챔휩愚者에 서 의 VDRL 檢훌와 TPHA[檢훌에 對한 比較

대힌임싱병리사회지 : κ .l 극 κ -후 •. H~8

챔휩愚者에 서 의 VDRL 檢훌와 TPHA[檢훌에 對한 比較

옮g

全南大學校 醫科大學 附屬病院 臨*病뀔￡科

E월 -:J•

~

績 論

.‘

梅毒園(Treponema pallidum) 은 Schaudin괴_ Hoffm-

ann¹) 에 依해 처 음으로 報告된 tJ 來 Wassermann²) 이 補體結合反應을 일으키는 抗原을 發見한 以後 Pangb- orn³) 을 寫始하여 많은 學者들에 依해 t牛心節으로부터 臨質系抗原 (Lipoidal Antigen) 을 抽出， 精製， 化學物 質의 센加 또는 合成等으로 抗原의 安定優 그리 고 抗 原{生 抗體反應의 표確度블 높여 왔다.

그러나 이러한 眼質系抗原에 反應하는 抗體는 梅毒 園어1 對해 非特異的이 며 레 아진抗體 (Reagin Antibody, Diphosphatidyl glycerol) 라 하고 免俊化學的 分類에 있 어 사 主로 IgMòl 나 IgG, 그리 고 IgA 等으로 되 여 었 다고 한다 4 ， 5).

梅毒園에 感樂되 었을 때 前述한 reagin 抗體블 除外한 血淸에 서 梅毒園에 特異하게 反應하는 梅毒園 特異抗 體가 血淸內에 存在한다는 것 이 Nelson等 6)에 依해 처 음」즈로 밝혀졌다. 그 後 梅毒園 自體가 가지고 있는 抗原性의 昭究가 많은 學者들에 依해 進行되 어 왔다.

그리 하여 梅毒園으로 부터 deoxycholate, polysaccha- ride, protein과 前述한 reagin 抗體等 梅毒園으로 因해 塵出되는 抗體가 血淸內에 여러가지가 었으므로 檢흉 種類도 多樣하게 소개되고 있다 7， 8， 1 4:) • 그中 널리 使用 되고 있는 檢훌方法으로는 reagin抗體를 測定하는 VD RL Slide Flocculation test로써 이 方法은 梅毒庫、者가 아닌 다른 病뾰에도 陽性反應을 나타내는 生物化學的 疑陽性反應 (Biologicalfalse positive) 가 많다. 그리하 여 著者는 非特異的인 reagin 抗體에 生物化學的 疑陽 性反應이 높은 顆病옳、者를 對象으로 하여 梅毒園에 特 異的인 Treponema pallidum Hemagglutination Antigen test(以下 TPHA로 略함)와 reagin 抗體에 對한 VDRL 反應을 比較 檢討할 目的으로 本實驗을 試行하였다.

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基

寶驗材料

1976年 1 月r:4 s 부터 1977年 2月 29 터까지 1年 2 個月 間훌全南醫大附屬病院 皮 I賣科와 全南 高興컵ß 塵~꾀 4、塵 島病院에 서 懶病￡로 確該된 盧者휠 148名을i對象으로 하여 血被을 採取하여 分離된 血淸을 使用하였다.

VDRL檢효는: Hyland" 會社製X抗原을 使用하었고 TP HA 檢효는웅富士職器製藥í*式會社에서:製造된 TPHA

kit를 使用하였다.

TPHA kit 內容은 다음과 같이 區分되었다.

label B_ 吸J& 種釋被

label C. 感作 면 양 i}ft 血球

label D. 未感作 면 양 未血球 陽性對照、 血淸

Droper.

血球 응칩 板(hem-aggutination tray).

方法 및 實驗成績

A) VDRL 檢흉

VDRL 血淸檢호를 寶施한 結果 懶愚者~148例中 弱陽

性(Weakly-reactive) 이 17 名 .k 꿇陽性 (Strong-reactive) 이 6 名， 陰性 (Non-reactive) 이 125 名으로(23 名의 陽~j 中 弱陽性이 가창 많이 나타냈다(表 -1).

