Kor. J. Pharmacogn.
44(3) : 281∼ 285 (2013)
281
유산균 발효 천마의 수면유도 효과
이경호1·이기형2·김병수2·최영호2·김충환2*
1(주)종근당중앙연구소, 2공주대학교 산업과학대학
Sleep Inducing Effect of Gastrodia elata Fermented with Lactic Acid Bacteria
Keyong Ho Lee1, Ki-Hyeong Rhee2, Byung-Soo Kim2, Yong-Ho Choi2, and Choong-Hwan Kim2*
1CKD Pharmaceutical, Yongin-city 446-916 Korea
2College of Industrial Sciences, Kongju National University, Yesan 340-720, Korea
Abstract − Ethanol extract of Gastrodia elata fermented with Lactobacillus brevis was highly effective on the duration of pen- tobarbital hypnosis in mice. Pretreatment of mice with ethanol extract of the fermented Gastrodia elata (200 mg/kg, p.o.) pro- longed markedly the duration of pentobarbital sleeping time and reduced the sleep latency. The mechanism of the extract of the fermented Gastrodia elata was investigated to inhibit the binding of 3H-Flumazenil, a selective benzodiazepine receptor antagonist, to benzodiazepine receptor of mice cortices. IC50 value from displacement of 3H-Flumazenil binding was 62 µg/mL at the treatment of the fermented Gastrodia elata. Therefore, these finding, such as increase of sleeping time and reduction of sleep latency, was examined by elevated concentration of GABA and parishin C, which were increased by Lactobacillus brevis.
Key words − Gastrodia elata, Sleeping time, Sleep latency, Lactobacillus brevis
불면증은 잠이 들기 힘들거나 잠을 계속 유지하기 어렵거 나 너무 일찍 깨서 다시 잠들지 못하는 증상이다. 보통 여 성에서 흔하며, 수면유지곤란이나 새벽에 일찍 깨는 증상은 특히 노인에서 더 흔하다. 불면증은 성인의 12%에서 나타 나는 흔한 증상이며 일차 진료기관에 방문하는 환자의 20%
가 유의한 수면 이상을 호소한다고 한다.1)수면제는 일반적 으로 불면증의 단기적 치료에 효과적이나 약물의존성, 인지 기능저하 등 각종 부작용이 있다하여 초기에는 비약물적 치 료을 권고하며 심한 경우 수면제를 처방하는 것이 일반적 인 불면증의 치료법이다.2) 이러한 수면장애의 치료제로는 quazepam, flurazepam 및 triazolam 등의 benzodiapine 계통 약물과 zolpidem이 있다. 이러한 약물의 단점은 불안, 흥분 및 금단현상과 유사한 증상이 나타날 수 있어, 일상생활의 어려움뿐만 아니라 인지적 장애나 우울등 다른 질병을 일 으키는 위험요인이 되기도 한다.3)
한방에서도 불안 및 신경과민에 관한 약리학적 연구가 많 이 보고되어 있으며, 특히 산조인(Zyziphus jujube)은 저용 량에서는 항불안 효과를 나타내며, 고용량에서는 진정작용
을 가지는 것으로 알려져 있다.4) 그 밖에 항불안 생리활성 효능을 갖는 약재로는 황금, 현삼 및 천마 등이 있다.5-7)
천마(Gastrodia elata)는 난초과에 속하는 다년생 초본으 로 사용부위는 뿌리이다. 천마의 산지는 한국, 중국, 일본이 며 채집 시기는 5월이다. 특성으로는 맛은 맵고, 약성은 평 범하고 독이 없다. 국내에서 천마에 대하여 알려진 연구결 과로는 신경보호기능, 진정작용, 항염증, 혈전효과, 관상순 환기 및 일반성분에 대한 연구가 있다.8-11) 이와 같은 효능 을 나타내는 천마의 성분으로는 페놀성 화합물로서 대표적 인 성분으로는 gastrodin이 있으며, 이외에 vanillyl alcohol, valnillin, benzaldehydes 및 페놀성 배당체 등이 보고 되었
다.12-16)본 연구에서는 기존의 천마의 항불안 효과를 나타
내는 성분을 증강시켜서, 발효하지 않은 천마 및 발효 천마 의 추출물에서 수면유도에 대한 효과가 있는지를 유기용매 로 추출 및 분획하여 시험한 결과, 발효 천마의 항불안 효 과를 나타내는 성분의 증가와 함께 수면유도 효과가 우수 한 것을 확인하였다.
