Ñ] K ¡” ôQ ß O Ë ù p § 4  º” X ¢ Ì ¦ R 8 û Ò Å ] k ù° Ë Ñ” ôQ ß O Ë8 ý  Œ” ô

° Ë

Ñ] K ¡”  ôQ ß O Ë ù p § 4  º” X ¢ Ì ¦ R 8 û Ò Å ] k ù° Ë Ñ”  ôQ ß O Ë8 ý  Œ”  ô

ö

¶ B³ Ö£ Ó ·  ™ »+ ä  ÷ 7 B

“

 …  ;@ /† < Ɠ § Ó ü t o † < Æõ , “  …  ; 406-772

Martin Guthold

Department of Physics, Wake Forest University, Winston-Salem 27109, U.S.A.

(2011¸   11 Z 4 17{ 9  ~ à Î6 £ §, 2011¸   12 Z 4 14{ 9  à º& ñ ‘ : r ~ à Î6 £ §, 2012¸   1 Z 4 9{ 9  > F  S X ‰& ñ )

"

é

¶  ü @‚  (Deep Ultra Violet: DUV) + þ AF  g ‰ & ³p  ⠓ É r Ò q t^ ‰› ¸f ” _   ƒ  + þ AF  g`  ¦ s 6   x # Œ + þ AF  g ³ ðd ”  \ O  s

 + þ AF  g s p f ç `  ¦ ½ ¨‰ & ³½ + É Ã º e ” Ü ¼ 9, F  g @ /% i  \  -t Ì “ s ì ø ͕ ¸^ ‰ Ó ü t| 9 _  \ x  + þ AF  g s p f ç `  ¦ à º' Ÿ ½ + É Ã º e ”

  H Ä »6   x ô  Ç ì  r$ 3  ~ ½ ÓZ O s  . Ä ºo   H  ü @‚  \  @ /ô  Ç È Òõ $ í s  ± ú “ É r ˜ Ð: Ÿ x + þ AF  g‰ & ³p  â ? / Ò_  F  g † < Æ> \  ¦ UV È Òõ $ í s  Ä ºÃ ºô  Ç UV F  g † < Æ> – Ð “ §^ ‰, & h ] X y  C u  “ ¦, UV LED\  ¦ F  g " é ¶ Ü ¼– Ð  6   x † < ÊÜ ¼– Ð+ ‹ 280 nm   © œ@ /\ " f  Œ •1 l x   H DUV + þ AF  g‰ & ³p  â `  ¦ $ í / B N& h Ü ¼– Ð ] j Œ • % i  . ] j Œ •  ) a DUV + þ AF  g‰ & ³p  â Ü ¼– Ð à

Ôw n ž Ðó ø Í  p ” ¸í ß –, ZnO
” ¸‚  , fibrinogen
” ¸$ 3 Ä »_  DUV + þ AF  g s p f ç `  ¦ $ í / B N& h Ü ¼– Ð Ã º' Ÿ  % i 



.

Ù þ

˜d ” # Q:  ü @‚  , + þ AF  g‰ & ³p  â , UV, ZnO, + þ AF  g s p f ç , à Ôw n ž Ðó ø Í

Simple Construction of a Deep Ultraviolet Fluorescence Microscope Using an Optical Microscope

Hugeun Song · Jenogyong Kim ^∗

Department of Physics, University of Incheon, Incheon, 406-772

Martin Guthold

Department of Physics, Wake Forest University, Winston-Salem 27109, U.S.A.

(Received 17 November 2011 : revised 14 December 2011 : accepted 9 January 2012)

Deep Ultraviolet (DUV) fluorescence is very useful in imaging biological tissues and cells. It uses their intrinsic auto-fluorescence without fluorescence dying or tagging and without the need to determine the band-edge photoluminescences of wide bandgap nanomaterials. We successfully constructed a DUV fluorescence microscope operating in the 280 nm wavelength range by replacing and arranging the UV-transmitting optics and the UV LED. The results of the performance test of the constructed DUV fluorescence microscope showed that it can be conveniently used to obtain the epi-fluorescence image of electrospun fibrinogen nanofibers and thermally grown ZnO nanowires.

