Effects of Samki-eum (s?nq?-y?n) on Freund’s Complete Adjuvant-induced Arthritic Rats

(1)

Adjuvant 유발 관절염 랫트에 대한 삼기음의 효과

최은실⋅장홍규⋅권오곤⋅우창훈⋅안희덕

대구한의대학교 한의과대학 한방재활의학과교실

Effects of

Samki-eum (s

ā

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ì

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ǐ

n)

on Freund’s Complete Adjuvant-induced Arthritic Rats

Eun-Sill Choi, O.M.D., Hong-Gyu Jang, O.M.D., O-Gon Kwon, O.M.D., Chang-Hoon Woo, O.M.D., Hee-Duk An, O.M.D.

Department of Oriental Rehabiliation Medicine, College of Oriental Medicine, Daegu Hanny University

RECEIVED July 4, 2013 REVISED July 4, 2013 ACCEPTED July 6, 2013

CORRESPONDING TO

Hee-Duk An, Department of Oriental Rehabiliation Medicine, College of Oriental Medicine, Daegu Hanny University, 136, Sincheondong-ro, Suseong-gu, Daegu 708-828, Korea

TEL (053) 770-2116 FAX (053) 764-0566 E-mail [email protected]

Objectives The object of this study was to observe the favorable anti-arthritic effects of Samki-eum (sānqì-yǐn) on Freund’s complete adjuvant (FCA)-induced arthritic Wistar rats.

Methods Rheumatoid arthritis was induced by intradermal injection of FCA, and 300, 150 or 750 mg/kg of Samki-eum (sānqì-yǐn) were orally administered once a day for 14 days from 14 days after FCA treatments, and 15 mg/kg of dexamethasone was intraperitoneally administered as reference drug in this experiment. All rats were sacrificed at 14 days after continuous oral treatment of Samki-eum (sānqì-yǐn) or intraperitoneal administration of dexamethasone, and changes on the body weight, knee circumferences, gross arthritis score, inflammatory tissue prostaglandin (PG) E2 levels were monitored with cartilage collagen components and glucosaminoglycans compositions - chondroitin sulphate, heparan sulphate and hyaluronic acid in the present study.

Results As results of FCA treatment, classic rheumatoid arthritis featuring dramatical decreases on the body weights, cartilage collagen contents and bone glucosaminoglycans-chondroitin sulphate, heparan sulphate and hyaluronic acid contents, with increases on the knee circumferences, gross arthritis scores and inflammatory tissue PGE2 levels.

However, these changes from FCA-induced rheumatoid arthritis were clearly reduced by treatment of dexamethasone and both two different dosages of Samki-eum (sānqì-yǐn) 300 and 150 mg/kg in the present study. Although FCA-induced arthritis were more favor- ably inhibited by treatment of dexamethasone 15 mg/kg as compared with Samki-eum (sānqì-yǐn) 300 mg/kg, marked decreases of body weights were detected in dexamethasone 15 mg/kg treated rats, and Samki-eum (sānqì-yǐn) 300 mg/kg showed similar preserve effects on the cartilage glucosaminoglycan compositions in this study.

Conclusions The results obtained in this study suggest that over 300 and 150 mg/kg of Samki-eum (sānqì-yǐn) showed favorable anti-arthritic effects on the FCA-induced arthritis mediated by suppression of PGE2, a inflammatory mediator. However, detail mechanism studies should be conduced in future with the screening of the biological active com- pounds in this herb. Although overall anti-inflammatory effects Samki-eum (sānqì-yǐn) 300 mg/kg were lowered than those of dexamethasone 15 mg/kg treated rats, Samki-eum (sānqì-yǐn) 300 mg/kg treated rats showed similar preserve effects on the cartilage glucosaminoglycan compositions in this experiment. (J Korean Med Rehab 2013;23(3):1-14)

Key words Rheumatoid arthritis, Freund's complete aduvant (FCA), Samki-eum (sānqì-yǐn)

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Scientific name Korean name Amounts (g) Rehmannia glutinosa (Gaertn.) Libosch. ex Steud.

Eucommia ulmoides Oliver Achyranthes japonica Nakai Angelica gigas Nakai Lycium chinense Miller Poria cocos Wolf Paeonia lactiflora Pallas Cinnamomum loureirii Nees Asarum heterotropoides Maxim Angelica dahurica Benth Aconitum carmichaeli Debeaux Glycyrrhiza uralensis Fisch Zingiber officinale Roscoe　 Total

熟地黃杜沖去絲牛膝當歸枸杞子白茯苓白芍藥肉桂細辛白芷炮附子炙甘草生薑 13 types

11.25 3.75 3.75 3.75 3.75 3.75 3.75 3.75 3.75 3.75 3.75 3.75 3.75 56.25

All individual herbs were purchases from local voucher (Jaechunhanbagyakcho, Jacheon, Korea) after confirm the morphology un- der microscopy.

Table I. Composition of Samki-eum (sānqì-yǐn) Used in This Study

서론»»»

류마티스 관절염은 관절의 활막염으로 시작하여 연골 및 뼈의 손상으로 관절 파괴를 초래하는 만성 진행성 염증 질환이다¹⁾. 조기 치료가 시행되지 않을 경우 10~20년 이 내에 관절 운동 장애가 오고, 2년 이내에 방사선학적 골파 괴가 환자의 70%에서 오며, 관절 손상이 첫 1년에 가장 급 격히 진행되는 것으로 알려져 있다²⁾. 따라서 조기의 적극 적인 치료가 강조되지만, 가장 널리 사용되는 항류마티스 약물(Disease Modifying Anti-Rheumatic Drugs, DMARDs) 인 methotrexate (MTX)과 최근 조명되고 있는 생물학적 제제인 TNF (Tumor Necrosis Factor) 억제제의 경우 다양 한 부작용이 보고되고 있어, 부작용이 적고 효과적인 류마 티스 관절염 치료제의 개발의 필요성이 제기되고 있다.

한의학에서 류마티스 관절염은 歷節風, 鶴膝風, 白虎歷節風 등의 명칭으로 불리며, 風寒邪의 침입과 肝腎의 虛損이 주된 원인으로 痺證, 痺痛의 범주에 속하고, 그 치법 은 去風散寒, 除濕淸熱, 活血通絡, 滋補肝腎 등이 활용되 고 있다³⁾.

