Ear lich

혜 한엄 상뱅 리 사회 지 : 제 9 권 제 1 호 1977

病驚 f덤來흉휩훌뒀 球園의 生物學的 性狀 및 抗生齊UJ옳受性에 관한 짧究

指導:閔昌‘때 敎授

宋

李敎錫內科醫院 臨'*病理科 羅*

I .

績 論

1910年

Ear lich

(1

910)

1)는 合性有機 物質언

Arsph- 'enamine

(606) 에 依하여 創始펀 化學續法의 擺念은 종

래 의 各種 感榮뾰의 治廳方法을 對fIE廳法으로부터 原

?因廳法으로 代替 하였 A며 각종 微生物로 因한 傳業性 똥愚治廳의 놀라운 했果를 거두었다. 이를 계기로 이 방변의 과학자들은

Antimicrobial

Activity가 있 는 合成有機物質의 發見에 판심을 기울이제 되었으며 化 學癡法齊~(Chemotherapeutic agent) 時代의 出發의 계 기가 되었다.

Domagk²) 는

Prontosil (2. 4-Diamino-azo benzene- 4-Sulfonamide-

Hcl) 이 連鎭球園에 卓越한 抗園效果를 가지고 있는 것을 發見하였고 그後 Sulfa劃의 各種 合 成物이 續續 發見되고 使用되게 되었다.

한펀 1929年 Fleming³)은 혈園안

Penicillium No-

tatum의 培養 i慮練中에

Antibacterial

Activity가 있 는 物質이 含有되어 있음과 生物이 生塵하는 抗生物質 을 發見하였고， 1944年에는 Waksman⁴) 이

Streptom- ycine(C21H30012N

7)을， Dugger(1648)5)는

Chlorotet-

racycline을， 그리 고

Burkholder (1947)

6)와

Finag

, (1949)7)는 各各 Chloramphenicol과

Oxytetracycline

을 發見하였마. 이렇게 抗生物質이 多數 發見됨에 짜 라서 現今의 細園感榮:IlE에 對한 殺園簡j로서 廣範圍한 治擾效果를 거 두어 왔다.

그러나 抗生物質의 廣範圍한 治擺를 寫한 使用은 그 엽體의 직접적안 副作用外에도 그 製劃의 灌用파 誤用 혜문에 藥劃耐性園의 出現이라는 새로운 問題가 생기 게 되었음은 꺼論이고， 耐性傳達， 園交替距等의 새로

운 樣相을 招來하였오며， 이로 因한 難治感榮뾰의 出

~現을 보게 되고 臨皮的으로는 感榮治續 및 免‘않學的안

·여러 問題와 아울러 製郵j學的으로도 새로운 抗生뽑j의

在

開發이 계속 必要하게 되었다.

이와 같은 現象을

Hinshel

wood⁸) 는 일찌 기 微生物 의 藥齊j耐性獲得이 適應에 依한 것이라고 하였고，

Luria⁹)는 耐性園을 -種의 突然變異園緣로 記錄하였 다.

耐性獲得 方法의 原因中 現在 까지 R-要因等 10， 11) 많 은 짧究가 되 어 왔￡나， 抗生劃의 出現파 아울러 化學 廳法의 鍵達에 依하여 抗生郵I의 投與는 必然的으로 耐 性園緣의 增加를 招來하게 되었으며， 藥簡j 投與前에 抗 生劃 感受性 檢훌를 하게끔 되었고， 그 텀的이 직접적 으로는 뽑、者에 對한 適切한 치료효과의 期待와 더 불어 間接的으로 地域的 및 年次的안 耐性園 推移觀察에 있 다.

우리나라 에서와 같이 醫師의 처방없이도 抗生簡I를 任意로 購入하여 使用 할 수 있는 制度下에서는 耐{生 園樣의 增加나 그 分布가 多樣함을 據想활 수 있다.

Staphylococcus

aureus는 各種 抗園齊j에 對한 感受

↑生 빛 耐性을 잘일으키는 園種의 하나로 알려져 왔고，

14 ， 15， 16 ， 17 ， 18 ， 19， 20， 2 낌낌 3 ， 24 ， 25) 抗生齊l 開發當時에 는 세계

적으로 Penicillin에 對한 而↑生園林의 報告例는 極少數 이 였으나 近年에 이 르러 李 15)等은

Staphylococcus au

reus가 Penicillin에 對하여 耐{生이 있 었 다고 報告한바 있다.

