Vol. 12, No. 2, June, 2005
류마티스 관절염에서 염증 관여 유전자의 다형성 연구:
대식 세포 유주 억제 인자(MIF)
충남대학교 의과대학 내과학교실, 서울특별시립동부병원 방사선과*, 서울대학교 의과대학 내과학교실**
송주경․신현영․이유선․황재희․권양숙*․정연주*․이윤종**․강성욱
= Abstract =
Association between Macrophage Migration Inhibitory Factor Gene Polymorphism and Rheumatoid Arthritis
Ju Kyoung Song, M.D., Hyun Young Shin, M.D., You Sun Lee, M.D., Jae Hee Hwang, M.D., Yang Sook Kwon, M.D.*, Yeon Ju Jeong, M.D.*,
Yun Jong Lee, M.D.**, Seong Wook Kang, M.D.
Department of Internal Medicine, Chungnam National University College of Medicine, Daejeon, Department of Radiology, Seoul Municipal Dong-bu Hospital*, Seoul, Department
of Internal Medicine, Seoul National University Bundang Hospital**, Seongnam, Korea
Objective: Rheumatoid arthritis (RA) is characterized by the interaction of multiple mediators, especially cytokines. Macrophage migration inhibitory factor (MIF) is a proinflammatory cytokine and has been shown to be involved in RA. This study explored the association of the MIF gene polymorphism with RA in Korean.
Methods: 114 patients with RA, and 114 age and gender matched healthy controls were studied. Patients and controls were genotyped for a single nucleotide polymorphism (SNP) in the 5’-flanking region at position -173 of the MIF gene.
Results: No significant differences in MIF gene polymorphism were observed in RA compared to healthy controls. No association with disease severity was detected for the MIF gene polymorphism.
Conclusion: MIF -173 G/C polymorphism did not appear to be associated with genetic susceptibility and disease severity in Korean RA patients.
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＜접수일：2005년 4월 27일, 심사통과일：2005년 5월 25일＞
※통신저자：강 성 욱
대전시 중구 대사동 640번지 충남대학교병원 내과
Tel：042) 259-8018, Fax：042) 257-5753, E-mail：[email protected] 본 연구는 2003년 충남대학교 자체 연구비 지원에 의하여 이루어진 것임.
서 론
류마티스 관절염은 다발성 관절의 염증 및 관절의 파괴를 특징으로 하는 만성 염증성 질환이다. 많은 연구에도 불구하고 병인은 확실히 알려져 있지 않 다. 아마도 환경적인 요인, 유전적인 요인, 또는 감 염 등이 관련되어 있을 것으로 추정하고 있다.
이 중 유전적인 요인으로 HLA-DRB1이 질병의 감 수성 및 관절염의 중증을 예측하는 인자임이 알려져 있고 이 외에도 다른 유전자들이 류마티스 관절염과 연관이 있을 것으로 생각하고 있으며 이에 대해 많 은 연구가 진행 중이다1).
이 외에도 류마티스 관절염의 발병에는 면역 및 염증 반응이 밀접하게 관련되어 있는데 종양 억제 인자(TNF) 및 인터루킨-1 등이 알려져 있고 최근 대 두되는 여러 치료들도 이들의 작용을 억제함으로써 좋은 결과를 얻고 있다.
그러나 현재까지 알려져 있는 시토카인을 대상으 로 하는 치료에도 많은 환자들이 반응이 없거나 불 충분한 치료 효과를 보이고 있어 류마티스 관절염에 지금까지 알려진 것 이외에도 다른 여러 인자가 질 병의 발생 및 진행에 영향을 미칠 것으로 추측하고 있다.