三氣飮은 ｢㬌岳全書｣⁴⁾에 수록된 이후 周命新, 黃道淵 등에 의하여 歷節痛, 鶴膝風痺痛 등 관절 질환을 치료하 는 처방으로 사용되었고⁵⁾, 氣血虧損한 상태에서 風寒濕이 내침하여 筋骨歷節痺痛甚者, 痢後鶴膝風痛 등이 발생한 증을 치료하며, 營血不和로 外邪가 침입하여 발생한 陰寒痺痛證을 치료한다 하였다. 三氣飮은 숙지황을 포함한 13 종의 약재로 구성되어 있는데 가장 많은 용량을 차지하는

숙지황의 항염증 효과⁶⁾가 실험적으로 증명되어 있어 三氣飮 역시 항염 작용을 통해 관절염에 유효한 효과를 나 타낼 것으로 생각된다.

현재까지의 三氣飮에 관련한 연구로 이 등⁷⁾의 연구에 서 대식세포 활성화 및 항산화 효과를 보였고, 이 등⁸⁾의 연구에서 TNF-α의 활성 억제를 통한 proteoglycan의 이 화 작용 감소로 골관절염에 대한 유효한 효과를 보여 류 마티스 관절염에도 유효한 결과를 보일 것으로 추정된다.

신과 이⁹⁾의 연구와 김과 이¹⁰⁾의 연구에서 三氣飮의 adjuvant 유발 관절염에 대한 연구가 있었으나 관절 연골에 대한 보호 효과 및 대조군 설정이 부족하여 류마티스 관 절염에 대한 직접적인 항염 및 관절 보호 효과에 대한 연 구가 필요할 것으로 보인다.

따라서 본 연구에서는 adjuvant 유발 류마티스 관절염 랫트 모델에 三氣飮을 투여하여 체중 변화, 육안 관찰 소 견, 염증 조직 내 prostaglandin (PG) E2 함량, 관절 연골의 collagen, glycosaminoglycan 함량 등을 측정하여 三氣飮이 류마티스 관절염에 미치는 효과를 확인하고자 하였다.

재료 및 방법»»»

1. 재료

1) 三氣飮 추출물

본 실험에 사용된 약재는 약업사(제천한방약초, 제천,

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Groups Test article/ FCA treatment/Dose (mg/kg/day) Control Intact Non-FCA treated and distilled water administered rats, 5 ml/kg

FCA FCA treated and distilled water administered and rats, 5 ml/kg

Reference Dexamethasone FCA treated and dexamethasone intraperitoneally administered rats, 15 mg/kg Samki-eum (sānqì-yǐn)

treated groups

Samki-eum (sānqì-yǐn) 300 FCA treated and Samki-eum orally administered rats, 300 mg/kg Samki-eum (sānqì-yǐn) 150 FCA treated and Samki-eum orally administered rats, 150 mg/kg Samki-eum (sānqì-yǐn) 75 FCA treated and Samki-eum orally administered rats, 75 mg/kg

Samki-eum (sānqì-yǐn) or vehicle (distilled water) were dosed at 5 ml/kg volume, once a day for 14 days from 14 days after FCA treatment.

Eight rats per group, total 6 groups were used this study.

All animals were sacrificed after 14 days of test article treatment (28 days after FCA treatment).

FCA: Freund’s complete adjuvant.

Table II. Experimental Design Used in This Study

Korea)에서 매입한 것을 현미경하에서 관능검사를 통하 여 선정하여 사용 하였으며, 본 실험에 사용된 三氣飮 1 첩 분량의 조성은 Table I과 같다. 선정된 약제 10첩 분 량(562.5 g)을 취하여 정제수 10 L로, 80^oC에서 3시간 동 안 3번 가열 추출한 후, 흡인 여과한 여과액을 rotary vacuum evaporator (Buchi Rotavapor R144, Buchi La- bortechnik AG, Switzland)로 감압, 농축하여 점조성의 추출물을 얻은 다음 programmable freeze dryer (La- bconco Freezone1, Labconco Corp., MO, USA)를 사용 하여 동결 건조시켜, 총 88.59 g (수율 약 15.75%)의 연 갈색 물 추출물을 얻어 실험에 사용하였다. 물 추출한 三氣飮 동결 건조물은 -20^oC의 냉장고에 보관 후 실험에 사 용하였으며, 본 실험에서 사용한 용매인 증류수에 60 mg/ml의 농도까지 연갈색으로 비교적 잘 용해되었다.

2) 실험동물

48마리의 수컷 Wistar 랫트(6-wk old upon receipt, SLC, Japan)를 7일간의 순화과정을 거쳐 실험에 사용하였 으며, 순화과정 및 실험 전 기간 동안 온도(20~25^oC)와 습도(40~45%)가 조절된 사육실에서 랫트용 polycarbo- nate 사육상자에 4마리씩 수용하여 사육하였고, 명암 주 기(light: dark cycle)는 12시간 주기로 조절하였으며, 사 료(Samyang, Korea)와 음수는 자유롭게 공급하였고, 모 든 실험동물은 picric acid로 개체를 식별하였다. 실험동 물은 각 실험마다, 군당 8마리씩, 정상 대조군, 관절염 유 발 대조군, dexamethasone 투여군, 三氣飮 300, 150 및 75 mg/kg 투여군으로 구분하였다(Table II). 본 실험에 사용된 모든 실험동물은 “Guide for the Care and Use

of Laboratory Animals”¹¹⁾ 및 ○○한의대학교 실험동물 윤리위원회의 기준에 준하여 취급하였다.

2. 방법

1) 류마티스 관절염의 유발

Ramprasath¹²⁾의 방법에 따라, 1 ml의 paraffin oil에 10 mg의 Mycobacterium tuberculosis 사균체가 포함된 FCA (Sigma, MO, USA) 0.1 ml을 왼쪽 후지 발바닥(left hind paw)에 피내(intradermal) 주입하여, 류마티스 관절염을 유발하였다. 한편 정상 대조군에서는 FCA 대신 멸균 생 리식염수를 동일한 방법으로 주입하였다.

2) 약물의 투여

300, 150 및 75 mg의 三氣飮 물 추출물을 멸균 증류수 5 ml에 용해시켜, 동물 체중 kg 당 5 ml의 용량(즉, 300, 150 및 75 mg/kg)으로 FCA 투여 14일 후부터 매일 1회 씩 14일간 금속제 Zonde가 부착된 3 ml 주사기(syringe) 를 이용하여 강제 경구 투여 하였다. 또한 dexamethasone 역시 멸균 증류수에 용해시켜, Kim¹³⁾의 방법에 따라, 비교적 독성이 적고 적절한 항염효과를 나타내는 것으로 알려진 15 mg/kg의 농도로, 체중 kg 당 5 ml의 용량으로 매일 14일 동안, 복강 투여하였다.

