血淸 Sialic Acid의 臨껴￡實用化를 위한 級究

대한임상병리사회지

제 23권 1호

血淸 Sialic Acid의 臨껴￡實用化를 위한 級究

城 l힘病院 臨하ç病f변科

金秀貞， 李和珍， 朴雄承， 成浩然

1 .

績 論

*행짧

의 構 !κ ，λ 상 줌 하 나 인

sialic

acid는 購器組織의 細R힘表 úô 에 존재하여 細뼈 의 움직임과 안정된 構造를 維持하는데 중요한 投웹 을 하는 것으로 알려져 있다5)

血淸

acid는

및 각종 精蛋白파 마찬가 지로 ~!lIE性 病뿔、이나 惡性睡傷 등 組織의 破壞를 隨伴하는 각종 快愚、時에 폭 넓 게 增加하므로 臨皮談 斷에 이용 價植가 매우 높은 것으로 알려져 있다 13)

이와같은 血淸

acid가 그 동안 測定方法이 복잡하고， 醫驚保險團Hf費에도 檢춤項 R 이 登載되어 있지 않아서 臨皮該斷에 이용하지 못하였으나， 근래 에 醒素를 이용한 測定方法이 開發되어 CRP나 그외 각종 精蛋白보다 오히려 적은 費用으로 손 쉽게 測 定할 수 있게 되었다.

이에 著者들은 혈청

acid의 臨더〈實}해化를 위 하여 일본 極東製藥의 血젊

kit를 이 용 하여 I었 H~파 I꾀試藥을

n 動分析機에 ~웰jfJ 한 變法으로 二重測定하여 각각 信顆할 만한 結果를 얻을 수 있었다.

아울러

ESR과의 關係도 알아보고자 시 도 했던 몇 가지 實驗을 통하여 意義있는 結果를 얻었 기에 i則定方法 및 그 結果에 대하여 紹介하고자 한 다.

II.

를驗材料 및 方法

톰앓材料

1991 년 9월부터 11월 사이 本院에서 健康該斷을 實施한 正常成 A 中， 男~- 61例와， 女-]- 39例， 合 1001껴l와， 같은 기 간 本院에 서 ESR파 CRP가 同時에 依顆된 뿔‘;휩中 無作寫로 60例를 選別하여 正常 A은 血淸만 준비하고 뿔‘者는 血淸파

blood를 함

즉시 實施하였고，

定量檢좁는 一定量이 모일 때까지

冷i東庫에 i東結保存하였다가 測 定하였다.

2.

實驗方法

1) Sialic

검 사법

解素試藥 A

와 醒 素 試 藥

TPP) 를 表示量만큼 繹衝波 [ethyl-N-(β-hydroxyethy l)

으로 溶解하여 A와

를 同量 混合한다.

血淸 20μ

에 A와

混合波을

넣어 잘 섞 은 후，

bath에서 20분간 反應시킨다.

1낭 J!ð 終 r 후

化，파藥

씬 IfJi ì핀’t’1:폐)

Oml를 넣 어 60분 이 내 에 547mrn에 서 photometer의 U及 )\::f표-를 i째파하고， I퍼一하게 寶施한 標準lfllì，원의 P& 光度를 이 용， 檢體중의

含量을 討算하였 다

2) ABA-200

自動分析홉에 遇用한 變法

醒素試藥 A와 B를 1) 과 同一하게 준비하여 사용 하고 安定化試藥은 사용하지 않았다.

ABA-200에 適用한

acid의 測定

는 다음과 같다.

Test code

및

任意使用

Sample volume :

5μ

250μ

(dilution ratio 1 : 51) Filter : 14 (550/650)

Reaction type : 1 (end point) Reaction direction : 1 (up) Analyse time : 5 (5min) Revolution : 3

Data conversion type ; 01 Aux, dispense: N 0

Max Ad; 1.0

Assay fator :

~

이 외 의 檢씬 h1.t은

n ^動分析機

에 의하였다.

3) CRP-TIA

빼定法

일본 Nissuitrf:의

Kit를 I~ii.t대로 사용 하여 ìl씨파하였다.

4) ESR

檢흉法

Wintrobei.t으로 檢츄.하여 Wintrobe의

修

싸에 의하여 CSR치를 구하였다.

III .

實嚴成績

1.