表 1 懶」愚者 148 名에 對한~VDRL~그檢훌 VDl표反應度 I 11ì‘

그>---

I

|

l

例數 및

I I

I

愚 者 數 I

I

I

%

I 파% I

I

定性檢흉에서 陽性反應을 보언것은 定量檢흉를 實雄 하였으며 그 成績은 表 2에서 記載된 것과 같다(表 2).

表 2 VDRL 陽性愚者中 VDRL 定量 檢흉

잃싫騙度/\擺/1

數!

%

1

1

I

I

2. 1: 80으로 橋釋된 血淸을 0.5ml썩 血球응집틀 (hemagglutination tray) 에 表 3 과 같이 2구멍 에 넣 는 다.

3. 感作된 면 양未血球 O. 05ml (2drops) 를 1 : 80 으로 橋釋된 愚강5 며1 淸 hemagglutination chamber(tray) 上에 서 떨어뜨린다.

4. 未感作펀 면 양末血球 0.05ml(2drops) 를 1 : 80 으 여 기 서 定量檢흉에 서 도 弱陽性이 23 名中 17 名으로 로 橋釋펀 愚者lfI1.淸 (hemagglutination chamber (tray) 74% 를 차지하여 가장 많이 나타났고 1 : 16은 但 1 名 上에서 떨어뜨린다(對照實驗) ^.

뿐이었다 5. 血球응집닫의 測面을 차례로 조섬스렵게 두둘겨

B) VDRL 抗原에 依한 抗體 吸收 實驗 면양 %lfn‘球와 標釋된 血淸-이 잘 混合되게 한다.

TPHA 檢좁를 實施하기 前에 VDRL 抗原으로 reagin 抗體를 吸收시 켜 reagin 抗體와 TPHA에 對한 抗體가 다르다는 것을 證明하기 寫한 텀的으로 本實驗에서 實 施한 VDRL 定量檢호어l 서 L 16 으로 나타난 血淸을 分 離하여 血淸 0.5ml에 VDRL 좋L 빼波 1. 5ml플 遠心試驗 管에 넣 고 손으로 數次 混合시 킨 다음 1550 rpm에 15 分間 遠心分離시 킨 후 上淸波으로 VDRL 定性檢흉를 寶雄한 結果 彈陽性 反應을 나타냈다.

前과 同一한 血淸 0.5ml와 VDRL와빼滾 3.5ml블 混 合하여 1:8로 풍L빼被에 橋釋된 血淸을 遠心試驗管에 넣고 3000 rpm으로 10分間 遠心分離後 VDRL 定性， 定 量檢養에서 陰性 反應을 나타냈다.

對照、實驗으로 0.9% 食題水로 1 : 8이 되게 隔釋시킨 血淸을 VDRL 定性檢훌를 實施하였 던 바 彈陽性反應、

을 나타냈다. 여기서 VDRL 좋L빼波에 吸收된 上淸被 을 다시 VDRL Antigen에 反應하지 않은 것을 確認하 였던 點으로 보아 reagin 抗體가 다 吸收되었다고 思

料된다.

C) TPHA 定性檢흉 (Screening test 1 : 80)

1. 작은 試驗管에 吸收輪釋쨌 (Absorbing diluent) 로 血淸을 表 3. 과 같이 精釋하여 30分 동안 室溫 (25=1=

5⁰C) 에 放置하여 室內溫度와 같게 한다.

表 3 TPHA 試驗輪釋 倍數

試 ^{驗 管} 1. 2.

橋釋된 血淸 1 : 20 1 : 80

血 淸 (ml) 0.05 0.4

吸收 協釋波 (ml) 0.95 ^1.2 血球 응집틀 (ml) 0.5 0.5

感作후血球 - 2drops I

未感作후血球 2drops - I

mix 시킨 후 흔들리지 않도록 놓아둔다.

6. 以上의 造作이 끝난後 室溫에 3-4 時間 放置하여 -次 判讀한다.

7. 最終 判讀은 18時間後에 한다 (表 4.).

