선천성고혈압 흰쥐에서 두릅 에탄올 추출물의 항고혈압 작용에 관한 연구

碩 士 學 位 論 文

선 천 성 고 혈 압 흰 쥐 에 서 두 릅 에 탄 올 추 출 물 의 항 고 혈 압 작 용 에 관 한

연 구

濟 州 大 學 校 大 學 院

獸 醫 學 科

朴 恩 惠

2004年 6月

선 천 성 고 혈 압 흰 쥐 에 서 두 릅 에 탄 올 추 출 물 의 항 고 혈 압 작 용 에 관 한

연 구

指 導 敎 授 李 榮 載

朴 恩 惠

이 論 文 을 獸 醫 學 碩 士 學 位 論 文 으 로 提 出 함

2004 年 6 月

朴 恩 惠

의 獸 醫 學 碩 士 學 位 論 文 을 認 准 함

審 査 委 員 長 委 員 委 員

濟 州 大 學 校 大 學 院

2004年 6月

목 차

Ⅰ . 서 론 ··· 1

Ⅱ . 재 료 및 방 법 ··· 4

Ⅲ . 결 과 ··· 8

Ⅳ . 고 찰 ··· 19

Ⅴ . 결 론 ··· 23

Ⅵ . 참 고 문 헌 ··· 25

T he A ntihypertensive E ffects of E thanol E xtracts of A ralia E lata seem an and A m lodipine in Spontaneously H ypertensive

R ats.

E un-H ye Park

(supervides by professor Y oung Jae-Lee)

D epartm ent of V eterinary M edicine, G raduate School, C heju N atinal U niversity, Jeju, K orea

A bstract

T he antihypertensive effects of ethanol extracts of A ralia elata seem en (A E) and am lodipine besylate (A m ) w ere investigated in the spontaneously hypertensive rats (SH R ). SH R aged 14 w eeks w ere treated for 8 w eeks either w ith A E (5, 10 m g/kg per day) or am lodipine besylate (10 m g/kg per day) orally. H ypertension causes injury to several organs, produced significant increases of m alondialdehyde (M D A ) content as a result of lipid peroxidation and endothelial dysfunction. In this study, oral adm inistration of A E and A m significantly reduced

systolic blood pressure, total urinary protein, organ hypertrophy and M D A content in tissues, w hile increased significantly urinary and plasm a nitrite and nitrate (N O x) concentration. T he endothelium -dependent relaxant activities of acetylcholine (A C h, 10^-10 -10^-3 M ) in norepinephrine (N E)- precontracted aorta w ere increased in A E and A m treated anim als. Especially strong endotheilium -dependant relaxant activities w ere observed in the A E (50m g/kg) treated anim als. T he endothelium -independent relaxant activities of sodium nitroprusside (SN P, 10^-10 -10^-3 M ) in N E-precontracted aorta w ere not changed. T hese results suggested that A E have an antihypertensive effects and end-organ protective effects in SH R . T hese effects of A E have sim ilar activities of A m , an established antihypertensive agent.

K ey w ords : A ralia elata Seem . H ypertension, A m lodipine, Spontaneously hypertensive rats, N itric oxide

Ⅰ . 서 론

고혈압은 만성순환기계 질환 중 가장 발생빈도가 높은 질환으로, 본태성 (또는 일차 성) 및 속발성 (또는 이차성) 고혈압으로 분류되며, 고혈압 환자의 대부분은 원인을 규 명하기 어려운 본태성 고혈압환자로 알려져 있다. 고 혈 압 은 특 별 한 자 각 증 상 이 없 이 진 행 되 지 만 심 장 비 대 , 뇌 졸 증 , 신 부 전 , 동 맥 경 화 증 등 치 명 적 인 합 병 증 을 유 발 할 수 있 기 때 문 에 보 다 적 극 적 인 관 리 와 치 료 가 요 구 되 는 질 병 으 로 알 려 져 있 다 (김 호 철 등 , 1999; Y oichi Inada 등 , 2001). 혈압은 혈관에 흐르는 혈 액의 압력으로 심박출량과 말초 혈관저항의 변화에 의하여 조절된다. 따라서 고혈압은 심박출량의 증가 또는 말초혈관 저항의 증가를 유발하는 복잡 다양한 인자에 의하여 유발될 수 있다. 심박출량의 증가는 교감신경의 흥분성 증가에 의한 것과 신장의 염분 배설의 이상에 의한 염분저류로 인한 체액의 증가 등이 원인으로 알려져 있으며, 혈관 저항의 증가는 혈관의 수축에 의하여 발생하고 혈관 수축은 혈관 수축물질의 증가, 혈 관 확장물질의 감소, 교감신경계의 항진, 세포막이상에 의한 세포내 칼슘 증가 등이 그 원인으로 제시되고 있다.

혈 관 내 피 세 포 는 혈 관 의 긴 장 도 와 혈 소 판 기 능 에 큰 영 향 을 주 는 물 질 endothelium -derived reaxing factor (E D R F)와 같 은 이 완 성 물 질 또 는 endothelin과 같 은 수 축 성 물 질 을 계 속 적 으 로 유 리 한 다 . Furchgott와 Zaw adzki(1980)는 acetylcholine에 의 한 혈 관 이 완 이 내 피 의 존 성 을 나 타 내 며 , 이 것 은 E D R F 라 명 명 된 인 자 에 의 해 매 개 된 다 는 것 을 밝 혔 다 . 후 에 ED RF는 많 은 연 구 자 들 에 의 해 nitric oxide (N O )와 동 일 함 이 증 명 되 었 다 (M oncada 등 , 1989; Ignarro, 1989; Palm er 등 ,1987). nitric oxide는 N O synthase (N O S)에 의 하 여 L-arginine으 로 부 터 생 성 되 어 세 포 내 cyclic G M P level을 증 가 시 켜 혈 관 평 활 근 을 이 완 시 킨 다 (Ignarro, 1989). 혈 관 내 피 세 포 의 기 능 이 상 은 좌 심 실 의 비 후 와 더 불 어 동 맥 혈 관 성 고 혈 압 의 주 된 특 징 으 로 알 려 져 있 다 . 실 제 로 실 험 동 물 에 서 내 피 의 존 성 이 완 물 질 에 관 련 된 유 전 인 자 를 제 거 하 거 나 , 또 는 N O synthase 억 제 제 를 투 여 하 면 혈 압 이 상 승

(Shesely 등 , 1996)하 게 되 며 , 신 장 혈 관 의 수 축 및 혈 류 의 감 소 , 신 부 전 증 , 요 배 출 량 및 사 구 체 여 과 율 등 의 감 소 하 게 된 다 (K ang 등 , 2002). 또 한 인 간 의 본 태 성 고 혈 압 과 유 사 한 발 현 양 상 을 보 이 는 선 천 성 고 혈 압 쥐 (SH R) 에 서 도 내 피 의 존 성 이 완 반 응 이 정 상 혈 압 동 물 에 비 하 여 억 제 되 어 있 다 고 알 려 져 있 으 며 (Y am ori와 O kam oto 등 , 1974; 전 병 화 등 , 1999), 고 혈 압 치 료 제 를 투 여 시 심 장 비 대 , 사 구 체 신 염 , 신 장 동 맥 경 화 , 신 부 전 으 로 인 한 전 신 성 부 종 이 완 화 되 었 다 는 보 고 가 있 다 (Y oichi 등 , 2001). 특 히 SH R 에 서 혈 관 내 피 세 포 의 산 화 적 손 상 은 고 혈 압 을 유 발 하 는 주 요 인 자 로 알 려 져 있 으 며 (N akazono 등 , 1991; T schudi 등 , 1996), 이 에 따 라 산 화 적 손 상 에 의 해 조 직 내 m alon dialdehyde량 이 증 가 하 게 되 며 , 항 산 화 제 에 의 하 여 이 를 감 소 시 킬 수 있 음 이 보 고 되 어 있 다 (H ana 등 , 1999).

