제 로 핵과 세포질 내에 존

： 년 월 일 ： 년 월 일 ： 년 월 일

：서 장 수 대구시 북구 학정동 칠곡경북대학교병원 진단검사의학센터

1ㆍ ²

칠곡경북대학교병원 진단검사의학센터¹, 경북대학교 의학전문대학원 임상병리학교실²

＜

μ μ

은 의 촉매성 엔도펩디자아

제 로 핵과 세포질 내에 존

재하며 유비퀴틴 의존성 혹

은 비의존성 비리소좀경로

에서 다양한 조절단백의 생성과 소멸 항원제시 세포분열 및 자멸에 관여하는 것 으로 알려져 있다 또한 은 각종 시 토카인 의 생성과 관련되며 면역조절효

과 를 가지고 자가면역

질환자에서 흔하게 보이는 항 항체 형 성을 유도한다는 것이 알려져 있다

은 백혈병 신세포암 유방암 등의 암세포내에서 과발현되며 자가면역질환 골수증식성질환 다발성골수종 급ㆍ만성림프구성백혈병 고형종 양 패혈증 외상 등에서 증가되어 있을 뿐 아니 라 질병의 상태 및 예후와 관련성이 있는 것으로 알려져 있다

전혈 및 농축적혈구는 제조하여 일정기간 보 관하며 환자에게 사용하게 되는데 저장시간이 증가함에 따라 와 가 감소하고 라이 소인지질 과 칼륨 등이 축적되어 적혈구의 변형 및 생화학적 성상변화를 야기하게 된다 이 때문에 전혈과 농축적혈구의 보존기간 은 일로 제한되고 감마선을 조사할 경우 적혈 구 손상이 증가되므로 조사 후 일간 사용이 가 능하다

최근 적혈구제제의 저장기간 중 발생하는 용

혈과 관련되어 혈장내의 이 증가된다 는 보고가 있었고 이는 현재 알려진 수혈관련 부작용의 원인 외에 으로 인한 영향 즉 면역조절효과나 항 항체의 형성 등을 새롭게 제시할 수 있는 근거가 될 수 있다고 생각되었다 이에 저자들은 전혈을 저장하면서 축적되는 의 양과 실제로 환자에게 수 혈되는 농축적혈구 제제에 포함된 의 양을 측정하였다

특별한 질병이 없는 건강한 성인 지원자 명 남성 명 여성 명 평균연령 세 을 대상으로 하여

항응고제가 포함된 혈액저장용기

녹십자 용인 한국 에 전혈을 채취하 여 일간 에서 냉장보관하였다 저장 일 일 일 일 및 일째에 전혈보관용기에서 일 부 검체를 재채취하여 원심분리한 후 상청액을

− 에 보관하였다

과 혈장내 헤모글로빈 농도와의 관

련성을 평가하기 위하여 용혈제제를 준비하였다

건강인의 전혈을 원심하여 혈장을 분리하고 남은

혈액에 동량의 증류수를 섞어 용혈시켰다 자동

＜ 화장비

로 용 혈제제의 헤모글로빈 농도를 측정한 후 분리해 둔 건강인의 혈장에 희석하여 과 같은 농 도의 용혈제제를 농도별로 개씩 준비하여 − 에 보관하였다

환자에게 수혈되는 적혈구제제가 함유하고 있 는 의 농도를 측정하기 위해 실제 환자 에게 불출되는 개 농축적혈구제제의 분절을 불 출시점에 하나씩 준비하여 분절내 검체를 별도의 용기에 담아 원심분리한 후 상청액을 − 에 보관하였다

을 사용하여 혈장과 용혈 제제 내의 농도를 측정하였다 검 체는 모두 배 희석한 후 회 중복 측정하여 흡 광도의 평균값으로 농도를 결정하였고 검출키트 의 측정범위 ∼ μ 내에 속하지 않는 검 체의 경우 다시 희석하여 측정하였다 최종적으 로 측정된 농도값에 희석배수를 곱하여 농도를 결정하였다

의 측정결과값은 평균 표준편차로 나타내었고 개 전혈제제의 저장기간에 따른

농도는 를

이용하여 저장 일 일 일 일 및 일째의 값을 서로 비교하였다 농도에 미치는 용혈의 영향을 평가하기 위하여 각 헤모글로빈 농도별 용혈제제의 값 각 농도별 제제 개의 평균값 을 이용하여 단순선형회귀 및 상관 분석을 시행하였다 상기 분석에서 모두 ＜

