사상체질의학회지
J. of Sa웰Ig Canst. Moo.
Vol. 13. No 3. 2001
;京隔散火邊이 Allergy 性 接觸皮I홉껏에 미XI 는 影響
조셰왕* . 박성식*
I Abstract I
Effects of Yangkyuksanhawtang on the Allergic Contact
Dermatitis
Cho Se-wang . Park Seong-sik
D빼. 이 없sang Constitutional M뼈α ne, Coli 맹e 이 Oriental M잉icine, Dongguk Univ.
1. The purpose of s’udy
To study the effectiveness of YangkyuksanhaWtang(YS1) against Allergic Conract Dennaritis
(ACD) I obse πed the change of cutaneous shape, histochemistry, immunohistochemistry, and the distribution of
apoptotic cells.
2. The material and method of study
I divided 4-month-old rars inro thr 야 groups of 10, which are a conrrastive group of having applied Acetone olive oil
O띠y, ACD group to have intentionally activated Allergic Conraa Dermatitis by DNCB 뻐d YST group co give medication
of YangkyuksanhaWtang extract. And I obse πed each group of mice after 24, 48 and 72 hours.
3. The result and conclusion of s’udy
까Ie change of cutaneous shape and hypersensirive reaaion of immunity was significandy decreased by YST in ACD
rars. I consider thar YST suppressed hypersensitive reaaion of imm 띠피ty and
inflammarion in ACD
Kεywords : Soyangin, YangkyuksanhaWtang, Allergic αnract Dermatitis.
I. 總 뚫 8회熱1JE 에 대한 淸陽上升의 목적으로 사용되고 있 다
2) 李”는 「몹受熱훌熱病」 에서 上消 , 體p 흉風과 層睡의 輕 에 사용한다고 하였으며” 임상적으로 뼈햄 , 手足輝, 連動障많,r 足廳木, 口 좀病 , 牙 f{!j 痛, i',M 패散火1易은 r東협壽世保元j 의 「少陽A 몹受
熱필熱病論」 에 처음 소개된 처방1)으로 少陽A H셈
동국대화교 한의과대학 사상체질과 교신저자 조세왕 주소)
서올 성북구 동소문동 5 가 7 ’번지 돈앙한의원 전화 )924-6333 E-mail) sewangl@ 따m 때J.ner
행뺏名 14으聚名 ]iJ®P°É)
生地하 Rerunanniae RaÇtx 8.0
忍‘종 Lonicera Japonica 8.0
i훨짧 ForsYlhiae FruclUS 4.0
山뚫子 Gardeniae F ruCIUS 4.0
¬i Memhae Helba 4.0
ÇŠoffl Anemalrhenae Ç…moma 4.0
EÖÌ Gypsm Fibrosum 4.0
×4Õ<1)= Schizonepelae Helba 4.0
防風 Ledeb±Jriellae Radix 4.0
TOlal Amount 44.0
- 사싱혜짙의학회지 재13권 째 3 효때1 -
上熱感, 面發꿇熱, 좀睡, 맘血, 調語, 發狂, 좋L쨌 둥의 중상과 I풋熱로 인한 피부 질환에도 다용된다 4-1)
최근 현대인들에게 Allergy 性 接觸皮!홉찢의 발병 빈도는 점차 늘어나고 있는 추세이며 8) 韓醫學에서 이 질환은 까擔 , 擔陽 , 孤lIJ< 刺, 花擔, 四빼風,jiji 없 둥과 유사하며9-11) 勝理가 不密한 신체상태 혹은 체질적인 素因이 있는 상태에서 風, 짧, 熱, 蟲이나 유독한 물질에 접촉되어 발생하는 것으로 보고 있 다.’
2.\)
皮!훨훌뽕‘에 대한 최근의 연구에 의하면 情熱解毒 시키는 方뽑 j 들이 抗Allergy 와 免훌反應힘l 制에 유의 한 효과가 있어 Allergy 性 皮빼族愚에 엄상적 활용가
능성이 있음이 보고되고16-26) 있으며 굉힘散火陽에
관한 실험적 연구로는 腦揚陽에 관한 연구21-29) ’ J:J 뺨 짧陽에 관한 연구30), 高血 및 高8읍血證에 관한 연 구31), 廳않病에 관한 연구32-33),
뻐滿효에 관한 연구씨
)
퉁이 있었으나 皮쩍族愚에 관한 연구는 없었다 . 이에 저자는 源隔散火陽이 때 ergy 性 接觸皮 I 협찢 에 미치는 영향을 관찰하기 위해 생쥐를 대상으로 실험을 해서 皮!협의 外形的 形態‘짧化,m 織化f 헝的 變化 , 免훨組織化쩔的 變化, 壞死細뼈의 分布 흉한化 를 觀察한 바 有흘、# 있는
*임果를 얻었기에 報깜하
는바이다 .
