The Wormicidal Substance of Fresh Water Fishes on Clonorchis sinensis(VI) Structure Identification of Purified Clonorchicidal Substance from Epidermal Mucus of Cyprinus carpio nudus

M fo ： 3!9 ( 搬 3

간흡충에 대한 살충성물질에 관한 연구(VI)

향어 체 표 면 점액내 살 충 성 물 질 의 구 조 확인

이 재 구 • ^{김 평 길} • ^{안 병 준} *

전북대 학교 수의 기 생 충학교실 • * 충남대 학교 약학대 학 (Received January 22, 1987)

T h e W o r m ic id a l Substance o f Fresh W a te r Fishes o n Clonorchis sinensis ( V I ) Structure Identification of Purified Clonorchicidal Substance from

Epidermal Mucus of

Ja e K u R hee, P y u n g G il K im a n d B y u n g Z u n A h n *

Dept, o f Veterinary Parasitology, Jeonbug National University, Jeonju 520，Korea

와Dept, o f Pharmacy，Chungnam National University, Taejon 300-31，Korea

AbstractᅳIn order to elucidate the defence mechanism of Cyprinus carpio nudus to Clonorchis

clonorchicidal substance in the epidermal mucus of this fish was isolated by silica gel column and thin layer chromatography and analyzed for its chemical nature by UV, IR and NMR-spectroscopy. The epidermal mucus of the fish was extracted by ethyl ether and separated in­

to 2 fractions by column chromatography using petroleum ether/chloroform (30/70, v/v) as first solvent and methanol as second solvent. The second fraction with greyish white colour showed clonorchicidal effect. The second was again fractionated into greyish white precipitate and clonorc­

hicidal greenish yellow supernatant fraction, by adding petroleum ether and standing the mixture for 5 days at 5°C. The latter was divided into 7 fractions in column chromatography with acetone/

benzene (10/90， v/v) as carrier. The fraction on equivalent to the spot of

0.225 value among them disclosed the strongest clonorchicidal effect. By this purification procedure, clonorchicidal substance was purified 154-fold with 0.

yield from the mucus of the fish, and lOmg of the final fraction killed the metacercariae in 22 min. Infra red, nuclear magnetic resonance and ultraviolet spectrometric analysis of the purified substance revealed that the substance is linoleic acid. According to the results of the present studies it seemed that this fish could not be proper intermediate host of

，and that defence mechanisr

clonorchicidal substance in epidermal mucus.

간 흡 충은 우 리 나 라 에 서 중 요 한 •'

- 충 유 의 일 송 으로서 남한 각처 하천유역에 큰 유 행 지 -S- 형성 하고 있 으 미 ， 간흡충증의 역학직 사 실 읍 이해히- 는데 필 요한 제 이중간숙주에 대 한 생 대학지 지 식 에 는 불 충 분 한 진이 많 다 .

저 지- 능 1~ n 은

0] CQyprinus carpio w/^/와 )에 대 한 간흡충의 재 이 중간숙주로시 의 역 한 여 부 'S- 규명하기 위 한 일 환 으 로 우신 간흡충 유 미 유 충 의 향어에 대 한 각종 인공 및 지-인갑입시힘융 수행하여 자연계에서 그 역 할음 한 수 없다는

of this fish to the worm seems to be correlated with

사 실 을 천 명 한 다음 그 방 어 기 진 을 규 명하기 위 하어 향어 체표민 진 액 으 로 부 터 살 충 성 물 질 을 순 수 분 리 하 고 아울러 표피의 조 직 학 직 소 견 을 관참하여 산 충 성 물 질 과 관련이 있 다 고 생 각 되 는 곤봉상 새 포의 존 제 -3" 확 인 한 마 있 다 .

이빈에 지 자 등 은 항이 체 표 면 진 액 으 로 부 터

순수하게 분 리 만 간휴영'-에 대 만 산증싱 질유

기 기 분 식 유 통하여 구 조 -il- 확 인 하 있 기 에 보 고 하

는 바이디-.

