사상체질의학회지
]. of Sasang Co띠t.Med.
Vol. 13. No 3. 2001
少樓A 훌훌香正훌훌散의 抗 Allergy 作用
안보국* . 송정모*
I Abstract
I
Anti-allergy Action of Soeumin Kwakhyangjeon
짧isan
Ahn So-kook' Song Jeong-mo
Oept. of Sasang Const 삐삐lal Medicine, College 이 Orient 허 M잉icine, Wi∞suk Univ.
까Ie pw αJSe of this re앞arch was to investigate the effeas of Kt 째byanfietm, 짧san (
찌S) on the anti-allergic aaion. In
the present study, we examined the effea of K]S on type I and type IV allergic reaction. K]S inhibited the systemic
anaphylaxis induced by compound 48/80 뻐d platelet aaivating faaor (PAF>, and inhibited the 야sSlve cutaneous
anaphylaxis (PCA) induced by anti 강inicrophenyJ (DNP)-IgE and DNP-hwnan serum albumin (HSA) in viw. In addition,
K]S dose 깅ependencly inhibited the release of histamine from peritoneal mast cells in rat. Also, K]S inhibited the delayed
type hypersensitivity (DTH) induced by SRBC and the contaa dermaritis induced by dinitrofluorobenzene (DNFB). K]S
inhibited the proliferation of splenocyres, the subpopuJation of B220+ cells and CD4+CD8'(Th) cells in splen αytes and the
prl여uction of 1{ -interferon in serum and splenocyres 까lese fin 뼈19s suggest that K]S prevented the type I allergy by the
inhibition of histamine release from mast cells and the type IV allergy by the inhibition of 1{ -interferon production and B
lymphocyres subpop 띠값Ion. 끼lese res 띠 ts in 이cate thar K]S may be useful for the prevention 뻐d treatment of type I and
type IV allergy related disease.
Key words : Kw 짜hyangj ∞nggisan(K]S), I allergy, IV allergy, prevention
I. 績옳
Allergy 질환이 알려지기 시작한 것은 기원전 l 세
기부터지만 크게 문제되기 시작한 것은 산업의 발 달로 각종 물질이 우리의 생활환경을 오염시키연서 부터이다 . 최근 우리나라에서도 allergy 질환이 중가 하는 추세에 있으며 발병 연령도 매우 낮아지고 있 다
I)
한의학에서는 ‘앉正桂%’라는 치료방법이 연역 및
allergy 질환 치료에 대한 이론적 근거가 되고 있으
며2), 최근 들어서는 체질과의 관련성올 중요하게 생 각하는 경향이 높아지고 있다. 사상의학에서는 각 체질의 병중올 表病과 뚫病으로 분류함으로써 체질 에 따른 짧服의 상호관계를 정상화시켜 균형올 회 복하연 연역계의 다양성이 충분히 발휘되어 항병력 을 중강시키고 病%에 대항할 수 있다 하여 연역과
allergy 질환에 대한 치료의 근거를 제시하고 있다3)
少陰A 題香正氣散은 李濟馬씨의 r 東醫壽世保
우석대화교 한의과대학 사상채질과 교신저자 .송정모 주소)
전주시 완산구 중화산동 2, ’ 우석대학교 부속한방병원 천화 >063-22 α8600 E-Mail)soo-dang@ 따m 때I.nec
- 사상체짙의학회지 쩌 13 권 t3 효때1 -
元」 新定 少陰 A病 應用要藥 二十四方에 수록되어 있으며 , 興信’
)
의 r 古今醫훌」 에 기재된 題香正氣散
에서 結홉 터Jf 白g 뺨을 去하고 桂皮 乾훌 益
智t 을 추가하여 少陰A 뽑受熱表熱病의 太陽病 大 陽↑白寒, 흥狂初證, 少陰A 봅受寒훌寒病의 太陰病 下利淸-짧 둥의 중에 웅용된 처방이다6,7)
따라서 임상활용에 있어서 外感風寒 內傷1t'
六짧 頭痛 !흉i효 8힘問 JJM 服 被敵 야훌I£f::'ffl!:
t훌 f훌짧L 熾珍 中風初證 둥에 적용하는 처방으로 서 그 활용도가 매우 광범위하다
(,.10)
少陰人 題香正氣散은 또한 少陰A의 表病과 짧病 에 두루 사용하여 升陽益氣와 훌陰降氣의 작용을 동시에 발휘하연서 홈훌服의 불균형올 조절해주는 치 료기전으로 볼 때 면역조절기능이 있을 것으로 추 측활 수 있으며 , ’짧珍, n 敵 동 allergy 질환에도 사용 되어 왔다는 점을 고려할 때 연역조절기능 실조로 인한 질환과 각종 allergy 질환에 광범위하게 사용할 수 있을 것으로 사료된다.
