쥐노래미

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서 론

어류의 여포세포층에서 생성된 에스트로겐 호르몬은 혈류를 따라 간으로 가서 난황형성에 필요한 난황형성

전구물질인 vitellogenin을 간에서 합성한 후 다시 이 물질을 혈액속에 분비하여 난소난에서 난황단백질을 형 성케하는 중요한 역할을 하고 있는 것으로 보고되어 있 다(Aida et al., 1973a; Stanchfield and Yager, 1980). 이 들 어류의 간은 생식소 성숙 및 섭이율에 따라 간세포내

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쥐노래미

Hexagrammos otakii

의 난소 발달단계에 따른 간세포의 활성변화

정 의 영∙강 희 웅*∙이 근 우**

군산대학교 해양생명과학부, *국립수산과학원 보령수산종묘시험장

**군산대학교 해양응용공학부

Changes in Activity of the Hepatocytes of the Greenling Hexagrammos otakii with the Ovarian Developmental Phases

Ee-Yung Chung, Hee-Woong Kang* and Keun-Woo Lee**

School of Marine Life Science, Kunsan National University, Kunsan 573-701, Korea

*Boryeong Marine Hatchery, National Fisheries Research &

Development Institute, Boryeong 355-851, Korea

**School of Ocean Applied and Technology, Kunsan National University, Kunsan 573-701, Korea

The GSI in the female greenling Hexagrammos otakii, began to increase in September and reached a maximum in November. The reproductive cycle of the greenling can be divided into five successive stages: early-growing stage (July), late-growing stage (July to August), mature stage (September to October), ripe-and-spent stages (September to December), and recovery- and-resting stages (December to June). Monthly changes in the HSI showed a similar pattern with those of the GSI. In the early-growing stage, a lot of lipid droplets, and glycogen particles were present in the cytoplasm of hepatocytes. Especially, the cytoplasm of hepatocytes were weakly stained with hematoxylin. In the late-growing to mature stage, hepatocytes became large, and the amount of glycogen and lipid droplets in hepatocytes gradually decreased, while basophilic substance increased. In the spawning to recovery-and-resting stages, basophilic substances decreased in the cytoplasm of the hepatocytes. However, lots of lipid droplets and glycogen were stored in the hepatocytes. The maxium total protein, lipid and glycogen contents (%) in the hepatocytes appeared in September (mature stage), July (early-growing stage) and March (resting stage), respectively.

Key words : Hexagrammos otakii, Reproductive cycle, Gonadosomatic index, Hepatosomatic index, Hepatocyte

(2)

지방^,글리코겐^,핵산물질 등의 양이 계절적으로 변화하는 것으로 알려져 있다(Pickford, 1953; Ito et al., 1962). 어 류가 번식기에 이르면^,성숙한 암컷의 간중량지수는 수 컷보다^,그리고 미성숙어보다 더 크게 증가되는 것으로 보고되어 있다⁽ 宮∙ ^{, 1948;} 口∙ ^{, 1953;}

Ishii and Yamamoto, 1970). 지금까지 한국과 일본산 쥐 노래미 Hexagrammos otakii에 관해 연구∙보고된 것은 생태학적 연구(Kanamoto, 1976, 1977, 1979a, b; Kim, 1977; Fukuhara and Fushimi, 1983, 1984), 발생학적 연 구(Yamamoto and Nishioka, 1948; Chung and Lee, 1985; Chung et al., 1986; Kim et al., 1993; Lee et al., 2000), 종묘생산에 관한 연구⁽ 등^{, 1974;} ^{, 1980;}

∙ , 1981; Lee et al., 1996; Lee and Lee, 1996) 등이 있으나^,생식기작에 관련된 간세포의 활성변화에 관한 기초연구는 매우 미흡한 실정이다^.특히^,어류의 간 세포내 물질축적 및 분비활성에 관한 광학 및 전자현미 경적 연구∙보고는 소수의 연구자들(Yamamoto, 1964;

Berlin and Dean, 1967; Ishii and Yamamoto, 1970; Aida et al., 1973b; Chung et al., 1986, 1991b)에 의해 보고되 어 있을 뿐^,난소 발달에 따른 간세포들의 활성 변화는 아직도 불명확한 점이 많다^.

본 연구는 쥐노래미의 인공종묘생산이 우리 나라에서 도 성공적으로 수행되고 있고 양식 대상어종으로 부각 되고 있어 본 종의 자원증식과 인공종묘생산을 위해서 는 우선 양식생물의 생식생리에 관한 기초연구가 필요 하다^.따라서 연안정착성 어류인 쥐노래미를 대상으로 생식소중량지수^(GSI),간중량지수^(HSI)의 연간변화와 간세포내 물질축적 및 분비활성이 생식소의 발달과 어 떠한 관계를 가지는지 조사하여 이들 생식주기 성립기 구의 해명을 위한 기초자료를 얻고자 조사하였다^.

