Micro-Analysis of Methyl 5-Hydroxydinaphtho[1, 2-2``, 3``] furan-7,12-dione-6-carboxylate

약학회지 제

3 7

3

286-^289(1993) Yakhak Hoeji V ol. 37, N o. 3

에털 5-허드록시 디나프토 [1,2-2\31 푸란-7,12 디온 6-카복시레이트의 미링분석

박유미

•

•

•

서울대학교 약학대학

(R e c e iv e d J u n e 4, 1993)

김박 광

#

Micro-Analysis of Methyl 5-Hydroxydinaphtho[l, 2-2', 3']

furan-7,12-dione-6-carboxylate

You M ie Park, H ae Seon Jang, K youn g Hwan Kang, K yu n g Nim Kim , Seong Ki Ja n g and B ak-K w an g K im *

College o f Pharmacy, Seoul National University, Seoul 152-742, Korea

A b s t r a c t — U V a n d h ig h p e r fo r m a n c e liq u id c h r o m a to g r a p h ic m e t h o d s fo r th e q u a n tita tiv e a n a ly s is o f m e th y l 5 - h y d ro x y - d in a p h th o [1, 2-2', 3 '] fu r a n - 7 ,

^-dione-

- c a r b o x y la te ( M H D D C ) in u r in e a n d b lo o d w e r e d e v e lo p e d . T h e c o r r e la tio n c o e ffic ie n ts o f th e c a lib r a tio n c u r v e s o f M H D D C in c h lo r o ­ fo r m , m e th a n o l a n d d io x a n e s o lu tio n w e r e 0.999, 0.997 a n d 0.998, r e s p e c tiv e ly . M H D D C w a s re s o l­

v e d w ith in 15 m in a n d h a d a d e te c tio n lim it o f 2 — 5 n g a t S / N = 3 b y u s in g a r e v e rs e d - p h a s e c o lu m n w ith tw o s o lv e n ts ( M e O H , H A c ).

K e y w o rd s □ M e t h y l 5 - h y d ro x y - d in a p h th o [ 1, 2-2', 3 ']fu ra n - 7 ,1 2 - d io n e - 6 - c arb o x y late , Paulownia tomentosa s te m , U V , H P L C , u r in e , b lo o d .

Paulownia tomentosa Steud의 성분연구로는 퓨란 퀴논계 화합물이 건염염료로서 알려겨 있으며,^^ 이 퓨란퀴논을 모핵으로 갖는 물질로서 dinaphtho [2, 1-2', 3']furan-8, 13-dione과 dinaphtho[l, 2-2', 3']

furan-7, 12-dione,대 또 페놀화함물과 2, 3-dichloro-l, 4-naphthoquinone을 측함시켜 퓨란퀴논 화합물을 합 성한 논문,사 그외 catapd과 syringin,뜨^ aucubin과 확 인되 지 않은 iridoid glycoside류, coniferin, acte- oside^^ 그리그I lignan인 paulownin, sesamin, ( + )- pipearidol，으 **자 methyl 5-hydroxy-dinaphtho[l, 2-2\

3'그furan-7, 12-dione-6-carboxylate (MHDDC ； C

2

본 연구는 M HDDC에 대한 계속적인 연구로서 이 물질에 대한 대사체 분석을 시도할 목적하에 뇨 및

본 논문에 관한 문외는 이 저자에게로.

혈액중외 미량 M HDDC를 흡광광도 및 HPLC방범을 이용하여 검토하였다.

실험방법

시약 및 기기

시료물질인 메틸 5-하이드록시 디나프토[1,2-2\3긴

*^!：란 7 ,

12

6

사용기 기로는 Shimadzu UV-2100 UV-visible reco­

rding spectrophotometer, 액체크로마토그라피는 Hi- tachi 사의 L-6000 pump, L-6200 intelligent pump,

메틸 5-히드록시 디 나 프 토 [1,2-2',3'] 푸 란-7,12-디 온-6-카 복 시 레 이 트 의 미 량 분 석 287

H i t a c h i L -4 2 0 0 U V - V IS d e t e c t o r , S h i m a d z u C -R 4A c h r m a t o p a c I n t e g r a t o r

H i b a r L ic h r o s o r b R P - 1 8 (2 5 0 m m X 4 m m , 7 | im )

표준품 M H D D C 의 정량

홉광광도법에 의한 정량"

H M D D C

1

10

M - 2 X 1 0 MV1, 2 - 8 X 1 0 = M

2 - 8 X 1 0

M

c m

4 5 1 n m , 4 4 3 n m

4 4 0 n m

그러나 이 경우에는 액성 등 반응조건에 따라 흡 광도가 달라지므로, 본 실험에서는 반응조건에 영향을 받지 않는 수렴점에서 흡광도를 측정하여 검량선을 작성한 후 이것을 사용하여

M H D D C

액체크로마토그라퍼범에 의한 정량一아래에 표시 하여 둔

T a b le I

참오동나무 에탄율엑기스중 M H D D C 의 정량 H PLC용 검액의 조제一

M H D D C

M H D D C 1 m g

5 0 m /

0 .4 5 |im m e m b r a n e f i l t e r

M H -

D D C

메란올엑스 검액외 조제는 참오동나무즐기를 세절

하여

5 0 g

5 0 0 m /

70

°C

3

10 0 m /

0 .4 5 |im m e m b r a n e fil-

t e r

H P L C

H PLC에 의한 M H D D C 정랑一참오동나무줄기의 메탄을엑기스중외

M H D D C

T a b le

하에서

H P L C

뇨 및 혈액중의 M H D D C 정랑 Table I

— A n a ly tic a l c o n d itio n s o f H P L C C o lu m n

H ib a r L ic h r o s o r b RP-18

(2 50 m m X 4 m m , 7 p m )

