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Ginkgolides Attenuate Glutamate-Induced Neurotoxicity in Primary Cultures of Rat Cortical Cells

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약학회지 40 6 720-726(1996) Yakhak Hoeji Vol. 40. No. 6

글루타메이트에 의한 신경독성에 미처는 정코라미드의 영향

김 소 라전 미 희* • 김 영 중*

서울대학교 약학대학. •보건복지부 중앙약사심의위원회

{Received October 9. 1996)

Ginkgolides Attenuate Glutamate-Induced Neurotoxicity in Primary Cultures of Rat Cortical Cells

So Ra Kim, Mee Hee Jeon* and Young Choong Kirrf

College of Pharmacy, Seoul National University, Seoul 151-742, Korea

*The Central Pharmaceutical Affairs Council, Government Complex II, Kwachun-City, Kyungkido 427-760, Korea

Abstract——The neurotoxicity induced by L-glutamate in primary cultures of rat cortical cells could be attenuated by diterpene constituents of Ginkgo biloha leaves, ginkgolides A, B and C. At the con­

centration of 100 nM. ginkgolides up-regulated the activity of glutathione reductase in primary cultures of rat cortical cells exposed to 100 (iM glutamate. Furthermore, ginkgolides increased the content of reduced glutathione in glutamate-treated cortical cells. However, ginkgolides showed little effect in reducing superoxide dismutase activity. Ginkgolides did, however, markedly blocked the production of malondialdehyde, a byproduct of lipid peroxidation in glutamate-treated rat cortical cells.

Keywords O glutamate, primary cultures of rat cortical cells, ginkgolides. glutathione reductase, su­

peroxide dismutase. glutathione, malondialdehyde.

노인성 질환 중에서 최근 사회 문제로까지 대두되고 있는 치매는 알쯔하이머씨 병이 주원인언 것으로 알려 졌다. 알쯔하이머씨 병 환자는 콜린성, 아드레날린성, G A B A 성 및 글루타메이트성 신경에 이상이 초래되며.

특히 콜린성 신경의 손실이 가장 심각하다고 보고되었 다 . 이 러 한 다양한 신경 중에서도 최근에 알쯔하이머 씨 병의 발병이나 진전에 글루타메이트성 신경이 깊이 연관되어 있다는 연구보고가 급증하면서 글루타메이트 성 신경에 작용하는 물질을 이용하여 알쯔하이머씨 병 올 에방하거나 치료하려는 시도에 관심이 고조시되고 있다.2-^> 글루타메이트는 뇌조직 중에서 기억력과 학습 력에 관여한다고 알려진 소뇌편도, 해마 등에 집중적으 로 분포되어 있는 세 종류의 수용체, 즉 quisqualate, N-methyHD-aspartate (NM DA ) 및 kainate 수용

" 논문에 관 한 문 의 는 저 자 에 게 로 (전화0 02-880-7842 (팩 i ) 02-888-2933

체에 작용하여 다양한 생리작용의 발현에 관여한다.®*

하지만 이둘 조직이 저산소나 저혈당 상태와 같이 비정 상 상태에 이르게 되면 시냄스에서 유리되는 글루타메 이트의 양이 증가된다. 그러나 신경세포 내로의 재흡수 는 감소되어 결과적으로 세포 외의 글루타메이트 농도 가 증가된다/^"® 이와 같이 세포 외의 글루타메이트의 농도가 증가되면 세포 내의 C a^ 의 농도가 따라서 증가 되고 이에 따라 자유 분자단외 생성이 증대되어 결국에 는 세포막에 상해를 일으켜 신경세포의 괴사가 초래된 다 .8-® 따라서 이러한 글루타메이트의 작용을 차단시킬 수 있는 물질은 알쯔하이머씨 병의 증상을 개선시키거 나 진행을 지연시킬 수 있다고 보고되었다.*®

본 연구실에서는 생약 및 민간약을 중심으로 글루타 메이트로 인한 신경독성 차단효과를 검색하던 중 은행 잎 추출물이 글루타메이트로 인한 득성을 유외성 있게 차단시킴을 확인하였다. 은행엎 추출물은 1972년에 유 럽에서 특허화되어 심혈관계 및 노인성 말초 순환장애,

