대한미용성형외과학회

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구자혜 약력

년 고려대학교 의과대학 졸업 2003

년 고려대학교 대학원 석사학위 취득 2008

년 고려의대 성형외과 전공의 수료 2009

현 고려대학교 구로병원 성형외과 임상강사

서 론 I.

최근 들어 지방줄기세포 시술이 연구자들 뿐만 아니라‘ ’ 미용성형을 주로 다루는 개업가에서도 이슈화되어 많은 관심이 쏠리고 있다 배양된 자가지방세포를 주입하는 방. 법도 개발되어 그 효과와 안정성이 입증되고^1,2최근 대한민 국 식약청이 이 방법의 사용을 최종 승인함으로써 제품화 에도 성공하는 등 자가지방세포의 주입을 통한 연부조직 증대 시술에 박차를 가하고 있다 실제로도 각종 개원가 등. 의 홈페이지에서는 지방유래세포를 이용한 시술 등을 언

급하며 줄기세포 지방이식 줄기세포 치료 라는 용어를‘ ’, ‘ ’ 사용하고 있다 그러나 현재 시술되고 있는 방법은 정확하. 게는 줄기세포 시술이라고 말할 수는 없다 이는 지방줄기. 세포에 대한 정확한 이해가 부족하기 때문이라 판단되며 이에 대한 정확한 이해는 지방유래세포 시술의 효과를 극 대화하고 합병증에 대한 적절한 대처를 하는데 중요한 역 할을 할 것으로 사료된다 지방줄기세포 시술방법은 세포. ‘ ’ 이식이라는 기초의학분야와 연관돼 있고 최근 개발된 방 법이기 때문에 대부분의 성형외과 전문의들이 전공의 시 절에는 이에 대한 지식을 습득할 기회가 거의 없었던 것이

임상의를 위한 지방유래세포의 이해

구자혜 ‧ 한승규

고려대학교 의과대학 성형외과학교실

Brief Review of Adipose Derived Cells

Ja Hea Gu, M.D., Seung-Kyu Han, M.D., Ph.D.

Department of Plastic Surgery, Korea University College of Medicine, Seoul, Korea

Recent works state that adipose tissue hosts cells which are able to display various differentiation potentials. Moreover, this adult tissue is abundant and easy to sample with no ethic limitation. In addition, the simple isolation procedures provide a clear advantage for tissue engineering. The adipose cells which are used for tissue engineering can be isolated from the stromal vascular fraction (SVF) obtained after adipose tissue digestion that may be used either freshly prepared or after culture. In this last case, cultured cells represent a particular cell subpopulation, which is restricted to the adherent cell fraction of SVF, and termed adipose derived stromal cells (ADSCs). However, there is a confusing inconsistency in the literature in the use of terms to describe multipotent precursor cells from adipose tissue stroma, such as processed lipoasporate cells, ADSCs, preadi- pocytes, adipose stoma vascular cell fraction, SVF cells, and others. In addition, characteristics of such cells have not clearly been defined and still controversial. The aim of this brief and com- prehensive review is to define terminologies for such cells, to describe preparation and isolation procedures for SVF cells and ADSCs, to summarize molecular characterization of SVF cells and ADSCs, and to discuss clinical cases using these cells.

ReceivedAugust 31, 2009 AcceptedSeptember 15, 2009

Address Correspondence : Seung-Kyu Han, M.D., Ph.D., Department of Plastic Surgery, Korea University Guro Hospital, 97 Guro-dong, Guro-gu, Seoul 152-703, Korea.

Tel: 82-2-2626-333 / Fax: 82-2-868-6698 / E-mail: [email protected] 대한미용성형외과학회지 제 15 권, 제 3 호

Vol. 15, No. 3, 192 - 198, 2009

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이에 본 논문에서는 세포치료 특히 개업가에서 관심이 많은 지방줄기세포 시술법의 이해를 돕고 성형외과 전문‘ ’ 의로서 시술 술기뿐만 아니라 각 시술법에 대한 정확한 이 해와 장단점 및 합병증에 대한 대처능력 등을 숙지하는데 도움이 되고자 계획되었다 지방유래세포 용어의 이해부. 터 세포의 획득 및 배양 임상적 이용까지 광범위한 내용이, 지만 간단히 요약하여 이 분야에 대한 연구경험이 없는 독 자들에게 특히 도움이 되고자 하였다.

