⋅교신저자: 임윤경, 대전광역시 동구 용운동 96-3 대전대학교 한의 과대학 경락경혈학교실, Tel 042-280-2610, Fax 042-280-2641 E-mail :[email protected]
⋅투고 : 2008/05/30 심사 : 2008/06/11 채택 : 2008/06/21
양릉천 저주파 전침자극이 CCl 4 로 유발된 흰쥐의 간 손상에 미치는 영향
채충헌
1⋅안택원
2⋅임윤경
1대전대학교 한의과대학1경락경혈학교실, 2사상체질의학교실
Hepatoprotective effect of electroacupuncture at GB34 (Yangreungcheon) in CCl
4-intoxicated rats.
Choong-heon Chae
1, Yun-Kyung Yim
11
Dept. of Meridian & Acupoint,
2Dept. of Sasang Constitutional medicine, College of Oriental Meidicine, Daejeon University
Abstract
Objectives : To investigate the effect of electro-acupuncture (EA) at GB34 on hepatotoxicity in CCl
4-intoxicated rats.
Methods : Rats were injected with CCl
4and treated with acupuncture or 2 Hz electro-acupuncture (EA) at left GB34 three times a week for 10 weeks. A non-acupoint in left gluteal area was selected as a sham point. To estimate the effects of EA on hepatotoxicity in rats, body weight, liver weight and liver index were measured, and biochemical assays for serum ALT, AST, ALP and total cholesterol, and hematological analysis for RBC, WBC, PLT, hemoglobin, lymphocytes, neutrophils and monocytes, and histology analysis of liver tissue were performed.
Results :
1. Lymphocyte level in blood was significantly decreased by CCl
4-intoxication and significantly increased by acupuncture and 2 Hz EA at left GB34.
2. Neutrophill and monocyte level in blood was increased by CCl
4-intoxication and significantly reduced by acupuncture and 2 Hz EA at left GB34.
3. Acupuncture and 2 Hz EA at left GB34 significantly reduced serum ALT and AST which were increased by CCl
4-intoxication.
4. EA at GB34 significantly reduced serum ALT and AST as compared with EA at sham point in CCl
4-intoxicated rat.
5. No significant difference was found between the effects of acupuncture and that of 2 Hz EA on CCl
4-induced liver damage in rats.
Conclusions : 2 Hz EA at GB34 has hepatoprotective effects on CCl
4-induced liver damage in rats and the point-specificity of GB34 may be involved in these effects.
key words : Electro-acupuncture, GB34, CCl
4, Liver damage
Ⅰ. 서 론
韓醫學的으로 肝은 藏血과 疏泄 기능을 하며
1,2), 西洋醫學的으로는 혈장단백의 합성, 탄수화물과 지질의 대사, 담즙의 생산, 해독 작용과 이물의 제거 등 여러 가지 기능을 담당한다
3).
陽陵泉은 足厥陰肝經의 陰陽表裏經인 足 少陽膽經의 合土穴로, 淸濕熱, 利肝膽하는 효능이 있어 肝鬱氣滯, 濕熱蘊結 등으로 인 한 脇筋痛, 黃疸, 肝炎, 膽囊炎 등을 주치한 다
4,5).
電鍼療法은 穴位에 刺鍼하여 감응이 있은 후에 鍼柄에 전류를 통하여 전기적 자극을 가함으로써 해당 經穴 및 經絡을 자극하는 방법으로
6,7), 자극의 파형, 주파수, 전압, 통 전시간 등에 따라 다른 치료효과를 보이는 것으로 알려져 있으며, 객관적으로 자극을 정량화할 수 있어, 임상 뿐 아니라 실험방법 으로서 폭넓게 응용되고 있다
6-9).
사염화탄소(CCl
4)는 간세포막의 지질과산 화 반응을 촉진하여 간세포를 손상시키고 간의 기능장애를 유발함으로써, 실험적으로 간손상을 일으키는데 널리 이용되고 있다
10-13)
.