최근 한의학계에서는 약재의 單味 혹은 복합처 방이 연역 및 allergy 에 미치는 영향에 대한 실험적 연구가 많이 이루어지고 있는데 II 찌), 사상처방올 이용한 연구는 朴
3)
의 싫根解 I1Ilt 쩌, 金
3(;)
의 浩-心連
子揚과 淸R벼&경fiH 易, 1갚37)
의 熱多겠少陽 , 徐’
8)
의 少
陽A 忍 顧地샘 皮1싫- 둥으로 연역작용올 살펴 본 것틀이 보고되어 있으나 少陰A 處方에 대한 것은 없었다.
때ergy 는 GeU 과 Coombs39) 에 의해 4 가지 형으로 분류되는데 , 제 I, II 및 III 형은 항원과 체액성 항체 의 상호작용에 기인된 즉시형 반웅이며 , 제 VI 형은 지연형 반웅으로 주로 감작 T 임파구에 의해 주도 되는 반웅이다쩌
)
따라서 저자는 少陰A 짧香正氣散의 allergy 에 대 한 작용을 관찰하고자 가장 흔한 제 I 형 및 IV 형 에 대한 실험을 실시한 바, 유의한 결과가 있었기에 보고하는 바이다.
II. 를뚫 材혐 및 方法
1. 材料
1 ) 빠物
본 실험에 사용한 mouse 는 I α계 및 BALB/c 계 수
컷 20 土2g 올, rat 는 SD 계 수컷 200 土20g 올 대한실험동 물에서 구입하여 , 온도 20 土2t:, 습도 50:1:5%, darkl
light 12 시간의 조건하에서 1 주일 이상 실험실에 적
웅시킨 후 사용하였으며 , 고형사료와 물을 자유롭게 섭취하도록 하였다.
2) 밟쫓 및 짧具
실험에 사용한 시 약은 Dulbecco ’s m 빼ed Eagle ’s
m어뻐배DME), penicillin-streptomycin, Dulbecco ’s phos-
phate buffered saline{DPBS-A), compound 48/80, anti-
dinitrophenyl(DNP)-IgE 뻐【il아xly, dinitrophenyl-human
serum albulin(DNP-HSA), platelet activating factor(PAF),
metrizarnide, dinitroll ‘lorobenzene(DNFB) 는 Sigma Co"
RPMI 1640, fetal bovine serum(FBS), trypsin 은 Gibeo
Co., mouse 1{-IFN immunoassay kit, mouse
interferon-2(1L-2) immunoassay kit, mouse ι-4
immunoassay kit 는 R&D Co., PE-conjugated anti-CD4,
FITC-conjugated anti-CDS anti 뼈y, PE-conjugated
anti-B220, FITC-conjugated anti- π1Y 1 mAbs 는 Dai 띠ppon
seiyaku Co. 동을 사용하였으며 , 기타 시약은 cell
culture 用 및 I급 시약올 사용하였다. 사용기구는
띠띠re llask(Nunc), multi-well plate(96-weU, 24-weU,
Costar), Microplate -Reader (Dynatech MR5000), C02
incubacor{Vision scientific Co.), inverted microscope
(Nikon Co.), freeze dry apparatUS (lisin Co.), flow
cycometer (Coulter EPICS- XL), speccrofluorometei\Kotron
Co.) 等올 用하였다.
2. 方法
1) 홉홉의 빼빼
본 실험에 사용한 少陰A 禮香lE 散의 구성은
r 냈뽑꿇世保元4)J 에 준하였으며 , 사용한 약재들은
우석대학교 부속 한방병원에서 구입하여 정선하여 사용하였고 그 내용과 분량은 다음과 같다.
