약학희 지 제 49 권 제 6 호 518ᅳ526 (2005)
Yakhak Hoeji
Vol. 49，No. 6 稱 學 合 확
C57BL6 마우스에서 복합생약제인 황금궁의 육모 효과
허진주 . 리란 . 유설혜 • 백인정 • 연정민 • 남상윤 • 윤영원 • 황석연* • 홍 진 태** • 이범준#
충북대학교 수의과대학 및 동물 의학연구소, * 충북대학교병원 진단검사의학과, ** 충북대학교 약학대학
(Received November 9，2005; Revised November 15，2005)
Effect of Hwanggumgung, a Natural Product, on Hair Growth Promotion in C57BL6 Mice
Jin-Joo H u e , L an L i, Sul-H ye Lyu, In-Jeoung Baek, Jung- M in Yon, Sang-Yoon N am , Y oung W on Y un, Seock-Yeon H w an g *, Jin Tae H o n g ** and B eom Ju n L e e #
College of Veterinary Medicine and Research Institute of Veterinary Medicine,
^Chungbuk National University Hospital and
**College of Pharmacy, Chungbuk National University, Cheongju 361-763，Korea
Abstract — Hwanggumgung (HGG) is a hair-care product which is composed of several plant extracts used in oriental medicine. This study was carried out to investigate effect of HGG on hair regrowth in a shaving model of C57BL6 mice.
Five-week-old mice were acclimated for 1 week under 23±3°C, 50±10% relative humidity, and 12 h of a light/dark cycle before beginning experiment. There were four experimental groups including distilled water (D.W., control), 10% ethanol (EtOH, vehicle control), a positive control of
3%minoxidil (MXD), and HGG for female and male mice, respectively. Six- weeks old mice were trimmed by electric clippers so as not to damage the skin. The next day, mice without visible scraches were selected, randomized and separated in groups of 11 mice. The test compounds were topically treated with 0.15
mlper mouse per day for 21 days. The hair regrowth was photographically and histologically determined during the experimental period of 21 days. Enzyme activities of y-glutamyl transpeptidase and alkaline phosphatase were also determined using a rate assay method. There were no clinical signs in all experimental groups. The topical application of 3% MXD and HGG in female mice promoted hair regrowth earlier and faster than the control groups. In male mice, the topical application of 3% MXD and HGG also accelerated hair growth compared with the controls. Ten percent ethanol also promoted hair growth faster than D.W group. The histology of hair growth in experimental groups was strongly associated with the hair regrowth.
3% MXD and HGG promoted elongation of hair follicles compared with the controls in both female and male mice. Activities of alkaline phosphatase and y-glutamyl transpeptidase, enzymes related to hair growth, significantly increased after treat
ments of
3%MXD and HGG for 2 weeks in both female and male mice (p<0.05). These results suggest that HGG has hair growth promoting activities and it can be for treatment for alopecia.
Keywords □ alopecia, C57BL6 mice, minoxidil, hair regrowth, alkaline phosphatase, y-glutamyl transpeptidase
사람의 모발은 뇌와그것을둘러싸고 있는두개골보호와 같 은본래의 기능이외에도미용적인면에서큰기능을갖고있어 발모
,
양모 및탈모 예방은예로부터 많은관심의 대상이 되고있다
.1>
최근에는 기존의 중년 남성뿐아니라젊은층과여성층에서도탈모예방과양모등에대한관심이중가하고 있다
.
이는 남성에서 발생하는유전적인요인이외에 현대사회로들어서면 서여성들의 사회활동증가，입시나직장에서의 스트레스 증가#본 논문에 관한 문의는 저자에게로 (전화) 043-261-3357 (팩스) 043-267-3150 (E-mail) [email protected]
및서구화된 식사습관에서 오는 영양불균형
,
이밖에 화공약품 이주성분인무스,
스프레이,
염모제 등이 탈모에직,
간접적으 로영향을미칠수있는많은사회 문화적인요인들의 변화에서 기인하는것으로생각되고있다.
최근전세계적으로많은대학및기업연구소등에서모발성 장과탈락에 대한세포학적
,
생화학적 또는분자생물학적 연구 를통해탈모치료및모발성장을촉진시킬수 있는약물의 개발 에도많은노력을기울이고있다.