肝損傷에 대한 鍼 또는 전침치료에 관한 기존 연구로는 홍
14)등의 ‘흰쥐의 行間 刺鍼 이 간손상에 미치는 영향’, Liu
15)등의 ‘급성 간손상에 足三里와 太衝穴의 치료 효과에 대한 실험적 연구’ 및 윤
16)등의 ‘太衝 및 陽池의 電鍼이 實驗的으로 誘發된 白鼠의 肝保護效果에 미치는 影響에 관한 연구’ 등 이 있었으나, 陽陵泉(GB34) 電鍼이 간손상 에 미치는 영향에 관한 보고는 접할 수 없 었다.
이에 저자는 흰쥐에 CCl
4를 투여하여 간 손상을 유발하고, 陽陵泉(GB34)에 저주파(2 Hz) 전침 자극을 가한 후, 혈액학적 검사 및 조직학적 관찰을 통하여 유의한 결과를 얻었기에 보고하는 바이다.
Ⅱ. 실 험 1. 재료
1) 동물
동물은 체중 200-250g의 Sprague-Dawley 계 웅성 흰쥐를 대한바이오링크(한국)에서 공급받아 실험 당일까지 고형사료(삼양사 료)와 물을 충분히 공급하고, 실온(22±2℃) 을 유지하여 2주일간 실험실 환경에 적응시 킨 후 실험에 사용하였다.
2. 방법
1) 실험군 설정
실험동물은 각각 정상군(normal), 대조군 (control), 구속 대조군(holder), 임의혈 저주 파 전침군(sham-EA), 양릉천 유침군(GB34 -NR), 양릉천 전침군(GB34-EA)의 6군으로 분류하고, 각 실험군에는 실험동물을 10마리 씩 배정하였다. 각 실험군에 대한 처치는 다 음과 같다.
(1) 정상군(normal) : Normal SD rat (2) 대조군(control) : 10주간 주 2회
CCL
4(50 mg/kg ) 복강투여
(3) 구속 대조군(holder) : 10주간 주 2회
CCL
4(50 mg/kg ) 복강투여와 함께 주 3
회 15분간 아크릴 홀더에 구속
(4) 임의혈 전침군(sham-EA) : 10주간 주 2회 CCL
4(50 mg/kg ) 복강투여와 함 께 주 3회 아크릴 홀더에 구속하여 좌 측 둔부의 임의혈에 15분간 2 Hz의 전 침자극
(5) 양릉천 유침군(GB34-NR) : 10주간 주 2회 CCL
4(50 mg/kg ) 복강투여와 함 께 주 3회 아크릴 홀더에 구속하여 좌 측 양릉천(GB34)에 자침 후 15분간 유침
(6) 양릉천 전침군(GB34-EA) : 10주간 주 2회 CCL
4(50 mg/kg ) 복강투여와 함 께 주 3회 아크릴 홀더에 구속하여 좌 측 양릉천(GB34)에 자침 후, 15분간 2 Hz의 전침자극
2) 간 손상 유발
Carbon tetrachloride(CCl
4) 와 Olive oil을 동량 희석한 희석액(1 ㎖/㎏ )을 흰쥐의 복강에 10주 동안 주 2회 투여하여 간 손상을 유발 하 였다
3) 취혈, 자침 및 전침 처치
길이 20㎝, 지름 5㎝의 원통형 아크릴 홀 더를 제작하여 4개의 구멍을 뚫어, 홀더 안 에 실험동물을 넣고 4개의 구멍으로 실험동 물의 사지를 노출하여 자침 및 전침을 시행 할 수 있도록 하였다. 정상군(normal)과 대 조군(control)을 제외한 모든 실험군은 실험 1주일 전에 3회에 걸쳐 홀더에 넣고 홀더 적응 훈련을 시킨 후 실험을 시작하였다. 골
도분촌법에 준하여 인체의 양릉천(GB34)에 상응하는 부위를 실험동물의 후지에서 취하 여, 멸균된 stainless steel 호침(0.25mm×
30mm, Dong Bang Acupuncture Co. Korea ) 을 약 2～3㎜ 깊이로 자입하였다. 양릉천 전 침군은 자침한 부위와 동측의 解谿(ST41) 상응 부위에 0.5×1㎠ 크기의 패드를 부착한 후, 저주파 치료기(PG-6, Suzuki iryoki, Japan )의 한쪽 극을 자입된 침의 끝에 연결 하고 다른 한쪽 극을 패드에 연결하여 2Hz 에서 근육의 수축이 육안으로 확인되는 정 도로 amplitude를 조절하여 15분간 전침자 극을 가하였다. 임의혈전침군(sham-EA)은 좌측 둔부의 임의혈에 자침 후 같은 방법으 로 전침자극을 가하였다. 양릉천유침군은 좌 측 양릉천에 자침후 전침 자극을 가하지 않 고 15분간 유침 후 발침하였다.