Prescnption of Soeumin Kwakhyangjeonggisan
.¥T 生뺏名 Ó„[:!i!:(g)
if 香 Agasrac s Herba 6
쫓 Perillae Hcrba 4
훌 ilt ArracrylÅìis Ç…Uzoma 2
白 끼t ArracrylÅìis Rhizoma Å(ba 2
半 휠 Pinelliac Tuber 2
陳 皮 A·`lIlIrii Nobilis PeriµLplUm 2
‘협 皮 AÉant²È Immarri Pericarpium 2
大때皮 Arecae PericaÆium 2
It 皮 Gnnamomi Cortex 2
훌 Zingiberis Rhizoma 2
益쩔’仁 Alpiniae FruCtus 2
tt 월 Glycyrrhizae Radix 2
깅i 헬 Zingiberis Rhizoma 4
大 짧 ¬zyphi FruCtus 2
ιi‘f:i jt 36
- 안보국 외 1 : 少陰A 훌홉正 aM: 의 tit Allergy ft 用-
상기 처방 2 첩 분량을 증류수 2,α>Om! 로 2회 가열 추출한 후, 여과하여 여액올 rotary evapotator 로 농축
한 다음, freeze dryer 로 동결건조하여 분말 14.8g (수
득율 20.6%) 을 얻어 ( 以 f KJS 라 칭합), 동물실험 시 에는 생리식염수에 용해시켜 사용하였다.
2) Compound 얘l80 에 의환 anaphvlatic shock
생쥐 (lCR.; 계) 1군올 10 마리로 하여 대조군에는 생 리식염수만올 실험군에는 KJS 500mg/kg 및 1,000
mg/kg 을 경구 및 복강으로 투여하고 l시간 후에
Comp ωnd 48/80 8mg/kg 올 복강투여한 다음 l 시간
동안 anaphylatic shock 에 의해 치사되는 생쥐의 수를 관찰하였다 41)
또한 반복투여에 의한 KJS 의 영향올 알아보기 위 해 KJS 500m 아cg 을 l 일 l 회씩 7 일간 경구투여한 후 동일한 실험을 실시하여 치사되는 생쥐의 수를 관 찰하였다 . KJS 연속 투여에 의한 영향을 관찰하기 위해서 KJS 500mg/kg 올 경구로 l 일 l 회씩 7 일간 경 구투여하고, 동일한 실험을 실시하여 치사되는 생쥐 의 수를 관찰하였다
3) PAF 메 의한 anaphvlatic shock
생쥐 (I α계 ) 1 군을 10 마리로 하여 Ha 의 방법42) 에
의해 실시하였다 . 대조군에는 생리식염수만을 실험 군에는 KJS 500m, 아cg 및 I,OOOm 해cg 을 경구 및 복강
으로 투여하고 l시간 후에 platelet activating
factor(PAF) 25 μgJ찌를 0.1 찌 꼬리 정맥에 주사한 다
음 l 시간 동안 anaphylatic shock 에 의해 치사되는 생 쥐의 수를 관찰하였다 .
4) Anti-DNP-lgE 와 DNP-HSA 에 의한 PCA 띔
흰쥐 5 마리를 l 군으로 하여 혈을 제거한 후, 동에
anti-DNP-IgE 0.5 μg(50!d) 을 피하주사하였다 . 48 시간
후에 대조군에는 생리식염수를, 실험군에는 KJS 500m 밍kg 을 경구투여한 다음 l시간 후에
dinitrophenyl- human serum aIbulin(DNP-HSA) Img 과
4% evans blue 용액 1 : 1 혼합액 100 뼈를 꼬리 정맥
에 주사하였다 30 분 후에 청색반점이 나타난 흰쥐 의 퉁 피부를 박리하여 IN-KOH 1m! 로 24 시간 동안 색소를 추출하였다. 추출액을 5N-H}P04 5m! 로 중화 하고 acetone 3m! 를 가하여 2,500 φm 에서 10 분간 원 심분리하였다. 상충액을 분리하여 620nm 에서 홉광 도를 측정하였다
4})
5) 복강 mast cell 의 분리
Kanemoto 둥얘
)
의 방법에 준하여 흰쥐 복강 mast cell 을 분리하였다 . 흰쥐를 ether 로 마취시킨 후 실온
에서 PMC buffer (PBS 100m!, FBS 10m!, Heparin
10,000 뻐t 1찌에 3차 중류수를 가해 1,000 찌로 조
제, pH 7.0) 30m! 를 복강에 주입하고 90 초간 복벽을 가볍게 마사지한 다음 복강액플 채취하여 원심분리
0,500 rpm, 5분) 하였다. 15m! tube 에 22.5% merrizamide
(4 "C) 2m! 를 넣고 Yurt 둥의 방법4) 에 따라 그 위에
DME 배지로 희석한 세포부유액을 서서히 가하고
1,3 ω rpm 에서 10 분간 원심분리 하였다 세포를
DME 배지로 세척한 후 2 x 105 cells/. 찌로 조제하여 실험에 사용하였다.
