약학회지제
42
권제3
호307~311(1998) Yakhak Hoeji Vol. 42, No. 3
포공렴의 카드몸에 대한 세포독성 억제효과
한두석 ■ 이기남* • 이종섭** • 백승화***»
원광대학교 치과대학 구강해부학교실 . *한의과대학 예방외 학교실 .
**의과대학 예방의학교실 . ***자연과학대학 화학과 (Received February 6, 1998)
The Inhibitory Effects of
Taraxaci Herbaagainst Cadmium induced Cytotoxicity
Du Seok Han, Ki Nam Lee* Jong Sub Lee** and Seung Hwa Baek**
D epartm ent o f Oral Anatom y, School o f D entistry,
^Department o f Preventive Medicine, School o f O riental Medicine,
**Department o f Preventive Medicine, School o f Medicine,
***Department o f Chemistry, College o f N a tu ra l Sciences, W onkw ang University, Ik sa n 570-749
；Korea
Abstract — This study was carried out to evaluate antitoxic effects Taraxaci Herba extract against Ca- dium by colorimetric methods. The antitoxic activity of Taraxaci Herba extract in NIH 3T3 fibroblasts was evaluated by MTT (3-(4,&-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5^phenyl-2H-tetrazoliumbromide). NR (Neutral red) and SRB (Sulforhodamine B protein) assay. The light microscopic study was carried out to observe morphologcal changes of the treated cells. These results were obtained as follows ； The concentration of 10 "오 mg/m/ of Taraxacci Herba extract was shown significant antitoxic activity. The number of NIH 3T3 fi
broblasts were antitoxic and tend to regenerate. These results suggest that Taraxaci Herba extract re
tains a potential antitoxic activity.
Keywords □ Taraxaci Herba extract. MTT assay. NR assay. SRB assay, colorimetric method, antitoxic ac
tivity.
포 공 령 은 우 리 나 라 전 지 역 에 자 생 하 고 있 으 며
,
최 근 에 김 등 은 포 공 령 물 추 출 물 이 진 통 과 항 염 작 용 에 비 교 적 양 호 하 게 나 타 났 으 며,
이 등 "*은 포 공 령 의 메 탄 올 추 출 물 을 핵 산,
클 로 로 포 름,
부 탄 올 을 계 통 분 획 후 각 분 획 의 항 위 염 작 용 을 염 신 ^ 에 탄 올 위 손 상 모 델 을 이 용 하 여 검 토 한 결 과 물 분 획 이 강 한 위 손 상 억 제 작 용 을 나 타 낸 다 고 보 고 한 바 있 다.
이 ® 는 포 공 령 으 로 부 터 물 추 출 뭄 을 조 제 하 여 인 체 구 강 유 상 피 암 종 세 포 에 적 용 한 후 일 차 검 색 에 이 용 되 는 비 색 법 중 가 장 민 감 하 고 안 정 적 인M TT
정 량 분 석 법 과SRB
정 량 분 석 법 을 이 용 하 여 항 암 활 성 을 측 정 하 였 고,
세 포 증 식 외 지 표 가 되 는A g-
*
본논문에관한문외는이저자에게로(
전화) 0653-850-6225 (
팩스) 0653-841-4893
N O R
염 색 방 법 을 이 용 하 여A g-N O R
수 를 산 정 하 여 항 암 활 성 을 보 고 한 바 있 다.
오 등 "•은 포 공 령 으 로 부 터 물 추 출 물 을 조 제 하 여 인 체 괴 부 흑 색 종 세 포 에 적 용 한 후1
차 검 색 방 법 인 비 색 정 량 분 석 범 을 이 용 하 여 세 포 의 항 암 활 성 을 측 정 하 여 유 의 한 결 과 를 보 고 한 바 있 다.
