서 9)론
최근에 변산 전통 八仙酒에 사용되는 釀造用 水의 세포독성과 항암활성 및 암 전이 억제물 질을 조사하기 위하여 양조용수를 농도별로 NIH 3T3 섬유모세포, 인체 구강유상피암종세 포 및 피부흑색종세포에 적용한 후, MTT 분석 법, Ag-NOR 검사, SRB 분석법 및 PAS 염색 을 실시하였다. NIH 3T3 섬유모세포에 대한 세포독성은 무독성이었으나, 인체 구강유상피 암종세포 및 피부흑색종세포에 대한 항암활성
▪교신저자 : 이호섭, 전북 익산시 신룡동 344-2 원광대학교 한의학전문대 학원 Tel. 063-850-6841, Fax : 063-850-6841,
E-mail : [email protected]
본 연구는 한국과학재단, 전락북도청, 의약자원연구센터의 연구지원 (98-16-01-04-A-3)과 BK21사업지원에 의해 수행된 것임.
은 유의하였고, Ag-NOR 수의 감소와 PAS 음 성반응은 암전이에 관여하는 부착단백량에 영 향을 미칠 것으로 사료된다는 보고를 하였다.1) 한 등2)은 카드뮴, E. coli, endotoxin과 Salmonella endotoxin이 NIH 3T3 섬유모세포 에 미치는 세포독성을 검정하고, 八仙釀造用水 가 E. coli endotoxin에 대하여 해독경감효과가 높게 나타났으며, 카드뮴과 Salmonella endotoxin에 대하여도 10-2 mg/ml 농도와 10-3 mg/ml 농도에서 유의한 해독경감효과가 있다 고 보고한 바 있다.
신장의 기능은 노폐물질의 배설과 항상성 유 지, 산․염기평형에 기여 및 내분비기관의 역 할 (renin 과 renal erythropoietic factor)을 한 다 신장에서의 체액조절은 sodium 배설량에 의해 좌우되며, 이는 사구체 여과율, 신혈류역
八仙釀造用水의 利尿效果
백승화1․신지희1․정우영2․한두석2․한종현1․이호섭1
원광대학교 한의학전문대학원1⋅원광대학교 치과대학 구강해부학교실2
Diuretic Effects of Palsun Brewing Water
Seung-Hwa Baek1․Ji-Hee Shin1․Woo-Young Chung2․Du-Seok Han2․ Jong-Hyun Han1․Ho-Sub Lee1
Professional Graduate School of Oriental Medicine1, Dept. of Oral Anatomy, College of Dentistry2,
Wonkwang University
Abstract
This study was attempted to investigate diuretic effects after the administration of Palsun Brewing Water in rats. Changes of renal function were evaluated by water balance, urine volume, urinary excretion of eletrolytes and creatinine, free water clearance, plasma levels of atrial natriuretic peptide and aldosterone.
The administration of Palsun Brewing Water accompanied with the decrease of water balance and amounts of potassium, with the increase of amounts of electrolytes, sodium and free water clearance excreted in urine. It accompanied with the increase of urinary excretion of creatinine, with the decrease of plasma levels of atrial natriuretic peptide and aldosterone in rats.
Key Words : Diuretic effects, Water balance, Urine volume, Urinary excretion of eletrolytes, Creatinine, Free water clearance, Atrial natriuretic peptide, Aldosterone
