Amikacin sulfate가 돼지 정액의 체외보존에 미치는 영향

(1)

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Amikacin sulfate7

~ 돼지 정액의 체외보존에 미치는 영향

신종원， 황환섭， 김종택， 박춘근， 정희태， 김정익， 장현용 · 초|강덕 공홍식 이학교 양부근 f

강원대학교 동물자원과학대학， 한경대학교 생명공학과1’ 경희대학교 동서신장병연구소2

Effect of amikacin sulfate on sperm characteristic in fresh boar semen during in vitro storage

J. Y.

앙rin，

H. S.

H때J]g，

J. T.

퍼m，

C. K

많rk，

H. T. Cheo ng, C. 1. Kim,

표

Y. Jang , K D.

Ch이2’

H. S.

Kon힐， H.

K Lee

¹때d

B. K yangt

College of An imal Resources Science , Kangwon National

[자1iversity，

lDepartment of Genomic

En앙'neering，

Genomic Informatics Center ,

많nkyong

Nation a1 University ,

깜'ast

West Ki dney Disease Research Institute , School of Medicine , Kyung Hee University

ABSTRACT

The purpose of this study was to investigate the effect of amikacin sulfate on sperm characteristic in fresh boar semen during in vitro storage.

The percentage of motile spermatozoa extended with Mulberry ru , Modena and Modenaplus amikacin sulfate were 69.9% , 40.6% and 44.6% , respectively.

Using Makler counting chamber , the percentage of viable spermatozoa showed 53.8% in Mulberry

ru , 33 .4% in Modena , and 39 .4% in Modena plus amikacin sulfate , respectively. Empolying the hypoosmotic swelling test (HOST) , sperm membrane integrity were 25.6% in Mulberry III , 19 .7% in Modena , and 2 1. 6% in Modena plus amikacin sulfate with coiled-tail spermatozoa in overall means.

In Coomassie brilliant blue staining , the rates of acrosome-intact spermatozoa extended with Mulberry ru , Modena , and Modena plus amikacin sulfate (0.6mg/mD were 89 .4%, 82 .4% and 84 .1 %, respecti vely.

In Rose-Bengal staining , the percentage of abnormal sperm were 9.6% in Mulberry ru , 10.5% in Modena and 10.5% in Modena plus amikacin sulfate , respectively.

The results of motility , menbrane integrity , the acrosome-intact spermatozoa extended with Mulberry III was higher percentage than in those of any other groups , but sperm abnormality were not difference among the groups.

Key words: boar spennotozo a, amikacin

su따tι

Mode na, in vitro storage

t Corespondence Tel: 033-250-8623

,

E-mail: bkyang@ kangwon.ac.kr

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(2)

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서 론

원정액의 희석은 유전적으로 능력이 우수 한 숫컷을 최대한 활용하기 위하여 채취한 정액을 다수의 암컷에 주입할 수 있도록 정 액량을 증가시키고， 정자의 생존성에 유효하 게 작용하는 물질을 첨가하여 정자의 체외 보존성을 높이는 데 었다.

정액 희석액의 구비조건은 당류를 비롯한 여러 종류의 유기물질을 첨가하여 정자의 체 외생존율을 연장시키고， 희석액의 삼투압을 등장으로 조정하며， 또한 완충제를 첨가하여 정자의 생존성에 적합한 pH를 유지하고， 정 액 중에 들어 있는 미생물의 작용으로 인한 오염을 방지하기 위하여 항생물질이 첨가되 어야 한다.

돼지정액 희석제에 샤용되는 항생제에는

Dihydrosteptomycin ^, Ge ntamycin ^, Li ncomycin ^, Penicilin ,

Polymi꾀n

B. Spsleinomyain , Bacitracin ,

Colistin ^, Dibekacin ^, Enrofloxin ^, Erythromycin ^, Kanamycin ^,

S띠famlamide，

Sulfadiazine ^, Ty losin

벚

Ami kacin sulfate

등이 었다(신창엽，

2003).