대식 세포 유주 억제 인자(Macrophage migration in- hibitory factor: MIF)는 1960년대에 알려진 이래로 다 양한 염증 반응에 연관이 되어 있음이 알려지면서 여러 질병들과의 관계에 대한 연구가 이루어지고 있 다. 특히 류마티스 관절염 및 다른 염증성 관절염의 병인 및 진행 과정에 영향을 미치는데 류마티스 관 절염 환자의 혈청 및 활액에서 MIF가 증가되어 있 다는 사실은 이미 여러 연구를 통해서 알려져 있다2,3). 그리고 일부 보고에 의하면 MIF 유전자에 다형성이 존재하며 이러한 다형성이 관절염의 감수성 및 질병 의 경중과도 관련이 있다고 하였다4,5). 그러나 대개 MIF 유전자 다형성에 대한 보고는 연소형 특발성 관절염 및 다른 염증성 관절염에 대한 보고들이고 류마티스 관절염에 대하여는 몇몇의 논문이 있으며 MIF 유전자 다형성이 류마티스 관절염의 감수성과 는 관련이 있으나 질병의 경중과는 상관이 없다는 보고도 있었다6).
본 논문에서는 한국인 류마티스 관절염에서 대식 세포 유주 억제 인자의 173 G/C 유전자 다형성을 관찰하였고 건강 대조군과 비교를 통하여 질환의 감 수성 및 질환의 심한 정도에 따른 연관성을 밝히고 자 하였다.
대상 및 방법 1. 연구 대상
충남대학교병원 류마티스내과에서 치료 중인 류마 티스 관절염 환자를 대상으로 하였으며 이들은 모두 미국 류마티스 학회의 분류 기준에 만족하였다7). 총 114명(남자 31명, 여자 83명)을 대상으로 하였고 건 강 대조군은 류마티스 관절염 환자의 성별 및 연령 에 맞추어서 선정하였다. 환자군은 연구에 참여하기 전 모두 사전 동의를 얻었으며 질환의 중등도를 평 가하였다.
2. 혈액 채취
유전자 분석을 위해 류마티스 관절염 환자 및 건 강 대조군의 정맥에서 전혈을 EDTA 튜브에 채취하 여 DNA를 추출하였다. DNA의 추출은 PUREGENEⓇ DNA Purification kit (Gentra systems, Minneapolis, MN)을 이용하였다. Polymerase chain reaction-restric- tion fragment length polymerase (PCR-RFLP) 분석법을 이용하여 유전자형을 결정하였다. PCR 반응의 조성 은 50 ng의 Genomic DNA, 25pM forward primer, 25pM reverse primer, 0.2 nM dNTPs, 2.5U Taq DNA polymerase (Bioline) 및 완충액으로 총 25 uL가 되도 록 만들었다. 시발체의 구성은 forward primer: 5’- ACTAAGAAAGACCCGAGGC-3’, reverse primer: 5’- GGGGCACGTTGGTGTTTAC-3’였으며 95oC에서 5분 간의 변성, 95oC에서 45초, 60oC에서 45초, 72oC에서 45초 과정을 30번 반복하였다. 72oC의 마지막 과정 은 5분 동안 시행하고 반응을 마쳤다. 증폭된 PCR 산물 3 uL를 4U의 Alu 1 제한효소(New England Bio- labs, Beverly, MA)와 1 uL의 10×반응 완충액과 섞 어 총 10 uL를 만들어 37oC에서 하룻밤 반응을 시 켰다. 반응이 끝난 용액을 3% 한천겔을 이용하여 전기영동한 후 ethidium bromide로 염색하여 자외선 투과기를 이용하여 판독하였다. 판독 결과 205 bp,
98 bp, 63 bp의 세 개의 PCR 생성물이 관찰되면 CC 동형접합체, 268 bp, 205 bp, 98 bp, 63 bp의 4개의 PCR 생성물이 관찰되면 GC 이형접합체, 268 bp, 98 bp의 2개의 PCR 생성물이 관찰되면 GG 동형접합체 로 각각 판정하였다(그림 1).
3. 질환의 중등도 평가
기능적 상태에 따른 분류는 류마티스 내과 전문의 가 혈액을 채취할 당시에 환자와의 면담을 시행하였 고 1991년 ACR criteria를 이용하여 평가하였다. 자 가관리, 직장 업무, 취미활동 등 모든 일상생활의 활 동을 완전히 수행할 수 있는 상태를 Class I, 일상적 인 자가관리 활동과 직장업무는 수행할 수 있으나 취미활동은 제한된 상태를 Class II, 일상적인 자가 관리 활동은 수행할 수 있으나 직장업무와 취미활동 은 제한된 상태를 Class III, 일상적인 자가관리 활 동, 직장업무, 취미활동 등의 모든 일상생활 수행 활 동이 제한된 상태를 Class IV로 하였다.
