血감흥斷 檢호의 問題點

대한임상벙리사회지 : 제 9 권 제 l 후 1977

血감흥斷 檢호의 問題點

서울保健專門學校

羅 東 進

血被 檢흉室에 서 實施꽉는 檢훌中에 서 제 일 중요한 檢養는 血球의 形態學的 檢훌라 해도 과언이 아니다.

하나의 標本에서 7)ft血球， 白血球， 血小板의 數的 異 常이 推測될수 있는 것만이 아니고， 血球 하냐 하나의 病的狀態가 나타나기 혜 문이 다.

예를들면 血球의 形態學的 檢훌에서 Auer bodies가 발견되면， 기타 血滾檢흉 成積의 結果가 어떤 특별한 변화가 없는 限 急性骨體性日血病 (Acute granulocytic

leukemia)으로 該斷하게 되 고， 특수 先血球 및 異常 껏血球 (Specific erythrocyte), E大血小板 (Giant thr ombocyte) 等의 出現은 血球의 形態學的 檢호에 의해 서만 나타난다.

이와같이 중요한 血球의 形態學的 檢홈에 있어서 표 본작성의 方法， 細뼈의 감벨첨 等은 각 실험실에 짜라

약간씩 차이가 있고， 여러 학술 토론회에서 細뼈 該斷 에서 오는 이와같은 문제에 대해서 많은 문제점이 있 다는 것을 느껄 혜가 많다. 그렇기 해문에 血球의 形 態學的 檢홉의 標準化를 바라지 않을 수 없을 것 이 다.

血球의 形態學的 檢흉의 문제점에 대해서는 日本의 伊麗에 의해 상세히 기술되었 A드로 이러한 점에서 病 院에서 실시하고 있는 여러방법을 관련시커 의견을 말 해보고자한다.

血球의 形態學的 檢호의 標準化에서 문제로 되는 첨 은 크게 나누어 1) 標本作成時의 問題 2) 檢鏡法 3) 細 뼈의 鍵別點즈L로 나눈다.

1. 標本 作成時의 問題

이것에는 採血部位， 抗擬固뽑l 使用， 뚫技方法， 榮色 方法 等이 포함된다.

1. 採血部位와 抗癡固團l

많이 보급 될 줄 안다. 그러면 지금보다 정맥채혈의반 도는 더욱 상승 되리라 생각된다. 靜眼採血을 사용한 血球 計算에는 항응고제의 使用은 안할수 없는 것이마 주로 各 病院에 서 사용하는 항응고제 로는 double ox-

alate를 많이 使用하고 있오며， 차츰 自動 血球計算器 를 使用 함에 따라 EDTA-2K를 使用하는 곳도 많아지 고있다.

이상과 같이 항응고제를 使用하는 靜J1fft採血法야 血 球 計算用에 사용하는 빈도가 높아짐에 따라서 도말표 본을 작성 하는 경 우의 採血部位， 항응고제에 짜른 血 波의 形態、學的 檢홉의 영향에 대해서 생각해 보고자 한다.

採血部位에 따른 血球 計算f直의 差異에 대 해 서 는 렛 불 (ear lObe)과 靜眼에 서 採血한 血被을 비 교하면 血色‘

素， 꿨血球數 ，7)ft血球客積f直， 白血球數 모두 컷불에서 採血한 血浪이 有意의 높은f直를 나타내 며 , 血球의 形 態學的 面에 선 血小板數， 網狀先血球는 有意、의 差가없 다는 것이 報告 되었다. 또한 靜願血과 렛불에서 얻은 血滅 사이에 血球의 形態學的 差에 있어서 일정한 경 향은 나타나지 않는다고 報告되었마.