항 생제 중

Penicilin

과 Gentamycin은 코알라의 희석 정액에서 박테리아의 성장을 억제한다눈 보고가

있으며

(Johnston

등;

1998) Amikacin

s버fate는 kanamycin에서 유도된 반합성 아미노배당체의 항 생물질로

Pseudomonas ^, Providencia ^, Acinetobacter ^, Pr oteus species

벚

Escherichia coli , Citrobacter freundi i, Klebsiella-Enterobacter- Se rratia

등을 포 함하는 그람음성 세 균에 효과적 이 고

penicillinase

생 성 포도상구균을 포함한 여 러 종의 그람음성 미생물에 대해서도 효과적이 다. 또한 임상적으로는 감수성 세균에 의한 광범위 한 감염증치료에 널리 사용되고 있다

(

이 우주，

20Q2). Amikacin

sulfate는 종마와 황소의 희 석 정 액 에 서

Penicilin

^,

Penicilin

~l

streptomycin의혼합 첨가와 비교하였을 때 가 장 높은 정자 운동성을 나타냈으며 (Arriola 와

Foote ^, 1982) ^, Amikacin sulfate ^, Gentamycin sulfate ^, Streptomycin sulfate ^, Penicillin G ^, Sodium Ticarcillin

를 이 용하여 종마의 정 액 을 희석한 후 저장 기간동안의 정자의 운동성을 검 사한 결과

Amikacin

sulfate를 첨 가한 희 석 정액에서 정자운동성이 가장 높게 나타났으며 전진운동정자의 비율 또한 높은 것으로 보고 되 었다 (Varner등，

1998).

본 연구에서는 정액 희석액에

Amikacin

sulfate를 첨 가하여

Amikacin

sulfate가 돼 지 정액의 특성에 미치는 영향을 캠토하고자 실 시하였다.

ll.

재료 및 방법

1

정액채취 및 희석액 제조

( 1 )

정액채취

원주

A .I

센터의 웅성 종돈에서 수음마사 지법으로 채취한 정액과 일정량의 희석액

(Mulberry

m 와 Modena) 을 혼합하여 희석 정액의 농도를

3.75

^X

10

⁵ 정자Iml 가 되도록 맞춘 후 1Tc 의 돼지 정액 보관고에 옮겨

2

시간 내에 실험실로 운반하여 실험에 공용하 였다.

(2)

희석액 제조

돼지 정액 희석액 인

Modena(Table

1)의 구성 성분 중

Gentamicin

sulfate를 대신하여

Amikacin sulfa

te를 각각

0.3mg/m l, 0.6mg/ml

과

0.9mg/ml

를 첨가하여 희석액을 제조하 였다.

(3)

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Table 1. Composition of Modena pig semen extender Ingredients

Glucose EDTA NaHCO a Tris

Sodium citrate Citric acid Cysteine BSA

Gentamicin sulfate

2.

정액 성상검사

mM 138.73

6.06 1 1. 90 46.66 23 .4 6 9.52 3.06

육안에 의한 생존 빛 활력검사， 유효정자율 검 λh 기형율 검사， 저장액에서 정자 강도 검사 빛 첨체 정상성 검사 등의 돼지 정액의 일반 성상검 사는 “돼지 신선 정액의 체외 보존에 따른 정액 희석제의 효과”의 방법에 준하여 실시 하였다.

3.

통계처리

M.W.

180.2 372.2 84.01 12 1. 1 294 .1 210 .1 163.2

Volume(g /l) 25.0 2.25 1. 0 5.65 6.9 2.0 0.5 3.0 0.3

본 실험에서 얻어진 결과를

SAS

Package를 이용하여

Duncan

다중검정을 실시하여 처리 간 유의성을 검정하였다.

I1I.

결 과

1.