6) 셰포배양액 환리
세포배양액은 분리한 mast cell 을 2 x 10’ cells/m! 로 조제하여 ep 야ndorf tube 에 1 매씩 넣고, C02-incubator 에서 10 분간 배양한 후 PMC buffer 로 회석한 KJS 를 최종농도가 0.05, 0.25, 0.5, 2.5 및 5mgJm! 로 되도록
각각 가하고 37"C 에서 10 분간 배양한 다음
- 사상체짙의학회지 재 13 권 재3 효때1 -
compoW1d 48/80 5μg/ml 를 가하여 10 분간 배양하였다.
배양액을 1,500 rpm 으로 10 분간WC) 원심분리하여 상충액올 분리하였다 .
#: PMC buffer; lOX PBS 100 메 + FBS 10 ml +
he 뼈rin(10,OOO 빼c, I 찌) + 3차 증류수 = 1,000
ml(pH 7.0)
7) Histamine 정량
분리한 세포배양액 중의 hiscamine 의 정량은 Shore 둥46) 의 방법에 준하여 측정하였다 . 혈청 및 상충액
500 μg
에 O.N-HO 450 μA와 과염소산 용액 50J1R, 를 넣 고 혼합한 후 1,500 φm 으로 20 분간 원심분리하고, 상충액 800 μe를 취해 5N-NaOH 용액 500 μt, 중류수
3ml, n-BuOH IOml 및 NaO I.2g 을 넣어 진탕한 다음
2, α)Q φm 으로 20 분간 원심분리 하였다 n-BuOH 충 8ml 를 취하여 O.IN-HO 3ml 와 n-heprane IOml 를 가하 여 진탕한 후 2,000 φm 으로 20 분간 원심분리하였 다. 수충 2ml 를 취하여 IN-NaOH 용액 400 뼈와 1%
〔←phrhaJdiaJdehyde(OP A) 용액 looJ1R, 를 가하고 37'C 수
욕상에서 3 분 동안 반응시 칸 다음 3N-HO 200 따를 넣어 혼합하여 2 분 동안 방치한 후 Aa=353nm, A
<m=440nm 에서 형광광도를 측정하였다 .
A - B
Hisramine 유리억제율 (%) = :nn100A x
A; KJS 를 첨가하지 않았을 때의 hisramine 양 B; KJS 를 첨가하였을 때의 hiscamine 양
8) SRBCOtI 의한 delayed type hypersensitivity
<DTH) 반응
생 쥐 8 마리를 l 군으로 하여 Y∞hikai 등41) 의 방 법에 따라 KJS 500m 아<g 을 경구투여하고 2 X 101 개 의 SRBC 0.03 찌를 마우스 좌측 후 족척 피하에 주사 해서 감작시킨 다음 4 일 후에 KJS 500m 밍햄을 경구 투여하고 l시간 후 우측 후 족척 피하에 2 x 108 개 의 SRBC 0.025 떼를 주사하여 반웅을 야기하였다. 야 기직후 {TO) 및 야기 24 시간 후{T24) 에 족척의 두께를
micromerer 로 측정하였다 .