일반적으로모발성장주기(hair growth cycle)
는3
단계로구성되는데，모발이 가장활발하게 성 장하는anagen
기,
모발의 퇴화가시작되는ratagen
기및모발의성장이멈추거나휴지기에접어드는
telogen
기로분류하게된다.2)
황금궁의 ^발성장 ^과 519
현재 모발성장을 촉진하는 약물로는 m inoxidil과 finasteride이 잘알려져 있으며미국 Food and D rug Adm inistration(FDA)의 승인을받은제품들이다. M inoxidil은원래고혈압 치료를위한 혈관확장제로 개발되었으나부작용으로다모증이 보고 되면서 발모제로 개발되었고그발모효과에 대한작용기전은 현재까지 명확히 밝혀지지 않았지만혈관확장을통한영양공급증가 및
potassium channel opening 효과등이 모발성장을유도하는 것
으로생각되고있다.3’4) 또한 finasteride는남성호르몬대사에 작
용히는효소인 5a-reductase의활성을억제시키는물질로 알려
져있다.5)
발모, 양모및탈모예방연구에 이용되는 실험법으로는실험
동물을이용한
in vivo
평가와모낭세포 및조직배양을이용한in vitro
평가등이 주로이용되고있다.6> 1980년대에 들어모낭 을구성하고 있는 핵심 세포인 모유두세포(dermal papilla cell) 와외모근초세포(outer root sheath cell)의배양법이개발되면서 모낭에서의분화기전에 대한연구가활기를띠게 되었다.7’8) 그러나이러한
in vitro
배양기법을이용한평가는모낭조직 내에서의 세포간의 상호작용과모낭조직과주위를둘러싼진피조직 과의상호작용, 그리고 혈액순환이 배제되는 등모발성장에 직, 간접적으로영향을미칠 수있는많은요소들이 배제되어 있어
한계성을 지니고 있다.9’10) 따라서 각종 생화학적 평가를 통해
탐색되는 많은 약물들의 실제효과를검증하기 위해서는아직 까지실험동물을이용한효능평가및임상실험 등이 주로이용
되고있는실정이다.11’12) 또한, 최근에는 생화학적, 분자생물학
적실험 방법을이용하여모발 성장과관련된 각종성상인자나 유전자의 동정，작용기전연구및약물탐색연구가활발히 진행
되고 있다. 그 중 발모와 관련된 생화학적 효소인 y-GT(y-
glutam yl transpeptidase) 는 membrane-bounded enzym e으로
glutathione대사와세포막을통한아미노산과펩티14의흡수，배
줄에 관여하며，특히 anagen기의 가장좋은 지표로 보고된바 있다.13-15) 또한 alkaline phosphatase(ALP)가 발모 기전에 관
여하는 바는 규명되어 있지 않지만 모발 생성 과정 중 hair
matrix내혈관신생에관여한다는보고와발모가일어나면서 효
소활성이 증가한다는보고가 있어 발모의 또다른지표로 고 려될 수있다.15)
발모, 양모및 탈모방지 둥의효과를평가하기 위하여이용되 는실험동물모델로는붉은꼬리원숭이 (stum ptailed macaque), 토 끼(rabbit), 햄스터(ham ster), 생쥐(mouse) 등이 있다. 이들 중
C57BL6 mouse는체모가검정색이고, 자발적탈모(spontaneous
alopecia)가일어니는특징을지니고 있으며, 또한 melanocyte가 모낭께만한정적으로존재하고 m elanin합성이모발성장주기 (hair
growth cycle)와 잘 일치되어 피부색으로 모발의 성장주기를
판정할 수있는 장점을 가져 모발생리 연구에 널리 이용되고 있다.1748)
본실험에서사용한황금궁은주성분으로글리시리진산디칼륨, 당약및인삼추출액>그리고보습제로밀감및궁내이예감 추출 물을 함유하고 있는 천연생약제품이다. 이러한 개별추출물에 대한양모효과는아직 알려지지않았고본연구에서는 C57BL6 마우스를사용하여혼합알콜추출물인황금궁의 양모 효과를용
매인 10% 알콜및 M inoxidil과비교를통하여평가분석하였다.
