사상체질학회지
J.or 앓잃ng Const. Me<!
Vol. 14. No 1. 2002
關뽑升淸홉의 몹結8훌 훌를홉 防훌훌했果에 란흔 tif 究
한진수. . 박성식
I Abstract I
Study for defensive effect of Jowesungcheong-tang on gastr
ic mucosal damage in mice
Han Jin-Soo . Park Seoung-Sik
Dept. of Sasang Constitutional Medicine. College of Oriental Medicine. Dongguk Univ
1. The Purpose of study
An e 뿌erimental srudy has done co examine the effect of defense on gastric mucosal damage of ]owesu
ngcheong-tang.
2. The Material and Method of study
Mice had intragastric injected with ]ST eXtract before indome thacin treatment which induces hemorrh
age erosion artificially. General morphology, infiltrative cell in mucosa, the distribution of UEA-I, COX-
I, MAC-I. ICAM, and Apopcotic cell were objeaed (A 빠ueviation) ]ST :Jowesungcheong-tang, UEA-I :
띠ex europaeus agglutinin-I, COX-I: cyclooxyhenase-I, ICAM : intercellular adhesion molecule-I, GPE
Gastropathy elicitated mice
3. The results and Conclusions of srudy
1) The degree of hemorrhage erosion in GPE-group had increased conspicuously in gascric gland pro 야[
]ST-group were the same as norm 혀
2) 까1e noticeable increase of granular lecocytes and lymphocytes in GEP-group were seen, but in ]ST-
group, the configuration is decreased
3) The decrease of UEA-I posicive reacted cells, COX-I, surface epithelial cells and the increase of MA
C-I positive cells, ICAM-I positive cells had shown in GPE-group, but in ]ST-group UEA-I positiv
e cells, COX-I surface epithelial cells were in creased and MAC-I positive cells, ICAM-I positive c
ells were decreased than GPE-group.
4) A number of apopcotic cells were distributed in hemorrhage erosion. The remarkable decrease of
apoptotic cells were shown in ]ST -group.
Key words: ]owesungcheong-tang, Gastric mucosal damage, COX-I, ICAM, Apopcosis
.
동국대학교 한의과대학 사상체질과 교신저자 한진수 주소)인천시 연수구 연수 2 동 600-3 안병상한의원 천화) 032)815-9494
- 웹몹升l빼훌의 뽑 t,liij 훌 껴11 防혔!$! 에 관한 eft;: -
I . 서 론
사상의학〈四象醫學) 은 인간의 자율적 조절기 능과 음양승강( 陰陽昇降) 의 완속〈援速〕으로 병 증을 논하고 , 보명지주〈保命之主) 가 어떤 상황 에 처했느냐에 따라 인체의 불균형을 조절하 는 치심치 병( 治心治病) 의 학이다 1,2)
조위 승청 탕( 調몹升淸漫) 은 『동의수세보원 ( 東 醫壽世保元 )J 에 최초로 수록된 태음조위 탕( 太 陰調몹漫 ) 의 가미방으로 그 입 방( 立方) 목적은 혜의 호산지기( 呼散之氣j 부족에서 오는 조한증 ( 操寒證) 을 발한( 發규) 과 윤조( 潤操) 시키 는 방 법으로 치료하기 위한 것으로 태음인의 위완 수한표한병 ( 몹院受寒表寒病) 에 의한 폐조한증
(ij 며操寒證) 에 옹용되어 왔으며
3)
식 후비 만( 食後
햄滿)4-6) . 도포( 倒짧)’ .7) .
불사음식( 不思欲食)5.
7) . 토혈 ( 此血)7) 등의 위점 막 손상 증상과 탄탄
( 驚換)’ .7) . 중풍허증{ 中風虛徒)’ .7) . 퇴각무력( 腦
圖無力)4-6)
둥에 활용되어 왔다.