*교신저자(E-mail):[email protected] (Tel): +82-41-330-1421
재료 및 방법
재료 − Dimethyl sulfoxide(DMSO), pentobarbital sodium, penicillin-streptomycin, 3-(4,5-Dimethyl-2-thiazolyl)-2,5- Diphenyl-2H-tetrazolium bromide(MTT) 및 Diazepam은 시 그마(Sigma-Aldrich USA)로부터 구입하였다. 3H-Flumazenil 은 PerkinElmer Life & Analytical Sciences(USA)로부터 구 입하였다. Dulbeccos Modified Eagles Medium(DMEM), fetal bovine serum(FBS)은 Invitrogen(USA)으로부터 구입하 였다. 천마는 전북 무주에서 구입하였다.
유산균 발효−발효 균주인 Lactobacillus brevis(KCCM 41029)는 MRS broth에 2% 접종하여 37oC 배양기에 18시 간 배양하여 준비하였다. 시험에 사용한 천마는 세척, 건조 및 분쇄하여 동결건조를 거친 동결건조천마를 사용하였다.
발효천마를 제조하기 위하여 건조된 천마 1 kg를 물에 침지 한 후 불림을 행하였으며, 침지 후 물빼기를 실시한 다음 200 g씩 배양용기에 분취하였다. 이후 121oC에서 15분간 가 압 멸균하고 실온으로 냉각시킨 다음 Lactobacillus brevis (KCCM 41029) 배양액을 5% (v/w)로 접종 한 후 30oC에서 7일간 발효하였다. 배양체의 덩어리 형성 방지를 위해 하루 에 3회 규칙적으로 혼합하여 주었다. 발효가 완료된 후에는 동결 건조한 후 분쇄하여 냉동보관 하면서 실험에 필요한 시료로 사용하였다.
추출물 조제 − 유산균 발효된 천마와 발효시키지 않은 천 마는 모두 동결 건조하였고, 추출 공정은 김 등의 방법에 따 라서 에탄올을 이용하여 추출하였다.17) 에탄올의 농도는 60%로 하였고, 추출 온도 및 시간은 상온에서 7시간으로 하 였다.
동물시험 − 수면유도 시험 동물로는 체중 15~20 g ICR 수컷 마우스를 사용하였다. 사육조건은 22±2oC, 상대습도 55±5%, 환기횟수 시간당 10~12회, 명암주기 12시간으로 유 지하고, 모든 실험동물은 실험 동물실에서 1주일간 적응시 킨 후 실험에 사용하였다. 시료는 1일 1회로 5일간 투여하 였고, 최종 시료의 경구투여 30 후에 pentobarbital(30 mg/
kg, i.p.)을 마우스 복강으로 주사하여 수면시간(sleeping time) 과 입면시간(sleep latency)을 측정하였다.18)
GABAA-벤조다이아제핀 수용체 결합 활성 − GABAA-벤 조다이아제핀 수용체 결합 활성 측정은 마우스의 대뇌피질 을 적출한 후 즉시 30 mM Tris-HCl buffer(pH 7.4, 4oC) 20 ml에 넣어 균질화시키고 10초 동안 초음파를 처리하였 다. 이 후 27,000×g 및 4oC의 조건에서 15분간 원심분리한 후 상층액을 버리고 다시 buffer 20 ml로 원심분리하는 과 정을 3번 반복하였다. 뇌 조직 안의 GABA를 제거하기 위 하여 37oC의 water bath에서 30분간 정치하여 원심분리한 후 pellet을 수집하여 -80oC에서 동결보관하여 사용하였다.