M o b ile p h ase

M e O H

H A c b u ffe r(p H 3 .0 ) = 8 7

13 F lo w rate

m / / m in

A u fs

D e te c tio n

U V 254 n m In je c tio n v o lu m e

뇨 및 표준액의 조제~ 뇨 및 증류수

I m /

1, 2 . 4 ,

, 1 0 | ig /m /

M H D D C

5 m /

1

1 0

였다. 수층을 제거하고 클로로포름층에 대해 소량외 무수 활산나트륨으로 탈수한 후 이를 취하여 감압건 조하며 이 조작을

3

1 m /

0 .4 5 |Lim m e m b r a n e f i l t e r

H P L C

형액시료액의 조제一혈액

I m /

1 , 2 , 4 , 8 , 1 0

의

M H D D C

킨 용액 각각 I m / 썩을 넣고 여기에 아세토니트릴

1

5 m /

1

1 0

3

1 m /

0 .4 5 ( jm m e m b r a n e

f i l t e r

H P L C

H PLC에 의한 1MH13DC 정량一위의 방범대로 조 세한 혈액, 뇨 및 표준액의 검액을

T a b l e I

H P L C

결과 및 고찰

M H D D C

1 X 1 0 - ' M ~ 2 X

10 로 조제한 후 각 클로로포름용액을 1

^{c m}

4 5 1 n m

0 .1 , 0 .2 , 0 .5 , 1.0

2

^.

^X

^{' M}

0 .1 9 4 , 0 .3 9 6 , 0 .8 6 7 , 1.661 , 3 .2 2 6

( r )

0 .9 9 9

경우에는 농도가

2 , 4 , 6 . 8 X 1 0 ® M

4 4 3 n m

0 .0 7 , 0 .1 9 7 , 0 .2 9 9 ,

0 .3 9 4

( r )

0 .9 9 9

용액외 경우에는 농도가

2 , 4 , 6

8 X 1 0

4 4 0 n m

0 .1 4 1 , 0 .2 8 1 , 0 .4 2 4 , 0 . 5 6 3

( r )

0 .9 9 9

b l a n k

그러나 이 경우에는 액성 등 반응조건에 따라 흡 광도가 달라지므로, 본 실험에서는 반응조건에 영향을

Vol. 37. No. 3, 1993

박유미• 장혜선• 강경환• 김경님• 장성기• 김박광

T a b le I I — A b s o r b a n c e o f o r g a n ic at is o b e s tic p o in t

Solution Iso. Point Concentration Absorbance r MeOH 497 nM 2X10 "M 0.039 0.999

4X10- 0.073 6X10 MVl 0.108 8X10-기VI 0.141

D i^ane 495 nm 1X10 MVl 0.146 0.997 2X10 ■MVl 0.292

3X10 ■'M 0.442 4X10 MVI 0.586

F ig . 1 — H P L C c h r o m a to g r a m o f Paulownia tomentosa S te m .

I n j e c t i o n Amount o f NiHDDC (n g )

F ig . 3 — S ta n d a r d c a lib r a tio n c u r v e s o f M H D D C u r in e , b lo o d a n d D D W s o lu tio n .

- M -

U r in e B lo o d

F ig . 2 — H P L C c h r o m a to g r a m o f M H D D C in U r in e a n d B lo o d .

받지 않는 수렴 점에서외 흡광도를 측정하여 검량선을 작성한 후 이것을 사용하여

M H D D C

즉 메탄을용액외 농도가

2 , 4 , 6

8 X K T M V 1

4 9 7 n m

(r ),

1 . 2 , 3

4 X 1 0 -MVI

4 9 7 n m

T a b le I I

용액중외 성분함량을 분석하였다.

그리고

H P L C

M e O H

H A c b u f f e r ( p H 3 . 0 ) = 8 7

13

M H -

D D C

0 .9 9 9

로서 양호한 직선성을 나타내었다. 또한 같은 조건 하에 서 참오동나무 메란올엑스 중

M H D D C

0 .0 0 9 7 %

{ F ig . 1).

뇨 및 혈액중

M H D D C

H P L C

T a b le I

F ig . 2

M H D D C

1 5

M H D D C

F ig . 3

0 .9 9 3 , 0 .9 9 9 , 0 .9 9 2

양호한 직선성을 나타내었으며, 검출한계는

S / N = 3

에서

2 ~ 5 n g

이상외 결과들은 이 물질에 대한 중요한 정량방법 으로서, 특히

M e O H

H A c b u f f e r ( p H 3 .0 ) = 8 7

1 3

J. Pharm . Soc. Korea

메틸 5-히드록시 디 나 프 토 [1,2-2',3'] 푸 란-7,12-디 온-6-카 복 시 레 이 토 의 미 량 분 석 289

이동상으로 HPLC분석을 행하므로서 간편하게 극미 량까지 정량할 수 었어 이 물질의 대사체 분석 등에 서 널리 응용되리라 사료된다.

신의약품 개발연 이 연구를 수행 김종국 교수에게 갑사의 말씀

이 연구는

1 9 9 2

함에 있어서 혈액을 제공하여 준 심심한 감사를 드린다.

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