대한비과학회

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서 론

진균은 알레르기 천식, 알레르기 비염, 알레르기성 진균 성 부비동염 등의 호흡기 질환과 면역기능 장애가 있는 환 자의 전신감염을 유발한다. 진균의 인체내 침범으로 세포 군을 형성하여 알레르기 반응, 자가면역반응, 염증반응 등 다양한 형태로 나타난다.

지금까지 10만여 종의 진균이 발 견되었으며 그 중 200여종만이 병원성을 가지고 있으며 Alternaria, Aspergillus, Cladosporium, Penicillium, Candi-

da 등이 호흡기 질환과 연관성이 있는 것으로 알려져 있 다.

Katzenstein 등이 allergic Aspergillus sinusitis를 보고한 후 진균이 부비동염의 원인이 될 수 있음을 알게 되 었고 그 후 다양한 진균들이 부비동염과 연관성이 있음이 보고되었다. 정상인과 부비동염 환자의 비즙 내 진균의 존 재가 확인되었으며, 부비동염 환자의 경우 정상인과 다른 진균에 대한 면역학적 반응을 보일 것으로 생각하고 있다.

호흡상피세포는 호흡기내로 들어온 병원성 물질을 제거 하기 위해 매우 효율적이고 특이한 기능과 구조를 가지고 있으며 항상성과 숙주방어에 중요한 역할을 담당하고 있 다. 병원성 물질이 호흡기로 침범한 경우 점액섬모운동, 상 피세포의 물리적 방어와 비즙내 존재하는 면역물질 등에 의 해 제거된다. 하지만 이러한 방어기전에 문제가 발생하는 경우 병원성 물질은 염증반응을 유발하게 되고 상피세포 아

교신저자：신승헌, 705-718 대구광역시 남구 대명4동 3056-6 대구가톨릭대학교 의과대학 이비인후과학교실

전 화：(053) 650-4525·전 송：(053) 650-4533 E-mail：[email protected]

진균의 단핵구 유래 수상세포의 활성화와 Th 면역반응에 미치는 영향

대구가톨릭대학교 의과대학 이비인후과학교실

신승헌

·

·

The Effects of Fungi on the Activation of Monocyte Derived Dendritic Cells and Its Impact on Priming Th Polarization

Seung-Heon Shin, MD, Mi-Kyung Ye, MD and Ba-Da Han, MD

Department of Otorhinolaryngology, School of Medicine, Catholic University of Daegu, Daegu, Korea

ABSTRACT

Background and Objectives：The mucosal immune response depends on the surveillance network established by den-

Materials and Methods：Monocyte-derived DCs were developed by incubating monocytes with interleukin-4 (IL-4) and

DC migration was significantly increased by conditioned media from cells that were activated with Alternaria. Conclusion：

Airborne fungi induced different immune responses depending on the fungi. Alternaria strongly induced DC migration and a Th2 immune response.

KEY WORDS

래에 존재하는 염증세포에 의한 선천적 면역반응과 후천적 면역반응이 진행되게 된다.

호흡상피세포는 항원성 물질 에 노출되는 경우 granulocyte-macrophage colony sti - mulating factor(GM-CSF), interleukin-8(IL-8), tum- or necrosis factor-α(TNF-α) 등 각종 화학물질을 생산 하여 염증세포의 활성화와 이주에 영향을 미쳐 국소 염증 반응을 유지 또는 악화시킨다.

조직 내로 이동한 림프구, 단핵구, 수상세포와 같은 염증세포들은 상피세포와 물리적 으로나 생리적으로 밀접한 관계를 가지게 된다.

호흡기 점막의 후천성 면역반응을 담당하는 수상세포는 상피세포 측면의 세포간 공간과 상피세포 하방에 위치하고 있으며, 세포간 폐쇄막을 통해 수지상 돌기를 뻗어 호흡기 내 존재하는 항원성 물질과 반응하게 된다. 이 과정에 수상 세포의 E-cadherin, leukocyte function-associated a- ntigen-1(LFA-1) 등이 관여한다.