재료 및 방법

2000년 ¹월부터 ²⁰⁰¹년 ¹²월까지 충남 보령시 연안 앞바다에서 매월 낚시 및 통발로 ²⁰�³⁰마리씩 채집한 총 ⁴²⁴개체의 쥐노래미를 본 실험 재료로 사용하였다^. 채집된 재료는 즉시 실험실로 옮겨 전장과 체장은 ^0.1 cm까지^,체중은 ^{0.1 g}까지 계측한 후 해부하여 어체로부 터 떼어낸 생식소와 간은 ^{0.01 g}까지 계측하였다^.

생식소중량지수는⁽생식소중량×^100)/체중^,간중량지수 는⁽간중량×^100)/체중의 식으로 계산하였다^.광학현미경 적 조직표본제작은 ^Bouin고정액에 ²⁴시간 고정하여 파 라핀절편에 의해 ⁵�⁸µm 두께로 연속절편을 만들었으 며^,비교염색하였고, Hansen’s haematoxylin과 ^{0.5% eos-} in으로 이중염색하였다^.투과형전자현미경적 조직표본

제작은 2.5% glutaraldehyde-2% paraformaldehyde (0.1 M cacodylate buffer, pH 7.5)에 ¹²시간 전고정한 후 ¹⁰

% sucrose (0.1 M cacodylate buffer, pH 7.5)로 약 ¹⁰분간 충분히 세척하고 2% osmium tetroxide 와 0.2 M cacodylate 1 : 1 용액에서 ⁹⁰분간 후고정시켰다^.고정이 끝난 조 직소편은 에탄올에 의해 탈수한 뒤, propylene oxide로 치환하고 Epon-812 혼합액에 포매하여 Sorvall MT-2 ultramicrotome으로 초박절편을 제작하였다. 초박절편은 uranyl acetate와 lead citrate로 전자염색하여 ^{JEM 100} CX-2 전자현미경^{(100 KV)}으로 관찰하였다^.

간조직의 생화학적 성분 분석에서 일반성분 분석은 AOAC법에 의하여 수분함량은 ¹⁰⁵�^C 상압건조법으로 측정하여^,총단백질함량^(%),총지질함량^(%)과 글리코겐 함량^(%)과 비교하였다^.총단백질함량^(%)은 ^Soxtec추출 법(Soxtec HT6)으로^,총지질함량^(%)은 킬탈 ^TECATOR 1026 추출법^(KJELTEC질소증류장치⁾으로 측정하였고^, 글리코겐의 정량은 ^anthrone황산법을 이용하여 측정하 였다^.어체로부터 떼어낸 암컷 간조직 시료를 균질화하 여 일정량을 취한 후 ^30%수산화 칼륨 용액을 가하고^, water bath 상에서 ¹⁰⁰�^C로 ²시간 교반하였다^.그리고 냉각 후³배 양의 알코올을 가하여 교반한 후⁴�^C 상태 에서 하룻밤을 방치하여 글리코겐을 침전시켰다^.침전된 글리코겐을 원심분리^{(5000 g}×^{10 min)}하여 침전물을 ¹ N 황산용액 ^{6 ml}를 가하여 용해시킨 다음 다시 같은 조 건으로 원심분리하여 상층액을 가지고^anthrone황산법 으로 측정하였다^.총단백질함량^(%),총지질함량^(%)과 글 리코겐함량^(%)의 환산은 간조직 ¹⁰⁰그람당 함량^(%)으 로 나타내었다^.

간세포활성 조사를 위해 간세포와 핵의 크기 변화 등 을 광학현미경하에서 확인하였고^,세포내 소기관자⁽미토 콘드리아와 조면소포체) 및 영양물질(지방적 수, 글리코 겐 입자의 양⁾들을 전자현미경하에서 조사하였다^.또한 생화학적 성분분석에 의해 간세포질내의 총단백질함량 (%), 총지질함량^(%),글리코겐함량^(%)의 축적을 측정하 여 월별 변화를 비교∙조사하였다^.

결 과

1. 생식소중량지수의 연간변화

2000년 ¹월부터 ²⁰⁰¹년 ¹²월까지 ²년간의 ^GSI의 연 간변화는 ^{Fig. 1}에 나타내었다^{. 2000}년에 쥐노래미 암컷 의 ^GSI평균값은 ¹월에서 ⁷월까지 ^0.40이하로 아주 낮 았으나 ⁸월^(0.63)부터 서서히 증가하여 ¹¹월에 연중 최 고값^(7.53)을 나타내었다^.이 후 ^GSI값은 점차 떨어져

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12월에 ^5.52를 나타내었다^{. 2001}년에 조사한 암컷의 GSI 값도²⁰⁰⁰년에 조사된 값과 큰 차이없이 유사한 경 향을 나타냈다^{. 1}월에서 ⁷월까지는 ^GSI평균값은 ^0.40 이하로 아주 낮았으나 ⁹월로 접어들면서 생식소 발달이 시작되어 ¹¹월에 최고값^(5.90)에 이른 후^{, 12}월부터 다 시 떨어져 낮은 값^(2.30)을 유지하였다^.

2. 난소 발달단계에 따른 생식주기

GSI의 월별 변화와 난소내 생식세포 발달의 조직학적

관찰을 토대로 쥐노래미의 생식주기를 조사한 결과 성 장전기^,성장후기^,성숙기^,완숙 및 산란기^,그리고 회복 및 휴지기의 연속적인 ⁵단계로 구분할 수 있었다^.난소 발달단계는 주기성을 나타내었다^.

