A Comparison of the Components and Biological Activities of the Ethanol Extracts of Achyranthes japonica Nakai and Achyranthes bidentata Blume

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토우슬과 회우슬의 에탄올 추출물의 성분 및 생리활성 비교

이예슬, 김미선, 김덕진, 손호용*

안동대학교식품영양학과

Received: July 9, 2013 / Revised: September 6, 2013 / Accepted: September 8, 2013

서 론

우슬은비름과(Amaranthaceae)에속하는다년생식물로

한국^,중국^,일본등에분포하며^,민간에서는쇠무릎이라불 릴만큼관절염에효과가있다고알려져있다[8, 12, 14, 20].

한방에서의우슬은성미가평하며^,쓴맛과신맛을가지고^,신 장과간장에작용하여어혈을제거하며^,혈액순환을촉진하 고^,혈액을생성하는효능과열을떨어뜨리는효능이알려져 있다^{[16, 23].}우슬의 주요 약리성분으로는 oleanolic acid, inocosterone, ecdysterone, beta-sitosterol, stigmasterol, feruloyl tyramine glycoside 등이알려져있으며^[28],최근에 는우슬의지표물질검정및효율적인분석연구도진행되고

있으나^[29],아직까지국내에서는우슬의지표성분함량이

설정되어있지않은상태이다^.우슬에대한연구는^,과거다 량증식을위한기내배양연구^[15]에서우슬의효율적인이 용을위한유용생리활성탐색으로전환되고있으며^,현재보 고된생리활성으로는항산화활성^{[5, 23],}항균^{[3, 6]}및항말 라리아활성^[31],항염증활성^{[2, 17],}중금속제거및해독효 과^{[7, 9],}관절염완화및경조직재생효과^{[8, 19],}파골세포 분화억제효과^{[4, 10],}허혈성뇌손상에대한보호효과^[22],혈 류개선^[27]및간독성보호^[13]등이알려져있으며최근에 는우슬분말의저장안전성및독성에대한연구^[18]가진행 된바있다^.

우슬은기원식물이국가마다달라^,국내산우슬의경우토 우슬(Achyranthes japonica Nakai)을사용하며^,중국에서는 회우슬(Achyranthes bidentata Blume), 천우슬^(Cyathula officinalis Kuan) 및마우슬(Cyathula capitata Moq)을사 용하고있다^{[12, 14].}그러나현재우리나라대한약전에서는^, A Comparison of the Components and Biological Activities of the Ethanol Extracts of Achyranthes japonica Nakai and Achyranthes bidentata Blume. Lee, Ye-Seol, Mi-Sun Kim, Duck-Jin Kim, and Ho-Yong Sohn*. Dept. of Food and Nutrition, Andong National University, Andong 760-749, Korea

In the course of a study for the development of functional foods utilizing Woosul (Achyranthis radix), the components and vari- ous biological activities of Korean Woosul (AJN: Achyranthes japonica Nakai) and Chinese Woosul (ABB: Achyranthes bidentata Blume) were compared. Woosul in Korea, including AJN and ABB, are regulated and part of the Korean Pharmacopoeia.

From AJN and ABB, ethanol extracts and their subsequent organic solvent fractions were prepared and their in-vitro antimicrobial, antioxidant and anti-diabetes activities were evaluated. Although AJN and ABB have no clear distinction in terms of usage in Korea, our results suggest that AJN has higher quantities of lipid-soluble components and lower amounts of water-soluble sugars than does ABB. ABB also appears to possess greater amounts of flavonoid and polyphenol substances than AJN. Anal- yses of biological activities showed that the fractions of AJN were more active as antibacterial agents, and possessed more pronounced α-glucosidase inhibitory activities than those of the ABB fractions. However, the antioxidant activities of the ABB fractions, as determined by DPPH anion-, ABTS cation-, nitrite-scavenging activity and reducing power, were higher than those of the AJN fractions. Our results suggest that the components and bioactivity of the extracts and subsequent fractions of AJN and ABB are different. Therefore, usage of either AJN or ABB should be carefully considered, as regards their individual prop- erties, when the active fractions of Woosul are employed in the development of functional foods or novel plant-derived medi- cines.

