Evaluation of Shelf-life of Bojungikgi-tang by Long-term Storage Test

(1)

44(2) : 200∼ 208 (2013)

200

장기보존시험에 따른 보중익기탕 전탕팩의 유통기한 평가

서창섭¹·김정훈¹·김성실¹·임순희²·신현규¹^*

1한국한의학연구원 한약방제연구그룹, ²㈜글로벌헬스케어 생명과학연구소

Evaluation of Shelf-life of Bojungikgi-tang by Long-term Storage Test

Chang-Seob Seo¹, Jung-Hoon Kim¹, Seong-Sil Kim¹, Soon-Hee Lim², and Hyeun-Kyoo Shin¹*

1Herbal Medicine Formulation Research Group, Korea Institute of Oriental Medicine, Yuseongdae-ro 1672, Yuseong-gu, Daejeon, 305-811, Korea

2The Institute of Life Science Research, Global Health Care Co. Ltd., Gasan-dong 493, Geumcheon-gu, Seoul, 153-715, Korea

Abstract − The aim of this study was to evaluate the shelf-life of Bojungikgi-tang (Buzhongyiqi-tang in Chinese) by long-term storage test. Experiments were performed to evaluate the stability such as the selected physicochemical, pH, identification, heavy metal, microbiological experiment, and amount of marker compounds under a long-term storage test of Bojungikgi-tang decoction. The significant change was not showed in pH, heavy metal, microbiological, and identification test based on long- term storage test. Furthermore, the HPLC analysis was performed for the determinations of liquiritin, glycyrrhizin, nodakenin, and hesperidin in Bojungikgi-tang by long-term storage test. We were calculated shelf-life of Bojungikgi-tang decoction based on the amount change of four constituents. Consequently, Shelf-life by four compounds at room temperature was predicted 23 month. The suggested shelf-life would be helpful on the storage and distribution of herbal medicine.

Key words − Shelf-life, Bojungikgi-tang, Long-term storage test, Herbal medicine

현재 한의원이나 한방의료기관 등에서 처방되는 한약은 주로 치료나 예방을 목적으로 산제, 환제 및 탕제 등으로 처 방되고 있다. 이들 중 끓여서 파우치에 넣어 제공하는 탕제 가 대부분을 차지하고 있다. 탕제는 서늘한 곳에 보관하도 록 복약 지도하고 있는 실정이나 탕액 파우치의 보관 기간 에 대한 과학적인 근거는 설정되어 있지 않다. 따라서 본 연 구는 식품의약품안전처가 의약품 유통기간 기준 평가 시에 요구되는 장기보존시험에 따라 보중익기탕 탕액의 전탕팩 에 대한 연구를 수행하였다.

보중익기탕은 金元代李 의 「脾胃論·飮食勞倦所傷始爲熱中論」에 수록된 처방으로 脾를 보양하고 아래로 쳐진 脾氣를 일으키는 補中益氣와 양기를 끌어올리는 升陽擧陷 하는 효능이 있다.¹⁾또한 脾胃의 氣가 虛하고 中氣가 下陷 되어 나타나는 諸證을 치료하는 처방으로 황기, 감초, 인삼, 당귀, 진피, 승마, 시호 및 백출 등 8가지 약재로 구성되어 있다.^2,3) 보중익기탕의 생리활성 효능 연구는 면역증강,^4,5) 항알레르기,^6,7) 항염증,^8,9) 항암¹⁰⁾ 및 항산화¹¹⁾ 효과와 단회

투여 독성에 따른 안전성 연구^12,13) 등이 보고되었다. 또한 백 등¹⁴⁾은 HPLC-DAD를 이용하여 보중익기탕 중 glycyrrhizin 의 정량분석에 대한 연구를 실시하여 품질관리의 효율성을 높이고자 하였다.

이와 같이 한방의료기관에서 처방하는 다빈도 처방15) 중 하나인 보중익기탕에 대하여 식품의약품안전처에서 제시하 고 있는 장기보존시험을 근거로 보중익기탕 내용 액제에 대 하여 성상, 확인시험, pH, 비중, 중금속, 미생물 및 함량시 험 등과 같은 물리·화학적 시험을 실시하여 품질 안정성 에 미치는 영향을 평가하고 사용기간을 설정에 대한 기초 자료를 제공하고자 한다.