(2)

뇌 혈 관 장 애 의 치 료 제 로 널 리 사 용 되 고 있 으 며 이 러 한 효 과 는 주 로 flavonoid 성 분 에 의 한 것 으 로 밝 혀 졌 었 .*** 그 러 나 최 근 은 행 잎 중 의 diterpene 성 분 인

ginkgolides 약 효 성 분 이 며 강 력 한 platelet ac­

tivating factor 대 한 길 항 작 용 이 있 다 고 보 고 된 이 에 대 한 연 구 가 활 발 하 다.** 특 기 할 만 한 것 은 은 행 엎 중 외 diterpene 성 분 인 ginkgolides ses- quiterpene bilobalide 일 차 배 양 한 흰 쥐 의 해 마 세 포 나 계 배 의 뇌 신 경 세 포 에 서 과 량 의 글 루 타 메 이 트 에 의 한 신 경 세 포 괴 사 를 유 의 성 있 게 차 단 시 켰 다 는 보 고 있 다.*^^*^* 그 러 나 이 에 대 한 작 용 기 전 은 밝 혀 진 없 다. 이 에 연 구 에 서 는 ginkgolides 중 에 서 A, B

C 일 차 배 양 한 흰 쥐 의 대 뇌 피 질 세 포 에 서 글 루 타 메 이 트 에 의 해 유 도 되 는 신 경 득 성 을 어 떠 한 기 전 으 로 완 화 시 키 는 지 알 아 보 았 다.

실험방법

실험동물 - Sprague-Dawley 자 성 흰 쥐 (150~

250 g) 를 서 울 대 학 교 동 물 사 육 장 에 서 공 급 받 아 서 울 대 학 교 약 학 대 학 실 험 동 물 실 에 서 사 육 하 였 다. 사 육 장 의 경 은 실 내 온 도 를 22±5°C 유 지 하 고 조 명 시 간 을 아 침

7시 에 서 저 녁 7시 로 고 정 하 였 으 며, 사 료 는 조 단 백 23.

2%, 조 지 방 4.0%, 조 섬 유 6.0%, 조 회 분 10.0%, 조 칼 슘

0.6%, 조 인 0.4% 등 이 함 유 된 고 형 사 료 (서 울, 삼 양 사)

사 용 하 였 다. 자 성 흰 쥐 틀 교 배 시 켜 임 신 을 유 도 하 고 신 된 지 17~ 19일 된 태 자 를 실 험 에 하 였 다.

시약재료 - 연 구 에 사 용 한 모 든 약 은 Sig- ma (St. Louis, MO, U .S .A. ) 의 제 품 을, fetal bo­

vine serum Hyclone (Logan, Utah, U .S.A.)

제 품 을 사 용 하 였 다. Ginkgolides A, B C 득 일

Heidelberg 대 학 의 H. Schink 박 사 님 으 로 부 터 표 품 제 공 받 아 사 용 하 였 다.

환쥐의 대뇌퍼질세포의 분러 배앙 - 대 뇌 피 질 세 포 의 분 리 배 양 은 Choi 방 법 * 을 약 간 수 정 하 여 연 구 실 에 서 확 립 한 방법*"*에 따 라 행 하 였 다. 간 단 히 기 술 하 면 흰 쥐 태 자 의 대 뇌 를 적 출 한 해 부 현 미 경 을 이 용 하 여 피 질 부 분 만 을 분 리 한 다 음 막 을 제 거 한