Keywords: Bioactivity, Achyranthes japonica Nakai, Achyranthes bidentata Blume

*Corresponding author

Tel: +82-54-820-5491, Fax: +82-54-820-7804 E-mail: [email protected]

(2)

국내자생하는토우슬과중국원산의회우슬의²종을우슬로

규정하고있다^[12].국내에서는많은연구가토우슬에집중

되고있으나^,중국을포함한전세계적으로는회우슬에대한 연구가주로이루어지고있는실정이다^.현재까지토우슬과 회우슬의비교연구는주로형태분류에집중되어있으며^,생 리활성비교연구로는최근토우슬과회우슬의메탄올추출 물의DPPH(1,1-diphenyl-2-picryl hydrazyl) 음이온소거활 성과간암세포및자궁경부암세포에대한항암활성검정이

보고되어있을뿐이다^[30].따라서본연구에서는우슬을이

용한고부가가치식품개발연구의일환으로^,우슬의기원식 물별성분과생리활성의차이를확인하기위해국내산토우

슬과중국산회우슬의^ethanol추출물및이의순차적유기

용매분획물을조제하여각각의유용성분을분석하고^,추출 물의 in-vitro 항균활성^,항산화^,및항당뇨활성을비교하여 보고하는바이다^.

재료 및 방법

실험재료

본실험에사용된국내산토우슬과중국산회우슬은²⁰¹²년

안동지역대제한약에서구입하여사용하였다^{(Fig. 1).}국내

산토우슬은²⁰¹¹년경북영천에서가을에서수확^,건조한

제품이며^,중국산회우슬은²⁰¹¹년중국하남성에서가을에

수확^,건조한제품이었다^.각각의우슬은추출에적합하도록 세절한 후 95% ethanol (Daejung Chemicals & Metals Co., Ltd. Korea)을우슬무게의¹⁰배되도록가하여상온에 서³회추출하였다^.이후추출액은 filter paper (Whatsman No. 2)로 거른 후 감압 농축(Eyela Rotary evaporator N- 1000, Tokyo Rikakikai Co., Ltd. Japan)하여분말로조제 하였다^.유기용매분획물제조의경우^,각각의우슬^ethanol 추출물을 물에 현탁한 후 n-hexane, ethylacetate 및

butanol을이용하여순차적으로분획하고물잔류물을회수

하였으며^[1],각각의분획물들은감압건조하여분말화하였

다^.각각의시료들은^DMSO에적당한농도로녹여, in-vitro 항균활성^,항산화및항당뇨활성평가에사용하였다^.기타 사용한시약은시약급이상으로 Sigma Co. (USA)의제품을 구입하여사용하였다^.실험에사용한우슬은안동대학교식 품영양학과에서 보관하고 있다(voucher specimen 2012- WS1, 2012-WS2).

우슬의 항균 활성

조제된우슬의 ethanol 추출물및이의분획물의항균활

성은기존의보고된방법과동일하게평가하였다^[11].항세 균활성평가를위한 그람양성세균으로는 Staphylococcus aureus KCTC 1916, Listeria monocytogenes KACC 10550, Bacillus subtilis KCTC 1924를사용하였으며^,그람음성세 균으로 Escherichia coli KCTC 1682, Proteus vulgaris KCTC 2433, Salmonella typhimurium KCTC 1926, 항진 균활성평가를위해서는 Candida albicans KCTC 1940 및 Saccharomyces cerevisiae IF0 0233를사용하였다^.항세균 활성평가의경우, Nutrient broth (Difco Co., USA)에각각 의세균을접종하여³⁷ô^C에서²⁴시간동안배양한후^,각균 주를Ô.D.600 0.1로 조정하여 Nutrient agar (Difco Co., USA) 배지를포함하는멸균 petri dish (90×15 mm, Green Cross Co., Ltd. Korea)에¹⁰⁰µ^l도말하고^,각각의 시료 5µ^l를멸균 disc-paper (지름 6.5 mm, Whatsman No.2)에 가하여^{, 37}ô^C에서²⁴시간동안배양하였으며^,진균경우에 는 Sabouraud dextrose (Difco Co. USA)를이용하여동일 한방법으로³⁰ô^C에서²⁴시간동안배양후^,생육저지환의 크기를측정하여항균활성을평가하였다^[11].대조구로는항 세균제인 ampicillin과항진균제인 miconazole (Sigma Co., USA)을각각¹µ^g/disc농도로사용하였으며^,생육저지환의 크기는육안으로생육이나타나지않는부분의지름을^mm 단위로측정하였고^{, 3}회이상평가후대표결과로나타내 었다^.