지방유래 줄기세포 II.

의 이해 (Adipose derived stem cell)

가 줄기세포. (Stem cell)의 정의

지방유래 줄기세포의 용어를 이해하기 위해서는 먼저 줄기세포에 대한 정확한 정의를 이해해야 한다 줄기세포. 는 일생 동안 거의 무한히 자가재생을 할 수 있으면서 적절, 한 생체신호와 외부자극에 의해 다양한 종류의 여러 세포 로 분화할 수 있는 세포를 통칭한다 간혹 줄기세포와 혼동. 되어 사용되는 전구세포(precursor/progenitor cell)라는 용어가 있는데 이는 완전히 분화되기 전의 세포단계로서 분화할 세포의 종류가 미리 정해져 있고 자기와 똑 같은 세 포로 자가재생을 하지 못한다는 점에서 줄기세포와는 구 분된다.

줄기세포는 크게 세 가지로 분류할 수 있다 첫째는 분. 화전능화세포 혹은 만능세포, (totipotent cell, master cell) 로 태아를 비롯한 몸을 구성하는216개의 모든 세포로 분 화할 수 있는 능력을 보유하고 있는데 이는 수정란이 유일 하다 둘째는 분화다능세포. , (pluripotent cell)로 태아를 제 외한 몸의 모든 세포로 분화할 수 있는 세포로서 흔히 배 아 줄기세포(embryonal stem cell)를 일컫는다 셋째는 성. 숙한 조직과 기관 속에 들어있는 다기능줄기세포 (multi- 이다 다기능줄기세포는 몇 개의 세포형태 potent stem cell) .

로 분화할 수 있으며 흔히 성체줄기세포(adult stem cell)를 일컫는다.

만능줄기세포는 세포 하나하나가 한 명의 태아가 될 수 있고 배아줄기세포의 경우 짧은 배아기에만 존재하고 태, 아를 이루는 세포들의 일부를 희생해야 하기 때문에 윤리 적인 쟁점을 일으킬 수 있어 현재는 성체줄기세포만이 임 상적 이용이 가능하다 성체줄기세포는 골수 뇌 말초혈액. , , , 혈관 근육 피부 간 지방 탯줄 췌장 망막 각막 척수와 소, , , , , , , , , 화기관 등 거의 모든 조직에 존재하고 있으며 자기 자신의 것을 사용할 수 있고 성인에서도 얻을 수 있어 임상적인 유

용성이 크다 하겠다.

나 줄기세포 공여부로서의 지방조직.

앞서 언급했듯 우리 몸의 거의 모든 조직에서 줄기세포 를 얻을 수는 있지만^3-11골수유래 줄기세포가 가장 초기부 터 널리 연구되어 왔다.^12,13그러나 최근에 성형외과를 비롯 한 많은 영역에서는 세포획득의 용이성 때문에 지방조직 유래 줄기세포에 대한 연구가 활발히 되고 있다 지방조직. 은 지방세포뿐만 아니라 지방전구세포 섬유모세포 혈관, , 내피세포 중배엽 전구세포 및 줄기세포들을 포함하는 기, 질혈관분획세포 (Stromal Vascular Fraction cells, SVF cells) 들이 혼합되어 있는 조직이다.

지방조직 줄기세포의 경우 골수줄기세포와 유사하게 중 배엽성 다중계열 분화능력을 보이며^14,15계열특이 유도인 자를 이용하면 지방세포계열 골발생계열 연골발생계열, , , 근발생계열로 분화될 수 있다고 보고되고 있다.^13,16

다 지방유래 줄기세포의 명칭.

지방유래세포의 경우 비슷한 세포를 통칭하면서도 최소 개 이상의 이름으로 불리고 있다

13 (Table I).^15,17-23또한 지 방유래세포의 특징도 논문마다 다르게 기술되고 있다.¹⁵지 방유래세포에 대한 연구결과가 수 백 개의 논문에서 발표 된 바 있는데 서로 다른 실험실에서 다른 방식으로 지방유 래세포의 분리와 배양을 하다 보니 같은 지방유래세포라 도 연구자마다 사용하는 세포가 조금씩 다를 수밖에 없기 때문이다.