4) 몸무게 측정
실험 종료 시 실험동물의 몸무게를 측정 하였다.
5) 간비중 측정
실험 종료 시 실험동물의 간을 적출하여 간 무게를 측정하고, 체중에 대한 간 무게의 비율을 계산하여 전체 몸무게에서 차지하는 간의 비중을 확인하였다.
liver
index = 실험동물 체중 (g) 간 무게 (g) × 100
6) 혈액학적 분석
(1) Hematology 분석
실험 종료 24시간 후 ethyl ether를 이용 해 실험동물을 마취한 후 심장 채혈법으로 채혈하였다. 채혈한 혈액은 CBC bottle에 넣어 (주)Biotoxtech(한국)에 의뢰하여 RBC, WBC, PLT, lymphocyte, neutrophil, monoc yte, hemoglobin level을 분석하였다.
(2) Blood chemistry 분석
채혈한 혈액을 6500rpm으로 15분간 원심 분리한 후 (주)Biotoxtech(한국)에 의뢰하여 ALT, AST, ALP, total cholesterol level을 측정하였다.
7) 조직학적 분석
실험동물의 간을 적출하여 혈액을 완전히 제거한 후, 간의 일부분을 절단하여 10% 포 르말린에 고정한 다음, (주)Biotoxtech(한국) 에 의뢰하여 Hematoxylin and eosin 염색과 Masson's Trichrome 염색을 하였다.
8) 통계처리
본 실험에서 얻은 결과는 평균 ± 표준편차 로 나타내었다. SPSS 통계프로그램의 일원배 치 분산분석(one way ANOVA, 14.0 KO)을 사용하여 유의성을 검증하였고, 각 실험군의 결과값을 비교하여 신뢰도 95%이상(p 0.05) 일 때 유의한 것으로 판정하였다.
Ⅲ. 성 적 1. 몸무게
실험동물의 몸무게를 측정한 결과, 정상군
(normal)에 비하여 대조군(control) 및 구속 대조군(holder)에서 몸무게가 감소하였으나, 통계적 유의성은 없었다. 양릉천 전침군 (GB34-EA)에서는 대조군(control) 및 구속 대조군(holder)에 비하여 몸무게가 증가하였 으나 통계적 유의성은 없었다(Fig. 1).
Fig. 1. Effect of EA at GB34 on body weight of CCl
4-intoxicated rats.
2. 간비중
실험동물의 몸무게에 대한 간무게의 비중 을 측정하였다. 정상군(normal)에 비하여 대조군(control), 구속 대조군(holder) 및 임 의혈 전침군(sham-EA)에서 간비중이 증가 하였으며, 양릉천 유침군(GB34-NR) 및 양 릉천 전침군(GB34-EA)에서 대조군(contro l), 구속 대조군(holder) 및 임의혈 전침군(s ham-EA)에 비하여 간비중이 감소하였으나, 통계적 유의성은 없었다(Fig. 2).
