ⓒ 2014 The Korean Medicine Society For The Herbal Formula Study
This paper is available at http//:www.ompak.okdanche.com which permits unrestricted non-commercial use, distribution, and reproduction in any medium, provided the original work is properly cited.
pISSN 1229-1218, eISSN 2288-5641 http://dx.doi.org/10.14374/HFS.2014.22.1.141 Official Journal of The Korean Medicine Society For The Herbal Formula Study
Available at http://www.ompak.okdanche.com
HFS
Original Article / 원저
쪽 니람의 DNCB 유발 생쥐의 아토피 피부염에 미치는 효과
추한나1·박은혜1·정종길2·백윤웅3·김정상1*
1동신대학교 한의과대학 해부학교실·2동신대학교 한의과대학
본초학교실·3광주보건대학교 물리치료과
The Effect of the Polygonum tinctoria Niram on Atopic Dermatitis in DNCB-Induced Hairless Mice
Han-Na Choo1 · Eun-Hye Park1 · Jong-Kil Jeong2 · Yun-Woong Paek3 · Jeong-Sang Kim1*
1Dept. of Anatomy · 2Dept. of Herbology, College of Korean Medicine, Dongshin University, Jeonnam, Korea
3Department of Physical therapy, Gwangju Health College University, Gwangju, Korea
ABSTRACT
Objectives : The purpose of this study was to investigate the effects of Polygonum tinctoria Niram(PTN) on atopic dermatitis(AD) in hairless mice induced by 2,4-dinitrochlorobenzene(DNCB).
Method : They were divided into four group, Nor, Con, 1X and 5X, for evaluating the change of appearance of skin surface, skin hydration, thickness of epidermis and mast cell numbers during 30 days.
Results : PTN suppressed symptoms of AD in appearance of skin and increased skin hydration for 1X and 5X. In histopathological examination, 1X and 5X significantly reduced the thickness of epidermis and number of mast cell in dermis. These results suggested that the PTN improved the AD-like symptoms of hairless Mice.
Keyword : Polygonum tinctoria Niram, Atopic Dermatitis, mast cell, 2,4-dinitrochlorobenzene(DNCB), hairless mice
Ⅰ. 서 론
26)
아토피 피부염(Atopic Dermatitis, AD)은 영유 아기부터 발병이 시작되어 가려움을 동반하는 만 성재발성 습진질환이다. 호산구 다량 침윤, 비만 세포의 탈과립화에 따른 히스타민 배출, IgE의 증가 등에 따른 면역학적 변화가 심한 피부발진 현상을 야기시킨다. 발병원인은 가족력, 피부감염, 음식섭취, 환경오염, 모유수유 감소, 기후변화 등 으로 알려져 있다1-3).
쪽(Polygonum tinctoria)은 마디풀과의 한해살 이풀이며 식물성 염료로 청색 염색에 이용되며 동양에서 남(藍), 서양에서는 indigo라고 알려져 있다4). 고대시절부터 해충 피해가 적은 장점을 활 용하여 옷감 및 종이 염색과 해독 작용에 탁월한 효과가 있어 약재로도 사용되어졌다. 인디고틴 (Indigotin)과 인디루빈(Indirubin)이 함유되어 있어 항균성과 항암성이 있다고 보고되었으며5), 항암
6,7), 아나필락시 알러지 반응 억제8)와 항 HIV-19), 항염증10) 등의 면역력에 영향을 주어 다양한 질 병 치료 효능이 선행연구를 통해 알려졌다. 이 식 물은 요람(蓼藍), 인도람(印度藍), 대청(大靑), 유 구람(流球藍)으로 분류되어 있어 그 쓰임과 형태 가 매우 다양하다11). 생잎의 즙액으로 직접 염색 하는 방법과 발효염색 또는 화학적 환원염색 방 법으로 쓰이고 있다12).
AD는 환자와 그 주위사람에겐 삶의 질과 가치 를 악화시키는 질환이며, 세계적으로 환자 발생률 이 증가되고 있다. 치료제로서 스테로이드 제제 및 항히스타민제 등이 사용되나 많은 부작용이 발생하고 질병의 완치를 기대하기는 어렵다13). 본 연구에서는 Polygonum tinctoria Niram(PTN)이 AD 동물에서의 치료 효능을 조사함으로써 의약 품, 섬유나 코스메틱 산업 등으로의 개발 가능성 을 확인하고자 하였다.