재료 및 방법

실험재료 − 본 실험에 사용된 보중익기탕의 구성 한약재 인 감초(Glycyrrhizae Radix et Rhizoma), 당귀(Angelicae Gigantis Radix, Yeongcheon, Korea), 백출(Atractylodis Rhizoma Alba), 승마(Cimicifugae Rhizoma), 시호(Bupleuri Radix), 인삼(Ginseng Radix Alba), 진피(Citri Unshii Pericarpium) 및 황기(Astragali Radix, Jeongseon, Korea)는

*교신저자(E-mail):[email protected] (Tel): +82-42-868-9464

(2)

광명당제약(Ulsan, Korea)에서 구입하였다. 각각의 구성 한 약재들의 표본(2012-KE12-1~2012-KE12-8)은 한국한의학연 구원 한약방제연구그룹에 보관하였다.

시약 및 기기 − 표준물질인 liquiritin과 nodakenin은 ㈜천 연물화학(Yeongi, Korea)에서 구입하였으며, glycyrrhizin과 hesperidin은 Wako Pure Chemical Industries, Ltd.(Osaka, Japan)와 Biopurify Phytochemicals Ltd.(Chengdu, China)로 부터 각각 구입하였다. 이들 표준물질의 순도는 HPLC 분 석에 의해 98%이상으로 확인되었다.

함량시험은 Agilent 1200 series HPLC(Agilent Techn- ologies, Santa Clara, CA, USA)를 사용하여 측정하였으며, 전탕팩 보관을 위한 항온항습기는 SH-CTH288(Samheung Instrument, Korea)을 사용하였다. 분광광도계와 초음파추출 기는 각각 X-ma 2000(Human Co., Korea)과 8510R-DTH (Branson, Danbury, CT, USA)를 사용하였으며, 건조기는 J- 300M(JISICO, Korea), pH meter는 Orion 3 star(Thermo, San Jose, CA, USA)를 사용하였다. 보중익기탕의 전탕 및 포장은 초고속 진공 저온 농축 추출기(Cosmos 660, Kyungseo machine, Korea)와 자유조절 롤 포장기(MH 205 Tower, Kyungseo machine, Korea)를 사용하였다. 포장지는 레토르트 포장지로 포장지 밖은 폴리에틸렌 재질, 중간막은 알루미늄 및 안은 폴리프로필렌 재질로 이루어져 있다. 추 출 및 정량분석에 사용된 methanol과 acetonitrile은 HPLC grade용으로 J. T. Baker (Phillipsburg, NJ, USA)로부터 구 입하였다. Water는 MR-RU1690(Mirae Science Co., Korea) 을 이용하여 여과하여 사용하였으며, 그 외의 시약은 HPLC 또는 특급시약을 구입하여 사용하였다.

시험물질의 조제 및 보관 − 보중익기탕 전탕액은 쌍화탕 약 26제 분량(6.0 kg)을 약재 무게의 10배수에 해당하는 약 60 L의 전탕수로 100^oC에서 2시간 증기를 배출하지 않은 가 압식 방법으로 전탕한 후 100±10 mL로 포장하였다. 보중익 기탕의 1첩 구성은 Table I과 같다. 전탕팩은 3개의 lot로 나 누어 전탕하였으며 상대습도 60±5%, 보관 온도 25±2^oC 및 차광하여 보관하였다. 보관기간별 전탕팩의 분석은 0, 3, 6,

9 및 12개월마다 측정항목을 분석하였다.

성상 − 조제된 보중익기탕 전탕액에 대하여 보관기간에 따라 육안으로 관찰하였다.

확인시험 1) 표준액 조제

(1) 감초 − 감초 대조생약 가루 약 1.0 g에 메탄올 100 mL 를 넣고 1시간 환류 추출하였다. 추출액은 탈수여과 후 감 압농축하고 잔류물에 메탄올 10 mL를 넣어 녹여 표준액으 로 하였다.

(2) 당귀, 백출, 승마 및 인삼 − 4종 생약의 대조생약 가루 약 1.0 g에 메탄올 100 mL를 넣고 1시간 환류 추출하였다.

추출액은 탈수여과 후 감압농축하고 잔류물에 메탄올 1 mL 를 넣어 녹여 표준액으로 하였다.

(3) 시호 − 시호 대조생약 가루 1.0 g에 메탄올 50 mL를 넣고 1시간 환류 추출하였다. 추출액은 탈수여과 후 감압농 축하여 여액이 2.0 mL이 되도록 하여 표준액으로 하였다.