% increase= (T24 - To / To) x 100
9) DNFB 메 의환 접혹성 피부과민반응 생쥐 8 마리를 l 군으로 하여 Ha48)
의 방법에 따라 마우스의 복부를 제모한 다음 실험 l일 및 2 일에
0.5% DNFB 용액 (acerone:olive oil =4: 1) 10 때를 복부피 부에 도포하여 감작한 다음, 5 일 후 KJS 500 m밍kg 을 경구투여하고 l 시간 후 0.2% DNFB 용액 10 μg
씩 귀 내 외면에 각각 도포하였다 . 귀 종창증가의
정도는 micromerer 를 사용하여 야기직전 π이,24 시간
후 (T24) 및 48 시 간 후 (T48) 에 귀의 두께를 측정하 였으며 종창증가의 정도는 다음 공식에 따라 %로 나타내었다.
% increase= ( T24 or T48-To / To ) x 100
10) Thymocytes 및 splenocytes 의 분리
생쥐의 rhymocyres 및 splenocyces 분리는 WYSOCki49) 및 Mizel 에
)
둥의 방법올 이용하였다 생쥐 5 마리를 l 군으로 하여 KJS 500mg/kg 을 l 일 l 회씩 7 일간 경구 투여한 다음 8 일째 생쥐를 경추탈골하여 도살하였 다. 적출한 흉선 및 비장을 DPBS-A 를 넣은 perri dish 에서 잘게 분쇄하고 멸균된 scainless mesh 로 여과하 여 세포부유액을 얻은 후 , DPBS-A 로 2 회 세척한 다 음 (1,500 rpm 에서 10 분간 원심분리 ), rhymocyces 및
splenocyres 부유액으로 하였다. 배지에는 10% FBS 와
야nicillin-screpromycin (IOOunirs/ml, 100, μg/ml) 을 첨가하 여 사용하였다
11) Thymocytes 및 splenocytes 의 증식능 측정
Thymocyres 및 splenocyres 의 증식능 측정은 M∞m 퍼
J)
이 개발하여 Kornik 둥’2)이 변형시킨 Mπ 방법으로 측정하였다. 분리 한 rhymocyces 및 splen αyces 를 RP 뻐 1640 배지로 세포 부유액올 조제한 후, 96-well place 의 각 well 에 세포 부유액 100 때 (2xlO ’ cells/ ml) 를 접 종하고 rhymocyres 에 는 concanavaJin A(Con A) 5μg 뼈 를 첨가하거나 또는 첨가하지 않은 조건으로 ,
splenocyres 에는 lipo φlysaccharide(LPS) 10μg/매를 첨가
하거나 첨가하지 않은 조건으로 37'C 의 C02
incubaror 에서 48 시간 배양하였다. 배양 종료 4시간
전에 5mg/ 떼 농도로 DPBS-A 에 회 석된 Mπ용액 20
μM를 각 well 에 첨가하고 , O.IN-HO 에 용해시킨
IO%-SDS 100 뼈를 각 well 에 첨가하여 차광 상태에서
18 시간 더 배양한 후 발색된 각 well 의 홉광도를
microplare reader 로 570nm 에서 측정하여 세포생존율
을 산정하였다 .