34 이 재 구 • 김 평 길 •안 병 춘

실 험 방 법

향0\(Cyprinus carpio nudus

) ᅳ 1986년 8월에 호 림 수 산 소 양 호 양식장으로부터 길이 25cm내 외 , 체 중 500g 정도의 향어 총 40kg을 분 양 받 아 , 그 체표면 점 액으로부터 살충성 순 수 물 질 을 분 리 하 였 다 .

간흡충의 탈 낭 유 충 ᅳ 1986년 8월에 부산시 북 구 강동동 대사리 소재 김해 호수에서 채 집 한 참붕어 (P 피 ^ onz办 )nz 多w f l ) 로부터 인공소화액 (펩 신 6g, 염 산 7ml, 증 류 수 1Z)으 로 분리 시 킨 피

Epidermis and corium of

(3kg)

| Ethyl e t h e r , 24 h r s , 6 times ( t h e first s t e p ) E x t r a c t s

| Ev ap o ra tion R e m na nt ( 101 • 8 )

낭 유 충 을 인공장액 (N a H C 0 3 0. 2g, 트립 신 0. 5g.

생 리 식 염 수 50ml)으 로 처리하여 얻은 간흡충 틸 낭 유 충 을 살충시험에 공 하 였 다 .

살 충 성 물 질 분획ᅳ•향어의 표피 및 진 피를 박 리하여 Fig. 1과 같은 방 법 으 로 처리하여 간흡 충에 대한 살 충 성 물 질 을 분 획 하 였 다 . 즉 ， 3kg의 향 어 로 부터 표피 및 진 피 를 박리하여 에테르에 침 지 시 킨 후 실온에서 24시 간 마 다 6회에 걸쳐 에 테 르 추 출 ， 감 압 증 발 농축시켜 101. 8g의 물질 을 얻은 다음 석 유 에 테 르 (30% ) 와 클 로 로 호 •!

(70% ) 의 최 초 혼 합 용 매 를 사 용 , 시 리 카 겔 컬럼 크 로 마 토 그 라 휘 하 여 살충성 음성의 황색물을

S i l i c a gel c o l u m n ch ro m ato g ra p h y ( the second s t e p )

First solvent

Pet. ether 30 % C h lo r o f o r m 70 %

Second sol vent

Me OH

Yellow s o l u t i o n

Greyish w h it e ppt.

G re y is h white s o l u t i o n *

| E v ap o ra tion Residue ( 4 . 5 7 )

Adding 20

데

Greenish yellow supernatant

| Ev ap oration Residue ( 1.956 S )

I

S i l ic a gel c o lu m n chro m at o g ra p h y ( the fou rth s t e p ) Solve nt

八 cc ton c 1 0 % Hcnzcnc 90 %

Rf. ^{0. 812 0.683 .567 0.483 .가 Of) 0.225 * 0.032}

( 9 1 8 r n y )

Fig.

1. Fractionation of clonorchiciclal substance from

* Clonorchicidal activity

J. Pharm. Soc. Korea

간흡층에 대한 살충불질에 관한 연수 35 리 제거시 키 고 , 두번 째 용매인 메 탄올을 이용

하여 그• 컬럼 상단에 잔 류 하 고 있는 물 질 을 용 리시켜 희백색 용 리 물 을 얻어 감 압 증 발 , 4.5g의 살충성 양성 물질 을 얻 었 다 . 이에 석 유 에 테 르 20ml를 주 가 ， 5°C에서 5일간 방치하여 희백색 침 전 물 (살 충 성 음성 )과 대 록황색 상청 액 (살충성 양 성 )으 로 구 분 하 였 다 .

