임상병리와 정도관리：제25권 제2호 2003
J. Lab. Med. & Quality Assuarance 2003：25：247-250 247
분변잠혈검사 측정기인 Ez step FOBTM의 평가
장은아․임채승․김영기․이갑노
고려대학교 의과대학 진단검사의학과
Evaluation of the Ez step FOB
TMfor Fecal Occult Blood Test
Eun Ah Chang, Chae Seung Lim, Young Kee Kim, and Kap No Lee Department of Laboratory Medicine, College of Medicine, Korea University, Seoul, Korea
Background：Fecal occult blood tests (FOBT) have been recommended for gastro- intestinal bleeding and colon cancer screening. This study compared the effectiveness of two fecal blood screening kit, OC-Hemodia II and Ez step FOB for fecal occult blood.
Methods：The detection limit was evaluated by using OC-control and serially diluted samples.
The comparison study between OC-hemodia II and Ez step FOB were evaluated in 143 cases.
Results：The concordance rate between OC-Hemodia II and Ez step FOB was 85.6% and 50% of non-concordance cases have history related to gatrointestinal bleeding. Ez step FOB was possible to detect 35 ng/mL in serially diluted OC-control.
Conclusions：The result of Ez step FOB satisfactory to clinical application and showed good concordance rate compared to OC-Hemodia II.
Key Words：Fecal occult blood, Colorectal cancer screening, Ez step FOB
교신저자：임채승
우) 425-707 경기도 안산시 고잔동 516
고려대학교 의과대학 진단검사의학과 전화：031)412-5300, FAX：031)412-5314
서 론
소화기관에서의 출혈은 간과해서는 안될 건강상태에 대 한 경고로 볼 수 있다. 치질이나 치루와 같은 질환으로 밝 혀질 경우가 많지만 살리실산이나 스테로이드, 페닐부타존, 인도메타신 같은 약제의 투여로 나오는 경우도 있으며 철분 같은 제제의 자극에 의해 소화기 자극을 일으키고 2차적으 로 급성 출혈을 야기하는 수도 있다[1]. 분변잠혈검사(Fe- cal occult blood test)는 가장 흔히 사용되는 선별검사 중의 하나로 소화기관 출혈, 대장암이나 대장 용종 검출시 유용한 것으로 되어 있다[1-2]. 분변잠혈이 검출되면 입에 서 항문에 이르는 소화관의 출혈(궤양, 암종, 대장염)이나 기생충감염, 혈액질환, 치질 및 대장 종양등 다양한 질환의 가능성을 감별 진단하여야 한다[1].
Guaiac test, Ortho-toluidine법 등 과거에 주로 사용 하던 검사들은 예민한 검사이나 위양성이 많아 최근에는 사
람혈색소에 대한 항체를 이용한 면역학적 방법들이 많이 이 용된다[1].
저자들은 최근 국내에서 개발된 이지스텝 에프오비(BLS, 한국) Immunochromatographic 검사법을 자동화기기인 OC-sensor를 이용하여 측정하는 OC-Hemodia(Eiken Chemical Co., Japan)의 결과와 비교하여 평가하여 보았다.
재 료 및 방 법 1. 기기 및 재료
OC-Hemodia II (Eiken Chemical Co., Japan)의 경우 검체 내의 혈색소와 사람혈색소에 대한 항체의 반응에 의하여 검출하는 방법으로 시약 회사의 설명서에 따라 충분 히 교반한 후 OC-Sensor 자동화 기기로 검출하였다.
Ez step FOB (BLS, 한국)는 Immunochromatogra- phic법을 이용한 분변중 잠혈의 정성적 측정법으로 사람의 항 혈색소 혈청을 사용하는 방법인데 희석액에 분변을 잘 섞은 후 직접 디바이스에 8방울 떨어뜨려 5분 후에 디바이 스내에 양성 반응선이 나타나는지 여부를 설명서에 따라 육 안으로 판독하였다.
