서 론
한국인에서 발생하는 악성종양 중 발생빈도가 높은 위선 암종은 조직학적 소견, 침윤양상, 림프절 전이 유무 등이 예 후와 관련이 있으며(1) 최근에는 위암의 발생과 진행에 따 른 종양세포의 유전자이상, 종양유전자와 종양억제유전자 의 역할에 대한 관심이 높아지고 있다. 위선암종은 Lauren 의 분류(7)에 따라 장형 선암종과 미만형 선암종으로 분류 할 수 있으며 이 두 유형은 형태학적으로나 임상적으로도 차이가 있다.(1,2) 발암과정에 관여하는 다양한 유전자 중 p53 유전자이상이 중요하다고 알려져 있는데(3) p53은 유방 암종, 폐암종, 두경부암종 등에서 가장 흔하게 돌연변이를 일으키는 유전자 중 하나이며, 돌연변이형의 p53 단백은 정 상적인 p53 유전자의 기능이 소실되어 손상된 DNA가 복구 되지 않고 다른 유전자 돌연변이의 기회를 증가시켜 발암 과정에 관여한다.(4)
CREB-binding protein (CBP)은 다양한 DNA 의존성 전사
위선암종에서 p53 단백 및 CREB-결합 단백의 면역조직화학적 발현양상
중앙대학교 의과대학 외과학교실, 1병리학교실
노태호·지경천·임현묵·이정효·박용검·김범규·김미경1·김진수1
Immunohistochemical Expression of p53 Pro- tein and CREB-binding Protein in Gastric Ade- nocarcinomas
Tae Ho Noh, M.D, Kyung Choun Chi, M.D, Hyun Muk Lim, M.D, Jung Hyo Lee, M.D, Yong Gum Park, M,D, Beom Gyu Kim, M.D, Mi Kyung Kim, M.D.1and Jin Soo Kim, M.D.1
Purpose: The wild-type p53 protein participates in suppre- ssing cell transformations while its mutant forms has tumorigenic potential. Alterations in the structure of the p53 protein are one of the most common changes associated with human cancers. CREB-binding protein (CBP) and its homologue, p300, are transcriptional co-activators of various sequence-specific DNA-binding transcription factors and are involved in a wide range of cellular activities, such as DNA repair, cell growth, differentiation, and apoptosis. Several studies suggested that an association between p53 and p300 might account for the p53-responsible negative regula- tion. This study examined the relationship between p53 and CBP expression in terms of the clinicopathological factors and significance.
Methods: The level of p53 protein and CBP expression was measured in 150 gastric adenocarcinoma patients, who had undergone a gastrectomy, and the relationship between p53 and CBP was examined. Immunohistochemical stain was performed on formalin-fixed paraffin-embedded sections using monoclonal anti-p53 and anti-CBP antibody.
Results: 1. p53 protein was expressed in 46.3% (31/67) of early gastric cancers (EGC), 69.9% (58/83) of advanced gastric cancers (AGC)(P＜0.05), 69.1% (65/94) of the intes- tinal type, 42.9% (24/56) of the diffuse type (P＜0.05), 78.5% (55/70) of patients with a lymph node metastasis and
42.5% (34/80) of patients without a lymph node metastasis (P＜0.01). 2. CBP expression was observed in 65% (61/94) of intestinal type, 51% (29/56) of the diffuse type (P＞0.05), 47.8% (32/67) of EGC, 69.8% (58/83) of AGC (P＜0.05), 68.6% (48/70) of patients with a lymph node metastasis and 52.5% (42/80) of patients without a lymph node metastasis (P＞0.05). 3. p53 protein and CBP expression was coinci- dentally observed in 66.7% of gastric adenocarcinomas, and there was a significant correlation between the expression of both (P＜0.05).