PACS numbers: 7.60.-j, 87.64.M-, 07.60.Rd

Keywords: Ultraviolet, Fluorescence microscope, ZnO, Fluorescence imaging, Tryptophan

∗

E-mail: [email protected] -38-

I. " e  ] Ø

"

é

¶  ü @‚  (Deep Ultra Violet: DUV) ‰ & ³p  ⠓ É r { 9 ì ø Í& h  Ü

¼– Ð 300 nm s  _    © œ`  ¦ ”    ü @‚  `  ¦ s 6   x ô  Ç ‰ & ³p 

 â

s p f ç l Õ ü t`  ¦ t g Aô  Ç . s    © œ% ò % i _  „   l  \  ¦ s

6   x ô  Ç ‰ & ³p  â l Õ ü t“ É r r  F  g‚  `  ¦ s 6   x   H { 9 ì ø Í& h “   ‰ & ³ p

 â s  ] j/ B N t  3 l w   H Y >  t   © œ& h `  ¦ t m “ ¦ e ”  . €  

$

 F  g @ /% i  \  -t Ì “ s`  ¦ ”   GaN, ZnO
” ¸Ó ü t| 9 _  band edge + þ AF  g s p f ç s  0 p x  . s [ þ t F  g @ /% i  \  -t Ì “ s


”

¸Ó ü t| 9 [ þ t“ É r @ /> h 3.4 eV s  © œ_  \  -t  Ì “ s`  ¦ t Ù ¼– Ð, ì

 rF  g: £ ¤$ í ƒ  ½ ¨\  e ” # Q" f 360 nm s  _    © œ`  ¦ ”   Y U s

$ \  ¦ ŠҖ Ð  6   x ô  Ç  [1]. Õ ª Q
 UV Y Us $ \  ¦ s 6   x ô  Ç /

B

N œ í& h  + þ AF  g s p f ç s 
 PL ì  r$ 3 ~ ½ ÓZ O “ É r 0 p x 
  Ø Ô>  r

« Ñ © œ_  V , “ É r % ò % i _  \ x + þ AF  g (epi-fluoresecnece) % ò  © œ

`

 ¦ % 3   H X <  H ] jô  Ç& h s  e ”  . ¢ ¸, Ò q t^ ‰ › ¸f ” _  [ jŸ í Ù þ ˜õ  é

ß –Ñ þ ˜| 9  $ í ì  r[ þ t _  UV % ò % i \ " f_  : £ ¤& ñ ô  Ç F  gf  ¨ à º $ í | 9 `  ¦ s

6   x # Œ UV f  ¨ à º s p f ç s  0 p x # Œ [ jŸ í? / é ß –Ñ þ ˜| 9 õ  Ù þ

˜í ß –| 9 | ¾ Ó_  & ñ | ¾ Ó& h s  ì  r$ 3 s  0 p x   [2]. Õ ªo “ ¦, DUV F 

g“ É r Ò q t^ ‰r « і РÒ'   ƒ  + þ AF  g(auto-fluorescence)`  ¦ Ä » µ

1 Ïô  Ç . Ò q t^ ‰r « Ñ ? /\  ” > r F    H é ß –Ñ þ ˜| 9  î ß –\   H à Ôw n ž Ð ó

ø Í  p ” ¸í ß –s  ” > r F    H X <, s [ þ t“ É r 280 nm @ /_  y n C`  ¦ f  ¨ Ã

º # Œ 350 nm % ò % i _  + þ AF  g`  ¦ ~ ½ ÓØ  ¦ ô  Ç  [3]. Õ ª QÙ ¼– Ð, DUV F  g`  ¦ s 6   x ½ + É  â Ä º Ò q t^ ‰r « Ñ_  › ' a ¹ 1 Ï`  ¦ 0 A # Œ  – Ð + þ

AF  g% i Ò  o`  ¦ ½ + É € 9 כ ¹ \ O s  + þ AF  g s p f ç s  0 p x  . r 

«

Ñ_  › ' a ¹ 1 Ï`  ¦ 0 AK  % i Ò  o`  ¦ ½ + É  â Ä º, r « Ñ ‘ : r A _  : £ ¤$ í `  ¦



  or ~  ´ 0 p x$ í s  e ”   H X < , & h ] X ô  Ç % i Ò  o “   \  ¦ ½ ¨ 



 H  כ s  † ½ Ó © œ 6   x s  t • ¸ · ú §Ü ¼ 9, % i Ò  oõ & ñ ×  æ r « Ñ_  ’ < H



© œs  { 9 # Q± ú ˜ 0 p x$ í • ¸ e ” Ü ¼Ù ¼– Ð s  כ “ É r  H  © œ& h s   ½ + É Ã

º e ”  . Ò q t^ ‰r « Ñ÷  r ë ß –  m   é ß –Ñ þ ˜| 9    & ñ _  s p f ç \ 

•

¸ B Ä º ´ òõ & h s   [4]. à Ôw n ž Ðó ø Í  p ” ¸í ß –\  _ ô  Ç  ƒ   + þ

AF  g“ É r é ß –Ñ þ ˜| 9 _  Šҁ   ¨ 8 Š â \  _  # Œ + þ AF  g   © œ x 9  [ jl 

   ô  Ç . s  Qô  Ç $ í | 9 “ É r  Ë ¨– Ð é ß –Ñ þ ˜| 9  ½ ¨› ¸_  — ¸m '  a A\  æ ¼# Œ & ñ  © œ[ jŸ íü < € Œ ™[ jŸ í\  ¦ ½ ¨Z >    H ƒ  ½ ¨\ • ¸  Ö ¸ 6

 

x ÷ &% 3   [5].