1) 성장전기(Early growing stage)

7월에 채집된 개체들에서는 난소가 활성화되기 시작 하였다^.성장전기의 난소내에서는 크로마틴인기 난모세 포⁽난경 ^12.5�^20.0µm)와 주변인기 난모세포⁽난경 ³⁰

�¹²⁰µm)들이 출현∙발달하였다(Fig. 3A).

2) 성장후기(Late growing stage)

7�⁸월에 접어들면 대부분의 개체가 성장후기의 난소 를 갖는데^,난소내에서는 난황포기⁽난경 ¹²⁰�³⁰⁰µm) 및 난황구기 난모세포⁽난경 ⁴⁰⁰�⁸⁰⁰µm) 들이 난소소 낭을 가득 채웠다(Fig. 3B).

3) 성숙기(Mature stage)

난소의 발달이 급격히 진행되어 대부분의 난소내에는 다량의 난황이 축적된 난모세포들과 배포이동기에 속하 는 성숙난모세포(난경900�1,000µm)들로 가득 채워졌 다(Fig. 3C, D). 성숙기의 개체들은⁹월에서 ¹⁰월까지 출 현하였다^.

4) 완숙기 및 산란기(Ripe and spent stage) 9월과 ¹²월에는 완숙기의 난소가 출현하였는데^,이때 암컷의 난소소낭내에는 난경 ^1,150�^1,450µm 전후의 완숙난으로 가득 채워져 있는데(Fig. 3D), 이들 완숙난 의 난황구는 균질화되어 있다^{. 11}월 초순부터 배란흔적 을 보이는 난소가 출현하기 시작하였으며(Fig. 3E), 이 들의 산란은¹¹월부터¹²월까지 지속되었다

5) 회복 및 휴지기(Recovery and resting stage) 12월 이후 방란이 끝난 암컷개체들의 난소소낭내에는 미방출된 난모세포들과 잔존여포들이 퇴화∙흡수되었으 며 이때 난소소낭은 위축되었다^.이때 난소소낭내에는 난황포기 난모세포 이상 발달한 모든 난모세포들은 모 두 회복∙흡수되었고(Fig. 3E), 호염기성 세포질을 가지 는 초기 성장기의 난모세포들만이 난소소낭을 채웠다^. 이들 개체들은 ¹²월부터 ⁶월까지 장기간에 걸져 회복 및 휴지기의 상태를 나타내었다^{(Fig. 3F).}

3. 간중량지수의 연간변화

생식소 발달과 직접 관련되어 변화를 보이고 있는 간 중량지수의 연간변화는 ^{Fig. 2}와 같다^{. 2000}년에 암컷의 HSI 평균값은 ¹월에서 ⁴월까지 ^1.0이하의 낮은 값을 나타내었으나 ⁵월부터 상승하기 시작하여 ¹¹월에 연중 Fig. 1. Monthly changes in the gonadosomatic index (GSI)

of Hexagrammos otakii from January 2000 to Dec- ember 2001. Vetical bars represent standard error.

Fig. 2. Monthly changes in the hepatosomatic index (HSI) of Hexagrammos otakii from January 2000 to Dec- ember 2001. Vetical bars represent standard error.

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Fig. 3. Photomicrographs of gonadal phases of the female greenling Hexagrammos otakii (A�F). A, The ovarian lobule in the early growing stage. Note oocytes in the chromatin-nucleolus and perinucleolus stages in the cytoplasms. Scale bar = 30µm; B, the ovarian lobule in the late growing stage. Note oocytes in the late perinucleolus stage, yolk vesicle and yolk stages in the cytoplasms. Scale bar = 200µm; C, the ovarian lobule in the mature stage. Note oocytes filled with yolk globules in the cytoplasms. Scale bar = 900µm; D, the ovarian lobule in the ripe stage. Note ripe eggs with homogenized yolk materials and oil gloubules in the cytoplasms and well developed zona radiata. Scale bar

= 1,000µm; E, the ovarian lobule in the spawning stage. Note the presence of residual follicles after ovulation. Scale bar = 30µm; F, the ovarian lobule in the recovery and resting stage. Note the degenerating oocytes and residual immature oocytes. Scale bar = 30µm. Abbreviations : CN, Chromatin-nucleolus; DO, degenerating oocytes; IO, immature oocytes; PN, perinucleolus; RE, ripe eggs; RF, residual follicles; YG, yolk globules; YS, yolk stages; YV, yolk vesicle.

A B

C D

E F

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최대값^(2.43)을 나타내었으며^{, 12}월부터 다시 떨어져 1.59를 나타내었다^{. 2001}년의^HSI의 변화도 ¹월부터 낮 아지기 시작하여 ²월에 연중 최저값^(0.72)을 나타내었 고 ⁵월에 일시적으로 급상승하였다가 ⁶월부터 일시 감 소되었다가 ¹¹월에 연중 최고값^(2.40)에 이른 후 ¹²월 부터 그들의 값이 감소되었다^.따라서 쥐노래미 암컷의 경우는 ^GSI의 연간변화는^HSI와 유사한 경향을 나타내 었다.