현재까지 알려진 고혈압치료제는 약리기전에 따라 Ca²⁺-channel 차단제, angiotensin converting enzyme (ACE) 저해제, β-수용체 차단제, α-차단제, angiotensinⅡ 수용체 차단제 및 이뇨제 등으로 분류 된다 (Siegel 등, 1998). 현재 국내 에서 가장 많이 사용되고 있는 고혈압 치료제의 하나인 Norvasc^Ⓡ (amlodipine besylate)는 제3세대 dihydropyridine 계 칼슘 길항제로 우수한 조직 선택성과 긴 반감 기 및 서서히 혈압을 강하시키는 장점이 있어 하루에 한번만 취할 수 있는 편리성이 인정되고 있다 (Burges et al., 1989). 그러나 현재까지 개발되어 사용되고 있는 대부분 의 고혈압치료제는 서로 다른 약리 작용과 부작용을 가지고 있으므로 사용상에 주의를 가져야 함은 물론이며, 특히 대부분 평생 복용해야 하는 문제가 있기 때문에 그 효과와 안전성 면이 특히 강조되고 있는 실정이다.

한편 자생식물은 오래 전부터 민간에서 약용 등으로 사용되어온 예가 많아 사용에 따른 부작용의 위험성이 비교적 적으며, 화학합성에 의한 약물개발과는 달리 새로운 약 리 활성물질을 찾을 수 있는 가능성이 클 것으로 기대된다.

두릅나무 (A ralia elata Seem en)는 두 릅 나 무 과 (A raliaceae)에 속 하 는 낙 엽 활 엽 관 목 으 로 예 로 부 터 한 방 , 민 간 요 법 , 식 용 등 으 로 이 용 되 어 져 왔 으 며 (이 은 방 등 , 1993), 혈 당 저 하 효 과 (Y oshikaw a 등 , 1994, 1995, 1996b; 이 은 방 등 , 1993), 알 콜 흡 수 저 해 효 과 (Y oshikaw a 등 , 1993, 1996a), 세 포 보 호 효 과 (Saito 등 , 1993), 위 염 및 위 궤 양 에 대 한 효 과 (이 은 방 과 정 춘 식 , 1993;

H ernandez 등 , 1988), 당 뇨 병 에 대 한 효 과 (김 영 희 와 임 정 교 , 1999) 등 이 보 고 되 었 다 . 특 히 최 근 에 는 두 릅 추 출 물 에 서 흰 쥐 대 동 맥 혈 관 평 활 근 이 완 효 과 (주 창 완 ,2002)와 선 천 성 고 혈 압 쥐 에 서 항 고 혈 압 효 과 가 (진 주 연 , 2002, Ju-youn Jin and Y oung-jae Lee,2003) 보 고 되 었 다 .

따 라 서 본 연 구 에 서 는 두 릅 나 무 의 에 탄 올 추 출 물 을 SH R 에 투 여 하 여 혈 압 의 변 화 , 심 장 및 신 장 등 장 기 비 대 , 산 화 적 손 상 , 혈 관 내 피 세 포 기 능 이 상 의 변 화 를 관 찰 하 고 그 결 과 를 am lodipine과 비 교 하 여 항 고 혈 압 약 물 로 서 의 개 발 가 능 성 을 모 색 하 였 다 .

Ⅱ . 재 료 및 방 법

1 . 실 험 동 물

실 험 동 물 은 14주 령 의 웅 성 선 천 성 고 혈 압 쥐 (spontaneously hypertensive rats. SH R )를 (주 )대 한 바 이 오 링 크 사 로 부 터 구 입 하 여 일 주 일 간 순 화 시 킨 후 실 험 에 사 용 하 였 다 . 사 료 와 물 은 자 유 롭 게 공 급 하 였 으 며 , 명 암 주 기 가 12시 간 단 위 로 조 절 되 는 실 험 동 물 실 에 서 사 육 하 였 다 .

2군 의 두 릅 나 무 에 탄 올 추 출 물 투 여 군 (10 m g/kg, 50 m g/kg)과 am lodipine 투 여 군 (10 m g/kg) 및 대 조 군 (5% D M SO ) 등 4개 의 군 으 로 나 누 어 1일 1회 8주 간 경 구 투 여 하 였 다 .

2 . 시 료 의 추 출 및 분 획 화

두 릅 나 무 (A ralia elata Seem en, A E )는 2003년 5월 중 순 에 서 6월 경 에 제 주 도 한 라 산 에 서 채 취 하 여 실 험 에 사 용 하 였 다 . 시 료 를 채 취 하 여 음 지 에 서 건 조 시 킨 후 미 세 하 게 잘 라 서 10배 부 피 의 95% 에 탄 올 을 가 하 여 침 출 시 킨 후 상 등 액 을 여 과 하 고 회 전 농 축 기 로 농 축 하 여 건 고 물 (에 탄 올 추 출 물 )을 만 들 었 다 . 에 탄 올 추 출 물 은 dim ethyl sulfoxide (D M SO )에 녹 인 후 생 리 식 염 수 로 희 석 하 여 D M SO 농 도 가 최 종 5% 이 하 가 되 게 하 여 실 험 에 사 용 하 였 다 .

3 . 수축기 혈압과 심박수 측정

혈 압 은 간 접 법 (tail cuff m ethod)으 로 매 주 측정 하 였 다 . tail cuff와 pulse transducer (M LT 1050, A D instrum ents, U .S.A .)를 꼬 리 에 위 치 시 키 고 ,

pulse transducer는 physiograph recorder에 연 결 하 여 혈 압 을 측정 하 였 다 . 혈 압 측정 전 모 든 실 험 동 물 은 36℃ 로 조 절 된 w arm ing box 내 에 서 15-20 분 간 안 정 화 를 취 한 후 수 축 기 혈 압 을 측정 하 였 다 . 심 박 동 수 는 맥 박 에 서 나 온 신 호 를 C hart4 for w indow s program (A D instrum ents, U .S.A .)으 로 분 석 하 였 다 . 각 군 의 실 험 동 물 에 약 물 을 경 구 투 여 한 후 6시 간 째 의 혈 압 을 측정 하 였 다 .

4 . 장 기 의 중 량 변 화

실 험 최 종 일 모 든 실 험 동 물 을 경 추 탈 골 법 에 의 하 여 희 생 시 키 고 , 복 대 정 맥 으 로 혈 액 을 채 취 하 였 으 며 , 심 장 , 간 , 신 장 , 뇌 등 을 적 출 하 였 다 . 장 기 의 중 량 변 화 를 보 기 위 하 여 각 각 의 장 기 를 적 출 하 여 무 게 를 측정 하 고 실 험 동 물 의 체 중 으 로 나 누 어 나 온 값 을 각 각 비 교 하 였 다 .

장 기 무 게 지 표 (organ w eight index) = 장 기 무 게 (organ w eight) / 체 중 (body w eight)

5 . 요 단 백 검 사

실 험 동 물 을 대 사 케 이 지 에 24시 간 동 안 두 어 오 줌 을 채 취 하 였 다 . 요 단 백 은 B radford 법 (1976)으 로 측정 하 였 다 . B ovine serum album in을 표 준 시 약 으 로 사 용 하 였 으 며 , 요 중 단 백질 배 설 량 은 m g/day로 나 타 내 었 다 .