II. 를 앓
1. 材料
1)111 物
9읍點 4 주된 BALB/c 계 암컷 생쥐 ( 대한실협동물센 터, 한국) 를 無홉웹育裝웹內에서 2 주일동안 적웅시 킨 후 체중 20g 된 생쥐를 선별하여 사용하였다 .
Acecone 과 olive oil 만 처리한 대조群, dinitr 여uorobenzene
( 이하 DNCB 라 합) 처리를 통한 Allergy 性 接觸皮’!협
* 홉發群( 이하 ACD 群이라 함), DNCB 처리 후 &, 、隔 散火揚 抽出被 投與합 (°
1하 YST 뺨이라 합) 으로 나누 었다. 이를 다시 Allergy 性 f훌觸皮!홉갖 유발 후 시간 의 경과에 따라 24,48 그리고 72 시간으로 세분시켰 으며, 각 群에 10 마리씩 배정하였다 한편 접촉성 과 민반웅 측정올 위해 각 群에 별도로 10 마리씩 배정 하여 실험하였다.
2) 홉淚의 월造와 投훨
隔散火揚 πable 1.) 2첩을 중류수 1α)()
뼈에 넣 고 3시간 동안 뺀揚한 후 여과하였다. 그 뼈被올 원 심분리 시킨 후 rotary evaporator 로 농축하였다 농축 액을 陳結乾操하여 추출물 15.07g 을 얻었다. 源隔散 火揚 추출물올 YST 群에 Allergy 性 接觸皮!확갖 유발 후 매일 0.75 밍kg 씩 없; 用投與하였다.&, 隔散火없 의 처방구성 약물과 용량은 다음과 같다 I)
Table 1. 까'Ie M'aJnt ard Q:.rrf:x 정tioo of Yar 밍kyuk$nha\'<tang
E얘ract
2. 方法
1) DNCB 도포에 의환 Allergy 性 훌빼皮11 껏의 if.
作과뚫훌
Allergy 性 接觸&1협갖을 유발하기 위해 2,4-
DN α(Sigm ζ USA) 를 acetone 과 olive oil (4: 1) 혼합용 액에 5% 와 2.5% 로 희석한 다음 사용하였다 . 5%
DNCB 25 때를 연도된 오른쪽 샅바위쪽 복부 2 c미 에 쏠布하여 感fr 시켰다. 感fF 후 14 일째가 되었을 때 ACD 앓과 YST 群의 생쥐에게만 왼쪽 복부에 2.5%
DNCB 4 μe를 쫓布하여 Allergy 性 接觸皮 ! 쩍 올 훌용 發시켰다 한편 대조群에는 DNCB 가 포함되지 않은
acetone 과 이ive oil 혼합액을 1ti 하였다. Allergy 性 接
觸皮!홉씻 유발여부는 외부 피부휩없 확인을 통해
이루어졌다 .
2) 접혹성 과민E띔 혹정(Contact Hypersensitivity Assay)
ONα 感作 후 ACD 群과 YST 향에서 접촉성 과 민반용 측정을 실시하기 위해서 생쥐 오른쪽 귀에
- 조셰횡 외 1: 뼈뻐火훌이 찌뻐1JI ↑11i 톰Ill. ※애 미쳐는 톨-
2.5% DNCB 4μe를 짧布하여 Allergy 性 接觸皮I쩍찢을 뚫發시 켰다 . Allergy 性 接觸皮I훨찢 홉發후 24, 48 그 리고 72 시간에 오른쪽 귀의 두께를 이때 t비ckness
gage (Miruroyo, JAPAN) 로 측정 한 다음 ear swelling 명
균값올 구하여 각각의 차이를 비교하였다 .
3) 皮빼뼈훌 훔本 훨作
Allergy 性 接觸皮1월갖 유발 후 24,48 그리고 72 시
간의 각 群올 s 여lurn 야 ntobarbit 외 용액으로 마취한 후 vascular rinse 와 10% 중성 포르말린용액 (neutral
b‘Iffered formalin: NBF) 으로 심장관류고정을 실시하
였다. DNCB 쏠布부위에서 얻어진 피부는 실온의 10% 중성 포르말린용액에 24 시간동안 고정한 후 통 상적인 방법으로 p 없ffin 에 포매하고 5J.l111 두께로 연 속절연올 만들었다. 만들어진 연속절편은 뼈 natoxyline 과 eosm 으로 염색하여 표본올 제작하였다.