일 때 통계학적으로 유의한 차이가 있는 것으로 해석하였다

일 동안 보관하면서 측정한 전혈제제의 혈 장내 농도는 저장 일 일 일 일 및 일에 각각

및 μ 로

나타났다 저장 일째와 비교하였을 때 일 일 일 및 일째의 농도는 모 두 유의하게 증가하였고 ＜ 일 이후부터

일까지의 값은 증가하는 경향을 보였으나 통계

학적 유의성은 없었다

혈장내 헤모글로빈이 증가할수록

농도가 유의하게 증가하였으며 ＜ 상관계 수 는 였다

환자에게 수혈된 개 농축적혈구제제 분절의

농도는 μ 였고 보관

기간은 평균 일 표준편차 일 이었는데 개 중 개의 농축적혈구의 농도는 예 외적으로 높은 것으로 나타났다

μ

은 비리소좀단백분해복합체

로 유핵세포의 핵과 세포질내에 존재한다 은 촉매중

심복합체 인

과 조절하부복합체

로 이루어져 있다 중심체는 개 하 부단위 개의 α 하부단위 개의 β 하부단위 가 쌍을 이루어 실린더 모양으로 배열되어 있으 며 하부단위의 구성에 따라 다양한 촉매활성을 가지게 된다 조절복합체는 개의 와 개 이상의 하부단위로 구성되며 유 비퀴틴화 단백과 결합하여

의 유비퀴틴 의존성단백분해활성을 제 공하게 된다 은 정상적으로 말초혈액의 혈장내에서 검출되며 혈중

으로 알려져 있다 년에 다양한 악성조혈세포계

에서 의 생성이

촉진된다는 것이 알려진 이후 등은 혈액

암 환자의 혈청에서 농도를 측정하여

암의 크기와 양의 상관관계가 있음을 밝혔다

여러 연구자들은 급성백혈병 비호지킨성림프종

다발성골수종 만성골수증식성질환 및 골수이형

성증후군과 같은 다양한 혈액종양 환자들의 질병

상태 혹은 예후가 혈청 의 농도와 관계

가 있음을 증명하였고 유방 위 신장 대장 폐

및 간 등의 고형암에서도 혈중 이 증가 되어 있음을 밝혔다 또한 간경화 간염 및 지방간 등을 포함한 간질환 다양한 자가면역질 환 및 외상이나 패혈증에서 농도가 유 의하게 증가된 것으로 알려져 있다

이렇게 다양한 질병군에서 이 증가 되는 이유에 대해 연구자들의 여러 의견이 제시 되고 있는데 암세포에서는 세포증식의 주된 조

절기전인 이 활

성화되어 있고 따라서 의 중심적 역할을 하 는 이 증가된다고 설명하였다 암세 포가 아닌 일반세포에서는 세포괴사나 용해시에 세포내 성분들이 세포밖으로 방출되는데 그 중 한 성분이 이기 때문에 증가한다고 하 였다 그러나 외상이나 패혈증과는 달리 세포손 상 환경에서도 농도가 증가하지 않는 경우 복부 수술 등 를 고려할 때 단순한 세포손상 이 아닌 면역학적 활성에 의한 현상이라는 의견 도 있었는데 다양한 자가면역질환에서의 현상을 함께 설명할 수 있는 가설로 제시되었다

은 단백의 조절 항원제시 신호전 달 세포분화 세포주기 조절 및 세포자멸 등에 광범위하게 작용하는데 특히

에 항원을 제시하고 인터페론감마의 분비를 유도하며 을 형성하여 세포의 증식과 세포독성작용을 활성화하는 역할을 하게 된다 이와 함께 항 항체를 형성하면 서 일련의 자가면역반응을 활성화하여 자가면역 질환자의 자가항체의 증폭을 가져오기도 한다

적혈구를 포함한 혈액제제의 저장에 따른 부 작용들 중 대부분은 산화 스트레스와 연관된 단 백과 지질의 변성 적혈구 막의 소실이나 변성으 로 인한 모양의 변화 및 변형능의 감소와 관련되 어 있는데 최근 의 주요단백 중 하나인 유 비퀴틴 이 혈액제제 저장 중 야기되

는 용혈로 인해 증가하며 각종 시토카인의 분비 를 촉진하여 면역조절의 원인이 될 수 있다는 연 구가 있었고 역시 용혈과 관련하여 농축적혈구의 저장기간에 따라 증가한다는 보고 가 있었다 저자들의 결과에서는 저장기간에 따 라 이 증가하는 경향을 보였으나 첫 주를 제외하고는 통계학적으로는 유의성이 없었 다 또한 농축적혈구분절의 평균농도 는 μ 평균보관기간 일 로 저장

일째 전혈제제 μ 보다 오히

려 더 낮게 나타났다 이처럼 이전 연구자들의 결 과와 달리 저장에 따른 농도의 유의한 증가가 없었고 농축적혈구제제와 전혈제제간의 농도를 비교했을 때에도 저장으로 인해