미성숙 수상세포로 말 초조직에서 감시자로서의 역할을 담당하다가 침입한 항원 과 반응하여 활성화되고 림프절로 이동하여 T 림프구와 반 응하여 면역반응을 유도하게 된다.

즉 림프구의 면역반응은 수상세포에 의해 크게 Th1 혹은 Th2의 반응으로 나뉘어진다.

림프구에서 만들어진 사이 토카인은 탐식세포나 기타 면역세포에 대한 활성화 혹은 억제 신호를 보내어 적절한 면역방어기전이 작동하도록 한 다. 비강 상피세포의 경우 공기 중 존재하는 진균에 의해 활성화되어 각종 화학매개물질을 만들어 염증세포의 이주 와 활성화를 유도하는 것으로 알려져 있다.

이에 본 연 구에서는 진균에 의해 활성화된 비강 상피세포에 의한 수 상세포의 이주와 진균에 의해 활성화된 수상세포의 면역반 응을 알아보고자 하였다.

대상 및 방법

진균에 의해 활성화된 비강 상피세포 배양액(NECM) 생성

부비동내시경 수술을 시행받은 환자의 비용조직에서 상 피세포를 분리하였다. 환자의 선택은 알레르기성 비염과 상기도 감염이 동반되지 않고, 수술 전 4주 이상 항생제, 항 히스타민제, 국소 및 경구용 스테로이드제재 등의 약물 치 료를 시행하지 않은 예로 하였다. 채취한 조직을 penici- llin(Pc) 100 UI/mL, streptomycin(SM) 100 μg/mL, am - photericin-B(Amp-B) 2 μg/mL을 포함한 Ham’s F-12 배양액으로 세척 후 dispase(Gibco, Grand Island, NY) 를 포함한 Ham’s F-12로 처리하여 조직 표면의 세포를 분 리한다. 박리된 세포들을 10 cm 플라스틱 접시에 1시간 두 어 섬유모세포, 근육세포와 혈관 내피세포를 제거하고 얻

어진 상피세포는 Pc, SM, Amp-B, transferrin 5 μg/mL, insulin 5 UI/mL, epithelial growth factor 25 ng/mL, en- dothelial growth supplement 15 μg/mL, triiodothyrnin 200 pM, hydrocortisone 100 nM, fetal calf serum 15%

를 포함한 배양액에 37℃, 5% CO

에서 배양하였다. 상피세 포의 융합성단층이 형성되면 배양액을 keratinocyte serum free media(Gibco)로 교체하고, Alternaria alternata 50, 10 μg/mL과 Aspergillus nigra 50, 10 μg/mL을 넣어 48시간 동안 상피세포의 활성화를 유도 후 상등액을 얻어 -70℃에 보관하였다.

수상세포의 분리 및 진균에 의한 활성화

수상세포는 정상인의 heparin 처리된 말초 혈액을 pho- sphate-buffered saline(PBS)(Gibco)와 혼합하여 His- topaque(Sigma, St. Louis, MO) 위에 놓고 원심분리하여 말초혈액단핵구(PBMC)를 얻었다. 얻어진 PBMC를 PBS로 세척 후 항-CD14 항체로 30분 처리 후 magnetic cell se- paration 방법(Miltenyi Biotec, Sunnyvale, CA) 양성분리 법(positive selection)을 이용하여 단핵구를 얻었다. 단핵 구에서 유래된 수상세포를 얻기 위해 단핵구를 GM-CSF 25 ng/mL과 IL-4 10 ng/mL을 첨가한 RPMI-1640(Gibco) 으로 6일간 배양하였다. 수상세포의 순수도와 분화도는 항 CD14와 CD11c 항체를 이용하여 유동세포 분석기를 이용하 여 확인하였다.