Conclusion: That the expression of the p53 protein and CBP indirectly indicate the malignant potential of a cell, and may play an indirect role in the CBP and p53-mediated tumorigenic potential. (J Korean Surg Soc 2007;72:467- 472)
Key Words: p53, CBP, Stomach, Adenocarcinoma 중심 단어: p53, CBP, 위, 선암종
Departments of Surgery and 1Pathology, College of Medicine, Chung-Ang University, Seoul, Korea
책임저자：지경천, 서울시 용산구 한강로 3가 65-207 ꂕ 140-757, 중앙대학교 용산병원 외과 Tel: 02-748-9959, Fax: 02-793-1042 E-mail: [email protected]
접수일：2006년 12월 28일, 게재승인일：2007년 4월 10일 이 논문은 2007년 대한외과학회 춘계학술대회에서 포스터 발표 되었음.
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인자들의 활성인자 중 하나로 DNA 복구, 세포의 성장 및 분화, 세포고사 등과 같은 다양한 세포활동에 관여하는데 발암과정에서의 역할은 아직 규명되지 않은 채 논란의 대 상이 되고 있으나 최근 들어 종양억제역할에 대한 연구결 과들이 보고되고 있다.(5) 특히 p53과의 상호작용에 의한 성장억제효과에 대해 초점이 모아지고 있는데 이러한 CBP 의 성장억제능력은 p53과 관련되어 이루어지리라 추측되 고 있고 p53의 N-terminal region의 인산화로 인해 p53 활동 을 극대화한다는 보고도 있다.(6,15,17-22)
한국인에서 발생빈도가 높은 위선암종에서 종양의 발생 에 관여하는 대표적인 종양억제유전자인 p53의 돌연변이 형 p53 단백과 더불어 최근 들어 연구가 진행되고 있는 CBP의 발현정도를 면역조직화학적 염색을 시행하여 확인 하고, 병리조직학적 예후인자들과 연관성을 비교하여 위선 암종조직에서의 p53 단백 및 CBP 발현의 의의, 발암과정에 서의 상호작용에 의한 일부 역할수행여부를 인체 위선암조 직에서 알아보고자 하였다.
방 법
1) 연구재료 및 방법
중앙대학교 의과대학 용산병원에서 1995년 1월부터 2005 년 12월까지 위선암종으로 위 절제술을 시행 받은 환자의 위암조직표본 중 보존상태가 양호한 파라핀 포매괴 150예 를 연구대상으로 하였다.
환자의 기록을 검토하여 침윤깊이 및 림프절 전이유무를 조사하였다. 위선암종의 조직학적 분류는 Lauren의 분류법 (7)에 따라 종양세포가 주로 선구조로 구성되어 있는 장형 과 종양세포가 작고 둥근모양이며 낱개로 흩어져 선구조를 형성하지 않으며 경계가 불분명한 미만형으로 분류하였다.
2) 면역조직화학적 염색
각 예의 파라핀 포매 조직에서 4∼5μm 두께의 절편을 박절하고 탈파라핀하고, 무수 알코올, 90%, 75% 및 50% 알 코올에서 차례대로 함수과정을 거쳐서 증류수에 5분간 수 세하였다. 내인성 과산화효소의 활성을 억제하기 위해 0.5% hydrogen peroxide에 10분간 처리 후 증류수로 수세하 였다. 항원성 회복을 위하여 10 mM citrate (pH 6.0) 완충액 에 담가 5분간 2회 극초단파 처리 후 실온에서 냉각시키고 50 mM Tris 완충용액(TBS, pH 7.5)으로 수세하였다. 면역조 직화학염색의 비특이적 반응을 제거하기 위해 30분간 염소 혈청으로 처리하고, 여분의 용액을 제거한 다음 일차항체 인 p53 (D0-7, Santa Cruz Biotechnology Zymed Co, USA, mouse monoclonal, 1：50)과 CBP (C-1 SC7300, Santa Cruz Biotechnology Zymed Co, USA, mouse monoclonal, 1：50)을 실온에서 하룻밤 반응시킨 후 TBS로 5분간 3회 수세한 다 음 biotin이 부착된 이차항체(Zymed Co. USA)에 20분간 작
용 후, streptavidin과 결합한 과산화 효소 복합체를 가하여 20분간 반응시킨 후 AEC chromogen (3-amino-9-ethylcar- bazole) 용액으로 발색하고 Mayer hematoxylin으로 대조 염 색을 실시하여 광학현미경으로 관찰하였다. 면역조직화학 염색반응의 음성 대조군으로는 위선암종조직에서 일차 항체 를 처리하지 않고 음성대조 시약으로 대체하여 이용하였다.