Õ

ª Q
 UV6   x F  g " é ¶ õ  UV6   x @ /Ó ü tE $ ™Ý ¼\  ¦  6   x   H  כ ë

ß –Ü ¼– Ѝ  H DUV + þ AF  g s p f ç s  Ô  ¦ 0 p x  . @ / Òì  r _   © œ 6

 

xF  g † < Ɖ & ³p  â `  ¦ s À ғ ¦ e ”   H E $ ™Ý ¼1 p x _  F  g † < Æ Ҿ ¡ §“ É r   © œ 400 nm s  _  „   l  \  @ / # Œ B Ä º Ô  ¦ È Ò" î ô  Ç : £ ¤$ í

`

 ¦ ˜ Ð# Œ DUV s p f ç s  " é ¶ g Ë :& h Ü ¼– Ð Ô  ¦ 0 p x l  M :ë  H s 



. þ j   H  ü @‚   s p f ç 6   x  © œ6   x ‰ & ³p  â s  > hµ 1 Ï÷ &% 3 Ü ¼


&

ñ K ”   6   x • ¸_  & ñ w n  ‰ & ³p  â Ü ¼– Ð" f, ƒ  ½ ¨ _   € ª œô  Ç כ ¹

½

¨\   Ò6 £ x t  3 l w   H  © œ S ! s  . Ä ºo   H  © œ@ /& h Ü ¼– Ð & h 

“ É

r ” ¸§ 4 õ  q 6   x Ü ¼– Ð l ” > r F  g † < Ɖ & ³p  â \  þ j™ è_  > h› ¸\  ¦ Ã

º' Ÿ  # Œ 280 nm   © œ_  DUV + þ AF  g‰ & ³p  â `  ¦ ] j Œ • % i 



. ½ ¨‰ & ³ ) a DUV + þ AF  g‰ & ³p  â _  $ í 0 p x r + « >`  ¦ 0 A # Œ, à Ô w n

ž Ðó ø Í_   ƒ  + þ AF  g s p f ç , GaN
” ¸‚  _  + þ AF  g s p f ç , x

Ú Ô 2 ;
” ¸$ 3 Ä »_  + þ AF  g s p f ç `  ¦ — ¸¿ º Z > • ¸_  + þ AF  g ³ ðd ” 

\ O

s  $ í / B N& h Ü ¼– Ð + þ AF  g s p f ç `  ¦ à º' Ÿ  % i  .

DUV + þ AF  g s p f ç l Õ ü t“ É r Ò q t^ ‰› ¸f ” s 
 [ jŸ í › ' a8 £ ¤ <  Ê

“ É

r F  g @ /% i  \  -t Ì “ s ì ø ͕ ¸^ ‰
” ¸Ó ü t| 9 _  s p f ç \  B Ä º Ä

»6   x ô  Ç ~ ½ ÓZ O s  9, ç ß –é ß –ô  Ç F  g † < Æ> _  “ §^ ‰– Ð ˜ Ð: Ÿ x  © œ6   x + þ A F 

g‰ & ³p  â `  ¦ DUV s p f ç  © œq – Ð   + þ A½ + É Ã º e ”  €    Ö ¸6   x

•

¸ B Ä º Z  }`  ¦  כ Ü ¼– Ð l @ /  ) a  . ‘ : r  7 Hë  H \ " f  H { 9 ì ø Í& h 

“

  + þ AF  g‰ & ³p  â `  ¦ DUV ‰ & ³p  â Ü ¼– Ð   + þ A   H ~ ½ ÓZ O `  ¦   [

jy  ] jr  “ ¦ $ í 0 p x S X ‰ “   r + « >Ü ¼– Ð Ã º' Ÿ ô  Ç DUV + þ AF  g s  p

f ç   õ \  ¦ ˜ Г ¦ “ ¦  ô  Ç .

II. ÷ m Ç] M ö U ê s0 n É

DUV ‰ & ³p  â `  ¦ ½ ¨» ¡ ¤ l 0 AK " f  H K   K     H   6

£

§ õ  ° ú  “ É r Y >  t  l Õ ü t& h  è ß –] j e ”  .

(1)  ü @‚  % ò % i _  y n C\  & h ½ + Ëô  Ç @ /Ó ü tE $ ™Ý ¼ (2) ‰ & ³p  â ? / UV6   x F  g † < Æ> _  & h ½ + Ëô  Ç C u .

(3)  ü @‚  `  ¦ µ 1 Ï   H F  g " é ¶.