육안에 의한 생존율검사

Table 2. Effects of Amikacin sulfate on sperm motility in boar semen during in vitro storage

Storage periods Motility ( %)

(days) Mulberry m Modena M + A-0.3

¹

M + A-0.6

²

M + A-0.9

³

0 97.0

:t

1. 4 96.0

:t

0.0 97.0 :t 1. 4 97.0 :t 1. 4 97.0 :t 1. 4 2 93.5 :t 0.7a 84.5 :t 0.7c 9 1. 5 :t O .7 ab 94.0 :t 2.8a 88.5 :t 2.1 cb 4 83.0 :t 2.8a 5 1. 5 :t 2 .1 c 62.5 :t 0.7b 54.5 :t 0.7c 6 1. 5 ::!: 2 .1 b 6 77.0 :t 1. 4a 1 1. 5 :t 0.7c 16.5 :t 2 .1 b 17.0 ::!: O.Ob 15.5 :t 0.7b 8 59.0 :t O.oa 0.0 :t O.Od 0.0 :t O.Od 2.5 :t 0.7c 5.0 :t O.Ob 10 10.0 :t 1. 4a 0.0 :t O.oc 0.0 :t O.oc 0.0 :t O.oc 2.5 ::!: 0.7b Overall mean

Mulberry m 69.9

^:t

29.0

^A

Modena 40.6

:t

29 .4 B Amikacin 44.6

:t

30.5B

1. M + A -0.3 Modena + Amikacin - O .3mg/ml 2. M + A -0.6 Modena + Amikacin - 0.6mg/ml 3. M + A -0;9 Modena + Amikacin - 0.9mg/ml

a. b. c. dMean values within row and

A.

Boverall mean within coloum with different superscripts are significantly differ

,

P<0.05.

(4)

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육안에 의한 정자의 생존 빚 활력 검사에 대한 결과를

Table 2

에 나타냈다.

Table 2

에서 나타난 바와 같이 0 일에는

처리구간에 통계적으로 유의적인 차이를 보 이지 않았으나 2 일부터 처리구간에 유의적인 차이가 인정되었다 (P<0.05). 체외 보존 8 일후 부터 는

Mulberry Ill,

Modena에

Amikacin sulfate 0.6mg/ml

첨 가구와 Modena에

Amikacin sulfate 0.9mg/ml

첨 가구에 서 만 생 존정자가 인정되었으며，

Mulberry

III 가 여타 구보다 유의하게 높은 성적을 나타냈다

( P<0.05L

전체평균에서 보면 대조구인

Mulberry Ill, Modena

벚 Modena 에

Amikacin sulfate

첨가구에서 각각

69.9% ,

40.6%

및 44.6% 의 생존율을 나타내어

Mulberry

III 가 유의하게 높은 성적을 나타

냈 으며 Modena와 Modena에

Amikacin

sulfate

첨가구간에는 통계적 유의성은 인정

되 지 않았으나， Modena 에

Amikacin sulfa te

첨가구가 다소 높은 성적을 나타냈다.

2.

유효정자율검사

유효정자율에 대한 결과를

Table 3

에 나 타냈다.

Table 3

에서 나타난 바와 같이 0일에는 대

조구와 처리구간의 유의적인 차이가 나타나지 않았으나 2 일부터 처리구간에 유의적인 차이 를 나타내었다 (P<0.05). 대조구인

Mulberry III

가 8 일 후에

28.6% ,

10 일 후에 4.8%로서 정자 의 유효정자율이 가장 좋았으며， Modena와 Modena에

Amikacin

첨가구는 체외보존 8 일 후 부터는 생존정자가 나타나지 않았다. 전체 평 균 성 적 에 서 는

Mulberry III

가 Modena와 Modena에

Amikacin

첨 가구보다 유의 하게 높 은 성적을 나타내 육안에 의한 생존율과 비슷 한 경향을 나타냈다.

3.

정자 강도 검사

(Hypoosmotic swelling test)

Table 3. Effects of Amikacin sulfate on viable spermatozoa in boar semen during in vitro storage

Storage periods Viable spermatozoa(%)

(days) 0 2 4 6 8 10 Overall mean

Mulberry m

95.0

^:t

0 .1 83.6

^:t

2 .1 a 65.7

^:t

4.0a 44.9

^:t

1. 4a 28.6

^:t

1. 0a 4.8

^:t

OS

Mulberry m 5 3. 8

^:t

32.6

^A

Modena 33 .4

:t

35 .1 B Amikacin 39 .4

:t

37.2B

Modena 93. 4

:t

0.3 54.2

:t

3 .5"

4 1. 0

:t

0. 7"