3) 면역조직화학적 염색 판정 및 분석
p53 단백과 CBP에 대한 염색의 판정은 종양세포의 핵에 분명한 적갈색으로 염색된 경우를 양성으로 판정하였고 면 역조직화학적 반응도의 평가는 Sasatomi 등(1996)의 기준에 의거하여 전체세포의 10% 이상에서 염색상을 보일 때 양성 으로 판정하였고 염색상이 10∼50%인 경우를 + (국소적), 50% 이상인 경우를 ++ (다발성)으로 판정하였다.
통계학적 유의성은 chi-square test로 분석하여 P＜0.05인 것을 의의 있는 것으로 하였다.
결 과
1) 병리학적 소견
조직학적으로 장형 위선암종은 94예, 미만형 위선암종은 56예였고 조기 위암은 67예, 진행성 위암은 83예였으며 림 프절 전이가 있는 위선암종은 70예, 림프절 전이가 없는 위 선암종은 80예였다.
2) p53 단백의 발현
돌연변이형 p53 단백(p53 단백)의 발현양상은 장형 위선 암종에서는 전반적으로 종양세포의 핵에 염색된 정도인 발 현강도가 높고, 다발성의 발현을 보였으나 미만형에서는 발현을 나타내기는 하나 발현강도도 장형 위선암종에 비해 약하고 국소적 발현을 나타냈다. 장형 위선암종에서는 94 예 중 21예(22.3%)에서 국소적 발현을 나타냈고 44예 (46.8%)에서 다발성 발현을 보였다. 미만형 위선암종 56예 중 14예(25%)에서 국소적 발현을, 10예(17.9%)에서 다발성 발현을 나타냈다. 조기 위암 67예 중 20예(29.9%)에서 국소 적 발현을, 11예(16.4%)에서 다발성 발현을 보였고 진행성 위암 83예에서는 15예(18.1%)에서 국소적 발현을 43예 (51.8%)에서 다발성 발현양상을 나타냈다. 림프절 전이가 있는 70예 중 15예(21.4%)에서 국소적 발현을, 40예(57.1%) 에서 다발성 발현이 관찰되었고 림프절 전이가 없는 80예 에서는 20예(25%)에서 국소적 발현을, 14예(17.5%)에서 다 발성 발현을 나타냈다. 따라서 p53 단백은 미만형 위선암종 보다는 장형 위선암종에서 의미 있는 발현양상을 보였고(P
＜0.05), 조기 위암보다는 진행성 위암에서 의미 있게 높았 으며(P＜0.05), 림프절 전이가 없는 경우보다 림프절 전이 가 있는 경우에서 높은 발현율을 나타냈다(P＜0.01)(Table 1, Fig. 1).
3) CBP의 발현
CBP의 발현양상은 장형 위선암종에서는 94예 중 37예 (39.4%)에서 국소적 발현을 나타냈고 24예(25.5%)에서 다발 성 발현을 보였다. 미만형 위선암종 56예 중 12예(21.4%)에 서 국소적 발현을, 17예(30.4%)에서 다발성 발현을 나타냈 다. 조기 위암 67예 중 20예(29.9%)에서 국소적 발현을, 12 예(17.9%)에서 다발성 발현을 보였고 진행성 위암 83예에 서는 29예(34.9%)에서 국소적 발현을, 29예(34.9%)에서 다 발성 발현양상을 나타냈다. 림프절 전이가 있는 70예 중 27 예(38.6%)에서 국소적 발현을, 21예(30%)에서 다발성 발현 이 관찰되었고, 림프절 전이가 없는 80예에서는 22예(27.5%) 에서 국소적 발현을, 20예(25%)에서 다발성 발현을 나타냈 다. 따라서 CBP은 미만형 위선암종보다는 장형 위선암종에 서 다소 높은 발현율을 보였으나 통계학적 의의는 없었고(P＞
0.05), 조기 위암보다는 진행성 위암에서 의미 있게 높았으 며(P＜0.05) 림프절 전이가 없는 경우보다 림프절 전이가
있는 경우에서 높은 발현을 보였으나 통계학적 의의는 없 었다(P＞0.05)(Table 2, Fig. 2).