3) 체중의 측정

모든 실험동물의 체중을 FCA 투여 1일 전, FCA 투여 일, FCA 투여 7, 14 (약물 투여 시작일), 21 및 최종 희생 일에 각각 측정하였으며, 실험 시작시의 개체 차이에 의

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0=normal;

1=mild, apparent swelling limited to individual digits 2=moderate, redness, and swelling of the ankle 3=redness and swelling of the paw including digits 4=maximally inflamed limb with involvement of multiple joint The arthritis score for each mouse was the sum of four paws, with the highest score of 16.

Table III. Estimation of Macroscopic (Gross) Arthritis Scores Used in This Study

한 체중 변화를 최소화하기 위해 관절염 유발기간(14일), 약물 투여기간(14일) 및 실험 전 기간(28일) 동안의 체중 변화량인 증체량(body weight gains)을 하기의 공식 [1]

을 이용하여 각각 산출하였다.

EQUATION [1]. Body Weight Gains (g)

Body weight gains during induction periods=Body weights at 14 days after FCA treatment−body weights at the day of FCA treatment (Day 0~Day 14)

Body weight gains after test article treatments=Body weights at sacrifice−body weights at the starting day of test article administration (Day 14~Day 28)

Body weight gains throughout the experimental periods=Body weights at sacrifice−body weights at the day of FCA treatment (Day 0~Day 28)

4) 슬관절 두께의 측정

모든 실험동물의 슬관절 두께를 FCA 투여일, FCA 투 여 14, 21 및 28일에 각각 cotton thread method¹⁴⁾으로 각각 측정하였다. 슬관절 두께의 측정은 약물 투여기간에 는 약물 투여 1시간 전에 각각 측정하였다. 슬관절 두께 의 변화를 더 명확히 하고, FCA 투여 전 차이를 최소화하 기 위해, FCA 투여 후 28일 간의 두께 차이를 하기의 공 식 [2]를 이용하여 각각 산출하였다.

EQUATION [2]. Changes of Knee Circumsferences (mm)=Individual knee thicknesses at sacrifice−individual knee thicknesses at the day of FCA treatment (Day 0~Day 28)

5) 육안 관절염 score 측정

Hatori¹⁵⁾의 방법에 따라, 3명의 실험자가 각각 사지의 발적, 종창 및 관절 강직을 평가하여(triple-blind fash- ion), Table III에 기록된 방법을 통해 paw 당 4 등급(총 4개의 paw 합; 최대 16으로 scoring을 실시하여, 유발된 관절염의 육안적 변화를 평가하였다. 육안 관절염 score 는 FCA 투여일, FCA 투여 14, 21 및 28일에 각각 측정, 기록하였다. 또한 육안적 관절염 score의 변화를 좀 더 명확히 하고, 약물 투여 시작시의 개체 차이를 최소화 하 기 위해, 약물 투여기간인 14일 간의 육안 관절염 score 의 변화량을 하기의 공식 [3]을 이용하여 각각 산출하였 다.

EQUATION [3]. Changes of Gross Arthritic Scores

=Individual gross arthritic scores at sacrifice−individual gross arthritic scores at start of test material administration (Day 14~Day 28)

6) 염증 조직 내 PGE2 함량의 측정

최종 희생일에 Zoletile mixture (Zoletile 50; Virbac Lab., France)로 마취하고, 왼쪽 후지를 절취하여, 슬관절 아래 부분을 분리하였다. 분리한 조직을 생리식염수에 60 분간 침전시키고, 3,000 rpm에 10분간 원심분리하여, 상 층액을 분리하였다. 분리한 상층액 0.1 ml에 methanol에 용해시킨 0.5 mol/L KOH (Sigma, MO, USA) 용액 2 ml 를 첨가하고, 50^oC 하에 20분간 incubation 한 다음 20 ml의 methanol로 희석하였다. 희석한 용액에서 PGE2 함 량을 Chen¹⁶⁾의 방법에 따라, ultraviolet spectrophotometer (Model 22, Angstrom Advanced Inc., MA, USA)를 이용하여 파장 278 nm에서 흡광도를 측정하여, ng/paw 단위로 각각 측정하였다.

7) 관절 연골 내 collagen 함량의 측정

관절연골의 콜라겐 함량 변화는 Leach¹⁷⁾에 의해 변형 된 Neuman and Logan^18,19)의 방법에 따라, 무릎 관절의 대퇴골 및 경골 관절 연골 내에서 hydroxyproline 함량을 측정하여, 평가하였다. Hydroxyproline 함량은 mg/100 mg cartilage 단위로 측정하였다.

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8) 관절 연골 내 Glycosaminoglycan 함량의 측정 관절 연골 내 glycosaminoglycan-heparan sulphate, chondroitin sulphate 및 hyaluronic acid 함량은 mg/g defatted tissues 단위로 이전의 방법²⁰⁾을 이용하여, ultraviolet spectrophotometer (Model 22, Angstrom Advan- ced Inc., MA, USA)로 각각 측정하였다. Hyaluronic acid, heparan sulphate 및 chondroitin sulphate의 흡광 도는 각각 650, 478 및 480 nm에서 측정하였다.

9) 통계처리

모든 수치는 평균±표준편차로 표시하였으며, 다중비 교검증을 이용하여 통계처리를 실시하였고, 분산동질성을 Levene test를 실시하여 검증 하였다²¹⁾. 등분산일 경우, one way Analysis of Variance (ANOVA) test를 실시한 다음 least-significant differences (LSD) test로 사후 검증 을 실시하여 군간의 유의성을 측정하였다. 비등분산일 경 우에는 비모수 검증인 Kruskal-Wallis H test를 실시하여 유의성이 인정된 경우에는, Mann-Whitney U (MW) test 를 실시하여 군간의 유의성을 검증하였다. 모든 통계처리 는 SPSS for Windows (Release 14.0 K, SPSS Inc., USA) 를 이용하여 평가하였으며, p-value가 0.05 이하인 경우 통계적 유의성을 인정하였다²²⁾. 또한 FCA에 의한 류마티 스 관절염의 유발 정도를 파악하기 위하여, 정상 매체 대 조군과 FCA 대조군과의 percent change를 하기의 공식 [4]를 이용하여 측정하였으며, 투여 물질의 약효를 좀더 명확히 하기 위하여, 약물 투여군과 FCA 대조군과의 percent change를 하기의 공식 [5]를 이용하여 각각 측정하 였다.