0.25% trypsin으 로 30분 간 리 하 여 조 직 을 연 화 시 다 옴 개 개 의 세 포 상 태 로 분 리 하 였 다. 분 리 한 신 경 세 포 LDH MTT assay 위 하 여 poly-Lrlysine으 로 도 포 한 배 앙 용 기 (Coming, 1 5 x 2 4 mm) 에 1 x 1 0

cells/dish 이 식 하 였 다. 항 산 화 효 소 의 활 성 검 색 을 위 하 여 서 는 collagen으 로 도 포 한 배 양 용 기 (Com ing, 60 mm dishes) 에 3 x 10®cells/dish 이 식 하 였 다. 양 액 은 DM EM 90%, fetal bovine serum 10%, penicillin 100 lU/m/과 streptom ycin 10 |xg/m/으 로 구 성 된 것 을 사 용 하 였 다. 세 포 의 배 양 은 일 정 한 습 도 를 유 지 하 는 37°C 배 양 기 에 서 공 기 (95% ) 와 C02 (5% ) 의 혼 합 기 체 를 계 속 공 급 시 키 면 서 수 행 하 였 으 며 세 포 배 양

3 후 에 5 X u y M 5-fluorodeoxyuridine으 로 리 하 여 신 경 세 포 가 아 닌 다 른 세 포 들 의 성 장 을 저 지 시 켰 다.

글루타메이트에 의한 신경독성 유발 - 분 리 한 흰 쥐 대 뇌 피 질 세 포 를 14 동 안 배 양 한 100 nM 루 타 메 이 트 를 24시 간 동 안 배 앙 세 포 에 작 용 시 켜 신 경 득 성 을 유 발 시 켰 다.*"^®

Ginkgolides투여 - Ginkgolides 대 뇌 퍼 질 세 포 글 루 타 메이 트 로 득 성 을 유 발 시 1시 간 전 에 농 도 벌 로 투 여 하 였 다.

MTT assay - 배 양 중 인 대 뇌 퍼 질 세 포 의 배 양 액 에

M TT (5 mg/m/ ) 를 배 양 액 의 10% 가 되 도 록 가 하 고 속 하 여 3시 간 배 양 한 생 성 된 form azan

D M SO 녹 여 다 옴 540 nm에 서 흡 광 도 를 측 정 하 였 .

Lactate dehydrogenase (LDH)정량 - 흰 쥐 의

뇌 퍼 질 세 포 의 배 앙 =액 을 취 하 여 배 양 액 중 으 로 유 리 된

LD H K it 이 용 하 여 량 하 였 다.*

Superoxide dismutase 활성측정 - 일 차 배양 한 대 뇌 피 질 세 포 내 의 superoxide dism utase 활 성 은

M cCord Fridovich 등 의 방 법*®*을약 간 수 정 하 여 정 하 였 다.

Glutathione reductase 활성측정 - 차 배양 한 피 질 세 포 내 의 G S SG -R 활 성 은 Carlberg M an - nerviik 방 법*®•으로측 정하 였 다.

Glutathione 정량 - 일 차 배 양 한 대 뇌 피 질 세 포 glutathione양 과 G S S G양 은 Griffith 방 법®

으 로 측 정 하 였 다.

과산화지질의정량 - 지 질 의 과 산 화 정 도 는 1 ,1.3,3- tetraethoxypropane 표 준 물 질 로 하 여 A sakaw a

M atsushita 방 법 ® 을 응 용 하 여 측 정 하 였 다.

단백질 정량 - 단 백 질 양 은 bovine serum a l- bum in 표 준 품 으 로 하 여 Low ry 방 법 ™ 으 로 505 nm에 서 흡 광 도 를 측 정 하 여 결 정 하 였 다.

(3)

100.0 0.0

100.0 0.0

Control is the value for primary cultured rat cortical cells. Control values for MTT and LDH were 1.23±

0.08 optical density and 197.6± 1.06 Unit/m/, respec­

tively.

Reference is the value for primary cultured rat cortical cells exposed to glutamate. Reference values for MTT and LDH were 0.58±0.02 optical density and 110.9±

0.31 Unit/m/, respectively.

Differs significantly from the control p<0.05*. p<0.01**, n = 3.

통계처리 - 통 계 적 유 의 성 검 토 는 대 조 처 로 부 터 외 동 을 "one-way ANOVA" test 하 였 으 며 p값 이 5%

미 만 일 때 는 통 계 적 으 로 유 의 성 이 있 다 고 판 정 하 였 다.