血淸

acid測定法 (Manual) 과 自動分析機 應用法의 比交

F놔싸t製藥의

kit를 센파파

I’ l 폐상析機에 M흰川한 變‘파으로 二 ïf( ìUJJ 짜한 結

* ^1111삶과

Y= 1. 01x 十 0.46， flll뻐係數 (r) =0.9853으로 거의 一致하였 다

ABA-200 (mg/dl)

100

r =0.9853

2.

血淸

正常흉考個 設定

IE 常成 A 男 -{-61， 女子 39， 合 1001列를 對象으로 血 淸

acid를 測定하여 ::t 2SD를 벗어나는 結果는 l삿外하고

'1;;;; 參경-ML를 1ft 짜한 바， )써 w에서는

6::t9.14mg/d 1 , ABA-200

I’1 핑h 分析機에 應\ J IJrJ.):에 는

였 다

*Pì'ê에 서 는， f!}￥써性， f씻

flJ •

ill迷↑"1:과 함께 a과藥도 많이 節원J할 수 있 는， 自 몇h分析機에 應다}한

을 正常參考-植 로 設 Æ 하였다

또한 自動分析機를 應、用한 男子 5N 正常參考f直는 男

女←f

로 서 거의 差異가 없는 것으로 나타났다 (Table.

Table 1. Serum sialic acid level in 100 cases of healthy adult subject

Sex No. of cases Sialic acid (mg/ dl) Mean lSD

Male 61 59.5::t 7 .83

Female 39 59. 9::t8. 56

Total 100 59. 7::t 8 . 29

3.

血淸

acid個와

ESR 과의 關係

ESR파 CRP가 I버時에 依輯된 ‘뿔、者 601111를 對象으 로 血淸

ESR檢쥔를 實他한 統없，

acid와 ESR파의 關係는 相關係數 (r)

一致;환

acid와 TIA-CRP와의 關係는 m 關係歡 (r)

←一致率 85.0% 로서 세 가지 檢얀가 매우 삼|쇄↑1: 이 있는 것으로 나타났다.

또한

acid 가

어 느 것 과도 一致 하지 않는 경우는 6.7% 에 불파하므로 이들을 대신 할 수 있는 檢싼로서 매우 감意할 것으로 나타났다

(Fig 2, Fig 3, Table. 2).

50 100

一f文率은，

이 상，

이 상，

男 子 10mm/hr이 상， 女

51 u "

r 12mm/hr이상을 陽性으로 判定하여 討算하였다.

Fig 1. Comparision of value for sialic acid ; ABA-200(autoanalyser) & CH-100(manual)

150 Sialic

acid (mg/dD

100

n =60 Y = 1.48x+56

r =0.7852

10 20 30 40 50 60 ESR (mm/Hr) Fig 2. Correlation between ESR (1 Hr)

and serum sialic acid

1501 Sialic

acid (mg/c11)

100

-’ -

% -‘

n =60 Y =4.43x 十 67

r =0.6986

5 10 15

TIA -CRP (mg/ dl) Fig 3. Correation between TIA-CRP

and serum sialic acid

Table 2. Comparision of sialic acid with TIA-CRP & ESR

구 τ 님r

+ + +

24 명

。E1

47명

23명

SA, CRP

일치

0명

ESR

불일치 4 명

+

4 명

SA. ESR

일치

5병

불일치

불일치 5 명

13명

+

0 명

CRP, ESR

일치

0 명

SA

불일치 ^{4 명}

+

4 명

계 60 명

60명

IV.

考 覆

Sialic

acid는 單一의 物質을 말하는 것이 아니고，

neuramic

acid라 불리는 9개의 t설素原 f를 갖는 精 에 관련한 物質調道體의 繼稱이다 13)

A體에 있는

acid는 거의 모두가

로 알려 져 있 으며

이들은 輔蛋白파 함께 細8힘表面에 존재하여 細뼈의 움직 임 파 安定된 構造를 維持하는데 큰 投렘을 하는 것으로 알려져 있다5， 13)

그 중에 서 도

αl-antichymotrypsin，

등에 쫓붉1t￥j 되 어 있 다5， 13)

이러한 物質들을 急性反應像物質 (acute

이 라 하는데

이 들은 대 부분 JJf에 서 合成되 어 갓꺼E性病愚‘이 나 惡性睡揚 등 組織破壞 를 隨伴하는 각종 病뿔‘에서 增量되는 것으로 얄려져

있 다 1 ， 2 ， 3 ， 4 ， 5.13)