(4) 진피 − 진피 대조생약 가루 약 1.0 g에 에탄올 50 mL 를 넣고 30분간 환류 추출하였다. 추출액은 탈수여과 후 감 압농축하고 잔류물에 에탄올 1 mL를 넣어 녹여 표준액으 로 하였다.

(5) 황기 − 황기 대조생약 가루 약 3.0 g에 메탄올 20 mL 를 넣고 1시간 환류 추출하였다. 추출액은 탈수여과 후 감 압농축하고 잔류물에 메탄올 0.5 mL를 넣어 녹여 표준액으 로 하였다.

2) 검액의 조제

보중익기탕 전탕액 약 100 mL에 초산에틸 100 mL를 넣 어 2회 분배 추출하였다. 초산에틸 층을 탈수 여과 한 후 감 압농축하고 잔류물에 메탄올 1 mL를 넣어 녹여 검액으로 하였다.

3) 박층크로마토그래피(TLC)

조제된 대조생약과 검액을 각각 20 µL씩 실리카겔 GF₂₅₄ 에 점적하여 Table II의 조건으로 각각 10 cm 전개한 후 주 요 반점의 R_f 값과 색상을 비교하였다.

Table I. Composition of Bojungikgi-tang

Herbal medicine Amount (g) Supplier Source

Astragali Radix 5.625 Kwangmyungdang Jecheon, Korea

Glycyrrhizae Radix et Rhizoma 3.75 Kwangmyungdang China

Ginseng Radix Alba 3.75 Kwangmyungdang Yeongju, Korea

Atractylodis Rhizoma Alba 3.75 Kwangmyungdang China

Angelicae Gigantis Radix 1.875 Kwangmyungdang Bonghwa, Korea Citri Unshii Pericarpium 1.875 Kwangmyungdang Jeju, Korea

Cimicifugae Rhizoma 1.125 Kwangmyungdang China

Bupleuri Radix 1.125 Kwangmyungdang Gurye, Korea

Total amount 22.875

(3)

pH − 조제된 보중익기탕 전탕액에 대하여 pH meter를 이 용하여 장기보존시험에 대한 시료의 pH를 측정하였다.

비중 − 조제된 보중익기탕 전탕액을 이용하여 대한약전 일반시험법¹⁶⁾의 비중 및 밀도측정법 제 3 법 부칭에 의한 시험법에 따라 비중 시험을 하였다.

중금속 − 보중익기탕 전탕액 1.0 mL를 달아 대한약전 일 반시험법¹⁶⁾중금속시험법 중 제 3 법에 따라 조작하여 시험 하였으며, 비교액에는 납표준액 3.0 mL를 넣어 시험하였다.

미생물 시험 − 이 약을 가지고 식약청고시 “의약품 등의 미생물한도기준 및 시험방법”¹⁷⁾에 따라 시험하였으며, 세균 수, 진균 수, 대장균, 녹농균, 황색포도구균 및 살모넬라균 에 대하여 미생물 시험을 실시하였다.

정량

1) HPLC 분석조건

보중익기탕의 구성 생약 중 감초의 주요성분인 liquiritin 과 glycyrrhizin, 당귀의 nodakenin 및 진피의 hesperidin 함

량을 Agilent 1200 series HPLC(Agilent Technologies, Santa Clara, CA, USA)를 사용하여 분석하였다.

(1) Liquiritin 함량 분석

감초의 주요 성분인 liquiritin의 함량을 분석하고자 Table III의 조건을 이용하여 등용매용리로 분석하였다.

(2) Glycyrrhizin 함량 분석

감초의 주요 성분인 glycyrrhizin의 함량을 분석하고자 Table III의 조건을 이용하여 기울기용리(0분, 10% B; 0-10 분, 10-15% B; 10-25분, 15-25% B; 25-40분, 25-30% B;

40-55분, 30-50% B; 55-58분, 50-10% B; 58-60분, 10% B) 로 분석하였다.

(3) Nodakenin 함량 분석

당귀의 주요 성분인 nodakenin의 함량을 분석하고자 Table III의 조건을 이용하여 기울기용리(0분, 20% B; 0-3분, 20%

B; 3-8분, 20-30% B; 8-18분, 30% B; 18-19분, 30-50% B;

19-40분, 50% B; 40-41분, 90% B, 41-50분, 90% B)로 분 석하였다.