0

Aü < ° ú  “ É r l Õ ü t& h  è ß –] j\  ¦ K     9 l ” > r _  F  g † < Ɖ & ³p 

 â

_  $ í 0 p x`  ¦ Ä »t  €  " f  ü @‚   ‰ & ³p  â `  ¦ ½ ¨» ¡ ¤   H z  ´ +

«

>& h  ” ¸ Ä º € 9 à º& h s  . Ä ºo   H  6 £ § õ  ° ú  “ É r ~ ½ ÓZ O Ü ¼

–

Ð 0 A\  ƒ  / å L ô  Ç l Õ ü t& h  è ß –] j\  ¦ F G4 Ÿ ¤ % i  .

(1) @ /Ó ü tE $ ™Ý ¼  H ‰ & ³p  â \ " f  © œ ×  æ כ ¹ô  Ç F  g † < Æ> s  .



 É r F  g † < Æ>  þ j& h  o÷ &# Qe ”    H & ñ \  @ /Ó ü tE $ ™Ý ¼_ 

›

¸o > hà º (numerical aperture: NA)\  _  # Œ F  g † < ÆK  © œ

•

¸   & ñ  ) a  . @ / Òì  r _  @ /Ó ü tE $ ™Ý ¼  H BK7 s    H ½ + Ë$ í Ä

»o  F « Ñ\  ¦  6   x   H X <, s  F « э  H 350 nm s  _   



© œ`  ¦ ° ú   H  ü @‚  _   â Ä º  _  È Òõ r v t  · ú §  H $ í | 9 `  ¦

t “ ¦ e ”  . s  Qô  Ç s Ä »– Ð { 9 ì ø Í& h “   @ /Ó ü tE $ ™Ý ¼– Ѝ  H 280 nm / å L _   ü @‚  `  ¦ s 6   x ô  Ç s p f ç s  Ô  ¦ 0 p x  .  8ç  H  

 Z  }“ É r NA _  @ /Ó ü tE $ ™Ý ¼  H ˜ Ð: Ÿ x 10 > h  Å   H E $ ™Ý ¼– Ð s  À

Ò# Q4 R e ” Ü ¼Ù ¼– Ð,  ü @‚   % ò % i _  s p f ç `  ¦ 0 AK " f  H   ü

@‚   È Òõ  : £ ¤$ í s  Ä ºÃ ºô  Ç fused silica (quartz) E $ ™Ý ¼– Ð ] j



Œ

•  ) a @ /Ó ü tE $ ™Ý ¼\  ¦  6   x # Œ  ô  Ç . ‰ & ³F  ó ø ÍB ÷ &“ ¦ e ”   H quartz @ /Ó ü tE $ ™Ý ¼ ] j› ¸ r   H Zeiss, Nikon, Partec, OFR

&

ñ • ¸s  9 s ×  æ \ " f “ ¦C Ö  ¦ + þ AF  g s p f ç s  0 p x ô  Ç 1.2 NA s

 © œ_  “ ¦K  © œ• ¸ @ /Ó ü tE $ ™Ý ¼  H Zeiss ü < Partec s  Ä »{ 9  



. Zeiss  „  : Ÿ x& h Ü ¼– Ð F  g † < Æl Õ ü t s  8 A# Q
 Z  }“ É r $ í 0 p x _

 @ /Ó ü tE $ ™Ý ¼\  ¦ ó ø ÍB  “ ¦ e ” Ü ¼
   s  B Ä º “ ¦“  X <



 working distance ( Œ •\ O  o )  200 µm Ü ¼– Ð B Ä º  Œ •



 Ô  ¦¼ #   . Ä ºo   H Partec  _  40× E $ ™Ý ¼\  ¦  6   x % i 



.

Table 1. Comparison of UV objectives made by different manufacturers.

]

j› ¸ r  Zeiss Nikon Partec OFR C

Ö  ¦ 40×, 100× 100× 40× 40×

NA 0.6, 1.25 0.6 1.25 0.6 W.D 0.36, 0.2 mm 0.2 mm 0.4 mm 2 mm

   $9,000, $13,000 $23,000 $4,500 $2,500

(2) F  g † < Æ ‰ & ³p  â \ " f F  g " é ¶ õ  r « Ñ, Õ ªo “ ¦ r « Ñ\ " f  B

j  t  s Ø Ô  H F  g ⠖ Ð õ & ñ \  e ”   H F  g † < Æ>   H @ /Ó ü tE $ ™ Ý

¼ë ß – e ” t  · ú § . # Œ Q E $ ™Ý ¼ x 9  € 9 '  1 p x s  e ” Ü ¼ 9, Õ ª à º

10 > h\  ¦  Å   H  â Ä º• ¸ ´ ú § .  © œ6   xF  g † < Ɖ & ³p  â _   â Ä º s [ þ t