동결된 membrane을 해동시킨 후 27,000×g 및 4oC에서 10
분간 원심분리한 후 상층액을 버리고 50 mM Tris-citrate buffer(binding buffer, pH 7.1, 4oC) 20 ml로 원심분리과정을 3번 반복한 후 membrane을 binding buffer에 500 ml buffer/
original tissue g의 농도로 현탁시켜 결합력 평가 시험에 사 용하였다. 96-well plate에 membrane suspension 180 µL, 각각의 추출물 시료 10 µl 및 3H-flumazenil(1 nM, final concentration) 10 µL을 넣고 ice-bath에서 40분간 반응하였 다. 이 후 glass fiber filter(GF/C, Whatman)을 이용하여 수 집하였다. 샘플의 radioactivity는 Tri-Carb Liquid Scintillation Analyzers (Perkin-Elmer, Shelton, CT, USA)로 측정되었다.
비특이적 결합(nonspecific binding, NSB)은 clonazepam(1 µM, final concentration)을 이용하여 그 값을 결정하였고, binding displacement 값(%)은 아래와 같이 계산하였다.19)
Binding displacement(%) = [1− ((시료의 DPM − NSB DPM)/(TB DPM− NSB DPM))]×100 (DPM: disintegrations per minute, TB: total binding, NSB: nonspecific binding)
주요 성분 분석 − 천마의 생리활성물질들 중 다음의 5가 지 물질, 가스트로딘(gastrodin), 4-하이드록시벤질 알코올(4- hydroxybenzyl alcohol), 4-하이드록시벤질 알데하이드(4- hydroxybenzyl aldehyde), 바닐린(vanillin) 및 파리신 씨 (Parishin C)은 시그마 등에서 구입하여 증류수에 녹인 후 측정하였으며, 천마의 열수추출물과 그 발효액은 증류수에 100배 희석한 후 0.22 µm 막 필터로 여과한 후 측정하였다.
칼럼은 C18 컬럼(4.5 mm×150 mm, 5 µm, Phenomenex Inc., Torrance, CA, USA)을 사용하였고, 이동상은 아세토니트릴 -물 혼합액을 1.0 ml/min로 사용하였다.20) 시료검출은 UV 검출기로 220 nm의 파장에서 시행하였고 컬럼오븐은 30로 유지하였다. GABA 함량 측정은 아미노산분석기(Amino acid analyzer, L-8900, Hitachi, Japan)사용하여 정량 분석하 였으며, 6,000×g에서 15분간 원심 분리하여 얻은 상등액을 0.45 µm membrane(Millipore)으로 여과한 후 분석용 시료로 사용하였다.21)
통계 분석 − 실험 결과의 통계분석은 SPSS 프로그램을 이용하여 평균 및 표준편차를 구하였다. 그룹간의 유의적인 통계차를 분석하기 위하여 p<0.05의 유의수준으로 일원분 산분석(one-way ANOVA)을 실시한 후, Duncan의 다중범위 검정법(Duncan’s multiple range test)을 이용하여 사후검증 을 하였다.
결과 및 고찰
수면시간 및 입면시간의 변화 − 유산균 발효 천마와 발 효시키지 않은 천마 각각을 경구투여 30 후에 pentobarbital (30 mg/kg, i.p.)을 마우스 복강으로 주사하여 수면시간 (sleeping time)과 입면시간(sleep latency)을 측정해 보았다.
