대한소화기학회지 2000;36:793 - 800
4)
접수: 2000년 9월 14일, 승인: 2000년 11월 27일 연락처: 이선영, 158-710, 서울특별시 양천구 목동 911-1
이화의료원 부속 목동병원 소화기내과 Tel: (02) 650-5575, Fax: (02) 2645-5505
서 론
p53 유전자는 17번 염색체의 단완에 위치하는 종 양억제유전자로서 p53의 핵인 단백질(p53 단백질) 을 발현시키며 이는 세포의 성장과 전환을 억제하
췌장암 진단에서 혈청 p53 단백질의 임상적 유용성
이화여자대학교 의과대학 내과학교실
박영미・정혜경・손혜영・김영선・이선영
Cli n i c a l S i g n i fi c a n c e o f S e ru m p 53 P r o te i n i n P a ti e n ts w i t h P a n c r e a ti c Ca r c i n o m a
Yo u n g Mi P a r k , M.D., H y e Ky u n g J u n g , M.D., H y e Yo u n g S o n , M.D., Yo u n g S u n Ki m , M.D. a n d S u n Yo u n g Yi , M.D.
Department of Internal Medicine, Ewha Womans University College of Medicine, Seoul, Korea
Background/Aims: The p53 gene is a tumor suppressor gene and mutation of the p53 gene is the
most common genetic alteration found in human malignancies. The accumulation of mutant p53 protein in tumor cells can be released into the extracellular environment such as the serum and thus, serum concentration of p53 protein can be examined by enzyme linked immunosorbent assay (ELISA). We evaluated the clinical significance of serum p53 protein in patients with pancreatic carcinomas and examined especially its usefulness as a tumor marker. Methods: Serum concentra- tion of p53 protein and levels of CEA, CA19-9, CA242 were determined by an ELISA in 27 cases of pancreatic carcinoma , 14 cases of chronic pancreatitis, and 19 cases of normal controls. Results:The serum concentration of p53 protein in patients with pancreatic carcinoma was significantly higher than in patients with chronic pancreatitis and normal controls (p=0.001). The serum concentration of p53 protein did not correlate significantly with the levels of CEA, CA19-9 or CA242. The overall sensitivity of serum p53 protein assay was 85.2% and the specificity was 96.9%.
Positive predictive value was 95.8% and negative predictive value was 88.8% in this p53 protein assay. Conclusions: Serum concentrations of p53 protein can be clinically used as a tumor marker with high specificity and high efficiency in diagnosing of pancreatic carcinoma. (Korean J
Gastroenterol 2000;36:793 - 800)
Key Words: Serum p53 protein, Pancreatic carcinoma
794 대한소화기학회지 : 제 36 권 제 6 호 2000