4. 생식주기에 따른 간세포의 변화

간세포는 세포의 크기^,영양물질의 합성 및 축적^,그리 고 염색성 등이 생식소 발달단계에 따라 뚜렷한 변화를 나타내었다^.

1) 광학현미경적 소견

7월에 채집된 성장전기의 난소를 가진 개체^{(GSI 0.42}

�^0.63)들의 간세포(HSI 1.23) 들의 크기는 ^14.80� 15.20µm의 범위로 한 개의 뚜렷한 핵^(5.0�^5.1µm)과 1�²개의 인들이 핵속에 출현하였다^.이때 간세포질속 에는 영양물질의 합성 및 축적이 일어났으며^,호염기성 물질의 축적이 활발치 않아 헤마톡실린 염색에 약한 호 염기성을 나타내었다(Fig. 4A). 8�¹⁰월에 성장후기 및 성숙기의 개체들의 ^GSI값이 ^1.05�^2.77을 나타내는 개 체들의 간세포(HSI 1.58) 들의 크기^(15.50�^16.10µm) 와 핵의 크기^(5.2�^5.5µm)는 좀더 비대해졌으며 인의 활성도 뚜렷해졌다^.이때 세포질내에는 호염기성물질의 축적이 증대되고 있어 헤마톡실린에 염색되어 나타났다 (Fig. 4B).

9�¹⁰월에 성숙 및 완숙기의 생식소를 가진 개체^(GSI 6.68)의 간세포(HSI 2.25) 들의 크기^(17.40�^17.50µm) 와 핵의 크기(7.4�7.5µm)는 크게 비대되었으며, 세포 질속에는 물질의 합성과 축적이 최대로 일어나고 있어 세포는 가장 크게 비대해졌다^.또한 호염기성물질의 축 적도 최대로 일어나 헤마톡실린에 강한 염색 반응을 나 타내었다^.반면^,지질 축적은 오히려 감소되었다^(Fig.

4C). 방란 중인 ⁹�¹²월의 개체^{(GSI 5.52}�^7.53)들의 간세포(HSI 1.59) 크기^(15.30�^15.40µm) 및 핵의 크기 (5.1�^5.2µm)는 크게 감소되어 나타났으며^,세포질내에 는 지질이 축적되어 포상구조가 뚜렷하게 나타났으며^, 세포질내에는 호염기성물질의 합성 및 축적이 극히 감 소되어 헤마톡실린에 염색성이 약해졌다^.그리고¹월 이 후 퇴화 및 휴지기의 개체들^{(GSI 0.33}�^0.76)의 간세포

(HSI 1.02)의 세포질속에는 지방적이 다량으로 축적되어

간세포는 마치 포상구조를 나타내고 있으며^,영양물질의 축적이 점차로 증가되어 에오신 염색에 약한 호산성을

나타내었다^.반면^,이 시기에 간세포질내에는 호염기성물 질의 축적이 급감되어 호산성을 나타내었다^{(Fig. 4D).}

2) 전자현미경적 소견

생식소 발달단계에 따른 암컷 개체들의 간세포 활성 은 간세포질내 소기관자들의 변화와 물질의 축적상태에 따라 다르게 나타났다^.성장전기의 난소를 가진 개체들 의 간세포들의 모양은 다각형 또는 타원형이었으며^,구 상의 핵속에는 크로마틴인이 나타났다^.그리고 이 때 간 세포의 세포질내에는 수많은 미토콘드리아^,조면소포체 들과 다량의 지방적 및 글리코겐 입자들이 핵 주변에 축적되어 나타났으나 간세포의 활성은 낮았다(Fig. 5A).

성장후기의 난소를 가지는 개체들의 간세포 핵의 모양은 타원형이었으며^,핵속에는 뚜렷한 한 개의 인이 출현하였 다^.간세포질내에는 발달된 다수의 조면소포체들^,골지체 및 미토콘드리아가 출현하였으며^,소량의 작은 지방적이 보여 성장전기의 특징과 아주 다르게 나타났다^{(Fig. 5B).}

난황축적이 일어나는 성숙기의 난소를 가지는 개체들의 간세포의 핵은 원형으로 점차로 커지며 그 속에¹�³개 의 인들이 보인다^.또한 핵내의 크로마틴은 핵막주위에 분포하며^,일부는 미세과립상으로 핵질내에 산재하였다^. 그리고 세포질내 지방적의 양은 급격히 감소되는 반면^, 잘 발달된 조면소포체들과 리보소옴의 수가 크게 증가 되어 단백질의 합성이 왕성해 지며^,이시기에는 핵산물 질이 합성∙축적되어 활성도가 최대로 높아져 간세포들 의 활성이 가장 높게 나타났다^{(Fig. 5C).}

방란후 회복 및 휴지기 개체들의 간세포 핵은 약간 작아지며^,세포질속에는 미발달된 소수의 조면소포체들 과 미토콘드리아 및 리소조옴들이 나타난다. 그리고 다 량의 글리코겐물질들이 축적되었으며 크고 작은 지방적 들이 다수 축적되었다^{(Fig. 5D).}

5. 생식소 발달단계에 따른 간조직내의 생화학적 성분 변화

1) 총단백질 함량(%)의 월별 변화

난소의 발달 단계에 따른 간조직 ¹⁰⁰그람당 총단백 질 함량^(%)의 월별 변화는 ^{Fig. 6}에 나타낸 바와 같이^, 성장후기인^{7, 8}월부터 서서히 증가되기 시작하여⁹월에 최대값^(16.92%)에 이른 후 산란기인 ¹⁰�¹²월까지 점 차 감소되었으며^,회복기인 ¹�²월에도 아주 낮은 값 (12.25�^12.63%)을 나타내었다^.