중 금 속 해 득 물 질 은 자 체 득 성 이 적 고 중 금 속 과 외 결 함 이 용 이 하 거 나 중 금 속 과 의 결 함 을 쉽 게 할 수 있 는 물 질 을 생 체 에 서 분 비 하 도 록 하 는 물 질 이 어 야 하 며
®
소 엽 에 는 게 외 중 득 을 해 득 하 는 물 질 이 함 유 되 어 있 을 뿐 아 니 라 약 러 작 용 이 다 양 하 고 중 금 속 물 질 의 해 득 성 분 인 페 놀 산 이®
함 유 되 어 있 을 것 으 로 생 각 되 어 한 등^>은 소 엽 의 세 포 득 성 을 관 찰 하 여 득 성 이 가 장 적 은 추 출 액 으 로 밝 혀 진 메 탄 올 추 출 액 에 서5
종 류 의 분 획 을 조 제 하 여 카 드 뮴ICso
량 과l(T*mg/m/
정 도 의 분 획 을 동 시 에 처 리 하 여307
한 두 석
■
이 기 남■
이 중 섬 • 백승화각 분 획 외
M TT
정 량(3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2, 5-d ip h en yl-2 H -tetrazoliu m brom ide), N R
정 량(Neutral red)
및SR B
정량(Sulforhodamine B pro- tein
)을 분 광 광 도 계 를 이 용 하 여 정 량 분 석 하 고 형 태 학 적 관 찰 을 실 시 하 여 해 득 효 과 를 측 정 하 였 다.
본 연 구 는 비 색 정 량 분 석 법 에 의 한 포 공 령 물 추 출 물 외 카 드 몸 세 포 득 성 효 과 률
1
차 검 색 방 법 인 비 색 법 중 가 장 민 감 하 고 안 정적인M TT
정량 분 석법. NR
정량 분 석 법 과SR B
정 량 분 석 범 을 이 용 하 여 포 공 령 물 추 출 물 외 해 득 효 과 를 측 정 하 여 유 의 한 결 과 룰 얻 었 기 에 보 고 하 는 바 이 다.
실험재료 및 방법
검액재료
-
포 공 령600 g
을2
개 의3000 m/
등 근 폴 라 스 크 에1
차 증 류 수1500 m
/과 포 공 령300 g
썩 넣 고, 100°C
에 서 물 중 탕 하 여 환 류 추 출 하 였 다.
이 와 같 이3
번 반 복 하 여 얻 은 추 출 액 을0.45 tim
필 터 로 여 과 한 후 여 과 액 을50°C
에 서 감 압 농 측 시킨 후 동 결 건 조 하 였 다.
건 조 된 양 은 약50
평정도 얻 을 수 있 었 다.
추 출 액 은 실 험 직 전 에 생 리 식 염 수 로 용 해 시 켜 사 용 하 였 다.
시약
-
세 포 배 양 에 사 용 한MEM(Minimum E s
sential M edium ), fetal bovine serum, penicillin G, streptomycin, fungizone
시 약 은Gibco
제GR
급 이 었 으 며, M TT
정량, N R
정량 및SR B
정량 에 사 용 한 시 약 은Sigma
사 에 서 구 입 하 였 다.
중 류 수 는3
차 중 류 하 여사 용 하 였 다.
실험기기
-
세 포 의 배 양 은CO 2 incubator(Shellab Co., U .S.A
) 를 사 용 하 였 고,
세 포 수 외 계 산 은Turk
형 혈 구 계 산 기 를 사 용 하 였 으 며,
현 미 경 은 도 립 현 미 경(In- verted Microscope, Olympus
) 을 사 용 하 였 다. MTT
정 량, N R
정 량 및SR B
정 량 은ELISA reader(Spectra M ax 250, U .S.A
) 를 사 용 하 였 다.
시료의처리
-
조 제 한 시 료 는 즉 시4°C
냉 장 고 에 저 장 하 였 다 가 사 용 직 전 에 배 지 로 희 석 하 여l(T^~Kr®
mg/m
/농 도 를 실 험 에 사 용 하 였 다.
세포배양
-
포 공 령 추 출 물 에 대 한 해 득 작 용 을 측 정 하기 위 하 여
NIH 3T3
섬 유 모 세 포 를 사 용 하 였 다.
배 양 액 으 로 는MEM(Gibco, U .S.A
) 에10% fetal bovine serum(Gibco, U .S.A
) 과penicillin G(25unit/m/), streptomycin(0.25 Hg/mO
률 첨 가 하 여 사 용 하 였 다.
각 세 포 의 배 양 은 온 도3TC,
습 도95?^,
탄 산 가 스 농 도5
% 의 배 양 기(C02 incubator, Shellab, U.S.A
) 를 사 용 하 였 다.
실 험 을 위 하 여 배 양 한flask
의 세 포 를0.25%
trypsin
으 로 처 리 하 여. Turk
형 혈 구 계 산 기 를 이 용 하 여 세 포 수 가5 xl0 ^ ells/m
/가 되 도 록 세 포 부 유 액 을 만 둘 었 다.