EQUATION [4]. Percent Change of Intact Controls and FCA Controls

=((Data of FCA control−Data of intact control)/Data of intact control)×100

EQUATION [5]. Percent Change of FCA Controls and Samki-eum (sānqì-yǐn) Treated Controls

=((Data of test article administered groups−Data of FCA control)/Data of FCA control)×100

결과»»»

1. 체중의 변화

정상 대조군에 비해 유의성 있는(p＜0.01) 체중의 감 소가 FCA 투여 14일(투여 시작일) 후부터 관절염 유발 대조군에서 인정되기 시작하여, 실험 전 기간 동안 인정 되었다. 따라서 유발기간, 투여기간 및 실험 전 기간 동 안의 증체량이 각각 정상 대조군에 비해 유의성 있는(p＜

0.01) 현저한 감소를 나타내었다. 한편 dexamethasone 투여군에서는 투여 7일 후부터 관절염 유발 대조군에 비 해서도 유의성 있는(p＜0.01 또는 p＜0.05) 체중의 감소 를 나타내어, 투여기간 및 실험 전 기간 동안의 증체량 역시 정상 및 관절염 유발 대조군에 비해 유의성 있는(p＜

0.01) 감소를 각각 나타내었다. 三氣飮 300 및 150 mg/kg 투여군에서는 각각 투여 7 또는 14일 후부터 관절 염 유발 대조군에 비해 유의성 있는(p＜0.01 또는 p＜

0.05) 체중의 증가를 나타내었고, 투여 기간 및 실험 전 기간 동안의 증체량 역시 관절염 유발 대조군에 비해 유 의성 있는(p＜0.01 또는 p＜0.05) 증가를 나타내었으나, 三氣飮 75 mg/kg 투여군에서는 관절염 유발 대조군과 유 사한 체중 및 증체량의 변화를 각각 나타내었다. 한편 14 일간의 FCA 관절염 유발 기간 동안의 증체량은 모든 약 물 투여군에서 관절염 유발 대조군과 유사하게 관찰되었 다(Table IV, Fig. 1).

실험 전 기간 동안의 증체량(28일; 최종 희생일의 체중−

FCA 투여일의 체중)은 관절염 유발 대조군의 경우, 정상 대조군에 비해 -134.07%의 변화를 나타내었으며, dexamethasone, 三氣飮 300, 150 및 75 mg/kg 투여군에서 는 관절염 유발 대조군에 비해 각각 -60.04, 110.74, 55.55 및 8.14%의 변화를 나타내었다.

2. 슬관절 두께의 변화

정상 대조군에 비해 유의성 있는(p＜0.01) 슬관절 두 께의 증가가 FCA 투여 14일(투여 시작일) 후부터 관절염 유발 대조군에서 인정되기 시작하여, 투여기간 동안의 슬 관절 두께 변화량의 유의성 있는(p＜0.01) 증가 역시 인 정되었다. 한편 dexamethasone, 三氣飮 300 및 150 mg/kg 투여군에서는 각각 투여 7일 후부터 관절염 유발

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Fig. 1. Body weights in FCA-induced arthritic rats. Note that the body weights in FCA control were significantly (p＜0.01) decreased from 14 day after FCA treatment (at start of test article administration; arrow) throughout 14 days of administration periods. However, significant increases of body weights were detected in dexamethasone, Samki-eum (sānqì-yǐn) 300 and 150 mg/kg treated rats from 7 and 14 days after start of administration, respectively as compared with FCA control (arrow heads).

Samki-eum (sānqì-yǐn) was orally treated and dexamethasone was intraperitoneally treated in the present study, respectively before means 1 day before FCA treatment.

Day 0 means at FCA treatment.

Values are expressed mean±SD of eight rats, g.

*p＜0.01 as compared with intact control by LSD test.

†p＜0.01 and ^‡p＜0.05 as compared with FCA control by LSD test.

Groups

Body weight gains (g) during Induction periods of arthritis

(14 days)

After treatment of test substances (14 days)

Whole experimental periods (28 days)

Controls

Intact 22.38±7.44 34.13±6.47 56.50±12.57

FCA 0.13±4.05* -19.38±1.92^† -19.25±3.20^†

Dexamethasone -1.25±3.69* -29.75±6.98^†‡ -31.00±4.21^†‡

Samki-eum (sānqì-yǐn)

300 mg/kg -0.38±3.58* 2.25±6.50^†‡ 1.88±5.22^†‡

150 mg/kg -0.38±2.33* -8.38±6.95^†‡ -8.75±7.55^†§

75 mg/kg -0.88±2.85* -17.00±2.73^† -17.88±3.87^†

Values are expressed Mean±SD of eight rats, g.

Dexamethasone was intraperitoneally administered at 15 mg/kg dose level, and all three different dosages of Samki-eum (sānqì-yǐn) were orally administered in the present study, respectively.

†p＜0.01 as compared with intact control by MW test.

‡p＜0.01 and ^§p＜0.05 as compared with FCA control by MW test.

Table IV. Changes on the Body Weight Gains after Dexamethasone and Samki-eum (sānqì-yǐn) Administrations in FCA-induced Arthritic Rats

대조군에 비해 유의성 있는(p＜0.01) 슬관절 두께의 감소 가 인정되기 시작하여, 투여 기간 동안의 슬관절 두께 변 화량의 유의성 있는(p＜0.01) 감소가 각각 인정되었으나, 三氣飮 75 mg/kg 투여군에서는 관절염 유발 대조군과 유 사한 슬관절 두께 및 변화량을 각각 나타내었다(Table V, Fig. 2).

투여시작일의 유발 슬관절 두께는 관절염 유발 대조군 의 경우, 정상 대조군에 비해 55.08%의 변화를 나타내었 으며, dexamethasone, 三氣飮 300, 150 및 75 mg/kg 투 여군에서는 관절염 유발 대조군에 비해 각각 -0.16, 1.18, -0.03 및 -0.82%의 변화를 나타내었다.

최종 희생일의 유발 슬관절 두께는 관절염 유발 대조 군의 경우, 정상 대조군에 비해 87.54%의 변화를 나타내 었으며, dexamethasone, 三氣飮 300, 150 및 75 mg/kg 투여군에서는 관절염 유발 대조군에 비해 각각 -29.17, -17.51, -11.26 및 -3.82%의 변화를 나타내었다.

투여 기간 동안의 슬관절 두께 변화량(14일; 최종 희생 일의 슬관절 두께 - FCA 투여 14일후의 슬관절 두께)은 관 절염 유발 대조군의 경우, 정상 대조군에 비해 3880.00%

의 변화를 나타내었으며, dexamethasone, 三氣飮 300, 150 및 75 mg/kg 투여군에서는 관절염 유발 대조군에 비 해 각각 -61.70, -37.35, -23.79 및 -7.82%의 변화를 나타 내었다.

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Groups Knee thicknesses at Changes of knee thickness

FCA treatment [A] Sacrifice [B] [B] - [A]

Controls

Intact 2.44±0.12 2.50±0.14 0.06±0.04

FCA 2.45±0.12 4.68±0.36* 2.24±0.30^‡

Dexamethasone 2.46±0.07 3.32±0.20*^† 0.86±0.20^‡§

300 mg/kg 2.46±0.12 3.86±0.16*^† 1.40±0.10^‡§

150 mg/kg 2.45±0.09 4.16±0.16*^† 1.71±0.09^‡§

75 mg/kg 2.44±0.09 4.51±0.21* 2.06±0.27^‡

Values are expressed Mean±SD of eight rats, mm.