2) 총지질 함량(%)의 월별 변화

Fig. 6에 나타낸 바와 같이^,난소의 발달 단계에 따른 간조직 ¹⁰⁰그람당 총지질 함량^(%)의 월별 변화는 휴지

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Fig. 4. Photomicrographs of hepatocytes with ovarian developmetal phases of the female greenling Hexagrammos otakii (A�D). A, Hepatocytes in the early growing stage. Note prominent nuclei and a lot of lipid in the vacuolized cytoplasm; B, the late growing stage. Note nucleolus in the nuclei and lipid in the basophilic substance weakly stained with hematoxylin in the cytoplasm; C, the mature stage. Note remarkable hypertrophic nuclei and basophilic substance strongly stained with hematoxyline in the cytoplasm; D, the recovery and resting stage. Note prominent nuclei and a lot of lipid in the vacuolized cytoplasm after spawning. Scale bars = 30µm.

A B

C D

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Fig. 5. Electron micrographs showing the activity of the hapatocytes with ovarian developmetal phases of the female greenling Hexagrammos otakii (A�D). A, Hepatocytes in the early growing stage. Note a large nucleus with chro- matin, large quantity of lipid droplets, glycogen particles and the mitochodria in the cytoplasm; B, the late growing stage. Note a nucleolus in the nucleus, small number of lipid droplets, remarkable rough endoplasmic reticulum, Golgi apparatus and the mitochodria in the cytoplasm; C, in the mature stage. Note remarkable hypertrophic nucleus with the nucleolus, well-developed rough endoplasmic reticulum and the mitochodria; D, the recovery and resting stage. Note prominent nuclei, large quantity of lipid droplets and glycogen particles in the cytoplasm after spawning. Abbreviations : GA, Golgi apparatus; GP, glycogen particle; LD, lipid droplet; M, mitochondria; N, nucleus;

NO, nucleolus; RER, rough endoplasmic reticulum. Scale bars = 1µm.

A B

C D

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기인 ⁶월부터 서서히 증가하기 시작하여 성장기인 ⁷월 에 최대값^(13.19%)을 나타낸 후 산란기인 ¹⁰�¹²월까 지 급격하게 감소^(4.10�^9.81%범위⁾되었고^,휴지기인 ³

�⁴월에도 계속하여 낮은 값^(2.16�^2.65%)을 나타내었 다^.

3) 글리코겐 함량(%)의 월별 변화

난소의 발달 단계에 따른 간조직 ^{100 gr}당 글리코겐 함량^(%)의 월별 변화는 총단백질 함량 및 총지질 함량 의 변화와 음(-)의 상관관계를 일부 나타내었다^(Fig.

6). 회복기인 ¹�²월에는 아주 낮은 값^(3.33�^4.10%범 위⁾을 보였고^,휴지기인 ³월에 최대값^(17.05%)에 이른 후 ^{4, 5}월에 급감되어^,성숙기인 ⁹월에 최저값^(0.51%)을 보였다^.그 후 산란기인 ¹⁰�¹²월에도 낮은 값을 나타 내었다^.

고 찰

남해안산 쥐노래미 GSI의 변화는 1월에 최고값을 나 타내었으며^{, 3}�⁹월까지는 ^1.0이하의 아주 낮은 값을 나타내었으나(Lee et al., 2000), 본 조사에서 서해안산 쥐노래미의 ^GSI는 ¹¹월에 최대값을 나타내고 ¹²월과 ¹ 월에 급감되는 현상을 나타내어 큰 차이를 보였다^.그리 고 ³월�⁸월까지는 남해안산 쥐노래미와 같이 ^{GSI 1.13} 이하의 낮은 값을 보였다^.

일반적으로 춘∙하계 산란어종에 있어서는 ^GSI와 HSI의 변화관계는 상호 음의 상관관계를 보이고 있는 것으로 보고(Sugimoto et al., 1976; Ishida, 1979; Lee and Hanyu, 1984)되어 있으나^,본 조사에서 쥐노래미는 연어류(Imura and Saito, 1969), 고등어⁽ 口∙ ^,

1953)와 동계산란 어종인 노래미(Chung and Lee, 1985) 에서와 같이 그들의 변화가 유사한 변화를 보이는 것이 춘∙하계 산란어종과 다른 점이라 생각된다^.

이것은 간에서 생식소발달에 관여하는 물질인 난황전 구물질을 합성한다는 것은 잘 알려져 있으나 이들 물질 의 합성 및 저장시기와 간으로부터 난소에 공급되는 시 기가 어종에 따라 차이가 있기 때문이라고 생각된다^.