이와같이 컷불과 靜服에서 뺑血한 血波의 形態學的 변화는 큰 差異는 없지만 랫불에서 採血한 血滅을 가 지고 檢호하는데 주의해야 할 중요 문제가 있다. 그것 은 최 초의 한 방울에 는 單球 (Monocyte) 가 차지 하는 닝1 율이 높다고하는 것이다. 그렇기 혜문에 적어도 3방울 이후의 血被을 使用해서 도말표본을 작성하지 않으연 안된다.

血球計算파 동시에 血球의 形態學的 檢호가 실시되 는 경우 항응고제가 血被에 미치는 영향이 문제로된다

抗擬固齊j의 血被像에 마치는 영향에 대해서는 많은 검 토가 있었마.

아직까지 우리나라는 선진국에 비해 血被檢훌에 있 항응고제로는 EDTA-2Na, EDTA-2K, heparin, 어 서 수동적 인 것 이 自 動血球 計算器보다 많이 使用되 double oxalate 等이 검 토 되 었 다.

고 있지만 앞A로 멀지않아 우리나라도 血波 檢흉室의 三輪等은 好中球 (Neutrophil)중의 band neutrophil

精度向上과 능율화를 위해 自動 血球 計算器의 使用이 과 segmented neutrophil은 double oxalate에서는

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시간이 경과함에 짜라， 서서히 감소되고， 특히 4시간 이 후에 현저 히 감소된다고 한다.

기 다의 항응고제 는 EDTA-2K, heparin에 서 는 큰 差異는 없다고 한마 i林巴球 (Lymphocyte)는 採血後，

시간의 경과와 병행하여 증가하는 경향이 보이고 이것 도 double oxalate블 사용한 경 우에 보다 현저 하게 증가 된다고 한다.

변형된 빼巴球의 출혈율은 double oxalate에서 현 저 하게 나타나며 採血後 2시 간 以後에 는 다른 항응고 제에서도 10-20% 로 나타 난마고 한마.

單球는 各 항응고제와 함께 시간의 경과에 따라서 캄소되며， 변형된 單球의 출혈율은 항응고제를 사용하 였을경우 2시간 후에 50-60% 로 나타난다.

특히 double oxalate를 사용 하였 을 경 우 90% 까 지도 나타난다 빼모球， 單球의 변형은核形의 변화， 細 騙質의 g효脫 (Vacuolation)의 출현이 중요한 것 으로 되 어 있 마. 늦놓團은 EDTA-2K ， 3K가 血被像에 마 치 는 영 향을 비교해서 形態的 변화는 30분 후에는 천혀 나타 나지 않￡며 5시 간후 소수의 빼E球의 核의 榮色性이 不均等 하게 되 고 核의 축소를 만든다.

顆拉球나 單球에선 약간의 변화가 보이나 血滅像의 판독은 충분히 가능하다고 본다， 또한 骨體룡球 (Myel­

oblast), 單룡球 (Monoblast)와 같은 助若細뼈는 成熟 細뼈에 비해서 항응고제에 따른 形態的 변화를 더 받 는 다고한다.

이 러 한 보고자의 -致펀 意見오로는 血球計算파 血 被像에 비교적 영향이 적은 항응고제로서 EDTA-2K

를 열거하고 있으며， 血滾像을 좀더 정확하게 판찰하 려면 血滾 도말표본 작성시 항응고제를 첨가하지 않은 血滾으로 採血後에 즉시 실시하는 것이 가장 이상적이 다.

2. 逢技方法

血滅學에서 使用하는 逢妹法에는 slide glass法과

cover glass法의 2가지 가 있 다.

前者는 現在 韓國에서 일만적오로 샅시하고 있는 方 法A로 血球의 分布가 -定하지 않은 健點을 가지고 있마.

後者는 glass의 취급이 어렵고 염색할혜 不便한 點 이 있 A냐 염 색 후 slide glass에 놓고 balsam으로 封 하면 영쿠표본을 만들수 있는 利點이 있마. 美國에서

많이 使用한다.