재료 및 방법
시료의 준비
시험물질인횡금궁
(Lot No. 04E01)
은글리시리진산디칼륨, 당 약추출액 및인삼추출액(추출액은에탄올과물혼합액으로추출 된것임)을주성분으로그리고밀감및궁내이예감추출물을 보 습제로함유한제품으로 한일건강마을로부터 공급받았다. 비교 대상물질로서3% minoxidil(3% M XD
: 현대약품)을 제조사로 부터 구입하였다.실험동물
생후 5주된암 ■수컷 C57BL6 마우스를 (주)대한바이오링크
로부터 구입하여 1주간동물사육실 환경에 적응시킨 후실험에 사용하였다. 동물사육•실은온도 23± 30C, 상대습도 50± 10%，
12시간씩밤낮을 유지하였다. 수1험동물은격리용미우스 케이지 ((주)삼광)에서 사육하였고실험동물용사료(삼ᅧ양사료) 및상수 도물을자유로이 급여하였다. 군은 암 • 수컷각각 4개로총 8개 군으로군당 11마리씩총 88마리를 실험에 사용하였다.
음수
•
사료섭취량및체중측정음수 • 사료섭취량 및 체중은발모 시험물질 도포직전부터 ■측 정하여 실험종료 시까지 일정한시간(오전 10시)에 측정하였으 며임상증상은매일관찰하였다.
발모제의도포및육안적관찰
발모효과를살펴보기우ᅵ해，•등쪽피부의색이
pink colorfr
보 이는휴지기 체모의6
주령을시용하였다.Electric animal clipper
를이용하며 조심스럽게 마우스의 등판의 털을 막아 내어 털을제거한후, 그부위에
0.15m/
의시료를 각군별로 도포하고붓을八년하여 문지르며 고르게 분포시켜주었다. 시료 처리는 매 일오전 10시에 1회씩 21일간실시하였다. 음성대조군으로서 증 류수, 용매대조군으로서
10%
에탄올(10% EtOH),
양성대조군으 로3% minoxidil,
그리고시험물질로횡금궁을도포하였다. 실험 시작후0
일,4
일,7
일，10
일,14
일，17
일및21
일에 털이자라는 상태를 육안적으로확인하기 위하여 에테르로가볍게 마취한후 사진촬영을실시하였으며 , 털이자란상태 정도-5 육안적으S 판 단하여 비교하였다.520 허진주 ■ 리란 • 유설혜 . 백인정 • 연정민 ■ 남상윤 • 윤영원 . 황석연 • 홍진태 • 이범준
조직학적 분석
시험
7, 14
，21
일째에시료도포부위를해부기를이용하여 적출한후
formalirL0J £
고정하였다.
단계별로alcohol
과xylene
으 로탈수처리하여 파라핀으로포매한후, microtome
을이용하여5 |im
의절편을제작하여다시alcohol
과xylene
으로파라핀을제 거하였다. Hematoxylin & eosin
염색하여광학현미경으로모낭 조직의 조직학적 변화를관찰하였다.
- B — 10% BOH
—A— 3% MXD
효소활성도측정
시험
7, 14, 21
일째에4
개군에서 각각3
마리마우스에서피부 조직을적출하여 빙냉하에서 미세절편으로만들고,
그중일정 량을칭량한후, 4
배량의0.1 M
인산완충용액(pH 7.4
)을가하여homogenizei
를 이용하여20%(w/v)
마쇄 균질액을만들었다.
이 균질액을12,000 rpm
에서20
분간원심분리하여 그상등액을취 해 효소활성도 측정에 사용하였다. Total protein
은Biuret method
로단백질의peptide bonds
는알칼리 용액에서Cu(n
)이온과
chelate
화합물을형성하여자색으로발색되는원리를 이용하여 이를
540nm
에서 비색 정량하여 측정하였으며, alkaline
phosphatase(ALP
)의 활성은p-nifrophenolphosphate(PNPP)- DEA
를 이용한enzyme rate assay(GSCC)
법을 그리고 y-glutamyl transpeptidase(Y-GT
)활성은Modified SZASZ method
에의한rate assay
법을이용하여 각각측정하였다.16’19)
측정장 비로는 생화학 자동분석기인Hitachi-747(Hitachi medical Co.
LTD, Japan
)을이용하여분석하였으며,
사g
된 시약은모두Daichi (Daichi chemical Co, LTD, Japan
)사의것을이용하여 측정하였 으며,
그외기타사항은임상병리시험기준에준하였다.
측정치에 대한통계분석은one-way ANOVA
로 하였으며 군간 유의성은Student's t test
로분석하였다.