간세포의 전자현미경적 관찰 결과와 간중량지수를 연 관지어 생각해 볼 때 간중량지수의 증감에 영향을 미치 는 것은 주로 간의 지방함량이며 그밖에 글리코겐^,단백 질함량도 다소 관여하는 것으로 생각된다^.고등어⁽ 口

∙ ^{, 1953)}에서는 난황형성시기에 간세포내의 지방

이 감소되고 있는데도 불구하고 간중량은 오히려 급격 히 증가되고 있다고 하였다^.이와 같은 현상은 쥐노래미 에서도 유사하게 나타나고 있는데^,이것은 간세포내에서 의 지방대사가 간실질의 신진대사에 앞서 일어나기 때 문에 지방이 감소되는 대신 간실질이 저장되어 간중량 이 증가되는 것이라고 생각된다(Chung et al., 1986).

노래미(Chung et al., 1986)와 은어(Aida et al., 1973b) 와 점망둑(Kaneko et al., 1984)에서 난소가 성숙해짐에 따라 간세포에는 호염기성인 핵산물질의 축적과 단백질 합성이 활성화된 상태를 나타내고 있으며 산란기에는 이들 물질이 감소되었다고 보고되어 있는데^,이와 같은 현상은 쥐노래미에서도 유사한 현상이 나타났다^.성장전 기⁽⁷월^),성장후기⁽⁷�⁸월^),성숙기⁽⁹�¹⁰월⁾및 산란후 회복 및 휴지기⁽¹²�⁶월⁾에 채집된 쥐노래미 암컷의 간 세포질내 조면소포체의 출현양상은 성장전기보다 성장 후기에 조면소포체의 출현량이 증가되었고^,성숙기에 리 보소옴이 부착된 잘 발달된 조면소포체가 양적으로 가 장 많이 출현하였는데^,이 시기에 광학현미경으로 관찰 하여 보면 간세포질내에 호염기성물질이 최대로 축적되 어 헤마톡실린 염색에 강한 양성반응을 나타내었다^.따 라서 조면소포체의 발달시기와 호염기성 물질의 합성 및 분비작용시기가 일치하고 있음을 알 수 있다^.그러나 산란기 이후에는 조면소포체의 출현량도 극감되었고 헤 마톡실린에 핵산물질의 염색성이 현저히 감소되는 것이 광학현미경하에서 관찰되어 전자현미경적 관찰에서 나 타나는 조면소포체 출현량과 호염기성 물질관계는 매우 밀접한 관계를 보였다^.

쥐노래미 간세포의 크기는 은어(Aida et al., 1973b), 노래미(Chung, 1986), 짱뚱어(Chung et al., 1991b)에서 보고된 바와 같이^,미성숙한 암∙수 개체들과 성숙 중인 수컷의 경우에는 글리코겐 및 지방적과 같은 영양물질 의 축적량에 의해 간세포의 크기가 좌우되는 것으로 생 각되나^,성숙중인 암컷의 경우에는 조면소포체 및 골지 Fig. 6. Monthly variations of total protein, total lipid and

glycogen contents in the liver of the female Hexag- rammos otakii.

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체와 같은 단백질합성에 관여하는 소기관자들의 발달에 의해 크기가 좌우되는 것으로 생각된다^.무지개송어 (Takashima et al., 1971) 간세포내 지방함량은 난황형성 과 더불어 점차로 감소되며^,성숙중인 은어 암컷^{(Aida et} al., 1973b)과 금붕어 암컷(Ishii and Yamamoto, 1970)에 서는 글리코겐의 양이 수컷보다 더 크게 감소되었다고 하였다^.쥐노래미의 경우에는 성장전기와 성장후기에 간 세포질내에 다량으로 축적되었던 지방적과 글리코겐 입 자들이 성숙시기에 급감되는 것이 전자현미경적 관찰에 서 확인되었다^.이와 같은 현상은 난황형성이 일어나는 시기에 간에서 지질과 글리코겐 물질 등으로 난황전구 물질(vitellogenin) 들이 생성된 후 이들 전구물질이 다 시 분비되어 혈류를 경유하여 난소내 난모세포로 이동 되고 있기 때문에 간세포내의 지방적과 글리코겐 입자 들이 성숙기에 급감되는 것으로 생각된다^.

Chung et al. (1991a, b, 1992, 1995)은 짱뚱어^(Boleopt- halmus pectinirostris)와 조피볼락(Sebastes schlegeli)의 생식소 발달 단계에 따른 간조직의 단백질함량을 조사 한 결과^,성숙기에 간조직내의 단백질함량이 가장 많았 음을 확인하였는데^,본 연구에서도 성숙기인 ⁹월에 단백 질함량^(%)이 가장 높아 그들의 연구결과와 잘 부합되고 있다^.