방사선학적 이상을 평가하기 위하여 2명의 진단방 사선과 전문의가 수부 관절의 X선 사진을 평가하였 고 관절의 미란 및 협착의 정도를 modified Sharp score로 표시하였다8,9). 좌우 양 측의 수부 관절에서 35개의 미란 및 36개의 관절 간격 협착을 측정하여 합산한 값으로 하였다.
이외에도 발병 연령, 류마티스유사인자의 역가, 관 절 외 증상, 침범 관절의 수, 적혈구 침강 속도, C
반응 단백, 치료의 병력 등을 조사하였다.
4. 통계 분석
류마티스 관절염 환자군과 대조군간의 비교는 t- test를 이용하였으며 그 결과는 평균±표준편차로 제 시하였다. 류마티스 관절염 환자와 건강 대조군 사 이의 MIF-173 G/C 유전자 다형성과 류마티스 관절 염의 발생에 대한 관계, 각 각의 유전자 형에 따른 류마티스 관절염의 중등도를 평가하기 위해 Fisher's exact test와 Chi-square test를 이용하였다.
이외에도 관절염의 예후 및 질병의 경과와 관련이 있다고 알려져 있는 인자들을 유전자형에 따라 비교 하였고 One Way ANOVA test를 이용하였다. 통계학 적 유의성의 수준은 p-값이 0.05 미만인 경우를 의 미 있는 것으로 하였다. 통계분석에는 SPSS system (Window용 SPSS 11.5)를 이용하였다.
결 과 1. 대상자의 임상적 특성
류마티스 관절염 환자의 평균 연령은 50.19±11.8 세, 건강 대조군의 평균 연령은 50.10±12.0세, 남성 은 31명, 여성은 83명이었고 류마티스 관절염의 발 병은 평균 41.18±12.5세, 평균 이환 기간은 8.87±
8.1년이었다. 일반적인 특징은 표 1과 같다.
Fig. 1. Polymerase chain reaction-restriction fragment le- ngth polymorphism (PCR-RFLP) analysis of MIF- 173 genotypes. Lane 1 and 5, MIF-173 GG ho- mozygote (268 bp, 98 bp), Lane 2, MIF-173 CC homozygote (205 bp, 98 bp, 63 bp), Lane 3, Negative control without genomic DNA, Lane 4, GC heterozygote (268 bp, 205 bp, 98 bp, 63 bp), The band of 63bp is not shown in this figure.
1 2 3 4 5
268 205
98
Marker 400 bp 300 bp
200 bp
100 bp
Table 1. Characteristics of the RA patients and healthy controls
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RA Controls
(n=114) (n=114) ꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏ Age (years)±SD 50.19±11.8 50.10±12.0 Gender, female/male 83/31 83/31 Mean age of onset
41.18±12.5 (years)±SD
Mean disease duration
8.87±8.1 (years)±SD
RF positive: % 85.1 Functional class
I 51 (44.75%) II 42 (36.84%) III 21 (18.41%) IV 0 (0%)
ꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏ
2. 한국인 류마티스 관절염과 MIF-173 G/C 유전 자 다형성과의 관계
류마티스 관절염 환자 및 대조군에서 MIF-173 G/C 유전자 다형성을 분석하였으며 유전자 다형성 에 의한 양 군 간에 질환의 감수성의 차이가 있는지 를 보고자 하였다.
총 114명의 류마티스 관절염 환자 중 MIF-173 GG 유전자형은 67명(58.8%), MIF-173 GC 유전자형은 37 명(32.5%), MIF-173 CC 유전자형은 10명(8.8%)이었 다. 나이와 성별을 맞추어 선정한 건강 대조군에서 MIF-173 GG 유전자형은 70명(61.4%), MIF-173 GC 유전자형은 39명(34.2%), MIF-173 CC 유전자형은 5 명(4.4%)이었다(표 2). 대조군의 유전자형은 Hardy- Weinberg equilibrium에 합당한 분포를 보였다(P=
0.78). 대조군의 유전자형 분포는 지금까지 보고된 외국의 자료와5,6,14,32) 비교하였을 때 MIF-173 GG, GC는 유사한 빈도이나 MIF-173 CC 유전자형은 약 2배 정도로 한국인에서 높은 분포를 보였다. 류마티 스 관절염 환자와 건강 대조군 간에 MIF-173 G/C
유전자 다형성의 차이는 p값이 0.410으로 통계학적 인 차이는 없었다.