12.0

^:t

0 .1

^C

0.0

^:t

O.Ob 0.0

^:t

O.Ob

1. M + A -0.3 Modena + Amikacin - O .3mg/ml 2. M + A -0.6 Modena + Amikacin - 0.6mg/ml 3. M + A -0.9 Modena + Amikacin - 0.9mg/ml

M + A -0.3

¹

M + A -0.6

²

95.3

^:t

2.5 94 ^.4

^:t

0 ^.7 68.7

^:t

0 .1 b 70 .3

:t

7.6b 54.0

^:t

4.0b 59 .4

:t

3.5ab 12 ^.1

^:t

13 17.8

^:t

0.9b

0.0

^:t

O.Ob 0.0

^:t

O.Ob 0.0

^:t

O.Ob 0.0

^:t

O.Ob

M+A-O.9

³

96 .1

:t

1. 4 7 3. 7

:t

2.5ab 5 1. 8

^:t

2.5b 16.3

^:t

0 .1 b 0.0

^:t

O.Ob 0.0

^:t

O.Ob

a. b. cMean values within row are

A.

Boverall mean within coloum with different superscripts are significantly differ

^,

P<0.05.

(5)

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Table 4. Effects of Amikacin sulfate on sperm showing swelling in boar semen during in vitro storage Storage periods Hypoosmotic swelling spermatozoa( %)

(days) Mulberry m Modena M + A-O.3

¹

M + A-O.6

²

M ⁺ A-O.9

³

0 4

^1.

8

:t

5 .4 36.8

^:1:

5.9 34.8

^:1:

8.5 36 .3:I:7 .6 37.0

^:1:

9.2 2 33.0

^:1:

3.9 27.5

:1:

5 .3 27.0

:1:

2.6 30.7

^:1:

6.9 29.3

:1:

5.5 27.2

^:1:

3S 22.7

^:1:

2.5b 24.5

^:1:

2.6ab 24.7

^:1:

2.9ab 24.7

^:1:1.

0ab

24

^.7:1:

2.7a 20.2

^:1:

3.2b 23.2

^:1:1.

9ab 23.2

^:1:1.

7ab 23.7

^:1:

4.2ab

8 14.2

:1:

2.9a 8.0

:1:

2.0b l

1.

0

:1:

3.5ab 12.7

:1:

2.9a 1

^1.

0

^:1:

5 .1 ab 10 12.7

^:1:

2.9a 3.2

^:1:1.

6b 4.0

^:1:1.

8b 5.5

^:1:

0.5b 4.8

^:1:

3.8b Overall mean

Mulberry m 25.6

:1:

10.9A Modena 19.7

^:1:

12.0B Amikacin 2

^1.

6

^:1:

l

^1.

4AB

1.

M ⁺ A-O ^.3 Modena ⁺ Amikacin - 0.3mg/ml 2. M + A-0.6 Modena + Amikacin - 0.6mg/ml 3. M ⁺ A-0.9 Modena ⁺ Amikacin - 0.9mg/ml

a. bMean values within row and A. Boverall mean within coloum with different superscripts are significantly differ , P<0.05.

저장액을 이용한 정자의 강도검사에 대한 결 과를

Table 4

에 나타냈다.

Table 4

에서 나타난 바와 같이 0 일과 2 일에 서 대조구와 처리구간의 유의적인 차이가 나타 나지 않았으나， 4 일부터 유의적인 차이가 나타 나기 시작하였다. 8 일까지

Amikacin

0.6mg과

Amikacin 0.9mg

첨가구는 대조구인

Mulberry

m 와 유의적인 차이를 나타나지 않았으며 처리 구 중

Amikacin

0.6mg첨가구에서 가장 높은 정 자 강도율을 나타내었다. 전체 평균에서 대조구 인

Mulberry m

와 Modena는 각각 25.6%와 19.7%로서 통계적으로 유의한 차이를 나타냈으 나 (P<0.05) ，

Mulberry m

와 Modena에

Amikacin

첨가구간에는 각각 25.6%와 21. 6%로

서 통계적으로 유의성 이 나타나지 않았으나，

Mulberry

m 가 다소 좋은 성적 을 나타냈다.