4) 위선암종에서 p53 단백 및 CBP의 동일 양상 발현율
총 150예의 위선암종에서 p53 단백과 CBP는 66.7%의 동 일 양상 발현율을 나타냈다(P＜0.05)(Table 3).
고 찰
한국인에서 발생빈도가 높은 위선암종은 발암기전에 대 한 연구가 절실히 요구되고 있고 또한 위암의 예후를 예견 하기 위해서 많은 인자들의 검색이 진행되고 있다. p53 단 백은 DNA종양 바이러스인 SV (simian virus) 40의 T 항원에 결합하는 특성으로 인해 처음 분리되었고(8) 그것의 유전자 는 17번 염색체의 단완의 13 band에 존재하는 종양억제유 전자로 돌연변이형 p53은 사람에서 발생하는 종양의 반수 에서 발견되며 이것은 종양의 병인에 기본적으로 중요한
Fig. 1. Immunostain for p53 shows diffuse strong nuclear reaction in gastric adenocarcinoma of intestinal type (left) and nega- tive nuclear reaction in dif- fuse type (right)(×200).
Table 1. p53 protein expression in gastric adenocarcinomas p53 protein (%)
Number of case
(-) (+) (++)
Histologic type*
Intestinal 94 29 (30.9) 21 (22.3) 44 (46.8) Diffuse 56 32 (57.1) 14 (25) 10 (17.9) Depth of invasion*
EGC 67 36 (53.7) 20 (29.9) 11 (16.4)
AGC 83 25 (30.1) 15 (18.1) 43 (51.8)
LN metastasis†
Positive 70 15 (21.4) 15 (21.4) 41 (57.1) Negative 80 46 (57.5) 20 (25) 14 (17.5) Histologic type = Lauren classification; EGC = early gastric carcinoma; AGC = advanced gastric carcinoma; LN = lymph node;
CBP = CREB-binding protein. *P＜0.05, †P＜0.01.
Table 2. CBP expression in gastric adenocarcinomas CBP (%)
Number of case
(-) (+) (++)
Histologic type
Intestinal 94 33 (35.1) 37 (39.4) 24 (25.5) Diffuse 56 27 (48.2) 12 (21.4) 17 (30.4) Depth of invasion*
EGC 67 35 (52.2) 20 (29.9) 12 (17.9)
AGC 83 25 (30.2) 29 (34.9) 29 (34.9)
LN metastasis
Positive 70 22 (31.4) 27 (38.6) 1 (30) Negative 80 38 (47.5) 22 (27.5) 20 (25) Histologic type = Lauren classification; EGC = early gastric carcinoma; AGC = advanced gastric carcinoma; LN = lymph node;
CBP = CREB-binding protein. *P＜0.05.