결 고
^
음수• 사료섭취량및체중의 변화
각시료를투여한미우스에 있어서음수
•
및사료섭취량은대 조군과비교히여유의차가없었으며,
또한특별한임상증상을보 이지 않았다.
체중에서는3% MXD
군에서임컷과수컷에서 다소증가하는경향을보였으나대조군에비해유의차는 없었다
(Figs.
1 & 2).
양모의육안적 변화
제모
1
일후부터 각각의 시료를제모된부위에도포하였다.
암 컷에서는음성대조군으로서 증류수를시용한미우스와용매대조군으로쓰인
10% EtOH
에서는10
일까지 거의 털이자라지 않았다
(Fig. 3).
그러나, 3% MXD
을도포한군에서는암컷모두에 서도포10
일부터 등쪽의 색이검게돌아오는것이관찰되었고,
21 Experimental days
Fig. 1 -
Change in body weight by topical treatments of test compounds for 21 days in an alopecia model of C57BL6 female mice. D.W., distilled water; EtOH, ethanol; MXD, minoxidil; HGG, hwanggumgung.
3
^
ul
o)! a)s
a
"
do cq
25
20
15
10
5
7 10 14
Experimental days
17
21
Fig.
2 - Change in body weight by topical treatments of test compounds for 21 days in an alopecia model of C57BL6 male mice. D.W., distilled water; EtOH, ethanol; MXD, minoxidil; HGG, hwanggumgung.
14
일경에는등쪽에 털의일부가자란것을확인할수있다.
황금궁투여군에서도투여
10
일째 암컷 마우스에서 미약하게 털이 자라는것을관찰할수있었다.
시험14
일째에는증류수를포함 한모든시험군의미우스의 등에서 털이 나는것을관찰할수있었으며
,
특히3% MXD
및횡금궁에서는집락형태의모발성장을관찰할수 있었다
.
시험14
일이후암컷마우스에서 황금궁의모발 성장촉진 효과는
3% MXD
와거의 유사하였다. 17
일이후에도
D.W
.군에서는털이 미미하게자랐으나횡금궁및3%
MXD
군에서는모든마우스의 털이 왕성하게 자란것을확인할수있었다
(Fig. 3).
수컷에서는증류수와10% EtOH
를도포한마 우스에서 도포14
일경에 털이 일부분이 자라는것을관찰할수있었고
, 21
일에서는등중앙부위에어느정도털이 자란것을확인할수있었다
. 3% M X D
을도포한군에서는10
일경에약간의 털이자라는것이 관찰되었고, 14
일이후에는대부분의털이자5
0
5
0
5 2
2
1
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A TJo
m
횡금궁의 ^발성장 ^과 521
D .W 10% EIOH 3 % MXD HGG
4 days
細
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Fig.
3 - Hair regrowth changes in a time-dependent manner by topical applications of test compounds for 21 days in an alopecia model of C57BL6 female mice. D.W., distilled water; EtOH, ethanol; MXD, minoxidil; HGG, hwanggumgung.
란것을확인할수있었다
(Fig. 4).
한편，황금궁군은10
일과14
일사이에 털이 자라기 시작하여 시간이 경과함에 따라 빠르고 고르게털이자라는 것을관찰할수있었으며，17
일째에는 거의 모는미우스에서 왕성하게 털이자란것을확인할수있었다(Fig.
4).
대조군의 암컷 및수컷마우스에서14
일경부터 약간의 털이 자라기 시작하여21
일째수컷미우스에서더많이자란털을관찰할수있었고 황금궁의 효과는암
•
수컷 모두에서3% MXD
와거의유사하게 모발성장을
,
촉진하였으나,
그효과가암컷에 서뛰어난것처럼 보였다.
양모의 조직학적 변화
황금궁이 피부의 모낭및모근의 성장에 미치는효과를조사
하고자
,
각물질을도포한후7
일별로부검하여 발모현상을조 직학적으로관찰하였다.
암컷에서 황금궁은 대조군과비교하여 모낭의증식이 활발하게 이루어지고모근의 크기 및 길이가성 장하는것이관찰되었다(Fig. 5).
수컷에서도역시 대조군과비교 하여 모낭의 증식이 활발하게 일어나는것을 확인할수있었다(Fig. 6).