최근 위접막 손상에 대한 실험적 연구로는 목단피지 황탕( 收판皮地黃揚)8) ’ 태음조위 당( 太 陰調몹楊)9) ’ 삼출건비탕( 參出健牌揚)
낀출환(
三責*只끼t11./1) ’ 평진건비탕( 平陳健牌場)12) ’
가미귀비 창( 加味歸牌楊)13>, 자음건비 탕( 滋陰健
牌楊)14) ’ 육울탕( 六뽕揚)15) ’ 보혈안신탕( 補血安
神揚)
씬탕을위접막 손상에 연구로 보고한 바는 없
었다.
조위숭청탕에 대한 실험적 연구로는 구속 스트레스 흰쥐의 항스트레스와 연역반웅에 미 치는 영향까 흰쥐의 방사형 미로 학습과 기억 에 미치는 영향씬 alzheimer
’
s disease 모델 백
서( 터鼠) 의 학습과 기억에 미치는 영향 19) 등의 연구는 있었으나 조위승청당의 위점막 손상 에 대한 방어효과에 관한 보고는 없었다.
이에 저자는 조위승청탕이 위점막 손상에 대한 방어효과를 규명하기 위하여 생쥐에 조
위승청탕을 투여한 후, 위점막의 일반적인 형 태변화, 조직화학적 변화, 연역조직화학적 변 화, apoptOsis 변화 등을 관찰한 바, 유의성있는 결과를 얻었기에 보고하는 바이다.
IT . 재료 및 방법
1. 동 물
태령 4주된 ICR 계 숫컷 생쥐( 대한실험동물
센타에서 분양받은) 를 무균사육장치내에서 2 주일동안 적응시킨 후 체중 30g 된 생쥐를 선 별하여 사용하였다 . 실험군의 분류는 무처치 된 대조군 , 위점막 손상 유발군 ( 이하 GPE 군), 조위승청탕 추출물 사전 투여 후 위점막 손상 유발군 ( 이하 ]ST 군) 로 나누었으며 각 군당 10 마리를 배정하였다 . 한편 ]ST 군은 다시 위점 막 손상 유발 직전 , 24 시간전 , 48 시간전 그리 고 72 시간전으로 나누어 관찰하였다.
2. 위접막 손상 유발
위 점 막 손상을 유도하기위 해 indomethacin (Si gma, USA) 를 0.9% NaCl 이 포함된 70% 에 탄올 에 회석시 킨 후 25 mglkg 를 GPE 군과 ]ST 군에 음용투여하였다 .
3. 조위승청탕 추출액의 쩌l조와 投與
조위숭챙탕의 처방 내용과 분량은 『동의수 세보원( 東醫뚫世保元)J 에 준하였으며 , 동국대 학교 한방병원에서 구입하여 사용하였다 {Table 1). 2첩을 증류수 500 뼈에 넣고 2 시간동안 전 탕한 후 여과하였다 그 여액( 演滾) 을 rotary ev
aporatOr 를 이용하여 50 뼈으로 감압농축하여 J
ST 군에 위점막 손상 유발 직전 , 24 시간전 , 48 시간전 그리고 72 시간전에 2. 5 /kg 량으로 구강투여 하였다.
- 사상체질의학회지 제14권 제1호 2002 -
Table 1. The amount and composition
。f Jowesungcheongtang (JST).
*
뿔 名 !IlJlt (g)Coicis Semon 12.0
easran<a< Semon 12.0
Raphani Semon 6.0
Ophiopogonis Radix 4.0
Acori Gramino; Rhizoma 4.0
PI따yc뼈 Radix 4.0 Sc“zandrBr Frucrus 4.0 E야dra< Horba 4.0
Polygala< Radix 4.0
Asparagi Radix 4.0
Zizyphi Spinosa< Semon 4.0
Longana< AriIl ‘JS 4.0
뺑 율 66.0
繼 -짧廳짧縣짧歸짧願滋쨌짧願
4. 조직표본 제작
위점막 손상 유발 후 6 시간이 경과되었을 때 s 여ium pentobarbital 용액 으로 마취 한 후 V잃
cular rinse 와 10% 중성 포르말린용액 (neutral b
uffered formalin: NBF) 으로 심장관류고정을 실
시하였다. 위 ( 몹 ) 몸통{body) 을 적출하여 실온 에서 24 시간동안 10% NBF 에 고정하였다 . 고 정된 조직은 통상적 인 방법으로 paraffi n 에 포 매한 후 5 μm 두께의 연속절편으로 제작되었 다. 위점막의 일반적인 형태변화를 관찰하기 위해 연속절편을 hematoxylin 과 eosm 에 염색한 후 광학현미경 (BX50. Olympus, Japan) 으로 관 찰하였다.