결과 고찰

뇌 신 경 계 질 환 을 치 료 하 거 나 예 방 할 있 는 새 로 운 의 약 품 을 개 발 하 려 는 노 력 이 부 단 히 경 주 되 고 었 으 나 이 러 한 외 약 품 으 로 개 발 될 있 는 생 리 활 성 물 질 을 속 하 고 정 확 하 게 검 색 할 있 는 방 법 은 아 직 까 지 도 쾌 하 게 제 시 되 어 있 지 않 다. 이 에 연 구 에 서 는 생 체 를 대 신 하 여 신 경 세 포 외 연 구 에 널 리 이 용 되 고 있 는 일 차 배 양 한 흰 쥐 의 대 뇌 피 질 세 포 를 이 용 하 여 글 루 타 메 이 트 의 한 신 경 득 성 을 차 단 하 는 물 질 을 검 색 하 던 은 행 추 출 물 이 글 루 타 메 이 트 에 의 한 대 뇌 피 질 세 포 의 사 덜 완 화 시 킴 을 알 았 다. 이 에 은 행 엎 추 출 물 로 부 터 유 효 물 질 의 분 리 를 시 도 하 기 전 에 은 행 엎 의 성 분 으 로 이 미

platelet activating factor 대 한 강 력 한 길 항 작 용 을 Table I — Effects of gmkgolides A, B and C on glu­

tamate-induced neurotoxicity in rat cortical cells

Relative ratio Relative ratio Concentration of MTT(%) of LDH (%)

갖 는 것 으 로 알 려 진 ginkgolides 폭 시 이 러 한 활 성 을 타 내 는 지 여 부 를 검 색 하 여 보 았 다. 검 색 결 과

ginkgolides 유 의 성 있 게 글 루 타 메 이 트 에 의 한 신 경 득 성 을 완 화 시 킴 을 알 고 작 용 기 전 을 밝 히 고 자 하 였 . 흰 쥐 의 대 뇌 피 질 세 포 룰 글 루 타 메 이 트 성 수 용 체 가 층 분 히 발 달 되 도 록 14일 간 배 양 한 lOOliM 글 루 타 메 이 트 를 작 용 시 키 면 신 경 측 색 돌 기 의 굵 기 가 가 늘 어 지 며 분 절 되 고 신 경 세 포 자 체 도 팽 윤 되 어 결 국 에 는 멸 되 는 것 을 현 미 경 으 로 관 찰 할 있 었 다. Gink­

golides A, B C 14 동 안 배 양 한 흰 쥐 의 대 뇌 피 질 세 포 에 lO nM에 서 lO u M까 지 농 도 별 로 작 용 시 키 고

1시 간 후 에 글 루 타 메 이 트 룰 처 리 하 여 득 성 을 유 발 시 키 면 서 계 속 하 여 24시 간 동 안 배 양 한 현 미 경 관 찰, M TT assay 이 용 한 생 존 율 측 정 배 양 액 중 으 로 유 리 되 는 LDH양 을 측 정 하 였 다 (Table I). Gink­

golides A, B C 모 두 글 루 타 메 이 트 로 인 한 신 경 득 성 을 유 의 성 있 게 완 화 시 켰 으 며 각 각 100 nM에 서 고 의 효 과 를 나 타 내 어 정 상 상 태 때 의 48%, 52%

47% 수 준 까 지 대 뇌 피 질 세 포 를 생 존 시 켰 다.

글 루 타 메 이 트 수 용 체 는 적 으 로 든 간 접적 으 로 든 이 온 channel들 과 연 걸 되 어 있 어 과 량 외 N M D A 용 체 의 효 능 제 를 양 세 포 에 투 여하 면 단 시 내 에 내 의 C a ^ , N a" 등 의 농 도 가 증 가 되 며, 이 러 한 이 온 의 유 입 에 이 어 서 세 포 내 외 전 압 조 절 을 위 하 여 옴 이 온 이 역 시 세 포 내 로 유 업 되 고, 높 아 진 삼 투 압 을 조 절 하 기 위 하 여 물 이 세 포 내 로 유 입 되 어 결 국 은 세 포 팽 윤 되 고 터 져 서 괴 사 하 게 되 는 데 이 러 한 현 상 은 배 양 세 포 의 경 우 30 이 내 에 급 속 하 게 나 타 난 다* , 배 양 세 포 에 NM DA 수 용 체 의 효 능 제 를 고 농 도 로 투 여 한 다 옴 30 이 내 에 즉 시 효 능 제 를 제 거 하 여 도

