임상병리검사과학회지
:
제 28 권 제 1 호1996.
구강에서 Gandida Species 분포에 관한 연구
대구 가톨릭피부과의원
·
대구보건전문대학 임상병리과*경산대학교 보건과학과**
.
신일전문대학***방용준
·
이건섭*.
김쌍용*.
노병의**.
김병식***Study on the Distribution of Gandida Species from Oral Cavity
Bang , Young- Jun. , Lee , Gun-Sup*. , Kim , Ssang - Young*. , Roh , Pyong- Ui**. , Kim , Byoung-Sig***
Cathl여ic
Sk in Clinic , Taegu Korea
Dept. of Clinical
Path,여ogyTaegu Health Junior Colleg e*
Kyungsan Universit ý'*, Shinil Junior
C여~lef5i항**A study was conducted in order to determine harborage of Candida species in oral cavity of 80 healthy volunteers , 8 cancer patients , 26 diabetes patients , 40 Hansen ’ s dis- ease patients and 37 other patients who used steroid for a long period of time. Speci- mens were collected from oral cavities of the subjects by cotton swabs , and the speci- mens were cultured on corn meal agar. The results were summarized as follows :
1. Of 191 subjests Candida species were isolated from 72(37.7%) and C. albicans were from 57(29.8%). Of C. albicans 49(86%) were serotype A.
2. Candida species were isolated from 27(75%) of 37 patients using steroids. The same secies were isolated from 10(37.5%) of 26 diabetes patients. Three of eight cancer patients, ten of forty Hansen’s disease patients, and 22 of 80 healthy sub- jects had Candida species in their oral cavities.
3. Of 80 healthy subjects
Caηdidaspecies were isolated from 22 subjects(27.5%). C.
albicans were isolated from 14 (1 7.5%) , and C. tropicals from four sujects.
Key words : Candida spp. , oral cavity , C. a/bicans serotype
1 .
서 론 근래에 후천성 면역결핍증의 증가와 암종 또 는 이로 인한 항암제 투여나 방사선조사, 장기 이식 후 면역 억제제 투여, 당뇨, 노인, 항생제 를 오랫 동안 사용할 경우 등으로 숙주의 면역 결핍상태 또는 내분비학적 요인으로 인해 숙주 의 방어능력이 약해지는 사례가 늘어남에 따라 Candida균속은 자연계와 주변 환경에 널리 분포하고 있으며, 건강한 사람의 피부, 입 안, 질, 장에 정상균총 (normal flora) 으로 숙주와 균형을 유지 하여 감염증상을 일으키지 않고 존재하고 있다 1-3)
n ι
숙주와 균형을 유지하면서 정상적으로 존재하 는 비병원성인 균도 감염을 일어키는 소위 기 회 감염
( opportunistic inf ection)
의 증가가 문제 시 되고 있다 4.5)저 자들은 장기 간 steroid를 복용한 환자, 당 뇨환자, 악성 종양환자, 10년 이 상 항나균제 를 복용한 환자 등 면역상태가 저하된 환자는 기 회감염될 위험이 높기 때문에 이러한 환자의 구강과 건강한 사람의 구강내 Candida균속 분 포를 알아보기 위하여, 진균증이 없는 환자 및 건강인을 대상으로 구강에서 채취한 검체를 직 접도말검사하여 균사와 분아포자를 볼 수 없는 검제를 배양한 결과를 보고한다.
II.
재료 및 방법1.
대상1996 년 5 월부터 7월까지 가톨릭피부과의원과 대구시 소재 치과의원에 내원한 환자 중 비진균 성 질환으로 6 개월 이 상 corticosteroid를 복용한 환자 37 명, 당뇨가 있는 환자 26 명, 악성종양 환 자로서 피부질환으로 내원한 환자 8명, 정기적으 로 10년 이상 항나균제 치료 중인 나환자 40 명 과 건강인 80명을 대상으로 진균 배양을 하였다.
2.