는 역할을 한다. p53 유전자의 변이는 악성 종양에 서 발견되는 가장 흔한 유전자 이상으로 알려져 있 으며 대부분의 p53 유전자의 변이는 이 단백질의 반감기를 증가시키기 때문에 p53 단백질의 세포 내 축적을 초래하고 축적된 변이 p53 단백질은 면역조 직화학법을 이용하여 그 농도를 측정할 수 있다. 반 면에 야생형의 p53 유전자의 산물은 그 반감기가 짧아 농도를 측정하기 어려우므로 높은 농도의 p53 단백질은 p53 유전자의 변이를 시사한다고 할 수 있다.1,2 종양세포 내에 축적된 변이 p53 단백질은 혈청과 같은 세포 외 환경으로 유출되며 이 단백질 의 혈중 농도는 Enzyme linked immunosorbent assay (ELISA)를 이용하여 측정할 수 있다.3
최근 p53 단백질의 혈청 농도가 대장암과 폐암 환자에서 ELISA법을 이용하여 측정되었고 이 환자 들에서 p53 단백질의 혈청 농도가 의미 있게 음성 대조군에 비하여 높으며 이 단백질의 혈중 농도가 p53 유전자의 변이 정도와 의미 있는 상관관계가 있음이 보고되었다.4,5 또한 p53 유전자의 변이와 이 로 인하여 증가된 변이 p53단백질의 혈청 농도는 보다 진행된 암의 병기와 관련이 있으며 췌장암 환 자에서 생존율 감소와 관련이 있음이 보고되었고, ELISA법을 이용하여 측정한 p53 단백질의 증가된 혈청 농도가 유전자 분석이나 면역조직화학법을 이 용하여 밝힌 p53 유전자의 변이와 의미 있는 상관 관계가 있음이 유방암과 췌장암 환자에서 보고되었 다.6,7
대개의 종양표지자는 임상증상이 적고 영상적 조 기 진단이 어려운 암의 진단에서 중요하며, 췌장암 역시 조기 진단이 어렵고 예후가 나쁜 암 중의 하나 로 무엇보다도 임상증상이 없는 조기에 진단이 중 요하다고 하겠다. 따라서 조기 진단을 위한 노력으 로 단일클론항체법을 이용한 혈청학적 진단 방법에 대한 연구가 진행되었으며 CA 19-9, CA242, CA 50, CAR-3, 그리고 DU-PAN-2 등의 종양표지자를 현재 임상적으로 적용할 수 있게 되었다. 그러나 기 존의 혈청학적 표지자들은 조기에 췌장암을 진단하 는 데 있어 민감도가 떨어진다는 점과 담즙 저류나 담도염 등이 동반된 양성 질환에서도 혈청 내 수치 가 증가될 수 있다는 제한점이 있었다.
이에 본 연구에서는 췌장암 환자에서 혈청 내 p53 단백질의 농도의 진단적 가치를 평가하기 위하 여 정상인, 양성 췌장질환, 췌장암 환자에서의 p53 단백질의 농도를 측정하였고 나아가 암의 병기와의 상관관계, 기존의 종양표지자인 CEA, CA19-9, CA242와의 상관관계를 비교하여 분석하였고, 췌장 암 진단을 위한 p53 단백질의 기준치를 정하고자 하였다.
대상 및 방법
1. 연구 대상
수술적 절제를 통하여 조직학적으로 확진된 27명 (남자 15명, 여자 12명, 평균 연령 63세, 범위 30-77 세)의 췌장암 환자를 대상으로 하였다. 췌장암 환자 들은 TNM 병기에 의해 분류하였고 제1병기 1명, 제2병기 4명, 제3병기 13명, 제4병기 9명이었다. 대 조군은 췌장의 양성 질환자(만성 췌장염) 14명(남자 11명, 여자 3명, 평균 연령 46.8세, 범위 15-78세)와 정상인 19명(남자 6명, 여자 13명, 평균 연령 59세, 범위 49-71세)으로 하였다.
2. 연구 방법
1) p 53 단백질 및 CE A , C A19 - 9, CA 242의 혈청 농도 측정
환자군의 검체는 진단시 채취하여 혈청을 분리하 고 섭씨 영하 70℃ 이하에서 냉동 보관하였다. 췌장 암 환자와 대조군에서 모두 CEA, CA19-9, CA242 및 p53 단백질의 농도를 측정하였으며 CEA는 ELISA법(Abbott Axsym, USA, cut-off value 5 ng/
mL)을, CA19-9는 microparticle enzyme immunoas- say (Abbott Axsym, USA, cut-off value 37 U/mL) 를, CA242는 ELISA법(CanAg Diagnostics AB, Sweden, cut-off value 20 U/mL)을 사용하였고 p53 단백질의 농도는 토끼 p53 항체(p53 reporter anti- body)를 이용한 ELISA법(Oncogene Research Product' s mutant p53 ELISA, Cat#QIA03, Calbiochem, USA) 을 사용하여 측정하였다.
박영미 외 4인. 췌장암 진단에서 혈청 p53 단백질의 임상적 유용성 795
2) 통계 처리
통계 패키지 프로그램인 SPSS 9.0을 이용하였다.