表 4 TPHA 判讀 基準

判 議 基 準 l ^{判讀 I!結果}

血球가 단추 模樣으로 나타나 가운데 I -

I

I,

. - - i

연스렵게 생긴 外顧을 만든다.

I

血球의 圓이 對照보다 크고 두께가

I + I

앓고 거칠은 沈願物이 흩어져 있다.

I I 血球가 고른 體같은 模樣을 이룬다 1++1 陽性

血球 沈織이 오목한 막(願)模樣을 形 1++ 十 I

成한다 I

圓의 둘레와 크기가 對照 보다 약간 I I \

크고 두께도 약간 두껍고 圖 周圍가 l =t再檢쫓i

조금 沈澈物。1 있다.

I \

VDRL 陽뾰월、者 23 名을 前述한 方法에 依해 實施하

여 判讀基準에 따라 TPHA에 서 9 名이 陽{生으로 나다 나 39.1% 를 보였고 14 名이 陰性으로 나타나서 60.9%

로 쫓 5와 같이 나타났다(表 5).

表 5. VDRL 陽性 爾恩者애 對한 TPHA 檢효

l획꿇뿔灣/T웰f | ^{?f띔 ! T챈f ! 삼計}

弱 陽 住 1

I

1_1_7_

l:=-_1-뜨_1_0 I

다

l:4

I

I

1 : 16 ¹ 0 ^I 1 ^I 0 : 1

- 4 8 -

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1 : 8로 VDRL 와빼被에 吸收시켜 VDRL에 陰性으로 Antibody-absorption test CFTA-abs) 를 開發하였다.

나다난 上、淸被血淸과 1 : 8로 食훌훌水로 輪釋 VDRL에 Tomizawa 等10)은 TP-N 園緣로 만들어 진 抗原을 면 陽性反魔을 나타낸 對照血淸으로 TPHA를 實雄한 바 양의 末血球에 吸著시켜 梅毒血淸內의 病原뾰 TP휩에

둘다 TPHA C++) 陽性 反應플 나타냈다. 對한 抗體와 特異하게 反應하여 末血球 擬集反應을 일

으키 는 鏡敏한 Treponema pallidum Hemagglutination

考 按 抗原을 만들어 냈다. 따라서 梅毒뽑、者 血淸內에는 이

抗原과 特뚫하게 反應하는 抗體가 았 을 것 이 며 梅毒血 梅毒檢흉 種類가 많은 것 처 럼 梅毒園으로 因하여 生 、淸檢옳 結果도 FTA abs, 또는 TPI (Treponema pal1idum 기는 抗原과 여기에 對하여 起因하는 抗짧도 여러 種 Immo biliza tion: TPI) 나 같은 正確度를 나다낸 것으로 類가 있겠으나 크게 2가지로 나누어 보면 젠毒園 自體 알려졌다 10， 13， 14， 15) 이러한 特뿔↑生을 갖은 TPHA 抗原 에 含有된 抗原性 物質로 因하여 起因하는 特異뾰 抗 을 가지고 本實驗에 았어서 VDRL 血淸檢좁에서 生物 體와 梅毒園에 依해 生體內의 어 떤 組熾어l 病的變化를 學的 疑陽↑主 01 많은 懶病愚者 血淸으로 VDRL에 서 陽 招來하여 그 組織에 含有된 物質。1 抗原↑生으로 作用하

여 抗體를 잖生하는 非特異住 抗體로 大別할 수 았다.

Stone 等 11) 은 假說로서 주장하기를 梅毒園은 顯著하 게 血씁의 擔傷을 招來함으로서 reagin 抗體形成은 血 管鎭傷이1 對한 特異한 것이라 하였고 이 抗體는 血管 塵周圍에 發生한 憐R릅質物을 急히 除去하기 寫한 生體 의 增進된 씻llE뾰 反應의 結果라고 한다. 그리 고 血管 이 擔傷되 었을 때 血管뚫의 憐 R읍質아 j司所淸編機轉으 로부터 除去되는 것보다 더 빨리 遊離될 것 같으면 이 遊離된 憐R읍質은 抗原으로 行勢한다고 주장하고 있다.