248 장은아․임채승․김영기․이갑노
Table 1. Comparison of occult blood test between OC-Hemodia II and Ez step FOB in serially diluted samples
Serially diluted samples OC autocontrol
(Hg:ng/mL) *614 362 154 70 15 4 **740 370 185 92.5 46.3 23
Ez step FOB + + + + - - + + + + + -
OC- Hemodia II + + + - - - + + + + - -
* Patient's sample measured by OC-sensor (Hb conc. : ng/mL)
** OC autocontrol (Hb conc. : ng/mL)
Table 2. Comparison of occult blood test between OC-Hemodia II and Ez step FOB
OC- Hemodia II Positive Negative
Ez step FOB Positive 39 10
Ez step FOB Negative 8 86
2. 방법 1) 검출한계측정
Eiken 사의 OC-Hemodia II의 경우 직선성은 50- 2000 ng/ml이므로 OC-autocontrol (716 ng/ml)액과 정상인 혈액을 증류수로 용혈시킨뒤 OC-Hemodia와 Ez step FOB (BLS, 한국) 희석 시약으로 단계적으로 희석하 여 각 시약의 검출 한계를 측정하였다.
2) 2002년 1월부터 5월까지 고려대학교 안산병원에 내 원하여 변 잠혈검사가 의뢰된 143예를 대상으로 OC-He- modia의 결과와 수기법인 Ez step FOB (BLS, 한국) 검 사를 실시한 뒤 비교 분석하였다. 두 검사방법의 결과가 불 일치를 보이는 경우 내원시 병력자료를 조사하여 소화기 계 통의 장애가 존재하는지 여부를 확인하였다.
결 과 1. 각 시약의 검출한계 비교
OC autocontrol을 이용한 검출한계 OC-Hemodia의 경우 인위적으로 희석된 79.5 ng/mL 농도에서 양성과 음 성 구분이 불분명하였다. Ez step FOB의 경우 39.8 ng/mL의 농도에서 양성을 보이며 20 ng/mL농도에서 양 성과 음성의 구분이 불가하였다(Table 1).
2. 임상검체의 단계 희석에 따른 검출 결과
OC-Hemodia II의 경우 614 ng/mL로 측정된 대변 잠 혈 양성 검체를 단계적으로 2배씩 희석하였을 때 1:4배 (154 ng/mL) 희석 배수까지 양성으로 보였으나, Ez step FOB의 경우 1:32 (19 ng/mL)배까지 희석된 검체 에서 양성으로 판독되었다(Table 1).
3. 임상검체에서의 양성률 비교
총 143검체중 39검체는 모두 양성으로 86검체는 양쪽 모두 음성으로 판독 되었고, 8예는 OC-Hemodia II에서, 10예는 Ez step FOB (BLS, 한국)에서만 양성으로 판독 되었다. Ez step FOB (BLS, 한국)에서 양성으로만 판독 된 검체는 OC-Hemodia II에서 측정치는 100 ng/mL 이 하로 기계 상에서는 양성 측정 기준치 이하로 음성으로 분 류되었다(Table 2).
한쪽 기기에서 양성을 보인 예의 내원 시 병력조회를 실 시한 결과 OC-Hemodia II에만 양성을 보인 8예중 2예는 장염, 1예는 위출혈, 1예는 직장암으로 나머지 4예는 소화 기와 관련된 특이한 병력이 없었다. Ez step FOB (BLS, 한국)에만 양성으로 판독된 10예중 4예는 급성 위출혈, 1 예는 급성 담낭염이 있었으며 나머지 5예는 소화기와 관련 된 특이한 병력이 없었다.
고 찰
대장암의 증가추세에 따라 대변 내에서 발생하는 잠혈 측정의 중요성이 두드러지고 이를 검사하기 위한 여러 가지 방법이 개발되고 있으나 현재는 혈색소를 측정하는 방법이 가장 대중화되어 있다. 정상에서도 생리적인 출혈이 있지만 보통 잠혈반응에 양성으로 나오기 위해서는 정상출혈의 5-10배가 되어야한다. 대장에서 발생된 잠혈은 출혈량에 따라 틀리지만 5일에서 12일정도 대변에서 지속적으로 혈 액이 검출된다[10]. 무증상인을 대상으로 한 대단위 연구에 서 2-4% 정도가 hemoccult 양성으로 나오고 이중 5- 10%가 대장직장암이 원인이라는 보고도 있다[3-4]. 잠혈 반응의 예민도는 보고에 따라 차이가 있으나 대장용종에서 10-39%, 대장암에서 약 50%정도로 낮으며 대변의 채취 회수가 증가할수록 같은 대변에서라도 여러 번 검사하면 증 가한다. 그러나 출혈이 없던지 약간 간헐적으로 있는 small adenoma나 colorectal malignancies등의 경우는 놓칠 수도 있다[5-6].