Ⅱ. 재료 및 방법
1. 쪽 니람
쪽(Polygonum tinctoria) 니람은 나주 천연염 색문화관에서 구입하여 사용하였다.
2. 실험 동물
6주령인 hairless mice를 오리엔트바이오(Orient Co., Iksan, Korea)로부터 구입하여 항아토피 피 부염 실험에 사용하였다. 실험군 분류는 정상군 (Nor), 대조군(Con), 쪽 니람 희석 1%(1X)와 희 석 5%(5X)로 분류하였다. 실험동물은 동신대학교 한의과대학 동물사육실에서 일정한 조건(온도 : 21±2℃, 습도 : 50-60%, 12시간 주기 명/암)하에 서 일반 고형사료(샘타코, 흰쥐 용)와 물을 충분 히 공급하면서 1주 동안 적응시킨 후 실험에 사 용하였다.
3. 아토피질환 유발
Acetone과 olive oil을 4:1의 배합으로 섞은 후 2.5% 2,4-dinitrochlorobenzene(DNCB, Sigma-Aldrich Co., St. Louis, USA)와 0.2% DNCB 유발제를 제 조하였다. 2.5% DNCB는 3일 간격으로 2회 100 ul씩 도포 후 0.2% DNCB를 3일 간격으로 2회 100 uL씩 총 4회 도포하여 아토피질환을 유발시 켰다.
4. 쪽 약물 치료
쪽 약물 치료를 위해 PTN을 증류수에 1%(1X) 와 5%(5X)로 희석하고 냉장 보관하여 사용하였 다. 2주동안 2일에 1회씩 각각 200 ul씩 피부에 도포하여 치료 변화를 관찰하였다. 아토피 질환 유발이 자연 치유됨을 방지하기 위하여 0.2% DNCB 를 Con, 1X, 5X에 주 2회 200 ul씩 도포하였다.
* Corresponding author : Jeong-Sang Kim, PhD. Professor, Dept. of Anatomy, College of Korean Medicine, Dongshin University 185 Gunjaero, Naju, Jeonnam, 520-714, South Korea.
․ Tel : 82-61-330-3512
․ E-mail : [email protected]
∙ Received : May 15, 2014 / Revised : June 4, 2014 / Accepted : June 9, 2014
5. 육안 관찰
흡입마취제(이소플루란)를 사용해 전신마취 후 제모한 mice의 등 부분을 사진 촬영하고 관찰하 였다.
6. 피부 수분함유량
피부 표면의 수분량 측정은 corneomater CM825 (Courage-Khazaka electronic GmbH, Germany) 를 사용하여 측정하였다. 이 기기는 피부표면(예:
각질층)의 수분함유량을 정전부하용량(capacitance) 계측법으로 측정한다. 각질층 하방 깊이 이내 (10-20 um)의 수분함유량을 측정하는 기능(conductor track in electric scatter field)을 갖고 있으며 피부 보 습력의 평가지침으로서 이용되고 있다. 보습도가 높을수록 측정수치가 높아지며, 단위는 arbitrary unit(AU)이다14).
7. 조직의 처리 및 epidermis 두께 측정 피부를 관찰하기 위하여 mice를 도살한 후 각 각 조직을 적출하여 10% 포르말린에 24시간 고 정시킨 다음, 30, 50, 70, 80, 90, 95, 100Ⅰ, 100Ⅱ 와 같이 알코올 농도를 상승시켜 조직 속의 수분을 제거한 후 xylene으로 투명화 과정을 거친 후 paraffin으로 포매하였고, 포매된 조직을 microtome 을 사용하여 5㎛ 두께로 절편하였다. 절편한 조직 을 slide glass 위에 부착시키고 xylene으로 paraffin 을 제거한 다음 100%, 90%, 80% ethanol과 같이 농도가 낮아지는 순으로 5분씩 담구어 함수과정 을 거치게 하였다. 그 조직은 epidermis, dermis, keratinocytes, neutrophils, eosinophil과 그 외 다 른 세포와 부종을 식별 할 수 있는 hematoxylin
& esoin 염색을 한 다음 탈수 후 Canada balsam 으로 봉입하고 카메라 부착 광학현미경(Nikon Eclipse 80i, Tokyo, Japan)으로 200배로 촬영하고 마리당 5구역의 epidermis의 두께를 측정하였다.