진균에 의한 수상세포의 활성화를 확인하기 위하여 1×

10

/mL의 수상세포를 Alternaria 50, 25 ug/mL, Aspegil- lus 50, 10 μg/mL와 함께 24시간 배양 후 상등액을 얻어 보 관하였다. 양성 대조군으로는 lipopolysaccharide 10 μg/

mL을 사용하였다. 상등액에 포함된 IL-6와 TNF-α는 효 소면역측정법(R&D system, Minneapolis, MN)을 이용하 여 확인하였다.

NECM에 의한 수상세포 이주

수상세포의 이주는 3 μm의 구멍으로 이루어진 막을 가진 24-well Transwell insert system(Corning Costar, Ca - mbridge, MA)을 이용하였다. 분리된 수상세포를 upper chamber에 1×10

개 넣고 lower chamber에는 Alternaria 와 Aspergillus를 이용하여 만든 HECM을 넣고, 37℃ 5%

CO

에서 2시간 배양 후 광학 현미경을 이용하여 lower chamber로 이동한 수상세포의 수를 측정하였다.

진균으로 활성화된 수상세포와 CD4 림프구의 합동배양

CD4 림프구는 정상인의 heparin 처리된 말초 혈액을

Histopaque(Sigma) 위에 놓고 원심분리하여 PBMC를 얻 었다. 얻어진 PBMC를 항-CD4 항체로 30분 처리 후 mag- netic cell separation 방법(StemCell Technologies, Van - couver, BC, Canada) 음성분리법(negative selection)을 이용하여 얻었다.

수상세포를 진균으로 24시간 동안 활성화를 유도한 후 PBS로 세척하고 CD4 림프구와 함께 6일간 합동배양 후 상등액을 얻었다. 96 well에 수상세포 10

개를 넣고 CD4 림 프구는 2.5×10

, 10

, 2×10

개씩 넣었다. CD4 림프구의 활 성화를 확인하기 위하여 TNF-α, interferon-γ(INF-γ), IL-5를 효소면역측정법(R&D system)을 이용하여 확인하 였다.

통계분석

각각의 실험은 5회 이상 반복하여 그 결과를 얻고자 하였 다. 수상세포의 이주는 Wilcoxon signed rank test를 사 용하였고 사이토카인 생성 결과는 Kruskal-Wallis test를 이용하여 분석하였으며(SPSS ver. 14.0；SPSS Inc., Chi - cago, IL), 통계학적 유의수준은 p＜0.05로 하였다.

결 과

진균에 의한 수상세포의 활성화와 HECM에 의한 이주

진균으로 자극하지 않은 수상세포의 배양액에서는 IL-6 70.2±.4 pg/mL, TNF-α 59.0±.5 pg/mL이 포함되어 있 었다. Alternaria와 Aspergillus 50 ug/mL에서 IL-6의 경우 362.4±.3 pg/mL과 398.6±.5 pg/mL, TNF-α의 경우 1666.9±.9 pg/mL과 1796.7±.1 pg/mL로 유의한 증가소 견을 보였다(Fig. 1). TNF-α의 경우 Aspergillus 10 μg/mL 에 의해서도 유의한 증가소견을 보였다.

진균에 의해 활성화된 상피세포 배양액에 의한 수상세포 이주는 Alternaria 50, 10 μg/mL의 경우 upper chamber에 있던 수상세포의 11~14%가 이주되어 상피세포를 진균으로 활성화 유도하지 않은 경우에 비해 유의하게 이주가 증가 됨을 확인할 수 있었다(Fig. 2).

진균으로 활성화된 수상세포와 CD4 림프구의 합동배양

진균으로 활성화된 수상세포와 CD4 림프구를 6일간 합 동배양 하여 CD4 림프구에서 만들어진 사이토카인의 양상 을 알아보았다. Alternaria와 Aspergillus로 수상세포를 활 성화한 경우 TNF-α와 INF-γ의 생성은 수상세포를 진균 으로 활성화를 유도하지 않은 경우와 차이를 보이지 않았 으나 IL-5는 Alternaria 50 μg/mL로 수상세포를 활성화

한 경우 245.5±.1 pg/mL로 Aspergillus, LPS로 수상세포 의 활성화를 유도한 경우에 비해 유의하게 많은 양이 CD4 림프구에 의해 만들어짐을 확인할 수 있었다. 양성 대조군 으로 사용한 LPS의 경우에는 TNF-α와 INF-γ의 생성이 진균으로 활성화를 유도한 경우보다 유의하게 많이 유리되 었다(Fig. 3).