우슬의 항산화 활성

우슬추출물및이의분획물의항산화활성은 DPPH (1,1-

diphenyl-2-picryl hydrazyl) anion scavenging activity [DSA], ABTS [2,2-azobis(3-ethylbenzothiazoline-6- sulfonate)] cation scavenging activity [ASA], nitrite scavenging activity [NSA]

및환원력측정으로평가하였다^[26].먼저^DSA측정의경 우^,다양한농도로희석한시료²⁰µ^l에 99.5% ethanol에용 해시킨²×¹⁰^-4^{M DPPH}용액³⁸⁰µ^l를 넣고 혼합하여 37^oC에서³⁰분동안반응시킨후^{, 516 nm}에서 microplate reader (Asys Hitech, Expert96, Asys Co., Austria)를사용 하여흡광도를측정하였다^{. DSA(%)}는시료첨가구와비첨 가구의백분율로표시하였다^{[25]. ASA}측정의경우^{, 7 mM} Fig. 1. Photography of the dried roots of Achyranthes japon-

ica Nakai (Korea, left) and A. bidentata Blume (China, right) used in this study.

(3)

ABTS (Sigma Co., USA) 5 ml와 140 mM potassium persulfate 88 ml를섞은후상온에서¹⁶시간빛을차단하여^ABTS양 이온을형성시켰으며^,이후이용액을^{414 nm}에서흡광도 값이^1.5가되도록^ethanol로희석하였다^.조제된희석용액 190 µ^l와시료¹⁰µ^l를혼합한후상온에서⁶분간반응시킨

후^{734 nm}에서 흡광도를 측정하고 다음의 식에 의해

ASA(%)를결정하였다^[11].

ASA (%) = [(C−^S)/C]×¹⁰⁰

C: DMSO 첨가시흡광도^{, S:}시료첨가시흡광도^. 한편^NSA측정의경우^,아질산염용액^{(1 mM)}에시료용액 을가하고여기에^{0.1 N HCl}을가해^{pH 1.2}로조정한후^, 37^oC에서¹시간 반응시킨후 Griess reagent (Sigma Co., USA)를가하고혼합하였다^.이후¹⁵분간실온에서방치후 520 nm에서흡광도를측정하여잔존^nitrite양을측정하였 다^{. NSA(%)}는다음의식에의해계산하였다^[11].

NSA (%) = [1−^(A−^C)/B]×¹⁰⁰

A: 1 mM nitrite 용액에시료를첨가하여¹시간반응시킨 후의흡광도, B: 1 mM nitrite 용액의흡광도^{, C:}우슬시료 의흡광도^.

환원력평가의경우^Oyaizu등의방법을변형하여측정하

였다[1]. Ethanol에 용해한 시료^{2.5 ml}에 0.2 M sodium phosphate buffer (pH 6.6) 2.5 ml와 10% potassium ferricyanide 2.5 ml를첨가하고⁵⁰^o^C에서²⁰분간반응시킨 후, 10% trichloroacetic acid 2.5 ml를첨가하여반응을종 료하고^{4,000 rpm}에서¹⁰분간원심분리하여상등액을회수 하였다^.회수한상등액은증류수로²배희석한후^,신선하게 조제된 0.1% ferric chloride 용액과 5:1 (v/v) 비율로혼합하

고^{700 nm}에서흡광도를측정하여평가하였다^.상기의항

산화실험에서대조구로는 vitamin C (Sigma Co., USA)를 사용하였으며^,용매대조구로는^DMSO를사용하였다^.각각 의활성평가는각각³회반복한실험의평균과편차로표 시하였다^.