MTT
점량분석법- Mosmann
의 방 법 ® 에 따 라 세 포 를5x10" cells/well
이 되 도 록 조 절 하 여1 mZ
씩24 well plate
에 분 주 하 고24
시 간 배 양 하 였 다. 3T3
섬 유 모 세 포 에 대 한 • 카 드 뮴 의M TT 5 o(midpoint inhibition value
) 농 도 를 결 정 하 였 다.
수 복 효 과 실 험 은6
개 군 으 로 구 분 하 였 는 데,
배 양 액 만 으 로 배 양 한 군 을 대 조 군, MTTso
량 의 카 드 물 과 배 양 액 으 로 배 양 한 군 을MTTso
군
. MTTso
량 과 각 각 외 포 공 령 물 추 출 물 의mg/m
/농 도 를 배 양 액 에 넣 어 배 양 한 군 은 실 험 군 으 로 하 여48
시 간 동 안 배 양 완 료 후 분 석 당 일 조 제 한M TT(Sigma) 50 ^ig/m
/가 함 유 된 배 양 액 을well
당1 mZ
썩 넣 어3
시 간 배 양 하 였 다.
배 양 후 배 양 액 을 버 리 고dimethylsulfoxide(DMSO
) 를2 m//well
씩 넣 어5
분 간 실 온 방 치 후M TT formazan
을 용 해 한 후 분 광 광 도 계ELISA reader (Spectra M AX 250, U.S.A, 520 nm
) 로 흡 광 도 를 측 정 하 여MTTso
군 과 비 교 하 였 다.
NR
정량분석법一Borenfreund
와Puemer
의 방 법®
에 따 라 세 포 를
5 xl(/cells/w ell
이 되 도 록 조 절 하 여1 m/
썩24 well plate
에 분 주 하 고24
시 간 배 양 하 였 다. 3T3
섬 유 모 세 포 에 대 한 카 드 몸 의NRso
농 도 를 결 정 하 였 다. MTT
정량 의 방 법 과 동 일 하 게 대 조 군, NRso
군 및 실 험 군 으 로 하 여48
시 간 동 안 배 양 완 료 후, 50
의neutral red(Sigma
) 를 함 유 한 배 양 액 을3TC
어 두 운 곳 에 서overnight
시 킨 후, well
당1 m/
씩 첨 가 하 여3
시 간 동 안 배 양 하 였 다.
배 양 완 료 후 배 양 액 을 버 리 고, phosphate buffered saline(PBS
) 으 로2—3
희 세 척 하 고, well
당0.5 m
/의\% formaldehyde-1 % CaCU
을 넣 어 세 포 를 고 정 한 후, 1% glacial acetic acid-50%
ethanol
을well
당2 m/
씩 넣 어15
분 간 실 온 에 방 치 하 여 용 해 소 체 내 에 측 적 된NR
을 용 출 하 였 다.
용 출 된NR
에^
흡 광 도 는 분 광 광 도 계ELISA reader (Spectra MAX 250, U.S.A, 520 nm
) 로 측 정 하 여NRso
군 과 비 교 하 였 다.
SRB
정량분석법- Skehan
등 의 방범*®에 따 라.
세 포 를5 xl(y* cells/well
이 되 도 록 조 절 하 여1 m/
씩24 well plate
에 분 주 하 고24
시 간 배 양 하 였 다. 3T3
섬 유 모 세 포 에 대 한 카 드 물 외SRBso
농 도 를 결 정 하 였 다.
}. Pharm. Soc. Korea
Control 3.73±0.01
1 3.72±0.02
5 2.19±0.03*
25 0.40±0.10*
50 0.36±0.10*
100 0.30+0.03*
NRso 30.45 uM
Cells were incubated for 48 hrs. The ceils were h a r
vested w ith Trypsin-EDTA. ^ h e values represent the mean± standard deviations for triplicate ex
periments. Significantly different from the control value- **p<0.01, ***p<0.001 (Student's t- te s t).
는 카 드 뮴 의 농 도 에 의 존 하 여 감 소 하 였 으 며
. IC (inhi
bitoiy concentration)50
인MTT
50은33.04 |iM. N R
50
은30.45
나M.
및SRBso
은5472
나M
이었다(Table I.