이 상 청 액 을 감압증발시켜 얻은 1.956g의 분 획 물 질 을 아세톤과 벤젠 1 0 :9 0 의 혼 합 용 매 를 사 용 , 시 리 카 겔 컬럼 크로 마 토 그 라 휘 하여 작은 시험관에 120단계의 각 용 리 물 을 3ml씩 채 취 하 였 다 . 이 들 을 시 리 카 겔 박 막 크 로 마 토 그 라 휘 하 여 확 인 한 7개의 반점중에서 살충성이 가 장 강 력 한 것 은 Rf- 0.225값에 상 당 한 분획 이었으며 , 무색 의 유상물질 918mg을 집 량 하 였 다 .

간흡충에 대한 살 충 성 시 험 ᅳ 향 어 표피 점 액 으 로부터 추 출 한 각 단계 분 획 물 질 을 적 당한 양의 에 테 르 를 주가하여 10mg 상당의 물질이 함유된 에 테르 용 액 을 시계접시에 취하여 용 매 를 완전 히 증 발 시 키 고 , 10마리의 간흡충 탈낭유충이 들 어 있는 생 리 식 염 수 1ml롤 넣고 직접 접촉시켜 탈낭유충의 변성 사 멸 과 정 을 관 찰 하 였 다 .

한 편 ， 대조로서 시계접시에 에 테 르 lm l를 취 하여 완전히 증발시켜 생 리 식 염 수 와 간흡충 탈 낭 유충 을 가하여 그 변성 사 멸 과 정 을 관 찰 하였 다 . 실험 및 대 조군 모 두 이 러 한 실 험 을 3반복 으로 실 시 하 였 다 .

탈낭유충의 사멸 판 정 은 그 운동의 완진 정지 및 충체의 이완을 기 점 으 로 하 였 다 -

살충 성 물 질 의 화 학 분 석 一 적 외 선 분 광 분 석 은 Beckmann spectrophotometer룰 , 핵 자기 공명 분 광분석 은 Varian 80 FT -N M R spectrophotometer

를 , 자외 선 분광분석 은 Pye U nicam 사의 ultra­

violet spectrophotometer를 사 옹 하 였 다 .

실 험 결 과

간 흡 충 탈낭유충에 대한 살 충 시 험 一 향 어 표피 점 액 에테 르 추출물의 최 종단계 각 분 획 물 질 의 탈낭유충에 대 한 살 충 성 은 Table 1에 표 시 한 바 와 같이 각 분 획 물 질 을 in 에 서 탈 낭 유 충 에 각 각 직접 접촉시켜 경 시 적 으 로 관 찰 한 소 견 은 R f. 0. 812〜 0. 032값의 7개 의 분획 물질 중에 서 제 6 반점인 R f. 0.225값 상당의 물질 이 다 른 분 획물질에 비교하여 살충성이 강 력 하 였 다 . 즉 , 탈낭유 충 에 이 물 질 을 직접 접 촉 시 킨 다 음 4분 까 지 는 정 상 적 인 모 든 운 동 을 관 찰 할 수 있 으 나 그 후 부 터 는 시계접시 바닥에 구 흡 반 을 밀착시 킨 채 격 련을 일으키며 미 약 한 수 축 운 동 을 하 다 가 8분 에 는 충 체 가 이완하기 시 작 하 였 다 . 그리 고 ， 12분 에 는 거의 운동성이 소 실 된 채 충 체 는 고 도 로 수축되어 22분 에 는 모 든 충 체 가 변성 사 멸하기 시 작 하 였 다 .

한 편 , 대조에 있어서 탈 낭 유 충 은 24시 간 이상 생 존 하 였 으 며 , 충체의 제 운 동 은 저 자 등 9^ ! 관 찰 한 소 견 과 유 사 하 였 다 .

각 분획 단계 별 살 충 성 물 질 의 정제 도 및 수 율 一 각 분획단계 별 살 충 성 물 질 의 정 제 도 및 수 율 은 Table 2에 표시 한 바와 같이 향어 체 표 면 점액 에 테 르 추 출 물 101. 8g으로부터 최 종 분획 단계에 서 918mg가 회수 되 었 으 며 그 수 율 은 0 .9 % , 그 정 제 도 는 154배 이 다 .