現在 各種 重要한 感榮原因園으로서

Sta phy lococcus

의 治廳에 있 어 서 各種 抗園製郵j에 對한 耐性園林가 많 을 것」즈로 報告되고 있으며， 最近에 이와 같은 點에서 著者는 病뚫로 부터 分離同定된

aureus Staphyloco-

ccus

aureus에 對한

Penicillin

外 5種의 抗生簡j에 依 한 感受性 碩向을 파악하고 그 園들의 耐性의 出現頻 度와 그 程度를 基鍵資料로 하여 現，1:E 우러 나라에 있 어 서 이 園에 對한 各種 抗生齊j 耐↑生-分布를 파악하여 治廳面에서 資料로서 調훌하였던 바 若千의 知見을 얻 을 수 있었음으로 이에 報告하는 바이다.

ll.

實驗材料 및 方法

1) 實驗材料

a.

團

:f*

서울市內 結合病院에서 病뚫로 부터 分離된 蘭홈球 園에 對하여 그 生物學的 性狀과

Coagulase

,

Mannitol

分解，

Pigment

,

Hemolysis

檢흉를 通하여 典型的이 라고 確認된 것 中에서， 試驗園1*로 100林를 選擇하여 寶驗에 使用하였다.

b. 分離및培地

分離培地로는

Blood agar

및

Nutrient

agar 이 며 이 培地에 發育된 園1*를 形態學的 및 生化學的 檢

호를 通하여 分離된 園樣를 試驗園緣로 使用하였다.

c.

抗生物質 懷受性 試驗

Disk

本試驗에 使用한 抗生物質 Disk는 Difco社(Bacto­

:Sensitivity

Disks)製를 使用하였 다.

2)

1.

Coagulase test (Tube method)

토끼의 血驚에 試供園被을 훈加해서

37

⁰

C Water

bath에서 1시간 以內와 2시간 以內에 그 波이 묵과같 이 응고 되였을 경우 陽性오로 判定하였다.

2. Hemolysis

5%

면양혈쿠 (Sheep cell)를 溶解시킨 48⁰C의

Nut- rient

Agar에 넣 어 만든 培地에 試供園을 接種하여 .36⁰C에서 24시간 후에 판찰하였을 혜 Colony의 주위 가 깨끗하고 투명한 溶血帶를 形成한 것을 陽性으로 -判定하였마.

3.

MannitaI分解

Mannital Salt

agar에 試供園林블 接種하여

37

⁰

C

r 에서 24시간 배양하여 Colony周圍가 黃色오로 變했을 해 이것을 陽性A로 判定하였다.

4. 色 素

Blood Base

agar에서 37⁰C로 24시간 배 양 했을 경 우 Colony의 色素가 黃色이 냐 白色이 냐로 區~Ij하였마.

5.

接種團滾의 調製

試供園1*들을 各各

pH 7. 2 Brain heart infusion

培地에 接種하고 35"'37⁰C에서 18시간배양增植한 園 을 증류수로

1 :

100~으로 희 석 한 것 을 용해 한

Muller Hinton

培地블 48⁰C로 식 헌 後 100cc에 1cc씩 접 종하 여 잘 混合한 다음， 直座 100mm의

Petri

Dish에 分

;注하고 응고 한 것을 使用하였다.

6.

抗生物質

Disk

懷受性 檢훌

感受↑生檢겉표는 Difco製 (Paper disks)를 上記接種培地

에 均等한 間隔오로 놓고 이 를 36⁰-37⁰C로 18시 간 내 지 24시간 배양한 後 發育저지법위의 크기로 耐性如否 를 判定하였다.

이 혜 使用한 抗生物質의 禮度는

Penicillin G. 10 unitc. Ampicillin 10mcg , Methicillin 5mcg , Cep- halothin 30mcg , Chloramphenicol 30mcg

및

Te- tracycline

30mcg블 使用하였 다.

ID.