- 안보국 외 1 少A 톨홈正 .1It 의 Iii 매lergy 作用 -
12) Thvmocytes 및 splenocytes 의 subpopulation
측정
분리한 thymocytes 및 splenocyres 를 각각 RPMI
1640 배지로 3 회 세척하였다 . T cell 의 population 은
PE-conjugated anti-CD4 및 FITC-conjugated anti-CD8
monoclonal antilx 성y 로,T 및 B cell 의 subpopulacion 은
PE-conjugated anti-B220 및 FITC-conjugated anti-Thy I
monoclonal anti 뼈y로 이중 염색하여 4 t 에서 30 분
간 반웅시 킨 후 flow cytometer [excitation; 488 nm,
emission; 525 nm(FITQ, 575 nm(PE)} 로 subp φulation 을
측정하였다5»
13) Cvtokines 혹정
생쥐 5 마리를 l 군으로 하여 대조군에는 생리식염 수만을 , 실험군에는 KJS 500m 방cg 을 l 일 l 회씩 7 일 간 경구투여한 다음 8 일째 생쥐의 심장으로부터 혈 액을 채취하여 원심분리한 후 혈청을 분리하여 , 혈 청 50 뼈를 취하여 mouse unmuno 양say kit 를 이용하여 마tokines 를 측정 하였다. 즉 sample 50 μe에 양say
diluent 50 뼈를 혼합하여 설온에서 2시간 동안
incubation 한 후 4 회 세척하였다 세척 후 an tI- mouse
cytokines conjugated concentrate 100td 를 가하여 실온
에서 2 시간 met 뼈tlon 한 후, 5회 세척하고 substrate
solution 100td 를 혼합하여 30 분 동안 실온에서 배양
하였다 . Stop solution 100 μe를 가하여 450nm 에서
mkroplate reader 로 홉광도를 측정 한 후, 미리 작성한
검량선에 의해 cytokines 의 양올 환산하였다 . 까1ymocytes 및 splenocyres 배양액 중 앙Inte κeron 의 측정은 생쥐 5 마리를 l 군으로 하여 대조군에는 생 리식염수만을, 실험군에는 KJS 500m 따cg 을 l 일 l 회 씩 7 일간 경구투여한 다음 8 일째 통일환 방법으로
thymocyres 및 splenocyres 를 분리하여 2 x 107 cells/mJ
로 조제하여 96 well plate 에 200 μe 씩 분주한 후 ,72 시간 동안 C incubator 에서 배양하였다. 배양액을 원심분리 (2,5OOrpm, 2분,4t) 한 다음 , 상둥액 50 뼈
를 취하여 mouse immunoassay. kit 를 이용하여 x
-Interferon 의 양을 측정하였다
14) 통계처리
모든 실험 결과들은 Mean:!:SE 로 나타내었고 통계 처리는 student (-test 를 실시하여 P<0.05 를 기준으로
유의성 여부를 판정하였다 .
川. 톰뚫 훌훌果
1. 賣홉jE 顆散 (KJS) 이 compound 48/80 에
의안 。naphylaxis 애 미지는 효과
대조군은 compound 48/80 을 주사시 100%7} 사망 하였으나, KJS 500 및 1,000m 아cg 을 경구투여시에는 사망률이 각각 70 및 50% 로 감소하였으며 , KJS 500 및 1,000mg/kg 을 복강투여시에는 사망률이 각각 50 및 0% 로 대조군에 비해 감소하였다 {Table I).
Ta때e I. Eff없 이 K뼈khyangje01gQisan(KJS) on the
ana αwla 씨s indu α잉 by ∞mpαmd 4&'80 in mice
Samples Mortaliry (%)
100
Dose (m
김/kg) Saline
Roure
Conrrol p.o
KJS 500 p.o. 70
KJS 1,000 p.o. 50
KJS 500 i.p. 5。
KJS 1,000 i.p. 0
KJS (5。αng/kg or I,OOOmg/kg) was a떼피usrercd p.o. or i.p. I h
before Compound 48/80 (8 m 잉kg, iρ) i띠cerion. The dara
represenrs rhe morraliry of 10 nlice.
한약은 경구투여를 하기 때문에 KJS 연속 투여에 의한 작용을 관찰하기 위해 KJS 500 m빙‘g 을 7 일간 경구투여하고 compound 48/80 올 주사시 사망률은 30% 를 나타내었다. 이는 KJS 가 comp ωnd 48/80 에 의 한 즉시형 과민반응올 억제할 수 있음올 시사하는 것이 대 Table II).