Slide glass法에 서 細脫의 分布가 -定하지 않은 것 은 前進 시키는 spreader의 血球 부착이 原因A로 생

각된다. 즉 spreader에 붙기쉬운 顆함球냐 單球는 쫓 妹의 最後의 부분까지 운반되 으로 쫓技 종말부에 顆*立 球單球가 많게된다.

그러 나 血滾이 앓고 平等하게 펼쳐 진 標本에 선 血球 는 비교적 均等하게 分布되어 있마고 한다.

좋은 標本作成의 條件오로서 日 野는 CD 뚫妹이 slide glass의 폭 전체에 되면 얀되고 변두리가 있을 것.

~ Slide glass의 1/2이 나 1/3 정 도의 걸 이 에 서 쫓技 이 끝날것，@ 될수 있는 限 앓게 逢技 할 것， @ 逢 妹이 뀔等할 것 .@ 쫓妹標本의 변두리 가 slide glass

의 변두리에 平行할 것，@ 前進시킨 끝이 直線에가까 운 모양을 하고 더욱 上 下가 대칭￡로 될것의 6가지 를 열거 했마.

3. 梁色方法

血被 뚫妹標本의 作成에는 일반적 A로 Giemsa 염색，

Wright 염 색 , May -Grünwald염 색 , 혹은 Wright-Gi-

emsa 염 색 , May Grünwald-Giemsa 염 색 파 같은 2重 짧色이 쓰이고 있다.

Giemsa 염색은 原形質內의 顆拉의 榮色↑生이 나쁘고 梁色時間을 30分 以上 要하는 것 이 缺點이 다.

Wright 榮色은 固定과 榮色이 (Fixa tion and Stai-

ning) 同時에 실시되어 時間이 절약되나 核의 염색상

태 가 Giemsa 염 색 보다 뭇하다.

2가지 의 缺點을 보충하는 의 미 에 서 Wright-Giemsa

2重 짧色이있다.

어 떤 學者는 이 것 보단 May -Grümvald-G!emsa 梁色 쪽이 우수 하다고 한다.

어떻든 梁色의 標準化에는 2重 梁色法을 채용하는 것이 좋마고 생각된마.

4. 檢 鏡 法

현재 市中에는 對物 lens 40x60 이 市取되고 있마.

이 lens를 사용하는 이로운 點으흔 標本이 더러워지 지않고 cedar oil을 씻을 必要도 없고 白血球의 백분 율은 물론 ~血球나 血小板의 形態를 보는 目 的에 는 충분하기 혜문에 血球의 形態學的 檢호에 사용하고 있 는 檢좁室이 차츰 많아지고 있마.

그러 나 oil immersion lens를 사용하는 경 우에 바 해서 細脫를 판단하는 능력이 떨어진다는 것은 부정할 수 없 다. 그러 나 xloo, oil immersion lens블 쓰는 것 은 視野가 좁고 檢효에 時間이 많이 걸린다.

檢鏡의 순서에 있어서도 먼저 약확대 (Low power field) - 1 5 -

에 서 標本의 뚫妹， 梁色狀態， 細眼가 均等하체 分布되 核球로 보느냐가 問題된다. Schilling은 이 를 分葉核 어 았는 장소를 찾는 同時어1 白血球의 증감도 확언한 球로 취급하고 있￡며 표常 末稍血滾에서 뽑狀核球는-

다 3 ，...， 5% 정도라고 報告하였다. 여기에 對해서 Rohr과

다음에 깅-확대 (High power field)로서 白 血球의 백 小宮은 分葉을 맺 는 chroma tin bridge가 명 백 한 것 분율을 보면되나 그 前에 값血球의 形態 이상이나 폈 만을 分葉核球로 취급하여야 된다고 하였 A며， 이렇게 色性， 封入體(Inclusion body)의 有無， 마음에 血小板 되 면 正常人 血被像의 뽑狀球는 10,..., 15% 가 된다.