—

¸Ž  H F  g † < Æ> \  ¦ quartz F  g † < Æ> – Ð  Ë ¨  H  כ “ É r / 'î  r { 9 s 



m  . Õ ª QÙ ¼– Ð Ô  ¦€ 9 כ ¹ô  Ç F  g † < Æ> \  ¦ ] j  “ ¦, þ j@ /ô  Ç ç

ß –é ß –ô  Ç F  g † < Æ> \  ¦ ½ ¨$ í K    9, s \  ¦ 0 AK " f  H  ü @‚   F 

g † < Ɖ & ³p  â _  F  g ⠖ Ð\  @ /ô  Ç B Ä º Z  }“ É r s K  כ ¹½ ¨  ) a



. à Ôw n ž Ðó ø Í_  + þ AF  g s p f ç `  ¦ 0 AK " f  H l ‘ : r& h Ü ¼– Ð € 9  '

 [ jà Ô € 9 כ ¹  9 s  € 9 ' [ jà ԍ  H „  ë  H € 9 '  Ò q tí ß – ó ø Í B

 \ O ^ ‰“   Semrock  \ " f ½ ¨½ + É Ã º e ”   H  כ Ü ¼– Ð µ 1 ß) €& ’ 



(TRP-A). TRP-A € 9 '  [ jà ԍ  H 280 nm @ /_  { 9 § 4 F  g s

 : Ÿ x õ ÷ &# Q dichroic  Ö  ¦ \  ì ø Í ÷ &# Q r « Ñ\  { 9  ÷ &“ ¦, 350 nm % ò % i _  + þ AF  g“ É r È Òõ r v   H : £ ¤$ í `  ¦ t “ ¦ e ”  .

(3) { 9 ì ø Í& h “   + þ AF  g‰ & ³p  â _  F  g " é ¶“ É r ŠҖ Ð, à º“ É rÏ þ ›á Ô

´ ú

§s  æ ¼“   . à º“ É r Ï þ ›á ԍ  H   H  ü @‚   Ò'  & h ü @‚   t  V , 

“ É

r % ò % i \    5 g æ ¼{ 9  à º e ” Ü ¼ 9 F  g [ jl  Z  }   V , o  æ ¼s “ ¦ e ”

 . Õ ª Q
 280 nm   © œ_   ü @‚  “ É r B Ä º €  • “ ¦ Ï þ ›á Ô

Ä ºf ç · ú ¡\  0 Au ô  Ç | 9 5 Å qE $ ™Ý ¼ quartz E $ ™Ý ¼– Ð  Ë ¨# Q 

  H    – й ¡ § s  e ”  . s ü <  H ² ú ˜o  þ j   H + þ AF  g‰ & ³p  â F  g

"

é

¶ Ü ¼– Ð ´ ú §s  æ ¼s “ ¦ e ”   H Metal-halide Ï þ ›á Ô_   â Ä º 300 nm s  \ " f  © œ@ /& h Ü ¼– Ð  8 ´ ú §“ É r F  g [ jl \  ¦ ] j/ B N “ ¦ e ” 

#

Q €  $  r • ¸ % i  . Õ ª Q
 z  ´] j– Ð Metal-halide Ï þ ›á Ô

\

 ¦ z  ´+ « >\   6   x ô  Ç   õ   ü @‚   % ò % i _  F  g s   @ /ô  Ç r  F 

g‚   % ò % i _  C  â F  g \  _  # Œ  9t   H  ҁ Œ •6   x s 
  z

Œ

¤ .  ü @‚  ë ß –`  ¦    Q? /  H € 9 ' \  ¦  6   xÙ þ ¡6 £ § \ • ¸ Ô  ¦ ½ ¨

“ ¦, r  F  g‚   % ò % i _  F  g s  0 >z Œ • G ' p › ' a > – Ð  ü @‚   % ò

%

i _  ’    ñë ß –`  ¦    Q? /  H  כ “ É r € 9 '  6   x ë ß –Ü ¼– Ѝ  H 0 p x  t

 · ú §€ Œ ¤ . s  Qô  Ç s Ä »– Ð Ä ºo   H   ² D G  ü @‚  ë ß – ~ ½ ÓØ  ¦ 



 H UV LED \  ¦ F  g " é ¶ Ü ¼– Ð  6   x l \  s Ø Ô! 3  .  6   x ô  Ç LED  H p ² D G Sensor Electronic Technology  _  UVTOP 280 nm – Ð" f þ j“ ¦ Ø  ¦§ 4 s  0.5 mW – Ð" f  ™ è €  • 
  

 É

r   © œ_  C  â F  g s  \ O    H  © œ& h `  ¦ t “ ¦ e ”  .  8¹ ¡ ¤ s

 „  €   ˜ û ¶ • ¸Ä º\  ¦ ½ ¨€  E $ ™Ý ¼ % ƒo  # Œ F  g`  ¦ — ¸ Šҍ  H l  0

p

x  t  t “ ¦ e ” # Q B Ä º Ä »6   x % i  .