혈청 p53 단백질의 농도, CEA, CA19-9, CA242의 각 군 간의 평균의 차이는 t-test 및 Mann-Whitney U-test를 이용하였고, 각 종양표지자와 췌장암과의 상관성 및 각 종양표지자의 병기와의 상관성, 그리 고 각 종양표지자와 p53 단백질 농도의 상관성에 대해서 선형회귀분석을 시행하였다. 선형회귀분석 에서 상관계수(pearson correlation; r) 0.5 이상에 대 하여 관련성이 있다고 판정하였고, 유의수준은 p값 이 0.05이하인 것으로 하였다. 각 종양표지자와 p53 의 상관관계에 대하여 각 표지자의 기준치 이상 혹 은 이하에서 p53 단백질이 기준치 이상 혹은 이하 인지의 여부 또한 비교하였다. p53 단백질의 혈중 농도에 대한 receiver operating characteristics (ROC) 곡선을 측정하였다. 이는 어떤 임상 검사의 기준치 설정과 유용성 결정에 흔히 이용되는 방법으로서, 임상 검사의 기준치를 임의로 변화시켜 각각의 기 준치에서 진양성률(민감도)과 위양성률(1-특이도)을 X축과 Y축에 도식화한 후 적절한 위양성률(0-20%) 의 범위 내에서 진양성률을 최대화하는 점, 즉 그래 프의 좌측 상단에서 최소의 거리에 있는 점을 가장 적절한 검사의 기준치(cut-off value)로 채택하는 방 법이다. 또한 이 곡선에서 그래프 아래의 면적(area under curve)을 비교하여 면적이 클수록 그리고 그 래프가 좌측 상단으로 치우칠수록 검사로서의 가치
가 인정되는 반면, 직선화할수록 유용성이 적은 검 사로 인정된다.
결 과
1. 췌장암 환자에서 혈청 p 53 단백질, CE A , CA 19- 9, C A24 2의 농도
1) 혈청 p 53 단백질의 농도
췌장암 환자에서 혈청 p53 단백질 농도의 평균값 은 1.53±1.74 ng/mL이었으며(범위 0.15-8.36 ng/
mL), 정상 대조군과 비교해 보면 정상 대조군의 혈 청 p53 단백질의 평균값은 0.20±0.12 ng/mL로 췌 장암 환자군의 p53 단백질 농도가 의미 있게 상승 되어 있으며(p=0.001) 양성 췌장질환인 만성 췌장염 환자군과 비교할 경우에도 만성 췌장염 환자군의 혈청 p53 단백질의 평균값은 0.18±0.11 ng/mL로 췌장암 환자군에 있어 p53 단백질의 농도가 의미 있게 상승되어 있었다(p=0.001)(Table 1).
췌장암과 p53 단백질의 상관관계는 상관계수 0.501로 의미 있는 상관관계를 가졌다(p=0.001). 회기 식에 의하여 p53 단백질의 혈청 내 농도가 1 ng/mL 상승할 때 췌장암의 확률은 2.61배인 것으로 측정되 었다.
조기 췌장암 환자군 5명(제1병기와 제2병기) 에 서 p53 단백질의 평균값은 0.78±0.35 ng/mL이었으 며 진행된 췌장암 환자군 22명(제3병기와 제4병기) 에서 p53 단백질의 평균값은 1.70±1.88 ng/mL
Table 1. Comparisons of Serum p53 Protein, CEA, CA19-9, CA242 between Patients with Pancreatic carcinomas, Chronic Pancreatitis and Normal Control Group
Pancreatic carcinoma (n=27) Chronic pancreatitis (n=14) Normal (n=19) p53 protein (ng/mL)
CEA (ng/mL) CA19-9 (U/mL) CA242 (U/mL)
1.5±1.7 15.3±36.0 4114.7±17018.4
53.8±66.9
0.2±0.1*
1.9±1.3†
33.3±53.8 10.2±10.3§
0.2±0.1*
2.4±1.4†
4.8±6.4 5.3±9.4§
Data are expressed as the mean±S.D.