8. 피부조직 내 mast cell 수 측정
피부조직의 염증세포의 침윤을 알아보기 위하 여 비만세포를 염색하였다. 조직 절편을 70% alcohol 에 녹인 1% toluidine blue stock solution을 pH
2.3의 1% sodium chloride에 1:9의 비율로 섞어서 사용하였다. Xylene으로 paraffin을 제거한 다음 100%, 90%, 80% ethanol과 같이 농도가 낮아지 는 순으로 5분씩 담궈 함수과정을 거친 후 toluidine blue working solution에 2∼3분간 염색하였다.
그 후 증류수로 3번 수세하고, 50, 70, 80, 90, 95, 100Ⅰ, 100Ⅱ와 같이 알코올 농도를 상승시켜 빠 르게 담갔다가 꺼냈다. 조직 속의 수분을 제거한 후 xylene으로 투명화 과정을 각 2번씩 3분간 씻 었다. 건조 후 canada balsam으로 봉입하였다. 광 학현미경으로 200배에서 마리당 5구역씩 관찰하 여 비만세포 수를 세어 계산하였다.
9. 통계처리
실험 결과는 Mean±SE로 나타냈으며, 대조군과 실험군 사이의 평균 차이를 검정할 때에는 Student's t-test로 검정하여 P값이 0.05 미만일 때 통계적 으로 유의한 차이가 있는 것으로 나타내었다.
Ⅲ. 결 과
1. 육안관찰
Fig. 1은 DNCB 용액으로 아토피 질환을 유발 한 뒤 쪽 니람으로 치료하는 동안의 마우스 등 피부 모습의 사진이다. 정상군을 제외하고 대조군 과 실험군 모두 유발 후 피부에서 심한 홍반, 인 설, 가피, 태선화 염증, 출혈, 피부건조 등의 증상 이 나타남으로 유발이 잘 되었음을 확인할 수 있 었다. 시간이 지남에 따라 가피는 제거되었지만 아토피로 인한 홍반과 상처는 남아있었다. 실험군 에 2일 간격으로 2주 동안 쪽 니람을 등 부위에 도포하고 변화를 관찰하였다. 그 결과, 약물 치료 한 실험군의 아토피 증상이 점차 완화되었고 피 부 상태도 매끄러워졌으며 상처나 홍반이 치료됨 을 알 수 있었다. 실험 종료 시점에서 대조군의 아토피 증상 유지와 비교하였을 때 쪽 니람은 아 토피 치료에 효과가 있는 것으로 육안적으로 관 찰되었고, 농도의 차이에 따라서도 5X의 높은 농
0 week 1 week 2 week 3 week 4 week
Nor
Con
1X
5X
Figure 1. Effect of Polygonum tinctoria niram on clinical skin features of DNCB-applied hairless mice.
Normal, No treated group; Control, DNCB only group; 1X, DNCB+1% PTN group; 5X, DNCB+5% PTN group.
Figure 2. Changes of the mean value of the skin hydration in dosal skin of DNCB-applied hairless mice.
Normal, No treated group; Control, DNCB only group; 1X, DNCB+1% PTN group; 5X, DNCB+5% PTN group.
도의 치료가 효과가 있음을 확인하였다.
2. 수분함유량의 변화
Hairless mice의 등 외피 수분 함유량의 변화를 실험 기간 동안 corneometer로 측정하였다(Fig.
2). 유발하기 전엔 모든 군에서 비슷한 수분 함유 량을 나타내었으나 대조군과 실험군은 유발이 시 작되면서부터 급격한 감소를 보였다. PTN을 도 포한 후 실험군은 수분 함유량이 점차 증가되었 음을 확인하였다. 정상군은 27.2±5.9 AU로 실험 기간 동안 수치의 큰 변화가 없었으며, 대조군은 점차 감소되어 9.9±2.1 AU로 가장 낮은 값을 나 타내었다. 1X와 5X는 각각 11.4±2.5 AU와 14.5±2.4 AU로 유발시기 때보다 증가함을 보였다. 이와 같 은 결과로 PTN이 아토피 질환이 있는 피부 표면 의 수분함유량의 변화에 영향을 주었으며, PTN의 농도가 증가함에 따라 더 큰 치료 효과를 확인 할 수 있었다.