우슬의 항당뇨 활성

항당뇨활성은în-vitroα^-amylase저해활성과α-glucosidase 저해활성을평가하여나타내었다^.먼저α^-amylase저해활 성은^Lim등^[21]의방법을수정하여사용하였으며^,우슬시 료^2.5µ^l와 50 mM phosphate buffer (pH 6.8)로희석한α^- amylase (0.25 U/ml) 25 µ^l를 혼합하여³⁷ô^C에서¹⁰분간 preincubation 한후, 0.5% soluble starch (Samchun Chemicals Co., Korea) 25 µ^l를가하여³⁷ô^C에서¹⁰분간 반응하였다^. 이후¹⁰⁰ô^C에서⁵분간가열하여반응을정지시켰으며^,반응

액에¹⁵⁰µ^l의 DNS (3,5-dinitrosalicylic acid, Sigma Co., USA) 용액을가하여¹⁰⁰^o^C에서⁵분간가열하여발색한후 상온에서방냉하였다^.발색액은 96 well microplate reader (Tecan Co., USA)를이용하여^{540 nm}에서흡광도를측정하 였으며^,각각의실험은³회반복한후평균값을구하여다음 의식으로저해율을계산하였다^.

저해율^{(%) = [1}−⁽시료첨가구효소활성^/대조구첨가구 효소활성^)]×¹⁰⁰

α-glucosidase 저해활성은 pNPG (p-nitrophenol glucoside;

Sigma Co., USA)를이용하여평가하였으며^[21],우슬시료 2.5 µ^l와 50 mM sodium acetate buffer (pH 5.6)로희석한 α-glucosidase (0.25 U/ml) 25 µ^l를혼합하여³⁷^o^C에서¹⁰분 간 preincubation 하고 1 mM pNPG 용액²⁵µ^l를가하여 60^oC에서¹⁰분간반응하였다^.이후 1M NaOH 25 µ^l를가하 여반응을정지시키고^{, 405 nm}에서흡광도를측정하여저 해율을계산하였다^.

기타 분석

우슬의 수분함량은 적외선 수분측정기(HG53 Halogen Moisture Analyzer, Mettler-Toledo International Inc., Zurich, Switzerland)로측정하였으며^,추출물의^pH측정은 320 pH meter (Mettler Toledo InLabR 413, UK)로측정 하였다^.색차측정은색차계(Chromatometer CR-300, Minota, Japan)를 이용하여 백색도(L value, lightness), 적색도^(a value, redness) 및 황색도(b value, yellowness) 값을³회 반복측정하여색차^(E)를계산하였다^.표준백색판은^L값이 92.39, a 값이−^{0.08, b}값이^1.39이었으며^,색차^(E)는다음 의식을이용하여계산하였다^.

한편추출물의총^flavonoid의함량측정은기존의보고한

방법^[25]에따라측정하였으며^,각각의시료를¹⁸시간메탄 올교반추출하고여과한추출검액⁴⁰⁰µ^l에 90% diethylene glycol 4 ml를 첨가하고 다시 1 N NaOH 40 µ^l를 넣고 37^oC에서¹시간반응후^{420 nm}에서흡광도를측정하였다^. 표준시약으로는^rutin을사용하였다^.총 polyphenol 함량은 추출검액⁴⁰⁰µ^l에⁵⁰µ^l의 folin-ciocalteau, 100µ^l의^Na2CO₃ 포화용액을넣고실온에서¹시간방치한후^{725 nm}에서 흡광도를측정하였다^[24].표준시약으로는 tannic acid를 사용하였다^.총당정량의경우에는 phenol-sulfuric acid 법 을^,환원당정량의경우에는^DNS변법을이용하였다^[26].

각각의분석결과는³회반복한실험의평균과편차로나타 내었다^.

E

Δ = (ΔL)²+( )Δa ²+( )Δb ²

(4)

통계분석

실험결과는 SPSS 20.0 버전을사용하여^mean±^SD로나 타내었으며^,각 군간의 차이는^ANOVA로 분석하였으며^,

Duncan 다중비교검증법으로통계적유의성검정을조사하

였다^.유의수준은 p < 0.05로하였다^.