단계임을 시사한다.(9,24) 이 유전자는 세포가 손상을 받으 면 세포성장 주기의 G1기에서 세포의 성장을 억제하고 손 상된 DNA를 복구하여 정상으로 회복시키거나 혹은 손상이 심하여 복구가 어려우면 세포자멸사에 의해 세포사를 유도 하여 결과적으로 종양의 발생을 억제한다. 그러나 돌연변 이 된 p53 유전자는 p53 종양억제 유전자의 본래의 억제기 능을 상실하여 숙주세포가 종양세포로 전환되어 여러 종류 의 암발생에 관여하는 것으로 알려져 있다.(10,25,26) 또한 유전자의 돌연변이나 다른 세포성 단백 또는 바이러스성 단백과 야생형 p53 단백의 결합에 의하여 야생형 p53 단백 의 정상적인 기능이 소실되면 세포증식이 유발되고 또한 p53 단백은 화학적으로 안정되어 핵내에 축적된다.(4,9) p53 단백의 과발현은 폐, 대장, 유방 등 많은 인체암에서 보고되 고 있다.(11,27,28) p53 단백은 전암성 단계에서도 발견되므 로 발암현상의 중요한 사건으로 인식되고 있으나 그 작용 시기는 아직까지 논란의 대상이 되고 있으며(12) 종양의 생 물학적 악성도와 연관이 있는 경우가 많아서 각 종양의 예 후인자의 하나로 취급되고 있다.(13). 위암에서의 p53 단백 에 관한 연구로 Hurliman 등(1994)은 장형 위선암종에서 71%, 미만형에서 11%의 발현율을 보고했고 또 다른 보고 에 따르면 장형에서 56%, 미만형에서 27%의 양성 발현율 을 보고하면서 장형 위선암종의 종양세포에서 많은 발현을
나타내고 미만형의 경우는 소수의 종양세포에서 발현되는 것으로 보아 p53 유전자의 돌연변이가 장형 위선암종의 발 암과정에 관여한다고 주장하였다. 본 연구에서 p53 단백은 정상 위점막상피세포에서 거의 발현되지 않았고 장형 위선 암종에서 69.1%, 미만형 위선암종에서 42.9%의 발현율을 보여 통계학적으로 의미 있는 차이를 나타냈고 발현강도도 미만형의 경우 다발성 발현을 보이더라도 발현강도가 약한 반면 장형 위선암종의 경우 46.8%에서 다발성 발현과 함께 종양세포 핵내에 강한 발현강도를 나타내었다. 암의 진행 에 따른 p53 유전자의 돌연변이를 주장하는 보고도 있는데 (14) 본 연구에서도 조기 위암에서 46.3%의 발현율을 보인 반면 진행성 위암에서는 69.9%의 발현율을 나타내어 암의 진행에 따른 발현의 차이를 보였고 다발성의 강한 발현도 조기 위암(16.4%)보다 진행성 위암(51.8%)에서 의미 있게 높았다. 또한 림프절 전이유무에 따른 p53 단백 발현이 가 장 큰 차이를 보였는데 림프절 전이가 있는 경우 78.5%, 림 프절 전이가 없는 경우 42.5%로 통계적으로 의미 있는 발현 율의 차이를 나타냈다. 이는 림프절 전이가 있는 경우 대부 분 예후가 좋지 않고 이런 예들에서 p53 단백의 과발현이 있 다는 연구결과와 일치하는 소견이라 하겠다.(14)
CBP은 DNA와 결합하는 여러 특이적 전사인자들의 활성 인자(transcriptional co-activator)로 DNA 복구, 세포증식 및 분화 등의 세포 내 활동에 관여한다.(5) 또한 종양 억제자로 서의 역할이 몇몇 연구자들에 의해 보고되고 있다.(15) 특 히 여러 보고자들에 의해 두경부 암종 및 전암성 병변에서 CBP가 높은 발현율을 보여 발암단계에서의 CBP의 역할을 시사하고 있다.(16) 본 연구에서 CBP은 정상 위점막상피세 포에서는 발현되지 않았고, 장형 위선암종(65%)에서 미만 형 위선암종(51%)보다 다소 높은 발현을 나타냈다. 진행성 위암의 경우 69.8%로 47.8%의 발현율을 보인 조기 위암에 비해 의미 있는 차이를 나타냈다(P＜ 0.05). 림프절 전이유무 에서는 통계학적 의의가 없었다(P＞0.05). 전반적으로 발현 율이 낮고 발현강도도 약하였지만 CBP는 위선암종에서 p53 단백과 유사한 발현양상을 보였다. 이는 p53 단백과 마 Fig. 2. Immunostain for CBP shows diffuse strong nuclear reac- tion in gastric adenocarci- noma of intestinal type (left) and negative nuclear reaction in diffuse type (right)(×200).
Table 3. Comparison of expression between p53 protein and CBP in gastric adenocarcinomas
p53 protein
(-) (+) (++)
CBP
(-) 43 (28.7) 10 (6.7) 7 (4.7)
(+) 11 (7.2) 24 (16) 14 (9.3)
(++) 7 (4.7) 1 (0.7) 33 (22)
( ) : % of positive cells.