양성대조군(3% M XD
)과시험물질(
황금궁)도포7
일경과후암수컷 미우스 모두의 조직은표피
(epidermis
)층증식이활발히이루어져 대조군에 비해두꺼워졌으며，또한 모낭의 새 로운생성을확민할수있었다
(Fig. 5 & 6)•
도포14
일후에는 대조군에비해크기가커지고다수의 모낭을관찰할수있었다
. 21
일경과후황금궁시험군은암수컷미우스모두에서 대조군에비 해길어진모닝■이다수관찰되었다
.
또한모든 시험군에서 염증522 허 ^주 ■ 리란 • 유설혜 . 백인정 • 연정민 . 남상윤 ■ 윤영원 . 황석연 • 홍진태 . 이범준
D.W 10% EtOH 3% MXD HGG
0 day
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7 days
10 d
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W B K K m t M
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腿
14 days
17 dajs
21 dave
S E I 1 L 1 1 E J
m M
r w ^
i p ^ ^ nL i c J L y H I
Fig.
4 - Hair regrowth changes in a time-dependent manner by topical applications of test compounds for 21 days in an alopecia model of C57BL6 male mice. D.W, distilled water; EtOH, ethanol; MXD, minoxidil; HGG, hwanggumgung.
소견이나기타병리학적인소견은 발견되지 않았다(Fig. 5 & 6).
효소 활성도의 변화
y-glutam yl transpeptidase(g-G T )
활성
-丫-GT는증식과분 열이 활발한세포내에서 많이 발현되는데따라서 모발성장주기 중 anagen기에좋은지표로활용될수 있다. Fig. 7과 8은각각 암컷과수컷에서 시험그룹별날짜 경과에따라적출된피부조직의 y-GT 측정 결고|미다. 제모시 면도에의한피부자극으로올
수있는초기효소활성의영향을배제하고자제모 1주후부터매 주측정하였고, 제 1주후에암컷에서는 각군에서 유의성 있는 변화가없었으며, 수컷에서는 3% M X D와황금궁군이증류수대 조군보다 높은 y-GT의활성을 나타내었다(Fig. 7 & 8) 제 2주
후에는암컷에서 10% 에탄올, 3% M X D 및황금궁군모두에서
증류수대조군보다丫-GT의활성이높게 나타났으나 vehicle 대
조군에비해서는유의성이 없었다(Fig. 7). 제 2주수컷에서는각
그룹간의 유의차가존재하여 3% M X D , 황금궁, 10% 에탄올, 증 류수군의 순으로높은 y-GT 활성을보였다(Fig. 8). 제 3주후 암수컷미우스 모두에서 대조군들에 비해 3% M X D 및황금궁 군에서 높은 y-GT 활성을보였다(Fig. 7 & 8).
A lk alin e phosphatase(A L P )
활성
- ALP는주로혈관신생 에관여하며, 진피유두에밀집되어 있는모세 혈관으로영양을 공급함으로써발모작용을원활하게 해주는것으로알려져 있다.따라서 A LP 측정은 발모작용을 간접적으로추측가능한것으
로보고된다. Fig. 9과 10는날짜 경과에 따른 ALP 활성을측
황금궁의 모발성장 효과 523
7 days 14 days 21 days
10%
E tO H
3%
Fig. 5 - Histology of hair regrowth in a time-dependent manner by topical application of test compounds for 21 days in an alopecia model of C57BL6 female mice. H&E, X40. D.W., distilled water; EtOH, ethanol; MXD, minoxidil; HGG, hwanggumgung.
정한 것으로
1
주후암컷 마우스에서3% M XD
와황금궁군에 서ALP
의높은활성이관찰되었으며(Fig. 9),
수컷마우스에서는3% M XD
군에서만유의성(p<0.01)
있게높았다(Fig. 10).
제2
주및
3
주후에는암수컷모두에서3% MXD
와황금궁군에서대조군에비해유의성
(p<0.01)
있게높은ALP
활성을나타내었다(Fig. 9 & 10).
고 찰
최근탈모및세모로 심리적 고통을받는남성 및여성이 증 가하고있다
.
그래서 탈모방지혹은양모에 대해효능이 있는약 제의 개발이매우중요하다.
이러한 점에서현재Minoxidil
은 잘 알려진발모제이나한약혹은익용식물읍 사용하는대체의학이 점차주목을받고있다.
본실험에사용된 황금궁은 생약성분의 제제로현대인의 기호와필요를충족시킬수있는제품으로 개발되어 실험동물
(C57BL6
마우스)에서모발성장효과가 있는지를평가하였다
.