결과 및 고찰

토우슬과 회우슬의 관능적 특성 및 성분 비교

국내산토우슬은가늘고긴원주형의뿌리를가지며^,황갈 색을띄며^,상대적으로전분립이적어단단하고부서지기쉬 운형태로^,냄새는거의없으며^,씹을때단맛이느껴졌다^. 반면중국산회우슬은굵고곧게뻗은긴원주형의뿌리를 가지며^,담갈색을띄며^,푸석푸석하여쉽게부서지며^,냄새 가있으며^,씹을때단맛^,쓴맛^,떫은맛이함께느껴졌다^(Fig.

1). 한편 토우슬 및 회우슬의 수분함량은 각각^9.13%및

10.89%로차이가나타났으나^,에탄올추출효율은^5.0-5.1%

로차이가나타나지않았다^.추출물의^pH와색차분석결과

역시유의성이인정되지않았다(Table 1). 토우슬과회우슬

의에탄올추출물의분획효율및성분분석결과는^{Table 2}

에나타내었다^.토우슬의경우^n-hexane과 ethylacetate 분 획의총량이^8.5%에달하며^,분획물중^butanol분획물과물 잔류물이각각^42.4%및^47.3%로나타났다^.회우슬의경우 에는^n-hexane과 ethylacetate 분획의총량이^3.6%이며^,분 획물 중^butanol분획물과 물 잔류물이 각각^32.0%및

64.2%로나타났다^.또한에탄올추출물의총당및환원당함

량은회우슬추출물이토우슬보다^1.26-1.44배높은함량을 나타내었다^.이러한결과는비록토우슬과회우슬의에탄올 추출물효율은유사하나^,토우슬추출물이회우슬추출물보 다지용성물질을많이포함하며^,회우슬의경우상대적으로 수용성당류를많이포함하고있음을의미한다^.한편총플라 보노이드함량분석결과, 토우슬에서는 n-hexane 분획에서

Table 1. Comparison of water content, extraction yield, pH and color differences between Achyranthes japonica Nakai (Korea) and A. bidentata Blume (China).

Samples Water content (%)

Extraction yield

(%) pH Color differences

L a b ∆E

AJN^a 9.13± 0.09^* 5.0± 0.12 5.15± 0.08 49.0± 0.1 -5.5± 0.1 -1.8± 0.2 42.9± 0.5 ABB^b 10.89± 0.04^* 5.1± 0.05^* 5.04± 0.10 48.4± 0.5 -5.3± 0.1 -2.3± 0.5 43.5± 0.5

aAJN: Achyranthes japonica Nakai.

bABB: Achyranthes bidentata Blume. Data are presented as the mean± SD of three determinations.

*p < 0.05 compared with AJN.

Table 2. Comparison of the contents of total flavonoid, total polyphenol, total sugar and reducing sugar in different extracts and fractions between Achyranthes japonica Nakai (Korea) and A. bidentata Blume (China).

Samples Extract/

Fraction

Fraction yield (%)

Content (mg/g-extract)

Total flavonoid Total polyphenol Total sugar Reducing sugar

AJN^a Ethanol ex^c - 0.11± 0.10 3.53± 0.09 384.17± 0.48 342.44± 3.37

Hexane fr^d 2.3 2.61± 0.52^* 4.60± 0.25 40.94± 0.75 29.44± 0.48

Ethylacetate fr 6.2 0.72± 0.22 4.66± 0.13 330.81± 0.48 276.82± 2.88 Butanol fr 42.4 0.04± 0.14^* 3.67± 0.08 363.43± 1.27 328.67± 3.13 Water residue 47.3 0.06± 0.03 2.38± 0.05 371.17± 1.43 334.96± 2.40

ABB^b Ethanol ex - 1.71± 0.07 6.79± 0.12 553.08± 3.10 430.04± 3.85

Hexane fr 0.8 3.39± 0.09^* 7.22± 0.06 25.72± 0.21 20.70± 0.48

Ethylacetate fr 2.8 19.05± 0.42 8.32± 0.06 80.27± 0.63 38.06± 0.24 Butanol fr 32.0 0.58± 0.24^* 7.22± 0.20 500.82± 1.41 439.23± 4.33 Water residue 64.2 0.71± 0.00 4.91± 0.02 544.30± 2.54 126.23± 6.50

bABB: Achyranthes bidentata Blume.

cex: extract.

dfr: fraction. Data are presented as the mean± SD of three determinations.

*p > 0.05 compared with counterpart of AJN or ABB.