4) 뼈훌化훌的 쌓色
1.IE 반용에 관여하는 빠滿細뼈의 分布와 形態 쩔 化를 관찰하기 위해 Iμna's method 를 통한 組織化쩔 的 色올 실시하였다 우선 5J.l111 두께의 연속절연
올 에dehyde fu마Sin 에 30 분간 횟色한 후 Weigert' ’siron
hematoxylin 과 methyl or311ge 용액에 각각 I 분, 5 분 동
안 對照、혔色하였다. 血管生成 뺑化를 조사하기 위해 서 皮I쩍組織올 Wright 용액에 20 분 동안 횟色하는
Wright st외n 을 시행한 후 皮!회에서 나타나는 血管分
布를 관찰하였다 .
콜라겐섬유의 生成 分布 變化를 관찰하기 위해 서 VanGieson ’s picric acid-fuchs 띠 혔色을 시 행하였다
우선 Weigert
’s iron hematoxylin 에서 20 분 동안 횟色한
다음 VanGieson ’s 핫色형被에서 5 분간 혔色하였다.
5) 훌훌뼈i훌化훌的 쌓色
免BHIt 織化學적 色은 proteolytic digestion 과정 에
proteinase K (DAKO, Denmark) 를 사용하여 횟色性올
향상시켰으며, 그 결과 陽性k 應細뼈의 分布와 反應 件 變化를 좀 더 명확하게 관찰할 수 있었다.
(I) 免활細뼈
免15£ 細8셉의 分布와 形態 變化를 조사하기 위해서
Mac-I 에 대한 단클론항체를 이용한 免활組織化學的
혔色올 실시하였다 . 우선 절편은 proteinase K 에서 5 분 동안 proteolysis 과정을 거친 후 非特異的 免훌反 應올 억제하기 위해 10% blocking serum 인 normal
rabbit serum (Vector Lab., USA) 에서 1 시간 동안 반웅
시켰다 그리고 l차 항체인 rat anti-mouse Mac-I
(CDllb/CDI8 : Serotec, UK) 올 1:100 으로 椰釋하여 실
온의 hun 피빠ied 마amber 에서 24 시간 동안 반웅시켰 다. 그런 다음 2 차 항체인 biotinylated rabbit 때ti-rat
IgG (DAKO) 와 실온에서 4 시간 동안 반용시킨 후
aVI 이n biotin complex (ABC: Vector) 에 l 시 간 동안 처
리하였다 . 통상적인 방법으로 0.0125% 3,3 ’-
φ빼nobenzidine (DAB : Sigma, USA) 와 0.01%
hydrogen 야roxide 가 포함된 0.05 M tris-Hd 완충용액
(pH 7써에서 발색시킨 후 , hematoxylin 으로 對照榮色 하여 광학현미경으로 관찰하였다.
(2) Cycokine
Cycokine 의 變化를 조사하기 위해 IL-1J3 와 IL-2R-a 에
대 한 단클론항체 인 hamster 와1 디-mol 않 IL-I {3 (Serotec) 와
rat anti-mouse IL-2R-a (CD25R-a : Pharmingen, USA) 를
이용한免廠且織化學的 i'. 올 실시하였다. 실시방법 은 위에서 기술한 통일한 방법올 사용하였다.
(3) 細뼈附훌分子
細R생附홈分子의 分布 變化를 조사하기 위해
lCAM-1 과 VCAM-l 에 대한 단클론항체인 빼raa뼈bb바lπt
ant따t
VC다A뻐M-l (CDI 뼈06 : Serotec) 올 이용한 免훌組織化學的
횟色을 실시하였다 . 실시방법은 위에서 기술한 동일 한 방법을 사용하였다.
6) Apoptosis 훌化 판활
apoptosis 관찰을 위해 TUNEL 방법과 신호분자에
대한 免훌組織化學的 횟色을 시행하였다.
(1) πJNEL 방법
Apoptotic 細뼈의 分布變化를 조사하기 위해 in
Situ 야)()ptosis detection kit (Apoptag, Imergen, USA) 를 이용한 TUNEL (tennin 쇠 deoxynucleotid 때1Saferase-
mediated dUTP nick end-Iabe 파ng) 방법을 실시하였다.