그러 므로 血淸

acid는 特定病愚의 該斷的

R릅質結合形態

로도 존재 하나 극히 徵 量 이 므로 血淸 줌의

acid는 거 의 모두가 總蛋自 에서 111 來한 것이라 할 수 있다5)

IlÍlì핍

acic의 윗핀을 나타내는 îf( 찢한 써 .1쉰 들을 살펴보면， ijf핏뿔、에서 nr파파 즉， Jl fij없變이 있 는 경우에 께f에서 APR을 잠成치 못하므로 減小하 며， nt햄의 경우에는 原發性， 轉移性 모두에서 增1)[J

한다2 ， 5 ， 13)

a-fetoprotein은 府硬變에 서 陽性으로 나타나는 정우도 있으며， 轉移性nt癡에서는 陰性으로 나타나 므로 땀癡과 府硬變의 鐵別에 있 어 서 는

가 더 有效할 것이다 13)

小化器病뿔、에서는 뽑癡， 폼햄， 急性大陽갓 등에 서 增加하며 2，3， 13) 呼吸器病뿔、으로는 上氣道햄， ì핀動 性뼈結核，1Ji1j癡， 師갓등에서 確實히 增加한다13)

￥u콩癡，

등 각종 惡性睡揚의 경우에

sialid

acid의 j農度가 睡傷의 進展度와 상당한 一致

를 보이기 때문에 이의 測定이 睡傷의 構大程度나 治驚效果를 判斷하는데 有效하다 13)

心節硬塞時에 는 發作 後 CRP와 LDH 가 빨리 t쩍 加하는 것과 달리， 서서히 增加하여 일개월 가까이 높은 植를 나타낸다 13)

즉，

acid는 心節의 障짧가 아닌 鎭傷된 心 觸을 며復시키는 組織反應時 增加하므로 心觸種塞 의 짧過觀察에도 매우 有效하다 13)

이외에도 廳保病， 痛風 등에서 반수 이상 增加하 며

關節류마치 스 등 自 己免훌性病뿔、의 活動期 에도 增加하므로 이들 病愚의 經過觀察에도 有效하

다 13)

血淸

acid는

등의 檢좁와 깊은 相關이 었다 11)

ESR파의 關係를 살펴보면， 師結核 및 교원病의 活動期 등에서 明確히 一致하며 그 외 病뿔、에서도 대 부분 一致하나 께f機能障碼時에 는

acid가 減 少하므로 反比例의 樣相을 나타낸다 11 ， 13)

CRP와의 關係는， CRP가 갖徒 發生後 빠르게 增 加하고 빠르게 減少하나

acid는 늦게 增加하 여 핏徒이 安定될 때까지 持續되므로 ESR과의 관계 보다 一致率은 떨어지는 반면에， 두 가지를 同時，

測定하여 比較하면 갖徒의 經過觀察을 더욱 明確히

할 수 있다 13)

기타 急性反應像物質 (APR) 인 각종 輔蛋되파도 강한 相關이 있으므로 간펀히 實施할 수 있는

acid를 우선 測定하여 異狀이 있는 경우에만 必要한 輔蛋 H 을 測定하는 것이 經濟的， 時間的으로 有利할 것이다

血淸

acid의 i則定方法으로는 그 동안

Thoibabiturate法6)이 가장 敏感度가 높은 것 으로 알려져 있었지만 測定方法이 복잡하여 실제로 臨많 利用에 어려운 점이 많았다.

그 후 periodate-resorcinol法8)이 開發되 어 敏感 度는 낮으나 測定方法이 前法보다 비교적 容易하며 遊離및 蛋白質파 結合된

모두를 測定할 수 있어 많이 이용 되었으나， 醒素法이 開發된 지금 은 거의 俠川치 않고 있다.

解훤를 이 용한 )j 필으로는 Colormetridt과

헛h 分析·機에 適 JH 하는 uv설이 있는데， 앞의 方法은 縣 素反應으로 만5 成된

acid에 peroxidase를 이 용하여 過醒化水索를 生成시켜 i則定하며， 뒤의 方法 은

acid에 LDH를 이 용하여

acid로 변 하는 過程의

吸光度 差를 求하여 測定한

다 9 ， 10 ， 12)

V. 結 論

血淸sialic acid를 臨1未에 活用하기 위 하여 몇 가 지 試驗을 한 結果는 다음과 같다.

