것인가, 몇 가지 검사를 할 것인가 등은 병리의사의 판단에 따라 결정된다.
염색의 질관리를 위하여 대한병리학회 정도관리위원회에서 주관하는 숙련도 평가에 참여하여야 한다.
(10) 그 외 필요한 검사
필요한 경우 분자병리검사, 전자현미경 검사 등을 시행한다. 검사의 질관리를 위하여 대한병리학회 정 도관리위원회에서 주관하는 숙련도 평가에 참여하여야 한다.
(11) 조직진단
① 수검자의 성명, 병리번호와 제작된 슬라이드의 번호를 확인하고 검체의 채취 부위와 개수가 일치하
는지를 확인한다.
② 수검자의 성별, 나이, 검사 소견 및 임상진단 등을 참고하여 병소에서 적절한 검체가 얻어졌는지 평 가한다.
③ 광학 현미경에서 병리소견을 관찰하여 진단한다.
④ 진단에 필요하다고 판단될 때에는 육안검사 재시행, 연속절편 제작, 다양한 특수염색검사, 면역조직 화학염색검사 등을 추가로 시행하여 정확한 진단이 되도록 한다.
⑤ 조직진단에서 악성 종양으로 진단될 때에는 종양의 조직학적 진단명을 기재하고 시술에 따라 필요 한 경우에는 분화도, 혈관 림프관 색전, 침윤 여부 및 침윤 깊이 등을 관찰이 가능한 경우 기재한다.
질환에 따라 염증 정도, 병원균의 종류를 기술하기도 한다.
⑥ 진단 목적 이외에도 특히 암 수검자의 경우에 치료 방법 결정 및 예후 예측 인자로 알려져 있는 면역 조직화학염색검사가 요구되는 경우에는 이를 시행하여 정성적 또는 정량적으로 판독하여 이를 보고 서에 기재한다.
(12) 진단지 전사 및 보고
① 진단지와 수검자 인적 사항 재확인
② 진단 결과 입력
③ 진단 결과 출력
④ 진단 결과 확인
⑤ 진단 결과 배송
⑥ 검체 의뢰서 정리
⑦ 진단 보고서 정리
⑧ 진단 건수 통계