24시 간 후 에 는 배 양 세 포 에 심 한 득 성 이 나 타 난 다.®• 세 포 내 로 유 입 된 C a요부에 외 해 여 러 calcium -de- pendent 효 소 가 활 성 화 되 고 cystine up take 억 제 되 어 세 포 내 에 서 자 유 분 자 단 의 생 성 이 증 대 되 어 성 이 유 발 되 는 것 으 로 받 아 들 여 지 고 있 으 며 다 양 한 산 화 제 들 이 글 루 타 메 이 트 로 인 한 득 성 을 유 의 성 있 게 차 단 시 킨 다 는 보 고 가 이 를 뒷 받 침 한 다.** 세 포 내 외 분 자 단 은 정 상 환 경 에 서 도 생 성 되 나 세 포 내 에 존 재 하 는 항 산 화 제 인 glutathione 의 해 직 접 포 합 되 거 superoxide dism utase (SOD), catalase

glutathione peroxidase 일 련 의 효 소 들 과 반 응 하 인 체 에 무 해 한 물 질 로 변 화 되 어 배 설 된 다.^^^®

722 김소라• 전미희• 김영중

A

B

C Control Reference Ginkgolide

10 nM 100 nM U*M 10 M Ginkgolide

10 nM 100 nM i m 10 Ginkgolide

10 nM 100 nM 1 \iU

10 u M

(4)

C trl R e f G K A G K B G K C C oncentration (lO O n M )

Fig. 3 — Effects of ginkgolides on the level of GSH/

GSSG in primary cultured rat cortical cells ex­

posed to glutamate.

The nomenclature and levels of significance are precisely as described under the legend to Fig. 1 (n = 3).

Control level for GSH/GSSG was 11.4±0.9.

Reference level for GSH/GSSG was 3.5±0.2.

괴 사 률 더 욱 촉 진 시 킨 다 는 보고®^가 었 어 gin k­

golides 글 루 타 메 이 트 에 의 해 감 소 된 glutathione

양 에 어 떻 게 영 향 을 미 치 는 배 양 세 포 를 수 집 하 여 포 내 에 존 재 하 는 glutathione양 과 환 원 형 산 화 G S S G앙 을 측 정 함 으 로 써 알 아 보 았 다 (Figs. 2 and 3). Ginkgolides 글 루 타 메 이 트 로 인 하 여 감 소 Fig. 2

C trl R e f G K A G K B G K C

C oncen tratio n (lO O n M )

Effects of ginkgolides on the content of total glutathione in primary cultured rat cortical cells exposed to glutamate.

The nomenclature is precisely as described under the legend to Fig. 1.

Control value for total glutathione content was 89.3±7.9 nmol/mg protein. Reference value for total glutathione content was 21.8±3.1 nmol/

mg protein.

Differs significantly from the control p<0.05*

(n=3).

C oncentration (lO O n M )

Fig. 1 — Effects of ginkgolides on the activity of glu­

tathione reductase in primary cultured rat cort­

ical cells exposed to glutamate.

Control is the value for primaiy cultured rat cortical cells. Control value for G S S O R was 67.5

±3.9 nmol NADPH oxidized/mg protein/min.

Reference is the value for primaiy cultured rat cortical cells exposed to glutamate. Reference value for GSSG-R was 34.6±2.2nmol NADPH oxidized/mg protein/min.

Differs significantly from the control p<O.Or*, p<0.0r**(n=3).