농도가 증가한다고 결론지을 수가 없었다 이러한 차이들은 사용한 혈액제제의 종류가 다르 고 검체보관환경 채혈용기내 혹은 분절내 에 차 이가 있었기 때문일 수 있겠고 이에 대한 추가적 인 검토가 필요하다고 생각하였다 이처럼 저장 과 농도와의 직접적인 연관성이 불확 실하여 저자들은 별도의 용혈제제를 만들어 용혈 과 농도와의 직접적인 관련성을 살펴 보았다 등이 일간 보관하면서 측정한 적 혈구농축제의 혈장헤모글로빈 농도는 약 ∼ 로 나타났고 이를 바탕으로 저자들은 단계별 희석 ∼ 을 통해 용혈제제를 만 들어 농도를 측정하였다 이 때 헤모 글로빈 농도증가에 따라 의 농도가 유 의하게 증가한 것을 미루어 볼 때 비록 저자들이 저장기간과 농도와의 직접적인 상관 성은 도출하지 못하였지만 적어도 용혈이

증가의 원인이 된다는 것을 알 수 있었 다

수혈로 인한 면역조절을 예방하기 위해 백혈

구를 제거한 적혈구제제를 사용할 것을 권장하고

있으나 완전한 예방이 불가능한 것으로 알려져 있다 이나 의 활성도는 혈액내의 세포 중 적혈구에서 현저하게 증가되어 있기 때 문에 적혈구제제의 저장 이전에 백혈구를 제 거하여도 이나 의 방출을 완벽히 예 방할 수 없을 것으로 생각되었고 이를 통해 백혈 구 제거시에도 발생가능한 면역조절을 부분적으 로 설명해 줄 수 있다고 생각하였다 저자들은 실 제로 환자에게 수혈되는 농축적혈구 분절내의

을 측정하였는데 개 제제 중 개의 농도는 각각 μ 저장기간 일 μ 저장기간 일 였는데 개

제제의 평균값 μ

저장기간 일 와 주 보관한 전혈의 평균 값 μ 을 크게 상회하는 결과를 보여주었다 이로 미루어 볼 때 개 적혈구제제 내의 농도가 저장과는 무관하게 처음 부터 높았을 것이라 추측이 되며 저장기간보다는 공혈자의 상태가 더 중요한 것으로 생각되었다 즉 단순히 저장기간을 줄여서 수혈하는 것만으 로는 고농도의 으로 인한 면역조절을 막을 수 없게 된다 등은 저장혈액제제의 수 혈시 수혈자의 혈중 중성구를 자극하여 발생하는 면역조절효과를 방지하기 위해 흔히 권장되는 백 혈구제거방법과 적혈구를 세척하여 혈장성분을 제거하는 두 방법을 이용하여 두 방법 중 적혈구 세척 방법이 효과적이라는 것을 증명하였다 이처럼 수혈로 인한 다양한 면역조절효과는 제제 내에 포함된 백혈구 뿐만 아니라 혈장내에 유리 되는 성분들도 원인이 될 수 있으며 따라서 저자 들은 암이나 자가면역질환과 같은 고위험군에서 는 백혈구제거와 함께 수혈전 적혈구 세척을 병 행하는 것이 이와 같은 부작용을 최소화 할 수 있 는 방법 중 하나일 수 있다고 생각하였다

본 연구에서는 저장기간이나 용혈에 따른

의 농도와 환자에게 수혈되고 있는 적혈 구 제제내에 포함된 혈중 을 측정하였 지만 혈액제제내에 포함된 이 생체내 에서 어떤 부작용을 야기하는지에 대해서는 아직 알려진 바가 없다 또한 환자에게 불출된 적혈구 제제의 수도 충분하지 않을 뿐 아니라 높은

농도를 가진 적혈구 제제의 공여자에 대 한 추적 조사 또한 이루어지지 못한 한계점을 가 지고 있다 따라서 이와 관련된 후속연구들이 뒷 받침되어야 할 것이며 아직 밝혀지지 않은 수혈 관련 부작용의 다양한 원인을 규명하는 데에 도 움이 될 수 있을 것으로 생각한다

은 유핵세포의 세포질과 핵내 에 존재하는 다수의 하부단위로 구성된 효소이 고 여러 질병을 야기하는 병태생리과정에 관여 한다 최근 용혈로 인해 이 방출된다는 연구가 있었고 혈액제제내의 축적은 저장으로 인한 손상 및 부작용을 야기할 수 있다 따라서 저자들의 저장혈액제제의 농 도 변화를 분석하였다

방법을 이용하여 명의 자원자로 부터 얻은 전혈과 개의 농축적혈구에서

의 농도를 측정하였고 농도별 용혈제 제를 준비하여 의 농도와 용혈과의 관 련성을 분석하였다

전혈제제내의 은 저장 일째 와 비교하였을 때 일 이후부터 유의하게 증가하 였다 ＜ 농축적혈구분절내의

농도는 μ 평균저장기간

일 였는데 개 중 개의 농축적혈구의 농도는 예외적으로 높은 것으로 나타났

다 μ 용혈제제의 헤모글로

빈 농도가 증가할수록 농도도 함께 증 가하였다

전혈제제의 저장시 첫 일간을 제외하고 의 농도의 변화는 없었지만

축적에 용혈이 관련될 수 있을 것으로 생각 되었다 추후 혈액제제내에 포함된 높은 농도의

이 수혈자에게 미치는 영향에 대한 연

구가 필요할 것이다