Fig. 1. Fungi modulates cytokine production by monocyte-de- rived dendritic cells (MDDC). IL-6 and TNF-α production was sig- nificantly elevated after 24 hours in supernatants from MDDC with Alternaria (Alt), Aspergillus (Asp) and lipopolysaccharide (LPS). NC：negative control, *：p＜0.05 compared with NC.

Fig. 2. Nasal polyp epithelial cell conditioned media which was stimulated with Alternaria (Alt) enhanced the migration of mono- cyte-derived dendritic cells. Asp：Aspergillus, NC：negative con- trol, *：p＜0.05 compared with NC.

1,600 1,400 1,200 1,000 800 600 400 200 0

IL-6 (pg/mL)

NC Alt50 Alt10 Asp50 Asp10 LPS10

*

* *

3,000 2,500 2,000 1,500 1,000 500 0

TNF-a (pg/mL)

NC Alt50 Alt10 Asp50 Asp10 LPS10

*

*

* *

18 16 14 12 10 8 6 4 2 0 Migrated cells (104)

NC Alt50 Alt10 Asp50 Asp10 LPS10

*

*

고 찰

호흡기 점막은 공기 중 존재하는 다양한 물질에 지속적 으로 노출되어 있어 병원성 물질과 비병원성 물질의 구분 이 필요하고, 이들 물질과의 면역반응이 지속적으로 이루어 지고 있다. 호흡기내로 항원성 물질이 들어오는 경우 호중 구나 대식세포를 이용한 선천성 면역반응이 일차적인 방어 기전으로 작용하게 된다. 이러한 비특이적 방어기전이 충분 하지 못한 경우 백혈구에서 만들어진 염증성 화학매개물질 에 의해 항원제시세포(antigen presenting cell)이 활성화 되면서 후천적 면역방어기전을 통해 항원성 물질을 제거하

게 된다.

수상세포는 거의 모든 조직에 존재하는 대표적 인 항원제시세포 중 하나로 면역학적 항상성 유지에 매우 중요한 역할을 담당하고 있다. 호흡상피 하층에 위치하고 있던 미성숙 수상세포가 병원성 물질에 노출되면 면역반응 이 시작되고 강화되며 T 림프구와 반응하여 Th1 및 Th2 면역반응을 나타내게 된다.

일반적으로 호흡기 점막에 는 1 mm

당 평균 500~1,000개의 수상세포가 존재하며 병 원성 물질, 담배 연기, 알레르기 물질 등에 노출되는 경우 점 막 하 수상세포의 수가 증가하게 된다.

진균은 알레르기 천식, 만성 부비동염 등의 호흡기 질환을 유발하며 면역기능 장애를 가진 환자에서는 전신감염을 일 으키기도 한다. 진균은 여러 종류의 항원성 물질과 단백질 분 해효소로 구성되어 있고 이들 물질이 직접 호흡상피세포의 탈피를 유도하여 조직내 항원성 물질의 침투를 용이하게 한다. 본 연구에서는 비즙에서 흔히 배양되는 Alternaria와 Aspergillus를 사용하였는데, Alternaria는 기관지 천식을 악 화시키고, Aspergillus는 알레르기성 기관지폐 질환의 원인 으로 알려진 진균이다.

진균이 가지고 있는 다양한 단백물 질은 세포 수용체와 결합하여 세포의 활성화를 유도하게 된 다. 특히 수상세포의 경우 pattern recognition receptor 인 toll-like receptor(TLR)를 통해 신호전달이 이루어져 활성화가 이루어지는 것으로 알려져 있다.

단핵구에서 유 래된 미성숙 형태의 수상세포는 수상세포 고유의 항원제시 기능을 가지고 있으며 항원성 물질에 의해 활성화 및 성숙 되면서 Th림프구의 분화를 유도하는 것으로 알려져 있다.