5. 조직화학적 관찰
1) 위점막 침윤 세포의 변화 관찰
위점막에 침윤 (infilrration) 된 세포의 변화를
조사하기 위 해 PWoxine-taruazine 염 색 법 을 실
시하였다 . Mayer ’s hematoxylin 에 5 분간 핵 염색
한 후 phloxine 용액에 30 분간 반응시켰다. 그 런 다음 tarrrazme 용액에서 분별 후 광학현미 경으로 관찰하였다.
2) 점액분비세포의 변화 관찰
표연점 액세포 (surface mucose cell) 의 변화를 조사하기 위 해 Alcian blue-PAS-Orange G 염 색 을 실시하였다 먼저 절편을 alcian blue soluti
on (pH 2.5 : Sigma) 에 30 분간 염색시켰다.
그런 다음 periodic acid (Sigma) 에서 10 분간
산화시 킨 후 schiff reagent 에서 15 분동안 반응시켰다 . 반응 완충을 위해 sulfurous ri nse 에 각 2분씩 3회 세 척 하고 hematoxylin 에서 l 분동안 대조염색하였다 . 그리고 O.
5% orange G (Sigma) 용액에 처리한 후 광학
현미경으로 관찰하였다.
6. 면역조직화학적 관찰 1) 복합당질의 분포 변화 관찰
복합당질 (glycoconjugate) 인 ιlex eιropae ιJ aggl, μ
tinin I (UEA I) 의 점 막에서 의 분포 변화를
조사하기위해 lecrin 을 이용한 연역조직화학 적 염색을 실시하였 q.(Table 2). 우선 조직 을 실온에서 1 % bovine serum albumin (BS A) 에 30 분간 처리한 다음 1: 100 으로 회석 된 biotinylated anti SBA (Sigma)9t biotinylat
ed anti UEA I (Sigma) 에 4.C incubation cha
mber 내에서 24 시간동안 반웅시켰다 . Avidi
n biotin complex (ABC: Vecror Lab, USA) 에
1시간동안 실온에서 반응시킨 후 0.05% 3, 3폐aminobe nzidine (DAB: Sigma) 과 0.01% H
CI 이 포함된 0.05M tris-HCl 완충용액 (
ψpH7.4 에서 발색시 킨 후 , hematoxylin 으로 대조염색하 여 광학현미경으로 관찰하였다 .
Table 2. Sugar specifities and inhibit 。
ry carbohydrates of lectins.
lectin 0P,tiwn d
lIutton
I며libirory sugar
Sugar 5야cificicy
UEA I 40 /W) 뼈 Q-fucose galactose
2) 접막내 cyclooxygenase-l 분포 변화 관찰 점막상피세포의 보호기전에 관여하는 cycloo
xygenase-l (COX-I) 의 분포변화를 관찰하기위
한 면역조직화학적 염색을 실시하였다 . 우선 절 면을 proteinase K 에 5 분 동안 proteolysis 과정
- 調엽升l뼈훌의 1!It6 찢fjh1 防혔섰果에 관한 -
을 거친 후 blocking serum 인 10% normal goat se
rum (DAKO, Denm 뼈) 에서 1시간 동안 반응시
켰다. 그리고 l 차 항체 인 rabbit ami-mouse COX
-1 0:250, ehyman, USA) 에 4.C humidified chamb
er 에서 48 시간 동안 반웅시켰다. 그런 다음 2 차 항체인 goat ami-rabbit IgG (l: 100, DAKO) 에
4.C humidified chamber 에서 24 시 간 동안 반응
시 켰다 . Avidin biotin complex (ABC. VeCtor
Lab, USA) 에 1시간동안 실온에서 반응시
킨 후 DAB 에서 발색( 發色) 시킨 후, hematOxyli
n 으로 대조염색하여 광학현미경으로 관찰하였 다.