Fig. 2. Effect of EA at GB34 on liver index of
CCl
4-intoxicated rats.
Group Normal Control Holder Sham-EA GB34-NR GB34-EA RBC(x10/㎕) 7.98 ± 1.75 7.73 ± 1.07 8.32 ± 0.46 9.46 ± 0.4 8.42 ± 0.72 8.05 ± 0.15 WBC(x10
3/㎕) 8.14 ± 1.99 9.29 ± 3.89 10.25 ± 2.67 11.92 ± 1.77 8.95 ± 3.34 8.96 ± 2.48 PLT(x10
3/㎕) 988.25 ± 76.17 1100.5 ± 222.02 975.25 ± 194.96 1166 ± 77.28 687.25 ± 329.5 931 ± 145.09
Lymphocyte
(%/WBC) 87.83 ± 2.3 72.47 ± 6.52 59.93 ± 6.63 70.1 ± 3.09 78 ± 7.81 78.92 ± 3.49 Neutrophils
(%/WBC) 8.78 ± 2.3 23.84 ± 12.54 23.78 ± 12.22 19.76 ± 5.41 13.68 ± 2.01 12.09 ± 1.91 Monocyte
(%/WBC) 1.04 ± 1.1 5.09 ± 1.18 4.18 ± 1.92 5.24 ± 2.34 2.63 ± 1.83 2.91 ± 1.07 Hemoglobin
(g/㎕) 16.06 ± 0.11 14.5 ± 0.49 14.48 ± 0.44 14.2 ± 0.24 15.08 ± 1.04 14.58 ± 1.04 Table 1. Effects of EA at GB34 on various components in whole blood of CCl4-intoxicated rats
3. 혈액학적 분석 1) Hematology 분석
각 실험동물의 whole blood로부터 RBC, WBC, PLT의 함량과, hemoglobin의 농도, WBC 중 lymphocyte, neutrophils, monocyte 의 비율을 측정하였다(Table 1).
(1) RBC
각 실험동물의 whole blood에서 RBC의 함량을 측정한 결과, 모든 실험군에서 통계 적으로 유의한 차이가 나타나지 않았다(Fig.
3).
(2) WBC
각 실험동물의 whole blood에서 WBC의 함량을 측정한 결과, 정상군(normal)에 비 하여 대조군(control), 구속 대조군(holder) 및 임의혈 전침군(sham-EA)에서 WBC가 증가하였으며, 양릉천 유침군(GB34-NR) 및 양릉천 전침군(GB34-EA)에서 대조군 (control), 구속 대조군(holder) 및 임의혈 전침군(sham-EA)에 비하여 WBC가 감소하
였으나, 통계적 유의성은 없었다(Fig. 4).
(3) PLT
각 실험동물의whole blood에서 PLT의 함 량을 측정한 결과, 정상군(normal)에 비하 여 대조군(control) 및 임의혈 전침군 (sham-EA)에서 PLT 함량이 증가하였으며, 양릉천 유침군(GB34-NR) 및 양릉천 전침 군(GB34-EA)에서 대조군(control), 구속 대 조군(holder) 및 임의혈 전침군(sham-EA) 에 비하여 PLT 함량이 감소하였으나, 통계 적 유의성은 없었다(Fig. 5).
(4) Lymphocytes
각 실험동물의 whole blood에서 WBC 중
lymphocytes의 비율을 측정한 결과, 정상군
(normal)에 비하여 대조군(control), 구속
대조군(holder) 및 임의혈 전침군
(sham-EA)에서 lymphocytes의 비율이 유의
하게 감소하였으며, 양릉천 유침군
(GB34-NR) 및 양릉천 전침군(GB34-EA)
의 lymphocytes의 비율은 구속 대조군
(holder)에 비하여 유의하게 증가하였다
(Fig. 6).