이에 명칭에 대한 뚜렷한 원칙이 없어2004 9년 월 피츠버

Table I. A Variety and Inconsistency of Terms Processed lipoaspirate (PLA) cell

Stromal vascular fraction (SVF) cell

Adipose (tissue)-derived stromal cell (ADSC, ASC) Adipose (tissue)-derived adherent stromal cell (ADSC, ASC) Adipose (tissue)-derived stem cell (ADSC, ASC)

Adipose (tissue)-derived precursor cells Adipose (tissue)-derived stromal progenitor cell Adipose (tissue)-derived mesenchymal progenitor cell Adipose (tissue)-derived mesenchymal stem cell (ATMSC) Vascular stem cell (VSC)

Vascular precursor cell

Adipocyte precursor cell

Preadipocyte

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그에서 열린 제 차2 IFATS (International Fat applied Techno- logySociety)학회에서 지방조직에서 분리한 세포 중 세포배 양 과정에서 배양용기 바닥에 접착된 세포 (adherentcells)를 지방유래 줄기세포(adipose derived stem cell)라 명명하기 로 그 학회를 주도하는 연구자들끼리 약속하였다.¹²그러나 단지 접착되었다는 사실만으로 줄기세포라고 명명하는 것 은 무리한 논리이므로 많은 다른 연구자들은 지방줄기세‘ 포 라는 용어를 사용하는데 동의를 하지 않는다 실례로’ .

년 세포치료국제협회

2006 (International Society for Cellular 의 중간엽줄기세포위원회

Therapy) (Mesenchymal and Tissue 는 중간엽줄기세포가 되기 위한 최소 Stem Cell Committee)

한의 가지 조건을 새롭게 제안하였다4 .²³첫째는 표준 배양 환경에서 배양용기 바닥에 접착되어야 할 것 둘째는 최소, 한 골발생계열 지방세포계열 연골발생계열로 분화되는, , 것을 확인할 것 셋째는, CD73, CD90, CD105에는 양성일 것 넷째는, CD 14, CD116, CD 34, CD 45, CD19, CD79 ,α 에는 음성이어야 할 것 등이다 이 네 가지

HLA-DR, C-kit .

사항을 모두 갖췄다고 완벽히 줄기세포라고 할 수는 없으 나IFATS의 정의보다는 훨씬 합리적인 기준이라고 판단 된다.

지방조직 내 실제 줄기세포는 III.

얼마나 존재하는가?

지방조직을 이루고 있는 세포 중 지방세포를 제외한 지 방유래세포에 대한 명칭이 최근 1 - 년 전부터는 기질혈관2 분획세포와 지방유래 기질세포 (Adipose Derived Stromal 로 분리되어 사용되고 있다 기질혈관분획세

Cells, ADSCs) .

포는 최소한의 과정을 거친 세포로 교원질분해효소 (col- 를 이용하여 분리한 즉시의 세포이며 지방유래 기 lagenase)

질세포는 분리된 세포 중 배양과정에서 배양용기 바닥에 접착된 세포로 이후의 다양한 모든 단계의 세포들은 모두 지방유래 기질세포라고 일컫는다.

기질혈관분획세포의 경우는 기질연관 표지자나 중배엽 기질연관 표지자가 지방유래 기질세포에 비해 낮은데 이 는 배양을 많이 할수록 이러한 기질연관 표지자가 증가하 기 때문이다 (Table II).¹⁵

정리하면 지방조직에 존재하는 세포는 결국 지방세포 와 기질혈관분획세포로 나뉘며 기질혈관분획세포는 배양 과정을 통하여 접착된 세포와 그렇지 않은 세포로 나뉘게 된다 접착된 세포는 지방유래 기질세포를 일컬으며 여러.

Table II. Phenotypic Characterization of Human Adipose-Derived Cells at Progressive Stages of Isolation and Passage (cited from a paper by JB Mitchell et al.)