3) 점막내 세포기용 ( 細뼈起用 ) 변화 관찰 점막내 세포기용 변화를 관찰하기위해서 rat
anti-mouse CDllb/18 (Mac-l Serotec, UK) 와 r
abbit ami-mouse lCAM-l (CD54 : Serotec) 를 이
용한 면역조직화학적 염색을 실시하였으며 , 위에서 기술한 동일한 방법으로 실시되었다.
4) 접막 상피셰포 증식 변화 관찰
미분화세포로부터 증식 분화된 점막상피세 포의 분포변화를 조사하기위해 BrdU 를 이용한 면역조직화학적 염색을 실시하였다. 우선 실 험동물에서 위( 몹) 를 적출하기 5 시간전 , 3 시간 전, 1시간전에 생려식염수에 녹인 5-bromo-2-de
oxyuridine (BrdU, Sigma) 50 뼈/kg 을 복강주사하
였다. 얻어진 연속절편은 4
°C 와 37 °C의 2N H
G 용액에서 각각 20 분씩 반응시켜 DNA-denatu CIon 을 일으켰다 O.IM borate 완충용액 처리로 안정시킨 후 비특이적 면역반응을 억제하기위 해 0.01% 의 proteinase K (DAKO, Denmark)7}
포함된 normal goat serum (l :20, D뼈0) 에 1 시 간동안 반응시켰다 . 그런 다음 I} 항체인 mo
use anti-mouse BrdU (I: 50, Amersham, UK) 에
4.C incubation chamber 내 에 서 48 시 간 반응
시켰고 2차 항체인 biotinylated goat anri-mou
se IgG 0: 100, DAKO) 에 실온에서 4 시간동
안 반응시켰다. 이후 과정은 위에 기술한 면 역조직화학적 염색법과 동일하였다 .
7. Apoptosis 변화 관찰
ApoptOtic 세포의 분포변화를 조사하기 위해
In nt. ι apoptosis detection kit (Apoptag, Imergen,
USA) 를 이용한 TUNEL (terminal deoxynucleotid
transferase-mediated dUTP-biotin nick-end labellin
g) 방법을 실시하였다. 먼저 조직 절편을 prote
inase K (20 μg/ me) 에 5 분간 proteolysis 시 킨 다
음 equilibration buffer 에서 20 초간 처리하였다.
그런 다음 strength TdT enzyme (36 따 T dT enz
yme : 72 μe, reaction buffer) 을 처리하여 37 °C
의 humi 값ed chamber 에서 1시 간 동안 반응시
킨 후 strength Stop/wash bu 없r 에서 10 분 동안
처 리하였다. Am띠It띠t디i-d이ig양ox입‘이Jg용e히emr따r
동안 반웅시킨 후 D뼈를 처 리하였다 . HematO
xylin 으로 대조염색한 후 광학현미경으로 관찰
하였다.
8. 영상분석과 통계처리
연역조직화학과 TUNEL 염색 결과의 수치화 를 위해 Optimas 5.2 (Optima Co., USA) 를 이용 한 영상분석 (image analysis) 을 실시하였다 영 상분석 결과는 Sigma Plot 4.0 (Sigma) 을 통한 s
tudem T test 로 처리하였다. 유의 성 여 부는 P
V외ue 0.05 이하를 유의성이 있는 것으로 판단 하였다.
ill. 결 과
1. 일반적인 형태변화
GPE 군의 점막의 많은 지역에서 심각한 출
혈성 침식이 관찰되었으며 일부에서는 접막근 충까지의 궤양까지도 나타났다 . 이러한 위점 막 손상부위에서는 점액분비세포뿐만아니라 많은 수의 벽세포 (parie 때 cell) 와 주세 포(chief c ell) 의 유실도 관찰되었다 {Fig. I).