적 요

암컷 쥐노래미(Hexagrammos otakii)의 생식소중량지 수^(GSI)는 ⁹월에 증가되기 시작하여 ¹¹월에 최대에 도 달하였다^.쥐노래미의 생식주기는 연속적인 ⁵단계로 나 눌 수 있었다^:성장전기⁽⁷월^),성장후기⁽⁷�⁸월^),성숙기 (9�¹⁰월^),완숙 및 산란기⁽⁹�¹²월^),회복 및 휴지기⁽¹²

�6월). 간중량지수(HSI)의 월별변화는 GSI 변화와 유 사한 경향을 보였다^.성장전기에 다량의 지방적과 글리 코겐 입자들이 간세포내에 존재하였다^.특히^,이 시기에 간세포는 헤마톡실린에 약하게 염색되었다^.성장후기부 터 성숙기에 간세포의 크기는 증대되었으며 간세포질내 글리코겐과 지방적들의 양은 감소된 반면^,호염기성 물 질 축적이 증가하였다^.산란기부터 회복 및 휴지기에는 간세포내에 호염기성 물질 축적이 감소된 반면^,다량의 지방적과 글리코겐입자가 축적되었다^.간세포내의 총단 백질^,총지질 및 글리코겐함량^(%)의 최대값은 각각 ⁹ 월⁽성숙기^{), 7}월⁽성장전기^{), 3}월⁽휴지기⁾에 나타났다^.

사 사

본 연구는 군산대학교 해양개발연구소의 연구조성

비(2000~2001년도⁾의 일부 연구비지원에 의해 수행된 결과이며 이에 감사드립니다^.

인 용 문 헌

Aida, K., P.V. Ngan and T. Hibiya. 1973a. Physiological studies on gonadal maturation of fish-I. Sexual differ- ence in compensation of plasma protein of ayu in relat- ion to gonadal maturation. Bull. Jap. Soc. Sci. Fish., 38 (11) : 1091�1106.

Aida, K., K. Hirose, M. Yokote and T. Hibiya. 1973b. Physi- ological studies on gonadal maturation of fish-II. Hist- ological changes in the liver cells of ayu following gonadal maturation and estrogen administration. Bull. Jap.

Soc. Sci. Fish., 39(11) : 1107�1115.

Berlin, J.D. and J.M. Dean. 1967. Temperture-induced alt- erations in hepatocyte structure of rainbow trout (Sal- mo gairdneri). J. Exp. Zool., 164 : 117�132.

Chung, E.Y. and T.Y. Lee. 1985. Studies on the reproduc- tive cycle of Greenling, Agrammus agrammus. Bull.

Nat. Fish. Univ. Pusan 25(1) : 26�42. (in Korean) Chung, E.Y., Y.J. Chang and K.K. Lee. 1995. Activities of

hepatocytes and changes of protein and total RNA cont- ent in liver and muscle of Sebastes schlegeli with the gonadal maturation. J. Korean Fish. Soc., 28(3) : 338� 346. (in Korean)

Chung, E.Y., H.B. Kim and T.Y. Lee. 1986. Changes of the activity of the liver cells accompanied with the reprodu- ctive cycle of greenling, Agrammus agrammus (Temm- ick et Schlegeli). Bull. Korean Fish. Soc., 19(1) : 83�91.

(in Korean)

Chung, E.Y., M.W. Lee, K.K. Lee, S.K. Choi and Y.N. Oh.

1992. Studies on the electrophoretic analysis of protein, and variations of protein and RNA contents of the liver and muscle tissues of Boleophthalmus pectinirostris (Linnaeus). Korean J. Ichthyol., 4(1) : 96�104. (in Korean)

Chung, E.Y., K.K. Lee and Y.N. Oh. 1991a. Studies on the karyotype analysis, the electrophoretic analysis of protein, and variations of protein and nucleic acid contents of the muscle tissue of female Boleophthalmus pectinir- ostris (Linnaeus). Mar. Dev. Res. Kunsan Nat. Univ., 3 (1) : 27�38. (in Korean)

Chung, E.Y., K.K. Lee and Y.N. Oh. 1991b. Studies on changes of the activity of the hepatic cells, and variation of protein and nucleic acid contents of the liver tissue with the ovarian development phase of female Boleophthal- mus pectinirostris (Linnaeus). Korean J. Ichthyol., 3(1) : 48�57. (in Korean)

(10)

Fukuhara, O. and T. Fushimi. 1983. Development and early life history of the greenling Hexagrammos otakii (Pisces : Hexagrammidae) reared in the laboratory. Bull.

Japan. Soc. Sci. Fish., 49 : 1843�1848.

Fukuhara, O. and T. Fushimi. 1984. Squamation of larval greenling Hexagrammos otakii (Pisces : Hexagrammi- dae) reared in the laboratory. Bull. Japan. Soc. Sci.

Fish., 50 : 759�761.

Imura, K. and T. Saito. 1969. Seasonal variations in the metabolic activities of tissue constituents of some fishes -I. Changes in nucleic acid contents of some tissues of kokanee salmon, Oncorhynchus nerka F. Kenely. Bull.

Fac. Fish. Hokkaido Univ., 20 : 202�210. (in Japanese) Ishida, R. 1979. Changes of hepatosomatic index of the ayu, Plecoglossus altivelis during a spawning season.

Bull. Tokai Reg. Res. Lab., 100 : 169�171.