寶驗成續

1. 病原性供試 分離園으I

Coagulase

生훌과

MannitoI

分解能

病原性

Staphylococcus

aureus의 -次的안

Coagu- lase

生塵能과

Mannitol

分解能을 檢훌한 바 그 成績 은

(Table

1)과 같다.

Table

1.

Coagulase production and Mannitol Reaction in Terms of Time of 100 Strains of

Sta phylococcμs (aμreμs)

Coagulase Number oflAcid from Number of reaction Strains(%) I mannitol strains(%) 1 hr 61 (61) : ... (99)

((1(1\

I I

D~n; .j.;

Positive

•• _ .~~

24 hrs 93 ..

~.~~.? .... ~~ ..

(94) 2 hrs 38(38)

,--_, ,- ---. -

48 hrs 1 Over 2 hrs 1(1) !Negative 6(6)

本實驗에서의 Coagulase

reaction

出現은 1시간 以內 에서 61林 (61%) 가 나타냈으며 2시간에서

38

1*

(38%)

가 出現하였고 2시간 以上에서는 1緣 (1%) 가 나타값마

Mannitol Salt

agar에 서 分解能이 24시 간에 陽性 인 것이

93

1*

(93%)

, 48시간에서

1

1*

(1%)

, _{分解能 陰} 性이 61* (6%) 이 었다.

2.

色素生훌能 및 溶血性(Hemolysis)

Blood

agar에서 發育한 園한 集落의 色素 形成은

￠ 셔뼈

…

…

EN

mm

m

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Y

…

m

F

VN mL

~

…H

- 3 7 -

(Table

2) 에서 보는바와 같이 白色集落이

13%

, 黃色

3.

標準홉緣에 對한 抗生物質 感受性試驗 이 87%로 나타냈A며 , 용혈反應에 陽性이

40%

, 陰性 各種 抗生物質에 對한 標準園林 2種의 藥簡j 耐性度 이 6096 로 나타났다. 를 試驗한 바 그 成績은

(Table

3) 과 같마.

Table 3. Range of Zone Diameters mm Obtained withthe Referance Strain Stap. aureus ATCC 25923 and A TCC 6538p U sed instead

Antibiotic Disk* content wT/SCt. aureus

ATCC 25923 wT/SCt.C aureus ATCC 6538p

Ampicillin 10mcg 24-35 27-34

Cephalothin 30mcg 25-37 23-26

Chloramphenical 30mcg 19-26 25-28

Methicillin 5mcg 17-22 24-27

Penicillin G 10units 26-37 25-30

Tetracyclince 30mcg 19-28 25-29

* BACTO-Sensitivity Dikss manufactured by Difco Laboratories

Table 4. Standardized Disk Suscepti Bili1y Test of 100 Sarains

Antibiotic used -

J

Disk content

^J

Resistant (%)

^J

Intermediate I Susceptible (%)

Ampicillin 10mcg

Cephalothin 30mcg

Chloramphenicol 30mcg

Methicillin 5mcg

Penicillin G 10units

TetracyJ line 30mcg

4.

供試 Staphylococcus(aureus)의 慮受性試驗 供試훌홉~에 對한

Ampicillin

以外 5種의 抗生物質 에 對한 感受性分布를

Table 3

標準휩~에 對한 判定 規準을 適用하여 調죠뚱한바， 그 結果는

Table

4에 나 타난成績과같다.

Ampicillin

10mcg는 耐f生園 88% 이 고 感受性은

1%

로 나타났으며，

Chloramphenicol

30mcg에

9%

,

Pe- nicillin G

10units에

88%

및

Tetracycline

30mcg에 72% 가 耐性을 나타냈다.

N.

考 察

Hinshel

wood⁸)는 얼쩌 기 微生物의 藥齊j耐性 獲得 01 適應에 依한 것 이 라 하였고 Luria⁹)는 耐性園~를 一 種의 突然變異~로 推定한 바 있다.

耐性獲得方法의 原因은 現在까지 R-要因 等 10， 1 1) 많 은 맑究가 되 여 왔A냐 抗園齊j의 出現과 아울러 化學廳 法의 發達에 依하여 抗園郵1의 授與는 必然的으로 耐{生 園~의 增加를 가져오게 되었다.