살 충 성 물 질 의 화 학 분 석 ᅳ 최 종 분 획 순 수 삼 충 성 물질의 자외 선 분광분석 결 과 는 228. 7nm 이 었 다 .

Table I —Clonorchicidal effects of the final fractions from epidermal mucus on excysted metacercnrine Thin layer chromatography (7?/.)

Status of metacercariae --- 0.812 0.683 0.567 0.483 0.406 0.225 0.032 Duration of normal movement 65' 70' 55' 50' 30'

25' First appearance of body relaxation 140' 110/ 90' 80/ 60/ 8' 가 0' Death of all the worm 186'

160/ 154' 110'

75r Remark; Minutes

，

36 °i 재 누 • 김 평 친 . 안병 춘

Table I I —Purification of clonorchicidal substance from

Steps Total amount*

(mg) Specific activity**

(Min./lOmg dry weight)

Purity (-fold)

Yield (%)

1 101,800 3,390 1 100

2 4,500 415 8 4. 42

3 1,956 255 13 1.9

4 918 22 154 0.9

* Clonorchicidal activity

** Time(Min.) required to kill excysted metacercariae

적외선 분광분석 결 과 는 파수 2,800~3,000 cm-1 와 1, 400〜 1, 460cm-1 에 강한 피 이 크 , 그리 고 720cm-1 에 피 이 크 가 있 다 . 또 , 1,710cm-1 에 강한 피이 크와 이와 동시에 3,400cm-1 부위 와 930cm-1 부 위 에 도 피 이 크 가 있 다 . 그 리 고 ， 1,650cm-1 및 3 ,020cm-1 에 피 이 크 가 있 다 .

핵 자기 공명 분광분석 결 과는 5 .3ppm, 0.88 ppm, 1 .12ppm, 1. 52ppm, 1. 98ppm, 2. 25ppm, 2.75ppm 부위 에 피 이크 가 있 다 .

고 찰

1910년 Kobayashi에 의하여 담 수 어 류 가 간홉 충의 제 이 중 간 숙 주 역할을 한 다 는 사실이 판명 된 이래 지금까지 109종의 담 수 어 류 와 3종의 담 수 산 새 우 가 제 이 중 간 숙 주로 서 극동지역에서 많 은 기 생 충 학자에 의하여 보고된 바 있 다 10>.

그 러 나 , 간흡충 제 이 중 간 숙 주 로 서 보고된 담 수어류에 대한 그 역할 여부와 그 적 , 부적의 정 도 를 규정짓기 위 해 서 는 이 들 담 수 아 류 가 필 연 적 으 로 재 검 토 되 어 야 할 것 으 로 생 각 되 는 데 아직 까지 몇 가지 어 류에 한해 서 만 검 토되있 을 뿐이 다.

즉 , 동일수계에 서 식 하 고 있 는 담 수 어 류 라 할 지 라도 그 종류에 따라 간홉충 유미 유충이 용이 하게 침입할 수 있는 것과 그렇지 않는 것 으 로 대 빌 할 수 있을 뿐더러 담수어 체내에 있이시 그 피낭유충의 수명 이 현저 하게 다 르 다 는 것은 주지의 사 실 이 며 11-131 간홉충의 제 이 중 간 숙 주 로 서 알려 진