Antigen SVF (n = 7) P0 (n = 7) P1 (n = 7) P2 (n = 7) P3 (n = 7) P4 (n = 5)

CD13 37.0 ± 0.2 79.5 ± 9.7 93.0 ± 4.1 95.5 ± 2.3 95.9 ± 2.6 96.8 ± 2.3

CD29 47.7 ± 13.3 71.1 ± 30.3 77.1 ± 23.6 82.1 ± 21.2 87.4 ± 18.8 94.7 ± 2.05

CD31 21.8 ± 10.8 24.4 ± 17.4 7.9 ± 6.0 7.2 ± 5.4 20.8 ± 14.5 21.0 ± 19.9

CD34 60.0 ± 11.5 59.2 ± 25.4 21.5 ± 15.1 5.4 ± 6.3 2.0 ± 2.0 1.7 ± 1.0

CD44 63.8 ± 14.5 84.1 ± 8.2 93.4 ± 2.1 95.7 ± 1.8 96.9 ± 3.2 98.1 ± 1.0

CD49 35.6 ± 18.6 50.2 ± 28.3 58.8 ± 29.5 64.0 ± 29.1 53.4 ± 29.4 56.4 ± 29.3

CD63 42.0 ± 7.8 66.1 ± 21.1 73.6 ± 10.6 68.5 ± 21.1 79.0 ± 21.9 66.1 ± 25.1

CD73 25.0 ± 6.2 74.7 ± 10.2 85.3 ± 37.2 89.3 ± 10.9 93.9 ± 5.5 94.2 ± 4.2

CD90 54.8 ± 10.9 76.6 ± 9.6 90.4 ± 3.0 94.8 ± 1.8 96.2 ± 1.95 97.2 ± 1.0

CD105 4.9 ± 3.5 42.6 ± 17.7 52.8 ± 27.4 61.6 ± 16.6 68.9 ± 16.1 70.5 ± 12.1

CD144 3.5 ± 1.9 2.7 ± 1.7 7.9 ± 11.6 4.6 ± 5.1 2.3 ± 0.7 1.8 ± 0.3

CD146 21.4 ± 9.3 29.4 ± 10.8 19.8 ± 15.9 10.8 ± 4.5 5.1 ± 1.5 4.8 ± 2.8

CD166 0.8 ± 0.8 21.7 ± 18.6 48.5 ± 23.5 62.8 ± 21.4 64.1 ± 30.1 69.2 ± 17.4

ABCG 31.1 ± 15.7 21.5 ± 13.0 35.5 ± 7.6 19.1 ± 2.8 22.1 ± 12.3 13.9 ± 5.4

ALDH 14.3 ± 3 71.6 ± 15.6 79.8 ± 5.1 74.2 ± 3.3 84.6 ± 4.6 71.6 ± 4.8

VEGFr-2 2.0 ± 1.6 2.8 ± 3.3 10.2 ± 13.6 8.9 ± 5.2 2.4 ± 1.9 1.4 ± 0.2

von Willebrand 5.8 ± 1.5 4.6 ± 1.8 6.8 ± 6.2 6.3 ± 6.2 2.5 ± 1.3 2.0 ± 0.4

P, passage; SVF, stromal vascular fraction.

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간엽줄기세포 에 해당하고 나머지는 여러 종류의 전구세) 포 섬유모세포 성숙한 세포 등으로 이루어져 있는 것이, , 다 (Fig. 1).¹³구체적으로는 기질혈관분획세포 중 접착하 는 세포의 비율은 0.33 -1.4%정도이며¹⁵이 중 줄기세포 연관 표지자들에 양성으로 나타나는 세포의 비율은 1%

미만이다 결과적으로 기질혈관분획세포 내의 줄기세포. 의 비율은0.01%미만이 되게 된다 따라서 이러한 세포들. 을 사용하면서 줄기세포시술 이라고 명명하는 것은 무리‘ ’ 가 있다고 하겠다 지방유래세포들을 치료에 적용할 의료. 인들은 지방세포 기질혈관분획세포 지방유래 기질세포, , , 줄기세포의 용어를 구분할 줄 알아야 한다고 사료된다.

세포획득방법 IV.

연구실마다 차이는 있으나 세포획득 원리 자체는 동일 하므로 저자들의 연구실에서 사용하는 방법을 소개하고자 한다.^16,24

가 기질혈관분획세포 획득.

하복부 등 지방을 얻을 수 있는 부위에서 통상적인 방법 인 지방세포 흡입법으로 지방조직을 얻고 50mL tube에 획 득한 지방조직을 생리식염수로 회 세척한다 세척된 지방2 . 조직을 IA형의 교원질분해효소와 phosphatate buffered saline(PBS; Gibco, Carlsbad, USA)가 혼합된 용액으로(3.5 mg/10mL) 30분간CO2항온 배양(incubation)시켜 지방 조직에서 세포들을 분리해 낸다 분리된 세포들이 포함된.