저자들의 경우에도 수상세포를 진균으로 활성화를 유도하 여 IL-6와 TNF-α의 생성이 유의하게 증가됨을 확인할 수 있었다. 하지만 Alternaria와 Aspergillus에 의한 수상세포 의 활성화 정도는 양성 대조군으로 사용한 LPS에 비해서 는 약하게 이루어 짐을 알 수 있었다. 이는 진균이 TLR2를 통한 활성화보다 LPS의 TLR4를 통한 활성화 과정이 더욱 강력하게 이루어진다는 기존의 보고와 일치하였다.

미성 숙 수상세포가 TLR를 통해 항원을 인지하면 성숙해지면서 세포표면에 보조자극분자(co-stimulatory molecule)를 표 현하고 na

ve T세포를 자극하여 Th1 혹은 Th2 세포로의 분화를 유도한다. 일반적으로 진균의 인체 감염은 세포매 개면역 방어기전에 의해 병원성이 억제되지만 호흡기 점막 의 방어능력이 손상되는 경우 Th2 림프구의 활성화가 유도 되어 병적상태가 초래된다.

본 연구에서 Alternaria로 수 상세포의 활성화를 유도한 경우 CD4 림프구에서 Th2 사이 토카인인 IL-5가 유의하게 증가된 것은 Alternaria에 의 해 알레르기성 면역반응이 발생, 악화 될 수 있다는 기존의 보고와 일치하는 소견이었다.

하지만 호흡기 알레르기를

Fig. 3. Effect of activated monocyte-derived dendirtic cell (MDDC) with fungi on CD4 lymphocyte polarization. Activated MDDCs (10⁴/well) were co-cultred 2.5×10⁴, 10⁴, and 2×10³ of CD4 lymphocytes for 6 days. Alternaria (Alt) enhanceded the production IL-5 and lipopolysaccharide (LPS) enhanced the production of TNF-α and INF-γ. Asp：Aspergillus, DC (-)：non- stimulated DC. *：p＜0.05.

350 300 250 200 150 100 50 0

IL-5 (pg/mL) 2.5*104 DC (-) 104 (-) 2*103 DC (-) 2.5*104 Alt50 104 Alt50 2*103 Alt50 2.5*104 Alt10 104 Alt10 2*103 Alt10 2.5*104 Asp50 104 Asp50 2*103 Asp50 2.5*104 Asp10 104 Asp10 2*103 Asp10 2.5*104 LPS10 104 LPS10 2*103 LPS10

* * 80

70 60 50 40 30 20 10 0

TNF-a (pg/mL) 2.5*104 DC (-) 104 (-) 2*103 DC (-) 2.5*104 Alt50 104 Alt50 2*103 Alt50 2.5*104 Alt10 104 Alt10 2*103 Alt10 2.5*104 Asp50 104 Asp50 2*103 Asp50 2.5*104 Asp10 104 Asp10 2*103 Asp10 2.5*104 LPS10 104 LPS10 2*103 LPS10

*

*

80 70 60 50 40 30 20 10 0

INF-r (pg/mL) 2.5*104 DC (-) 104 (-) 2*103 DC (-) 2.5*104 Alt50 104 Alt50 2*103 Alt50 2.5*104 Alt10 104 Alt10 2*103 Alt10 2.5*104 Asp50 104 Asp50 2*103 Asp50 2.5*104 Asp10 104 Asp10 2*103 Asp10 2.5*104 LPS10 104 LPS10 2*103 LPS10

*

*

유발하는 것으로 알려진 Aspergillus의 경우는 Th1, Th2 사이토카인 생성이 증가되지 않았다. 이는 연구에 사용된 Aspergillus의 병원성이 Alternaria에 비해 약한 것이 원인 이 될 수 있다. 또 연구에 사용된 진균이 비강에서 직접 배 양된 진균이 아닌 냉동 건조된 것으로 인체에 존재하는 진 균의 항원 역가와 차이가 있을 수 있으며, 생산 과정에서 진 균의 항원 특성 일부가 소실, 변화될 수 있기 때문일 수 있다.