- 사상체질의학회지 제 14 권 제 1 호 2002 -
한편 위점막 손상 유발전에 조위승청탕 추 출물을 투여 한 )ST 군에서는 사전( 事前) 투여시 간에 따른 손상 차이가 관찰되었다 . 즉,72 시 간 사전투여군에서 가장 적은 조직손상이 관 찰되었는데 , 일부 지역을 제외한 대부분의 지 역에서 대조군에서 보이는 정상적인 위점막조 직 형태가 관찰되었다 {Fig. 2).
2. 조직화학적 변화
1) 우| 점막 회윤 셰포의 변화
GPE 군에서는 출혈성 침식이 일어난 주변에 는 적혈구 영주〈念몇섭, 중성호성백혈구를 비롯 한 과립백혈구와 립프구의 침윤이 증가된 것으 로 관찰되었다. 이러한 침윤은 위점막 상충뿐만 아니라 기저부까지 확산되어 있으며, 이 지역은 주로 과립백혈구 침윤이 두드러졌다 (Fig. 3).
)ST 추출액 72 시간 사전투여군에서는 간간 히 점막고유판에서 백혈구와 혈관내 적혈구가 관찰될뿐 GPE 에서 나타나는 과도한 침윤은 관찰되지 않았다 (Fig. 4).
2) 접액분비셰포의 변화
GPE 군에서 출혈성 침식 주변의 점막상피에 서는 표면점 액세포가 관찰되지 않았다 (Fig. 5).
)ST 추출액 72 시간 사전투여군에서는 세포 상충부에 분비과립이 가득창 표연접액세포가 대부분의 표연상피에서 나타났으며, 이러한 배열은 대조군과 유사하였다 (Fig. 6).
3. 면역조직화학적 변화 1) 복합당질의 분포 변화
GPE 군에서 UEA-I 양성반응이 일부 벽세포
주변부에서 관찰되었지만 대조군에 비해서는 아주 낮았다 (Fig. 7).
이에 비해 )ST 추출액 72 시간 사전투여군에 서는 UEA-I 양성반응은 표면상피, 벽세포 주 변, 주세포주변등 많은 지역에서 관찰되었으 며 (Fig. 8), 특히 점막 기저부의 고유위샘세포 의 세포질에서 강한 양성반응을 보이는 세포
가 많이 관찰되었다 (Fig. 9).
2) 점막내 COX-1 분포 변화
GPE 군에서 COX-1 양성반응이 관찰되지 않 았다 (Fig. 10, Table 3).
이에 비해 )ST 추출액 72 시간 사전투여군에
서는 COX-1 양성반응은 주로 표연상피에서
유의성 있게 관찰되었는데 대조군과 유사한 분포양상이었으며 , 또한 고유판의 일부 세포 에서도 COX-1 의 유의성 있는 양성반웅이 확 인되었다 {Fig. 11, 12, Table 3)
3) 점막내 셰포기용 변화
MAC-1 양성반응세포는 GPE 군에서 주로 점
막밑층의 혈관주변에서 많은 수가 관찰되었으 며 (Fig. 13, Table 3), 점막고유층에서도 일부 발견되었다. )ST 추출액 72 시간 사전투여군에 서도 GPE 군과 동일한 지역에서 관찰되지만 그 수가 훨씬 적었다 (Fig. 14, Table 3)
한편 lCAM 양성반응세포는 GPE 군에서 정 막맡충의 세포침윤지역 (Fig. 15, Table 3), 점막 기저부의 세포침윤지역 (Fig. 17, Table 3) 에서 많은 수로 관찰되었다 . 이에 반해 )ST 추출액 72 시간 사전투여군의 이들 지역에서는 적은 수가 나타났다 (Fig. 16, 17, Table 3).
4) 점막 상피세포 증식 변화
GPE 군의 출혈성 침식 지역에서는 BrdU 양 성반웅세포가 관찰되지 않았으며 , 벽세포 주 변에서 소수가 관찰되었다 (Fig. 19, Table 3).
그러나 )ST 추출액 72 시간 사전투여군에서 는 핵에 강한 양성반웅을 보이는 BrdU 양성반 웅세포가 많은 수로 관찰되었으며, 출현지역 은 목점액분비세포 주변과 벽세포 주변지역이 었다 (Fig. 20, 21, Table 3).