의 증감이나 형태를 관찰하는 습판을 갖도록 하는것이 이렇게되연 裡狀核球의 표常f直가 늪게 나타 나므로

必要하다. 因라여 好中核球의 左方移行을 말견하기 어려운 것이

아닌가 하는 의견도 있다.

5. 細服의 鍵껴IJ

細R힘鍵別에 對해서의 標準化는 지금까지 말한 逢技 標本 作成이나 檢鏡法의 標準化에 비해서 상당히 어려 운 問題를 內包하고 있다.

이것은 各 檢호室 사이에 또한 동일 檢뾰室에서도各 個人에 따라서 鍵別의 판단 기 준이 다르고 그판단에 主觀이 作用하게 된다.

血被 專門醫 사이에도 細뼈를 鍵別 하는데 對해서 差異를 안정하고 있는 것도 事實이다.

그렇기 때문에 細腦鍵別에 對해서 標準化는 엄밀한 의미에선 불가능한 것이라고 밖에 볼 수 없다.

伊蘇은 同一 환자에서 同時에 作成한 Wright 梁色 標本을 各 檢좁室에 보내 백 분율과 細뼈의 名稱을 報 告하게 한바 白血球 백분율에서는 극히 일반적으로 출 현하는 細뼈의 명칭에도 差異가 많은 것을 實證하였다 各 血球의 백분율 변동은 據想 이상A로 크고 또한 백분율 전체의 合이 100‘으로 되지않고 항血球와 微巴 球와의 區別을 하지 뭇하는사람이 많은事實도 지적했 다. 또한 천혀 틀린 細脫의 명청을 報告한 큰 명원，

대학뱅원도 있다는 것을 말하고 있다.

이란 현상을 불혜 적어도 正常λ、의 血球에 對해서鍵 7JiJ 點어1 판한 檢討는 상당히 중요한 것￡로 생각된다.

그러 으로 몇 가지 問題로 되 는 細脫의 훨품7Jí]點에 對해 서 記述해 불까 한다.

1) 뿜狀核球 (Band granulocyte)와 分葉核球 (Segm­

ented granulocyte)와의 區別 Schilling에 依하면 뿜 狀核球는 核의 形이 뽑狀으로 마다를 형성하는 것이고 형태는 여러가지 모양으로 되어있고 chromatin의 능 축도 강하마.

分葉核球는 核의 대부분이 분렬되어 있다. 그러냐완 천히 떨어 진 것 이 아니 고 가느마란 chromatin bridge 로 결합되어 있는 것을 말한마. 실제의 檢鏡下에서는 하나 하나의 血球에 chromatin bridge가 똑똑치 않 을 경우가 있다.

이 경우에 이것을 分葉核球로 보느냐， 아니면 뿜狀

2) 微모球 (Lymphocyte)와 單球 (Monocyte)의 區別 微巴球의 취급 방법에 對해선 小野等의 총설에 자세 하게 기술되어 있으나 血滾판계의 fffi에 나타나있는 빼 모球와 單球의 특칭을 表로 나타냈다.

表. 游 e 球와 單球의 특징

大微모球 球

形 態 | 윤꽉은 뚜렷하고 돌 | ^{불규칙한 운동형}

기상의 것은 전혀 | 위족 모양의 돌기 보이 지 않는다 를 나타낸마.

原形質

l

| 핵주위가 밝다 |핵주위는 밝지 않다

核

거칠고， 크고， 태부 l ^{불규칙한 형태}

분의 염색질 결절을 만들기 ι쉽다 Pe~oxi-I ι

、榮響 i 씀 ^{성 양 성}

大빼모球와 單球와의 감멸을 간단히 하기 위해선 小 宮이 치적한 바와같이 細뼈의 形態， 原形質의 色， 顆 fiL의 性狀， 核 梁色質에 注目하고， 특수 염색으로

Peroxidase 榮色을 실시 하여 캄별한다.