Mulberry m ^, Modena

및

Amikacin

첨 가구의 정자 강도율을 비교해 본 결과 Amikacin의 첨 가가 체외보존 8 일후 까지는

Mulberry

m 와 유 의한 차이가 인정되지 않았으나，

Modena

처리

구보다는 다소 높은 성적을 얻었다.

4. Coomassie brilliant blue

^{염색방법에}

의한 정자의 침체 정상성 검사 첨체 정상성 검사에 대한 결과를

Table 5

에 나타냈다.

Table 5

에서 나타난 바와 같이 0일과 2일에

서는 처리구간에 통계적으로 유의차가 나타나지 않았으나， 체외보존 4일부터 10 일까지 처리구가 대조구인 Modena보다 약간 높은 성적을 나타냈 으나 통계적으로 유의차는 인정되지 않았다. 전 체적인 평균에서 대조구인

Mulberry m ^,

Modena와 Modena에

Amikacin sulfate

첨 가구에 서 각각

89 .4%, 82 .4%

벚 84.1%로서

Mulberry

m 가 높은 성적을 보였으며 Modena와

Amikacin

첨가구는 각각 82.4%와 84.1%로 통계 적으후 유의성 이 인정되지 않았으나，

Modena

처 리 구보다는 Modena에

Amikacin sulfa te

첨가구 가 다소 높은 성적을 나타냈다.

(6)

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Table 5. Effects of Amikacin sulfate on acrosome intact sperm in boar semen during in vitro storage

Storage periods Acrosome intact (%)

(days) Mulberry III Modena M + A-0 .3

¹

M + A-O.6

²

M + A-O.9

³

0 96.5 :t 1. 0 95 .3:t 1. 4 96.3 :t 1. 4 95.7 :t 1. 4 95.8 :t 1. 5

2 93.7 :t 1. 4 93.8 :t 1. 5 95 .3:t 1. 4 93.8 :t 1. 7 93.7 :t 1. 2

82.5 :t 1. 9

^a

82.7 :t 1. 4b 84.0 :t 1. 0b 8 3. 5 :t 1. 0b 83.7 :t 2 .1 b 87.2 :t 4 .4

^a

78.7 :t 6.2b 8 1. 5 :t 1. 4b 8 1. 3 :t 1. 2b 8 1. 7 :t 3 .4 b 8 84.7 :t 4 .4

^a

74.2 :t 4.8b 75.2 :t 4 .1 b 77.5 :t 3.6b 77.5 :t1. 6b 10 8 1. 8 :t 3 .4

^a

69.5 :t 5.7b 7 1. 2 :t 4.0b 73.7 :t 3.7b 72.0 :t 2.6b Overall mean

Mulberry III 89 .4:t 6.0

^A

M odena 82 .4 :t 10 .4 B Amikacin 84 .1:t 9.0 B

1. M + A -0.3 Modena + Amikacin - O .3mg/ml 2. M + A -0.6 Modena + Amikacin - 0.6mg/ml 3. M + A -0.9 Modena + Amikacin - 0.9mg/ml

a.

bMean values within row and

A.

Boverall mean within column with different superscripts are significantly differ

,

P<0.05.

5.

정자의 기형율 검사

Rose-Bengal

염색방법을 이용한 정자의 기

형율 검사에 대한 결과를

Table 6

에 요약하 였다.

Table 6

에 나타난 바와 같이 체외보존기

Table 6. Effects of Amikacin sulfate on abnormal sperm in boar semen during in vitro storage

Storage periods Abnormality (%)

(days) Mulberry III Modena M + A-0 .3

¹

8.2 :t 1. 7 9.2 :t 1. 9 9.5 :t 1. 9

2 9 .3 :t 2 .4 9.8 :t 1. 6 9 .3 :t 1. 2

4 9.2 :t 1. 5 10.8 :t 1. 7 9 .3 :t 1. 3

6 10.2 :t 1. 7 1 1. 0 :t 2 .1 9.3 :t 1. 4 8 10.7 :t 1. 2 1 1. 2 :t 2 .1 9 .3 :t 1. 5 10 10.2 :t 1. 6 1 1. 0 :t 1. 5 9.3 :t 1. 6 Overall mean