3. Epidermis의 육안적 관찰
Hairless mice의 등 피부 조직을 H&E 염색하 여 피부 표면 변화를 관찰한 결과, 정상군에서는 epidermis의 두께가 얇고 세포 배열의 균일함을 확인할 수 있었으며 DNCB 유발 후 약물 무처리
Figure 3. Histology of dosal skin lesions in DNCB-applied hairless mice.
Normal(A), No treated group; Control(B), DNCB only group; 1X(C), DNCB+1% PTN group; 5X(D), DNCB+5% PTN group. Ep, epidermis; D, dermis. Hematoxylin & Eosin staining, Original magnification ×200.
Figure 4. Thickness of epidermis in dosal skin of DNCB-applied hairless mice.
Normal, No treated group; Control, DNCB only group; 1X, DNCB+1% PTN group; 5X, DNCB+5% PTN group. Significant differences were compared with normal at ###p＜0.001 or control ＊**p＜0.001. All value are mean±S.E.(n=5).
구인 대조군에서는 epidermis의 두께가 확장됨이 나타났다(Fig. 3-A, B). 실험군인 1X와 5X는 대 조군보다 얇은 두께의 epidermis가 관찰되었다 (Fig. 3-C, D).
4. Epidermis의 두께 변화
Hairless mice의 등 피부 조직을 H&E 염색하 고 눈금측정이 가능한 현미경을 사용하여 epidermis 의 두께를 측정하였다. Fig. 4에서 정상군(32.00±2.00 um)의 두께가 가장 얇게, 대조군(273.00±23.57 um) 의 두께는 가장 두껍게 측정되었다. 실험군인 1X(89.33±8.19 um)은 대조군에 비하여 유의성 있 는 감소를 나타났으며, 5X(42.67±3.45 um)도 대조 군에 비하여 유의성 있게 감소하였다(Fig. 4-C, D).
Figure 5. Effect of Polygonum tinctoria niram on mast cell infiltration in dosal skin of DNCB-applied hairless mice. Normal, No treated group; Control, DNCB only group; 1X, DNCB+1% PTN group; 5X, DNCB+5% PTN group. Arrows indicate mast cells. Toluidine blue staining, Original magnification ×200.
Figure 6. Number of mast cells in dermis of DNCB- applied hairless mice.
Normal; No treated group, Control; DNCB only group, 1X;
DNCB+1% PTN group, 5X; DNCB+5% PTN group. Significant differences were compared with normal at ###p＜0.001 or control ＊*p＜0.01; ＊**p＜0.001. All value are mean±S.E.
(n=5).
5. 피부 조직 내 mast cell의 변화 관찰 AD인 mice의 dermis의 비만세포를 관찰하기 위해 toluidine blue staining을 실시하였다. 정상 군에서는 비만세포가 거의 보이지 않았으며(Fig.
5-A), 대조군에서는 비만세포가 다수로 발견되었 고(Fig. 5-B) 정상군에 비해 뚜렷한 증가를 나타 내 AD의 유발이 정상적으로 이루어짐을 확인할 수 있었다. 1X와 5X는 대조군보다 비만세포의 감 소됨이 확인되었다(Fig. 5-C, D).
6. Mast cell 수의 변화
Hairless mice의 등 피부 조직을 toluidine blue staining하고 dermis에 있는 비만세포 수를 측정 하였다. 정상군(25.70±1.96)이 가장 낮은 비만세포 수를 나타냈고, 대조군(61.80±3.50)이 가장 높은 수 를 나타내었다. 실험군인 1X(44.10±3.14)와 5X(32.40±
2.64)는 대조군에 비하여 유의성 있게 감소하였다 (Fig. 6).
Ⅳ. 고 찰
아토피 피부염(Atopic Dermatitis)은 발진, 염 증, 가려움증, 피부건조 등의 증상이 나타나며, 유 전적, 면역학적, 환경적, 피부 기능 저하 등의 다 양한 요인으로 발생되는 피부질환이다15). AD는 전 세계적으로 꾸준히 증가하는 것으로 보고되었 고, 30년 전보다 현재 환자가 약 3배정도 증가되 었다16). 인구의 약 1%가 AD를 가지고 있으며, 유 아의 5-10%가 질환으로 치료를 받고 있어 국가 의 보건 문제로서 해결방안이 시급하다17). 현재까 지 AD의 원인과 발병기전은 밝혀지지 않았을 뿐 만 아니라 정확한 진단방법과 결정적인 방법이 없기 때문에 진단과 치료가 매우 어렵고18), 국소 부신피질호르몬제, 항히스타민 및 항생제 등의 약 물에 의존적인 일시적 치료만 행해지고 있다19). 이러한 약물은 피부 손상, 말초혈관확장, 일광에 대한 과민성 등의 많은 부작용이 야기되며, 항생 제 복용과 레이저 치료 등과 같은 계속적인 치료 에 대한 경제적 및 정신적 부담이 환자들에게 극 심한 스트레스를 주고 있다.