88(88) 1( 1)

11(11)

70(70) 16(16) 14(14)

9( 9) 1( 1) 90(90)

O(

0) 2( 2) 98(98)

88(88) 12(12)

72(72) 1( 1) 27(17)

Coagulase生塵園은 園體周圍에 血類擬塊를 形成함

~로서 宿主의 q용園作用에 對한 振抗性을 얻을 뿐만아 니 라 各種 宿主防獲機構에 對한 顯著한 批抗性을 나타­

냄으로 病原性 蘭홈球園의 籃別에 利用되는 한 性狀임 을

Cruishan R

12) 빛 Chapman¹³) 이 主張하였다.

그러나 蘭홈球園에서 生塵되는 園體外 蛋白質은 培­

養溫度， 培地成分， 培養時間 및 園 ffiï釋度 等에 짜라서 園體外 蛋白質의 塵生能 및 그 生化學的反應作用에 差 異를 나타냈￡며 , Coagulase作用도 病原性을 決定하 는 細對的 指標로 생 각하기 에 는 充分치 뭇하다고 하나 本調호에 서

Staphylococcus aureus

全園林카 2시 간→

얀으로 血짧을 擬固한 것￡로 보아 病뚫由來의 것으로 Coagulase生塵能이 彈하게 表示된 것으로 생각된다.

홉휠짚힘球園의 病原t뾰에 對해서는 많은 業績들이 發表­

되어 왔A나 病原性의 完全한 究明은 아직 報告된 바­

없다 22) 그러나 蘭짧球園의 病原{生파 關聯性이 있는것 혹로 생각되는 生物學的 性狀이 많이 핍究되어 있는바

Coagulase

,

Mannitol

, 分解 色素塵生 溶血作用 等은­

病原性과 판련성이 있는 것으로 알려져 있고， 特히

Coagulase

陽性언 蕭짧球園은 病原性의 表示이 긴 힐}-

나

Coagulase

塵生能이 培養條件의 차이 로 그 反應정 도가 달라짐 A로 보아 Coagulase가 그 園의 病原性의 障弱을 表示한다고는 불 수 없다.

Mannitol

分解能슨 病原性 蘭옳球園의 鍵別에 利用

되 고 病原園의 病뚫別 分離源과의 사이 에 어 느程度의 相關關係를 나타내고 있오나 많은 非病原性 蕭짧球園 이 Mannitol을 分解한다고 해 서 病原性의 鍵別의 指 針오로는 充分치 뭇하다.

其他 色素塵生， α， ß 및 r-溶血素作用 等은 그 陽性 反應을 나타내는 園1*가 24시간 후 各各 陽性

40%

陰 性 90% 로서 相當한 分布의 差異를 보이고 있다.

本實驗을 通하여 各病뚫別 分離園의 生物學的 性狀 을 比較할 혜 體에 서 分離된 園은 R홉껏， 子宮預部， 血 被 및 PR에서 分離된 園에 比하여 그 生物學的 性狀야 病原性A로 指稱되 는 各種 反應이 陽性을 나타내 고 있 는바 이러한 現象이 蘭흉칩球園의 分離源파 어떠한 그훈련 성이 있는지는 아직 報告된 바 없 A며 많은 試料를 通 하여 앞걷L로 追究하여 야 할 問題로 생 각된다.

本 實驗을 通하여

Coagulase

,

Mannitol

分解 等은 各病뚫別 蘭홈球園의 分離源에 關係없이 거의 同-‘한 陽性反應을 나타내 고 있오며 따라서 最少限 上述한 2 種의 生物學的 性狀을 推定하는데 必要한 것 ξL로 思料 되는 바이다.

抗生物質製빼가 우리나라에 導入된지도 滿30年이 경 과하였 는데 , 그 卓越한 治據했果와 藥效의 特異性， 應 m 據大 等은 醫藥分野의 要員뿐만 아니 라 -般國民에 게 까지 過大하리 만큼 알려져서， 이 약품의 應用範圍 는 治驚에 局限되지 않고 예방적 A로， 또는 防I홉的~

혹까지 據大使用하게 되었마.

우리 나라의 現實이 이 러 한 藥品에 對한 아문-런 特別 錯置가 없음￡혹 -般國民이 휩게 求할 수 있을만큼 많 은 量파 양은 種類의 抗生簡가 市中에서 流通되고 있 음이 事實이다.