6 . 혈 장 과 뇨 에 서 N O x 농 도 비 교

혈 액 을 ED T A 가 포 함 된 시 험 관 에 채 취 해 원 심 분 리 하 여 혈 장 을 분 리 하

였 으 며 , vanadium (Ⅲ ) chloride (V C l3)를 가 하 여 , nitrate를 nitrite로 변 환 시 킨 후 nitrite의 농 도 를 측정 하 였 다 (M iranda, 2001). 즉 , 혈 장 에 2배 부 피 의 에 탄 올 을 가 하 고 , 3000 rpm 으 로 10분 동 안 원 심 분 리 하 여 단 백질 을 제 거 하 였 다 . 상 층 액 100 ㎕ 에 G riess reagent인 sulfanilam ide(SU LF)와 N -(1-naphthyl)ethylenediam ine (N E D D )를 각 각 50㎕ 씩 넣 고 , vanadium (Ⅲ ) chloride (V C l3)를 100㎕ 넣 었 다 . 37℃ 에 서 3시 간 동 안 반 응 시 킨 후 570 nm 에 서 흡 광 도 를 측정 하 였 다 . 뇨 의 N O x 농 도 도 같 은 방 법 을 이 용 하 여 측 정 하 였 다 .

7 . 조 직 에 서 M a lo n d ia ld e h y d e ( M D A ) 함 량 비 교

조 직 의 M D A 함 량 은 thiobarbituric acid reacting substances (T B A RS)법 (Zingarelli, 1999)을 이 용 하 여 측정 하 였 다 . 조 직 에 1.5% K C l 용 액 을 가 하 여 균 질 화 시 키 고 , 균 질 액 100 ㎕ 에 8.1% sodium dodecyl sulfate 200 ㎕ 와 20% acetic acid 750 ㎕ 를 첨 가 하 여 10,000 g에 서 15분 원 심 분 리 하 여 상 층 액 을 얻 었 다 . 상 층 액 500 ㎕ 에 thiobarbituric acid 500 ㎕ 를 넣 고 95℃ 에 서 30분 간 반 응 시 켜 531nm 에 서 흡 광 도 를 측정 하 였 다 .

8. 흉 대 동 맥 에 서 혈 관 활 성

실 험 동 물 을 희 생 시 켜 흉대 동 맥 을 적 출 하 였 다 . K rebs solution(in m M , N aC l 120, K Cl 4.75, G lucose 6.4, N aH CO 3 25, K H 2PO 4 1.2, M gSO 4 1.2, C aC l2 1.7)으 로 채 운 petri dish 상 으 로 옮 긴 후 결 합 조 직 과 지 방 등 혈 관 주 변 조 직 을 제 거 하 고 3-5 m m 의 흉대 동 맥 환 상 절 편 (aortic ring)을 만 들 었 다 . 산 소 로 포 화 시 킨 K rebs 용 액 으 로 채 운 organ bath 내 에 특 수 제 작 된 stainless tissue holder로 현 수 하 였 다 . organ bath 내 의 온 도 는 37℃ 로 유 지 하 였 으 며 , 실 험 이 진 행 되 는 동 안 계 속 carbogen(95% O 2, 5% CO 2)을 공 급

하 여 용 액 의 pH 를 7.4로 유 지 시 켰 다 . 적 출 대 동 맥 에 1.5 g의 resting tension 을 준 후 20분 마 다 bath 용 액 을 바 꾸 어 주 면 서 1시 간 동 안 안 정 시 켰 다 . 혈 관 의 수 축 이 완 반 응 은 고 정 된 aortic ring의 다 른 한 쪽 을 isom etric force-displacem ent transducer (FT 03, G rass, A D instrum ents, U .S.A .)에 연 결 시 켜 , physiograph recorder (Pow erLab/400, A D instrum ents, U .S.A .)로 기 록 하 고 C hart4 for W indow s program (A D instrum ents, U .S.A .)으 로 분 석 하 였 다 . 내 피 세 포 의 존 성 이 완 실 험 은 내 피 세 포 가 건 재 한 혈 관 에 서 norepinephrine (N E) 10^-7M 으 로 혈 관 을 전 수 축 시 킨 후 acetylcholine (A ch)을 누 적 적 으 로 적 용 하 여 각 군 의 이 완 반 응 을 관 찰 하 였 다 . 내 피 세 포 비 의 존 성 이 완 실 험 은 내 피 세 포 를 제 거 한 혈 관 에 서 norepinephrine(N E) 10^-7M 으 로 혈 관 을 전 수 축 시 킨 후 N O donor인 sodium nitroprusside(SN P)을 누 적 적 으 로 적 용 하 여 각 군 의 이 완 반 응 을 관 찰 하 였 다 . 내 피 세 포 제 거 는 흉대 동 맥 환 상 절 편 내 부 를 18 G 척 추 천 자 침 을 삽 입 하 여 몇 차 례 회 전 시 킴 으 로 써 수 행 하 였 다 . 내 피 세 포 의 유 무 확 인 은 N E 10^-7 M 으 로 혈 관 을 전 수 축 시 킨 후 A ch 10^-5 M 을 투 여 하 여 혈 관 이 완 유 무 로 써 확 인 하 였 다 .

9 . 통 계 처 리

모 든 실 험 결 과 는 m ean ± S.E.M 으 로 표 시 하 고 , Student' t-test 및 A N O V A test를 사 용 하 여 유 의 성 검정 을 실 시 하 고 이 때 여 러 군 과 의 비 교 를 위 하 여 D uncan test를 실 시 하 였 다 . p 값 이 0.05 미 만 일 때 를 유 의 성 이 있 는 것 으 로 판 단 하 였 다 .

Ⅲ . 결 과

1 . 수축기 혈압 및 심박수

1) 수 축 기 혈 압 (systolic blood pressure, SBP)

대 조 군 의 수 축 기 혈 압 은 실 험 전 195.5±1.6 m m H g 이 었 으 며 실 험 종 료 시 200.0±1.8로 거 의 변 화 가 없 었 다 . 에 탄 올 추 출 물 10 m g/kg 투 여 군 에 서 는 투 여 전 198.5±1.4 m m H g 이 었 고 , 투 여 1주 일 째 에 179.6±1.1 m m H g로 감 소 되 었 으 며 , 이 후 지 속 적 으 로 혈 압 이 감 소 되 어 8주 후 에 는 164.4±1.0 m m H g이 었 다 . 이 에 비 하 여 에 탄 올 추 출 물 50 ㎎ /㎏ 투 여 군 과 am lodipine 10 ㎎ /㎏ 투 여 군 에 서 는 일 주 일 째 에 각 각 159.2±1.5 m m H g, 158.9±1.4 m m H g로 감 소 되 어 , 강 하 된 된 혈 압 이 투 여 기 간 동 안 비 교 적 안 정 하 게 감 소 된 형 태 로 지 속 되 었 다 . 투 여 마 지 막 인 8주 째 각 군 의 혈 압 은 투 여 전 에 비 하 여 10 m g/kg 투 여 군 에 서 는 34.2 m m H g, 50 m g/kg 투 여 군 에 서 는 38.3 m m H g, am lodipine 10

㎎ /㎏ 투 여 군 에 서 는 39.2 m m H g 만 큼 각 각 감 소 하 였 다 . 두 릅 나 무 의 에 탄 올 추 출 물 50 ㎎ /㎏ 을 투 여 한 군 은 am lodipine 10 ㎎ /㎏ 을 투 여 한 군 과 비 슷 한 혈 압 강 화 효 과 를 보 였 다 (Fig. 1A ). 그 러 나 심 박 동 수 는 모 든 군 에 있 어 서 유 의 한 변 화 가 관 찰 되 지 않 았 다 (Fig. 1B ).