Table II. Effect 이 a repeat administration of KJS on the
anaphv1axis i때uc 얹 by compound 뼈80 in mi ∞
Samples Conrrol
Mortaliry (%)
100
KJS 30
KJS (500m 밍kg) was adnUrlisrered p.o. once a day for 7 days and
Compo μnd 48/80 (8m 밍kg) was injcered i.p. The dara πpresenrs
rhe mortaliry of 10 nlice
Samples Dose (mg/kg) Route Mortality (%)
Control Saline p.o 100
KJS 500 p.o 80
KJS 1,000 p.o ω
KJS 500 ..p 50
KJS 1,000 ..p. 30
Foorpad thickness(mm) Increasc(%)
Samples
T24 T24
TO
Control 1.4S:!:0.02 1.65 :!:003 138
KJS 1.46:!:O.03 l 4 :!:0.03* ”
- 사상해질의학회지 A13 권 찌 3 효때1 -
2. PAFOf) 의안 anaphylaxis 에 미지는 효과
대조군은 PAF 을 주사시 100% 가 사망하였으나,
KJS 500 및 I,OOOm 밍kg 을 경구투여시에는 사망률이 80 및 60% 로 감소하였으며 , KJS 500 및 1,000m 아<g 올 복강투여시에는 사망률이 50 및 30% 로 대조군에 비해 감소하였다 \Table Ill) 이 러 한 결과는 KJS 이
PAF 에 의해 유도되는 전신성 anaphylaxis 의 발현을
억제하여 생체를 방어하는 작용이 있음을 의미하는 것이다 .
Ta 때e III. Effect 이 κJS on the anaphylaxis indu ∞d by PAF
In mce
KJS (500 m 잉kg or 1,000 mg/kg) was administered p.o. or i.p
1 h before PAF(25 μg/ml i.v.) 띠jcction. The data rep πsents the
mortality of 10 mice
3. Anti-DNP-lgE 와 DNP-HSA 어| 의한 PCA
반용애 미지는 효과
대조군에서 유출된 evans blue 의 양은 8.5tO.6 μg/떼 이 었으나 , KJS 을 투여한 군은 5.8 土0.2 μ밍ml 로 약 32% 감소하였다{Table IV)
Table IV. Effect 이 κJS on passive cutaneous
anaphylaxis(PCA) in m ∞
Samples
Cont rol
Leak 쟁e of evans blue{ μg/mJ) 8.5 to.6 5.8:!:0.2*
KJS
The data represents the mean:!:SE from 5 rats
* ; Significantly different from control group (p<0.05)
4. Compound 48/80 어l 의만 록캉 mast
cell 로부터 histamine 유리에 미지는 효과
Mast cell 에 KJS 를 전처리하고 comp ωnd 48 뻐0 을 가했올 때 KJS 는 용량 의존적으로 복강 mast cell 로
부터 마 [arrune 의 방출을 억제하였대 Table V).
Ta 때e V. Effect 이 KJS on histamine release indu α영 by
∞mpound 48'00 from r외 peritoneal mast ∞| 잉 In Vitro
KJS Concentrarion (mg/mJ) 0.05
Inhibition of histamine release
(%) 9.4:!:\.2 19.8:!:2.5 0.25
0.5 33.1:!:2.9
34.6:!:3.1 48.1:!:4.2 2.5
The dara represents [he mean:!:SE from 3 experiments
5. SRBC 어| 의한 족칙홈훌변!융에 미지는 효과 SRBC 투여 24 시간 경과 후 hind paw 의 두께는 대
조군에서 1.45tO.02mm 에서 1.65.1:0.03mm 로 13.8% 증
가되었으나 , KJS 500m 밍kg 을 투여한 군은
1.46:tO.03mm 에서 1.54tO.03mm 로 5.5% 증가되어 대
조군에 비해 증가율이 감소하였다{Table VI)
t‘’Y
Ta 미e VI. SRBC indu 뼈 delayed type hypersensitIVity in
KJS-administered mi∞
Mice were sensitized with 2 x 10’ SRBC on 0 day and
challenged wirh 0.03 mJ of 2 x 108 SRBC on 4 day. KJS
(5OOmg/kg) was administered p.o. at the indicated day 0‘
SRBC-sensirizarion. Footpad rhickness was measurtod jusr 야fore
challenge (To) and agains ar 24 hr (T,,) afrer challenge, and
calculated as following form 띠a: % Increase = [T" - Tol/To x
100. The data[footpad thickness(mm)) represcnts rhe mean:!:SE
from 8 mice.
*; Sinificantly different from control roup (p<O 야 ).