Õ

ªa Ë > 1\  UV + þ AF  g‰ & ³p  â _  > h| Ä Ì• ¸
 
e ”  . €  

$

  ^ ‰ ] j Œ •ô  Ç € 9 '  ~ à ÌÛ ¼  H ¿ º > h_  8 £ x Ü ¼– Ð  ) a + þ AI – Ð+ ‹

Fig. 1. (Color online) Schematic of the optical path of constructed DUV fluorescence microscope.

f ”

] X  ] j Œ •`  ¦ % i Ü ¼ 9, 0 AA á ¤ _  8 £ x Ü ¼– Ѝ  H  ü @‚  s  [ þ t # Q

" f Excitation Filter\  ¦ : Ÿ x õ  “ ¦, dichroic mirror\  ì ø Í



  ) a Ê ê Ò  re  ¦ \  • ¸² ú ˜½ + É Ã º e ” >  ÷ &# Q e ”  .  A A á ¤ 8 £ x“ É r Ò 

re  ¦ \ " f
š ¸  H + þ AF  g ë ß – È Òõ ½ + É Ã º e ” • ¸2 Ÿ ¤ UV\  ¦ } Œ • Å Ò



 H emission filter  [ O u ÷ &# Q e ” Ü ¼ 9, + þ AF  g`  ¦ ì ø Í r & " f CCD ~ ½ ӆ ¾ ÓÜ ¼– Ð ˜ Ð? /Šҍ  H % i ½ + É`  ¦   H  Ö  ¦ s  [ O u ÷ &# Q e ”

 . # Œl " f  Ö  ¦`  ¦ s 6   x   H s Ä »  H ‰ & ³p  â ? /_  tube E $

™Ý ¼  ü @‚   % ò % i _  y n C\ " f È Òõ Ö  ¦ s  ± ú l  M :ë  H s “ ¦,



Ö  ¦“ É r  ü @‚   % ò % i _  y n Cs  ¸ ú ˜ ì ø Í  | ¨ c à º e ” • ¸2 Ÿ ¤ · ú ˜À Òp 

³ o

u s   ïh A ) a  Ö  ¦`  ¦  6   x % i  . LED · ú ¡\   H UV r ï  r 6

  x E $ ™Ý ¼ (Newport, f = 100 mm)\  ¦ [ O u  # Œ @ /Ó ü tE $ ™Ý ¼\ 

¨ î

' Ÿ F  g s  [ þ t # Q° ú ˜ à º e ” >  % i  . Excitation filter  H 280 nm\  ¦  6   x % i “ ¦, emission filter“ É r 357 nm (band pass 50 nm)\  ¦  6   x % i Ü ¼ 9, CCD · ú ¡\   H quartz – Ð  ) a E $ ™ Ý

¼\  ¦ tube E $ ™Ý ¼_  @ /6   x Ü ¼– Ð  6   x % i  . r + « > s p f ç `  ¦ 0

A # Œ @ /Ó ü tE $ ™Ý ¼  H Zeiss  _  10× UV Lens(NA 0.2)ü <

Partec  _  40× UV Lens(NA 1.25)_  ¿ º 7 á x À Ó\  ¦  6   x 

%

i Ü ¼ 9, CCD  H Hamamatsu  _  EM-CCD\  ¦  6   x % i 



.