Table II. TLC conditions for identification test of reference herbal medicine and Bojungikgi-tang decoction Herbal medicine Stationary phase Condition Detection Glycyrrhizae Radix et Rhizoma Silica gel GF₂₅₄ Chloroform/Methanol/DW/Acetic acid

(100 : 25 : 1 : 1)

p-Anisaldehyde·sulfuric acid TS*

Angelicae Gigantis Radix Silica gel GF₂₅₄ Chloroform/Methanol/DW/Acetic acid (50 : 25 : 1 : 1)

UV (365 nm) Atractylodis Rhizoma Alba Silica gel GF₂₅₄ Chloroform/Methanol/DW/Acetic acid

(50 : 25 : 1 : 1)

UV (365 nm) Cimicifugae Rhizoma Silica gel GF₂₅₄ Chloroform/Methanol/DW/Acetic acid

(50 : 25 : 1 : 1)

p-Anisaldehyde·sulfuric acid TS

Bupleuri Radix Silica gel GF₂₅₄ Chloroform/Methanol/DW (30 : 10 : 1)

50% alcohol·sulfuric acid TS Ginseng Radix Alba Silica gel GF₂₅₄ Chloroform/Methanol/DW

(13 : 7 : 2)

p-Anisaldehyde·sulfuric acid TS

Citri Unshii Pericarpium Silica gel GF₂₅₄ Toluene/Ethyl acetate/Formic acid/Ethanol (3 : 4 : 1 : 2)

UV (365 nm) Astragali Radix Silica gel GF₂₅₄ Toluene/Methanol

(93 : 7)

Vanillin·sulfuric acid TS

*TS: Test solution

Table III. HPLC condition for quantitative analysis

Item Liquiritin Glycyrrhizin Nodakenin Hesperidin

Detector (nm) 217 250 330 280

Mobile phase 19% CH₃CN with 0.05% H₃PO₄

A : 0.05% H₃PO₄ B : CH₃CN

A : DW B : CH₃CN

A : 0.05% H₃PO₄ B : 70% CH₃CN with 0.05% H₃PO₄

Column Capcell pak C18 MGII

(5µm, 4.6×250 mm)

Intersil ODS-3 (5µm, 4.6×250 mm)

Column oven (°C) 38 35 25 35

Flow rate (mL/min) 1.0

Injection volume (µL) 10

(4)

(4) Hesperidin 함량 분석

진피의 주요 성분인 hesperidin의 함량을 분석하고자 Table III의 조건을 이용하여 기울기용리(0분, 5% B; 0-40분, 5- 65% B; 40-41분, 65-100% B; 41-48분, 100% B; 48-49분, 100-5% B; 49-60분, 5% B)로 분석하였다.

2) 표준액 및 검액 조제

감초의 liquiritin과 당귀의 nodakenin 표준품 약 10.0 mg 을 각각 정밀하게 취하여 메탄올을 넣어 녹여 정확하게 200 mL로 하여 표준액으로 하였다. 감초의 glycyrrhizin 표준품 약 10.0 mg을 정밀하게 취하여 메탄올을 넣어 녹여 정확하 게 100 mL로 하여 표준액으로 하였다. 또한 진피의 hesperidin 표준품 약 10.0 mg을 정밀하게 취하여 다이메틸 폼아마이드 10.0 mL과 메탄올을 넣어 녹여 정확하게 200 mL 로 하여 표준액으로 하였다.

검액은 보중익기탕 전탕액을 0.45 mm syringe filter (SmartPor, Woongki Science, Seoul. Korea)로 여과하여 검 액으로 하였다.

3) 정량계산

4가지 성분(Fig. 1)의 함량은 아래 식을 이용하여 계산하 였다.

Liquiritin, glycyrrhizin, nodakenin 및 hesperidin의 농도 (mg/mL)

=표준액 농도 (mg/mL) ×

유통기한 설정 − 유통기한 산정을 위해 보중익기탕 전탕 액 중 liquiritin, glycyrrhizin, nodakenin 및 hesperidin의 함 량 변화를 이용하여 의약품등의 안정성 시험 기준¹⁸⁾에 따라 유통기한을 예측하였다.

결과 및 고찰

성상 − 보중익기탕 전탕액의 최초 조제시 성상은 투명한 파우치에 든 황갈색의 액제였다. 이 후 장기보존시험 분석 에 따라 3, 6, 9 및 12개월 시점의 전탕액 성상을 확인한 결 과 황갈색의 액제로서 별다른 변화 없이 유지되었다.