찬가지로 위선암종에서 CBP가 일부 역할을 수행하고 있음 을 시사하는 소견이라 하겠고 또한 총 150예의 위선암종 중 p53 단백과 CBP은 66.7%의 동일 양상 발현율을 보여 발암 과정에서의 이들 단백의 상호작용이 이루어짐을 시사하는 소견이라 하겠다. 하지만, CBP의 경우 최근 들어 연구가 진 행되고 있어 두경부 암종 등 일부 암종에서의 보고만 있을 뿐 위암종에서의 연구가 드물고 또한 위암종에서의 p53에 대한 연구보고는 많지만 CBP와의 상호작용에 대한 연구보 고는 거의 없다. 따라서, 본 연구 결과를 토대로 이러한 소 견들을 뒷받침하기 위한 보다 세밀한 분자생물학적 연구가 필요하다 하겠고 위암환자의 조직표본을 이용한 연구라는 점에서 본 연구의 가치가 있다 하겠다. 이상의 결과로 위선 암종에서 p53 단백과 CBP는 장형 위선암종의 발암과정에 관련이 있으며 발암과정에서의 상호작용에 의한 일부 역할 수행이 있을 것으로 생각된다.
결 론
위선암종으로 수술받은 환자 150예를 대상으로 조직표본 에서 p53단백 및 CBP의 발현을 관찰하고 이들간의 상호 연 관성 및 병리학적 인자들과의 관계를 조사하기 위하여 면역 조직화학적 염색을 시행하여 다음과 같은 결과를 얻었다.
1. p53 단백의 발현은 장형 위선암종(69.1%)에서 미만형 위선암종(42.9%)보다 높게 나타났으며(P＜0.05), 조기 위암 (46.3%)보다 진행성 위암(69.9%)에서 높은 발현율을 보였고 (P＜0.05), 림프절 전이가 있는 경우(78.5%)가 림프절 전이가 없는 경우(42.5%)보다 의미 있는 발현양상을 나타냈다(P＜
0.01).
2. CBP의 발현은 장형 위선암종(65%)에서 미만형 위선암 종(51%)보다 다소 높게 나타났으나 통계학적 의의는 없었 고(P＞0.05), 조기 위암(47.8%)보다 진행성 위암(69.8%)에서 높은 발현율을 보였고(P＜0.05), 림프절 전이가 있는 경우 (68.6%)가 림프절 전이가 없는 경우(52.5%)보다 높은 발현 양상을 나타냈으나 통계학적 의의는 없었다(P＞0.05).
3. 총 150예의 위선암종에서 p53 단백과 CBP는 66.7%의 동일 양상 발현율을 나타냈다(P＜0.05).
이상의 결과로 p53 단백과 CBP 발현은 장형 위선암종에 서의 생물학적 악성도에 관한 예후인자로서의 가능성을 보 였으며, 또한 이들 단백의 발현부위도 통계학적으로 의미 있는 일치양상을 나타내어 발암과정 중 상호작용에 의한 일부 역할을 수행하리라 생각된다.
REFERENCES
1) Davessar K, Pezzulo JC, Kessimian N, Hale JH, Jauregui HO.
Gastric carcinoma: prognostic significance of several patho- logic parameters and histologic classification. Hum Pathol
1990;21:325-32.
2) Munoz N, Correa P, Cuello E. Histologic types of gastric carcinoma in high- and low-risk areas. Int J Cancer 1968;3:
809-18.
3) Tahara E, Semba S, Tahara H. Molecular biological obser- vations in gastric cancer. Semin Oncol 1996;23:307-15.
4) Zambetti GP, Levine AJ. A comparison of the biologic acti- vities of wild type and mutant p53. FASEB J 1993;7:855-62.
5) Goodman RH, Smolik S. CBP/p300 in cell growth, trans- formation and development. Genes Dev 2000;14:1553-77.
6) Gu W, Roeder RG. Activation of p53 sequence specific DNA- binding by acetylation of the C-terminal domain. Cell 1997;
90:595-606.