†p＜0.01 as compared with FCA control by LSD test.

‡p＜0.01 as compared with intact control by MW test.

§p＜0.01 as compared with FCA control by MW test.

Table V. Effects of Samki-eum (sānqì-yǐn) on the Changes of Knee Thicknesses in FCA-induced Arthritic Rats

Fig. 2. Knee thicknesses in FCA-induced arthritic rats.

Note that the knee thicknesses in FCA control were significantly increased from 14 day after FCA treatment (at start of test article administration; arrow) throughout 14 days of administration periods. However, significant decreases of knee thicknesses were detected in dexamethasone, Samki-eum (sānqì-yǐn) 300 and 150 mg/kg treated rats from 7 days after start of administration as compared with FCA control, respectively (arrow head). No significant changes on the knee thicknesses were detected in Samki-eum (sānqì-yǐn) 75 mg/kg treated group as compared with FCA control in the present study.

Values are expressed mean±SD of eight rats, mm.

FCA, Freund’s complete adjuvant.

3. 육안 관절염 Score의 변화

정상 대조군에 비해 현저한 육안 관절염 score의 증가 가 FCA 투여 14일(투여 시작일) 후부터 관절염 유발 대 조군에서 인정되기 시작하여, 투여 기간 동안의 score 변 화량 역시 현저한 증가가 인정되었다. Dexamethasone, 三氣飮 300 및 150 mg/kg 투여군에서는 각각 투여 7일 후부터 관절염 유발 대조군에 비해 유의성 있는(p＜0.01) 관절염 육안 score의 감소를 나타내기 시작하여, 투여 기 간 동안의 육안 관절염 score변화량 역시 관절염 유발 대 조군에 비해 유의성 있는(p＜0.01) 감소를 각각 나타내었 으나, 三氣飮 75 mg/kg 투여군에서는 관절염 유발 대조 군과 유사한 육안 관절염 score 및 변화량을 각각 나타내 었다(Table VI, Fig. 3).

투여시작일의 육안 관절염 score는 dexamethasone, 三氣飮 300, 150 및 75 mg/kg 투여군에서 관절염 유발 대 조군에 비해 각각 1.32, -1.32, -1.32 및 -1.32%의 변화를 나타내었다.

최종 희생일의 육안 관절염 score는 dexamethasone, 三氣飮 300, 150 및 75 mg/kg 투여군에서 관절염 유발 대조군에 비해 각각 -58.47, -32.20, -22.03 및 -8.47%의 변화를 나타내었다.

투여 기간 동안의 육안 관절염 score 변화량(14일; 최 종 희생일의 육안 관절염 score - FCA 투여 14일후의 육

(8)

Groups Macroscopic score at Changes of macroscopic score 14 days after FCA treatment [A] Sacrifice [B] [B] - [A]

Controls

Intact 0.00±0.00 0.00±0.00 0.00±0.00

FCA 9.50±1.41 14.75±1.49 5.25±1.49

Dexamethasone 9.63±1.41 7.75±1.16* -3.50±2.00*

300 mg/kg 9.38±1.41 10.00±1.60* 0.63±1.41*

150 mg/kg 9.38±1.06 11.50±1.41* 2.13±0.83*

75 mg/kg 9.38±1.06 13.50±1.41 4.13±2.03

Values are expressed Mean±SD of eight rats, scores (max=16).

*p＜0.01 compared with FCA control by LSD test.

Table VI. Effects of Samki-eum (sānqì-yǐn) on the Changes of Macroscopic Scores in FCA-induced Arthritic Rats

Fig. 3. Gross arthritic scores in FCA-induced arthritic rats.

Note that the gross macroscopic arthritic scores in FCA control were markedly increased from 14 day after FCA treatment (at start of test article administration; arrow) throughout 14 days of administration periods. However, significant decreases of gross arthritic scores were detected in dexamethasone, Samki- eum (sānqì-yǐn) 300 and 150 mg/kg treated rats from 7 days after start of administration as compared with FCA control, respectively (arrow head). No significant changes were detected in Samki-eum (sānqì-yǐn) 75 mg/kg treated group as compared with FCA control in this experiment.

Values are expressed mean±SD of eight rats, mm.

안 관절염 score)은 dexamethasone, 三氣飮 300, 150 및 75 mg/kg 투여군에서 관절염 유발 대조군에 비해 각각 -166.67, -88.10, -59.52 및 -21.43%의 변화를 나타내었 다.

4. 염증 조직 내 PGE2 함량의 변화

정상 대조군에 비해 유의성 있는(p＜0.01) 염증 조직 내 PGE2 함량의 증가가 관절염 유발 대조군에서 인정되 었으나, dexamethasone, 三氣飮 300 및 150 mg/kg 투여 군에서는 각각 관절염 유발 대조군에 비해 유의성 있는 (p＜0.01) 염증 조직 내 PGE2 함량의 감소가 관찰되었으 며, 三氣飮 75 mg/kg 투여군에서도 유의성은 인정되지 않았으나, 관절염 유발 대조군에 비해 염증 조직 내 PGE2

함량의 감소를 역시 나타내었다(Fig. 4).

염증 조직 내 PGE2 함량은 관절염 유발 대조군의 경 우, 정상 대조군에 비해 1,386.85%의 변화를 나타내었으 며, dexamethasone, 三氣飮 300, 150 및 75 mg/kg 투여 군에서는 관절염 유발 대조군에 비해 각각 -74.72, -61.81, -49.48 및 -13.71%의 변화를 나타내었다.

5. 관절 연골 내 collagen 함량의 변화

정상 대조군에 비해 유의성 있는(p＜0.01) 관절 연골 내 collagen 함량의 감소가 관절염 유발 대조군에서 인정

(9)

Fig. 4. Tissue PGE2 contents in FCA-induced arthritic rats.

Note that the tissue PGE2 contents in FCA control were significantly increased as compared with intact control. However, significant decreases of tissue PGE2 contents were detected in dexamethasone (Dexa), Samki-eum (sānqì-yǐn) 300 and 150 mg/kg treated rats as compared with FCA control, respectively.

No significant changes on the tissue PGE2 content were detected in Samki-eum (sānqì-yǐn) 75 mg/kg treated group as compared with CIA control in the present study.

Samki-eum (sānqì-yǐn) was orally treated and Dexa (15 mg/kg) was intraperitoneally treated in the present study, respectively PGE2, prostaglandin E2.

Values are expressed mean±SD of eight rats, ng/paw.