공기 중 존재하는 진균은 호흡상피세포의 활성화를 유도 하여 다양한 화학매개물질의 생성을 유도한다.

수상세 포는 화학매개물질이나 병원성 물질에 의해 세포벽 접착분 자와 수용체 발현이 변화되어 이주와 성숙이 이루어 진다.

항원에 의해 활성화된 기관지 상피세포는 CCL2, CCL5, CXCL10 등의 케모카인을 분비하고 이로 인해 수상세포의 이주가 이루어 진다.

본 연구에서 비강 상피세포를 Alter- naria로 활성화를 유도한 경우 수상세포의 이주가 활발하 게 이루어짐을 알 수 있었다. 수상세포의 이주에 영향을 미 치는 케모카인을 확인하지는 않았지만 비강 상피세포가 수 상상포의 분화와 이주에 영향을 미침을 확인할 수 있었다.

이상의 결과를 종합해 보면, 첫째 단핵구에서 유래된 미 성숙 수상세포는 Alternaria와 Aspergillus에 의해 활성화가 이루어져 IL-6와 TNF-α의 생성을 유도하며, 둘째 진균에 의해 활성화된 수상세포를 CD4 림프구와 함께 합동배양하 여 Alternaria에 의해 활성화된 수상세포가 Th2 사이토카 인을 생성시키며, 마지막으로 두가지 진균으로 비강 상피세 포를 활성화시켜 얻은 배양액으로 수상세포의 이주를 유도 한 경우 Alternaria로 활성화된 상피세포에 의해 수상세포의 이주가 유의하게 증가됨을 확인할 수 있었다. 비강점막 하 층에 존재하는 수상세포가 진균에 의한 상피세포의 활성화 에 의해 림프절로 이주하게 되고 그 곳에서 성숙되고 림프 구와 상호작용하여 면역반응을 나타내게 되는 것이다. 본 연구에서 사용된 진균 중 특히 Alternaria가 수상세포의 활 성화, 이주 및 Th2 면역반응을 강력하게 유도되어 공기 중 존재하는 진균 중 Alternaria가 호흡기 질환의 발병기전에 중요한 역할을 담당한다는 기존의 연구결과와 유사한 결과 를 보였다.

하지만 본 연구는 진균에 의한 수상세포의 활 성화 및 수상세포 이주 기전에 대한 연구를 함께 시행하지 못한 한계점을 가지고 있어 향후 이에 대한 연구가 필요할 것이다.

중심 단어：수상세포·진균·이주·활성화·면역반응.

저자역할(Author Contributions)

신승헌, 예미경, 한바다는 본 연구에서 모든 자료에 접근할 수 있 으며 자료의 완전성과 자료 분석의 정확성에 책임을 지고 있습니

다. 연구 기획：신승헌. 자료 해석 및 분석：예미경. 논문초안：

한바다. 논문수정：신승헌. 연구 총괄：신승헌.

REFERENCES

1) Romani L. The T cell response against fungal infection. Curr Opin Immunol 1997;9:484-90.

2) Koivikko A, Viander M, Lanner A. Use of the extended Phadebas RAST panel in the diagnosis of mould allergy in asthmatic chi- dren. Allergy 1991;46:85-91.

3) Shen HD. Lin WL, Tam FM, Wang SR, Tsai JJ, Chou H, et al. Al- kaline serine protease: a major allergen of Aspergillus oryzae and its crossreactivity with Penicillium citrinum. Int Arch Allergy Appl Immunol 1998;116:29-35.

4) Katzenstein AL, Sale SR, Greenberger PA. Allergic Aspergillus sinusitis: A newly recognized form of sinusitis. J Allergy Clin Im- munol 1983;72:89-93.

5) Ponikau JU, Sherris DA, Kern EB, Homburger HA, Frigas E, Gaf- fey TA, et al. The diagnosis and incidence of allergic fungal sinus- itis. Mayo Clin Proc 1999;74:877-84.