먼저 組織 절면을 proteinase K (20 μg/ 뼈)에 5 분간
Group Iniriarion 24 48 nhÀ
CONTROL 373:!: 368:1: 10 370! 8 371:!:6
ACD 375:t6 440:!: 8 455:t13 439:1:9
YST 375:!:5 416:1: 5. 428:t 10. 403:!:5.
- 사상쩌짙의학회지 찌 13 권 쩨3 효때1 -
proteolysis 시 킨 다음 equilibration buffer 에서 20 초간
처리하였다 그런 다음 Strength T dT e따πIe (36 μe
T dT enzyme: 72 μR, reaction buffer) 올 처리하여 37'1:
의 hwnidified ch 때IDer 에서 1 시간 동안 반웅시킨 후
strength stop/wash 빼ffer 에서 10 분 정도 처리하였다
Anti 해go 잉genin-peroxi φ풍에 l 시간 동안 반용시킨 후
0.05% D뼈를 처리하였다. Methyl green 으로 對照、핫
色한 후 광학현미경으로 관찰하였다 .
(2) 야)()ptos 얀 신호분자의 免훌組훌훌化훌的 色
Apoptl ∞잉 신호분 ;At 들의 變化를 조사하기 위해서
&1-2, Bax 그리고 F싫 둥에 대 한 단클론항체 인 rabbit
ami-mouse BcI-2 (pharmingen), rabbit ami-mOl 잉e Bax
(Pharmingen) 그리고 hamster ami-mouse Fas (<D95
Serotec) 를 이용한 免훌組織化쩡的 혔色을 실시하였
다. 실시방법은 위에서 기술한 동일한 기법의 免훌 組織化學的 色올 하였다
7) 映홉分析과 훌훌f훌훌
免훨組織化學 결과의 수치화를 위해 Optimas 5.2
(Optima Co., USA) 를 이용한 映像分析 (image
an 외ys 잉) 올 실시하였다 映像分析 結果는 Sigma
Plot 4.0 (Sigma) 을 통한 student T test 로 有풍、性을
검증하였다 .
III. 成 월
1. 접촉엉 과민반융 측정
(Contact Hypersensitivity Assay)
Ear swelling 결과 aceton & Olive oil 용액만올 쏠布
한 對照、群생쥐에서는 오른쪽 귀 두께 쩔化가 실험 기간 동안 관찰되지 않은 반면, Am 群과 YST 群은 對照、群과비해 有意# 있는 두께 증가를 보였다
(Table 2., Fig. 1.).
우선 Am 群에서는 때 ergy 性. 接觸皮I훨갖 유발 후 24 시간이 경과했올 때 오른쪽 귀의 두께는 440 土8
띠n로 對照、群의368 土10 때에 비해 증가된 양상을 보 였다 이러한 증가는 48 시간이 되었을 때 455:1:13 JI1Il
으로 가장 높은 증가를 보이는 것으로 관찰되었다.
그러나 이러한 증가도 72 시간이 되었올 때에는 오
히려 439 土9 때으로 약간 城少되는 경향성올 보였으 나, 여전히 對照、群에비해서는 중가된 것으로 나타 났다 (Table 2, Fig. 1).
한연 따、隔散火陽추출물올 투여한 YST 群도 실험 기간동안 對照群에 비해서는 귀의 두께가 증가된 것으로 나타났지만,Am 群에 비해서는 有意性 있는 뼈少 경향올 전 실험기간 동안 관찰할 수 있었다
(P<0.05). Allergy 性 接觸皮I웰찢 유발 후 YST 群의 귀
의 두께는 24 시간에 416 야 따 48 시간에는 428:1:10
JI1Il, 그리고 72 시간에는 403:t5 때로 측정되었다
(Table 2, Fig. 1).
Table 2. The Inhibition Effect 이 Ear SWelling in Mice
administered Yang 애uksanhawtang Extract after
AllerQic Contact Oermatrtis (ACO) 티|
α떠ltion.
unlr : J.IlD
< Abbreviarion >
M :I: S.D : Mean :!: srandard Deviarion
CONTROL: Acerone & olive oil only neared mice' ACD :
Allergic Conran Dermariris elicirared mice
YST: Y:때양yuba 빼쩌tang extraCtS 때띠파cered mice after allergic
comact dermariris 바cirarion .: P < 0.05 CO{빼I떠 v.irh ACD
The mean of ear swelling began ro increase and reach a peak
ar hour-48 after ACD eliciration. The ear swelling in mice rreared
wirh YST exrract noticeably decreased rhao ACD elicirared mice
for exper 띠lenr 외 period and r싸s inhibirion had probabiliry in
P<0.05 of srudenr T resr.