CCyprinus carpio), 붕어 (GirflM/w carassiui) 등은 중간숙주의 역할을 거의 한 수

없 다는 사실이 밝 혀 졌 다 . 9， 14' 1m

그러 므 로 , 이 의 기 전 을 구명 하기 위 한 끓임없 는 노력 이 지 속 되 고 있 다 . 일찌기 C h u n161 은 잉 어 와 붕어의 체표면 점액내에 간홉충 유 미 유 충 에 대 한 살 충 성 물 질 이 있 다 고 하 였 으 며 ， 최근에 이르러 Rhee 등 은 붕 어 ， 잉 어 , 금 붕 어 ， 가물치 ( ᄋ/ ) argus), ^17] {Parasilurus asotus) 및 향어 등의 체표면 점액으로부터 간홉 충에 대 한 살 충 성 물 질 을 분획 한 바 있 으 며 , Rhee 둥 18>은 잉 어 체표면 점액내 의 간홉충에 대 한 살 충 성 물 질 을 순 수 분리 하여 화학적 성 상을 밝힌 바 있 다 . 그리 고 , Rheew 는 담수어류 표피 의 곤 봉상세 포 와 간홉충 피 낭유충의 감 염 도 는 상 관 관 계 가 있 다 고 하 였 다 .

저 자 등은 전 보 2， 3네 서 각 종 인공 및 자 연 감 염 시 험 을 통하여 향어는 간흡충의 제 이 중 간 숙 주 의 역 할 을 할 수 없 다 는 것을 천 명 한 다음 향어 의 간홉충에 대 한 방 어 기 전 을 규명하기 위 한 일 환으로 제이단계 시험으로서 향어 체 표 점 액 을 에 테 르 로 추출하여 여 러 가지 용 매 를 혼합하거 나 또 는 단일 용 매 를 사용하여 시 리 카 겔 박막 및 컬 럼크로 마 토 그 라 휘 하여 순 수 살충성 물질 을 인있 는 데 이 번 에 는 재산단계 실힘으 로 시 적외 선, 자외선 및 핵자기공명 분 관 분 석 을 통하여 삼충성물질의 구 조 -5- 확 인 하 였 다 .

우선 향어 표피 진 엑 음 에 테 르 로 추 출 한 다음 식 유에 데 르 (3 0 % )와 클 로 로 포 -3-(70%)의 최 초 혼 합 용 매 -3- 사 용 , 시 리 카 겔 -진럽크토마토그라휘 하여 삼중성 음 성 물 질 - 용 리 제 거 시 키 고 두번 째 용매인 메 단 윤 을 이용하어 회백색 용 리 물 을 인 있 디 이 에 식 유 에 테 르 륭 주가하여 살충성 음

J.

간흡충에 대한 산충물질에 관한 연구 37 성 회백색 침 전 물 을 제 거 시 키 고 살충성 양성 대

록황색 상 청액 을 얻어 아 세 톤 10% 와 벤젠 90%

의 흔 합 용 매 를 사 용 , 시 리 카 겔 컬 럼 크 로 마 토 그 라휘하여 향어 표피 점액 에 테 르 추출물 101.8g 으로부터 살충성 이 가장 강한 R f. 0. 225 값의 물질 918mg(수 율 0.9% , 정 제 도 154배 )을 집 량 하여 기 기 분 석 을 시 도 하 였 다 .

즉 , 적외 선 스펙트럼 에서 2 ,800~3,000cmᅳ1 와 1, 400〜 1，460cmᅳ1에 강한 alkyl groug의 피 이 크가 있고， 또 , 720cm-1 의 피 이 크 는 4개의 methylene기가 연 속 적 으 로 결합되 어 있는 구 조 의 존재 를 시 사 한 다 . l.T lO c n r 1 에는 carbonyl기 에 해 당하 는 강한 피 이 크가 있으며 이 와 동시 에 3 ,400<： 111-1에 퍼 져 있는 산의 hydroxyl기 , 그리 고 산의 분 자 간 수 소 교 결 합 으 로 나타나는 930 c n r 1 부위 의 피 이크의 존재 로 보아 이 물질은 유 기산에 해 당 한 다 는 것을 알 수 있다. 또 한 , 1,650cm-1 및 ^ O M c n r 1 부위의 피 이 크 는 C = C 의 존재 를 암시 한 다 . 위 의 carbonyl기 의 위 치 로 보 아 이 는 이 중결 합과 공액 되어 있지 않고 수 소 교 결 합 만 하고 있다고 볼 수 있 다 . 만 일 , 이 중 결 합과 공액 으 로 되 어 있다면 이 피 이크 는 1, 700cm-1 이 하에 나타났어 야 할 것 이 다. 적 외 선 스펙트럼의 데 이 터 를 종 합 , 검토하면 이 물 질 은 4개 이상의 methylene기 로 연 결 되 는 alkyl기와 C = C 와 그 리고 이 이중결합에 직접 연결되지 않은 산기를 지 니 고 있다6느 한 편 ， 자외선 스펙 트렴 의 228. 7nm에 서 나타난 피 이 크는 C = C 와

ᄋ의 존재를 시 사 한 다 81.