J. K or. A M – M eridian & Pointology Soc.
동학적 요인과 교감신경계 및 renin-angio- tensin-aldosterone계, antideuretic hormone (ADH), atrial natriuretic peptide(ANP), progtaglandins 등에 의하여 조절되고, 사구체 여과율의 변동은 sodium 배설과 평행적 관계 가 있으며, 신혈류력활동적 요인에는 신관류압, 신혈관저항, 혈관팽창압등이 관계한다.3) 이뇨 의 기전은 수분성이뇨, 삼투성이뇨 및 약물에 의한 이뇨로 나뉘어지는데, 수분성이뇨는 원위 세뇨관과 집합관에서 수분흡수가 되지 않기 때 문에 용질의 배설양은 증가하지 않고 뇨량만 증가하는 저장성 뇨가 배설되고, 삼투성이뇨는 용질의 배설량이 증가되어 수분의 배설이 증가 되고 2차적으로 Na+와 수분의 재흡수가 억제 되어 고장성 뇨를 배설하게 되며, 약물에 의한 이뇨는 신세뇨관에서 주로 Na+ 재흡수를 억제 하여 뇨량이 증가되는 것을 말한다.4,5)
천연물로부터 조제한 추출물의 이뇨효과를 측정한 연구도 다양하여 송6)은 濟生腎氣丸 煎湯 液이 토끼의 신장기능에 미치는 영향을 연구하 여 신혈역동학적 변화와 혈장 renin 활성도 및 혈장 aldosterone 농도의 감소에 기인한 이뇨효 과가 인정된다고 보고하였고, 장7)은 三焦兪, 膀 胱兪 芮灸가 토끼의 신장기능에 미치는 영향에 관한 연구에서 사구체 여과율과 유리수분 배설 량의 증가 및 혈장 aldosterone의 유의한 감소 에 의한 이뇨효과는 인정하였으며, 국8), 김9), 박
10)등의 연구에서도 胃笭湯 煎湯液, 五味子 및 冬 瓜肉의 生․熟汁등이 흰쥐의 신기능에 미치는 영향에 관한 결과에서 뇨량의 감소, ANP농도의 감소, 뇨중 Na+배량의 감소, 혈중 creatinine 배 설량 증가 및 수분평형의 유의한 감소로 인한 이뇨효과를 인정한다고 보고하였다.
본 연구에서는 八仙釀造用水의 여러 가지 약 리효과를 측정하여 건강식품을 개발할 목적으 로 산학협동과제를 수행하고 있으며 八仙釀造 用水의 이뇨효과를 검색하기 위하여 四本 四根 으로부터 조제한 八仙釀造用水를 투여한 후 이 뇨효과 측정에 다양하게 이용되는 신장기능에 미치는 영향, 혈장 aldosterone 및 atrial natriuretic peptide (ANP) 농도의 변동을 관찰
하여 유의한 결과를 얻었기에 보고하는 바이다.
실험재료 및 방법
동 물 - 실험동물은 체중 200-250 g 내외의 Sprague-Dawley계 흰쥐를 사료와 물을 충분 히 주어 2주 동안 실험실 환경에 적응시킨 후 실험에 사용하였다.
八仙釀造用水의 제조 - 실험에 사용한 약재 는 부안군 상서면에 자생하거나 재배한 四本 四根을 채취하여 음건한 四本 4근 8가지 약재 를 四本은 1 ㎏씩을, 四根은 500 ｇ씩을 지하 수에 넣고 24시간 중간불로 달였다. 약 달이기 는 75 ℓ의 물이 졸아서 25 ℓ (1/3)가 될 때까 지 달여서 차게 식힌 후, 이 추출액 (100 ㎖)을 여과지로 여과하고 여액을 감압농축하여, 흑갈 색 추출물(1.31 ｇ)을 얻었다.1)
채뇨와 약물 투여 - 백서를 자유롭게 물과 먹이에 접근할 수 있는 metabolic cage에 넣어 1주간 적응시킨 후 실험을 시작하였다. 八仙釀 造用水는 각 실험군마다 10마리씩 나누어 급수 기에 50%농도로 희석하여 경구투여하였다. 1 주의 대조기간동안 24시간 뇨를 채뇨하였으며, 뇨의 채뇨용기, 먹이통, 물통, cage의 청소는 오전 10-11시에 실시하였다. 약물은 급수기에 희석하여 투여하였다.
채혈 - 약물의 효능을 관찰하기 위하여 3주 간 약침 후, 약물 투여 후 매주마다 scaffold로 단두하여 채혈하였다. 혈중 ANP 농도를 측정 하기 위한 채혈은 proteolytic enzyme inhibitor mixture, ethylenediaminetetraace- tic acid (EDTA) 5 ㎎/㎖, soybean trypsin inhibiter (SBTI) 50 BAEE/㎖, aprotinin 200 KIU/㎖)가 들어 있는 tube에 채혈하였으며, 4
℃에서 3000 rpm으로 원심분리하여 혈장을 분 리하였다.
뇨의 creatinine - Philips 등11)의 방법으로 spectrophotometer (Spectronic 2000, B & L, Rochester, U.S.A.)를 사용하여 측정하였으며, 전해질은 electrolyte analyzer (Nova 4, Newton, MA., U.S.A.)로 분석하였고,
osmolarity는 osmometer (3C2, Advanced Instruments, Needham Heights, MA., U.S.A.)를 사용하여 측정하였다.