이러한 事實로 미루어 보아 어떤 흉愚、이든지 血숍휠훌에 病變을 일으켜 憐R읍質이 血/짤블좋 細 B힘外에서 增加한다 면 이 에 對해 reagin 抗體가 形成될 수 있 으므로 梅毒 血淸檢훌時 reagin 抗體와 反應할 수 있는 抗原을 使用 하여 눴호할 때 는 陽性反應을 나타낼 수 있 다. 梅毒園 에 依하지 않은 다른 病뾰어l 依해 上記와 같은 reagin 抗原에 陽性反應이 나타날 때 는 이 를 所謂 生物化學的 疑陽↑生反應 (Biological false positive: BFP) 이 라 한다.

또한 梅毒愚者의 血淸中에 옳生된 抗體로서 憐 B듭質物 質로 되어 있는 抗原에 反應하는 reagin 抗體:는 陽原 f찾‘뽑， 慢f生씻llE*愚， 組織 또는 血管에 憐順質↑生 變化 를 일으키는 族愚等에서 形成될 수 있으며 生物學的 疑陽뾰 反應이 出現할 수 있다고 한다.

梅毒園에 對힌- 特異한 抗體가 있 다는 것 을 Nelson⁶⁾ 等이 確認한 以來 많은 學者들에 依해 發表되 었고 Hunter等 12) 은 비 록 TP園에 依해 逢出된 抗體엘지 라도 園練에 따라 嚴密히 말해 서 相違함으로 病)Jj(性 TP園 에 依해 춤出된 抗體에 만 選擇的으로 反應시 켜 血淸 檢호의 正確뾰을 期하기 德해 血淸을 非病原性 TP園 인 Treponema pallidum-Reiter strain: TP-R의 抗原으 로 血淸內의 抗體를 吸收 處理한 後病院性 TP園緣언 Nicol’s strain(Treponema pallidum-Nicol’s shain: TP- N) 의 抗原으로 反應을 시 켜 Fluorescent Treponemal

性으로 反應한 23例를 TPHA 檢효에서는 겨우 9例가 陽性으로 나타났다. 또한 VDRL 定뿔檢호애 서 1 : 16 으 로 反應한 血淸을 VDRL 抗原으로 reagin을 吸收시 킨 후 TPHA를 實施하였 던 바 陽性反應을 보여 reagin 抗

體와 TPHA 抗體가 다르다는 것을 本實驗으로 證明이

되었으며 reagin 抗體가 存在하여도 TPHA 反應、과는 何等의 影響을 받지 않으며 TPHA 抗體가 存在하여 도

VDRL 反應에는 何等의 影響이 없음을 보였다고 할수

있겠다.

結 論

1976年 l 月 4 日 부터 1977年 2 月 28 日 까지 l 年 2 個月 間 全南醫大附屬病院 皮 I賣科와 全南 高興那 塵洞 小塵 島 病院에 서 懶病으로 確該된 뽕、者 148例에 서 VDRL 檢훌와 TPHA를 比較 檢홀하여 아래 와 같은 結果를 얻었다.

1. 懶愚者 148 例中 VDRL Slide test에 서 弱陽·뾰 17 例 彈陽性 6例로 都合 23例가 陽性으로 15.5% 를 나다 냈다.

2. VDRL 弱陽性 17例中 6例가 TPHA에 陽住反應을 나타냈고 彈陽性 6例中 3例가 TPHA에 없d1: R應을 나

타내 VDRL 檢잖에셔 弱陽性이나 彈陽↑生에 상관 없이

TPHA에 反應했다.

3. VDRL 陽性 23 例中에서 TPHA는 9例가 !썽!生으르 나타나 梅毒檢훌에 對해 60.9% 가 疑陽 f生으로 나타났 다.

4. Reagin 抗體를 VDRL 抗原으로 吸收시 킨 上淸波

血淸이 TPHA 檢흉에 陽性으로 反應함을 通하여

reagen 抗體와 TPHA에 對한 抗體가 다르다는 것을

알았다.

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