용액을 100μm의 필터를 통해 여과하여 부유물을 제거하 고 필터를 통해 걸러진 용액을 450 × 에서g 17분간 원심 분 리하여 개의 층으로 분리하는데 분리된 각 층은 위에서4 , 첫 번째 지방조직층 두 번째 부유물층 세 번째 지방유래세, , 포층 가장 아래의 적혈구층 등이다 상층부의 두 개의 층을, . 제거한 후 사염화탄소를 투여 하고, 10분 간 실온에 방치한 후, 450 × 에서g 17분간 다시 원심 분리하여 적혈구 침사층 을 제거하고 기질혈관분획세포를 분리한다.

이러한 방법으로 세포를 획득한 경우Ashjian et al.등은²⁵ 1mL의 흡입된 지방에서1.2 × 10⁶개의 기질혈관분획세포 를Suga et al.등은²⁶1gm의 지방조직에서1.0 × 10⁶개의 기 질혈관분획세포를 얻었다고 보고하였다 저자들의 연구에. 따르면 1gm당6.3 × 10⁴- 2.1 × 10⁵개의 기질혈관분획세 포의 획득이 가능하였다 (Fig. 2).

나 지방유래 기질세포의 배양.

앞서 분리한 기질혈관분획세포를 10% 우태혈청(fetal bovine serum, Hyclone, Logan, UT, USA)이포함된Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium/Ham’s F-12 (DMEM/F-12, Gibco 에서 시간에서 시간 배양 BRL, Gaitherburg, MD, USA) 24 72

한다 배양 후 다른 비접착성 세포를 제거하기 위해서 플라. 스크를PBS로 세척한다 접착된 세포 자체나 이들을 증식. 시킴으로써 지방유래 기질세포를 얻는다.

이렇게 증식된 지방유래 기질세포는 임상적 이용을 위 하여 지방세포로의 분화도 가능하다 즉. DMEM/Ham’s

에 우태혈청

F-12 3% , biotin (33 mol/L), pantothenateμ (17 mol/L), IBMX

μ (3-isobutyl-1-methylxanthine),인간재조합

Adipose tissue cells

Adipocytes Stromal vascular fraction cells

Adherent cells

(Adipose derived stromal cells) Non-adherent cells

Adipose derived stem

(mesenchymal) cells

recursor cells Mature cells

Fibroblasts Vascular smooth muscle cells

Etc

Adipose-derived hematopoietic

stem cells

Blood derived

cell

Fig. 1. Cells in adipose tissue.

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형인슐린과 indomethacin (0.2mmol/L)이 포함된 분화배 양액으로 지방세포로의 분화를 유도한다 분화된 지방세. 포는 광학현미경하에서 섬유모세포와 비슷한 형태의 세포 로부터 지방공포(lipid vacuole)가 포함된 원주세포로 형태 학적인 변화를 보이게 된다.

지방유래세포의 임상적 이용 V.

지방조직의 기질혈관분획세포와 지방유래 기질세포 이 식을 이용한 저자들의 임상경험을 소개하고자 한다.

Fig. 2. Difference in amounts of isolated SVF cells according to patients. (Left) Adipose tissue harvested from four patients. (Right) After isolation of SVF cells using the method described in this paper and Calcein A stain which indicates viable cells. Sixty-three thousand (Right, above) to 2.1 × 10⁵ (Right, below) SVF cells per gm of adipose tissue were obtained.

Fig. 3. Clinical application of SVF cell autograft for wound coverage in a patient with squamous cell carcinoma on the left thenar area. (Above, left) After cancer resection, muscle, nerve, tendon and bone were exposed. (Above, right) A dressing after the SVF cell graft on soft tissue defect site. (Below, left) Postoperative appearance on the 21st day after the SVF cell graft.

(Below, right) Postoperative appearance after split thickness skin graft.