3. 한국인 류마티스 관절염과 건강 대조군 사이의 MIF-173 G/C 대립 유전자의 빈도
류마티스 관절염 환자 및 건강 대조군의 MIF-173 G/C 대립유전자의 빈도는 p값이 0.438 (OR=1.10)으 로 양 군간에 차이는 없었다(표 3).
4. MIF-173 G/C 유전자형에 따른 류마티스 관절 염의 중등도
류마티스 관절염 환자에서 MIF-173 G/C 유전자형 에 따라 질병의 경중에 차이가 있는가를 평가하였 다. 기능적 상태(1991년 ACR criteria)를 평가하였다.
MIF-173 GG 유전자형을 가진 67명은 Class I 43.3%, Class II 40.3%, Class III 16.4%의 분포를 보였다.
MIF-173 GC 유전자형을 가진 37명은 Class I 45.9%, Class II 29.7%, Class III 24.3%의 분포를 보였다.
MIF-173 CC 유전자형을 가진 10명은 Class I 50.0%, Class II 40.0%, Class III 10.0%의 분포를 보였으며
Table 4. Association of MIF genotype with radiologic score and functional class
ꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧ
MIF-173 GG MIF-173 GC MIF-173 CC
ꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏ Modified sharp score±SD 20.05±12.11 24.79±17.27 17.22±14.03 p=0.196 Functional class
I 29 (43.3%) 17 (45.9%) 5 (50.0%)
II 27 (40.3%) 11 (29.7%) 4 (40.0%)
III 11 (16.4%) 9 (24.3%) 1 (10.0%)
IV 0 (0%) 0 (0%) 0 (0%)
Mean 1.73 1.78 1.6 p=0.791
ꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏ Table 2. Comparison of MIF-173 G/C genotype in RA
and controls. No statistically significant differ- ences were observed between patients and con- trols
ꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧ
Polymorphism RA (n=114) Controls (n=114) ꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏ MIF-173*G/C GG 67 (58.8%) 70 (61.4%)
GC 37 (32.5%) 39 (34.2%) CC 10 (8.8%) 5 (4.4%) ꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏ p=0.410 by Fisher's exact test
Table 3. Comparison of MIF-173 G/C allele frequencies in RA versus controls. No statistically signi- ficant differences were observed between pati- ents and controls
ꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧ
Allele RA (n=228) Controls (n=228) ꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏ MIF-173*G 171 (75%) 179 (78.5%) MIF-173*C 57 (25%) 49 (21.5%) ꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏ OR of MIF-173*C allele=1.10, p=0.438 by chi-square test
유전자형에 따른 기능 상태의 차이는 없었다(p=
0.791).
방사선학적 변화를 평가하기 위해 modified Sharp score를 시행하였다.
MIF-173 GG 유전자형의 평균 score는 20.05, MIF- 173 GC 유전자형의 평균 score는 24.79, MIF-173 CC 유전자형의 평균 score는 17.22였고 p값이 0.196으로 유전자형에 따른 방사선학적인 차이는 보이지 않았 다(표 4). 이 외에도 발병 연령, 류마티스유사인자 역가, 평균 적혈구 침강 속도 및 C 반응 단백, 관절 외 증상, 침범한 관절의 수 등 류마티스 관절염의 예후 및 질병의 경과와 관련이 있다고 알려져 있는
인자들을 유전자형에 따라 비교하였으나 통계학적인 차이는 없었다(표 5). 또한 글루코코르티코이드의 사 용 및 지속 여부, 류마티스 관절염이 심할수록 DM- ARD를 여러 가지로 병행하였을 것이라는 가정하에 치료에 사용된 DMARD의 수를 비교하였으나 통계 학적인 차이는 없었다(표 6).