이러한 結果， 좋은 治據齊iJ로서의 抗生物質이， 너무 藍用되고 誤用되고 있기 때문에 耐性園의 大量出現파 過敏:JJE의 發生 等의 副作用이 생겼 4며 아울러 새로운 흉愚의 홉종發 等의 間題點을 일오키 고 있다 14 ， 15 ， 16 ， 17 ， 18)

한펀 이 製簡j의 國內生塵에 있어서， 藥品 適應:JJE에 對한 適用範圍의 過大策定碩向은 臨'* 實用範圍를넘 은 것 이 많으며 이 는 各種治擺面에 서 混亂을 招來하게 까지 되었마.

表 4에 서 보는 바와 같이 病原性

Staphy lococcuS

aureus의 65 ，....， 85% 가 이 미 1948年경 (Duggar)부~

Pe-

nicillin을 大規模로 使用했음A로 이에 對한 感受性園 1*는 除去되 는 耐性園1*(대 체 로

Penicillinase

生性園)

1*로 代置하게 되었음을 시사하는 것이다.

또 한펀 Tetracycline도 광범 하게 사용함A로서 얘 에 對한 감수성균주는 제거되고 내성균주만이 存續하 게 되었다. 대부분의 병원성

Sta phy

lococcuS는

Peni- cillin

및 Tetracycline에 대 하여 同時에 耐性을 갖는 것으로 報告되고 있다.

Richmond

(1

964)

²⁵⁾ 등의 보고에 의하면 한가지 以.

上 抗生劃에 耐性을 가진 균주는 Penicillin만에 對하 여 耐性을 갖는 것 에 비 추어 보펀적 으로 많은

Penicil-

linase를 生成하는 Staphylococci가 愚者의 保園部位 에 生存하여

Penicillinase-Transf

er로 그의 批抗性因 子를 받어 生存할 수 있음을 示埈하였다.

Tetracycline

및

Penicillin

耐性은 transfusion을 거쳐서

Sta phy

lococi만에 전파될 수 있음이 밝혀졌고 뽑、者에 서 분리 된

Penicillin G

耐性

Sta phy

lococci는 언제 나 Penicillinase를 生成하는 것 으로 報告되 고 있 다.

그러 나 그들은 ß-Lactomase에 영 향을 받지 않은­

Penicillinase에 돼 해 서 는 感受性을 나타내 는 것 A로 되 어 있지 만 이 효소에 영 향을 받지 않는

MethicilliLL

항생제에 대해서도 耐性을 갖는 園林가 報告되고 있다

또 한펀 우리 나라에서도 여러 맑究者 14 ， 15， 16， 17， 18 ， 19， 20)' 들이 病l횡↑生

Sta phy

lococci에 태 한 治據面의 한 指標 블 얻기 위해 抗生簡j 耐性檢호를 실시한 결과 둥이 報 告되어 있다.

그러 연서 도 抗生郵j 灌用의 現實에 비 추에

Penicilli-

nase生成과 이것이 캄수성 試驗에 미치는 影響을 調좁 한 報告는 없는 것￡로 알고 있다.

우리차 病原性蕭웰球園에 대하여 얻을 수 있는 材料 를 보면 Finland^2낌8) 가 1953年과 1959年에 各各 發表;

한 Penicillin어1 듣지 않는 (/JJ 가 나타나 問題가 되 었￡

며 이 것 이 Penicillin에 耐 性을 가진 홉휠껄등球園인 것 ~.

로 報告되 었 고， 李等 14)은 1963年 Penicillin에 대 한 耐 性이

85.9%

Chloramphenic이이

3.4%

Tetracyclinε 32.5% 라고 報告한 일이 있 A나 本 調호에서는

Peni-- cillin

G만이 같은 結果릎 보였고 그外 抗生郵j들은 높 은 耐性園의 出짧을 볼 수 없었다.

1962년 李 15)는

Penicillin G

外 E 種에 대 하여 實驗 한 結果을 보아 Penicillin 外의 成績과는 -致되지 않 았오며 1967年 徐 2 1)는

Tetracycline I

1C 種을 調흉한 報告에서 多齊j耐性의 出現 如否블 調히-였든바 多輝j耐­

性의 出現이 證明되었다.