시료 투여에 의한 수면시간 측정한 결과, 유산균 발효 천마 의 경우가 발효시키지 않은 천마에 비하여 수면시간의 증 대를 가져왔다. 즉, pentobarbital(30 mg/kg) 투여에 의한 정 상적인 마우스의 수면시간은 32±3분으로 나타났으나, 유산 균 발효 천마 2, 20 및 200 mg/kg의 투여군에서의 수면시 간은 각각 42±4, 44±6 및 69±5분으로 측정되어 시료 투여 에 의한 수면시간이 농도의존적으로 증가하였고, 20 및 200 mg/kg군에서는 각각 137% 및 216%의 수면시간 증가를 나 타내었고 통계적인 유의성이 인정되어 시료투여에 의한 수 면시간 증대의 효과가 나타났다. 특이적으로는 대조약물인 diazepam 2 mg/kg 투여군과 유사한 효과를 나타내었다. 반 면에 유산균으로 발효시키지 않은 천마의 투여에 의한 수 면시간의 증가효과는 투여농도 2, 20 및 200 mg/kg에서 각 각 33±5, 36±8 및 54±7분으로 나타났으나, 발효 천마의 투 여 대비 모든 투여농도에서 수면시간의 증대 효과는 낮게 나타났다(Table I). Table II에서는 잠이 들기까지의 시간을
나타내는 입면시간을 측정한 결과이다. 시료 투여에 의한 입면시간의 감소효과를 측정한 결과, 수면시간의 증대의 효 과가 동일 양상으로 유산균 발효 천마의 경우가 발효시키 지 않은 천마에 비하여 입면시간의 감소효과를 나타내었다.
즉, pentobarbital(30 mg/kg) 투여에 의한 정상적인 마우스의 입면시간은 8±1.0분으로 나타났으나, 유산균 발효 천마 2, 20 및 200 mg/kg의 투여군에서의 입면시간은 각각 7±0.4, 6±0.8 및 5±0.6분으로 측정되어 시료 투여에 의한 입면시간 이 농도의존적으로 감소하였고, 200 mg/kg군에서는 정상 마 우스 대비 38%의 입면시간 감소효과가 나타났고 통계적인 유의성이 인정되어 시료투여에 의한 입면시간의 감소효과 가 나타났다. 대조약물인 diazepam 2 mg/kg 투여군의 경우 는 4±0.2분으로 정상 마우스 대비 50%의 감소효과를 나타 내었다. 반면에 유산균으로 발효시키지 않은 천마의 투여에 의한 입면시간의 증가효과는 투여농도 2, 20 및 200 mg/kg 에서 각각 8±0.3, 7±0.5 및 7±0.2분으로 20 및 200 mg/kg 에서는 감소효과가 나타났으나 통계적인 유의성이 나타나 지 않아 유의하게 입면시간의 감소를 가져왔다고는 판단할 수 없었다.
GABAA-벤조다이아제핀 수용체 결합 활성 − 발효 천마와 발효하지 않은 천마 추출물의 벤조다이아제핀 수용체의 선 택적인 길항제인 3H-Flumazenil의 수용체에 대한 결합 반응 을 억제하는 활성도를 측정하였다(Fig. 1). 두 시료의 농도 를 0.1, 1, 10, 100 및 1,000 µg/mL로 달리하여 GABAA-벤 조다이아제핀 수용체 결합 활성 결과, 발효 천마는 각각 6, 29, 45 56 및 87%의 3H-Flumazenil의 결합을 치환하는 GABAA-벤조다이아제핀 수용체 결합 활성도를 나타내었다.
반면에 발효하지 않은 천마 추출물은 0.1, 1, 10, 100 및 1,000 µg/mL 처리농도에서 각각 4, 21, 34, 48 및 82%의 결 합 활성도를 나타내었다. 따라서 발효 천마와 발효하지 않 Table I. Change of sleeping time by each treatment of the
fermented and the unfermented Gastrodia Treatments Dose
(mg/kg)
Sleeping time
(min) % increase
Vehicle - 32±3a -
Fermented 2 42±4a 131
20 44±6b 137
200 69±5c 216
Unfermented 2 33±5a 103
20 36±8a 112
200 54±7c 169
Diazepam 2 78±7c 244
Values represent means±SD. Values with different letters above each data are significantly different(p<0.05) among different treatments.