방법임상적으로 진균증이 없는 191 명의 입 안에 서 멸균증류수를 적선 면봉으로 분비물을 채취 하여
0.5 ml
생리식염수에 혼합한 후,KOH
도Table 1. Summary of patients
Disease No. of cases
Pt ’ s on oral steroids 39 Internal disease
Diabetes mellitus 26
Malignancy 8
Leprosy 40
Controls 80
말검사에서 균사와 분아포자를 볼수 없는 검체
를
PDACT(potato dextrose agar 20 gm , corn meal agar 20 gm , peptone 2 gm , Tween 806 ml , distilled water 1000 ml)
평 판배 지 에 접 종하여 250C 에 4일간 배양한 후, 육안적으로 효모양으 로 자란 집 락 중 Candida종류에 따라 한 개 의 집 락 을 채 취 하여sabouraud detrose
agar배 지 에 계 대 배 양한 후, 발아관 시 험, corn meal agar
에 접종하여 위성균사와 후막포자 생성시험을 설시한 후 Candida균속과C.
albicans의 혈청형 을 알 수 있 는Candida check (Iatran Laborato- ries ,
inc.) 를 사용하여 최종적으로 동정하였다.ill.
결 과1.
대상자의 나이 및 성벌분포임상적 및
KOH
직접도말검사로 진균증이 없는 환자 및 건강인의 남·
여별, 나이별 분포 는Table
1 과 같다.2. Germ tube te8t
성 적PDACT에서 배양된 72 균주를 발아관 형성 시험 을 한 결과
C. albicans
57 주 중 53 주가 발 아관을 형성 하였고 4 주가 발아관을 형성하지 않았으며, C.
tropicalis는 9 주 중 1 주가 발아관 을 형성 하였고 8 주는 발아관을 형성하지 않았 다. 기타 다른 칸디다균속은 발아관을 형성하 지 않았다 (Table2).
Male Female Age ( a verage )
12 27 23
~72 (45.2)
14 12 26 ~ 69 (42.8)
4 4 30
~74 (53 .4)
13 27 35
~70 (55 .4)
40 40 5 ~ 76 (42.1)
기간 steroids를 복용한 환자 37예 중
27(72.9
%)예에서
c.
albicans가 분리 되었고, 당뇨병 환 자 26 예 중에서10(28.5%
)예, 악성종양 환자8
예 중
3(37.5%
)예,
나환자 40예 중16(25.0% )
예와 건강인은 80예 중
22(27.5%
)예에서c
albicans가 분리 되 었 다. 기 타 Candida균속은 steroids를 복용한 환자에 게 서
c. tropicalis
4예,
c.
parapsilosis와c.
guilliermondii와c.
krusei가 각 1예씩 분리 되었고 건강언에게서c. tropicalis
가 5예
, C. glabrate
2예, C. kefys
1 예 가 분리 되 었 다. 건 강인 의 나이 별c.
albicans의 분리 빈 도는60
세 이상에서
42% , 51 ...
61 세에서36.3% ,
10세 미만에서 20% 가 분리되어 소아와 노인층에서 높은 분리 빈도를 보인 반면, 10세 이상 30세 미 만에서는10%
미만의 분리 빈도를 나타내었다(Table 4 , 5).
3.
후막포자 생성시험Corn meal
agar 에서 후막포자 형성시험을한 결과
c. albicans
57주 중 55주가 후막포자가 생성 되었으며, 분아포자는 가성균사를 따라 밀 집된 덩어리를 이루고 있었고, 2주는 후막포자를 볼 수가 없 었 다.C.
tropicalis는 9 주 중 4주가 작 고 난형인 후막포자를 형성 하였고, 다른 균종 에서는 분아포자만 볼 수 있었다 (Table3).
Result of Germ tube test Table 2.
mι
않
-.때4
,‘
-rtι
뼈
-vN
4l
‘ -
때 --뼈
G
P -@ Total
효모균은 수많은 질환에 대한 원인균으로 밝 혀져 왔으며, 특히 항생제나 부신 피질 호르몬 제의 장기투여, 내분비 및 자율신경계 이상, 항 암제나 후천성 면역결핍증 등으로 인해 숙주의 면역이 저하된 상태에서 생활주변에 널리 분포 되어 있거나 정상균총으로 존재하던 것들이 병 원성을 획득하여 숙주에게 심각한 영향을 끼친
다 5)
Candida균속은 체온과 실온에서 효모세포와 균사가 섞여 증식하여 발병하는 진균증을 일으 킨다.