* p=0.001 (vs pancreatic carcinoma).
† p=0.058 (vs pancreatic carcinoma).
p=0.072 (vs pancreatic carcinoma).
§ p=0.003 (vs pancreatic carcinoma).
796 The Korean Journal of Gastroenterology : Vol. 36, No. 6, 2000
이었으나 통계적 의미는 없었다(Mann-Whitney test, p=0.316). 그러나 조기 췌장암 환자군의 p53 단백질 의 농도는 만성 췌장염 환자군과 정상 대조군에서 의 p53 단백질의 농도보다 높았다(Mann-Whitney test, p=0.007).
2) CE A
췌장암 환자에서 CEA의 평균값은 15.3±36.0 ng/mL이었으며(범위 0.7-191.4 ng/mL), 정상 대조군 의 CEA 평균값은 2.38±1.42 ng/mL이었고 만성 췌 장염 환자군의 CEA 평균값은 1.95±1.32 ng/mL이 었으나 통계적 의미는 없었다(p=0.058)(Table 1).
췌장암 환자에서 CEA는 췌장암 환자 27명 중 12 명에서 양성으로 44.4%의 민감도를 보였으며, 특이 도는 93.9%, 양성 예측치는 85.7%, 음성 예측치는 67.4%를 보였고, 검사의 효율(efficiency)은 71.7%이 었다(기준치 5 ng/mL).
3) CA 19- 9
췌장암 환자에서 CA19-9의 평균값은 4114.8±
17018.4 U/mL이었으며(범위 2.2-88790 U/mL) 정상 대조군에서 CA19-9의 평균값은 4.85±6.40 U/mL이
었고 췌장암 환자군의 만성 췌장염 환자의 CA19-9 의 평균값은 33.3±53.9 U/mL이었으나 통계적 의미 는 없었다(p=0.072)(Table 1).
췌장암 환자에서 CA19-9은 췌장암 환자 27명 중 21명에서 양성으로 77.8%의 민감도를 보였으며, 특 이도는 90.9%, 양성 예측치는 87.5%, 음성 예측치는 67.3%를 보였고, 검사의 효율은 85.0%이었다(기준 치 37 U/mL).
4) CA 242
췌장암 환자에서 CA242의 평균값은 53.8±66.9 U/mL(범위 0.8 U/mL-257 U/mL)이었으며, 정상 대 조군과 비교할 때 정상 대조군에서 CA242의 평균 값은 5.3±9.4 U/mL로 췌장암 환자의 CA242가 의 미 있게 높았으며, 만성 췌장염 환자와 비교하면 만 성 췌장염 환자의 CA242의 평균값은 10.2±10.3 U/mL로 췌장암 환자의 CA242가 의미 있게 높았다 (p=0.003)(Table 1).
췌장암 환자에서 CA242는 27명의 췌장암 환자 중 22명에서 양성으로 81.5%의 민감도를 보였으며, 특이도는 87.9%, 양성 예측치는 84.6%, 음성 예측치 는 85.3%이었고 검사의 효율은 85.0%이었다(기준 Fig. 1. Receiver operating curve of serum p53 protein. Cut-off value of serum p53
protein for diagnosis of pancreatic carcinoma is 0.39 ng/mL.
Park, et al. Clinical Significance of Serum p53 Protein in Patients with Pancreatic Carcinomas 797
치 20 U/mL).
2. p53 단백질과 CEA, CA19- 9, CA242와의 상관 관계
p53 단백질의 혈청 내 농도와 기존의 췌장암에 대한 종양표지자로 알려진 CEA, CA19-9, CA242의 상관관계를 선형회귀분석을 통하여 분석하였다. 혈 청 p53 단백질 농도와 CEA 사이의 상관계수는 0.234로 관련성이 없었고(p=0.072), 혈청 p53 단백 질 농도와 CA19-9 사이의 상관계수는 0.176으로 관 련성이 없었으며(p=0.178), 혈청 p53 단백질 농도와 CA242 사이의 상관계수는 0.012로 관련성이 없었 다(p=0.927).