3) 異形 빼巴球 (Atypical lymphocyte)에 對해 서 異形 빼모球는 전 염 성 單核球뾰 (Inectious monon- ucleosis), 耳下線*， 水뾰， 麻修， 風參， 結核， 梅毒等 의 감염증 이외에 PAS, 빠素에 대한 allergy, 방사선 照、射， stress 等의 림 파 조직 에 대 한 자극에 짜라 末 稍血滅에 出現하는 흉球， 單球， 形質細뼈와 비 슷한 異 形의 빼모球를 말한다.

천염성 단핵쿠증혜에 出現하는 異形微모球는 Down-

ey씨 의 이 릎을 붙여 Downey cell이 라고 하며 이 細 뼈의 특징에 따라 Downey 1 型， II 型， m 型으로 區 分한다.

I 型: 비교적 單球와 비슷하고 核은 타원형， 賢형，

不整형이다.

염색질이 풍부하고 대개크게， 거찰은 結節을 만들자

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쉽다.

細뼈質에 초眼가 보이 는 것 이 많고 原形質의 色은大 챔모球가 單球보다 염기성이 특히 주변부에 彈하마.

또한 밟 E 球에 선 顆拉을 많이 볼수 있 다.

H 型: 形質細臨 (Plasmocyte)와 비 슷한 積圓形이 고，

核은 염색질의 농축이 I 型보다 5뭘하고 不整塊狀￡로 形質細뼈와 같은 車顧狀 (Cart

,

m 型: 精圓， 賢形A로 微巴룡球와 버슷한 빼若한 細 騙核網은 비교적 섬세한 核小體 1""3個를 가진다.

細脫質의 염기성이 彈하다.

同-효 例에선 ll""ffi 型의 것이 混在되어 있는 것이 보통이기 혜문에 I""ffi 型 어느것에 속하는 가를 결정 하는 것 은 그다지 중요하지 않다.

4) 흉球의 區別

急性 白血病 (Acute leukemia)환자의 末稍血滅中에 출현한 骨觀흥球냐 밟巴흉球나 또한 單흉球가 있는가 를 결정하는 것은 쉽지않다. 그렇기 뼈문에 標本의 많 은 시야를 판찰해서 異常細뼈 集團의 형태적 특칭을잡 는 것이 중요하다.

例를 들면 Auer body를 카진 흉球라던가 룡球로 移 行하고 있는 前骨歸球가 존재하는가 빼巴球나 單球의 형태걱 移行을 調좁하는 것이 필요하다. 이와 같이 판 찰해도 강벌이 곤란 할혜는 peroxidase 염색， sudan black B 염색， PAS 염색， 生體梁色等의 細뼈 化學的 檢죠나 位相差현미경， 건자현미경 檢호등이 실시되고 있다. 또한 骨體性 白血病이나 單球性 白血病 환자의 血淸을 갖고 生化學的 檢호를 하는것 도 감별에 도움을 줄수있다.

이러한 특수검사의 결과가 나오기 까지는 소속 불명 의 病的룡球로서 기록해 두어도 충분하므로 무리하게 분류할 必要는 없는 것￡로 생각된다.

이 상으로 血球計算이 나 血被細脫 鍵別을 標準化 하 기위한 시도로서 血波逢妹標本을 各 病院 檢홈室에 보 내서 그 檢좁結果를 집계해서 平均f直보마 差異가 큰경

우에는 측정 방법이나 세포의 감벌점에 있어서 재검로 하여 측정법이나 감벨의 기준을 획일화 해야하겠다.

그러므로 各 檢표室에 있어서는 이러한 調훌에 적극 적 A르 첨가해서 血짧檢호의 수준을 향상 시키는데에 노력략는 태도가 바람직 하다고 생각된다.

이것은 또한 血鼓檢효를 어느정도 까지의 標準化를 達成 하는가에 對한 握젠이 된다고 생 각펀다.

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