Table II. Change of sleeping latency by each treatment of the fermented and the unfermented Gastrodia
Treatments Dose (mg/kg)
Sleep latency
(min) % decrease
Vehicle - 8±1.0a -
Fermented 2 7±0.4a 14
20 6±0.8a 25
200 5±0.6b 38
Unfermented 2 8±0.3a 0
20 7±0.5a 14
200 7±0.2a 14
Diazepam 2 4±0.2c 50
Values represent means±SD. Values with different letters above each data are significantly different(p<0.05) among different treatments.
Fig. 1. Activity of displacement of flumazenil binding by the treatment of the fermented and unfermented Gastrodia extract in the GABAA- benzodiazepines receptor binding assay. Each data point is expressed as mean ± SD (n = 3).
은 천마 추출물의 GABAA-벤조다이아제핀 수용체 결합 활 성의 IC50값은 각각 62 및 114 µg/mL으로 측정되었다. 따라 서 유산균 발효 천마의 경우가 3H-Flumazenil의 결합을 치 환하는 GABAA-벤조다이아제핀 수용체 결합 활성도가 증 가된 것을 확인할 수 있었다.
유산균 발효에 의한 천마 성분의 변화 − 천마의 성분 중 에서 수면유도 효과와 관련이 있다고 판단되는 성분인 gastrodin, 4-hydroxybenzyl alcohol, 4-hydroxybenzyl aldehyde, vanillin 및 Parishin C의 함량은 유산균 발효 천 마와 발효하지 않은 천마에 대하여 HPLC 분석을 실시하였 고, GABA의 함량은 아미노산분석기를 이용하여 함량의 변화를 측정하였다(Table III). HPLC 분석시험에서 발효전 의 천마에서의 gastrodin, 4-hydroxybenzyl alcohol, 4- hydroxybenzyl aldehyde, vanillin 및 Parishin C의 함량은 각각 0.403, 32.597, 0.226, 0.654, 0.256 및 0.487 mg%으로 측정되었고, 발효 후의 천마에서의 gastrodin, 4-hydroxybenzyl alcohol, 4-hydroxybenzyl aldehyde, vanillin 및 Parishin C 의 함량은 각각 0.114, 36.547, 0.297, 0.794, 1.097 및 2.346 mg%으로 측정되었다. 유산균 발효 전과 후는 천마의 위의 성분들에 대한 함량변화를 일으켰다. 유산균 발효 후 에 증가된 성분들로는 4-hydroxybenzyl alcohol, vanillin 및 Parishin C이었고, 감소된 성분들로는 gastrodin이었다. 아미 노산분석기로 측정한 GABA의 함량에 있어서는 발효 전과 후에 유의적으로 커다란 변화를 나타내었는데 발효 전에는 0.487 mg%이었으나 발효 후에는 2.346 mg%로 크게 증가 하였다. 따라서 위 성분들 중에서 발효 전과 후의 함량이 크 게 증가한 물질로는 parishin C와 GABA로 나타났다.
결 론
신경보호 및 진정효과를 나타내는 생약 중에서 천마는 익 히 잘 알려져 있다. 특히 천마의 성분으로 대표적인 gastrodin
은 항경련 및 stroke을 치료하는 약물로도 판매되고 있다. 천 마의 성분 중에서 신경보호 및 진정효과가 있는 성분들로는 GABA, gastrodin, 4-hydroxybenzyl alcohol, 4-hydroxybenzyl aldehyde, vanillin 및 Parishin C으로 알려져 있다.12-16,22)본 연구에서는 천마의 가공형태에 따라서 생리활성의 증대하 리라는 가설 하에 유산균을 이용하여 천마의 생리활성 및 성분변화를 유도하였다. 유산균 Lactobacillus brevis 발효에 의하여 수면유도 효과의 변화를 측정한 결과, 유산균 발효 에 의하여 천마의 수면시간의 증가, 입면시간의 감소 및 GABAA-벤조다이아제핀 수용체 결합 활성도 증대효과를 나 타내었으며, 발효된 천마의 성분 중에서 항불안, 진정 효과 를 나타내는 parishin C와 GABA 성분이 증가하였다. 최근 항불안제인 benzodiazepine계 약물의 작용기전은 억제적 신 경전달물질인 GABA의 강화라고 알려져 있다. GABA는 포 유류 뇌에서 중요한 억제성 신경전달물질로 시냅스 후 GABAA 수용체의 복합체에서 chloride 이온의 시냅스 후 세포(postsynaptic cell)내로의 투과력을 증가시킴으로써 큰 과분극을 일으켜 시냅스전달의 억제를 일으킨다. 중추신경 계의 모든 부위에서 벤조디아제핀류는 GABA에 의한 chloride ion의 투과력을 강화하여 간접적으로 GABA 신경 전달을 촉진하는 것으로 알려져 있다.23) Parishin C는 5-HT 1A receptor에 친화력이 높아 5-HT 1A receptor의 agonist 작용하여 항불안증 효과를 나타내는 물질로 알려졌다.22) 따 라서 본 연구에서 유산균 발효에 의하여 항불안 및 진정효 과를 나타내는 GABA와 Parishin C의 증가를 가져왔다. 또 한 수면시간 증진 및 입면시간의 감소 효과로 볼 때 이러한 성분의 증가는 수면유도 효과를 증진시키는 것으로 사료되 었다.