3. p53 단백질의 Receiv er oper at in g cur v e ROC를 통하여 위양성률 20% 범위 내에서 진양 성률을 최대화하는 각 종양 표지인자의 혈중 농도 를 구하였으며 이 점을 민감도, 특이도, 양성 예측 치, 음성 예측치를 최대화하는 검사의 기준치로 하 였으며 췌장암 진단의 기준치는 0.39 ng/mL이었다.
췌장암 환자에서 p53 단백질은 27명 중 23명에서 기준치 0.390 ng/mL 이상으로 85.2%의 민감도를 보 였으며, 특이도는 96.9%, 양성 예측치는 95.8%, 음 성 예측치는 88.8%를 보였다(Fig. 1).
p53 단백질의 진단 기준치와 기존의 종양표지자 들의 진단 기준치를 적용하여 계산된 검사의 효율 은 p53 단백질이 91.7%, CEA가 71.7%, CA19-9이 85.0%, CA 242가 85.0%로 췌장암 진단에 있어 p53 단백질의 혈청 내 농도 측정이 가장 효율이 높은 것 으로 판정되었다.
고 찰
췌장암은 초기에 임상증상이 적고 영상적 진단이 어려워 조기 진단이 어렵고 그렇기 때문에 낮은 조 기 진단율은 매우 나쁜 예후를 가진다. 그러므로 영 상적 진단이 아닌 혈청학적 진단으로써 췌장암을 조기에 발견하려는 노력의 일환으로 CEA, CA19-9, CA242, CA50 등이 제시되었고 이들 종양표지자를 임상적으로 적용할 수 있게 되었다. 이중 CA19-9은
1983년 처음으로 기술된 이후 가장 중요한 췌장암 의 혈청 내 종양표지자로서 이용되어 왔으나 조기 진단에 민감도가 떨어진다는 점과 담즙 저류가 동 반된 양성 질환에서도 혈청 내 수치가 상승할 수 있 다는 문제점을 보여 왔으며,8 CEA는 췌장암에 있어 서는 그 민감도나 특이도가 모두 떨어진다는 점이 문제점으로 제시되어 왔다. CA242 역시 췌장암 및 대장암의 진단에 종양표지자로서 최근에 제안되어 졌고, 외국의 연구에서 췌장암 진단에 CA19-9이나 CA50과 유사한 민감도 및 특이도를 나타내었으나9 아직 임상적 적용은 적은 상태이다. 췌장암 환자에 서 p53 유전자의 변이는 40-60%, 높게는 70%까지 도 보고된 바 있으며10,11 이러한 p53 유전자의 변이 는 유전자 서열 분석이나 면역조직화학법을 통하여 증가된 p53 단백질의 축적을 증명함으로써 확인되 었다.10 현재까지 임상적으로는 p53 유전자의 변이 를 측정하는 방법은 위에서 언급한 두 가지를 주로 하고 있으나 p53 유전자 변이를 밝히는 유전자 분 석이나 면역조직화학법은 모두 종양 조직을 필요로 하므로 수술을 통하여 종양 조직을 얻기 전에는 이 유전자 변이를 알 수 없으므로 임상 검사로서 사용 하기에 부적합한 것이 사실이다. 또한 이러한 방법 을 통하여 획득된 p53 유전자의 변이 여부는 현재 까지는 이미 진단된 암의 예후인자로서의 기능에 그 임상적 의의가 제한되었다. ELISA법을 이용하여 측정한 p53 단백질의 혈청 농도가 p53 유전자의 변 이를 시사할 수 있다면 이는 암의 진단이 이루어지 기 전 p53 유전자 변이와 관계된 악성 종양을 예견 하는 종양표지자로서 사용될 수 있으며 p53 유전자 변이가 암환자의 생존율을 포함한 예후와 관련되므 로 예후인자로서 활용될 수 있을 것이다. 또한 암의 제거 수술 후 p53 단백질의 농도가 수술 전에 비하 여 감소하며 p53 단백질의 농도가 암종의 크기 및 전이를 포함한 진행된 암의 병기와 관련이 있다고 보고된 바 있으므로12 p53 단백질의 농도 측정으로 치료 후 암의 재발이나 진행을 추적하는 인자로써 사용하여 그 임상적 유용성을 증가시킬 수 있을 것 이다. 실제로 면역조직화학법을 이용하여 밝혀진 이 유전자의 변이와 변이 유전자로부터 생산된 p53 단 백질의 혈청 내 농도를 측정하는 것이 높은 상관관