핵 자기 공명 스펙트럼 에 있어 서 5 .3ppm에 이 중결합상의 4개의 수 소 가 있 다 는 것을 알 수 있 으 며 ， 피이크의 모 양 으 르 미루어 보아 이들 수 소의 성 질은 유 사 하 며 , 또 한 trans 상 태 보다 cis 형일 가능성이 높 다 . 직외선 스펙트럼에 있어서 725cm-1위치에 이중결합상의 cis형 수소의 out of plane bend가 존재 하 므 로 이 와 같은 수소의 존재 를 더 욱 가능케 하고 있 디-. 0 .88ppm에 나 타나는 피 이 크는 그 이 웃에 methylene기 불 동반 한 •단 methyl기 에 헤 당하고 h]2p p m 에 는 methylene기의 수 소가 나타나 있 다 . Methyl기 -3- 기 준 으 로 환산한다면 이 위치의 methylene기

의 수 는 8개 이 다 . 1.52ppm， 1. 98ppm, 2. 25ppm 및 2. 75ppm의 피 이 크 들 은 4개 의 paramagnetic shift를 한 methylene기에 해 당 된 다 . 그 중 에 서 2.75ppm의 methylene기 는 두 개의 이 중 결 합 사 이에 있을 때의 chemical shift를 가 지 고 있 다 .

밖의 것 은 이 중 결 합 하나에 결합 되 어 있 는 methylene기 들 이 다 . 적 외 선 스 펙 트 럼 의 해 석 을 상 기 한 다 면 이 중 결 합 중 에 서 하 나 는 C = ᄋ 즉 산 기 이 다 . 핵 자 기 공 명 스 펙 트 럼 에 서 도 두 개 의 c = o 에 이 웃 한 수 소 를 확 인 하 였 다 . 그 러 므 로 ， paramagnetic shift를 한 4개 의 methylene기 는 이 들 3개의 이중결 합 의 이웃에 있 다 7느

또 한 ， 산기의 화학적 확 인 을 위하여 도 포 길 이 10cm의 시 리 카 겔 박 막 크 로 마 토 그 라 휘 판의 1cm 부위에 이 물 질 을 점 적 하 고 4cm 부위에 메 탄 올 성 N a O H 를 흡입시켜 하나의 band롤 만들어 건 조 시 킨 다음 벤 젠 으 르 전개 시 킨 바 이 물 질 이 NaO H band에 머물러 있 으 므 로 산이 라 고 생 각 한 다 .

위 의 데 이 터 들 을 종합적 으 로 분석 할 것 같 으 면 이 물 질 은 유 기 산 이 며 탄 소 수 가 18〜 19개이 다 . 또 한 , 그 중에서 4개의 탄 소 가 C = C 에 참 여 하 고 있 으 며 , 이 들 사이에 하나의 methylene 기 가 결 함되어 있 다 . 그리 고 ， 이 중결 합 은 모 두 cis형 이 다 . 이 와 같은 구조적 특 징 은 linoleic acid의 것 과 상 위 없 으 므 로 이 물 질 은 linoleic acid (Aldrich Library of N M R , 2nd Ed. 437C) 이 다 .