7) Lauren P. The two histologic main types of gastric carcinoma:
diffuse and so-called intestinal type carcinoma. Acta Path Microbiol Scand 1965;64:31-49.
8) Lane DP, Crawford LV. T antigen is bound to a host protein in SV40 transformed cells. Nature 1979;278:261-3.
9) Hollstein M, Sidransky D, Volgelstein B, Harris CC. p53 mutations in human cancers. Science 1991;253:49-53.
10) Yonish RE, Lotem J, Sachs L, Kimchi A, Oren M. Wild type p53 induces apoptosis of myeloid leukemic cells that is inhibited by interleukin. Nature 1991;352:345-52.
11) Bartek J, Bartkova J, Vojtesek B. Aberrant expression of the p53 oncoprotein in a common feature of a wide spectrum of human malignancies. Oncogene 1991;6:1699-703.
12) Levine AJ, Momand J, Finlay C. The p53 tumor suppressor gene. Nature 1991;351:453-6.
13) Diller L, Kassel J, Nelson CE. p53 funtions as a cell cycle control protein in osteosarcoma. Mol Cell Biol 1990;10:
5772-83.
14) Starzynska T, Bromley M, Ghosh A, Stern PL. Prognostic significance of p53 overexpression in gastric and colorectal carcinoma. Br J Cancer 1992;66:558-62.
15) Grossman SR. P300/CBP/p53 interaction and regulation of the p53 response. Eur J Biochem 2001;268:2773-8.
16) Lavielle JP, Brambilla E, Riva-Lavieille C, Reyt E, Charachon R, Brambilla C. Immunohischemical detection of p53 protein in preneoplastic lesions and squamous cell carcinoma of the head and neck. Acta Otolaryngol 1995;115:334-9.
17) Sakaguchi K, Herrera JE, Saito S, Miki T, Bustin M, Vassilev A, et al. DNA damage activates p53 through a phosphory- lation-acetylation cascade. Genes Dev 1998;12:2831-41.
18) Giordano A, Avantaggiati ML. p300 and CBP, partners for life and death. J Cell Physiol 1999;181:218-30.
19) Kobet E, Zeng X, Zhu Y, Keller D, Lu H. MDM-2 inhibits p300-mediated p53 acetylation and activation by following a ternary complex with the two proteins. Proc Natl Acad Sci USA 2000;97:12547-52.
20) Appella E, Anderson CW. Post-translational modifications and activation of p53 by genotoxic stresses. Eur J Biochem 2001;
268:2764-72.
21) Ito A, Lai CH, Zhao X, Saito SI, Hamilton M, Appella E, et al. p300/CBP-mediated p53 acetylation is commonly induced by p53-activating agents and inhibited by MDM-2.
EMBO J 2001;20:1331-40.
22) Vo N, Goodman RH. CREB-binding protein and p300 in transcriptional regulation. J Biol Chem 2001;276:13505-8.
23) Sasatomi E, Tokunaga O, Miyazaki, K. Spontaneous apoptosis in gallbladder carcinoma; relationships with clinicopathologic factors, expression of E-cadherin, Bcl-2 protooncogene, and p53 oncosuppressor gene. Cancer 1996;78:2101-10.
24) Vogelstein B, Kinzler KW. p53 function and dysfunction. Cell 1992;70:523-6.
25) Lane DP. p53, guardian of the genome. Nature 1992;358:
15-6.
26) Chang F, Syrjanen S, Tervahauta A, Syrjanen K. Tumori- genesis associated with the p53 tumor suppressor gene. Br J Cancer 1993;68:653-61.
27) Bosari S, Viale G, Roncalli M. p53 gene mutations, p53 protein accumulation and compartmentalization in colorectal adenocarcinoma. Am J Pathol 1995;147:790-8.
28) Lazaris AC, theodoropoulos GE, Anastassopoulos P, Nako- poulou L, Panoussopoulos D, Papadimitriou, K. Prognostic significance of p53 and C-erB2 immunohistochemical evalua- tion in colorectal adenocarcinoma. Histopathol 1995;10:661-8.