4. Apoptosis 변화
ApoptOric 변화를 조사하기 위해 π JNEL 방
법을 실시하였는데 대조군에서는 핵과주변부 에 양성반응을 보이는 apoptOnc 세포가 일부 점막표연상피세포에서 척은 수로 관찰되었다.
- 調뭄升l!R; 윷의 뭄*Bg 윷 챔{
훌 防훌었果에 관한 SR究 -
GPE 群의 출혈성 침식 지역에서 많은 수의
apoptotic 세 포가 관찰되 었고 (Fig. 22) 이 러 한 a
poprotic 세포의 분포는 점막의 기저부까지 확
대되어 나타났다 .
이에 반해 JST 추출액 72 시간 사전투여군에 서는 대조군과 비슷한 apoptOtlC 세포의 분포를 보여 표면상피세포에서만 apoptOtic 세포가 나 타났다 (Fig. 23).
Tab|e 3. The image ana|ysis 。f immU
n 。h|St 。chemistry and TUNEL
in JST treated mUrine st 。ma
ch bef 。「e gastr 。pathv
α》UROL GPE jsr
kld 뼈y
wmde lmensltY 뼈Idde lntfilslq wrude lmenslW
%78t2 ’ I2%t2}4 2482t54 l%9il ’ 2 876857 l2%tI82
ml5t 얘 l27,tl2 ’ 4빼i2l l260t 깅 4 l째생l. l263t2I9
48’7t36 l298tli7 l}4l6 ±8’ ll8 7t2l4 %4}t38 l286i28A
COX-l
MAC-I
lCM{
&du l}4%98 lo,8i168 ”t 2 l317tll,2 ll%t42. llO 선290
lI여2±9l l297t28l 29282t79 ll9h234 l3lO9iM. I2’ 2i 잉 8
A!XPt@u
(image analysis fbr 200000 pankles / range of int
ensiry 50 - l50)
AbbreVlation : M ± S D, Mean ± Standard Deviat
ion; CONTROL, No treared mice, GPE, Gastropat
hy eliCltated mlce; JST, jST treated mice before g
astropathy elicnation, COX-l, cyclooxytrnase-l; Br
du, bromodeoxyuridine; *, P 〈 0.05 compared wi
th GPE.
Fig. 1. The morphology of gastric mucosa 상orn G
PE mice. The hernormagic erosions (asterlsk) and
aggregation of leucocytes (arro ψ) are seen. SM, s
Urface mucous cell, PC, parietal cell, CC, chief c
elI; hα{, muscularis mucosa. H & E. ×200.
Fig. 2. The morphology of gascrlC mucosa Eton1 ]S
T tread mlce at 72 hours before GPE. The dec
rease of hernorrhagic erOslons (arrow) were appea
red. H & E 〉〈200
-
SM 폐‘!i
《 ig 째센}f j t
. ’//끼낀:
-、.Pκc ‘ η r ‘ 、 ‘、’ 〉ζ-ι-. ‘ - ‘
판 ? 씨 째1 석? 편?? :
I￡gends for figure
Fig. 3. The morphology of gasrrlC mucosa horn G
PE mlce. The noticeable lncrease of granular leco
qte (arrow) and lymphocytes (vacanted arrow he
ad) in base of hernormagic erOslon evoked region
were seen. PhIoxine-tartrazine- x400.
Fig. 4. TEe morphology of gastric mucosa from JS
T tread mice at 72 hours before GPE. The COIf
iguration of base ln gastric gland proper were th
e same as normal. Phloxlne-tartrazine- ×400.
Fig. 5. The morphology of surface epithelial cells
horn GPE mice The surface mucous cell were d
lsappeared- Alclan blue-PAS-Orange G. ×200.
Fig. 6. The mQrphology of surface epithelial cells f
rom JST tread mice at 72 hours before GPE. Ih
@ purple reddlsh coroled surface mucous cell (arro
- 사상체질의학회지 제14권 치|1 호2002 -
Fig. 13. The lmmunohistocheIIncal Stain for MAC-
l in submucosa (SU) Etorn GPE mice. The MAC
-1 posinve cells (arrow) were increased. ×200.