Ishii, K. and K. Yamamoto. 1970. Sexual differences of the liver cells the goldfish, Carassius auratus L. Bull. Fac.

Fish. Hokkaido Univ., 21 : 161�167.

Ito, T., A. Watanabe and Y. Takahashi. 1962. Histologische und cytologische undersuchungen der leber bei fisch und cyclostoma, nebst bemerkungen uber die fettspei- cherung-zellen.

Kanamoto, Z. 1976. On the ecology of Hexagrammid fish I.

Habitats and behaviors of Agrammus agrammus (Tem- mick et Schlegeli) and Hexagrammos otakii (Jordan et Starks). Jap. J. Ecol., 26 : 1�12. (in Japanese)

Kanamoto, Z. 1977. On the ecology of Hexagrammid fish III. Niches of some reef fish. Jap. J. Ecol., 27 : 215� 216. (in Japanese)

Kanamoto, Z. 1979a. On the ecology of hexagrammid fish IV. Mode of the distribution of Agrammus agrammus and Hexagrammos otakii and compositions abundance and food items of reef fish around serveral reefs. Jap. J.

Ecol., 29 : 171�183. (in Japanese)

Kanamoto, Z. 1979b. On the ecology of hexagrammid fish V. Food items of Agrammus agrammus and Hexagram- mos otakii sampled from different habitats around a some reef. Jap. J. Ecol., 29 : 265�271. (in Japanese) Kaneko, T., I. Hanyu and K. Hirose. 1984. Annual repro-

ductive cycle of a tidepoll-living goby Chasmichthys dolichognathus. Bull. Jap. Soc. Sci. Fish., 50(9) : 1535

�1540. (in Japanese)

Kim, Y.U. 1977. Length-weight relationship of Hexagram- mos otakii Jordan et Starks. Bull. Nat’l. Fish. Univ.

Busan Nat. Sci., 17 : 55�57. (in Korean)

Kim, Y.U., K.H. Han and B.H. Kim. 1993. The embryonic and larval development of the greenling, Hexagrammos otakii Jordan et starks. Korean J. Ichthyol., 5 : 151� 153. (in Korean)

Lee, J.K. and S.M. Lee. 1996. Effects of the dietary protein and energy levels on growth in fat cod (Hexagrammos otakii Jordan et Starks). J. Korean Fish. Soc., 29(4) : 464�473. (in Korean)

Lee, J.K., S.C. Kim and S.M. Lee. 1996. Influence of stock- ing density on growth, feed efficiency and body compos- ition of juvenile fat cod (Hexagrammos otakii Jordan et Starks) in indoor culture system. J. Aquaculture, 9(3) : 233�237. (in Korean)

Lee, J.K., H.K. Lim, C.H. Han, J.H. Jeung, D.J. Kim, K.

Aida. 2000. Changes of gonadosomatic index and sex steroid hormone of serum in cultured greenling (Hexag- rammos otakii). J. Korean Fish. Soc., 33(4) : 302�306.

(in Korean)

Lee, T.Y. and I. Hanyu. 1984. Reproductive cycle of small filefish, Rudarius ercodes. Bull. Koean Fish. Soc., 17(5) : 423�435. (in Korean)

Pickford, G.E. 1953. A study of the hypophysectomized male killfish, Fundulus heteroclitus (Linn.). Bull. Bing- ham Oceangr. ColL., 14 : 5�41.

Sugimoto, Y., Y. Takeuchi, K. Yamauchi and H. Takahashi.

1976. Induced maturation of female Japanese eels (Anguilla japonica) by administration of salmon pituit- aries, with notes on changes of oil droplets in eggs of matured eels. Fac. Fish. Hokkaido Univ., 27 : 102� 120.

Stanchfield, J.E. and J.D. Yager. 1980. Primary induction of vitellogenin synthesis in monolayer cultures of amp- hibian hepatocytes. J. Cell Biol., 84 : 468�475.

Takashima, F., T. Hibiya and T. Watanabe. 1971. Endocri- nological studies on lipid metabolism in rainbow trout- I. Differences in lipid contents of plasma, liver and vis- ceral adipose tissue between sexually immature and mature females. Bull. Jap. Soc. Sci. Fish., 37(4) : 307� 311. (in Japanese)

Yamamoto, T. 1964. Some observations on the fine str- ucture of the cells in the starved goldfish (Carassius auratus), with special reference to the morphologyof fat mobilization during starvation to the liver. Arch. Histol.

Jap., 24 : 335�345.

Yamamoto, G. and C. Nishioka. 1948. Breeding habits and developmental processes of greenling, Hexagrammos otakii Jordan et Starks. Seibutu. 3(5) : 167-170. (in Japanese)

∙ 崎男∙ . 1974. アイナメのと

について. 技 , 3 : 61�69.

宮 ∙ . 1948. 肝のにて.

, 10 : 10�13.

口 ∙ . 1953. サバ器の及の季

. , 19 : 525�529.

(11)

. 1980. によるアイナメのについて. 技 , 9 : 31�38.

∙ �介. 1981. によるアイナメ

. 技 , 10 : 79�87.

Received : April 17, 2002 Accepted : June 15, 2002