고 찰
대식 세포 유주 억제 인자는 1960년대에 T 림프 구에서 유리되어 대식 세포의 유주를 억제하는 씨토 카인으로 알려졌다10). 이후에 MIF가 대식 세포의 탐 Table 5. Association of MIF genotypes with severity of RA. No statistically significant differences were observed between
MIF genotypes
ꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧ
MIF-173 GG MIF-173 GC MIF-173 CC
(n=67) (n=37) (n=10)
ꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏ Disease onset, yrs±SD 42.46±13.3 37.84±12.4 40.40±11.6 p=0.409 RF titer (IU/mL)±SD 187.56±413.3 143.38±254.2 197.91±223.9 p=0.836
ESR (mm/h)±SD 34.45±21.5 33.33±23.9 33.37±12.3 p=0.964
CRP (mg/dL)±SD 1.64±1.53 1.87±2.25 1.37±0.91 p=0.682
Extraarticular manifestations*
No. of patients (%) 30 (44.8%) 20 (54.1%) 4 (40%) p=0.588 No. of involved joint area±SD 6.59±2.4 6.00±2.6 7.10±2.8 p=0.357 ꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏ
*Extraarticular manifestations include rheumatoid nodule, vasculitis, lung involvement and sicca symptoms
Table 6. Association of MIF genotype with history of medications
ꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧꠧ
MIF-173 GC MIF-173 CC
MIF-173 GG (n=37) (n=10)
(n=67) ꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏ No. of patients (%)
ꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏ Steroid therapy
No 12 (17.9%) 6 (16.2%) 2 (20%)
Yes 55 (82.1%) 31 (83.8%) 8 (80%) p=0.955
Continuation of steroid 40 (72.7%) 17 (54.8%) 4 (50%) p=0.068 No. of DMARDs
1 3 (4.5%) 2 (5.4%) 0 (0%)
2 36 (53.7%) 18 (48.6%) 3 (30%)
3 28 (41.8%) 16 (43.2%) 7 (70%) p=0.352
Mean numbers 2.37 2.32 2.70 p=0.226
ꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏꠏ No statistically significant differences between MIF genotypes
식 작용과 지연 면역 반응에 관련이 있음이 알려졌 고 여러 면역 반응 및 MIF의 분자 생물학적인 특성 에 대한 연구가 진행되어왔다.
MIF는 대식세포 및 림프구의 면역기능을 조절하 는 중요한 역할을 하며 글루코코르티코이드의 면역 억제 및 항염증 작용의 역조절 기능도 갖는다. 면역 및 염증질환, 예를 들어 패혈증, 류마티스 관절염, 지연형 과민반응, 염증성 폐질환, 악성 종양 그리고 동맥경화에 이르기까지 다양한 질환에서 다양한 기 능을 수행하는 씨토카인으로 알려져 있다5,6,11-24). 특히 류마티스 질환에서는 류마티스 관절염에서 MIF의 역할이 많이 연구되었다. 류마티스 관절염 환 자에서 MIF의 농도가 혈청, 활액, 활막의 섬유세포 에서 정상과 비교하여 증가되어 있으며 질병의 활성 도를 나타내는 C 반응 단백 수치와 양의 상관관계 를 보였고 치료 전과 후를 비교하였을 때 치료 후에 MIF가 감소하는 등 MIF가 류마티스 관절염의 임상 적 발현 및 활성화에 중요한 역할을 한다25). Sampey 등은 류마티스 관절염 환자에서 MIF가 TNF, IL-1, IL-6, IL-8의 유리를 유도하며 phospholipase A2, cyc- looxygenase 2를 상향 조절하여 PGE2의 생합성을 촉 진함을 보고하였고26) Onodera 등의 연구에서는 mat- rix metalloproteinase의 합성을 증가시켜 관절의 파괴 를 촉진한다고 하였다27). 또한 활막세포의 증식 및 종양 억제 유전자 p53의 발현에 직접 영향을 미쳐 아포프토시스 과정을 조절하기도 한다.
최근에는 MIF 단일 클론 항체가 패혈증, 류마티스 관절염 및 종양 발생의 억제에 효과가 있고 MIF 유 전자 결핍인 동물 모델에서 관절염이 유의하게 억제 되었다는 보고들이 있어 이들을 겨냥한 치료가 연구 되고 있다17,18,28-31)
.