수컷의 탈모패턴에 대한형태학적
,
조직학적 및생화학적 측 면은짧은꼬리 원숭이를가지고 연구한끝에 알려졌다.
대표적 인수컷의 탈모패턴은telogen
기가길어지고anagen
기가 짧아진 다.
탈모의 한가지조직학적특징은anagen
기모낭<>1
충분히 길 어지지않는다는 것이다.
자라나는모발의 두터움은 모낭의 크 기로결정된다.
그러므로초기anagen
기에서중기anagen
기까지자라나는모낭의 길이가정상모발주기에서매우중요하다
.20’21)
본 실에서
C57BL6
마우스를 심험동물모델로 사용하였는데,
C57BL6
마우스는6
주령부터 모발주기가telogen
기로들어간다 고알려져 있다.
우리는5
주령된 실험동물을구입하여1
주일간 순화기간을거쳐서6
주령¥1
마우스f t
가지고실험을 시작하였다
. Telogen
기에 들어간마우스는 털을깍았을 때체표면의 색이분홍색을 띄었고 실험을 진행함에따라 체표면 색은 청색으
524 허진주 • 리란 • 유설혜 . 백인정 . 연정민 . 남상윤 . 윤영원 . 횡석연 . 홍진태 . 이범준
7 days 14 d ay s 21 d ay s
D.W.
10% BOH
3% MXD
HGG
Fig. 6 - Histology of hair regrowth in a time-dependent manner by topical application of test compounds for 21 days in an alopecia model of C57BL6 male mice. H&E, X40. D.W, distilled water; EtOH, ethanol; MXD, minoxidil; HGG, hwanggumgung.
D.W
ᄃZD 10% EtOH
3% MXD [— I HOG 1 ^ D.W
ᄃ
=m 10% EtOH 3% MXD
ᄃ그그HGG
1 2 3
Weeks
Fig. 7 - Change in y-glutamyl transpeptidase activity by topical application of test compounds for 21 days in an alopecia model of C57BL6 female mice. D.W, distilled water; EtOH, ethanol; MXD, minoxidil; HGG, hwanggumgung. a_cMeans at each week sharing the same superscript letter were not significantly different at p<0.05.
1 2 3
Weeks
Fig. 8 - Change in y-glutamyl transpeptidase activity by topical application of test compounds for 21 days in an alopecia model of C57BL6 male mice. D.W, distilled water; EtOH, ethanol; MXD, minoxidil; HGG, hwanggumgung. a'dMeans at each week sharing the same superscript letter were not significantly different at p<0.05.
18
16 14 12 108
6
(ufe
-OJdH
bUI/nlvp-Iflo 14
12 108
6
{II?®
; 이 ft buvnltTuno
I
황금궁의 ^발성장 ^과 525
I I I
Weeks
Fig. 10 - Change in alkaline phosphatase activity by topical ap
plication of test compounds for 21 days in an alopecia model of C57BL6 male mice. D.W, distilled water; EtOH, ethanol; MXD, minoxidil; HGG, hwanggumgung. a_cMeans at each week sharing the same superscript letter were not significantly different at p<0.05.
로바뀌면서 생장기를 시작하고 점차검정색으로변해갔다
.
이 는모발주기가telogen
기에서anagen
기로돌아감을뜻한다.17’22)
본실험에서 황금궁은모발의 성장을촉진하였고,
이러한효 과는세계적으로그효능을인정받아*
발모제로널리쓰여지고있 는M XD
과비숫하게 나타났다.
시험10
일후부터 빠르게모발성장을유도하여
21°rl
경에는전체표면에자란털로덮인것을판찰할수있었다
.
좀더자세하고객관적인 자료를 얻기위하 여조직학적,
생화학적 검사를병행하였다.
조직학적 검사는실 험시작7
일, 14
일，21
일후실험동물의 체중을측정•
비교한후Weeks
Fig. 9 - Change in alkaline phosphatase activity by topical applica
tion of test compounds for 21 days in an alopecia model of C57BL6 female mice. D.W., distilled water; EtOH, ethanol;
MXD, minoxidil; HGG, hwanggumgung. a_cMeans at each week sharing the same superscript letter were not signifi
cantly different at p<0.05.
부검을 하여，검사시약을표면적으로도포한등쪽피부를 채취 하여 조직절편을제작한후
, H&E
염색으로현미경검사를 실시하였다
.