1974年 臨皮材料에서 分離된 蘭홈球園의 性狀을 張 等24)의 報告에 서 는

Coagulase

陽性園에 대 한 藥劃耐 性調춤에 서 本調효와 -致펀 것 은 Penicilin이 고 다른

- 3 9 -

抗生빼들은 一致되지 않았는데 이 原因은 Disk의 力價 變動파 試驗方法의 차이점에 기안된 것 A로 생각된다.

Table

5는 系列別抗生햄의 種類를 列題하였~며 試

驗에 使用한 抗生物質파 同一構造의 製빼는 그 名稱이

다르다 할지라도 그 耐性獲得은 同一한 것으로 推測펀 다 짜라서 試供園1*에 對한 이 들 抗生郵l의 耐↑生分布는 더욱 廣範圍한 것오로 推測된마.

Related

Antibiotic and It ’ s Related Products Antibiotic Products Ampicillin Table 5.

1li

n

꾀 빼

m

·14

1,

i

FIr

-L1L

빼 빼 때 패

1j

FL

‘ 1li

Uι

μ 씨

&

마 M빠

Class (Ampicillin , Hetacillin)

Cephaloporin Class (Cephalothin

,

Cephalexin

,

Cephaloglycin

,

Cephaloridine) Chloram phenico

Penic

il1

in G Tetracycline

Penicillinase resistant Penic

il1

in Class (Methicillin

,

Oxacillin

,

Nafc

il1

in

,

Cloxacillin , Dicloxacillin)

Penicillin Class (Penicillin G , Phenoxymethyl Penic

il1

in , Penethicillin) Tetracylline

, O~ytetracycline ，

Methacycline

,

Doxycycline

,

Demectocycline

,

Minocycline , Rolitetracycline , and ChlortetracyCline

V.

結 論

서울市內 蘇合病院에서 病뚫로 부터 分離된 홉휩옳狀 :球園 100珠에 對하여 各種 流行園緣로서의 性狀과 抗

生簡l 感受性에 對한 檢討를 實施하여 現時點에서 流行 萬緣의 特性을 把握함A로서 臨*病理學分野뿐만 아니 라 治擺分野에 도 有益한 資料를 提供하고자 시 도하였 든바 마음과 같은 結果 얻었다.

1) Coagulase

陽性園林는， 100i朱中 99緣 (99%) 이 었 다.

2) Mannital

分解反應 陽性園緣는 941* (94%) 이 었 다.

3)

色索塵生 白色集落은 13林 (13%) ， 黃色集落은

87

珠 (87%) 이며， 溶血素反應의 陽性園1*는 401朱 (40%) 이 고 陰性園은 601朱 (60%) 이 었다.

4)

各種抗生郵j의 感受↑生檢좁結果는 Ampicilin이

88

林 (88%) ，

Cephalothin

701朱 (70%) ，

Chlorampheni-

"col

9樣 (9%) ，

Penicillin G 88

1*

(88%)

및

Tetracy-

ιcline 72緣 (72%) 가 耐↑生을 나타내 었마.

5) Penicillin G

外 5種中 Methicillin만 感受↑生을 보였 A며

Ampicillin , Cephalothin , Chlorampheni-

℃이，

Penicillin G.

및 Tetracycline은 높은 耐性率을 보였다，

좋 考 文 훌t

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SUMMARY

A Study on Biological Properties and Antibiotic Susceptibility of Staphy lococci IsoIated from Various Lesions

Song , ]ae-Ong The characteristic and antibiotic susceptibility of 100 strains of Staphylococci isolated from the various lesions of patients from the general hospitals in Seoul area were studied.

The characteristics of current strains of Staphylococci wereias follows.

1.

Among 100 strains the coaguIase positive were 99%.

2. The positive strains of mannitoI fermentation were 94%.

3. The white coIony forming organism were 13% , and yellow one were 87% , and hem- olysis positive strains were 40%.

4. Ampicillin resistantistrains were 88% , Cephalothin 70% , Chloramphenicol _9% , Peni- cillin G 99% , and Tetracycline 72%.

5. Only methicillin of 5% , antibiot

Ïc

s except Penicillin Gwas sensitive to the organisms,

and antibiotics most often resistant to the organisms were Penicillin G and Tetracy c1 ine.