Fig. 14. The immunohlStochemical Stain for hac-
l in SU from JST tread mice ar 72 hours befor
e GPE. The remakable decrease of MAC-l positi
ve cells (arrow) were seen. 〉〈200.
Fig. l5. The immunohistocherIncal staln for ICAM
in SU Etorn GPE mice. The ICAM positive cells
(arrow) were increased. x400.
Fig. 16. The lmmuIlotusrochemical Stain for ICAM
in SU horn JST tread mice ar 72 hours &fore
GPE. The noticeable decrease of ICAM POSltive
cells (arrow) were seen. 〉〈400.
Fig. 17. The immlmothstochemlCal staln for ICAM
in base of hemorrhaglC erOslons from GPE mice.
The ICAM positive cells (arrow) were increased.
x400.
Fig. 18. The immunohlStochemical Stain fbr ICAM
in base of gastric gland pr φer fiorn JST tread
mice ac 72 hours &fore GPE. The noticeable de
w) were seen- Alclan blue-PAS-Orange G ×200.
Fig. 7. The immunohistochemical Stain for UEA-I
ln gastric mucosa 6om GPE mice. The UEA-I p
oskive cells (arrow) in region of heInormaglc ero
Sion were dlSappeared- x200.
Fig. 8. The immunohistochemical Stain for UEA-l
in gastrlC mucosa from JST tread mice at 72 ho
urs before GPE. The UEA-I positive cells (arrow)
in various regions were seen. ×200.
Fig. 9. The magnlfiaction of UEA-I positive cells i
n base of gastric gland proper- x400.
Fig. 10. The immunohistochemical staln for COX-
l in gastric mucosa from GPE mlCe. The COX-
l positive cells (arrow) in reglOn of hernormaglC
erosion were disappeared. x200.
Fig. 11. The immunohlStKhernlCal Stain fbr COX-
l in gastrlC mucosa fiom JST tread mice at 72
hours before GPE. The COX-1 positive cells (arr
ow) in aplCal surface of mucosa were seen ×20
0.
Fig. l2. The magnifiaction of COX-1 posiIive cell
s in Fig. ll. x400 crease of ICAh{ p。sltive cells (arrow) were seen.
x400.
Fig. I9. The immunohistochernlCal staln for BrdU
in gastric mucosa from GPE mice. The BrdU po
skive cells (arrow) were disappeared x200.
Fig. 20. The immlmothstochemlcaI staln for BrdU
ln gastrlC IrillCO6a fiom JST tread mice ar 72 ho
urs before GPE. The notlCeable increase of BrdU
posmve cells (arrow) were seen. ×200.
Fig. 21. 111e magnification of BrdU positive cells
in Fig 2I. x200.
Fig. 22. The distribution of apoptOtic cells in gast
ric mucosa fiom GPE mlCe The noticeable incre
ase of apoptotic cells (arrow) in reglOn of hemor
rhagic erOslon in seen- TUNEL Method- ×200.
Fig. 23. The dlStribution of apoptOtic cells ln gast
rι mucosa from ]ST tread mice at 72 hours bcf
’
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N. 고 찰
조위숭청 당은 r
동의수세보왼( 東醫꿇世保元)J 에 최초로 수록된 처방으로 태음인의 위수한 표한병 ( 몹脫受寒表寒病) 에 의한 폐조한증애벼操 寒證 ) 에 응용되어 왔다3)
本方은 태음조위당의 가미방으로 의이인, 건율, 나복자, 마황, 길경 , 맥문동, 오미자, 석 창포, 원지, 천문동, 산조인 , 용안육으로 구성 되었으며, 그 입방( 立方) 목적은 폐의 호산지 기( 呼散之氣) 부족에서 오는 조한증〈‘操寒證) 을 발한( 發t千) 과 윤조( 潤짧) 시키 는 방법으로 치 료 하기 위한 것이다
3)
본방( 本方) 을 이( 李)4) 는 식후비 만(食後휩隔) .
퇴각무력 ( 腦뼈無力 ) 동, 박t朴)7) 은 탄탄( 癡癡) .