러 나 버 정 상 적 으 로 세 포 내 에 서 자 유 분 자 단 이 과 다 하 생 성 되 면 항 산 화 작 용 이 지 속 적 으 로 원 활 하 게 진 행 되 지 못 하 고 세 포 막 외 지 질 이 과 산 화 되 어 세 포 외 괴 사 유 도 된 다

세 포 내 의 자 유 분 자 단 의 생 성 이 증 가 되 면 환 원 형

glutathione (GSH) 보 다 는 산 화 형 glutathione (GSSG)양 이 증 가 하 게 되 며, 증 가 된 GSSG glu­

tathione reductase (GSSG-R) 의 해 다 시 GSH 환 원 되 항 산 화 작 용 이 지 속 적 으 로 유 지 된 다. 그 러 나 경 세 포 가 글 루 타 메 이 트 에 의 해 득 성 을 입 게 되 면

GSSGHR 활 성 이 저 하 되 어 세 포 내 에 서 의 GSSG양 은 정 상 상 태 때 보 다 증 가 되 고 이 에 따 라 항 산 화 작 용 도 원 활 유 지 되 지 못 한 다. 이 에 ginkgolides 글 루 타 메 이 트 인 해 감 소 된 대 뇌 피 질 세 포 내 외 GSSGHR 활 성 에 어 떻 게 영 향 을 미 처 는 알 아 보 았 다 (Fig. 1). Gink­

golides A B 각 각 lOOnM에 서 글 루 타 메 이 토 로 감 소 된 G S S O R 활 성 을 각 각 정 상 상 태 때 의 67%

53% 수 준 까 지 증 대 시 켰 으 며 특 히, ginkgolide C

100 nM 작 용 시 켰 을 때 는 정 상 상 태 때 의 활 성 수 준 까 지 증 대 시 켜 ginkgolides 항 산 화 작 용 의 ■항상성 유 지 에 관 여 하 는 것 으 로 생 각 된 다.

또 한, 세 포 내 에 glutathione양 이 적 거 나 G SSG

양 이 과 다 하 게 존 재 할 때 에 는 글 루 타 메 이 트 로 인 한

0000008642

{%}0SS0/HS2019>519AIJBS 0000008642 1 C

HSO1*2J0slsio

s l s y o

o

o

o

o

08642

ossoio

(5)

Ctrl R e f G K A G K B Concentration (lO OnM )

G K C

Fig. 5 —— Effects of ginkgolides on the production of malondialdehyde in primary cultured rat cort­

ical cells exposed to glutamate.

The nomenclature is precisely as described under the legend to Fig. 1.

Differs significantly from the control p<O.Or**, (n=3).

Ctrl Ref G K A G K B GK C

Concentration (lOOnM)

Fig. 4 — Effects of ginkgolides on the activity of su­

peroxide dismutase in primary cultured rat cortical cells exposed to glutamate.

The nomenclature is precisely as described und­

er the legend to Fig. l(n = 3).

Control value for SOD was 53.5±4.4mU/m/.

Reference value for SOD was 27.5±2.7 m U /m l.

세 포 내 의 glutathione양 은 t t외 성있 게 증 가 시 키 못 하 였 다 (Fig. 2). 그 러 나 ginkgolides A, B C

글 루 타 메 이 트 로 인 하 여 감 소 된 GSH 양 은 유 의 성 있 증 대 시 키 고, 글 루 타 메 이 트 로 인 하 여 증 가 된 G SSG

양 은 감 소 시 켜 GSH /GSSG 값 을 정 상 상 태 때 의

66% 수 준 까 지 유 지 시 켰 다 (Fig. 3). 이 러 한 결 과 는

ginkgolides 의 해 G SSG -R 활 성 이 증 대 됨 으 로 써

G S SG G SH 원 활 히 환 원 시킴 으 로 써 G SH 양 을

증 대 시 킨 결 과 로 주 즉 된 다.