..,.i
..1i
융췄쫓맺
Fig. 1. The inhibrtion effect 이 ear swelling in mi∞
administered YST extract after AGO elicrtation. 깨e
mean 이 없 r swelling be 맹n to Inαease a때 reach
a peak at hour-48 after AGO eli여tauon. The ear
swelling in mi ∞ treated 에h YST extract noul ∞ably
mitigated than AGO elicrtated mi ∞ for experiment 외
pen< 피.
Group Initiation 24 48 nhÀ CONTROL
ACD + ++ +
YST ± + t
Group Ini &It!·`atµion 24 48 72 hrs
CONTROL
ACD + ++ +
YST t + ±
- 조셰왕 외 1 : 훌빼뼈火빼이 때erg)' 性Ii 톰m. ※예 미치는 &톨-
< Abbreviation>
CONTROL: Acetone & olive oil only treated mice
ACD : Allergic Contact Dermatitis elicitated mice
YST : Yangkyuksanhawrang extracts administered mice
aftet allergic contact dermatitis elicitation
-0- : CONTROL -ι ACD -0- : YST
2. 皮II 의 外形的 形$훌 훌化
對照群에서는 정상적인 皮! 협 상태가 실험기간동 안 유지되었다 . 그러나 ACD 群과 YST 群은 다른 양상 으로 관찰되었다. 우선 ACD 群에서 Allergy 性 接觸Hi f뼈찢 유발 후 24 시간이 경과되었을 때 붉은 좁쌀 形 態의 紅없性 IT 珍이 일부 DNCB 도포부위에서 나타 나는 皮I협휩傷이 시작되었으며 , 48 시간이 경과되었 올 때는 그 생성부위가 확산된 모양으로 관찰되었 다. 그러나 외형적 ffil 업협傷은 72 시간이 되었올 때 48 시간보다는 약화되는 것으로 나타났다. 한편 YST 群에서 나타난 외형적 皮!혐혐傷 變化는 ACD 群과 유사한 경향으로 나타났으나 YST 群의 皮!협협傷 정 도는 ACD 함보다는 완화된 것으로 관찰되었다.
Table 3. The 대ange of Skin-Damage on YST Extarct
aαninistered Mi∞ after ACD Elicrtation.
< Abbreviation>
negative, :!: : trace, + : moderate, + + : strong
CONTROL: Acetone & olive oil only treated mice' ACD :
Allergic Contact Dermatitis elicitated mice' YST
Yangkyuksanhawtang extracts administered mice after allergic
COntact dermatitis elicitation
After ACD elicitation, the degr 앉 of erythema began to increase
and reach a peak at hour-48. The degree of erythema in mice
treated with YST extract noticeably soften than DNCB treated
group for experimental peri 여
3. 皮II 組훌의 윌반적민 形$훌 훌化
對!센향은 실험기간동안 皮f쩍 組織의 形態 變化가 관찰되지 않았다 . 이에 반해 ACD 群과 YST 縣은 對照 群과는 달리 Allergy 性 接觸皮 f 협찢 유발 후 시간의 경과에 따른 皮I협휩傷의 차이가 관찰되었다.
Allergy 性 接觸&J 홉
* 유발 후 ACD 群의 皮f쩍組織 에서 나타나는 變化는 48 시간에서 가장 심한 것으 로 관찰되었다 이러한 변화는 우선 表皮에서 角質
Table 3. 끼le Change of Skin-Damage on YST Extarct
administered Mice after ACD Elicitation.
< Abbreviation>
negative, :t : trace, + : m 여erate, + + : strong
CONTROL Acetone & olive oil only treated mice ACD :
Allergic Contact Dermatitis elicitated mice' YST
Yangkyuksanhawrang extracts administered mice after allergic
contact dermatitis elicitation
After ACD elicitation, the degree of erythema began to increase
and reach a peak at hour-48. The degree of erythema in mice
treated with YST extract noticeably soften than DNCB treated
group for ex 야rimental period.