798 대한소화기학회지 : 제 36 권 제 6 호 2000
계를 가지고 있음이 증명되었고 또한 정상인이나 양성 췌장질환에서 p53 단백질의 농도는 췌장암 환 자에서보다 유의하게 낮은 것으로 보고된 바 있다.12 이는 모두 ELISA법을 통한 p53 단백질의 혈중 농도 측정이 췌장암을 예측하는 종양표지자로서 사용될 수 있음을 보여주는 근거가 된다. 이 연구에서는 조 직학적으로 확진된 27명의 췌장암 환자를 대상으로 하여 TNM 분류에 의해 병기를 구별하였고, 정상 대조군 19명 및 만성 췌장염 환자 14명에게서 p53 단백질의 혈중 농도를 측정하였다. 이 연구에서 p53 단백질은 0.39 ng/mL 을 기준치로 할 때 85.2%의 민감도와 96.9%의 특이도를 보였으며 기존의 보고 에서의 기준치 0.37 ng/ mL의 결과와 큰 차이를 보 이지 않았다.4 최근의 연구12는 전이를 동반한 췌장 암에서 혈청 내 p53 단백질 농도가 기준치 이상인 경우가 34.0%, 전이를 동반하지 않은 췌장암에서 혈청 내 p53 단백질 농도가 기준치 이상인 경우가 12.3%로, 진행된 췌장암에서 p53 단백질 농도가 높 은 것으로 보고하였으며, 이는 p53 유전자의 변이가 원발성 췌장암 조직보다 전이성 암으로 진단된 췌 장암 조직에서 많았다는 그 이전의 보고1와 연관성 이 있는 것으로 설명할 수 있다. 폐암에서 림프절 전이가 있거나 진행된 병기의 환자에서 p53 혈청 내 단백질 농도가 높다고 하여 진행된 폐암에서 p53 단백질의 농도가 높은 것으로 보고하면서 p53 단백 질의 농도와 종양 괴사의 정도와의 연관성이 있다 고 하였다.4 그러나 이 연구에서는 진행된 병기의 췌장암 환자군과 조기 췌장암 환자군의 p53 단백질 의 농도가 통계적으로 의미 있는 차이를 보이지 않 았는데 이는 조기 췌장암 환자군의 수가 적은 데 기 인한 통계적 오차로 생각된다. 진행된 췌장암과 높 은 p53 단백질의 농도와의 관계를 설명하는 가설은 p53 단백질의 혈중 증가가 암세포의 파괴로부터 비 롯된다는 것이었으나 아직 이 기전은 확실치 않으 며 p53 단백질이 암종의 수술적 제거가 이루어진 후 그 농도가 떨어진다는 이전의 보고들은 이 단백 질이 p53 변이 유전자로부터 특이적으로 생산된다 는 것을 확실히 보여주었고 이 연구에서도 p53 단 백질이 비췌장암 환자군에 비해 조기 췌장암 환자 군을 포함한 전체 췌장암 환자에서 현격히 증가됨
을 보여 주었다. 췌장암에서 CEA, CA19-9, CA242 는 진단 및 추적관찰에 사용되는 종양표지자로서 이 연구에서는 p53 단백질의 농도와 그 상관성은 낮은 것으로 나타났으며 이는 외국의 보고12에서와 일치하며 이는 p53 단백질이 췌장암에 특이적이나 CEA, CA19-9, CA242와는 다른 생물학적 과정을 거친다는 사실을 시사한다.