(5) Neutrophils
각 실험동물의 whole blood에서 WBC 중 neutrophils의 비율을 측정한 결과, 대조군 (control), 구속 대조군(holder) 및 임의혈 전침군(sham-EA)에서 정상군(normal)에 비하여 neutrophils의 비율이 증가하였으며, 양릉천 유침군(GB34-NR) 및 양릉천 전침 군(GB34-EA)에서 대조군(control), 구속 대 조군(holder) 및 임의혈 전침군(sham-EA) 에 비하여 neutrophils의 비율이 감소하였으 나, 통계적 유의성은 없었다(Fig. 7).
(6) Monocyte
각 실험군의 whole blood에서 WBC 중 monocyte의 비율을 측정한 결과, 정상군 (normal)에 비하여 대조군(control)에서 monocyte의 비율이 유의하게 증가하였다.
양릉천 유침군(GB34-NR)과 양릉천 전침군 (GB34-EA)의 monocyte 비율은 대조군 (control), 구속 대조군(holder) 및 임의혈 전침군(sham-EA)에 비하여 감소하였으나, 통계적 유의성은 없었다(Fig. 8).
(7) Hemoglobin
각 실험군의 whole blood에서 hemoglobin 의 함량을 측정한 결과, 대조군(control), 구 속 대조군(holder) 및 임의혈 전침군 (sham-EA)에서 정상군(normal)에 비하여 hemoglobin 함량이 유의하게 감소하였다. 양 릉천 유침군(GB34-NR) 및 양릉천 전침군 (GB34-EA)의 hemoglobin 함량은 대조군 (control), 구속 대조군(holder) 및 임의혈 전침군(sham-EA)에 비하여 유의한 차이를 나타내지 않았다(Fig. 9).
Fig. 3. Effect of EA at GB34 on RBC level in blood of CCl
4-intoxicated rats.
Fig. 4. Effect of EA at GB34 on W BC level in blood of CCl
4-intoxicated rats.
Fig. 5. Effect of EA at GB34 on PLT level in blood of CCl
4-intoxicated rats.
Fig. 6. Effect of EA at GB34 on lymphocyte level
in blood of CCl
4-intoxicated rats.
Fig. 7. Effect of EA at GB34 on the neutrophil level in blood of CCl
4-intoxicated rats.
Fig. 8. Effect of EA at GB34 on monocyte level in blood of CCl
4-intoxicated rats.
Fig. 9. Effect of EA at GB34 on hemoglobin level in blood of CCl
4-intoxicated rats.
2) Blood chemistry
각 실험군의 혈액으로부터 분리한 혈청에 서 ALT, AST, ALP, total cholesterol의 함 량을 확인하였다(Table 2).
(1) ALT
각 실험군의 혈청에서 ALT의 함량을 측 정하였다. 정상군(normal)에 비하여 대조군
(control), 구속 대조군(holder) 및 임의혈 전침군(sham-EA)에서 ALT 함량이 유의하 게 증가하였다. 양릉천 유침군(GB34-NR)과 양릉천 전침군(GB34-EA)의 ALT 함량은 구속 대조군(holder) 및 임의혈 전침군 (sham-EA)에 비하여 유의하게 감소하였다 (Fig. 10).
(2) AST
각 실험군의 혈청에서 AST의 함량을 측 정하였다. 정상군(normal)에 비하여 대조군 (control), 구속 대조군(holder) 및 임의혈 전침군(sham-EA)에서 AST 함량이 유의하 게 증가하였다. 양릉천 유침군(GB34-NR)의 AST 함량은 대조군(control), 구속 대조군 (holder) 및 임의혈 전침군(sham-EA)에 비 하여 유의하게 감소하였으며, 양릉천 전침군 (GB34-EA)의 AST 함량은 대조군(control) 및 임의혈 전침군(sham-EA)에 비하여 유의 하게 감소하였다(Fig. 11).