Rhee 등 1^ 은 잉어 체 포 점 액 으 로 부 터 간 흡 충 에 대한 살 충 성 물 질 을 순 수 분 리 하 여 적 외 선 및 핵 자기 공명 분 광분석 을 통하여 살충성 물질이 2개 의 이 중 결 합 , 15개의 methylene group 그 리 고 1개의 methyl group으 로 구 성 된 불포 화 지 방산의 에 일 에스테 르 라 고 보 고 한 바 있는 데 본 실 험 에서 수 행 한 향어의 직 외 신 및 핵 자 기 공 명 스패 트럼의 해 석 을 비교 및 참 고 로 하이 잉어의 살 충성물질 을 다 음 과 같이 재 검 토한 수 있 다 . 즉 ， 잉 이의 직외 선 스 펙 트 럼 에 있이시 3, 500cm-' 부 위에시 산의 -： ■ ； - 수 없 으 미 , 이의 깅 우

1, 기 0cm-1 에시 나 바 난 carbonyl기 기• 잉 이 에 시 는

1,750cm-1 로시 높 은 에 너 지 쪽 으 로 이 동 었 하 다 .

이 재 구 • 김평길•안병준 38

두 핵자기공명 스 펙 트 럼 을 비교하면 잉어의 경 우 4 .23ppm에 나 타 나 는 quartet이 향어 에 서 는 없 다 . 이 피이크의 모 양 과 수소의 수 로 보 아 ethoxy기 의 methylene기 에 해 당 하 며 , ethoxy기 의 methyl triplet는 1. 0~1. 5ppm 사에 이 묻혀 있 다 . 이와 같은 향어와 잉어의 간홉충에 대 한 살충성물질의 데 이 터 를 비교 검 토한 결과 잉어 의 살충성 물 질 은 ethyl linoleate(Aldrich Library of IR , 3rd Ed. 380B 및 N M R , 2nd Ed. 542A) 임을 알 수 있 다 .

결 론 적 으 로 ， 간흡충에 대 한 향어의 방어물질 은 linoleic acid, 잉어의 것 은 ethyl linoleate이 며 , 잉어가 향어로 변이됨으로써 향어의 방어물 질이 에 스테 르 가 아닌 유 리 산 으 로 되 어 있 다 는 사 실 은 생 태 화학적 측면에 서 매 우 흥미있으리 라 생 각 된 다 . 그 리 고 ， 최 종 살충성 분획물질 10mg 의 탈랑 유충에 대 한 살충시 간은 잉어 115분 18\

향어 22분으로서 linoleic acid가 ethyl linoleate 보 다 살충력이 강 력 하 다 . 이 것 은 전 자 가 극성이 크기 때 문 이 라 고 추 측 된 다 .

결 론

향어의 간홉충에 대 한 방 어 기 전 을 규명하기 위하여 그 체포면 점액 으 로 부 터 순수하게 분리 한 살 충 성 물 질 을 기 기 분석하여 그 구 조 를 결정 하 였 다 .

향어 체포면 점액의 에 테 르 추 출 물 을 여러 단 계의 화학적 처 리 를 거처 7개의 반 점 으 로 분획 하여 이들 물 질 을 간흡충의 탈낭유충에 in vitro 에서 직 접 접 촉시 켜 살충성시험 을 수행 한 바 제

6 반점인 R f. 0.225값의 물질이 다른 것들에 비 교하여 살충성이 월등하게 강 력 하 였 다 .

향어의 체포면 점액의 에 테 르 추 출 물 101.8g 으로부터 918mg의 살충성 순 수 물 질 을 회 수하 였 으며 그 수 율 은 0 .9 % , 그 정 제 도 는 154베 이 다 . 그 리 고 , 순수하게 분 리 한 살 충성물질에 대하어 적 의 선 , 자외신 및 핵자기공명 분 광 분 석 을 이용 하여 구 조 걸 정 을 하였던 바 이 물 질 은 linoleic acid로 관명 되 있 다 .

이 상의 실 힘 걸 과 로 미 루어 보 아 향어 의 체 표

면 점액내의 살 충 성 물 질 인 linoleic acid가 간흡 충의 방어기전에 관 여 하 고 있다 고 생 각 된 다 .

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