1.

일본 極東製藥의 血淸

kit를 原法파

ABA-200

自動分析機에 應用하여 測定한 바， 두 方

法의 結果에 有意할만한 差異가 없었다.

2. ABA-200

피動分析機를 利用한 血淸

acid의 1E 1합參考뼈는

이었으며 男 女別 差異가 없었다.

3.

血淸

acid와 ESR과의 關係는 相關係數

(r) 0.6986,

一致率 85.0% 로 매우 有意、하였다.

4.

血淸

acid와 TIA-CRP와의 相關은 相關 係數 (r)

一致率 85.0% 로 매우 有意、하였다.

이상의 結果와 文敵考察에 의하면 臨皮化學 領域 의 거의 모든 檢출가 府및 賢機能에 치우치고 있는 現實에 서 簡便하게 실시 할 수 있 는 血淸

測定은 急硬性갓徒病思、 및 惡性R重傷등의

test로서 充分히 利用할 價f直가 있다고 판단된다.

A Study on Serum Sialic Acid for Clinical Application

Kim, S. J., Lee, W. J., Park, K. S., Sung, H. Y.

Dept. of Clinical Lab. Sung Nam Hospital

ABSTRACT

The authors reviewed through some study to made use of serum sialic acid for clinic.

The result were as follow;

1. A comparision of native method by serum sialic acid kit and modified method by ABA-200 chemistry analyser shows good correlation coeffi- cience and linear regression equation.

2. In the healthy adult subjects, level of serum sialic acid was 59. 7 ± 8 . 29mg/ dl.

3. Level of serum sialic acid showed no differe- nce between male and female in healthy adult subjects.

4. The results of serum sialic acid and ESR showed the rate of accord 86. 6% .

5. The results of serum sialic acid and TIA -cRP showed the rate of accord 85. 0% .

REFERENCES

1.

~7lt!», ol-t-~, A~J\»~, ~~l%), ~~~' l!f~

~'

~~'

%~

~:q}A}oJ1 A~ ~TP»

~~1

*

^{~ ~J ~}

*

^~f?i

*it&t,

~19~ ~HJx,

2. *J87J_,

o1~7J-, ?:J-~~1~.

{J~

~

±~}71

~

~ ~

q! T ; t!l

tTI-~ lll-~:§:1

J>-112~.

3. l!f7lt'8,

~tTI-~, {J~~.

~ ~

~~A~ ~ ~

~tTI­

q! T-;

::kf¥~*mlli!*ittt;, ~5~, ~H~.

1985if..

4.

~;;;1

~~At ~

~

~

~-¥- ~~~

~ ~~

Q{~ ~

~ ~ A~ ~ ~J

.9-1

~%oJ1 ~'51-ci!

~wli::k*1irlftt:. ~25~.

~3~,

6. Warren L : The thiobabituric acid assay of sialic acid, J. Biol chem 234 ; 1971.

7. Keldevsky P : Carcino embryonic antigens.

In recent results in cancer research, Vol 45.

New York, Springer-Verlag. 1974.

8. J ourdian GW. Dean L. Roseman S : The si- alic acid. XI. A periodate resorcinol method for the quantitative estimation of free sialic acid and their glycosides, J Biol Chern 246 ; 430, 1971.

9. ff:ftfr},

pgffi~f*-1-, 7-.f*m~-t-

~(:~.QlfiLrf:tV7Jl;~Q)§jJJ~~~j~, ~*m

l_!I!, 54 ; 140, 1980.

10.

f~ff~~. itff~PJJ, fl-¥*~*: v~ JvV~

$

~~l.N~¥~$ ~(:~.QV7Jl;~O)~rJ~. ~W

m11.

n.

IWim$~*~:

;1;~ atrJ~fwU::JJf-~tfiiO) .It•~

~wm11 f~54,

12.

::krq~·li. ~-fl. ::RPxm:J'tn :

705~(:~

.Q

lfllrf:tV7Jv~OJ§fh~~,J~. ~Wmlli!,

135, 1983.

13. B:JfftXPJJ:

;\!7!)-.::/~fi~C:t/CQ)lfn.~RV

7

Jv~O)~~I]~

61 ,grj:ffl}-, 1984.