(5)

가장높은함량(2.61 mg/g)을나타내었으나^,회우슬에서는 ethylacetate 분획에서가장높은함량(19.05 mg/g)을나타 내어성분상의차이가나타났다^.특히회우슬이 ethylacetate 분획은토우슬의 ethylacetate 분획에비해당함량이^25%

정도로매우낮은특징을나타내었다^.총폴리페놀함량분 석결과^,토우슬에서는모든분획물에서 2.38-4.66 mg/g의분 포를^,회우슬의분획물에서는 4.91-8.32 mg/g의분포를나타 내어^,토우슬및회우슬모두다양한종류의폴리페놀류들을 함유하고있으며^,회우슬이토우슬보다상대적으로많은총 플라보노이드및총폴리페놀함량을나타냄을확인하였다^.

토우슬과 회우슬의 항균활성 비교

토우슬및회우슬의에탄올추출물및이의순차적유기

용매분획물의항균활성평가결과는^{Table 3}에나타내었다^.

먼저대조구로사용된 ampicillin과 miconazole은다양한병 원성세균^,식중독세균및진균에우수한항균활성을나타 내었다^.각각의우슬에탄올추출물은사용된세균및진균

에대해항균활성이거의인정되지않았으며^,분획물에서 가장많은양을차지하는물잔류물의경우항균활성이나타 나지않았다^.반면분획물중각각의^n-hexane및 ethylacetate 분획에서는대장균을제외한세균에서양호한항세균활성 이나타났다^.따라서토우슬및회우슬은지용성항세균활 성물질을포함하고있음을알수있으며^,토우슬추출물이 회우슬추출물보다^n-hexane및 ethylacetate 분획의지용 성분획함량이^2.4배많음을고려할때^,토우슬이회우슬보 다항균활성이우수하리라판단된다^.한편토우슬의경우 butanol 분획에서 회우슬과는 달리, Bacillus subtilis와 Salmonella typhimurium에대해약한항균활성이나타났다^.

토우슬과 회우슬의 항산화능 비교

먼저토우슬및회우슬의에탄올추출물및분획물들의항 산화활성을^DSA및^ASA로평가한결과(Table 4), 회우슬 추출물및분획물이토우슬추출물및분획물보다우수함을 알수있었으며^,토우슬및회우슬의에탄올추출물및^n-

Table 3. Comparison of the antimicrobial activity of the different extracts and fractions between Achyranthes japonica Nakai (Korea) and A. bidentata Blume (China).

Samples

Antimicrobial activity (Clear zone: mm, 500 μg/disc)

Gram positive bacteria Gram negative bacteria Fungi

LM^e SA^f BS^g EC^h STⁱ PV^j CA^k SC^l

AJN^a Ethanol ex^c NA^m NA NA NA 7 NA NA NA

Hexane fr^d 9 10 10 NA 9 8 NA NA

Ethylacetate fr 7 NA 7 NA 7 7 NA NA

Butanol fr NA NA 7 NA 7 NA NA NA

Water residue NA NA NA NA NA NA NA NA

ABB^b Ethanol ex NA NA 7 NA NA NA NA NA

Hexane fr 11 8 10 NA 10 9 NA NA

Ethylacetate fr 8 8 9 NA 8 8 NA NA

Butanol fr NA NA NA NA NA NA NA NA

Water residue NA NA NA NA NA NA NA NA

Ampicillin/Miconazole 25 22 30 11 17 30 13 18

The concentration of ampicillin or miconazole used was 1.0 μg/disc, respectively.

cex: extract.

dfr: fraction.

eLM: Listeria monocytogenes.

fSA: Staphylococcus aureus.

gBS: Bacillus subtilis.

hEC: Escherichia coli.

iST: Salmonella typhimurium.

jPV: Proteus vulgaris.

kCA: Candida albicans.

lSC: Saccharomyces cerevisiae.

mNA: No activity.