혈장 atrial natriuretic peptide 농도의 측정 - Sep-pak C18 cartridge를 4 ㎖의 acetonitrile과 4 ㎖의 0.1% trifluoroacetic acid (TFA)로 활성화시킨 후 Sep-Pak C18
cartridge에 흡착된 ANP는 60%의 acetonitril 1.5 ㎖으로 elution하여 polyethylene tube에 담아 Speed Vac Concentrator (SVC-100H, Farmingdale, NY, U.S.A.)로 증발시켰다. AP
Ⅲ에 대한 항체는 Cho 등12)의 방법에 따라 제 조하였다. 즉 AP Ⅲ 의 항체는 Goodfriend 등
13)의 carbodiimide 방법에 따라 AP Ⅲ와 bovin ethyroglobuline과 conjugation시켜 동양의 Freund's adjuvant와 잘 섞어 6주간, 1주에 1 회씩 여러 부분에 주사하였다. 채혈은 2주 후 부터 시행하여, 그 titer를 결정하였으며, 혈장 은 56 ℃에서 30분간 inactivation하여 사용하 였다. Titer가 결정된 AP Ⅲ의 항혈청은 사용 에 편리하도록 소량으로 나누어 -70 ℃에 보관 하였다. [125I]AP Ⅲ의 제조를 위한 iodination 은 chloramine-T method 에 의하였다. 즉 sodium phosphate buffer (pH 7.4, 0.5 M) 25
㎕가 들어 있는 eppendort tube에 5 ㎍의 AP
Ⅲ (Peninsula Laboratories, Belmont, CA, U.S.A.)가 들어 있는 5 ㎕의 solution과 sodium iodide-125 (1 mCi/10 ㎕, Amersham, Aylesbury, Buckinghamshire, England) 10
㎕를 가하였다. Iodination하기 직전에 만든 chloramine-T (3.6 ㎎/㎖) 10 ㎕를 가한 후 실 온에서 40초간 조심스럽게 pipette로 혼합하고, sodium metabisulfite 대신 30% bovine serum albumin (BSA) 200 ㎕를 넣어 반응을 정지시킨 후 Sephadex G-25 column에 조심스 럽게 가하고, 0.1 N acetic acid로 elution하였 다 (주입속도 0.5 ㎖/min). Elution buffer는 0.3% BSA, 0.3% lysozyme과 0.1% glycine을 포함한 0.1 N acetic acid였으며, fractionation 을 위한 tube에는 200 KIU/㎖의 aprotinin이 함유된 elution buffer 3 ㎖을 가하여 높은
radioactivity에 의한 AP Ⅲ의 파괴를 방지하 였다. 약 1 ㎖씩 fractionation한 직후 잘 혼합 하여 25 ㎕속에 들어있는 radioactivity를 측정 하고, iodinate AP Ⅲ의 peak에 해당하는 fraction은 3,000,000 cpm/tube가 되도록 나누 어 -20 ℃에 보관하였으며, tube당 8,000 cpm 이 되도록 하여 사용하였다. AP Ⅲ의 radioimmunoassay는 0.2% neomycin, 1 mM EDTA, 50 BAEE/㎖ SBTI, 0.02% sodium azide및 1% BSA를 포함한 0.1 M Tris-acetate buffer (pH 7.40)를 사용하였다. Extracted sample은 100 ㎕ 의 Tris-acetate buffer로 reconstitude하여 사용하였다. Assay는 통상적 인 equilibrated RIA 방법을 사용하였으나, disequilibrated assay도 사용하였는 바, 이때 는 100 ㎕의 antiserum과 시료 100 ㎕를 4℃
에서 24시간 incubation한 후 [125I]ANP를 동 량 첨가한 후에 bound form과 free form을 분 리하였다. Bound form과 free form의 분리는 charcoal suspension을 사용하였으나, goat antirabbit γ-globulin antibody를 사용하는 double antibody technique를 사용하여 비교 하였다. Charcoal suspension은 renin assay 방법에 준하여 제조하였다.
혈장 aldosterone 농도 측정 - 혈장 aldosterone 농도는 aldosterone solid-phase RIA kit(Diagnostic Products Corporation, Los Angeles, CA., U.S.A.)를 사용하여 측정하 였다.
통계 처리 - 실험결과의 통계적 처리는 stat viewTM (Brain power, Inc., Calabasas, CA.