중풍허증( 中風‘虛在 ) . 도포( 倒짧) . 불사음식( 不
思欲食 ) . 허로( 虛勞) . 표한( 表寒) . 중소( 中消) .
건망( 健忘.) . 토혈( 此血) 등, 윤{ 尹1’
)
은 탄탄( 繼 癡 ) . 중풍허증( 中風虛證 ) . 중풍통치 ( 中風通
治) . 도포( 倒E밍) . 식 후미 만 ( 食後훔滿) . 불사음
식 ( 不思欲食 ) . 허로통치 ( 虛勞通治 ) . 퇴각무력
( 腦斷無力 ) . 중소( 中消) . 건망( 健忘) . 자한도한
( 自 규효규 ) 등, 서 ( 徐)6)
는 식후비 만( 食後햄i隔) .
태음인 중소( 中消I) . 퇴각무력( 腦뼈無力) . 중풍
( 中風j . 구안와사 알츠하이머형 치매 허증
( 虛在) 등에 응용할 수 있다고 하였다
위점막 손상에 의한 궤양은 복통{ 심와부동 통{心홈홈曉痛), 공복통), 소화불양, 오심 , 탄산, 속쓰렴 , 복부팽만, 혹은 식욕부진 , 체중감소 등의 증상을 호소하며 대개 만성적인 경과와 주기성을 가지고 반복된다20,21) 한의학( 韓醫學) 에서는 위완통, 탄산, 조잡, 구토 등의 병증으 로 언급되어 왔으며 이는 식후비만( 食需챔滿), 도포( 짧IJe 밍), 불사음식 ( 不思欲食) 등에 활용해온 조위승청탕의 적웅증과 유사하다 하겠다.
몹tb 陳(gastric mucosa) 과 점막밑조직의 결손<h
emorrhage infarct and erosion) 은 위궤 양을 주도
하며 , 원인으로는 위산 (gastric acid) 과 pepsin 의 분비증가 , 점막 혈액 흐름의 차단, 내재성 pros
taglandins 분비 감소 , 세포분열의 억제 둥을
들 수 있다22) 특히 이 러한 손상은 nonsteroidal
anri-i 삐ammatory drug(NASID) 의 사용 급증으로
인해 매년 증가하는 추세이다셰
이에 저자는 동물실험을 통해 위점막의 일 반적인 형태변화 , 조직화학적 변화, 연역조직 화학적 변화, apoprosls 변화 관찰을 통해, 조위 승청당의 위점막 손상에 대한 방어효과에 관 하여 실험을 한 결과 유의성있는 결과를 얻 었다.
본 실험에서 GPE 군의 대부분 점막에서 출 혈성 침식과 중성점액질 분비세포의 유실 등 의 접막 손상이 일어났다. 이러한 접막보호장 벽의 손상 즉, 점 막의 mucus 와 bicabonate 보호 장벽의 결핍 은 prostaglandin 의 分泌 차단에 의 해 발생된 것인데 24), 이는 COX-l mRNA 발현 억제 에 의 한 세 포내 arachidonic acid 의 prostagla ndin 전환과정 저해의 결과이다2.26) 본 실험에 서도 출혈성 침식 지역주변에서는 COX-l 에 대한 양성반웅이 거의 나타나지않아 COX-l 의 결핍이 점막손상의 일차적 왼인으로 설명될 수 있었다 27.28)
또한, 이러한 조직손상은 점막고유충에 존 재하면서 위점막손상의 회복에 관여하는 표충 모세혈관망의 손상을 초래하였고29), 그 결과 그 주변부에서 적혈구 울혈이 관찰되었다. 이 러 한 모세혈 관의 손상은 reperfusion 시 허 혈성 조직손상을 유발하기도 한다30)
이러한 손상부위에서는 중성호성 백혈구를 비롯한 백혈구, 대식세포, 비만세포 등의 염증 관여세포들의 침윤증가도 확인되었다31) 염증 관여세포의 이주에는 MAC-l 와 세포유착분지 (c
ellular adhesion molecular; CAM) 이 관여 하게 되
는데 32.33) ’ 본 실험에서도 위기저부와 점막밑조