2 . 장 기 의 중 량 변 화

체 중 에 대 한 심 장 무 게 비 율 은 대 조 군 에 서 0.47±0.01 이 었 으 며 , 에 탄 올 추 출 물 10 ㎎ /㎏ 투 여 군 과 50 m g/kg 투 여 군 에 서 는 각 각 0.40±0.01, 0.36±0.02 로 대 조 군 에 비 하 여 유 의 하 게 그 리 고 용 량 의 존 적 으 로 감 소 하 는 경 향 을 보 였 다 (p< 0.05, p< 0.01). am lodipine 10 ㎎ /㎏ 을 투 여 군 에 서 는 0.38±0.01로 에 탄 올 추 출 물 과 같 이 대 조 군 에 비 하 여 유 의 한 감 소 를 보 였 다 (p< 0.01)(Fig.

2A ).

신 장 무 게 비 율 은 대 조 군 에 서 0.61±0.03, 에 탄 올 추 출 물 10 ㎎ /㎏ 투 여 군 과 50 m g/kg 투 여 군 에 서 각 각 0.55±0.02, 0.51±0.01 그 리 고 am lodipine 10 ㎎ /

㎏ 투 여 군 에 서 0.51±0.01이 었 다 (Fig. 2B ). 모 든 투 여 군 에 서 대 조 군 에 비 하 여 유 의 한 감 소 가 관 찰 되 었 다 (p< 0.05, p< 0.01).

간 의 경 우 에 는 대 조 군 3.70±0.07, 에 탄 올 추 출 물 10 ㎎ /㎏ 투 여 군 과 50 m g/kg 투 여 군 에 서 각 각 3.20±0.09, 2.97±0.18 그 리 고 am lodipine 10 ㎎ /㎏

투 여 군 에 서 3.02±0.15로 모 든 투 여 군 이 대 조 군 에 비 하 여 유 의 하 게 감 소 되 었 음 을 알 수 있 었 다 (p< 0.05, p< 0.01) (Fig. 2C).

뇌 의 무 게 비 율 은 0.50±0.01이 고 두 릅 나 무 의 에 탄 올 추 출 물 10 ㎎ /㎏ 을 투 여 한 군 과 50 m g/kg을 투 여 한 군 에 서 는 각 각 0.48±0.01, 0.47±0.01로 대 조 군 에 비 하 여 감 소 하 였 다 . am lodipine 10 ㎎ /㎏ 을 투 여 한 군 에 서 도 역 시 마 찬 가 지 로 체 중 에 대 한 뇌 의 무 게 비 율 이 0.47±0.01로 대 조 군 에 비 하 여 감 소 하 였 다 .(Fig. 2D )

3 . 뇨 에 서 단 백 질 양 비 교

두 릅 나 무 의 에 탄 올 추 출 물 10 ㎎ /㎏ , 50 ㎎ /㎏ , am lodipine 10 ㎎ /㎏ 을 8 주 간 투 여 하 여 뇨 중 단 백질 배 설 량 을 측정 한 결 과 대 조 군 에 서 는 117.94±9.85 m g/day, 두 릅 나 무 의 에 탄 올 추 출 물 10 ㎎ /㎏ , 50 ㎎ /㎏ 투 여 군 에 서 는 각 각 87.65±7.36 m g/day, 68.08±4.21 m g/day으 로 용 량 의 존 적 으 로 감 소 하 였 다 . 그 리 고 또 한 am lodipine 10 ㎎ /㎏ 을 투 여 한 군 에 서 도 75.34±1.49로 감 소 함 을 보 였 다 . 두 릅 나 무 의 에 탄 올 추 출 물 50 ㎎ /㎏ 을 투 여 한 군 에 서 의 뇨 의 단 백질 양 이 am lodipine 10 ㎎ /㎏ 을 투 여 한 군 에 서 보 다 더 감 소 하 였 다 (p< 0.05, p< 0.01) (Fig. 3).

4 . 요 와 혈 장 에 서 N O x 농 도 비 교

1) 요

두 릅 나 무 의 에 탄 올 추 출 물 10 ㎎ /㎏ , 50 ㎎ /㎏ , am lodipine 10 ㎎ /㎏ 을 8 주 간 투 여 하 여 뇨 에 서 의 N O x 양 을 측정 한 결 과 대 조 군 에 서 는 2.64±0.15 μ m ole/kg/day, 두 릅 나 무 의 에 탄 올 추 출 물 10 ㎎ /㎏ , 50 ㎎ /㎏ 투 여 군 에 서 각 각 3.10±0.08 μm ole/kg/day, 4.22±0.07 μm ole/kg/day으 로 용 량 의 존 적 으 로 증 가 하 였 다 . 그 리 고 또 한 am lodipine 10 ㎎ /㎏ 을 투 여 한 군 에 서 도 3.84±0.12 μ m ole/kg/day로 증 가 함 을 보 였 다 . 두 릅 나 무 의 에 탄 올 추 출 물 50 ㎎ /㎏ 을 투 여 한 군 에 서 의 뇨 의 N O x 양 이 am lodipine 10 ㎎ /㎏ 을 투 여 한 군 에 서 보 다 더 증 가 하 였 다 . (Fig. 4A )

2) 혈 장

뇨 에 서 와 마 찬 가 지 로 혈 장 에 서 도 두 릅 나 무 의 에 탄 올 추 출 물 10 ㎎ /㎏ , 50 ㎎ /㎏ , am lodipine 10 ㎎ /㎏ 을 8주 간 투 여 하 여 N O x 양 을 측정 한 결 과 대 조 군 에 서 는 10.73±1.12 μM , 두 릅 나 무 의 에 탄 올 추 출 물 10 ㎎ /㎏ , 50 ㎎ /㎏

투 여 군 에 서 각 각 17.51±3.84 μM , 47.69±2.94 μM 으 로 용 량 의 존 적 으 로 증 가 함 을 보 였 다 . 그 리 고 또 한 am lodipine 10 ㎎ /㎏ 을 투 여 한 군 에 서 도 30.40±1.52 μM 로 증 가 함 을 보 였 다 . 두 릅 나 무 의 에 탄 올 추 출 물 50 ㎎ /㎏ 을 투 여 한 군 에 서 의 혈 장 의 N O x 양 이 am lodipine 10 ㎎ /㎏ 을 투 여 한 군 에 서 보 다 더 증 가 하 였 다 . (Fig. 4B)

5 . 조 직 에 서 M a lo n d ia ld e h y d e ( M D A ) 함 량 비 교

1) 심 장

두 릅 나 무 의 에 탄 올 추 출 물 10 ㎎ /㎏ , 50 ㎎ /㎏ , am lodipine 10 ㎎ /㎏ 을 8주 간 투 여 하 여 심 장 에 서 의 M D A 양 을 측정 한 결 과 대 조 군 에 서 는 1.21±0.10 nm ole/m g 두 릅 나 무 의 에 탄 올 추 출 물 10 ㎎ /㎏ 을 투 여 한 군 과 50 m g/kg을

투 여 한 군 에 서 는 각 각 1.05±0.06 nm ole/m g, 0.93±0.02 nm ole/m g로 대 조 군 에 비 하 여 용 량 의 존 적 으 로 감 소 하 였 다 . am lodipine 10 ㎎ /㎏ 을 투 여 한 군 에 서 도 역 시 마 찬 가 지 로 심 장 의 M D A 양 이 0.94±0.02 nm ole/m 로 대 조 군 에 비 하 여 감 소 하 였 다 (Fig. 5A )