검사의 효율성은 ROC로 판정하였는데 p53단백 질의 혈청 농도 측정은 CEA, CA19-9, CA242와 비 교할 때 가장 높은 특이도 및 양성 예측치를 보였고 ROC는 직선화하는 양상을 보여 유용성이 높은 검 사로 판정되었다. 더욱이 이 연구 결과에서 조기 췌 장암 환자군(제1병기, 제2병기)에서 정상 대조군이 나 양성 췌장질환 환자군보다 높은 p53 단백질 농 도가 측정되어 기존의 종양표지자검사들이 조기 췌 장암 진단에 있어 민감도가 떨어지는 한계점을 극 복하고 조기 췌장암 진단에 있어 임상적 유용성을 높일 수 있는 가능성을 시사하였으나, 더 많은 수의 조기 췌장암 환자군에서의 고찰을 통하여 검증할 필요가 있다.
최근에는 p53 단백질에 대한 순환 항체가 다양한 종류의 암에서 발견되었으며 이러한 항체들이 암세 포 내의 변이 p53 단백질의 축적과 관련된다고 하 겠다.13 p53 단백질이 진행된 암에서 측정되는 반면, 이러한 항체는 보다 조기에 측정 가능하며 대장암 에서 항-p53 항체가 조기에는(1-2기) CEA보다 민감 도가 높다고 보고하였다.14
결론적으로 혈청 내 p53 단백질 농도는 췌장암의 혈청 내 종양표지자로서 기존의 종양표지자보다 높 은 특이도와 효율을 가진 검사로서 췌장암의 조기 진단을 위한 검사법으로서 임상적으로 유용성이 있 는 검사로 활용할 수 있음을 시사하였다.
요 약
목적: p53 유전자의 변이는 악성 종양에서 발견 되는 가장 흔한 유전자 이상으로 알려져 있으나 현 재까지 임상적으로 사용되던 p53 유전자의 변이 확 인 방법으로서의 유전자 분석이나 면역조직화학법 은 췌장종양 조직을 필요로 하므로 임상적 유용성
박영미 외 4인. 췌장암 진단에서 혈청 p53 단백질의 임상적 유용성 799
은 극히 제한적이었다. 그러나 종양세포 내에 축적 된 변이 p53 단백질은 혈중 농도를 상승시켜 ELISA 법을 이용하여 측정할 수 있게 되었다. 이에 저자들 은 췌장암 환자에서 혈청 내 p53 단백질 농도를 측 정하는 것이 종양표지자로서의 임상적 유용성을 가 질 수 있는지 연구하였다. 대상 및 방법: 수술 후 조직학적으로 확진된 27명의 췌장암 환자와 14명의 만성 췌장염 환자, 19명의 정상 대조군을 대상으로 하여 혈청 p53 단백질의 농도, CEA, CA19-9, 그리 고 CA242를 측정하여 p53 단백질의 농도를 환자군 별로 비교하였고, p53 단백질의 농도와 기존의 종양 표지자들인 CEA, CA19-9, CA242와의 상관관계를 조사하였다. 또한 Receiver operating curve를 통하여 p53 단백질의 췌장암 진단에 대한 기준치(cut-off value)를 구하였으며 검사의 민감도, 특이도, 양성 예측치 및 음성 예측치를 구하여 검사의 임상적 유 용성을 판정하였다. 결과: p53 단백질 농도는 췌장 암 환자에서 1.53±1.74 ng/mL, 만성 췌장염 환자에 서 0.18±0.11 ng/mL, 정상 대조군에서 0.20±0.12 ng/mL로, 췌장암 환자에서 만성 췌장염 환자나 정 상 대조군에 비하여 의미 있게 높았다(p=0.001).