확인시험 − 장기보존시험 동안 보중익기탕의 구성 생약인 감초, 당귀, 백출, 승마, 시호, 인삼, 진피 및 황기의 대조생 약과 보중익기탕 전탕액을 대상으로 TLC에 의한 확인시험 을 실시하였다. 확인시험 결과 R_f 값 0.3에서 감초의 대조생 약에서 나타나는 황색의 반점을 확인하였으며, R_f 값 0.6과 0.4에서 당귀와 황기의 적색과 자색의 반점을 각각 확인하 였다. 또한 R_f 값 0.8에서 백출, 승마 및 진피의 진녹색, 자 색 및 황색의 반점을 각각 확인하였으며, R_f 값 0.5에서 시 호와 인삼의 청색 및 자색 반점을 각각 확인하였다(Fig. 2).

이러한 TLC에 의한 확인시험은 최초 0개월에서부터 3, 6, 9 및 12개월 시점에서 각각 확인한 결과 모두 동일한 R_f 값 과 같은 색의 반점을 확인하였다. 이상의 TLC 결과로 보중 익기탕을 구성하는 8종의 생약은 감초, 당귀, 백출, 승마, 시 호, 인삼, 진피 및 황기로부터 유래된 것임을 알 수 있다.

pH − 보중익기탕 전탕액의 최초 pH는 lot별로 5.72, 5.54 및 5.40으로 각각 나타났으며, 이 측정값을 토대로 ±1의 범 검액의 피크면적

표준액의 피크면적

Fig. 1. Chemical structures of four marker compounds of Bojungikgi-tang.

Table IV. pH of Bojungikgi-tang by long-term storage test

Lot pH

0* 3 6 9 12

1 5.72 5.71 5.71 5.71 5.71 2 5.54 5.55 5.55 5.55 5.54 3 5.40 5.40 5.41 5.41 5.40

*month

(5)

위내로 시험기준을 설정하였다. 본 처방의 장기보존시험에 따른 pH를 측정한 결과 lot별로 5.71–5.72, 5.54–5.55 및 5.40–5.41로 각각 나타났으며(Table IV), 보관기간이 지남에 따라 pH 변화는 관찰되지 않았다.

비중 − 조제된 보중익기탕 전탕액을 이용하여 대한약전 일반시험법¹⁶⁾의 비중 및 밀도측정법 제 3 법 부칭에 의한 시험법에 따라 비중 시험한 결과 1.010–1.013 g/mL로 나타 났다(Table V).

Fig. 2. TLC chromatogram of reference herbal medicine and Bojungikgi-tang sample.

Table V. Specific gravity of Bojungikgi-tang by long-term storage test

Lot Specific gravity (g/mL)

0* 3 6 9 12

1 1.012 1.012 1.011 1.010 1.010 2 1.012 1.013 1.012 1.012 1.011 3 1.012 1.013 1.011 1.011 1.011

*month

(6)

중금속 − 보중익기탕 전탕액을 대한약전 일반시험법¹⁶⁾의 중금속시험법 중 제 3법에 따라 장기보존시험 한 결과 모 든 측정 기간에서 총중금속이 대한약전 기준치인 30 mg/kg 이하에 적합하였다.

미생물 − 식약청고시 “의약품 등의 미생물한도기준 및 시 험방법”¹⁷⁾ 기준에 따라 최초 0개월 시점의 보중익기탕 전탕

액 시료 10 mL을 이용하여 세균수 및 진균수와 같은 총호 기성세균과 대장균, 살모넬라, 녹농균 및 황색포도상구균과 같은 특정 세균에 대하여 미생물 실험 결과 세균과 진균은 모두 0 CFU/mL로 나타났으며, 특정세균에 대하여는 모두 검출되지 않았다. 이후 3, 6, 9 및 12개월 시점에서도 미생 물 시험 결과 모두 적합하였다(Table VI).

Fig. 3. HPLC chromatogram of four marker compounds in Bojungikgi-tang by long-term storage test. Liquiritin (A), glycyrrhizin (B), nodakenin (C), hesperidin (D). Initial test (I), three month (II), six month (III), nine month (IV), twelve month (V).

(7)

Fig. 3. Continued.