사 사
이 논문은 2004년 공주대학교 학술연구지원사업의 연구 비 지원에 의하여 수행되었음.
인용문헌
1. Kryger, M. H., Roth, T. and Dement, W. C. (2005) Principle and practice of sleep medicine. 444-467, 726-760. Elsevier, Philadelphia.
2. Kim, S. J. (2009) Pharmacotherapy of insomnia. J. Kor. Med.
Assoc. 52: 719-726.
3. Broman, J. E., Smedje, H., Mallon, L. and Hetta, J. (2008) The minimal insomnia symptom scale (MISS): A brief mea- sure of sleeping difficulties. Upsala J. Med. Sci. 113; 131- 142.
4. Peng, W. H., Hsieh, M. T., Lee, Y. S., Lin, Y. C. and Liao, J.
(2000) Anxiolytic effect of seed of Ziziphus jujuba in mouse Table III. Content analysis of GABA, gastrodin, 4-
hydroxybenzyl alcohol, 4-hydroxybenzyl aldehyde, vanillin and Parishin C in the fermented and the unfermented Gastrodia
Compounds
Unfermented Gastrodia
(mg%)
Fermented Gastrodia (mg%)
Gastrodin 0.403 0.114
4-hydroxybenzyl alcohol 32.597 36.547 4-hydroxybenzyl aldehyde 0.226 0.297
Vanillin 0.654 0.794
Parishin C 0.256 1.097
GABA 0.487 2.346
models of anxiety. J. Ethnopharmacol. 72: 435-441.
5. Choi, Y. H. and Jung, J. W. (2010) Anxiolytic-like effects of Scrophularia buergeriana Miquel using the elevated plus- Maze in mice: Involvement of GABAergic nervous system.
Kor. J. Oriental Physiol. Pathol. 24: 476-483.
6. Jung, J. W., Ahn N. Y., Park, S. H., Oh, J. K., Lee, B. K., Om, A. S., Kim, B. S., Kim, D. H. and Ryu, J. H. (2004) The anx- iolytic-like effects of Scutellaria baicalensis using elevated plus-maze in rats. Kor. J. Pharmacogn. 35: 22-27.
7. Kim, Y. H., Choi, H. C. Sohn, U. D., Lee, K. Y., Kim, W. J., Park, H. B. and Ha, J. H. (1996) Anxiolytic action of Gas- trodia elata Blume. J. Kor. Soc. Biol. Ther. Psych. 2: 108-114.
8. Kim, E. J., Ji, G. E. and Kang, Y. H. (1994) Effects of Gas- trodia Rhizoma extracts on global coronary circulation in rats.
Kor. J. Food Sci. Technol. 26: 213-220.