*p＜0.01 as compared with intact control by MW test.

†p＜0.01 as compared with FCA control by MW test.

Fig. 5. Cartilate Collagen contents in FCA-induced arthritic rats.

Note that the cartilages collagen contents in FCA control were significantly decreased as compared with intact control. How- ever, significant increases of cartilages collagen contents were detected in dexamethasone (Dexa), Samki-eum (sānqì-yǐn) 300 and 150 mg/kg treated rats as compared with FCA control, respectively. No significant changes on the cartilages collagen contents were detected in Samki-eum (sānqì-yǐn) 75 mg/kg treated group as compared with CIA control in the present study.

Samki-eum (sānqì-yǐn) was orally treated and Dexa (15 mg/kg) was intraperitoneally treated in the present study, respectively Values are expressed mean±SD of eight rats, hydroxyproline mg/100 mg cartilage.

†p＜0.01 and ^‡p＜0.05 as compared with FCA control by LSD test.

되었으나, dexamethasone, 三氣飮 300 및 150 mg/kg 투 여군에서는 각각 관절염 유발 대조군에 비해 유의성 있는 (p＜0.01 또는 p＜0.05) 관절 연골 내 collagen 함량의 증가가 관찰되었고, 三氣飮 75 mg/kg 투여군에서도 관절 염 유발 대조군에 비해 유의성 없는 관절 연골 내 collagen 함량의 증가가 인정되었다(Fig. 5).

관절 연골 내 collagen 함량은 관절염 유발 대조군의 경우, 정상 대조군에 비해 -50.65%의 변화를 나타내었으 며, dexamethasone, 三氣飮 300, 150 및 75 mg/kg 투여 군에서는 관절염 유발 대조군에 비해 각각 56.78, 48.64, 36.97 및 19.26%의 변화를 나타내었다.

6. 관절 연골 내 chondroitin sulphate 함량의 변화

정상 대조군에 비해 유의성 있는(p＜0.01) 관절 연골 내 chondroitin sulphate함량의 감소가 관절염 유발 대조 군에서 인정되었으나, dexamethasone, 三氣飮 300 및

150 mg/kg 투여군에서는 각각 관절염 유발 대조군에 비 해 유의성 있는(p＜0.01 또는 p＜0.05) 관절 연골 내 chondroitin sulphate함량의 증가가 관찰되었으며, 三氣飮 75 mg/kg 투여군에서도 관절염 유발 대조군에 비해 유의 성은 인정되지 않았으나, 현저한 관절 연골 내 chondroitin sulphate함량의 증가를 나타내었다(Fig. 6).

관절 연골 내 chondroitin sulphate 함량은 관절염 유 발 대조군의 경우, 정상 대조군에 비해 -53.04%의 변화를 나타내었으며, dexamethasone, 三氣飮 300, 150 및 75 mg/kg 투여군에서는 관절염 유발 대조군에 비해 각각 62.05, 59.28, 44.61 및 12.77%의 변화를 나타내었다.

7. 관절 연골 내 heparan sulphate 함량의 변화

정상 대조군에 비해 유의성 있는(p＜0.01) 관절 연골 내 heparan sulphate함량의 감소가 관절염 유발 대조군

(10)

Fig. 6. Cartilage chondroitin sulphate contents in FCA-induced arthritic rats.

Note that the cartilages chondroitin sulphate contents in FCA control were significantly decreased as compared with intact control. However, significant increases of cartilages chondroitin sulphate contents were detected in dexamethasone (Dexa), Samki-eum (sānqì-yǐn) 300 and 150 mg/kg treated rats as compared with FCA control, respectively. No significant changes on the cartilages chondroitin sulphate contents were detected in Samki-eum (sānqì-yǐn) 75 mg/kg treated group as compared with CIA control.

Samki-eum (sānqì-yǐn) was orally treated and Dexa (15 mg/kg) was intraperitoneally treated in the present study, respectively Values are expressed mean ± SD of eight rats, mg/g defatted tissues.

*p＜0.01 and ^†p＜0.05 as compared with intact control by LSD test.

‡p＜0.01 and ^§p＜0.05 as compared with intact control by LSD test.

Fig. 7. Cartilage heparan sulphate contents in FCA-induced arthritic rats.

Note that the cartilages heparan sulphate contents in FCA control were significantly decreased as compared with intact control. However, significant increases of cartilages heparan sulphate contents were detected in dexamethasone (Dexa), Samki-eum (sānqì-yǐn) 300 and 150 mg/kg treated rats as compared with FCA control, respectively. No significant changes on the cartilages heparan sulphate contents were detected in Samki-eum (sānqì-yǐn) 75 mg/kg treated group as compared with CIA control in this experiment.

Samki-eum (sānqì-yǐn) was orally treated and Dexa (15 mg/kg) was intraperitoneally treated in the present study, respectively.

Values are expressed mean±SD of eight rats, mg/g defatted tissues.

에서 인정되었으나, dexamethasone, 三氣飮 300 및 150 mg/kg 투여군에서는 각각 관절염 유발 대조군에 비해 유 의성 있는(p＜0.01) 관절 연골 내 heparan sulphate함량 의 증가가 관찰되었고, 三氣飮 75 mg/kg 투여군에서도 관절염 유발 대조군에 비해 유의성은 인정되지 않았으나, 현저한 연골 내 heparan sulphate함량의 증가를 나타내 었다(Fig. 7).

관절 연골 내 heparan sulphate 함량은 관절염 유발 대조군의 경우, 정상 대조군에 비해 -52.41%의 변화를 나 타내었으며, dexamethasone, 三氣飮 300, 150 및 75 mg/kg 투여군에서는 관절염 유발 대조군에 비해 각각 68.09, 69.75, 55.52 및 15.12%의 변화를 나타내었다.

8. 관절 연골 내 hyaluronic acid 함량의 변화

정상 대조군에 비해 유의성 있는(p＜0.01) 관절 연골 내 hyaluronic acid 함량의 감소가 관절염 유발 대조군에 서 인정되었으나, dexamethasone, 三氣飮 300 및 150 mg/kg 투여군에서는 각각 관절염 유발 대조군에 비해 유 의성 있는(p＜0.01) 관절 연골 내 hyaluronic acid 함량 의 증가가 관찰되었고, 三氣飮 75 mg/kg 투여군에서도 관절염 유발 대조군에 비해 유의성 없는 관절 연골 내 hyaluronic acid함량의 증가가 인정되었다(Fig. 8).

관절 연골 내 hyaluronic acid 함량은 관절염 유발 대 조군의 경우, 정상 대조군에 비해 -52.29%의 변화를 나타 내었으며, dexamethasone, 三氣飮 300, 150 및 75 mg/kg 투여군에서는 관절염 유발 대조군에 비해 각각 45.90,

(11)

Fig. 8. Cartilage hyaluronic acid contents in FCA-induced arthritic rats.