6) Shin SH, Ponikau JU, Sherris DA, Congdon D, Frigas E, Bombur- ger HA, et al. Chronic rhinosinusitis: an enhanced immune response to ubiquitous airborne fungi. J Allergy Clin Immunol 2004;114:1369- 7) Schonheyder H, Stolzenberg ED, Zasloff MA. Epithelial antibiot-75.

ics induced at sites of inflammation. Science 1995;267:1645-8.

8) Vandermeer J, Sha Q, Lane AP, Schleimer RP. Innate immunity of the sinonasal cavity: expression of messenger RNA for comple- ment cascade components and toll-like receptors. Arch Otolaryn- gol Head Neck Surg 2004;130:1374-80.

9) Suzuki H, Shimomura A, Ikeda K, Furukawa M, Oshima T, Taka- saka T. Inhibitory effect of macrolides on interleukin-8 secretion from cultured human nasal epithelial cells. Laryngoscope 1997;

107:1661-6.

10) Lambercht BN, Hammad H. The other cells in asthma: dendritic cell and epithelial cell crosstalk. Curr Opin Pul Med 2003;9:34-41.

11) Lanzavecchia A, Sallusto F. Regulation of T cell immunity by den- dritic cells. Cell 2001;106:263-6.

12) Shin SH, Lee YH, Jeon CH. Protease dependent activation of nasal polyp epithelial cells by airborne fungi leads to migration of eosi- nophils and neutrophils. Acta Otolaryngol 2006;126:1286-94.

13) Shin SH, Lim GH, Kim DH. Interaction between peripheral blood immune cells and activated respiratory epithelial cells with airborne fungi. Korean J Otolaryngol Head Neck Surg 2008;51:1009-14.

14) Delclaux C, Azoulay E. Inflammatory response to infectious pul- monary injury. Eur Respir J Suppl 2003;42:10s-4s.

15) Banchereau J, Seinman RM. Dendritic cells and the control of im- munity. Nature 1998;392:245-52.

16) Rissoan MC, Soumelis V, Kadowaki N, Grouard G, Briere F, de Waal Malefyt R, et al. Reciprocal control of T helper cell and dendritic cell differentiation. Science 1999;1183-6.

17) Gong JL, McCarthy KM, Telford J, Tamatani T, Miyasaka M, Sch- neeberger EE. Intraepithelial airway dendritic cells: a distinct subset of pulmonary dendritic cells obtained by microdissection. J Exp Med 1992;175:797-907.

18) McWilliam AS, Napoli S, Marsh AM, Pemper FL, Nelson DJ, Pimm CL, et al. Dendritic cells are recruited into the airway epithelium dur- ing the inflammatory response to a broad spectrum of stimuli. J Exp Med 1996;184:2429-32.

19) Neukirch C, Henry C, Leynaert B, Liard R, Bousquet J, Neukirch F. Is sensitization Alternaria alternate a risk factor for severe asth- ma? A population-based study. J Allergy Clin Immunol 1999;103:

709-11.

20) Mendes-Giannini MJS, Soares CP, da Silva JLM, Andreotti PF. In- teraction of pathogenic fungi with host cells: molecular and cellu- lar approach. Immunol Med Microbiol 2005;45:383-94.

21) Langenkamp A, Messi M, Lanzavecchia A, Sallusto F. Kinetics of dendritic cell activation: impact on priming of Th1, Th2 and nonpo- larized T cells. Nature Immunol 2000;1:311-6.

22) Kadowaki N, Ho S, Antonenko S, Malefyt RW, Kastelein RA, Ba-

zan F, et al. Subsets of human dendritic cell precursors express different toll-like receptors and responds to different microbial an- tigens. J Exp Med 2001;194:863-9.

23) Reibman J, Hsu Y, Chen LC, Bleck B, Gordon T. Airway epithelial cells release MIP-3α/CCL20 in response to cytokines and ambient particulate matter. Am J Respir Cell Mol Biol 2003;28:648-54.