(6)

hexane 분획물의^DSA활성의경우에는유의적이지않았다 (p > 0.05). 최근토우슬과회우슬의메탄올추출물의^DSA평 가결과^,회우슬의^IC50가 0.75 mg/ml, 토우슬의^IC50가^1.19

mg/ml로보고되어회우슬이토우슬보다우수한^DSA를나

타낸다고보고^[30]되었으나^,두추출물들의^DSA활성이전 체적으로미약하므로큰차이는나타나지않는것으로이해 된다^.한편각각의우슬분획물중 ethylacetate 분획에서가 장강력한항산화활성이보였고^{, DSA}의경우 0.5 mg/ml 농 도에서 vitamin C (0.01 mg/ml)만큼강력한활성을나타내 었으며^,특히회우슬이우수한활성을나타내었다^.반면^{, ASA} 의경우 각각의 ethylacetate 분획은 1.0 mg/ml 농도에서 vitamin C (0.01 mg/ml)에필적하는활성을나타내어우슬

의 ethylacetate 분획물은상대적으로양이온보다는음이온

에대한소거능이우수함을알수있었다^.한편환원력의경 우^,회우슬이토우슬보다전체적으로강력한활성을나타내 었으며^,특히 n-hexane 분획물을제외한다른분획물에서는

1.7-2.3배우수한활성을나타내었다^.따라서항산화능의경

우^,토우슬보다회우슬이^ASA및환원력이더욱우수함을 확인하였다^.

우슬추출물및이의분획물의^NSA평가는^{Table 5}에나 타내었다^.토우슬과회우슬의에탄올추출물에서는^NSA의 유의적인차이가나타나지않았으나^,분획물에서는전체적 으로 회우슬이 토우슬보다^NSA활성 증가가 나타났다 (p < 0.05). 2종 우슬의 분획물 중 강력한^NSA활성은^n- hexane 및 ethylacetate 분획에서나타났으며^,이들의경우 0.1 mg/ml 농도에서 vitamin C (0.01 mg/ml) 보다 우수한 Table 4. Comparison of the antioxidant activity of the different extracts and fractions between Achyranthes japonica Nakai (Korea) and A. bidentata Blume (China).

Samples (mg/ml)

Antioxidant activity (%) DPPH

scavenging activity

ABTS scavenging activity

Reducing power (700 nm)

AJN^a Ethanol ex^c 0.5 10.0± 2.4^* 29.8± 0.8 0.0870± 0.0007

1.0 17.6± 0.9^* 38.3± 0.1 0.3050± 0.0014

Hexane fr^d 0.5 11.4± 2.2^* 23.1± 0.0 0.1415± 0.0099

1.0 22.3± 0.9^* 42.9± 0.5 0.1845± 0.0035

Ethylacetate fr 0.5 28.1± 1.2 60.1± 0.0 0.1595± 0.0071

1.0 52.3± 0.5 70.7± 0.8 0.3490± 0.0113

Butanol fr 0.5 10.6± 2.4 25.5± 1.0 0.0820± 0.0007

1.0 13.5± 1.0 33.8± 0.0 0.2350± 0.0042

Water residue 0.5 03.0± 1.3 7.5± 0.4 0.0565± 0.0000

1.0 10.0± 0.5 15.6± 0.3 0.2445± 0.0049

ABB^b Ethanol ex 0.5 10.6± 0.3^* 26.2± 0.6 0.1075± 0.0057

1.0 19.1± 0.5^* 44.9± 1.2 0.4105± 0.0035

Hexane fr 0.5 11.7± 0.7^* 28.6± 0.6 0.0550± 0.0007

1.0 22.5± 1.2^* 54.2± 0.1 0.1235± 0.0049

Ethylacetate fr 0.5 64.2± 0.6 73.9± 0.3 0.4565± 0.0071

1.0 78.1± 0.1 81.9± 1.6 0.7960± 0.0071

Butanol fr 0.5 06.3± 0.6 20.6± 0.9 0.1365± 0.0113

1.0 16.7± 2.3 37.9± 1.2 0.3990± 0.0042

Water residue 0.5 05.7± 0.3 4.5± 0.0 0.1105± 0.0071

1.0 09.5± 0.7 13.1± 0.0 0.4130± 0.0071

Vitamin C 0.01 35.3± 0.9 88.2± 5.8 0.3812± 0.0433

cex: extract.

dfr: fraction. Data are presented as the mean± SD of three determinations.

*p > 0.05 compared with counterpart of AJN or ABB.