Note that the cartilages hyaluronic acid contents in FCA control were significantly decreased as compared with intact control. However, significant increases of cartilages hyaluronic acid contents were detected in dexamethasone (Dexa), Samki-eum (sānqì-yǐn) 300 and 150 mg/kg treated rats as compared with FCA control, respectively. No significant changes on the cartilages hyaluronic acid contents were detected in Samki-eum (sānqì-yǐn) 75 mg/kg treated group as compared with CIA control in this study.

Samki-eum (sānqì-yǐn) was orally treated and Dexa (15 mg/kg) was intraperitoneally treated in the present study, respectively.

Values are expressed mean±SD of eight rats, mg/g defatted tissues.

*p＜0.01 and ^†p＜0.05 as compared with intact control by MW test.

‡p＜0.01 as compared with FCA control by MW test.

48.35, 35.04 및 15.34%의 변화를 나타내었다.

고찰»»»

류마티스 관절염 치료의 기준이 되는 항류마티스 약물 (DMARDs) 중 가장 많이 사용되는 methotrexate의 경우 간독성과 B형 간염바이러스 증식의 활성화²³⁾, 골수 증식 억제²⁴⁾ 등 부작용에 의해 30%에서 투약을 중단하게 되고, 최근 조명되고 있는 생물학적 약제인 TNF (Tumor Ne- crosis Factor) 억제제는 결핵의 재활성화, 감염, 림프종이 나 악성종양 등²⁵⁾이 발생할 수 있고, 드물지만 다발성 경 화증, 시신경염, 말이집 탈락 등²⁶⁾의 부작용이 보고 되고 있어, 부작용이 적은 류마티스 관절염 치료제의 개발이

필요하다.

三氣飮은 ｢㬌岳全書｣⁴⁾에 수록된 이후 黃道淵, 周命新 등에 의해 ｢方藥合編｣, ｢醫門寶鑑｣에 수록되며 歷節風, 鶴膝風, 痺痛 등을 치료하는 처방으로 사용되었다⁵⁾. 三氣飮의 효능에 대한 실험적 연구를 살펴보면, 이 등⁸⁾의 연 구에서 TNF-α의 활성 억제를 통해 proteoglycan의 이화 작용을 감소시켜 골관절염에 유효한 효과 보고를 통해 三氣飮의 관절 질환에 대한 치료 가능성을 제시하고 있으 나, 신과 이⁹⁾, 김과 이¹⁰⁾의 adjuvant 유발 관절염에 미치 는 효과에 대한 연구에서 일반적 혈액 분석, 육안적 부종 관찰, 활성산소를 통해 분석한 보고에 그치고 있어 류마 티스 관절염에 대한 직접적인 항염 효과와 관절 연골의 직접적인 보호 작용에 대한 연구가 필요하다.

본 연구에서는 三氣飮의 류마티스 관절염에 대한 효과 를 adjuvant 유발 관절염 랫트를 이용하여 평가하기 위하 여, Wistar 랫트에 Freund’s complete adjuvant (FCA)를 피내 주입하여 류마티스 관절염을 유발시키고, FCA 투여 14일 후부터 三氣飮을 매일 300, 150 및 75 mg/kg의 농 도로 각각 14일간 경구 투여한 다음, 체중, 슬관절 두께 의 변화, 육안적 관절염 scores, 관절 내 PGE2 함량, 연골 내 콜라겐 함량 및 glycosaminoglycans-chondroitin sulphate, heparan sulphate, hyaluronic acid 함량의 변화를 각각 관찰하였다. 약효는 관절염 치료제 및 항염제 개발 에 가장 빈번히 사용되는 대조 약물 중 하나인, dexamethasone 15 mg/kg 복강 투여군¹³⁾과 비교 관찰하였 다.

Adjuvant 유발 랫트 관절염 모델은 현재 가장 흔히 이 용되는 만성 염증 실험동물 모델로, 사람의 강직성 척수 염(ankylosing spondylitis) 및 류마티스 관절염과 매우 유사한 병증을 나타낸다. Adjuvant 유발 관절염의 정확한 병태는 알려져 있지 않으나, 현재 결합조직의 기질 (matrix) 구성 성분의 대사성 변화가 가장 현저히 변화되 는 것으로 알려져 있다²⁷⁾. 이러한 Adjuvant 유발 관절염 모델에서는 관절 기질 내 구성 성분인 collagen 및 glyco- saminoglycans의 변화^27,28), 염증 화학 매개체의 양적 변 화²⁹⁾, 사지에 초래되는 부종, 발적 또는 강직을 바탕으로 한 육안 관절염 score^15,30-32) 등을 바탕으로 투여 물질의 약효를 평가해 왔다.

Dexamethasone은 잘 알려진 부신피질스테로이제로, 피부 위축 및 시상하부-뇌하수체-부신으로 이어지는 내분

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비 장애에 의한 면역 억제, 체중감소 등 전신적인 부작 용이 초래되므로 그 사용이 제한되고 있다³³⁾. 현재 새로 운 항염제 개발에 가장 많이 이용되고 있는 대조약물이

며^13,34), adjuvant 유발 랫트 관절염 모델에서도 그 효과가

입증되어 있어^35,36), 본 실험에서는 대조약물로 사용하였 다.

일반적으로 FCA에 의한 류마티스 관절염시 현저한 체 중 감소가 관찰되나³⁷⁾, 본 실험의 결과, 300 및 150 mg/kg 의 三氣飮은 이러한 FCA 류마티스 관련 체중 감소를 현 저히 억제하는 것으로 관찰되었고, dexamethasone 투여 군에서는 투여 7일 후부터 관절염 유발 대조군에 비해서 도 현저한 체중 감소가 시작되었다.

FCA 유발 관절염 모델에서 류마티스 관절염의 유발 정 도는 말초 관절(peripheral joints)의 발적, 종창 및 강직 을 바탕으로 한 육안적인 scoring system을 이용해 왔으 며¹⁵⁾, 본 연구의 결과, 三氣飮은 투여 용량 의존적으로 FCA에 의한 육안 score 및 슬관절 두께 증가를 현저히 억제하는 것으로 관찰되었다.

PGE2는 cyclic oxidase isozymes (COX2)에 의해 형성 되는 대표적 염증 화학 매개체로 염증시 주변 조직의 파 괴를 초래할 수 있으며³⁸⁾, 류마티스 관절염을 포함한 다 양한 염증성 질환에서 정상 조직의 파괴와 함께 형성이 촉진되는 것으로 알려져 있다³⁹⁾. 본 실험에서 인정된 투 여 용량 의존적인 염증 조직 내 PGE2 함량의 감소는, 三氣飮의 항염 효과를 나타내는 하나의 증거로 판단된다.