C.
albicans는 효모양 진균 중에서 가장 많이 분리되는 균으로서 두 가지의 혈청형 (A,B) 이 알려져 있으며, 정상 상재균으로 있을 때 는 일반적으로 분아세포만 볼 수 있고, 병소 부위에서는 병원성이 있는 균사와 분아 포자를
함께 볼 수 있다 14)
영 아기 이 후에 피 부나 입 안에
C. albicansoJ]
의한 칸디다증이 발생하면 먼저 부신기능저하 를 수반한 세포기능에 이상이 있을 기능성이 높고 항균제를 오래 복용하면 장관내에
C
albicans가 증가하는 경 우가 있다.
C. tropicalis
차 를
N.
고qu
14
Q
]
9ι
14 14 14 14
않
3 9 2 1 1 l -
되
2 1 0 0 0 0 0 Candida species
c. albicans serotype A C.
albicaπsserotype B C. tropicalis
C. glabrate C. parapsilosis C. guilliermondii C. krusei C. kefyr
72
T able 3. Result of Tween 80 with corn meal agar culture
18 54
Total
Germ tube test
Positive Negative Total C. albicans serotype A
C. albicans serotype B C. tropicalis
C. glabrate C. parapsilosis C. guilliermondii C. krusei C. kefyr
않
3 9 2 1 1 1 -
?“
nU Fb
nι
1i 1i 1i 1i
야4
3 4 0 0 0 0 0
Caπdida
species
72 13
59 Total
4.
각 질환벌 배양성적C. albicans
분리 율 성 적 을 보면 장- 64-
각 질환별
T able 4. Number of isolations of
Caηdidaspp f rom oral ca vi ty No.of No.of No. of species
Other Candida spp total cases Positive cases C. albicans serotype A, B
Pt ’ s on steroids C. guilliermondii - 1
37 27(72.9 %) 20(54.1%) 173 7 (1 8.9 %) C. parapsilosis-1 C. krusei-1
Internal disease C. tropicalis - 4
Diabetes mellitus 26 10(38.5 %) 10(38.5 %) 10 0
Malignacy 8 3(37.5 %) 3(37.5 %) 3 0
Leprosy 40 10(25.0 %) 10(25.0 %) 8 2 C. kefyr-1
Controls 80 22(27.5 %) 14 (1 7.5 %) 11 3 8( 10 %) C. tropicalis- 5 C. glabrate- 2
Total 191 72(37.7 %) 57(29.8 %) 49 8 15(7.9 %)
Table 5. Rate of isolation of C. albicans from oral cavity of controls Age
Date of isolation
o ,.._, 10 11 ,.._, 20 21 ,.._, 30 31 ,.._, 40 41 ,.._, 50 51 ,.._, 60 61 or 0ver
2/10 1/12 1/14 2/15 2/13 4/11 2/5
(20%) (8.3%) (7.1 %) (1 3.3%) (1 5 .4%) (36.3%) (40%)
는 규칙적으로 발견되지 않는 균으로
Stenderup 2)
은 정상인 피부의
1. 7% ,
조 등은 2.5% 에서 분 리하였다고 하였다. 이 균종은 중증 전신 감염 을 일으킬 수 있으며, 이 때의 치사율은92%
에까지 이른다는 보고가 있어 관심을 가져야 할 것이다 13)
저 자들은
corticosteroid
및 항나균제 를 장기 간 사용한 환자와 암치료, 당뇨병 등으로 면역 이 저하된 환자를 대상으로 입 안에서 채취한 검체를 직접도말검사하여 균사와 분아포자를 볼 수 없는 검체를 배양하여 입 안의Candida
균속 분포를 알아보기 위하여 본 연구를 실시 하였다.