197

외상이나 감염 종양수술 후에 생긴 피부와 연부조직의, 결손은 국소피판 유리피판 등의 다양한 피판술을 이용하, 여 재건되어 왔다 저자들은 피판의 양과 이동범위의 한계. , 전신상태가 큰 수술을 하기에는 힘든 경우 공여부의 손실, 등 피판의 단점을 극복하기 위한 창상피복의 방법으로 배 양하지 않은 기질혈관분획세포를 이용하여 만족스러운 결 과를 얻었다.²⁷이는 앞서 기술한 방법으로 분리한 지방조 직의 기질혈관분획세포를 창상에 도포하는 방법으로 시술 방법이 간단하고 공여부의 희생이 적으며 배양을 하지 않 으므로 배양기간을 절약하고 식약청의 허가가 필요하지 않다는 장점이 있어 창상피복을 요하는 임상적인 상황에 폭넓게 적용할 수 있을 것으로 보인다 (Fig. 3, 4).¹⁶

나 연부조직증대에의 이용.

앞서 기술한 것과 같이 배양된 지방유래 기질세포에서

분화시킨 자가지방세포를 주입하는 방법이 개발되어 아디 포셀 (Adipocell 이라는 상품명으로 제품화 되었다) .^1,2저 자들은 이렇게 획득한 지방세포들이 인체 내 주입 후 생착 하고 성숙하여 연부조직보충효과를 나타낼 수 있음을 확 인하였다 (Fig. 5).²⁴주입되는 지방세포는 자가조직을 이용 하므로 환자에게 심리적 안정감을 주며 수술방법이 간단 하다는 장점이 있지만 필러나 지방이식과 마찬가지로 시 술자의 기술에 따라 결과가 달라질 수 있다는 점은 인식하 여야 한다.

향후 세포분화에 대한 정확한 기전의 이해 및 지방유래세 포의 동정 분리나 정화 등에 대한 연구결과가 축적되면 이, 분야의 임상적 이용이 획기적으로 증가될 것으로 기대된다.

요 약 VI.

1. 지방조직을 이루고 있는 세포 중 지방세포를 제외한

Fig. 5. A patient was treated for lower eyelid correction with injection of in vitro differentiated adipocytes, which had been originated from cultured ADSCs. (Left) Preoperative view. (Right) One year after treatment.

Fig. 4. Clinical application of SVF cell autograft for wound coverage in diabetic foot ulcer patient. (Left) Diabetic foot ulcer on the right great toe. (Center) Immediate post-debridement appearance. (Right) After treatment with the SVF cell graft, the wound was completely closed.

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지방유래세포에 대한 명칭이 최근 1 - 년 전부터는2 기질혈관분획세포 (Stromal Vascular Fraction Cells,

와 지방유래 기질세포

SVF cells) (Adipose Derived 로 분리되어 사용되고 있다 기 Stromal Cells, ADSCs) . 질혈관분획세포는 최소한의 과정을 거친 세포로 교 원질분해효소를 이용하여 분리한 즉시의 세포이며, 지방유래 기질세포는 분리된 세포 중 배양과정에서 배양용기 바닥에 접착된 세포로 이후의 다양한 모든 단계의 세포들은 모두 지방유래 기질세포라고 일컫 는다.

2. 기질혈관분획세포 중0.01%미만이 지방유래 줄기세 포 중간엽줄기세포 에 해당하고 나머지는 전구세포( ) , 섬유모세포 성숙한 세포 등으로 이루어져 있다, . 3. 지방유래세포는 창상피복과 연부조직증대 등의 미용

적 목적으로 사용되어 좋은 결과를 보이고 있어 앞으 로 임상에서 다양한 분야에 적용될 것으로 기대된다.

REFERENCES

1. Cho SW, Kim I, Kim SH, Rhie JW, Choi CY, Kim BS:

Enhancement of adipose tissue formation by implantation of adipogenic-differntiated preadipocytes. Biochem Biophys

Res Commun 345: 588, 2006

2. Kim MH, Kim I, Kim SH, Jung MK, Han S, Lee JE, Nam JS, Lee SK, Bang SI: Cryopreserved human adipogenic-dif- ferentiated pre-adipocytes: a potential new source for adi- pose tissue regeneration. Cryotherapy 9: 468, 2007 3. Jiang Y, Vaessen B, Lenvik T.: Multipotent progenitor cells

can be isolated from postnatal murine bone marrow, muscle and brain. Exp Hematol 30: 896, 2002