(3) ALP
각 실험군의 혈청에서 ALP의 함량을 측 정한 결과, 정상군(normal)에 비하여 임의 혈 전침군(sham-EA)에서 혈청 ALP 함량 이 유의하게 증가하였다. 양릉천 유침군 (GB34-NR) 및 양릉천 전침군(GB34-EA) 에서 임의혈 전침군(sham-EA)에 비하여 혈 청 ALP 함량이 감소하였으나 통계적 유의 성은 나타나지 않았다(Fig. 12).
(4) Total cholesterol
각 실험군의 혈청에서 total cholesterol의 함량을 측정한 결과, 모든 실험군에서 통계 적으로 유의한 차이가 나타나지 않았다(Fig.
13).
Group Normal Control Holder Sham-EA GB34-NR GB34-EA ALT(U/L) 56.1 ± 10.985 210.0 ± 98.869 345.2 ± 139.9 492.3 ± 159.8 90.5 ± 38.5 78.5 ± 15.8 AST(U/L) 116.9 ± 12.451 457.5 ± 224.602 420.4 ± 94 578.3 ± 136.4 149.1 ± 11.7 175.2 ± 27.7 ALP(U/L) 230.6 ± 61.601 351 ± 38.732 281.4 ± 16.4 449.1 ± 100.7 370.1 ± 75.3 316.9 ± 59.8 Total Chol.
(㎎/dl) 95.9 ± 10.911 97.5 ± 22.827 118.4 ± 3.6 118.0 ± 30.7 103.1 ± 12.4 94.5 ± 18.2 Table 2. Effects of EA at GB34 on various components in serum of CCl4-intoxicated rats
Fig. 10. Effect of EA at GB34 on serum ALT of CCl
4-intoxicated rats.
Fig. 11. Effect of EA at GB34 on serum AST of CCl
4-intoxicated rats.
Fig. 12. Effect of EA at GB34 on serum ALP of CCl
4-intoxicated rats.
Fig. 13. Effect of EA at GB34 on total cholesterol level in serum of CCl
4-intoxicated rats.
4. 조직학적 분석 1) H & E 염색
각 실험군의 간 조직을 적출하여 H&E 염색법을 이용하여 염색하였다. 정상군 (normal)에 비해 대조군(control), 구속 대 조군(holder) 및 임의혈 전침군(sham-EA) 의 간 조직에서 간세포의 괴사, 간조직의 조 밀도 저하 등을 확인하였다. 양릉천 유침군 (GB34-NR)과 양릉천 전침군(GB34-EA)에 서는 간세포의 괴사가 적어 간조직이 정상 군(normal)과 유사하게 유지되었다(Fig.
14).
2) M & T 염색
각 실험군의 간 조직을 적출하여 M&T
염색법을 이용하여 염색하였다. 정상군
(normal)에 비해 대조군(control), 구속 대
조군(holder) 및 임의혈 전침군(sham-EA) 에서 간조직내 세포간질이 증가하고 구조가 문란해진 것을 관찰하였다. 양릉천 유침군 (GB34-NR)과 양릉천 전침군(GB34-EA)에 서는 세포간질의 축적이 적고 간조직의 구 조가 단정하여 정상군(normal)과 유사하게 유지되었다(Fig. 15).
Fig. 14. Hematoxylin and Eosin stain of liver sections of CCl
4-intoxicated rats.
Fig. 15. Masson's Trichrome stain of liver in CCl
4-intoxicated rats.
Ⅳ. 고 찰
韓醫學的으로 肝의 주된 生理機能은 ‘肝藏 血’과 ‘肝主疏泄’로 대별할 수 있다
2). 肝藏血 은 혈액을 생성, 저장하고 배분, 조절 및 출 혈을 방지하는 등의 역할을 말하며, 肝主疏 泄은 소통과 흐름이 원활하게 이뤄지는 것 을 말하는데 기혈순환, 정신활동, 음식의 소
화흡수, 월경 등이 疏泄作用에 의존해서 이 루어진다
17,18).