본 연구에서 지원자 191 명의 입 안에서 분 리 된 균종은
C.
albicans가 57 주,C. tropicalis 9
주,
C. glabrate
2주.C. guilliermondii
1 주,C.
parapsilosis 1
주,C. krusei 1
주,C. kefyr 1
주 가 분리 되었다.발아관 시험은,
C.
albicans를 빠른 시간 내에 동정할 수 있는 방법이나,C.
alblcaηs 이외에도C.
tropicalis가 발아관을 형성한다는 보고가 있고,
C.
albicans도 발아관을 생 성 하지 않는 경 우 도 있다. 본 실험에서는C. albicans
4주가 발아 관을 형 성 하지 않았으며C.
tropicalis는 1 주가 발아관을 형성하였다.입 안 Candida균속에 대 한 보고는
Marples 6 )
가 244명의 대상자 중C. albicans 4 1. 4 %,
정상 피 부에서는 15.6% 를 분리 하였으며,Dumenna 7 )
는 430명 의 대 상자 중
C. albicans
216 주,C.
parapsilosis
4 주,C. curvata
1 주를 분리 동정 하였으며, Somerville는 9) 410명에 대하여 시행 한 연령별, 신체 부위별 정상균총 연구에서c.
albicans는 유아 정상피부에서
13% ,
노인에게 서21 %
분리 동정 하였으며, 미숙아의 잇몸에 서24% ,
어린이의 잇폼에서31 %,
노인의 잇 몸에서 45% 를 분리 하였다. 또한 Demis는 8)C.
띠bicans가 입 안에 서 정 상균총으로
20 ..., 50%
존재한다고 하였다. 최근에 Takuro는 10) 건강인 132명 에 게 서
C.
albicans를18.2% , C. torpicalis
5 주,
C. krusei
1 주,C. guilliermondii
1 주를 분리 하였다.본 연구에서 건강인을 포함한
steroid
장기복용 환자, 당뇨 환자, 악성 종양 환자, 나환자 입 안의 Candida균속을 동정 한 바 그 중에 서
C
albicans가 37.7% 에서 분리 되었으며, 분리된
C. albicans
57 주 중 혈청형 A가 49 예 (86 %)로 대부분을 차지 하였으며, 이러한 결과는 조 ll) , Takuro") 의 분리 빈도와 일치 하였다.각 질환별 분리 빈도를 보면 6개월 이상 steroids를 사용한 환자군에서 75.9% 로 높은 분리 빈도를 보였고, 당뇨환자에서
38.5% ,
악 성종양 환자37.5% ,
나환자 25% 로 건강인 입 안에서 분리된27.5%
보다 높았다. Sulfa제를 주로 사용하는 나환자에게서는 건강인과 비슷 한 분리빈도를 나타내었다. 이러한 결과는steroids
복용환자에 게 서 Takuro의77.8%
와는 일치 하였으나 다른 질환에서는 분리 빈도가 낮았다.건강인 80명 중
22(27.5%
)예에서 Candida균 속이 분리 되었으며C.
albicans는14 (1 7.5% )
예
, C. tropicalis
4예, C.
grabrate가 2예,c.
kefyr
1 예가 분리 되었으며, 조 11) 의 건강인 입 안에서C. albicans 30 .4 %
보고와는 차이가 많 으며, Takuro의 10) 18.2% 와 비슷한 분리 빈도 를 볼수 있었다.건강인에게서 나이별
C.
albicans의 분포는10
세 미만의 소아와 50세 이상의 노인에게서 많 이 분리 되었으며, 이러한 결과는 인체의 면역 상태와 밀접한 관련이 있을 것으로 사료 된다.
V.
결 론진균증이 없는 대상자의 입 안의 Candida균 속의 분포를 알아보기 위하여, 환자 및 건강인 입 안으로부터 면봉 채취법으로 채취한 검체를 직접도말검사 및 배양한 결과 다음과 같은 결 론을 얻었다.
1.
대상자 191 명 중72(37.3
%)명에게서Can-
dida
7 균속이 분리되었으며, 이 중에서C.
albicans가
37.7% , C. albicans
57 주 중47
주 (86 %)가 혈청형 A형이였다.
2.
각 질환별 분리 빈도를 보면steroids
환자군에서 72.9% 로 높은 분리빈도를 보였 고, 당뇨환자에게서
38.5% ,
악성종양 환 자에게서37.5% ,
나환자에게서 25% 이였 으며, 건강인에게서는27.5%
분리 빈도를 나타내었다.3.
건강인 80명 중22(27.5%
)명에게서Candi-
da4균속이 분리 되 었 으며