MIF 유전자의 다형성이 보고되면서 여러 질환들 과 관련성을 밝히고자 하는 많은 연구가 활발히 진 행되어 왔고 아토피, 건선, 크론씨병, 궤양성 대장염 등의 다양한 질병에 MIF의 유전자 다형성이 연관되 어 있음이 알려졌다. 연소형 특발성 관절염에서 단 일 뉴클레오티드 다형성(G-to C transition at position -173 of the MIF gene)이 질병의 감수성과 관련이 있으며 성인 염증성 관절염에서도 유의한 상관관계 가 있음이 확인되었다5,32). 이는 MIF가 증가된 상태 에서 MIF 촉진 유전자의 AP-4 (activator protein)의
합성이 증가되어 있으며 MIF가 저농도인 경우에 류 마티스 환자들에서 질병의 심한 정도가 경하다는 보 고가 뒷받침하고 있다.
MIF 촉진 유전자의 794번째 CATT 염기서열의 반 복 또한 염증성 관절염의 발병과 관련이 있음도 여 러 보고를 통해 알려져 있다4,6). 특히 5-CATT 반복 염기서열을 갖는 경우에 류마티스 관절염이 비교적 심하지 않아 질병의 경중과도 관련이 있다는 일부 보고도 있으나 Barton 등의 연구에 의하면 관절염의 감수성과는 관계가 있으나 질병의 경중과는 관련이 없다고 하여 이에 대하여는 아직 논란이 되고 있다.
본 연구에서는 MIF 유전자 다형성이 한국인의 류 마티스 관절염의 발생 및 경과에 어떠한 영향을 미 치는 지를 밝히고자 하였다. 환자-대조군 연구를 통 해 MIF 유전자의 단일 뉴클레오티드 다형성(SNP)이 한국인의 류마티스 관절염 발생 빈도, 류마티스 관 절염의 심한 정도와 어떤 관련이 있는지 관찰하였 다. MIF-173 G/C 유전자 다형성이 류마티스 관절염 환자와 건강 대조군 사이에 거의 동일한 비율로 존 재하였으며 각 각의 유전자형과 기능적 상태 및 방 사선학적인 변화로 평가한 질병의 심한 정도와도 비 교 하였으나 유의한 차이를 발견할 수 없었다. 다른 외국 보고들과 달리 한국인 류마티스 관절염에서는 MIF 유전자 다형성이 질병의 감수성 및 경중과 관 련이 없음이 밝혀졌다.
지금까지 보고된 여러 외국 문헌들을 살펴보면 건 강 대조군에서 MIF-173 GG 유전자는 약 68∼79%, MIF-173 GC는 20∼30%, MIF-173 CC는 0∼1.9% 정 도로 분포하였고 대개 영국의 Caucasian을 대상으로 분석된 자료이다5,6,14,32). 본 연구에서는 건강 대조군 과 환자군에서 MIF-173 CC유전자형이 각각 5명과 10명으로 수치로는 환자군에서 2배가 높았으나(표 2) 통계학적으로 의미 있는 차이는 없었다. 한국인 의 건강 대조군에서 MIF-173 CC 유전자형이 백인 (UK Caucasian)과 비교하여 4.4%로 비교적 높은 비 율을 보여 인종적인 차이에 의한 결과일 수도 있겠 다.
류마티스 관절염이 만성적인 경과를 보이는 질병 인데 반해 본 연구는 횡단면 분석으로 조사를 시행 함에 따라 질병의 중증도 평가에 한계가 있었다.
또한 여러 연구에서 언급된 MIF의 CATT 반복 염
기 서열에 대하여는 조사하지 않았고 류마티스 관절 염의 진행에 영향을 미치는 다른 요인들을 충분히 분석하지 못한 점 등이 결과에 영향을 미칠 수 있었 으리라 생각한다.
결 론
류마티스 관절염은 다양한 병인이 작용하고 또한 질병의 감수성과 경과에 여러 인자들이 복합적으로 작용한다. 한국인 류마티스 관절염 환자에서 MIF- 173 G/C 유전자 다형성은 질병의 감수성과 중등도 에 관련이 없는 것으로 판단하였다.
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