形成細뼈 (keratin αyte) 의 過形成 (hy 야rplasia) 으로 인 한 皮f협 상피층수의 급격한 증가 (Fig. 2), 基I훌層의 핍]柱上皮細뼈와 基底板의 결합이 파괴된 공간으로 침윤{i 벼Itration) 허는 립프구의 증가가 확인되었다
(Fig. 4 ). 또한 可빼層과 흉底層 사이에서 核의 수축
으로 인한 셜廳과 세포질사이공간의 확장된 上皮細 뼈의 증가와 세포사이공샌inte πell 띠 at space) 의 확장이 관찰되었다 (Fig. 3). 한편 表皮쪽 힐皮에서는 갖:1lE 빼與 細R힘의 DNCB 도포부위로의 移fi:<migrarion) 증가와 혈 관 증가가 관찰되었다 (Fig. 4, 5). 이러한 짧化는 72 시 간이 되었을 때는 완화되는 것으로 관찰되었다 한편 YST 群에서의 形態變化도 ACD 群과 유사한 경향성을 보였으나, 전반적으로 DNCB 에 의한 Allergyt:!: 接觸皮
!휩찢이 약화된 양상으로 나타났다 특히 이러한 皮댐
組織 행傷의 완화는 48 시간의 皮I 홉上皮에서 잘 나타 났는데 ACD 합보다 表皮細뼈의 過形成 減少, 침윤히는 림프구의 수의 減少, 表皮 떠l柱上皮細R힘 웹傷減少 그 리고 세포사이공간의 회복 둥이 관찰되었다 (Fig. 6).
또한 힐皮에서 tEf 빼與細R힘의 침윤 減少와 혈관수의 減少가 확인되었다 (Fig. 이
4. 皮빼 組훌의 組훌化톨的 훌化 1 ) 률皮內 HE홉細뼈의 形o 와 分홉 훌化
對照합은 실험기간동안 皮I홉 組織內 H잉滿細뼈의 形態와 分布 變化가 관찰되지 않았다
ACD 뺨에서 나타나는 뾰滿細뼈의 分:;(fi 變化는
Allergy 件 接觸皮I휩찢 유발 후 시간이 경과할수록 下
&’쪽 현皮에서 수가 증가하는 것으로 관찰되었고
- 사상혜짙의회회지 째 13 권 재3 효 2001 -
(Fig. 7), 탈과립 형태(degranulated type) 와 과립 형태
(gran 띠 at 어 type) 의 두가지 形態로 나타났다 . 그리고
과립 형태의 8뀐滿細뼈가 특히 48 시간에서 많이 관 찰되는 것으로 확인되었다.
YSI 群도 Am 群과 같이 때 ergy 性 接觸皮I홉찢 유발 후 시간의 경과에 따른 증가경향은 유사하였지만 Am
群보다는 적은 수였다 (Fig. 8). 특히 YST 群에서는 탈과 립 형태의 DEiI 휩細8밍 출현이 Am 群보다는 적었다.
2) 皮빼內 血홈 生成 훌化
對照、향은실험기간동안 皮!확 組織내 血管分布의 했化가 관찰되지 않았다 .
A( 끄群에서 Allergy 性 接觸皮’!협찢 유발 후 모세혈
관 수의 증가가 興皮흙碩에서 관찰되었으며 직경이 큰 혈관의 출현도 잦았다 (Fig. 9). 表皮 上皮쪽으로 혈관생성이 진행되어 많은 혈구가 세포사이공간에 침적되어 있는 것올 확인할 수 있었다. 이러한 變化 는 48 시간에서 두드러진 것으로 관찰되었다.
YST 群에서는 ACD 합보다는 적은 혔化 즉, 직경이 작은 혈관이 주로 관찰되었으며 그 수도 ACD 뺨에 비해 적었던 것으로 확인되었다 (Fig. 10).
3) 皮빼內 훌라겐섬유 分布 훌化
對照、群은실험기간동안 皮!쩍 m織內 콜라겐섬유 의 分;(fi 變化가 관찰되지 않았다.
ACD 群에서 때 ergy 性 接觸皮!협찢 유발 후 表J:ti.1Jt'j
따皮에서 콜라겐 섬유의 分布 減少가 관찰되었다
(Fig. 11). 특히 이 콜라겐섬유분포지역에서는 콜라겐
섬유가 많은 모세혈관 주변에 위치하였다
YST 群에서는 對照群과 유사한 콜라겐섬유의 分 布가 관찰되었다 (Fig. 12).