U.S.A.)를 사용하여 computer (Power Macintosh 6100/66)로 처리하였으며 p-value 가 최소한 0.05 이하인 경우 유의한 차이로 판 정하였고, 실험치의 표현은 mean ± S. E.로 하였다.
결과 및 고찰
체내 수분평형 (water balance)에 미치는 영 향은 3주 동안 측정한 대조군의 water balance 는 table Ⅰ과 Ⅱ에서 보는 바와 같이 8.76 ±
0.3과 8.06 ± 0.23으로 큰 변화를 나타내지 않 았으나 八仙釀造用水 1 를 투여한 군에서는 2 주째에 6.15 ± 0.2, 3주째에 6.12 ± 0.18로 통계적으로 유의하게 (P<0.001) 감소하였으며 八仙釀造用水 2 투여군에서도 1주째에 10.01
± 0.72, 2주째에 5.62 ± 0.14, 3주째에 5.94
± 0.16으로 통계적으로 유의하게 (P<0.01 또 는 P<0.001) 감소하였다.
뇨량 (Urine volume)에 미치는 영향은 3주 동안 측정한 대조군의 뇨량은 table Ⅰ의 2.22
± 0.18과 table Ⅱ의 2.02 ± 0.10으로 통계적 으로 유의한 변화를 관찰할 수 없었으나 八仙 釀造用水 1를 투여한 군에서는 2주째에 1.70
± 0.09로 통계적으로 유의하게 (P<0.05) 감소 하였고, 八仙釀造用水 2투여군에서도 1주째에 1.69 ± 0.12, 2주째에 1.50 ± 0.08로 통계적 으로 유의하게 감소하였으며 PBW 1 투여군과
PBW 2 투여군의 3주째에는 대조군의 뇨량과 유사하게 회복되었다.
뇨 중 전해질 배설량에 미치는 영향은 3주 동안 측정한 대조군의 뇨 중 Na+배설량은 table Ⅰ의 239.26 ± 13.3과 table Ⅱ의 255.49 ± 12.15로 유의한 차이가 없었으나 八 仙釀造用水 1 투여군의 1주째에는 283.08 ± 11.29로 통계적으로 유의한 (P<0.01) 증가를 보였으며 八仙釀造用水 2 투여군의 3주째는 223.73 ± 9.74로 통계적으로 유의한 (P<0.05) 감소를 나타냈다. 3주 동안 측정한 대조군의 뇨 중 K+ 배설량은 table Ⅰ의 0.75 ± 0.03과 Table Ⅱ의 0.69 ± 0.03으로 통계적으로 유의 한 차이가 없었다. 八仙釀造用水 1 투여군의 1, 2, 3주째에는 각각 0.59 ± 0.02, 0.53 ± 0.03 및 0.60 ± 0.02로 유의하게 (P<0.001) 감소하 였으며, 八仙釀造用水 2 투여군에서도 1, 2, 3 Table Ⅰ. Effects of PBW 1 on the renal
function (water balance, urine volume, urinary excretion of electrolytes and creatinine and free water clearance) in rats Sample WB UV UNaV UKV H20 UcrV
Mean ±S. E.
Control 8.76±0.30 2.22±0.18 239.26±13.30 0.75±0.03 -16.18±0.40 3.58±0.09 1 week 9.89±0.73 1.91±0.11 283.08±11.29** 0.59±0.02*** -16.50±0.36 4.01±0.08***
2 weeks 6.15±0.20*** 1.70±0.09* 243.24±11.36 0.53±0.03*** -16.76±0.54 4.11±0.12***
3 weeks 6.12±0.18*** 2.15±0.09 224.18±9.40 0.60±0.02*** -17.21±0.61 4.25±0.07***
The values represent the mean ± S. E. for ten sets of experiments. Control; Control periods (mean of 4 days). WB; Water balance expressed in ㎖/100 g of body weight. UV; Urine volume expressed in ㎖/100 g of body weight. UNaV;
Urinary excretion of sodium expressed in μeq/㎖
/100 g of body weight. UkV; Urinary excretion of potassium expressed in meq/㎖/100 g of body weight. H2O; Free water clearance expressed in
㎖/100 g of body weight. UcrV; Urinary excretion of creatinine expressed in ㎎/㎖/100 g of body weight. PBW 1; 3×41 mg/ml concentration of Palsun Brewing Water. Significantly different from the control period; *P<0.05, **P<0.01,
***P<0.001, respectively.
Table Ⅱ. Effects of PBW 2 on the renal function (water balance urine volume, urinary excretion of electrolytes and creatinine and free water clearance) in rats Sample WB UV UNaV UKV H20 UcrV
Mean ±S. E.
