6장

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멸균과 소독

6장

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6-1. 멸균과 소독

 소독 (disinfection)이란 병원성 미생물의 생명력을 빼앗아 사멸시키거나 증식력을 잃게 하는 것으로, 주로 병원균을 대상으로 화학약품을 사용하여 처리하는 것을 의미하며, 공존하는 비 병원성 미생물의 생사에 대해서는 문제 삼지 않는다.

 멸균 (sterilization): 병원성, 비병원성을 막론하고 모든 미생물을 살멸 또는 제거시키는 것

 소독 및 살균 목적에 쓰이는 약제를 소독약제 (disinfectant) 및 살균제 (germicide, antimicrobiotica)라고 말하고, 이 중에서 특히 부패균 (腐敗菌)이나 발효균의 증식을 저 지하는 목적으로 생체 조직이나 식품에 적용하는 것을 방부제 (antiseptics)라고 한다. 또한 일반적으로 화학약품이나 물리적 수단에 의하여 미생물의 발육을 저해하거나 생명력을 잃 게 하는 것을 항미생물작용 (antimicrobial action)이라고 한다.

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6-2. 멸균 방법

1. 가열멸균법

고압증기멸균법:1.1kg/cm²(15lb/in²)에서 15~20분 멸균-공기제거가 중요

상압증기멸균법: 100℃의 증기 유통. 고압증기멸균에 견디기어려운 불안정한 배지 멸균에 사용, 특히 100℃에서 30분간 1회/1일, 3일간 실시하는 방법을 간헐증기멸균법이라고한다.

건열멸균법: 160 ℃에서 2~4시간 가열, 멸균후 건조단게가 생략됨

자비멸균법: 물 또는 1~2% Na₂CO₃용액을 넣은 소독시에서 15~30분간 끓여 멸균

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화염멸균법: 화염으로 내열기구의 멸균

저온멸균법: 우유나 맥주와 같이 고온에서 변질되는 식품에 적용.

고전적인 방법으로는 62.8 ℃에서 30분간처리하지만

대량의 우유를 멸균하기위해 순간저온살균법(flash pasteurization; High temperature short time (HTST)으로 71 ℃에서 15초 처리.

초고온 순간 멸균법(Ultra-high temperature sterilization)은 130~150 ℃에서 1~2초간 실시.

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2. 여과 멸균법

액체여과 멸균법 : 막여과기는 셀룰로오스의 혼합 에스테르로 0.45㎛, 0.2 ㎛공극 사용.

Berkefeld 여과기는 규조토로, Chamberland여과기는 카올린과 규사를 혼합한 돚기 재로로, 그리고 Seitz여과기는 석면으로 채워진 여과기로 현재 음용수 여과에 사용

공기여과멸균기 : 예로부터 솜이나 유리섬유 사용. HEPA filter사용(High efficiency

particulate air filter).0.3 ㎛크기의 입자를 99.97%제거. 조작시에 안전성 위해 Laminar flow biological safety cabinet 사용.

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3. 조사 멸균법:

이온화 조사멸균법: ⁶⁰CO 또는 ¹³⁷Cs등의 방사선 선원으로부터 감마선 조사 자외선 멸균법(UV radiation) 보통 파장 254 nm부근의 자외선을 조사

4. 가스멸균법 :

화학물질의 증기를 이용하여 미생물을 멸균. Ethylene oxide 또는β-propiolactone 등 가스사용. 단백질,핵산 등의 세포내 구성물을 알킬화한다.

단백질을 알킬화하는데 독성이 강하고 폭발하기 쉬워 이산화탄소와 혼합하여 사용.

카복사이드(Carboxide): 10%에틸렌 옥사이드 + 90% 이산화탄소 옥시품(Oxyfume): 20% 에틸렌옥사이드 + 80% 이산화탄소

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• 1. 소독제의 살균력 검정

• 페놀 계수 또는 석탄산계수 (石炭酸係數; phenol coefficient) : 페놀의 살균력을 표준으로 하여 그것에 대한 비교 수치

• 살균력 검정에는 표준 균주로 장티푸스균 (Salmonella typhi), 황색포도상구균 (Staphylococcus aureus) 을 사용한다.

• 검정 소독제와 페놀의 각 희석액을 표준균주에 처리하였을 때, 5분 이내에 균이 사멸하지 않고 10분 이내에 균이 완전히 사멸하는 희석배수를 각각 구하여, 검정 소독제의 희석배수 와 페놀의 희석배수의 비를 구하여 페놀계수를 산정한다

6-3. 소독제

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2. 페놀류 (phenol)

(1) 석탄산(phenol; ) (2) 크레졸 (cresol )

(3) 헥실레졸신올 (hexylresorcinol) (4) 헥사클로로펜 (hexachlorophene)

3. 산화제

(1) 과망간산칼륨 (potassium permanganate; KMnO4) (2) 과산화수소 (hydrogen peroxide; H2O2)

① 염소 (chlorine, Cl2) ② 표백분 (bleaching powder; CaOCl2)

③ 차아염소산나트륨 (sodium hypochloride, NaClO) ④ 클로라민 T (chloramine T)

⑤ 요오드 (iodine; I2) ⑥ 포비돈 요오드 (povidone iodine)

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4. 중금속염류

(1) 수은화합물 :

①염화 제이수은 (승홍, mercuric chloride, HgCl2) ② 머큐로크롬 (mercurochrome)

③ 머치올레이트(merthiolate: 치오머살Thiomersal) ④ 페닐초산수은 (phenylmercuric acetate)

(2) 은 화합물 :

① 질산은 (silver nitrate AgNO3) ② 프로테인은 (protargol)

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5. 알코올류 :

70% 에탄올, 30～50% 이소프로필알코올

6. 알데히드류

포름알데히드 (formaldehyde; HCHO)

7.역성비누 (invert soap)

알킬기를 함유한 비누 분자의 주체가 양이온으로 작용하는 군의 4급 암모늄 화합 benzalkonium chloride (Zephiran) 사용

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8. 색소제

(1) 아크리플라빈(Acriflavine):

(2) 아크리놀(Acrinol):

(3) Gentian violet , crystal violet:

9. 산, 알칼리류

(1) 붕산 (boric acid, H₃BO₃) (2) 초산 (acetic acid, CH3COOH)

(3) 수산화칼륨 (KOH)과 수산화나트륨 (NaOH)

(4) 제 2 및 제 3 인산나트륨 (disodium/trisodium phosphate) (5) 생석회 (quick lime; CaO)