2) 신 장

두 릅 나 무 의 에 탄 올 추 출 물 10 ㎎ /㎏ , 50 ㎎ /㎏ , am lodipine 10 ㎎ /㎏ 을 8주 간 투 여 하 여 신 장 에 서 의 M D A 양 을 측정 한 결 과 대 조 군 에 서 는 0.72±0.06 nm ole/m g 두 릅 나 무 의 에 탄 올 추 출 물 10 ㎎ /㎏ 을 투 여 한 군 과 50 m g/kg을 투 여 한 군 에 서 는 각 각 0.62±0.05 nm ole/m g, 0.47±0.05 nm ole/m g로 대 조 군 에 비 하 여 용 량 의 존 적 으 로 감 소 하 였 다 . am lodipine 10 ㎎ /㎏ 을 투 여 한 군 에 서 도 역 시 마 찬 가 지 로 신 장 의 M D A 양 이 0.50±0.07 nm ole/m 로 대 조 군 에 비 하 여 감 소 하 였 다 (Fig. 5B )

3) 간

두 릅 나 무 의 에 탄 올 추 출 물 10 ㎎ /㎏ , 50 ㎎ /㎏ , am lodipine 10 ㎎ /㎏ 을 8주 간 투 여 하 여 간 에 서 의 M D A 양 을 측정 한 결 과 대 조 군 에 서 는 0.45±0.02 nm ole/m g 두 릅 나 무 의 에 탄 올 추 출 물 10 ㎎ /㎏ 을 투 여 한 군 과 50 m g/kg을 투 여 한 군 에 서 는 각 각 0.36±0.03 nm ole/m g, 0.29±0.03 nm ole/m g로 대 조 군 에 비 하 여 용 량 의 존 적 으 로 감 소 하 였 다 . am lodipine 10 ㎎ /㎏ 을 투 여 한 군 에 서 도 역 시 마 찬 가 지 로 간 의 M D A 양 이 0.29±0.02 nm ole/m 로 대 조 군 에 비 하 여 감 소 하 였 다 (Fig. 5C )

4) 뇌

두 릅 나 무 의 에 탄 올 추 출 물 10 ㎎ /㎏ , 50 ㎎ /㎏ , am lodipine 10 ㎎ /㎏ 을 8주 간 투 여 하 여 뇌 에 서 의 M D A 양 을 측정 한 결 과 대 조 군 에 서 는 1.91±0.06 nm ole/m g 두 릅 나 무 의 에 탄 올 추 출 물 10 ㎎ /㎏ 을 투 여 한 군 과 50 m g/kg을 투 여 한 군 에 서 는 각 각 1.76±0.06 nm ole/m g, 1.53±0.06 nm ole/m g로 대 조 군 에 비 하 여 용 량 의 존 적 으 로 감 소 하 였 다 . am lodipine 10 ㎎ /㎏ 을 투 여 한 군 에 서

도 역 시 마 찬 가 지 로 뇌 의 M D A 양 이 1.54±0.05 nm ole/m 로 대 조 군 에 비 하 여 감 소 하 였 다 (Fig. 5D )

6. 흉 대 동 맥 에 서 혈 관 활 성

1) 내 피 의 존 성 혈 관 활 성 도 (A ch 투 여 )

두 릅 나 무 의 에 탄 올 추 출 물 10 ㎎ /㎏ , 50 ㎎ /㎏ , am lodipine 10 ㎎ /kg을 8주 간 투 여 하 여 마 지 막 날 내 피 세 포 가 건 재 한 흉대 동 맥 에 서 N E 10^-7M 로 전 수 축 시 킨 후 각 각 A ch (10^-10~10^-3M )을 농 도 누 적 적 으 로 투 여 하 여 이 완 효 과 를 관 찰 한 결 과 대 조 군 에 서 는 22.13±0.89% 이 완 되 었 고 두 릅 나 무 의 에 탄 올 추 출 물 10 ㎎ /㎏ 을 투 여 한 군 과 50 m g/kg을 투 여 한 군 에 서 는 각 각 46.12±3.25% , 34.60±3.16% 로 대 조 군 에 비 하 여 용 량 의 존 적 으 로 혈 관 이 완 효 과 가 증 가 하 였 다 . am lodipine 10 ㎎ /㎏ 을 투 여 한 군 에 서 도 역 시 마 찬 가 지 로 혈 관 이 완 효 과 가 43.53±3.71% 로 대 조 군 에 비 하 여 혈 관 이 완 효 과 가 증 가 하 였 다 . 두 릅 나 무 의 에 탄 올 추 출 물 50 ㎎ /㎏ 을 투 여 한 군 에 서 의 혈 관 이 완 효 과 가 am lodipine 10 ㎎ /㎏ 을 투 여 한 군 에 서 보 다 더 증 가 하 였 다 . (Fig. 6A )

2) 내 피 비 의 존 성 혈 관 활 성 도 (sodium nitroprusside, SN P 투 여 )

두 릅 나 무 의 에 탄 올 추 출 물 10 ㎎ /㎏ , 50 ㎎ /㎏ , am lodipine 10 ㎎ /kg을 8 주 간 투 여 하 여 마 지 막 날 내 피 세 포 를 제 거 한 흉대 동 맥 에 서 N E 10^-7M 로 전 수 축 시 킨 후 각 각 SN P (10^-10~10^-3M )를 농 도 누 적 적 으 로 투 여 하 여 이 완 효 과 를 관 찰 한 결 과 실 험 군 과 대 조 군 사 이 의 유 의 한 변 화 는 관 찰 되 지 않 았 다 . (Fig. 6B )

Day

0 10 20 30 40 50 60

Systolic Blood Pressure (mmHg)

120 160 200

240 5% DMSO

Aralia elata(10mg/kg) Aralia elata (50mg/kg) Amlodipine (10mg/kg)

*** *** *** *** *** *** ***

** ** **

**

***

** ** **

*** *** *** *** *** *** *** *****

(A)

Day

0 10 20 30 40 50 60

Heart Rate (beats/min)

250 300 350 400 450

500 5% DMSO

Aralia elata (10mg/kg) Aralia elata (50mg/kg) Amlodipine (10mg/kg) (B)

Fig. 1. Effects of repeated daily oral administration of Aralia elata and amlodipine on (A) systolic blood pressure (SBP) and (B) Heart rate (HR) in conscious

spontaneously hypertensive rats. Each point represents the mean ± S.E.M. of three or five rats. ** P < 0.01; *** P < 0.001 with respect to control.

Fig. 2. (A) Heart, (B) kidney, (C) liver and (D) brain weights of SHR treated with vehicle (control; C), Aralia elata (10mg/kg; A10, 50mg/kg; A50) and amlodipine (10 mg/kg; Am) at the end of the experiment. BW, body weight; HW, heart weight;

LW, liver weight; KW, kidney weight; BrW, brain weight. Data are presented as the mean SEM. *P<0.05, **P<0.01 compared with control.

HW/BW ratio

0.2 0.3 0.4 0.5

*

**

**

(A) Heart

KW/BW ratio

0.3 0.4 0.5 0.6 0.7

** **

*

(B) Kidney

LW/BW ratio

2.0 2.5 3.0 3.5 4.0

** **

*

(C) Liver

BrW/BW ratio

0.2 0.3 0.4 0.5 0.6

* * *

(D) Brain

U ri na ry P ro tei n E xcret io n ( m g/ da y)

0 20 40 60 80 100 120 140

** **

*

C A10 A50 Am

Fig. 3. Urinary protein excretion of SHR treated with vehicle (control; C), Aralia elata (10mg/kg; A10, 50mg/kg; A50) and amlodipine (10 mg/kg; Am). Data are presented as the mean SEM. *P<0.05, **P<0.01 compared with control.

Urinary NOx (mmole/kg per day)

0 1 2 3 4 5

*

***

**

(A)

Plasma NOx (mmole/l)

0 10 20 30 40 50 60

*

***

**

(B)

C A10 A50 Am

Fig. 4. Total urinary (A) and plasma (B) nitrate plus nitrite (NOx) release of SHR treated with vehicle (control; C), Aralia elata (10mg/kg; A10, 50mg/kg; A50) and amlodipine (10 mg/kg; Am). Data are means SEM. *P<0.05, **P<0.01, ***P<0.001 compared with control.