Control 8.06±0.23 2.02±0.10 255.49±12.15 0.69±0.03 -16.42±0.65 3.56±0.13 1 week 10.01±0.72** 1.69±0.12*253.12±10.49 0.55±0.04* -15.76±0.52 3.72±0.11***
2 weeks 5.62±0.14***1.50±0.08** 248.31±9.24 0.50±0.02*** -16.91±0.38 3.98±0.09***
3 weeks 5.94±0.16*** 1.90±0.08 223.73±9.74* 0.55±0.03*** -17.31±0.31 4.18±0.06***
The values represent the mean ± S. E. for ten sets of experiments. Control; Control periods (mean of 4 days). WB, Water balance expressed in ㎖/100 g of body weight. UV; Urine volume expressed in ㎖/100 g of body weight. UNaV;
Urinary excretion of sodium expressed in μeq/㎖
/100 g of body weight. UkV; Urinary excretion of potassium expressed in meq/㎖/100 g of body weight. H2O; Free water clearance expressed in
㎖/100 g of body weight. UcrV; urinary excretion of creatinine expressed in ㎎/㎖/100 g of body weight. PBW 2; 6×41 mg/ml concentration of Palsun Brewing Water. Significantly different from the control period; *P<0.05, **P<0.01,
***P<0.001, respectively.
주째 모두에서 통계적으로 유의하게 감소하였 다.
유리 수분 (free water) 배설량에 미치는 영 향은 유리 수분 배설량을 3주 동안 측정한 대 조군에서는 table Ⅰ의 -16.18 ± 0.40와 table
Ⅱ의 -16.42 ± 0.65로 유의한 차이가 없었다.
八仙釀造用水 1 투여군에서는 1주째에서부터 3주째까지 배설량이 증가하는 경향이었으나 통 계적으로 유의한 변화는 없었으며, 八仙釀造用 水 2 투여군에서도 2주째와 3주째에 배설량이 증가하는 경향이었다.
뇨 중 creatinine 배설량에 미치는 영향은 대조군의 creatinine 배설량은 table Ⅰ의 3.58
± 0.09와 table Ⅱ의 3.56 ± 0.13으로 3주 동 안 유의한 차이가 없었다. 八仙釀造用水 1 투 여군은 1, 2, 3주째 각각 4.01 ± 0.08. 4.11 ± 0.12 및 4.25 ± 0.07로 통계적으로 유의하게 (P<0.001) 증가하였으며, 八仙釀造用水 2 투여 군은 1주째에 3.72 ± 0.11, 2주째에 3.98 ± 0.09, 3주째에 4.18 ± 0.06으로 통계적으로 유 의하게 증가하였다.
혈장 atrial natriuretic peptide (ANP) 농도 의 변동은 대조군의 혈장 ANP의 농도는 78.00
± 19.55 pg/ml이었고, 八仙釀造用水 1 투여군 에서는 82.4 ± 14.85로 증가하는 경향이었고, 八仙釀造用水 2 투여군에서는 60.54 ± 10.16 으로 감소하는 경향이었으나 통계적으로 유의 성은 없었다 (Table Ⅲ).
혈장 aldosterone 농도의 변동은 대조군의 혈장 aldosterone의 농도는 589.67 ± 53.53 이었고, 八仙釀造用水 1 투여군은 569.85 ± 45.38로 감소하였고, 八仙釀造用水 2 투여군은 617.84 ± 70.58로 증가하였으나 통계적으로 유의성은 없었다 (Table Ⅲ).