III. ÷ m Ç] M ö + s ÇÊ Ý õ m Í ‚ º8 ý

Ä

ºo   H DUV + þ AF  g s p f ç s  ] j@ /– Ð ½ ¨1 l x ÷ &  H t  S X ‰ “  

l  0 AK  pristine tryptophanõ  ZnO nanowire_  + þ AF  g s

p t \  ¦ 8 £ ¤& ñ % i  . tryptophan (Sigma Aldrich) `  ¦ 1

% à º6   xÓ  o\   B$ 3 r †   Ê ê Ä »o l ó ø Í\  b  # Qä ¼ 2 ; Ê ê  ƒ  

|

› ¸ r &  ï  r q  % i  . Õ ªa Ë > 2  H Zeiss 10×(NA 0.2) ü <

Partec 40×(NA 1.25)\  ¦ s 6   x # Œ % 3 “ É r tryptophan + þ AF  g s

p t [ þ t _  q “ §\  ¦
 ? /“ ¦ e ”  . (a)  H Hallogen Ï þ ›á Ô

\

 ¦ s 6   x ô  Ç bright field È Òõ % ò  © œs “ ¦ (b)ü < (c)  H UV F  g`  ¦

¤

è# Œ Zeiss 10×(NA 0.2)ü < Partec 40×(NA 1.25)y Œ •y Œ • % 3 

“ É

r + þ AF  g s p t s  . Z  }“ É r NA @ /Ó ü tE $ ™Ý ¼– Ð % 3 “ É r (c) s p  t

  s `›   ‚  " î ô  Ç % ò  © œ`  ¦ ] j/ B N   H  כ `  ¦ ^  ¦ à º e ”  . à Ô w n

ž Ðó ø Í\ " f µ 1 ÏÒ q t   H + þ AF  g s  Ì º§  s  › ' a8 £ ¤ ÷ &# Q, 280 nm

Fig. 2. (Color online) Bright field transmission image (a) and DUV fluorescence image of dried pristine tryp- tophan using 10× 0.2 NA objective. (c) is DUV fluores- cence image obtained with 60× 1.25 NA objective. The rectangular region in (a) and (b) is the region imaged in (c).

Fig. 3. (Color online) Bright field transmission image (a) and DUV fluorescence image (a) of ZnO nanowire.



 © œ@ /% i _  DUV + þ AF  g‰ & ³p  â s  ½ ¨‰ & ³÷ &% 3 6 £ §`  ¦ Ì º§  s 
 

 · p . : £ ¤ y  @ /Ó ü tE $ ™Ý ¼_  NAà º\    É r – B H à Ô Û ¼à Ô_   s

 Ì º§  s 
 
  H  כ `  ¦ ^  ¦ à º e ”  . Õ ªa Ë > 2 (b)  H NA 0.2 _  UV @ /Ó ü tE $ ™Ý ¼– Ð Õ ªa Ë > 2(c)  H NA 1.25\  ¦ y Œ •y Œ •  6   x

# Œ s p f ç ô  Ç  כ “  X <, C Ö  ¦ _  s  ÷  r ë ß –  m   F  g – B H à

Ô Û ¼à Ô\ " f  H s  e ” # Q NA 1.25_  Partec E $ ™Ý ¼\  ¦



 H  â Ä º à Ôw n ž Ðó ø Í + þ A$ í + þ AI _  [ jx 9 † < Ê t   [ jy 
 

  H  כ `  ¦ ˜ Ð# Œï  r  .

Ä

ºo   H \ P  7 £ x ‚ Ã Ì # Œ % 3 “ É r ZnO
” ¸‚   [1]_  + þ AF  g s p  f ç

• ¸ à º' Ÿ  % i  . Õ ªa Ë > 3“ É r
” ¸‚  _  bright field È Òõ  s  p

t  (a) ü < + þ AF  g s p t  (b)_  q “ §s  . ¢ , aA á ¤ _  s p t 



 H r  F  g‚   % ò % i \ " f_  È Òõ s p t \  ¦
 ? /“ ¦ e ” “ ¦, ZnO
” ¸‚  “ É r 360 nm s     © œ_  UV F  g`  ¦ f  ¨ à º # Œ 380 nm   H ~ ½ Ó_  PL`  ¦ ~ ½ ÓØ  ¦   H  כ Ü ¼– Ð · ú ˜ 94 R e ”  . NA 1.25 UV E $ ™Ý ¼\  ¦ + ‹" f % 3   H Õ ªa Ë > 3 _  s p t \ " f ^  ¦ à º e ”  1

p

w s  È Òõ s p t  (Õ ªa Ë > 3 (a)) \ " f  H ¸ ú ˜ ˜ Ðs t  · ú §  H


”

¸‚   © œ_  µ 1 Ï F  gì  r Ÿ í_  Ô  ¦ ½ ©g Ë :$ í s  DUV + þ AF  g s p t (Õ ª a Ë

> 3(b))\ " f  H a % ~“ É r – B H à Ô Û ¼à Ԗ Ð ¸ ú ˜
 
e ”   H  כ `  ¦

^

 ¦ à º e ”  . UV Y Us $ \  ¦  6   x # Œ % 3 `  ¦ à º e ”   H / B N œ í& h  + þ

AF  g s p t ˜ Ð   s `›     É r 5 Å q • ¸– Ð ~ 1 >  + þ AF  g% ò  © œ`  ¦ % 3 

`

 ¦ à º e ” 6 £ §`  ¦ ˜ Ð# Œï  r  . s ü < ° ú  “ É r   õ   H ½ ¨» ¡ ¤ ) a DUV + þ

AF  g‰ & ³p  â s  F  g @ /% i  \  -t Ì “ s ì ø ͕ ¸^ ‰
” ¸Ó ü t| 9 _  \ x  + þ

AF  g s p f ç \ • ¸ Ä »6   x >  æ ¼{ 9  à º e ” 6 £ §`  ¦
  · p .