MDA(nmole/mg)

0.0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5

*

** **

(C) Liver

C A10 A50 Am

MDA(nmole/mg)

0.0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0

** **

*

(B) Kidney

MDA(nmole/mg)

0.0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5

* *

(D) Brain

C A10 A50 Am

MDA(nmole/mg)

0.0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 1.4

*

** **

(A) Heart

Fig. 5. (A) Heart, (B) kidney, (C) liver and (D) brain MDA content of SHR treated with vehicle (control; C), Aralia elata (10mg/kg; A10, 50mg/kg; A50) and

amlodipine (10 mg/kg; Am) at the end of the experiment. Data are presented as the mean SEM. *P<0.05, **P<0.01 compared with control.

Ach (log M)

-10 -8 -6 -4 -2

% of Control

0 20 40 60 80 100

120 5% DMSO

Aralia elata (10mg/kg) Aralia elata (50mg/kg) Amlodipine (10 mg/kg)

*

**

***

**

*

*

*

**

**

** **

**

**

***

*** ***

(A)

SNP (log M)

-10 -8 -6 -4 -2

% of Control

0 20 40 60 80 100

120 5% DMSO

Aralia elata (10mg/kg) Aralia elata (50mg/kg) Amlodipine (10 mg/kg) (B)

Fig. 6. Acetylcholine(Ach; A) and sodium nitroprusside (SNP; B)-induced relaxations in aorta from the control (vehicle), Aralia elata (10mg/kg, 50mg/kg) and amlodipine (10mg/kg) groups. Acetylcholine and sodium nitroprusside-induced relaxations were induced in arteries contracted by norepinephrine (10-7 M). Data are means SEM. *P<0.05, **P<0.01 compared with control.

IV . 고 찰

혈 압 은 심 박 출 량 과 말 초 저 항 의 변 화 에 의 하 여 조 절 된 다 . 말 초 저 항 은 혈 관 직 경 의 변 화 에 의 하 여 결 정 된 다 . 혈 관 긴 장 도 에 영 향 을 줄 수 있 는 대 표 적 인 요 인 은 혈 관 내 피 세 포 로 서 , 혈 관 내 피 세 포 에 서 유 리 되 는 물 질 로 는 내 피 이 완 성 이 완 물 질 과 내 피 의 존 성 수 축 물 질 이 있 다 . 내 피 의 존 성 이 완 물 질 로 는 일 산 화 질 소 (nitric oxide, N O )로 알 려 져 있 으 며 , 이 물 질 은 일 산 화 질 소 생 성 효 소 (N O S)에 의 한 작 용 으 로 생 성 되 어 세 포 내 cyclic G M P level을 증 가 시 켜 혈 관 평 활 근 을 이 완 시 키 는 것 으 로 알 려 져 있 다 (Ignarro, 1989). 따 라 서 이 물 질 의 유 리 가 억 제 되 거 나 감 소 된 다 면 내 피 의 존 성 이 완 반 응 이 감 소 되 어 혈 압 이 증 가 하 게 된 다 .

선 천 성 고 혈 압 쥐 에 서 내 피 의 존 성 이 완 반 응 은 정 상 혈 압 동 물 에 비 하 여 억 제 되 어 있 다 고 알 려 져 있 다 (Y am ori와 O kam oto 등 , 1974; 전 병 화 등 , 1999).

고 혈 압 치 료 제 로 쓰 이 는 약 물 들 은 대 부 분 혈 액 점 도 를 높 이 거 나 전 해 질 의 불 균 형 유 발 , 당 뇨 병 유 발 , 심 부 전 증 악 화 , 기 력 감 퇴 , 신 장 기 능 장 애 등 이 부 작 용 을 야 기 하 는 경 우 가 많 고 (W aeber와 B runner 등 , 1998), 근 본 적 인 치 료 가 불 가 능 하 기 때 문 에 이 러 한 약 물 을 평 생 복 용 해 야 하 는 문 제 점 이 있 다 (윤 진 숙 등 , 1997)

두 릅 나 무 (A ralia elata Seem en, A E)는 두 릅 나 무 과 (A raliaceae)에 속 하 는 식 물 로 서 혈 당 저 하 효 과 (Y oshikaw a 등 , 1994, 1995, 1996b; 이 은 방 등 , 1993), 알 콜 흡 수 저 해 효 과 (Y oshikaw a 등 , 1993, 1996a), 세 포 보 호 효 과 (Saito 등 , 1993), 위 염 및 위 궤 양 에 대 한 효 과 (이 은 방 과 정 춘 식 , 1993; H ernandez 등 , 1988), 당 뇨 병 에 대 한 효 과 (김 영 희 와 임 정 교 , 1999) 등 의 약 리 효 과 가 보 고 되 어 져 있 다 .

선 천 성 고 혈 압 쥐 에 두 릅 나 무 의 에 탄 올 추 출 물 을 투 여 한 실 험 군 의 수 축 기 혈 압 을 8주 동 안 매 주 측정 한 결 과 1주 째 부 터 대 조 군 과 비 교 하 여 모 두 유

의 성 있 는 혈 압 강 하 효 과 가 나 타 났 다 . 특 히 두 릅 나 무 의 에 탄 올 추 출 물 50 ㎎ /

㎏ 을 투 여 한 군 은 am lodipine 10 ㎎ /㎏ 을 투 여 한 군 과 비 슷 한 혈 압 강 화 효 과 를 보 였 다 . 이 를 볼 때 두 릅 나 무 의 에 탄 올 추 출 물 은 혈 압 을 강 하 시 킴 으 로 써 고 혈 압 치 료 제 로 서 약 리 효 과 가 있 음 을 알 수 있 다 . 심 박 동 수 는 대 조 군 과 비 교 할 때 유 의 한 변 화 는 관 찰 되 지 않 았 다 . 이 는 본 태 성 고 혈 압 쥐 에 서 의 혈 압 상 승 이 심 박 출 량 의 변 화 에 의 한 혈 압 상 승 이 아 님 을 시 사 한 다 .

선 천 성 고 혈 압 쥐 에 두 릅 나 무 의 에 탄 올 추 출 물 을 투 여 한 실 험 군 의 장 기 에 서 그 중 량 의 변 화 를 관 찰 한 결 과 대 조 군 과 비 교 하 여 모 두 유 의 성 있 는 중 량 감 소 효 과 가 나 타 났 다 . 두 릅 나 무 의 에 탄 올 추 출 물 50 ㎎ /㎏ 을 투 여 한 군 의 심 장 과 신 장 , 간 은 am lodipine 10 ㎎ /㎏ 을 투 여 한 군 보 다 그 중 량 이 더 감 소 하 거 나 비 슷 하 였 다 . 고 혈 압 은 여 러 장 기 에 손 상 을 주 는 데 , 특 히 심 장 (cardiac hypertrophy), 신 장 (glom erulosclerosis), 뇌 (stroke)에 손 상 을 준 다 . 선 천 성 고 혈 압 쥐 에 서 전 신 성 부 종 과 신 부 전 (renal insufficiency)으 로 인 해 심 장 , 뇌 , 신 장 , 간 의 중 량 이 늘 어 남 이 알 려 져 있 다 (Y oichi Inada, 2001). 따 라 서 두 릅 나 무 의 에 탄 올 추 출 물 은 고 혈 압 으 로 인 한 장 기 의 손 상 을 완 하 시 키 는 효 과 가 있 음 을 알 수 있 다 .