4. Ferraris C, Chevalier G, Favier B: Adult corneal epithelium basal cells possess the capacity to activate epidermal, pilose- baceous and sweat gland genetic programs in response to embryonic dermal stimuli. Development 127: 5487, 2000 5. Jones PH, Harpers S, Watt FM: Stem cell patterning and fate

in human epidermis. Cell 80: 83, 1995

6. Fuchs E, Segre JA : A new lease on life. Cell 100: 143, 2000 7. Gawronska-Kozak B: Regeneration in the ears of im- munodeficient mice: Identification and lineage analysis of mesenchymal stem cells. Tissue Eng 10: 1251, 2004 8. Gage FH, Ray J, Fisher LJ: Isolation, characterization, and

use of stem cells from the CNS. Annu Neurosci 18: 159, 1995 9. Lechner A, Habener JF: Stem/progenitor cells derived from adult tissues: Potentisl for the treatment of diabetes mellitus. AM J Physiol Endocrinol Metab 284: E259, 2003

10. Jankowski RJ, Deasy BM, Huard J: Muscle-derived stem cells.

Gene Ther 9: 642, 2002

11. Cao B, Zheng B, Jankowski RJ: Muscle stem cells differentiate into haematopoietic lineages but retain myogenic potential. Nat

Cell Biol 5: 640, 2003

12. Mitchell JB, Mcintosh K, Zvonic S, Garrett S, Floyd E, Kloster A, Halvorsen YD, Storms RW, Goh B, Kilroy G, Wu X, Gimble JM: Immunophenotype of human adipose-derived cells: Temporal changes in stromal-associated and stem cell-associated markers. Stem Cells 24, 376, 2006

13. Fraser JK, Wulur I, Alfonso Z, Hedrick MH: Fat tissue: an underappreciated source of stem cells for biotechnology. Trends

14. Noël D, Caton D, Roche S, Bony C, Lehmann S, Casteilla L, Jorgensen C, Cousin B: Cell specific differences between human adipose-derived and mesenchymal-stromal cells despite similar differentiation potentials. Experimental Cell Research 314:

1575, 2008

15. Nakagami H, Morishita R, Maeda K, Kikuchi Y, Ogihara T, Kaneda Y: Adipose tissue-derived stromal cells as a novel option for regenerative cell therapy. J Atheroscler Thromb 13: 77, 2006

16. Seo DR, Han SK, Chun KW, Kim WK: Clinical application of adipose derived stromal cell autograft for wound coverage. J

17. Hauner H, Entenmann G, Wabitsch M: Promoting effect of glucocorticoids on the differentiation of human adipocyte precursor cells cultured in a chemically defined medium. J Clin

18. Gimble JM, Guilak F: Differentiation potential of adipose derived adult stem (ADAS) cells. Curr Top Dev Biol 58: 137, 2003 19. Safford KM, Hicok KC, Safford SD: Neurogenic differentiation of murine and human adipose-derived adult stromal cells. Biochem Biophys Res Commun 294: 371, 2002 20. Katz AJ, Tholpady A, Tholpady SS: Cell surface and

transcriptional characterization of human adipose-derived adherent stromal (hADAS) cells. Stem Cells 23: 412, 2005 21. Zuk PA, Zuh M, Mizuno H: Multilineage cells from human

adipose tissue: Implications for cell-based therapies. Tissue Eng 7: 211, 2001

22. Miranvile A, Heeschen C, Sengenes C: Improvement of postnatal neovascularization by human adipose tissue-derived stem cells. Circulation 110: 349, 2004

23. Schäffler A, Büchler C: Concise review: Adipose tissue-derived stromal cells-basic and clinical implications for novel cell-based therapies. Stem Cells 25: 818, 2007

24. Han SK, Kim SH, Lim HW, Kim WK: A pilot clinical study on the use of differentiated adipocyte injection for soft tissue augmentation. J Korean Soc Aesthetic Plast Surg 14: 15, 2008 25. Ashjian PH, Ugarte DA, Katz AJ, Hedrick MH: Lipoplasty :

From body contouring to tissue engineering. Aesthetic Surg J 22:

121, 2002

26. Suga H, Matsumoto D, Inoue K, et al.: Numerical measurement of viable and nonviable adipocytes and other cellular components in aspirated fat tissue. Plast Reconstr Surg 122: 103, 2002

27. Ugarte DA, Ashjian PH, Elbarbary A, Hedrick MH: Future of

fat as raw material for tissue regeneration. Ann Plast Surg 50: 215,

2003