5. 皮II 의 훌훌뼈i훌化훌的 훌化 1) 훌훌細뼈의 훌化
對照群은 실험기간동안 皮!협 짧織써 Mac-l 陽性
反應細뼈의 分布 쩔化가 관찰되지 않았다
ACD 群에서는 때 ergy 性 接觸皮 ! 쩍찢 유발 후
Mac-l 陽性反應細뼈는 對照、群의휠皮￥t頭와 세앙층
의 혈관주변에서 다수 관찰되었다 (Table 4, Fig. 13, 14). 반연 YST 群은 對照、群에비해 陽性反應細뼈의 수가 적었고, 주로 세망충의 혈관주변에서 관찰되었
다 σable 4, Fig. 15).
2) Cvtokine 의 훌化
對照앓은 실험기간동안 皮1월 組織내 D..- IP 陽t'£
反應細뼈의 分布 쩔化가 관찰되지 않았다.A α群에
서는 Allergy 性 接觸皮I홉찢 유발 후 1L-IP 陽性反應 細뼈는 對照群의 힘皮 전 부분에서 다수 관찰되었 다 (Table 4, Fig. 16). 특히 강한 陽性反웹을 보이는 큰 細8잉質을 가진 陽性反應細 8힘는 주로 따皮좋L頭에 分꺼i 하였다. 반면에 YST 합은 陽性反應細뼈의 수가 對照、합에비해 적었으며, 합皮 $I. 頭에서는 陽性反應 性이 약했다 (Table 4, Fig. 17).
對照群은 실험기간동안 皮I협 組織내 IL-2R-Q 陽性 反應細뼈의 分자i 쩔化가 관찰되지 않았다. ACD 群에 서는 Allergy 性 接觸皮 I 험 유발 후 휩皮에 分布하는
IL-2R-Q 陽性反應細뼈는 對照、함에서다수 관찰되었
다. 특히 f더없된 表Ei 基底} 함 주변에 分布하는 亞細 뼈 形態의 陽性反應細뼈에서 강한 陽性反應을 보였 다 (T ψIe 4, Fig. 18) 반연 YST 함에서는 ACD 群에 비 해 陽性Ii 應細9밍의 수는 적었고 , 약한 陽性反應# 올 보였다 (Table 4, Fig. 19).
3) 細뼈附훌分훈의 훌化
對照、양은실험기간동안 皮! 쩍 m織內 ICAM-I 陽 性反應、細뼈의分,(Ii 했化가 관찰되지 않았다. ACD 압 에서는 Allergytf. 接觸皮! 윌찢 유발 후 휩照‘합의 따Ei
혈관주변에서 많은 수의 ICAM-I 陽性反應細뼈가 관 찰되었다 (Table 4, Fig. 20). 이에 반해 YST 깎에서는 ACD 詳보다 적은 수의 ICAM-I 陽性反應細뼈가 따皮 의 혈관주변에서 관찰되었다 (Table 4, Fig. 21).
￥J照양은 실험기간동안 &1홉 ID 熾內 VCAM-I 陽 性 & 應細뼈의 分꺼i 짧化가 관찰되지 않았다. ACD 群 에서는 Allergy 性 接觸皮I협찢 유발 후 VCAM-I 陽t'4=
)j( 應細뻐는 휩照縣에서 따El 의 혈관주변에서 다수
나타났다 (Table 4, Fig. 22). 반면에 YST 짧에서는 일
부 (fJ.& ’에서 적은 수가 관찰되었다 (Table 4, Fig. 23).
6. 皮떼의 細뼈消減 (apoptosiS) 훌化 1 ) 훌死細뼈의 分布 훌it
對照群은 실험기간동안 皮I홉 I:I 織內 慶死細뼈의 分써j
變化가 관찰되지 않았다 Allergy 性 接觸皮 ! 협찢
CONTROL Am YST Antibody
particle intensity particle tOteRSIÇt particle intensity
Mac-1 342t12 134.4:1:24.3 7305:t 54 123.4:t23.9 1049:t23* 126.6:!27.2
매u 532:t11 136.2:1:13.5 2982:t 32 125.3:t24.5 151 \:t12* 134.6:t23.9
1L-2R-u 1745:t42 131.5:t 12.9 22440:t356 115.3:t26.6 8717:t24* 127.4:t21.2
lCAM-1 1243:t58 135.7:!:24.8 12724:1:213 121.6:t24.6 6849:t45* 127.9:t22.0
VCAM-I 453tl2 134.6:1: 13.2 3678t 9 122.1 t25.5 1254:t34* BI.ltl9.9
Antibody CONTROL ACD
particle Intensity particle intensIty
TUNEL 32:t19 137.4:t26.2 2567:t 34 127.5:t22.3
BcI-2 1762W45 BU:t 12.7 1057:t37 129.9:1:21.4
Bax 995t32 129.5:1:21.5 3 75:t76 117.9:1:26.1
fas 675:t23 136.4t20.5 9193:1:84 127.6W21.3
- 조세왕외 1: ;*111 火훌이 씨!ergy ↑호}
훌톰. ※에 미치는 . -
Table 4. The lIT녕Qe Analysis of Immun 때istochemistrv in S애n elicitated ACD
(an 에ysis for 200000 particles / range of intensity: 50 - 150)
< Abbreviation>
M :t S.D : Mean :t Standard Deviarion
CONTROL: Accrone & olive oil only treated mice' ACD : Allergic Contact Dermatitis elicitated mice' YST : YangkyuksanhaWtang extracts
찌ministered mice alter allergic cOntact dermatitis elicitation' Mac-I: Macrophage-I' IL-1j3 : Interleukin-113 .IL-2R-u : Interleukin-2R-
u'ICAM-1 : Intercellurar Adhension Molecule-I' VCAM-1 : V싫αJar Adhension Molecule-I ‘ : P < 0.05 compared with Am.