본 연구에 사용된 쪽은 순수한 한글이름으로 조선시대부터 불리었고, 쪽의 사용은 그보다 훨씬 전부터 염료로서 사용되었다고 기록되었다. 일반 적으로 쪽잎의 부분을 추출하여 청색을 나타내는 데 사용되는 염재이다20). 국내에서는 전남 나주를 중심으로 재배중이며, 가장 널리 알려진 침전 염 법이 염색의 전통방법이다. 쪽잎을 항아리에 넣고 3일 정도 방치함으로 색소를 용출한 뒤에 조개 또는 굴 껍질을 구워 만든 석회가루를 첨가하여 공기중에서 교반하고 얻어진 청색의 침전물인 니람 을 발효해서 섬유를 염색할 때 이용되고 있다21).
따라서 본 연구에서는 AD의 치료에 효과가 있 을 것으로 제시한 PTN을 질환이 유발된 생쥐의 피부에 도포하여 육안과 조직학적 등으로 관찰하 고 분석하였다.
Hairless mice에 DNCB 용액을 제조하여 일정 기간 동안 도포하고 유발을 확인한 후, 실험군에 PTN을 도포하여 치료의 효능을 육안으로 확인한
결과, AD의 증상이 점차 개선되었고, 피부상태도 상처와 홍반이 감소됨을 관찰하였다. 수분함유량 을 사육 기간 동안 측정한 결과, 실험군의 PTN 도포가 실험종료 시기에 대조군보다 높은 수분함 유량을 나타내어 AD의 치료 효능에 도움이 되는 것으로 사료된다.
AD가 발병되면 T세포 매개성 염증세포의 침 윤에 따라 피부 부종 및 조직의 비후 현상이 발 생하여 피부의 epidermis 두께가 증가한다22,23). 신 선초 추출물22), 은행잎15), 아토피 크림과 자운고24), 탁리소독음 합 황련해독탕25), 편백잎 추출물26) 등 의 연구를 살펴보면 대조군보다 약물이나 치료를 실시한 실험군의 epidermis의 두께가 유의적으로 감소함이 확인되어 본 연구의 결과와 일치함을 나타내었다. PTN의 피부 도포가 epidermis의 두 께 감소 효과와 관련이 있는 것으로 보아 AD 치 료에 대한 효과를 기대할 수 있다.
비만 세포(mast cell)는 알러지 질환 및 염증질 환의 매개 물질을 생성하는 주요 세포이며27), 즉 시형 과민성 반응을 촉진하는 히스타민 분비에 중요한 역할을 한다28). 이러한 비만 세포를 관찰 하기 위해 설치류와 사람의 결합조직의 관찰 가 능한 toluidine blue 염색을 실시하여, 이염색성 (metachromatic staining)에 반응한 세포를 관찰 하였다29). Zheng et al.30)와 Kim et al.31) 등의 연 구결과에서 비만세포 수가 감소하는 것은 질병 치료에 효과가 있는 것이라고 보고하였다. 대조군 의 비만세포수 증가에 따라 AD의 유발이 정상적 으로 진행됨이 조사되었고, PTN을 도포한 실험 군에 대한 비만세포 수의 감소에 따라 치료 가능 성을 확인하였으며, AD의 증상 억제에 도움을 줄 것으로 사료된다.
이상의 결과로 PTN의 도포는 AD가 유발된 피부의 증상완화, 항염증, 급성 과민반응이 가시 적으로 효과를 나타내었다. 따라서 AD의 PTN 치료제 개발에 유효하게 활용할 수 있을 것으로 사료되며, 향후 다양한 효능 차이, 임상 실험 및 세포 독성의 연구들이 필요할 것으로 생각된다.