한편, 三氣飮 300 mg/kg은 dexamethasone 15 mg/kg 투 여군보다 비교적 낮은 염증 조직 내 PGE2 함량 증가 억 제 효과를 나타내었다.

관절 연골의 국소성 손상(local erosive destruction), 연골 내 collagen 감소 및 골 소실은 류마티스 관절염의 특징적인 소견으로, 류마티스 관절염의 진단 및 예후를 결정하는 인자로 이용된다⁴⁰⁾. 류마티스 관절염의 진행과 함께, 관절을 구성하고 있는 여러 가지 기질, 특히 collagen, 당단백질(glycoproteins), proteoglycans, glycosaminoglycans 및 콜라겐의 손실 초래된다²⁷⁾. 연골의 세포외 기질은 chondroitin sulphate, heparan sulphate, keratin sulphate 및 dermatan sulphate와 같은 황산화 proteo- glycans을 함유하고 있고, 관절염이 진행될 경우 chondroitin sulphate 및 heparan sulphate가 연골 손상과 함 께 혈중으로 유리되어, 이들은 관절염의 진행 정도를 평

가하는데 있어 중요한 인자로 사용되어 왔다⁴¹⁾. 또한 hyaluronic acid는 비교적 분자량이 큰 다당류로, 주로 관절 낭의 type B synoviocytes에서 생산 보충된다. 따라서 연 골 내의 hyaluronic acid의 감소 역시 관절염의 진행 정 도를 평가하는데 있어 중요한 인자로 사용된다⁴²⁾. 본 실 험의 결과, 三氣飮은 연골 내 collagen 및 glycosaminoglycan-chondroitin sulphate, heparan sulphate 및 hyaluronic acid 함량의 감소를 투여 용량 의존적으로 억제 하였다. 따라서 三氣飮은 류마티스 관절염을 효과적으로 억제할 것으로 생각되며, 특히 三氣飮 300 mg/kg 투여군 은 dexamethasone 15 mg/kg 투여군과 유사한 관절 연 골의 바탕질인 glycosaminoglycan 보존 효과를 나타내었 다.

본 실험의 결과, FCA 처리에 의해, 현저한 체중 및 증 체량의 감소, 슬관절 두께 및 육안적 관절염 score의 증 가, 조직 내 PGE2 함량의 증가, 관절 연골 내 collagen 및 glycosaminoglycan-chondroitin sulphate, heparan sulphate 및 hyaluronic acid 함량의 감소 등 전형적인 류마 티스 관절염이 유발되었다. 이러한 FCA에 의한 관절염 소견은 三氣飮 300 및 150 mg/kg 투여에 의해 투여 용량 의존적으로 억제되었으며, 특히 염증의 화학적 매개체인 PGE2 함량의 투여 용량 의존적인 증가 및 연골의 구성 바탕질인 glycosaminoglycan의 투여 용량 의존적인 감소 억제가 인정되었다. 한편 dexamethasone 15 mg/kg 투 여군에서는 三氣飮 300 mg/kg 보다 더 우수한 FCA 류마 티스 관절염 억제 효과를 나타내었으나, 실험동물의 현저 한 체중 감소와 같은 부작용 역시 인정되었다. 전체적으 로 三氣飮 300 mg/kg은 dexamethasone 15 mg/kg 투여 군보다 비교적 낮은 항염 효과를 나타내었으나, 연골 내 glycosaminoglycan 보존 효과는 dexamethasone 15 mg/kg 복강 투여군과 유사하게 관찰되었다.

이상의 결과에서 150 mg/kg 이상의 三氣飮은 항염 작 용에 의해 FCA로 유발된 류마티스 관절염을 효과적으로 억제하는 것으로 관찰되었고, 류마티스 관절염에 수반되 어 일어나는 체중 감소 등을 효과적으로 억제하였으므로, 부작용이 비교적 적은 새로운 류마티스 치료제로서 개발 가능성이 있을 것으로 사료된다. 그러나, 三氣飮은 13종 의 약재로 구성된 처방으로 각각 수많은 생리활성 물질을 함유하고 있어, 추후 개별 구성 약재에 대한 효능 및 화 학성분의 검색과 더불어 다양한 방면으로 기전적인 연구

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를 더 수행해야 할 것이다.

결론»»»

Adjuvant로 유발된 랫트의 관절염에 대해 三氣飮을 투 여한 결과 다음과 같은 결론을 얻었다.

1. 정상 대조군에 비하여 관절염 유발 대조군에서 실험 14일 이후 체중의 감소가 일어났고, 三氣飮 투여군에서는 실험 기간에 따라 투여 용량 의존적으로 체중 증가가 일 어났으나, 75 mg/kg 투여군에서는 관절염 유발 대조군과 유사한 결과를 보였다.

2. 정상 대조군에 비하여 관절염 유발 대조군에서는 실 험 14일 이후 슬관절 두께의 증가가 일어났고, 三氣飮 투 여군에서는 실험 기간에 따라 투여 용량 의존적으로 슬관 절 두께의 감소가 일어났으나, 75 mg/kg 투여군에서는 관절염 유발 대조군과 유사한 결과를 보였다.

3. 정상 대조군에 비하여 관절염 유발 대조군에서는 실 험 14일 이후 육안 관절염 score의 증가가 일어났고, 三氣飮 투여군에서는 실험 기간에 따라 투여 용량 의존적으 로 육안 관절염 score의 감소가 일어났으나, 75 mg/kg 투여군에서는 관절염 유발 대조군과 유사한 결과를 보였 으나, 75 mg/kg 투여군에서는 관절염 유발 대조군과 유 사한 결과를 보였다.

4. 정상 대조군에 비하여 관절염 유발 대조군에서 염증 조직 내 PGE2 함량의 증가가 일어났고, 三氣飮 투여군에 서는 투여 용량 의존적으로 염증 조직 내 PGE2 함량의 감소가 일어났으나, 75 mg/kg 투여군에서는 관절염 유발 대조군과 유사한 결과를 보였다.

5. 정상 대조군에 비하여 관절염 유발 대조군에서 관절 연골 내 GAGs-chondroitin sulphate, heparin sulphate, hyaluronic acid 함량의 증가가 일어났다.

이상의 결과에서 150 mg/kg 이상의 三氣飮은 항염 작 용에 의해 FCA에 의한 류마티스 관절염을 효과적으로 억 제하는 것으로 관찰되었으며, 류마티스 관절염에 수반되 어 나타나는 체중 감소 등의 부작용을 효과적으로 억제하 였다.

참고문헌»»»

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