Mulberry m 9.6 :t 1. 8 Modena 10.5 :t 1. 9 Amikacin 10.5 :t 1. 8

1. M + A -0 .3 Modena + Amikacin - 0.3mg/ml 2. M + A -0.6 Modena + Amikacin - 0.6mg/ml 3. M + A -0.9 Modena + Amikacin - 0.9mg/ml

M + A-O.6

²

9.5 :t 1. 0 10.0 :t 1. 8 9.7 :t 1. 5 10.2 :t 1. 7 1 1. 7 :t 2.0 1 1. 8 :t 1. 9

M + A-O.9

³

8.8 :t 1. 5 9.6 :t 2 .3 10.2 :t 1. 5 10.5 :t 1. 9 1 1. 8 :t 1. 5 1 1. 0 :t 1. 4

(7)

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간이 경과함에 따라 기형정자율은 대조구과 처리구간 모두에서 다소 증가하는 경향을 보 였으나 통계적으로 유의한 차이는 인정되지 않았다 (P)0.05L 전체평균에서도 대조구와 처 리구간에 유의한 차이를 나타내지 않았다.

N.

고 찰

돼지 정액 내에서 발견되는 세균의 종류에 는

staphyloccus spp ^, pseudomonas spp ^, eseherichia spp , klebsiella spp , citrobacter spp , microccoccus spp , eubacterium suis ,

Alcaligenes spp , Acinetobacter spp

둥 이 있 다. 세균은 정자의 생존에 악영향(오염， 정자 의 응집， 생존기간 단축)을 끼치며 섬할 경 우 12시간 이내에 정자의 사멸을 초래하고 있다(신창엽，

2003).

본 연구는 호기성 세균 의 성장을 억제하는데 가장 효과적인

Amikacin sulfa te (V

arner등， 1998) 를 정 액 희 석액에 첨가하여 정액의 장기보존 및 저장 기간 중 돼지 정액의 성상에 미치는 영향을 알아보고자 실시하였다. 육안에 의한 생존 및 활력검사 전체 평균에서는 대조구인

Modena (40.6%)

와

Amikacin ( 44.6

%)첨가구간의 유의적인 차이를 나타내지는 않았지만 보존 2일 의

M+A-0.3mg

벚

M+A-0.6mg

에서 각각

9 1. 5%

및 94.0%로서

Modena (84.5

%)보다 통계 적으로 높은 성적을 얻었으며， 대조구인

Mulberry m

(93.5%) 와 유의 차가 나타나지 않았 다. 또한 보존 6일에서

M+A-0.3mg ^, M+A-0.6mg

및 M+A-0.9mg은 각각

16.5% ^, 17.0%

및

15.5%

로서 대조구인 Modena의 11.5%보다 유의적으로 높은 결과를 나타냈다. 유효정자율 검사에서 도 육안에 의한 생존 벚 활력검사와 유사한

결과를 나타내였다.

이는

Amikacin

sulfate는 정자운동성 에 관한 연구(Arriola와

Foote , 1982)

와

Amikacin sulfate

가 종마의 정자운동성 유지를 위한 최상의 상태 를 공급한다는 보고(Varner등， 1998) 와 일치하는 경향을나타내었다.

정자의 강도 검 λh 첨체정상성 검사 빚 기형율 검사에서는 Modena희석액에 항생제인

Amikacin

sulfate

첨가의 효과는 인정되지 않았다. 본 실험

의 결과를 볼 때， 고가의

Mulberry m

^희석액에

비하여 저가인

Modena

희석액에 항생제인

Ami kacin

sulfate의 첨가는 돼지 정액의 일반 성 상을 다소 힘탱시키므로 항생제로 효과적으로 이 용 될 수 있다고 사료된다.

v. 참고문헌

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Amikacin sulfate가 돼지 정액의 체외보존에 미치는 영향

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Amikacin sulfate7

신종원， 황환섭， 김종택， 박춘근， 정희태， 김정익， 장현용 · 초|강덕 공홍식 이학교 양부근 f

Effect of amikacin sulfate on sperm characteristic in fresh boar semen during in vitro storage

J. Y.

H. S.

J. T.

C. K

H. T. Cheo ng, C. 1. Kim,

Y. Jang , K D.

H. S.

K Lee

B. K yangt

College of An imal Resources Science , Kangwon National

lDepartment of Genomic

Genomic Informatics Center ,

Nation a1 University ,

West Ki dney Disease Research Institute , School of Medicine , Kyung Hee University

ABSTRACT

The purpose of this study was to investigate the effect of amikacin sulfate on sperm characteristic in fresh boar semen during in vitro storage.