西洋醫學的으로 肝은 당질대사, 단백질대 사, 지질대사, 담즙색소대사 등의 중추기관 이 되고, 각종 영양소, vitamin, 철분 등을 저장하여 필요에 따라 공급하는 화학적 대 사와 외인성 및 내인성 물질을 해독하는 기 능을 갖는다
1,19,20). 만약 화학약품의 중독, 세 균의 감염, 종양 혹은 저산소 등으로 간세포 가 손상을 받게 되면, 간조직은 괴사 등 여 러 가지 병변을 유발한다
1,20).
CCl
4는 간의 대사 과정 중 microsomal mixed function oxidase에 의해 free radical 인 trichloromethyl radical을 생성하게 되는 데, 이 free radical이 지질, 특히 세포막의 지질을 과산화하여 간세포를 손상시킴으로 써 결국 간기능 장애를 유발하게 된다. 이러 한 기전에 의해 CCl
4는 실험적으로 간손상 을 유발하기 위하여 사용된다
10,11,12,13).
陽陵泉은 足厥陰肝經의 陰陽表裏經인 足 少陽膽經의 經穴로, 筋會, 陽之陵泉이라고도 하며, 膝下 1寸 髀骨小頭의 內直下 陷中에 위치한다. 膽經의 合土穴로서 疏肝利氣, 淸 熱利濕, 利膽退黃, 和胃止嘔의 효능이 있어 肝鬱氣滯, 濕熱蘊結로 인한 脇筋痛, 嘔吐, 口 苦, 黃疸, 肝炎, 膽囊炎 등을 주치한다
4,5). 본 연구에서는 CCl
4로 유발된 간손상의 치료혈 로서 陽陵泉을 선택하였다.
電鍼은 新鍼療法의 하나로, 穴位에 刺鍼하
여 감응이 있은 후에 鍼柄에 전류를 통하여
해당 經穴 및 經絡을 자극하는 방법으로, 기
계적 자극과 전기적 자극을 결합시킨 치료
법이다. 이러한 전침요법은 장시간의 지속적
인 運鍼을 대체할 수 있으며, 인력을 절약하 고 비교적 객관적으로 자극량을 조절할 뿐 만 아니라 어느 一點에 자극을 집중시킬 수 있는 장점이 있다
6,7,21).
전침은 자극의 파형, 주파수, 전압, 통전시 간 등에 따라 다른 치료효과를 보이는 것으 로 알려져 있다
9,21,22). 임상적으로는 주로 5-250Hz의 주파수를 이용하는데, 이중 고빈 도 주파수는 진통, 진경작용이 있고, 저빈도 주파수는 흥분작용이 있어 마비질환에 사용 되고 있다
9). 실험적으로는 2 Hz의 저주파와 100 Hz의 고주파가 다용되는데
8,23,24), 본 연 구에서는 2 Hz의 저빈도 자극을 사용하였 다.
실험동물에게 유침 및 전침자극을 가하는 동안 실험동물의 움직임을 방지하기 위하여 특수제작한 아크릴 홀더에 실험동물을 구속 하였다. CCl
4만 투여한 대조군(control)과 CCl
4투여와 함께 구속 스트레스를 가한 구 속 대조군(holder)의 군간 비교 결과, 모든 검사 항목에서 유의한 차이가 나타나지 않 았다. 따라서 구속 스트레스가 본 실험 모델 의 CCl
4에 의한 간손상에 유의한 영향을 미 치지는 않은 것으로 사료된다.
실험종료 후, 실험동물의 체중 및 간 무게 를 측정하고, 체중에 대한 간 무게의 비율을 계산하였다. 간비중의 증가는 CCl
4에 의해 만성화된 간손상의 경우 간경화로 진행되는 일종의 지표로 활용된다
25).
본 연구에서 CCl
4투여에 의해 실험동물 의 몸무게가 감소하고 간비중이 증가하였으 며, 양릉천에 대한 유침 및 저주파 전침자극 에 의해 몸무게와 간비중이 정상으로 회복
되는 경향을 보였으나 통계적 유의성은 없 었다(Fig. 1-2).