II, III). 3T3
섬 유 모 세 포 에MTTso
농 도 는33.04iiM
카 드 뮴 파4
종 류 의 포 공 령 물 추 출 물 농 도 를 동 시 에 처 리 한 후. MTT
흡 광 도 를 측 정 하 여MTTso
군 외 흡 광 도 와 비 례 적 으 로 산 출 한 결 과,
모 든 분 석 농 도 에 서 통 계 적 으 로 유 의 성 있 는 해 득 효 과 를 나 타 내 었 다.
그 렇 지 만 포 공 령 물 추 출 물 의l(T"mg/mZ
농 도 에 서 가 장 높 은 유 의 성(p<
0.001)
이 관찰되었다(Table IV). 3T3
섬 유 모 세 포 를NR*
농 도 인30.45 nM
카 드 뮴 과4
종 류 의 포 공 령 물 추 출 물 농 도 틀 동 시 에 처 리 한 후, NR
흡 광 도 를 측 정 하 여NRso
군 외 흡 광 도 와 비 례 적 으 로 산 출 한 결 과,
물 추 출 물 외l(T'~l(T®rng/m/
농 도 에 서 만70%
와67%
로 유 의 성(p<0.05
) 있 는 해 득 효 과 를 나 타 냈 으 며,
다 른 분 석 능 도 에Table
I I I — Dose-response effects of cadmium-treated 3T3 fibroblast cells assessed by the SRB assay
Table
U — The effects of cadm ium on the neutral red __________ uptake in cultured 3T3 fibroblasts__________
Concentration N R quantity
of cadmium (|iM) M ean± S.D.* % of control M TT
정량 외 방 법 과 동 일 하 게 대 조 군, SRBso
군 및 실 험군 으 로 하 여 포 공 령 물 추 출 물 이 첨 가 된 배 양 액 에 서
48
시 간 배 양 한 후,
배 양 액 을 버 리 고5
회 세 척 한 후, 0.4% su lfo rho d am in e B
를200 |a/
씩 첨 가 하 여1
시 간 동 안 실 온 에 방 치 한 다 옴, 1.0% acetic acid
로5
회 세 척 하 고 완 전 히 건 조 하 였 다. 10 m M T ris base
로 결 합 된pro te in s ta in
을 녹 인 후.
흡 광 도 는 분 광 광 도 계E L IS A reader(S pectra M A X 250, U .S .A , 520 n m )
로 측 정 하 여SRBso
군 과 비 교 하 였 다.
세포의 광학현미경적 관찰 -
광 학 현 미 경 으 로 세 포 를 관 찰 하 기 위 하 여N IH 3T3
섬 유 모 세 포 는M T T
정 량, N R
정량 및S R B
정량 을 하 기 전 에 도 립현 미경(In v e r
te d m icroscope, O ly m p u s )
으 로 관 찰 하 고 사 진 을 촬 영 하 였 다.
통계처리 -
실 험 결 과 의 통 계 처 러 는S tu d e n t's tr te s t
에 준 하 였 고, P - value
가0.05
이 하 일 경 우 유 의 한 것 으 로 판 정 하 였 다.
결과 및고찰
본 실 험 에 서 는 포 공 령 으 로 부 터 물 추 출 물 을 조 제 하 여 카 드 몸 에 대 한 해 득 효 과 를 측 정 하 기 위 하 여
, 1
차 검 색 방 법 인 비 색 분 석 방 법 중 가 장 민 감 하 고 안 정 한 방 법 인M T T
정량N R
정량 및S R B
정량 분 석범 을 이 용 하 여 실 험 한 결 과 는T able I~ V 1
과 같 다.
3T3
섬 유 모 세 포 를 여 러 농 도 의 카 드 뮴 으 로 처 리 한 후, M TT, N R
및S R B
의 흡 광 도 률 측 정 하 고,
대 조 군 의 흡 광 도 를100
% 로 하 여 마 이 크 로 몰 농 도 에 대 한 흡 광 도 률 비 례 적 으 로 측 정 한 결 과, M TT, N R
및S R B
의 흡 광 도Table I — The effects of cadm ium on the production of MTT formazan crystal in 3T3 fibroblasts
Control 1.92±0.02
1 1.92+0.03
5 1.16±0.02*
25 0 .7 8 ± 0 .ir
50 0.67±0.05*
100 0 .7 2 ± 0 .ir
SRB 50 54.72 uM
3.26±0.18 2.91±0.32*
L71±t).13*
0.76±0.14*
0.63±0.13*
0.29+0.03*
33.04 uM
Concentration MTT quantity Concentration ®모표 quantity
of cadmium (M-M) M ean± S D ^ % of control of cadmium (liM ) M ean± S.D /' % of control
Cells were incubated for 48 hrs. The cells were har
vested with Trypsin-EDTA. T he values represent the m ean±standard deviations for triplicate experiments.