Guaiac test는 혈색소가 갖고 있는 pseudoperoxidase 효과를 이용한 것으로 guaiac substrate와 결합하면 푸르 게 발색반응을 일으키는 값싸고도 쉽게 검사할 수 있는 방 법중의 하나이지만 변의 수분함량, 육고기(nonhuman he- moglobin), 신선한 야채나 과일, aspirin이나 NSAID와
분변잠혈검사 측정기인 Ez step FOBTM의 평가 249 같은 약제에 의한 위양성과 변의 부적절한 채취, Vitamin
C와 같은 경우는 위음성으로 나오는 단점이 있다[7]. 하루 에 약 20ml의 출혈이 있어야만 guaiac test에서 양성으로 판독된다[8-10].
Guaiac test 결점을 보완하고자 변중의 혈색소를 검출 하는 생화학법과 사람 혈색소를 검출하는 면역화학적방법이 있는데 생화학법은 일반 육고기 및 어류 등의 식사에 의한 위양성률이 높으므로 현재는 사람의 혈색소를 검출하는 면 역화학적방법이 개발되어 주로 쓰이고 있다. 국내에 소개된 면역학적 분변잠혈 검사로는 OC-Hemodia와 HM-JACK 이 있다[11-12]. HM-JACK은 사람의 혈색소에 대한 항 체를 이용한 라텍스응집법을 원리로 하는 자동화된 분변잠 혈 측정기기로 정량적 분석이 가능하며, 조작과정이 간편하 고 우수한 직선성과 계단 희석한 혈색소 농도의 57 ng/mL 까지 이르는 검출한계를 보인다고 한다. 그리고 정밀도와 실온 및 냉장 보존 검체에서의 검체간 검출률도 양호한 것 으로 평가되었다. 또한 수기법 OC-Hemodia와의 비교에서 도 90%의 일치율을 보이고 HM-JACK이 더 높은 예민도 를 보인다고 보고되었다[12].
본 연구에서는 OC-Sensor 분변잠혈자동 측정기기를 이 용한 OC-Hemodia와 수기법인 Ez step FOB를 이용한 비교라서 면역학적방법을 이용한다는 점에서는 유사하지만 결과에서는 검출한계가 Ez step FOB가 우수한 것으로 나 타났다. 이것은 실제 검출한계의 차이가 아니라 OC-He- modia의 cut off치 설정이 100 ng/mL로 정해진 기계의 특성 때문인 것으로 추정되며, 따라서 예민도나 검출한계는 차이가 없을 것으로 사료된다. 만약 Ez step FOB 의 검 출한계가 뛰어나서 위양성을 잡아낸다면 오히려 임상 적용 시 문제가 될 수 있는데 임상 검체에서는 병력과 일치율이 OC-Hemodia II와 비숫하여 임상 적용시 유용한 검출한계 로 보아야 할 것이다. 또한 분변잠혈 검사는 검체의 조작이 결과에 많은 영향을 주기 때문에 이도 고려해야할 요소이 다. 한번 조작할 때 사용되는 분변의 양은 매회 달라지고 분변중 선별하는 위치도 틀리기 때문에 동일량 동일 검체를 사용하지 않는 이런 임상검체 비교 시험에서는 대략적인 신 빙성을 제공할 수 밖에 없다. 본 연구에서도 양쪽 검사중 하나만 양성으로 나온 검체중 약 50%는 소화기 계통의 출 혈을 동반하고 있어서 검체의 채취과정에서 오는 오류가 결 과에 영향을 줄 수 있을 것으로 생각되었다. 또한 Ez step FOB가 아닌 다른 키트로 시행된 일본측의 연구에서도 스 틱의 채변량 균일화가 결과에 영향을 주며 이를 최소화 하 기 위해서는 2-3개의 대변스틱을 사용하여야한다는 보고도 있어 이를 뒷바침한다[13]. 결론적으로 분변잠혈검사 측정 기인 Ez step FOB는 현재 사용중인 자동화 분변잠혈 측 정기 OC-Hemodia II와 거의 유사한 예민도와 특이도를 보이며 수기법이기는 하나 검출한계와 임상적인 응용에서도 뛰어 난 것으로 조사되었다.