T때’e 5. The lmaoe Analysis 이Apoptosis in S애n elicrtated ACD.
YST
--- n‘
-t、 /
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l‘
…“-”κ -요써써”“ιι셔 /AUh”
n“ nι 5 κp-m
mω
%
intensIty 132.9:1:19.4 120.3:1:26.4 124.2:t24.8 127.5t21.0
(analysis for 250000 particles / range of intensity: 50 - 150)
< Abbreviation>
M :t S.D : Mean :I: Standard Deviation
CONTROL: AcetOne & olive oil only treated mice
Am : Allergic Contact Dermatitis elicitated mice
YST : YangkyuksanhaWtang extracts a마nin 잉te πd mice after allergic contact dermatitis elicitation
TUNEL : Terminal Dcoxynuclcotid Transaferase-mediated dUTP Nick End-Labelling
‘ : P < 0.05 compared with ACD
유발 후 짧7 細뼈는 Am1 洋의 1<& ’와 fM&’에서 다수 分씨 i 하였다 (Table 5, Fig. 24). 앓死細뼈의 lκ態는 陽 t'F.
J5i.1ffE 이 핵막을 경계연으로 때形으로 나타났고 , 核씨
%에서 강한 陽性 )j( 應을 보였다 (Fig. 25). YST 따에서 는 ￥↓쁘HI￥에 비해 表皮와 따皮에서 陽性 &. 應細R잉 수 가 적었다 π able 5, Fig. 26). 이 러한 減少는 表 h 상 훌
II'J 과 (tV5/. ’의 찢 tF. 細n 셈 협쐐地域에서 잘 관찰되었다 .
2) 細뼈消減 신호분자의 훌化
휩WM뿜은 실험 기간동안 皮!협 빠l織} 셔 BcI-2 陽t'F.&
應細뼈의 分꺼]
變it 가 관찰되지 않았다. Allergy 性 接 觸皮! 협갖 유발 후 BcI-2 陽性反應細뼈는 힐皮 細網層 에 分찌i하였다. Am 뺨보다는 YST 群에서 陽性反應細
H힘가 더 많이 관찰되었다 π'able 5, Fig. 27, 28)
웠W.1 양은 실험 기간동안 皮!홉 쩌l織써 Bax-2 없
*μ
應細뼈의 分깨"1 1t 가 관찰되지 않았다. Allergy 性 f훌 觸 h 상! 협찢 유발 후 Bax 陽함.反應細뼈는Am1 양의 ! 펀싸 전지역에서 다수 관찰되었으며 (Table 5, Fig. 29), 강한 陽性k 應을 보였다. 반면에 YST 휴에서는 陽t't& 應細
O셈의 수가 對照、뺨에 비해 적었다 (Table 5, F빙. 30).
對}照은 실험기간동안 皮I 협 *11 熾內 Bax-2 陽件 反應細뼈의 分꺼l 짧化가 관찰되지 않았다. Allergy 性
接觸及’I협찢 유발 후 ACD 않의 WU5/. 뚱LM에서 많은
수의 Fas 陽性反應細뼈가 관찰되었다 (Table 5, Fig
31). 일부 表&’細n 셉의 核 주변에서는 약한 陽tt& 應
性을 보였다. 반면 YST 뿜에서는 對!빡群보다는 적은 수의 陽性反應細뼈가 관찰되었으며 , 대부분 약한 陽 性反應性올 보였다 (Table 5, Fig. 32).