두 릅 나 무 의 에 탄 올 추 출 물 10 ㎎ /㎏ , 50 ㎎ /㎏ , am lodipine 10 ㎎ /㎏ 을 투 여 한 실 험 군 과 대 조 군 에 서 뇨 의 단 백질 량 을 비 교 한 결 과 두 릅 나 무 의 에 탄 올 추 출 물 은 용 량 의 존 적 으 로 감 소 효 과 를 보 였 고 , 두 릅 나 무 의 에 탄 올 추 출 물 50 ㎎ /㎏ 을 투 여 한 군 은 am lodipine 10 ㎎ /㎏ 을 투 여 한 군 보 다 더 감 소 하 였 다 . 이 는 고 혈 압 에 서 나 타 나 는 신 부 전 (renal insufficiency), 신 비 대 (renal hypertrophy), 사 구 체 벽 의 손 상 으 로 인 한 단 백뇨 현 상 을 완 하 시 키 는 것 임 을 시 사 한 다 (Juan D uarte, 2002).

두 릅 나 무 의 에 탄 올 추 출 물 과 am lodipine을 투 여 한 실 험 군 과 대 조 군 에 서 요 와 혈 장 에 서 N O x 농 도 를 비 교 한 결 과 요 에 서 는 두 릅 나 무 의 에 탄 올 추 출 물 을 투 여 한 군 에 서 용 량 의 존 적 으 로 N O x의 농 도 가 증 가 하 였 고 특 히 50

㎎ /㎏ 을 투 여 한 군 은 am lodipine을 투 여 한 군 에 서 보 다 높 은 증 가 를 보 였 다 . 혈 장 에 서 는 모 두 증 가 효 과 를 보 였 으 나 두 릅 나 무 의 에 탄 올 추 출 물 50㎎ /㎏ 을 투 여 한 군 에 서 월 등 한 증 가 효 과 를 보 였 다 . N O 는 soluble guanylate cyclase

의 hem e jprosthetic group과 결 합 하 여 세 포 내 cyclic G M P level을 증 가 시 켜 혈 관 평 활 근 의 이 완 을 초 래 한 다 (정 권 수 등 , 2001). 두 릅 나 무 의 추 출 물 을 투 여 한 군 에 서 N O 의 증 가 를 보 였 다 는 것 은 두 릅 나 무 의 추 출 물 이 N O 를 유 리 시 켜 혈 압 을 감 소 시 킨 다 는 것 을 시 사 한 다 .

두 릅 나 무 의 에 탄 올 추 출 물 을 투 여 한 실 험 군 과 대 조 군 에 서 조 직 내 M D A 함 량 을 비 교 한 결 과 용 량 의 존 적 으 로 그 수 치 가 감 소 함 을 관 찰 하 였 고 두 릅 나 무 의 에 탄 올 추 출 물 50 ㎎ /㎏ 을 투 여 한 군 은 am lodipine 을 투 여 한 군 과 비 슷 한 감 소 효 과 를 보 였 다 . M D A (m alondialdehyde)는 생 체 내 지 질 과 산 화 의 촤 종 산 물 로 서 생 체 내 의 산 화 적 손 상 을 평 가 하 는 지 표 가 된 다 . 혈 관 내 피 세 포 의 산 화 적 손 상 은 동 물 의 순 환 기 계 에 영 향 을 끼 쳐 쥐 에 서 선 천 성 고 혈 압 을 유 발 하 는 주 요 인 자 가 된 다 (N akazono 등 , 1991; T schudi 등 , 1996). 고 혈 압 에 서 산 화 적 손 상 에 의 해 조 직 의 M D A 의 함 량 이 증 가 하 고 항 산 화 효 과 를 보 이 는 약 물 들 을 투 여 했 을 때 생 체 내 의 산 화 적 손 상 을 감 소 시 켜 줌 으 로 써 조 직 내 M D A 함 량 이 감 소 된 다 는 보 고 가 있 다 (H ana 등 , 1999). 본 연 구 에 서 도 두 릅 나 무 에 탄 올 추 출 물 과 am lodipine이 조 직 내 M D A 함 량 을 감 소 시 켰 다 . 이 는 아 마 도 두 릅 나 무 에 탄 올 추 출 물 과 am lodipine의 항 산 화 효 과 에 의 한 것 이 라 고 할 수 있 을 것 이 다 .

마 지 막 으 로 본 연 구 는 두 릅 나 무 의 에 탄 올 추 출 물 과 am lodipin의 혈 관 내 피 세 포 기 능 에 미 치 는 효 과 를 관 찰 하 였 다 . 먼 저 A ch에 대 한 혈 관 이 완 반 응 즉 , 혈 관 내 피 세 포 의 존 성 이 완 반 응 이 두 릅 나 무 의 에 탄 올 추 출 물 과 am lodipine을 투 여 한 군 에 서 혈 관 내 피 세 포 의 존 성 이 완 반 응 이 크 게 증 가 하 는 것 을 관 찰 할 수 있 었 다 . 그 리 고 SN P에 대 한 혈 관 이 완 반 응 즉 , 혈 관 내 피 세 포 비 의 존 성 이 완 반 응 은 군 간 의 유 의 적 인 차 이 가 없 는 것 을 관 찰 하 였 다 . 혈 관 내 피 세 포 는 고 혈 압 , 고 콜 레 스 테 롤 혈 증 , 당 뇨 병 , 흡 연 , 동 맥 경 화 증 과 같 은 여 러 위 험 인 자 에 의 하 여 가 장 먼 저 손 상 을 받 는 것 으 로 알 려 져 있 다 (온 영 근 등 , 2001). 따 라 서 혈 관 내 피 세 포 기 능 평 가 는 이 러 한 혈 관 성 질 병 을 평 가 하 는 데 유 용 한 지 표 로 연 구 되 고 있 다 . 생 체 내 활 성 산 소 류 (reactive oxygen species, R O S)는 고 혈 압 , 동 맥 경 화 증 과 같 은 여 러 혈 관 성 질 병 을 일 으 키 는 위 험 인 자 가 된 다 (H ana 등 , 1999). 또 한 과 산 화 물 (superoxide)과 같 은 활 성 산

소 류 는 혈 관 내 피 세 포 확 장 인 자 (ED R F)인 일 산 화 질 소 (N itric oxide, N O )를 불 활 성 화 하 여 내 피 세 포 기 능 이 상 을 유 발 한 다 (N akazono 등 , 1991). 따 라 서 위 의 결 과 는 활 성 산 소 류 에 의 해 생 체 내 혈 관 확 장 물 질 인 N O 의 이 용 도 를 떨 어 뜨 려 고 혈 압 쥐 에 서 내 피 세 포 의 존 성 이 완 반 응 의 저 하 를 유 발 함 을 시 사 하 고 두 릅 나 무 의 에 탄 올 추 출 물 과 am lodipine에 의 해 내 피 세 포 의 존 성 이 완 반 응 이 호 전 되 었 음 을 보 인 다 . 이 효 과 의 기 전 으 로 는 N O 의 생 성 과 정 에 있 어 서 항 산 화 효 과 기 전 이 관 련 된 것 으 로 생 각 되 어 진 다 .

이 상 의 결 과 는 두 릅 나 무 의 에 탄 올 추 출 물 이 고 혈 압 치 료 제 로 서 효 과 가 있 음 을 나 타 내 며 이 는 혈 관 내 피 세 포 의 산 화 적 손 상 을 완 화 시 키 고 혈 관 내 피 의 존 성 이 완 물 질 인 N O 의 작 용 을 활 성 시 키 는 작 용 에 의 한 것 임 을 시 사 한 다 . 또 한 두 릅 나 무 에 서 나 타 나 는 선 천 성 고 혈 압 쥐 에 서 의 항 고 혈 압 효 과 와 최 종 장 기 손 상 에 보 호 효 과 는 현 재 고 혈 압 치 료 제 로 사 용 되 어 지 고 있 는 am lopine과 비 슷 한 효 과 를 가 지 고 있 다 .