Significantly different from the control value ： *p<0.05, **
p<0.01. ***p<0.001 ( Student's t-test).
Cells were incubated for 48 hrs. The cells were h a r
vested w ith Trypsin-EDTA. ^ h e values represent the mean ± standard deviations for triplicate ex
periments. Significantly different from the control value ： **p<0.01 (Student's t- test).
Vol. 42, 3, 1998
포공령외 카드몸에 대한 세포득성 억제효과
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25
50
100
MTTs
3.56±0.10 1.96±0.24 2.49±0.16*
2.39+0.22*
2.25±0.18 2.00+0.16
Cells were incubated for 48 hrs. The cells were har
vested w ith Trypsin-EDTA. ^ h e values represent the mean± standard deviations for triplicate ex
periments. Significantly different from the control value ： *p<0.05 (Student's t- test).
서 통 계 적 으 로 유 의 성있 는 해 득 효 과 를 관 찰 할 수 없 었 다
(T able V ).
핵 내 의 단 백 질 인sulforhodam ine B pro
t e i n ^
측 정 하 는 방 법 인S R B
정 량 분 석 법 을 이 용 하 여S R B
량 을 측 정 한 결 과, 3T3
섬 유 모 세 포 에 농 도 인5472
카 드 뮴 과4
중 류 의 포 공 령 물 추 출 물 농 도 를 동 시 에 처 리 하 였 다.
추 출 물 농 도 를 처 리 한 후, S R B
흡 광 도 를 측 정 하 여SRBso
군 의 흡 광 도 와 비 례 적 으 로 산 출 한 결 과,
포 공 령 물 추 출 물 외
10
캐mg/mZ
농 도 에 서 통 계 적 으 로67
? ^ 로 유 의 성(p<0.05
) 있 는 혜 득 효 과 를 나 타 냈 으 나,
다 른 분 석 농 도 에 서 통 계 적 으 로 유 의 성 있 는 해 득 효 과 를 관 찰 할 수 없 었 다(Table V I).
포 공 령 물 추 출 물W ^ m g / m /
농 도 를 건 강 세 포 인N IH 3T3
섬 유 모 세 포 에 적 용 하 여M TT
정 량 분 석 방 범 으 로 검 색 한 결 과 대 조 군 에 버 하 여98.53%
로 나 타 났 으 므 로 자 체 득 성 을 거 의 없 는 것 으 로 생 각 된 다.
비 색 분 석 법 에 의 한 포 공 령 물 추 출 물 외 카 드 몸Table V
The NK Uptake ability on aqueous extract of Taraxaci Herba in 3T3 fibroblasts treated w ith cadmium (NR 50 )
Groups N R quantity
Concentration
(mg/m/) Mean±S.D.® % of control
2.81±0.03 1.57±0.13 1.88±0.28*
1.60±0.33 1.57±0.14 1.33±0.28 3.34±0.35
1.93±0.18 2.61±0.04*
2.50±0.19*
2.41±0.28*
2.41±0.27*
해 득 효 과 는 일 반 적 으 로 추 출 물 의 농 도 증 가 에 따 라 흡 광 도 가 중 가 하 며
.
모 든 비 색 정 량 분 석 범 중 에 서 농 도 에 따 른 흡 광 도 의 번 화 는MTT
정 량 분 석 법 과NR
정 량 분 석 범 이SRB
정 량 분 석 법 보 다 민 감 하 게 감 소 하 는 경 향 을 볼 수 있 었 다.
세 포 외 광 학 현 미 경 적 관 찰 에 서 는 대 조 군 을
24
시 간 배 양 하 면w ell
바 닥 이 뚜 렸 한 핵 을 갖 는 방 추 형 으 로 단 층 을 이 루 며, 3T3
섬 유 모 세 포 돌 이 부 착 되 어 있 다 (그 림A).
ICsoCMTTso. NRso,
및SRBso
) 의 카 드 뮴 을 처 리 한 군 에 서 는 세 포 수 가 감 소 하 였 고,
세 포 의 형 태 가 원 형 으 로 부 터 변 형 되 는 잉스'•을볼 수 있 었 다 (그 림B). ICso
농 도 외 카 드 뮴 과 포 공 령 물 추 출 물 을 처 리 한 군 에 서 는ICso
군 에 버 하 여 세 포 수 가 중 가 하 고 재 생 현 상 뚜 렸 하 였 다 (그 림C).