요 약
배 경：분변잠혈 검사는 소화기 출혈이나 대장암 선별검 사에 추천되는 검사인데 이번 연구에서는 2종류의 분변잠혈 검사용 시약 OC-Hemodia II 와 Ez step FOB를 비교 평가하여 보았다.
방 법：검출한계는 OC-control과 단계 희석된 검체를 대상으로 하였고 146개의 검체를 대상으로 OC Hemodia II 와 Ez step FOB의 검사 일치여부를 분석하였다.
결 과：두 검사 시약간의 일치율은 85.6% 이었고 일치 하지 않는 양쪽의 예들중 50%는 소화기 출혈에 관련된 병 력이 있었다. Ez step FOB 의 검출한계는 단계 희석된 정도관리물질의 35ng/mL 농도였다.
결 론：Ez step FOB 는 OC-Hemodia II와 비교하여 검사결과의 일치율은 우수하였으며 임상에 적용하기 만족할 만한 것으로 사료된다.
참 고 문 헌
1. Ahlquist DA. Stool for occult blood. In: Henry JB, ed. Cli- nical diagnosis and management by laboratory method. 21th ed. Philadelphia: WB Saunders, 2001:475.
2. Walsh JM and Terdiman JP. Colorectal cancer screening:
scientific review. JAMA 2003;12:289:1288-96.
3. Mandel JS, Bond JH, Church TR, sonover DC, Bradely GM, Schuman LM, Ederer F. Reducing mortality from colorectal cancer by screening for fecal occult blood:Minnesota colon cancer control study. N Engl J Med 1993;13:328:1365-71.
4. Levin B and Murphy GP. Revision in American Cancer So- ciety recommendations for early detection of colorectal can- cer. CA: Cancer J Clin 1992;42:296-9.
5. Crowley ML, Freeman LD, Mottet MD, Strong RM, Swee- ney BF, Brower RA, Sharma SP. et al. Sensitivity of guai- ac-impregnated cards for the detection of colorectal neopla- sia. J Clin Gastroenterol 1983;5:127-30.
6. Griffith CD, Turner DJ, Saunders JH. False-negative results of Hemoccult test in colorectal screening. Br Med J 1981;
283:472.
7. Levin B. Screening for colorectal cancer. Cancer control 1996;3:20-5
8. Morris DW, Hansell JR, Ostrow D, et al. Reliability of chemical tests for fecal occult blood in hospitalized patients.
Am J Dig Dis 1976;21:845-52.
9. Heinrish HC and Icagic F. Comparative studies on the "in vivo"-sensitivity of four commercial pseudoperoxidase-based faecal occult blood tests in relation to actual blood losses as calculated from measured whole body-59Fe-elimination
250 장은아․임채승․김영기․이갑노 rates. Klin Wochenschr 1980;58:1283-97.
10. Stroehlein JR, Fairbanks VF, McGill DB, Go VL. Hemo- ccult detection of fecal occult blood quantitated by radio- assay. Am J Dig Dis 1976;21:841-4.
11. 김동찬, 조성석, 송정한, 김의종, 김진규. 면역학적 분변잠 혈검사를 위한 자동측정기 OC-SENSOR의 평가. 임상병리
와 정도관리 1998;20:281-7.
12. 홍승복, 김현수, 박효순, 이도훈. 분변잠혈검사 자동측정 기인 HM-JACK의 평가. 임상검사와 정도관리 2002;24:
221-4.
13. Ꝯ好建史. 제1판 免疫便潛血檢査(2日法)에 의한 大腸 癌 檢診. Eiken Chemical Co., Japan. 1996:24-28