Ⅴ. 결 과
PTN이 DNCB로 유도된 hairless mice의 AD 에 대한 효능을 조사하였다. 30일 동안 Nor, Con, 1X와 5X의 4개군으로 나누어 육안관찰, 수분함유 량, epidermis 두께와 비만 세포 수의 변화를 조 사하였다.
1. PTN은 육안관찰에서 AD 증상을 억제시켰고, 수분함유량은 1X와 5X에서 대조군보다 증가됨 이 나타났다.
2. 조직학적 관찰 결과, epidermis의 두께와 비만 세포의 수가 유의적으로 감소되었다.
이상의 결과로 PTN은 hairless mice의 AD 증 상에 대하여 치료 효과가 있는 것으로 판단된다.
참 고 문 헌
1. Kim TG, Nho HJ, JSH, Kim KB, Kim DU.
Anti-oxidation and anti-atopic dermatitis effect of herbal wood vinegar. Korean Chem. Eng.
Res. 2010;48(6):690-694.
2. Jang SN, Kim KL, Yun MY, Kang SM. The effect of ɤ-PGA on NC/Nga Mice, a mouse model for mite antigen-induced atopic dermatitis.
Kor. J. Microbiol. Biotechnol. 2009;37(4):53-63.
3. Kwon TK. Lim KB, Kim JC. The effect of anti-atopic cosmetic in hairless mice. Appl.
Chem. Eng. 2011;22(1):91-97.
4. Park DN, Beak SR, Jeon DW. A study on the effect of the changes of dyeing conditions on the dyeability of silk fabrics dyed with natural Polygonum tinctoria. Journal of Fashion business. 2011;15(2):120-130.
5. Lee EJ. Study on the color changes according to fermentation dyeing of indigo used lactic acid fermented milk. Department of Clothing
and Textiles. The Graduate School Ehwa Womans University. 2012.
6. Jang HG, Heo BG, Park YS, Namiesnik J, Barasch D, Katrich E, Vearasilp K, Trakhtenberg S, Gorinstein S. Chemical composition, antioxidant and anticancer effects of the seeds and leaves of indigo (Polygonum tinctoria Ait.) plant.
Appl. Biochem. Biotechnol. 2012;167(7):1986- 2004.
7. Iwaki K, Kurimoto M. Cancer preventive effects of the indigo plant, Polygonum tinctorium.
Recent Research Developments in Cancer.
2002;4:429-437.
8. Kim HM, Hong DR, Lee EH. Inhibition of mast cell-dependent anaphylactic reactions by the pigment of Polygonum tinctorium (Chung- Dae) in rats. Gen. Pharmacol. 1998;31(3):361- 365.
9. Zhong Y, Yoshinaka Y, Takeda T, Shimizu N, Yoshizaki S, Inagaki Y. Highly potent anti-HIV-1 activity isolated from fermented
Polygonum tinctorium Aiton. Antiviral Research.
2005;66:119-128.
10. Lin YK, Leu YL, Huang TH, Wu YH, Chung PJ, Supang JH, Hwang TL. Anti-inflammatory effects of the extract of indigo naturalis in human neutrophils. J. Ethnopharmacol. 2009;
125(1):51-58.
11. Kim MK. A study on natural Polygonum
tinctoria dyeing of sustainable eco-friendly
cellulose fabric and its application. Department of Clothing and Textiles. The Graduate School Ehwa Womans University. 2012.12. Chung IM, Kim HB, Sung GB, Kim YD, Hong IP. Traditional dyeing of natural indigo on the silk fabric. Korean J Seric. Sci.
2005;47(1):31-35.
13. Kim GE, Kim JH, Hong SK, Kim TG, Kim DU. Anti-acne and anti-atopic dermatitis effect of plant extracts including Eucommia
ulmoides Oliv and Phellodendron amurense.
Korean Chem. Eng. Res. 2010;48(6):700-703.
14. Choi EY. Comparison of state of skin surface using skin instrumental measurements. Korean J. of Aesthetic Society. 2006;4(2):1-10.
15. Kwon HY. The anti-atopic effect on flavonol content from Ginkgo biloba leaves on NC/Nga murine model with mast cell and DNCB- induced atopy. Dept. of Beauty and Health Care. Graduate School of Daejeon University, 2013.
16. Yu JS. The effects of Lonicerae Flos, Forsythiae Fluctus and hwangryunhaedok decoration pharmacopuncture on atopic dermatitis in NC/Nga Mice. Dept. of Oriental Medicine.