Ginkgolides 일 차 배 양 한 흰 쥐 의 대 뇌 피 질 세 포 에 글 루 타 메 이 트 로 인 한 신 경 득 성 으 로 저 하 된 SOD 활 성 에 는 어 떻 게 작 용 하 는 알 아 보 았 다. 일 차 배 양 한 흰 쥐 의 대 뇌 피 질 세 포 에 ginkgolides A, B C 각 각

100 nM 농 도 로 작 용 시 킨 글 루 타 메 이 트 로 득 성 을 유 발 시 키 고, 24시 간 후 에 배 양 세 포 를 수 집 하 여 SOD

활 성 을 측 정 하 였 을 , ginkgolides A, B C

SO D 활 성 에 별 다 른 영 향 을 미 처 지 않 았 다 (Fig. 4).

이 러 한 결 과 는 은 행 잎 추 출 물 제 제 인 Egb 761 자 유 분 자 단 을 직 접 포 합 하 여 항 산 화 효 과 를 나 타 내 는 데 러 한 작 용 은 은 행 잎 추 출 물 의 성 분 flavonoid 계 열 성 분 에 의 한 것 이 며, terpene 계 열 외 성 분 돌 은 직 접 자 유 분 자 단 을 포 합 하 지 않 는 다 는 보 고 와 일 처 한 다 고 하 겠 다.""^^*

Ginkgolides A, B C 각 각 100 nIV[에서 글 루 타 메 이 트 로 인 한 신 경 득 성 으 로 증 가 된 지 질 외 과 산 화 물 인 malondialdehyde 샘 성 량 을 정 상 상 태 때 외 준 까 지 감 소 시 켜 세 포 막 지 질 의 과 산 화 를 거 외 완 '벽 하 차 단 시 킴 을 있 었 다 (Fig. 5). 그 러 나 gink­

golides 세 포 막 지 질 의 과 산 화 를 정 상 상 태 때 외 수 준 까 지 차 단 시 킴 에 도 불 구 하 고 글 루 타 메 이 트 로 인 한 득 성 완 전 히 차 단 시 키 지 못 하 는 것 은 득 성 유 발 초 기 에 어 나 는 세 포 내 로 의 유 입 을 차 단 시 키 지 못 함 으 로 이 에 따 른 급 성 독 성 을 막 지 못 하 여 일 어 나 는 결 과 로 일 단 은 추 측 할 있 으 나 이 를 뒷 받 침 연 구 가 뒤 따 라 것 이 다.

1. Ginkgolides A, B C 모 두 lOOnM에 서 루 타 메 이 트 로 인 한 세 포 괴 사 를 유 의 성 있 게 완 화 시 켜 정 상 상 태 때 의 48%. 52% 47% 수 까 지 대 뇌 피 질 세 포 를 유 지 시 켰 다.

2. Ginkgolides A, B C 글 루 타 메 이 트 로 인 해 저 하 된 glutathione reductase 활 성 을 정 상 상 태 수 준 까 지 증 대 시 켰 다.

3. Ginkgolides A, B C 환 원 형 glutathione 유 의 성 있 게 증 가 시 켜 정 상 상 태 때 의 세 포 내 의 산 화 환 원 반 응 의 항 상 성 을 유 지 시 키 는 것 으 로 생 각 된 다.

4. Ginkgolides A, B C 글 루 타 메 이 트 로 인 한 지 질 과 산 화 로 증 가 된 malondialdehyde 생 성 량 을

724 김소라• 전미희• 김영중

000050

2 1 1

SJOJdMUV10UI3SJU9JU8VQ\

(6)

정 상 상 태 때 의 수 준 까 지 감 소 시 켰 다.

감사의

연 구 에 소 요 된 경 비 는 교 육 부 지 원 한 국 학 슬 진 흥 재 단 의 94년 도 자 유 공 모 과 제 ( 과 제 번 호 01 F 0119) 학 슬 연 구 조 성 비 로 층 당 된 것 으 로 연 구 비 지 원 에 감 사 드 리 ginkgolides A. B C 기 증 해 주 신 득 일 Heidel- berg 대 학 외 H . S chink 박 사 님 께 도 감 사 드 럽 니 다.

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수치

Fig.  3 — Effects  of  ginkgolides  on  the  level  of  GSH/
Fig.  5 — — Effects  of  ginkgolides  on  the  production  of  malondialdehyde  in  primary  cultured  rat  cort­

참조

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