Table VI. Result of microbial limit test

Item Permissible standard Result

Aerobic bacteria Number of bacteria 1×10³/mL 0 CFU/mL

Number of fungi 1×10²/mL 0 CFU/mL

Bacteria E. coli N.D*/mL N.D

P. aeruginosa N.D/mL N.D

S. aurenus N.D/mL N.D

Salmonella N.D/mL N.D

*N.D means not detection

(8)

보중익기탕 중 주요성분의 함량분석 − HPLC를 이용한 12개월간 실온보관에 따른 장기보존시험에서 한약처방 중 liquiritin, glycyrrhizin, nodakenin 및 hesperidin의 함량을 분

석한 결과 67.6–71.1 µg/mL, 93.9–97.1 µg/mL, 51.6–54.1 µg/

mL 및 49.9–51.8 µg/mL로 각각 나타났다(Fig. 3 및 Table VII). 4성분 모두 보관 기간이 경과되더라도 유의적인 함량 변화는 보이지 않았다.

보중익기탕 전탕액의 유통기한 설정 − 본 처방을 구성하 는 생약 중 감초, 당귀 및 진피의 주요 성분인 liquiritin, glycyrrhizin, nodakenin 및 hesperidin 등 4종 성분의 함량 변화를 바탕으로 6개월 가속시험에 의한 주요 성분들의 유 의적인 변화가 없다고 가정한 후 의약품등의 안정성 시험 기준¹⁸⁾의 선형회귀분석을 이용하여 전탕팩의 유통기한을 예 측하였다. 최초 0개월째 함량 시험 결과를 100%로 하여 진 행하였으며 초기 농도 대비 90.0%, 80.0% 및 70.0% 수준 으로 함량 기준을 설정하여 유통기한을 예측하였다. 총 12 개월의 장기보존시험 기간의 시험결과를 이용하여 선형회 귀분석법에 의해 95% 신뢰한계로 하한의 단측검정을 수행 하여 사용기간 등을 외삽하고, 3 lot 시험하여 외삽한 결과, 유통기한은 90.0%, 80.0% 및 70.0% 함량 기준시 23개월, 45개월 및 67개월로 나타났다(Fig. 4 및 Table VIII). 이상의 유통기한 설정 결과는 단순히 이화학적 결과 즉, 보중익기 탕 전탕액의 주요 성분인 liquiritin, glycyrrhizin, nodakenin 및 hesperidin의 함량 변화에 따라 유통기한이 계산된 것으 Table VII. Amount of four compounds long-term storage

test of Bojungikgi-tang

Compound Amount (µg/mL)

Lot 0* 3 6 9 12

Liquiritin 1 68.6 68.6 68.7 68.2 68.1 2 69.6 69.4 69.0 68.0 67.6 3 71.1 70.8 71.0 69.8 69.0 Glycyrrhizin 1 96.6 96.1 96.0 95.2 94.8 2 96.7 96.5 96.6 95.6 93.9 3 97.1 96.5 96.4 95.6 95.1 Nodakenin 1 54.1 53.8 53.7 53.3 53.2 2 54.0 53.6 53.2 53.0 52.9 3 53.2 52.9 52.6 52.3 51.6 Hesperidin 1 51.1 51.0 51.0 50.9 50.8 2 51.2 50.9 51.0 50.8 50.7 3 51.8 51.5 51.0 50.1 19.9

*month

Fig. 4. Shelf-life graph (lot 3) by linear regression analysis method. Liquiritin (A), glycyrrhizin (B), nodakenin (C), hesperidin (D).

(9)

로 보다 정확한 유통기한 설정을 위해서는 다른 약리학적 효능 비교가 병행되어야 할 것이다.

결 론

보중익기탕 전탕팩의 성상, 확인시험, pH, 비중, 중금속 및 미생물 시험 등에 대하여 12개월 동안 장기보존시험을 통한 안정성 시험을 실시하고, 보중익기탕의 구성 생약의 주요성분에 대한 함량의 변화를 분석함으로써 보중익기탕 전탕팩의 유통기한을 예측하였다. 그 결과 90% 함량기준으 로 23개월의 유통기한이 예측되었다. 이러한 결과는 보중익 기탕 전탕팩의 유통기한 설정을 위한 기초 자료로 이용될 수 있을 것으로 사료된다.

사 사

본 연구는 한국한의학연구원에서 지원하는 ‘한약처방의 과학적 근거 기반 구축사업(K13031)’에 의해 수행되었으며 이에 감사 드린다.