Fig. 4. (Color online) DUV auto fluorescence image of electrospinned fibrinogen fibers.

Æ

Ò– Ð Ä ºo   H „  l ~ ½ Ó   ) a fibrinogen
” ¸‚   [3]_  DUV + þ AF  g s p f ç • ¸ à º' Ÿ  % i  . s  z  ´+ « > % i r  fibrino- gen
” ¸‚  \  + þ AF  g ³ ðd ”  % i Ò  o`  ¦ „  ) € t  · ú §“ ¦ DUV\  ¦ s

6   x ô  Ç + þ AF  g s p f ç `  ¦ à º' Ÿ  % i  . Õ ªa Ë > 4\ 
 è ß – ü <

° ú

 s  à ºz   µm s  © œ U  ´s _  fibrinogen
” ¸‚  s  Ì º§  

>


 
e ”  . fibrinogen
” ¸‚  \   H fibrigogen é ß –Ñ þ ˜| 9 

?

/ Ò\  tryptophan residue  ” > r F    H X < s  tryptophan _

 € ª œ“ É r Õ ªa Ë > 2_  DUV + þ AF  g s p f ç \   6   x ) a 0 l x» ¡ ¤ ) a à Ô w n

ž Ðó ø ͘ Ð  ‰ & ³  y   Œ •“ É r 0 l x • ¸s  . Õ ª QÙ ¼– Ð fibrinogen

” ¸‚  _   ƒ  + þ AF  g`  ¦ s p f ç ½ + É Ã º e ” 6 £ §“ É r, { 9 ì ø Í& h “   Ò q t

^

‰ › ¸f ” s 
 [ jŸ í <  ʓ É r é ß –Ñ þ ˜| 9    & ñ _  DUV + þ AF  g s p f ç s

 0 p x † < Ê`  ¦ ˜ Ð# ŒÅ ҍ  H  כ Ü ¼– Ð ½ ¨» ¡ ¤ ) a DUV + þ AF  g‰ & ³p  â s

 ´ ú §“ É r  Ö ¸6   x • ¸ e ” 6 £ §`  ¦
  · p .

IV. + s Ç Â ] Ø

˜

Ð: Ÿ x  6   x   H + þ AF  g‰ & ³p  â _  F  g † < Æ> \ " f @ /Ó ü tE $ ™Ý ¼ü <

€ 9

' ~ à ÌÛ ¼  Òì  r _  F  g † < Æ> ë ß – ç ß –é ß –y  “ §^ ‰   H ~ ½ Ód ” Ü ¼– Ð 280 nm   © œ% ò % i \ " f  Œ •1 l x   H DUV + þ AF  g‰ & ³p  â `  ¦ $ í /

B N& h Ü ¼– Ð ] j Œ • % i  . ] j Œ •  ) a DUV + þ AF  g ‰ & ³p  ⠓ É r à Ô w n

ž Ðó ø Íõ  fibrinogen
” ¸$ 3 Ä »1 p x _   ƒ  + þ AF  g s p f ç x 9  ZnO
” ¸‚  _  + þ AF  g s p f ç s  0 p x † < Ê`  ¦ ˜ Ð# Œ, ç ß –é ß – >  ]

j Œ •  ) a DUV + þ AF  g‰ & ³p  â s   s š ¸ s p f ç õ  F  g @ /% i  \ 



-t Ì “ s
” ¸Ó ü t| 9 _  \ x + þ AF  g s p f ç \  Ä »6   x >  æ ¼{ 9  à º e ”

6 £ §`  ¦ ˜ Ð# ŒÅ Ò% 3  .

P

c p 8 ý ò k >

‘

: r ƒ  ½ ¨  H “  …  ;@ /† < Ɠ § 2010¸  • ¸  ^ ‰ƒ  ½ ¨q  t " é ¶ \  _ 

# Œ à º' Ÿ ÷ &% 3 6 £ §.

Y

c p w Š à U Ø ”  ô

[1] R. Kim, J. Kim, C. Yoon and S. Kim, New Physics:

Sae Mulli 61, 773 (2011).

[2] B. J. Zeskind, C. D. Jordan, W. Timp, L. Trapani, G. Waller, V. Horodincu, D. J. Ehrlich and P. Mat- sudaira, Nat. Methods 4, 567 (2007).

[3] J. Kim, H. G. Song, C. R. Carlisle, K. Bonin, I. Park and M. Guthold, Micro. Res. Tech. 74, 219 (2011).

[4] R. A. Judge, K. Swift and C. G. Alez, Acta Crystal- logr. D 61, 60 (2005).

[5] G. M. Palmer, P. J. Keely, T. M. Breslin and N. Ra-

manujam, Photochem. Photobiol. 78, 462 (2003).