Graduate School of Woosuk University. 2012.
17. Joo HA, Bae HJ, Park MC, Beak SC, Hong SH, Yang HJ, Cho HW, Jung SY, Cho JH, Hwang CY. A clinical study for the effect of cosmetic cream containing samwhangjegamibang extracts on atopic dermatitis patients. The Journal of Korean Oriental Medicine Ophthalmology and Otolaryngology and Dermatology. 2012;25(3):
129-149.
18. Yun HJ, Ko WS. Clinical study of atopic dermatitis; the classification of oriental medical clinical type and treatment. J Korean Oriental Med. 2001;22(2):10-21.
19. Cho JM, Hong EJ, Seo HS. Reviewing research on laser therapy of atopic dermatitis. The Journal of Korean Oriental Medicine Ophthalmology and Otolaryngology and Dermatology. 2013;26(1):
82-96.
20. Woo HR. Physical specifications and functionality regarding fabrixs natural indigo dyeing in Hanji fabrics. Dept. of Clothing and Textiles.
Graduate School of Kunkuk University. 2010.
21. Jang SE, Lee NK, Lee YR, Choi MS, Jeong YS. Isolation and characterization of Comamonase sp. and Microbacterium sp. from blue sediment
dye of Polygonum tinctoria Niram. Korean Society for Biotechnology and Bioengineering Journal. 2013;28(1):60-64.
22. Kim MA, Son HU, Nam DY, Cha YS, Shin YK, Choi YH, Lee SH. Inhibitory effect of
Angelica keiskei extract in an atopic dermatitis
animal model. Korean J Food Preserv. 2012;19(5):792-798.
23. Sasakawa T, Hiqashi Y, Sakuma S, Hirayama Y, Sasakawa Y, Ohkubo Y, Goto T, Matsumoto M, Matsuda H. Atopic dermatitis-like skin lesions induced by topical application of mite antigens in NC/Nga mice. Int Arch Allergy Immunol. 2001;126(3):239-247.
24. Yeo EJ, Han JK, Kim YH. Effects of atopy cream-combined with jawoongo ointment on the development of atopic dermatitis-like skin lesions in NC/Nga mouse. J Korean Oriental Pediatrics. 2009;23(1):37-72.
25. Weon YH, Hwang CY, Lim KS, Kim JH, Ko SG, Lee BK, Lee DH, Kim NK. Effect of taklisodok-um and hwangryunhaedok-tang on atopic dermatitis. The Journal of Korean Oriental Medicine Ophthalmology and Otolaryngology and Dermatology. 2011;24(1):121-141.
26. Cho SE. Anti-oxidative, anti-inflammatory and immunomodulatory effects of Chamaecyparis
obtusa leaves extracts for atopic dermatitis.
Department of Bioendineering. Graduate School of Konkuk University. 2012.
27. Ki HP, Jang SI, You YG. Ameliorative effects of Hwangnyeonhaedok-tang on atopic dermattitis.
Herbal Formula Science. 2013;21(1):80-90.
28. Kim KY, Lee JH, Kim YJ, Choi SY, Kim TH, Lyu YS, Kang HW. Anti-allergic effects of shcheongyoun-tang on RBL-2H3 mast cell and mice-mediated allergy model. Korean J.
Oriental Physiology and Pathology. 2007;21(5):
1260-1270.
29. Lee YH, Kim KT, Han UH, Kim HT, Park
BG, Lee MS, Song CH: Histochemical Characteristics and Ultrastructure of Mast Cells in Pheasant (Phasianus colchicus). The Korean J. Anat. 2006;39(5):367-374.
30. Zheng H, Jeong YJ, Song JM, Ji GE: Oral administration of ginsenoside Rh1 inhibits the development of atopic dermatitis-like skin lesions induced by oxazolone in hairless mice.
International Immunophamacology 11(4) : 511-
518, 2011.
31. Kim NR, Bae KB, Kim MO, Yu DH, Kim HJ, Yuh HS, Ji YR, Park SJ, Kim S, Son KH, Park SJ, Yoon DH, Lee DS, Lee SG, Lee HS, Kim TY, Ryoo ZY. Overexpession of cathepsin S induces chronic atopic dermatitis in mice. Journal of Investigative Dermatology. 2012;132:1169-1176.