포 공 령 물 추 출 물¥
이 용 하 여 카 드 몸 해 득 효 과 를 측 정 한 보 고 가 없 어 직 접 적 인 비 교 는 할 수 없 으 나.
본 실 험 의 걸 과 에 의 하 면 카 드 몸 에 대 한 세 포 득 성 을 포 공 령 물 추 출 물 이 억 제 하 는 해 득 효 과 가 있 는 것 으 로 인 정 된 다.
이 에 포 공 령 외 물 추 출 물 의 카 드 뮴 에 대 한 헤 득 물 질 이 함 유 되 어 있 을 것 으 로 관 단 되 어 분 광 화 학 적 인 방 법 으 로 분 자 구 조 를 규 명 하 는 노 력 을 계 속 할 계 획 이 다
.
결 론
카 드 뮴 이
3T3
섬 유 모 세 포 에 미 치 는 세 포 득 성 을 검 정 하 고,
카 드 물IC 5 o(MTT 6 o, NR 50 ,
및SRB
* ) 에 의 하 여 손 상 된3T3
섬 유 모 세 포 를 해 득 시 킬 수 있 는 물 질 을 창 출 할 목 적 으 로 본 연 구 를 수 행 하 였 다.
실 험 은 배 양 액 만 으 로 배 양 한 군 을 대 조 군,
세 포 독 성 실 험 에 의 하 여 결 정 된J. Pharm. Soc. Korea
310 한두석 • 이기남• 이중섬• 백승화
Table IV
— The MTT absorbance on aqueous extract of Taraxaci Herba in 3T3 fibroblasts treated w ith cadm ium (MTT 50 )
Groups Concentration
(m g/m i)
MTT quantity M ean± S.D / % of control
Table V I
— The SRB absorbance on aqueous extract of Taraxaci Herba in 3T3 fibroblast treated w ith cadmium (SRB 50 )
Groups Concentration
(mg/m/)
SRB quantity M ean± S .D / % of control
Cells were incubated for 48 hrs. The cells were har
vested w ith Trypsin-EDTA. *The values represent the mean± standard deviations for triplicate ex
periments. Significantly different from the control value ： *p<0.05. **p<O.Oi, ***p<0.001 (Student's t- test).
Cells were incubated for 48 hrs. The cells were har
vested w ith Trypsin-EDTA. ^ h e values represent the m ean± standard deviations for triplicate ex
periments. Significantly different from the control value ： *p<0.05 (Student/s t-test).
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포공령의 카드물에 대한 세포득성 억제효과 311
A
Fig. 1
Inverted photomicrograph of NTH 3T3 fibro
blasts after incubation in unmodified medium (control) for 2 days x200. Most cells had a- bundant cytoplasm and formed round shape (A). Inverted photomicrograph of N IH 3T3 fi
broblasts after incubation in the medium con
taining ICr 오 mg/m/ concentration of Taraxaci Herha for 2 days X 200. Most cells were shrink
ed and number of cells were decreased (B). In verted photomicrograph of N IH 3T3 fibroblasts after incubation in the medium containing 10 "요 mg/m/ concentration of Taraxaci Herha for 2 days x200. Most cells were showed regene
rative and number of cells were increased (C).
ICso 농 도 의 카 드 뮴 과 4 중 류 의 포 공 령 물 추 출 물 을 각 각
배 양 액 에 넣 어 배 양 한 군 을 설 험 군 으 로 분 류 하 여 실 험 하
였 다 . 모 든 군 은 동 일 한 조 건 에 서 48 시 간 배 양 한 후 .
MTT 흡 광 도 . N R U ptake 능 력 및 SR B 량 을 측 정 하 고 .
광 학 현 미 경 적 관 찰 을 실 시 하 였 다 . 포 공 령 물 추 출 물 이
M T T 정량, N R 정량 및 S R B 정량에서 통계적으로 유의 성있는 해득효과를 나타냈으나. 농도에 따른 흡광도의 번화는 M TT 정량분석법과 N R 정량분석범이 S R B 정 량분석범보다 민감하게 감소하는 경향을 볼 수 있었다.
광학현미경적 소견에서도 세포의 재생이 뚜렸하였다.
감사의 말씀
본 연구는 교육부 기초의학연구비지원에 의해서 연구 되었으며, 이에 감사한다.
문 헌