간세포의 손상에 따라 간장의 기능이 저 하되면 적혈구의 생산과 분해에 영향을 받 아 적혈구와 헤모글로빈의 양이 감소하게 된다
26).
본 연구에서 혈중 RBC의 함량은 각 군간 통계적으로 유의한 차이가 나타나지 않았다 (Fig. 3).
혈중 hemoglobin의 함량은 CCl
4투여에 의해 유의하게 감소하였으며, 양릉천 전침자 극에 의해 약간 증가하였으나 통계적 유의 성은 없었다(Fig. 9). 즉, 양릉천 유침 및 전 침자극은 CCl
4로 유발된 간손상에 의한 혈 중 헤모글로빈 감소에 유의한 영향을 미치 지는 못한 것으로 사료된다.
유침자극에서 저주파전침자극에 비하여 혈중 hemoglobin의 함량이 약간 높았으나 통계적으로 유의한 차이는 없었다(Fig. 9).
조
26)등에 의하면 CCl
4에 의한 간손상 모
델에서 간세포의 손상에 의해 면역기능이
활성화 되어 백혈구의 수가 전체적으로 증
가한다고 하였다. 본 연구에서는 CCl
4투여
에 의해 혈중 WBC의 함량에는 변화가 없
었으며, WBC 중 lymphocytes의 비율은 유
의하게 감소하였고, WBC 중 neutrophils과
monocytes의 비율은 증가하였다(Fig. 4,
6-8). 이는, 조
26)등의 실험이 5주간 시행되
어 염증반응이 활성화 되고 전반적인 면역
기능도 아직 왕성한 상태였던 반면, 본 실험
은 10주간 시행되어, 간손상이 이미 만성화
됨으로써 면역기능이 전체적으로 쇠약해지
고, 활성화된 염증상태는 지속되었기 때문인
것으로 사료된다.
Lymphocyte는 세포성면역을 담당하는 T 세포와 체액성면역을 담당하는 B세포로 대 별되며, 면역반응에 직접적인 작용을 한다
27,28)
. 인체가 다치거나 조직이 감염되면 보
체단백질과 기타 화학신호들이 식세포를 유 인하는데, 호중구가 먼저 오고 단핵구가 뒤 따라오며, 단핵구가 대식세포로 변하여 침입 자들과 찌꺼기 등을 삼키고 염증과 관련된 치유과정의 대부분을 수행한다
29).
본 연구에서 CCl
4투여에 의해 감소한 lymphocytes의 비율은 양릉천 유침 및 전침 자극에 의해 유의하게 증가하였다(Fig 6).
이는 CCl
4투여에 의한 간손상으로 약해진 면역능력을 양릉천 유침 및 전침자극이 강 화하였음을 나타내는 것으로 사료된다.
CCl
4투여에 의해 증가한 neutrophils 및 monocytes의 비율은 양릉천 유침 및 전침자 극에 의해 감소하는 경향을 나타내었다(Fig.
7, 8). 이는, CCl
4투여에 의한 염증반응이 양릉천 유침 및 전침자극에 의해 억제되었 음을 나타내는 것으로 보인다.
혈중 lymphocytes, neutrophils 및 monocytes의 회복에 있어 유침과 저주파전 침자극간 뚜렷한 차이는 나타나지 않았다 (Fig. 6-8).
간으로부터 혈액에 방출된 간의 효소 활 성도 측정은 간손상 연구에 있어서 가장 유 용한 방법 중의 하나이며, 특히 혈장 중 ALT와 AST 등의 효소 활성도 상승은 간손 상으로 인한 간세포의 괴사와 간조직의 파 괴가 진행됨에 따라 transaminase가 혈중으 로 유리되어 높은 활성을 나타내는 것이므
로 간세포의 변성 및 괴사의 지표가 된다
27,30)