The percentage of motile spermatozoa extended with Mulberry ru , Modena and Modenaplus amikacin sulfate were 69.9% , 40.6% and 44.6% , respectively.

Using Makler counting chamber , the percentage of viable spermatozoa showed 53.8% in Mulberry

ru , 33 .4% in Modena , and 39 .4% in Modena plus amikacin sulfate , respectively. Empolying the hypoosmotic swelling test (HOST) , sperm membrane integrity were 25.6% in Mulberry III , 19 .7% in Modena , and 2 1. 6% in Modena plus amikacin sulfate with coiled-tail spermatozoa in overall means.

In Coomassie brilliant blue staining , the rates of acrosome-intact spermatozoa extended with Mulberry ru , Modena , and Modena plus amikacin sulfate (0.6mg/mD were 89 .4%, 82 .4% and 84 .1 %, respecti vely.

In Rose-Bengal staining , the percentage of abnormal sperm were 9.6% in Mulberry ru , 10.5% in Modena and 10.5% in Modena plus amikacin sulfate , respectively.

The results of motility , menbrane integrity , the acrosome-intact spermatozoa extended with Mulberry III was higher percentage than in those of any other groups , but sperm abnormality were not difference among the groups.

Key words: boar spennotozo a, amikacin

Mode na, in vitro storage

t Corespondence Tel: 033-250-8623

E-mail: bkyang@ kangwon.ac.kr

www.earticle.net 1 .

Dihydrosteptomycin , Ge ntamycin , Li ncomycin , Penicilin ,

B. Spsleinomyain , Bacitracin ,

Colistin , Dibekacin , Enrofloxin , Erythromycin , Kanamycin ,

Sulfadiazine , Ty losin

Ami kacin sulfate

2003).

Penicilin

(Johnston

1998) Amikacin

Pseudomonas , Providencia , Acinetobacter , Pr oteus species

Escherichia coli , Citrobacter freundi i, Klebsiella-Enterobacter- Se rratia

penicillinase

(

20Q2). Amikacin

Penicilin

Penicilin

Foote , 1982) , Amikacin sulfate , Gentamycin sulfate , Streptomycin sulfate , Penicillin G , Sodium Ticarcillin

Amikacin

1998).

Amikacin

Amikacin

ll.

1

( 1 )

A .I

(Mulberry

3.75

10

2

(2)

Modena(Table

Gentamicin

Amikacin sulfa

0.3mg/m l, 0.6mg/ml

0.9mg/ml

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Table 1. Composition of Modena pig semen extender Ingredients

Glucose EDTA NaHCO a Tris

Sodium citrate Citric acid Cysteine BSA

Gentamicin sulfate

2.

mM 138.73

6.06 1 1. 90 46.66 23 .4 6 9.52 3.06

3.

M.W.

180.2 372.2 84.01 12 1. 1 294 .1 210 .1 163.2

Volume(g /l) 25.0 2.25 1. 0 5.65 6.9 2.0 0.5 3.0 0.3

SAS

Dihydrosteptomycin ^, Ge ntamycin ^, Li ncomycin ^, Penicilin ,

Colistin ^, Dibekacin ^, Enrofloxin ^, Erythromycin ^, Kanamycin ^,

Sulfadiazine ^, Ty losin

Pseudomonas ^, Providencia ^, Acinetobacter ^, Pr oteus species

Foote ^, 1982) ^, Amikacin sulfate ^, Gentamycin sulfate ^, Streptomycin sulfate ^, Penicillin G ^, Sodium Ticarcillin