八仙釀造用水를 조제하는 재료인 四本 (오갈 피, 마가목, 말오줌대, 개오동) 四根 (창출, 위령 선, 쇠무릎, 석창포) 중 창출, 쇠무릎 및 위령선 에는 이뇨효과가 있는 것14,15)으로 알려져 있어, 이뇨효과 측정에 다양하게 이용되고 있는 체내 수분평형, 뇨량, 뇨 중 전해질 배설량, 뇨중 유 지수분 배설량, 뇨중 creatinine 배설량 및 혈 중 aterial natriuretic peptide와 aldosterone 농도의 변동을 측정하였다. 八仙釀造用水를 흰 쥐에 투여한 후 2주째와 3주째에 체내 수분평 형이 유의하게 감소하여 박10)이 冬瓜肉의 生汁 에 대한 흰쥐의 이뇨효과를 측정한 보고와 일 치하였고, 뇨중 Na+배설량은 八仙釀造用水 1 투여군에서는 1주째에, 八仙釀造用水 2 투여군 에서는 3주째에 유의하게 증가하여 송6)이 濟生 腎氣丸 煎湯液을 토끼에 투여한 후 측정한 결 과와 일치하는 경향이었다. 뇨 중 Na+ 배설량 의 증가는 신장의 신세뇨관에서의 Na+ 재흡수 의 억제라고 생각할 수 있으며, 이때 뇨량은 당 연히 증가하여야 하며 여러 보고에서도 일치하 는 경향이었으나,6,10) 본 연구의 결과에서는 八 仙釀造用水 3 ml 투여군과 6 ml 투여군 모두 에서 1주와 2주째에는 감소하고 3주째에 대조 군의 뇨량과 유사하게 회복되었다. 그러나 사 구체 여과율은 3 ml 투여군과 6 ml 투여군 모 두에서 시일이 경과할수록 증가하는 경향이었 으므로, 八仙釀造用水가 신장기능에 영향을 미 쳐 이뇨를 도울 가능성은 있는 것으로 판단된 다. Renin-angiotensin-aldosterone계에 의한 체액조절은 혈 중 sodium hydrosulfide이 감소 하면, 혈액량이 감소하기 때문에 이차적으로 신혈류량이 감소하게 되고 신동맥압도 감소된 다. 수입세동맥의 벽에는 사구체옆세포가 위치 하고 있어 renin을 합성하여 혈액내로 분리하 며, 분리된 renin은 혈장내에 존재하고 있는 Table Ⅲ. Effects of Palsun Brewing Water
on the atrial natriuretic peptide (ANP) and plasma levels of aldo- sterone in rats
Group ANP (pg/ml) Aldosterone(pg/ml) Control
PBW 1 PBW 2
78.00±19.55 82.61±14.85 60.54±10.16
589.67±53.53 569.85±45.38 617.84±70.58 The values represent the mean ± S. E. for PBW 1; 3 × 41 mg/ml concentration of Palsun Brew- ing water. PBW 2; 6 × 41 mg/ml of concentra- tion Palsun Brewing water.
angiotensinogen을 angiotensin으로 변화시킨 다. Angiotensin Ⅰ은 전환효소에 의해 활성도 가 높은 angiotensin Ⅱ로 전환되고, angioten- sin Ⅱ는 부신피질에서 aldosterone의 분비를 촉진시키며, aldosterone은 네프론의 원위세뇨 관에서 sodium 재흡수를 촉진시켜 이차적으로 수분 재흡수를 증가시키게 된다.16,17) 본 연구 결과에서 혈장 ANP와 aldosterone 농도가 일 정하지 않아 Renin-angiotensin-aldosterone계 에 의한 기전은 확실하게 규명할 수 없으므로, 앞으로 八仙釀造用水가 신장기능과 관계되는 호르몬계의 변화에 대하여 연구를 계속하고자 한다.
결 론
八仙釀造用水를 흰쥐에 투여한 후 신장기능 의 변동을 관찰하기 위하여 체내 수분평형, 뇨 량의 변동, 뇨중 전해질 및 creatinine 배설량, 유리수분배설량을 측정하고 혈장 atrial natri- uretic peptide와 aldosterone 농도를 측정하여 다음과 같은 결론을 얻었다.
八仙釀造用水 투여 후, 체내 수분평형은 유 의하게 감소하였고 뇨량은 2주째에 유의하게 감소하였으나, 3주째에는 대조군과 유사하였 다. 八仙釀造用水 투여 후, 뇨 중 전해질량 , 뇨 중 Na+ 배설량도 유의하게 증가하였고 K+ 배 설량도 유의하게 감소하였으며, 유리수분 배설 량은 증가하는 경향이었다. 八仙釀造用水 투여 후, 뇨 중 creatinine 배설량은 유의하게 증가 하였다. 八仙釀造用水 투여 후 혈장 atrial natriuretic peptide 농도는 八仙釀造用水 2 투 여군에서 감소하는 경향이었고, 혈장 aldos- terone 농도도 八仙釀造用水 1 투여군에서 감 소하는 경향이었다.
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