V . 결 론

다 양 한 약 리 활 성 을 가 진 것 으 로 알 려 진 두 릅 나 무 의 추 출 물 과 고 혈 압 치 료 제 인 am lodipine의 활 성 을 비 교 하 여 다 음 과 같 은 결 과 를 얻 었 다 .

1. 선 천 성 고 혈 압 쥐 에 두 릅 나 무 의 에 탄 올 추 출 물 10 ㎎ /㎏ , 50 ㎎ /㎏ 과 am lodipine 10 ㎎ /㎏ 을 투 여 한 결 과 , 1주 째 부 터 수 축 기 혈 압 이 용 량 의 존 적 으 로 감 소 하 는 것 을 관 찰 하 였 다 . 그 러 나 심 박 동 수 의 유 의 한 변 화 는 관 찰 되 지 않 았 다 .

2. 선 천 성 고 혈 압 쥐 에 두 릅 나 무 의 에 탄 올 추 출 물 10 ㎎ /㎏ , 50 ㎎ /㎏ 과 am lodipine 10 ㎎ /㎏ 을 투 여 한 후 심 장 , 신 장 , 간 , 뇌 에 서 중 량 의 변 화 를 관 찰 한 결 과 모 두 유 의 성 있 는 중 량 감 소 효 과 가 나 타 났 다 .

3. 선 천 성 고 혈 압 쥐 에 두 릅 나 무 의 에 탄 올 추 출 물 10 ㎎ /㎏ , 50 ㎎ /㎏ 과 am lodipine 10 ㎎ /㎏ 을 투 여 한 후 요 에 서 단 백질 량 을 비 교 한 결 과 용 량 의 존 적 인 단 백질 량 감 소 효 과 를 보 였 다 .

4. 선 천 성 고 혈 압 쥐 에 두 릅 나 무 의 에 탄 올 추 출 물 10 ㎎ /㎏ , 50 ㎎ /㎏ 과 am lodipine 10 ㎎ /㎏ 을 투 여 한 후 요 와 혈 장 에 서 N O x 농 도 를 비 교 한 결 과 용 량 의 존 적 으 로 N O x의 농 도 가 증 가 하 는 것 을 관 찰 하 였 다 .

5. 선 천 성 고 혈 압 쥐 에 두 릅 나 무 의 에 탄 올 추 출 물 10 ㎎ /㎏ , 50 ㎎ /㎏ 과 am lodipine 10 ㎎ /㎏ 을 투 여 한 후 심 장 , 신 장 , 간 , 뇌 에 서 의 M D A 함 량 을 비 교 한 결 과 그 수 치 가 감 소 함 을 관 찰 하 였 다 .

6. 선 천 성 고 혈 압 쥐 에 두 릅 나 무 의 에 탄 올 추 출 물 10 ㎎ /㎏ , 50 ㎎ /㎏ 과

am lodipine 10 ㎎ /㎏ 을 투 여 한 후 내 피 의 존 성 혈 관 활 성 을 비 교 한 결 과 용 량 의 존 적 으 로 유 의 한 혈 관 이 완 효 과 가 관 찰 되 었 고 , 내 피 를 제 거 하 고 SN P(sodium nitroprusside)를 투 여 하 여 내 피 비 의 존 성 혈 관 활 성 을 비 교 한 결 과 대 조 군 에 비 해 유 의 한 이 완 효 과 는 관 찰 되 지 않 았 다 .

이 상 의 결 과 는 두 릅 나 무 의 에 탄 올 추 출 물 이 고 혈 압 치 료 제 로 서 효 과 가 있 음 을 나 타 내 며 이 는 혈 관 내 피 세 포 의 산 화 적 손 상 을 완 화 시 키 고 혈 관 내 피 의 존 성 이 완 물 질 인 N O 의 작 용 을 활 성 시 키 는 작 용 에 의 한 것 임 을 시 사 한 다 . 또 한 두 릅 나 무 에 서 나 타 나 는 선 천 성 고 혈 압 쥐 에 서 의 항 고 혈 압 효 과 와 최 종 장 기 손 상 에 보 호 효 과 는 현 재 고 혈 압 치 료 제 로 사 용 되 어 지 고 있 는 am lopine과 비 슷 한 효 과 를 가 지 고 있 다 .

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초 록

선 천 성 고 혈 압 흰 쥐 에 서 두 릅 에 탄 올 추 출 물 의 항 고 혈 압 작 용 에 관 한 연 구

(지 도 교 수 : 이 영 재 ) 박 은 혜

제 주 대 학 교 대 학 원 수 의 학 과

선 천 성 고 혈 압 쥐 (spontaneously hypertensive rat; SH R )에 서 두 릅 나 무 에 탄 올 추 출 물 (A ralia elata Seem en; A E )의 항 고 혈 압 효 과 를 고 혈 압 치 료 제 인 amlodipine besylate (Am)와 비교 연구하였다. 14주 령 의 SH R 에 8주 간 두 릅 나 무 의 에 탄 올 추 출 물 10 m g/kg, 50 m g/kg 과 amlodipine besylate 10 m g/kg을 각 각 경 구 투 여 하 였 다 . 고 혈 압 은 여 러 장 기 에 손 상 을 주 어 지 질 과 산 화 의 결 과 로 서 m olondialdehyde (M D A ) 함 량 이 증 가 하 고 내 피 세 포 기 능 이 상 을 나 타 낸 다 . 보 연 구 에 서 는 두 릅 나 무 에 탄 올 추 출 물 과 am lodipine을 투 여 한 SH R 에 서 수 축 기 혈 압 과 총 요 단 백량 , 각 장 기 의 중 량 과 M D A 함 량 이 현 저 하 게 감 소 하 는 것 을 관 찰 하 였 고 반 면 에 뇨 와 혈 장 의 nitrite과 nitrate(N O x)의 농 도 가 대 조 군 에 비 해 실 험 군 에 서 현 저 하 게 증 가 하 는 것 을 관 찰 하 였 다 .

norepinephrine(N E)으 로 전 수 축 시 킨 혈 관 에 서 acetylcholine(A Ch, 10^-10 -10^-3 M )을 누 적 적 으 로 투 여 하 여 내 피 세 포 의 존 성 이 완 반 응 을 관 찰 한 결 과 두 릅 나 무 에 탄 올 추 출 물 과 am pldipine을 투 여 한 군 에 서 내 피 세 포 의 존 성 이 완 반 응 이 증 가 하 는 것 을 보 였 다 . 특 히 두 릅 나 무 의 추 출 물 50 m g/kg을 투 여 한 군 의 혈 관 에 서 는 이 완 율 이 가 장 높 았 다 . N E 으 로 혈 관 을 전 수 축 시 킨 후 N O donor인 sodium nitroprusside(SN P. 10^-10 -10^-3 M )을 누 적 적 으 로 투 여 하 여 내 피 세 포 비 의 존 성 이 완 반 응 을 관 찰 한 결 과 각 군 마 다 변 화 가 없 었 다 . 이 상 의 결 과 는 두 릅 나 무 는 선 천 성 고 혈 압 쥐 에 서 항 고 혈 압 효 과 와 최 종 장 기 손 상 에 보 호 효 과 가 있 음 을 나 타 낸 다 . 그 리 고 이 들 효 과 는 현 재 고 혈 압 치 료 제 로 사 용 되 어 지 고 있 는 am lopine과 비 슷 한 효 과 를 나 타 낸 다 .

중 심 어 : 두 릅 , 고 혈 압 , A m lodipine, 선 천 성 고 혈 압 쥐 , N itric oxide