9. Kim, I. S., Choi, D. K. and Jung, H. J. (2011) Neuroprotective effects of vanillyl alcohol in Gastrodia elata Blume through suppression of oxidative stress and anti-apoptotic activity in toxin-induced dopaminergic MN9D cells. Molecules 16:
5349-5361.
10. Paik, Y. S., Song, J. K., Yoon, C. H., Chung, K. S. and Yun- Choi H. S. (1995) Anti-platelet and anti-thrombotic effects of Gastrodia elata. Kor. J. Pharmacogn. 26: 385-389.
11. Zhou, B. H., Li, X. J., Liu, M., Wu, Z. and Ming Hu, X.
(2006) Antidepressant-like activity of the Gastrodia elata ethanol extract in mice. Fitoterapia 77: 592-594.
12. Lee, J. Y., Jang, Y. W., Kang, H. S., Moon, H., Sim, S. S. and Kim, C. J. (2006) Anti-inflammatory action of phenolic com- pounds from Gastrodia elata root. Arch. Pharm. Res. 29:
849-858.
13. Lin, J. H., Liu, Y. C., Hau, .J. P. and Wen, K. C. (1996) Par- ishins B and C from rhizomes of Gastrodia elata. Phy- tochemistry 42: 549-551.
14. Taguchi, H., Yosioka, I., Yamasaki, K. and Kim I. L. (1996) Studies on the constituents of Gastrodia elata. Phytochem- istry 42: 549-551.
15. Yun-Choi, H. S., Pyo, M. K. and Park, K. M. (1997) Cir-
ciumaldehye from Gastrodia elata. Nat. Prod. Sci. 3: 104- 105.
16. Yun-Choi, H. S., Pyo, M. K. and Park, K. M. (1998) Isolation of 3-O-(4'-hydroxybenzyloxy)-β-sitosterol and 4[4'(4'- hydroxybenzyloxy)benzyloxy] benzyl methyl ester from fresh tubers of Gastrodia elata. Arch. Pharm. Res. 21: 357- 360.
17. Kim, S. H., Kim, I. H., Kang, B. H., Lee, S. H. and Lee, J.
M. (2006) Optimization of ethanol extraction conditions for effective components from Gastrodia elata Blume. Kor. J.
Food Preserv. 13: 506-512.
18. Chu, Q. P., Wang, L. E., Cui, X. Y., Fu, H. Z., Lin, Z. B., Lin, S. Q. and Zhang, Y. H. (2007) Extract of Ganoderma lucidum potentiates pentobarbital-induced sleep via a GABAergic mechanism. Pharmacol Biochem Behav. 86: 693-698.
19. Momosaki, S., Hosoi, R., Abe, K. and Inoue, O. (2010) Remarkable selectivity of the in vivo binding of [3H]Ro15- 4513 to a5 subtype of benzodiazepine receptor in the living mouse brain. Synapse 64: 928-936.
20. Oh, S. L., Kim, S. S., Min, B. Y. and Chung, D. H. (1990) Composition of free sugars, free amino acids, non-volatile organic acids and tannins in the extracts of L. chinensis. A.
acutiloba K., S. chinensis B. and A. sessiliflorum S. Kor. J.
Food Sci. Technol. 22: 76-81.
21. Shaz, W. S. (1985) HPLC determination of Gastrodia and 4- hydroxybenzyl alcohol in Gastrodia elata. Yaown Fenxi Zashi 5: 218-221.
22. Shin, E. J., Whang, W. K., Kim, S., Bach, J. H., Kim, J. M., Nguyen, X. K., Nguyen, T. T., Jung, B. D., Yamada, K., Nabeshima, T. and Kim, H. C. (2010) Parishin C attenuates phencyclidine-induced schizophrenia-like psychosis in mice:
involvements of 5-HT1A receptor. J. Pharmacol Sci. 113:
404-408.
23. Kent, J. M., Mathew, S. J. and Gorman, J. M. (2002) Molec- ular targets in the treatment of anxiety. Society of Biological Psychiatry 52: 1008-1030.
(2013. 7. 23 접수; 2013. 8. 7 심사; 2013. 8. 19 게재확정)