인용문헌

1.한의과대학 방제학교수 공편저 (2003) 방제학, 279-281.

영림사, 서울.

2. Seo, M., Lee K., Park J. and Hong, S. (2010) The current trend of research about Bojungikgi-tang. Korean J. Oriental Med. 16: 83-90.

3.박영순 (2002) 한방의 약리해설, 1315. 아카데미서적, 서울.

4. Eun, J. S., Choi, H. and Song, J. M. (2002) Effect of

Bojungikgi-tang on the specific immune response in BALF/

c mice. Korean J. Oriental Physiology & Pathology 16: 943- 947.

5. Chae, S. Y., Shin, S. H., Ha, M. H., Jo, S. K., Kim, S. H., Byun, M. W. and Yee, S. T. (2004) Effect of Bu-Zhong-Yi- Qi-tang on proliferation of T cell. J. Korean Soc. Food Sci.

Nutr. 33: 1085-1091.

6. Kang, D., Kam, C. and Park, D. (2003) Effect of Bu-Zhong- Yi-Qi-tang on proliferation of T cell. Korean J. Life Sci. 13:

73-82.

7. Kim, S., Sim, S., Byun, H. and Kim, K. (2005) The effect of Bojungikgi-tang in a mouse model of allergic rhinitis. J.

Korean Oriental Med. Ophthalmol. Otolaryngol. Dermatol.

18: 26-36.

8. Jang, S. I., Kim, H. J., Kim, Y. J., Pae, H. O., Chung, H. T., Yun, Y. G., Jeong, O. S. and Kim, Y. C. (2003) Bojungikgi- tang inhibits LPS plus interferon-ã-induced inflammatory mediators in raw 264.7 macrophages. Korean J. Oriental Med. Prescrip. 11: 115-128.

9. Yang, S. H. and Yu, C. L. (2008) Antiinflammatory effects of Bu-zhong-yi-qi-tang in patients with perennial allergic rhinitis. J. Ethnopharmacol. 115: 104-109.

10. Lee, S. E., Hong, J. E., Lee, S. H., Shin, J. Y. and Ro, S. S.

(2004) Study on apoptosis effect and mechanism by Bojungikki-tang on human cancer cell line H460. Korean J.

Orient. Int. Med. 25: 274-288.

11. Park, S. M., Lim, M. H., Lee, J. H. and Park J. H. (2003) Antioxidative effects of Bojungikgi-tang and Yukmijiwhang- tand in the liver of senescence-accelerated mouse (SAM).

Kor. J. Herbology 18: 175-191.

12. Lee, J. H., Hwang, Y. H., Kwak, D. H., Kim, T. S. and Ma, J. Y. (2011) Single oral dose toxicity test of Bojungiki-tang (Buzhongyiqi-tang) and fermented Bojungikgi-tang(Buzho- ngyiqi-tang) extracts in mice. Korean J. Orient. Int. Med. 32:

599-609.

13. Kim, J. D. (2011) Single oral dose toxicity test of Bojungiki- tang (Buzhongyiqi-tang) aqueous extract in ICR mice. Kor. J.

Oriental Perventive Med. Soc. 15: 21-38.

14. Baek, J. H., Kim, S. M., Ahn, J. W., Cho, C. H., Oh, M. H., Cho, J. H., Lee, M. K. and Kim H. J. (2008) Validation and determination of glycyrrhizic acid as a marker substance in Bu-zhong-yi-qi-tang by HPLC/DAD. Yakhak Hoeji 52: 7-11.

15.식품의약품안전청 (2006) 한국인의 한약재 복용실태 조사 연구, 91-94. 식품의약품안전청, 서울.

16.한국약학대학협의회 약전분과회 (2008) 대한약전 (9개정 해설서 I). 94, 192. 신일북스, 서울.

17.식품의약품안전청 (2009) 식품의약품안전청고시 제2009- 101호. 대한약전외 일반시험법.

18.식품의약품안전청 (2009) 식품의약품안전청고시 제2009- 117호.

(2013. 4. 23 접수; 2013. 5. 16 심사; 2013. 5. 22 게재확정) Table VIII. Shelf-life by long-term storage test of Bojungikgi-

tang

Lot Compound Shelf-life (month) 90.0% 80.0% 70.0%

1 Liquiritin 67 132 196

Glycyrrhizin 47 93 141

Nodakenin 52 106 158

Hesperidin 147 300 446