실험과정 체중은3% M XD
가다소증가하는양상을보였으나실험이 종료되는부검시에는별다른차이를발견하지 못
하였다
.
조직 검사시황금궁및3% MXD
군이 대조군보다모낭의길이와크기가크게증가하는것을보였다
.
이는 암컷과수컷 모두에서동일하게 관찰되었다.
또한염증이나다른 병리학적 소 견을나타내지 않았다.
생화학적 지표로피부의y-GT
와ALP
의 활성은암수모든미우스에서3% M XD
및횡금궁군에서 유의 성있는증가를보였는데，이는육안적 및조직학적 결과와매우 유사한경향을 나타내었다. Hamada
와Suzuki
는C3H
수컷마우 스에서모발성장주기의 지표로서 여러 생화학적 효소들을측정하였는데그중
y-GT
와ALP
가모발의 성장과관련성을보였다고보고하였다
.13) y-GT
의경우탈모후11
일후부터 유의성 있 게증가하기 시작하여2
주후에최고로 높은활성을 보였고 그 활성이18
일까지지속되었다.13)
본연구에서y-GT
의활성이 투 여군에서 대조군보다생장기에일찍증가하기 시작하여21
일후 에최고로높은활성을보였는데,
비록본연구에서3
주후에그 효소활성듬을 측정을 하지 않았지만감소하는 경향을보였으리 라추측된다.23)
본 연구에서3% M XD
와황금궁군에서 제모후생장기가초기에 유도되어
y-GT
의활성이 증가되는것은 초기생장기에케라틴화에 필요한
cystein
으로분해하는데y-GT
가관 여하는것으로사료된다.23>
한편, C3H
수컷 마우스에서ALP
는 탈모8
일후에 유의성 있는증가를 보이기 시작하여18
일까지 지속적으로 증가한다고 보고되었다.13)
또한Handjiski
등은C57BL6
마우스에서ALP
활성 및발현부위가모발성장주기와밀접하게 관련되며 전주기를통해
dermal papilla
에서 강한 발현및활성을 보였고 늦은
anagen
기나초기catagen
기에서는outer root sheath
에서ALP-positive
반응이나타났다고보고 하 였다.16)
본연구에서도whole skin
을마쇄하여 얻은결과로서투 여군의 경우대조군보다사고의 활성이 생장초기에 증가하기 시 작하여1
주후부터유의성 있는높은활성을보였으며 이러한결 과는암수마우스에서 공히발생하였다.
본 연구에서3% M XD
와황금궁군에서ALP
효소의 활성과y-GT
의활성이 유사한양 상을보였는데,
이는두물질이 혈관 확장을통해 혈액 순환을 증가시켜모발성장에필요한영양분을 공급함으로서 발모작용이나타나는것으로추정된다
.23’24) M XD
는예전연구에서이실험동물에서모낭을자극하여모낭이 충분히 길어지고모발 재성 장에도움을 준다고 알려졌지만
,
그후M XD sulfate
가모낭에 가서 활성 대사물로 전환되어사람의 머리피부에서 혈액순환이 잘되도록 작용한다는것이 밝혀졌다.24)
본실험결과에서 확인하였듯이 황금궁은
M X D
와마찬가지로C57BL6
마f
스에서 모발 재성장에도움이 된다.
황금궁이 모발재성장에작용하는정확한기전은확실히알려져 있지는않지만
, D.W
[ZZZ3 10% EtOH m m 3% mxd
ooooo
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Q 5
4
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1
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9 00 -
8 00 -
7 00 -
6 00 -
5 00 -
4 00
3 00 -
2 0 0 -
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(u
콩
jcj 3UI/n9Tun
526 허진주 • 리란 ■ 유설혜 • 백인정 • 연정민 . 남상윤 ■ 윤명원 • 횡석연 • 흥진태 • 이범준
모낭의 길이와크기 성장을촉진시킨다고 할수있다
.
즉,
모낭길이의 성장가속화가모낭이
anagen
기로돌아가도록활성화시킨다고추측할수있고
,
그결과，충분한모발재성장에 필요한 시간이 짧아진다.
따라서 위의 결과를토대로 황금궁은탈모환 자에게탈모방지및양모효과를기대하며사용될수있으리라사 료된다.
감사의 말씀
이논문은
2005
년도충북대학교 학술연구지원사업의 연구비지원에 의하여 연구되었음