p53 단백질 농도는 췌장암 환자에서 기존의 종양 표지자인 CEA, CA19-9 및 CA242와 상관성이 없었 다(p>0.05). 췌장암 환자에서 p53 단백질의 혈청 농 도 측정은 그 민감도가 85.2%이었고 특이도는 96.9%이었으며 양성 예측치는 95.8%이었고 음성 예측치는 88.8%이었으며 검사의 효율은 91.7%이었 다. 결론: 혈청 내 p53 단백질 농도는 췌장암의 혈 청 내 종양표지자로서 기존의 종양표지자보다 높은 특이도와 효율을 가진 검사로서 췌장암의 진단에 있어서 임상적으로 유용성이 있는 검사로 활용할 수 있음을 시사하였다.
참 고 문 헌
1. Berrozpe G, Schaeffer J, Peinado MA, Real FX, Perucho M. Comparative analysis of mutations in the p53 and K-ras genes in pancreatic cancer. Int J Cancer 1994;58:185-191.
2. Boschman CR, Stryker S, Reddy JK, Rao MS.
Expression of p53 protein in precursor lesions and adenocarcinoma of human pancreas. Am J Pathol 1994;145:1291-1295.
3. Luo JC, Neugut AI, Garbowski G, et al. Levels of p53 antigen in the plasma of patients with adeno- mas and carcinomas of the colon. Cancer Lett 1995;91:235-240.
4. Fontanini G, Bigini D, Vignati S, et al. Levels of p53 antigen in the serum of non-small cell lung cancer patients correlate with positive p53 immuno- histochemistry on tumor sections, tumor necrosis and nodal involvement. Int J Oncol 1994;5:553-558.
5. Luo JC, Zehab R, Anttila S, et al. Detection of serum p53 protein in lung cancer patients. J Occup Med 1994;36:155-160.
6. Pellegata NS, Sessa F, Renault B, et al. K-ras and p53 mutations in pancreatic cancer; ductal and non-ductal tumors progress through different genetic lesions. Cancer Res 1994;54:1556-1560.
7. Vojtesek B, Fisher CJ, Barnes DM, Lane DP.
Comparison between p53 staining in tissue sections and p53 proteins levels measured by an ELISA technique. Br J Cancer 1993;67:1254-1258.
8. 명승재, 최승목, 김은옥 등. 담도 및 췌장 악성 종양 에서의 CA19-9의 진단적 가치에 대한 평가. 대한소 화기병학회지 1995;27:345-353.
9. Nilsson O, Johansson C, Glimelius B, et al. Sensi- tivity and specificity of CA242 in gastrointestinal cancer. A comparison with CEA, CA50 and CA19-9. Br J Cancer 1992;65:215-221.
10. Scarpa A, Capelli P, Mukai K, et al . Pancreatic adenocarcinoma frequently shows p53 gene muta- tions. Am J Pathol 1993;142:1534-1543.
11. Ruggeri B, Zhang SY, Caamano J, Dirado M, Flynn SD, Klein-Szanto AJ. Human pancreatic carcinomas and cell lines reveal frequent and multiple alterations in the p53 and Rb-1 tumor- suppressor genes. Oncogene 1992;7:1503-1511.
12. Suwa H, Ohshio G, Okada N, et al. Clinical significance of serum p53 antigen in patients with pancreatic carcinomas. Gut 1997;40:647-653.
13. Angelopoulou K, Diamandis EP, Sutherland DJA,
800 The Korean Journal of Gastroenterology : Vol. 36, No. 6, 2000
Kellen JA, Bunting PS. Prevalence of serum anti- bodies against p53 tumor suppressor protein in various cancers. Int J Cancer 1994;58:480-487.
14. Takeda A, Nakajima K, Shimada H, et al. Detec-
tion of serum p53 antibodies in mucosal colorectal cancer and negative conversion after endoscopic resection. J Clin Gastroenterol 1999;29:153-154.