6. DNFB 에 의만 짙흑상 띠루과민반용에 미지는 효과
DNFB 도포 직전의 대조군의 귀 두께는
0.30tO.Olmm 이었으며, 도포 24 시간 및 48 시간 후의
귀 두께는 0.55tO.Olmm 및 0.63tO.02mm 로 각각
Samples Treated of Non-rreared of
Concanavalin A Concanavalin A
Control 100.0:1:2.2 78.512.1
KJS 105.l:t2.6 84.1:12.8
Samples Treated of Non-rreated of
Lipopolysaccharide Lipo0Å|poly &ysac±·`cI¼haÅYride
Control 100.012.7 77.5:t3.1
KJS 61.911.5* 47.2:1: 1.8*
- 안보국 외 1 少陰A 톨홈 iE 훌없의 lit 깨lergy 作用 -
83.3% 및 110.0% 로 증가하였으나 , KJS 500mg/kg 을
투여 한 군은 0.50:1:0.01mm 및 0.56 土0.02mm 로 각각
66.7% 및 86.7% 증가하여 대조군에 비해 증가율이
감소하였다{Table VII).
Table VII. Contact derrnatrtis indu ∞d by DNFB in μS-
administered mice
Ear thickness{mm) Increase (%)
Samples
o T" T.8 T2. T.8
Control 0.3010.01 0.5510.01 0.6310.02 83.3 110.0
KJS 0.3010.01 0.50!O.01* 0.5610.02* 66.7 86.7
Mice were sensitized with 0.5% DNFB on 0 day and I day
challenged with 0.2% DNFB on 5 day. KJS (500m 밍kg) was
administered p.o. for 5 day. Ear thickness was mcas 띠'ed j 따t before
challen 양 (To) and a
잉 a.i 띠 ar 24 ht (T2.) and 48 hr (T.8) afαr
challenge, and calculated as following form 띠a: % I ncrcase = (T
2'
or T.8 - To) π。 X 100.
'; The data [Eat thickness ‘mm)) reptt'Sents the mean ISE from 8
mlCc
*; Si,l:nificanrly different from control ,l:roup (p<0.05)
7. Thymocy ’es 및 splenocytes 의 륭식늄에
미지는 효과
대조군의 thym κytes 에 T-lymph αyte nurogen 인 Con A를 처리하였을 때의 세포생존율올 100% 로 하였올 때, Con A 를 처리하지 않았을 때 세포생존율은
78.5:1:2.1% 로 감소하였으며 , KJS 를 투여하고 분리한
thym αyres 에 Con A를 처리하였을 때의 세포생존율 은 105.l:!:2.6% 로,Con A를 처리하지 않았을 때 세포 생존율은 84.1 :1:2.8% 로 대조군과 별 차이가 없었다
(Table VIIl)
대조군의 splenocytes 에 B-lymphocyte mirogen 인 iPS 를 처리하였을 때의 세포생존율을 100% 로 하였을 때, LPS 를 처리하지 않았올 때 세포생존율은
77.5:1:3.1% 로 감소하였으며, 엔S 룹 투여하고 분리한
s 때enocyres 어] iPS 를 처 리하였을 때의 세포생존율은
61.9 土1.5% 로, LPS 를 처리하지 않았을 때 세포생폰율
은 47.2 土1.8% 로 대조군에 비해 감소하였다 {Table IX)
Table VIII. 댄없 이 KJS on the proliferation 이 munne
thvm α::vies
Cell Proliferation (%)
KJS (500mg/kg) was administered p.o. once a day for 7 days, and
the separared thymocyres (l.2xld' cclls/mI) were c띠rurt-d for 48
h in RPMlI640 media mixed wirh an acrivating mitOgen of
concanavalin A. The data represents the meanlSE of 5 mice
Ta 미e IX. Effect of κJS on the proliferation of murine
splen ∞VIes
Cell Proliferation (%)
KJS (500mg/kg) was administered p.o. once a day for 7 days, and
the separated splenocytes (1.2x 106°cel1s/mI) were culrured for 48 h
in RPMI1640 me 이 la mαed with an acrivating mitOgen of
lipopolysaccharide. The data represents the mean:1:SE of 5 mice
‘; Significanrly different from control group (p<O.OI)
8. Thymo αtes 및spleno αtes 의 S‘JbpopUation
에 미지는 효과
대 조군의 thymocytes 중 CD4 single positiv, 어(,1)4 +)
세포는 12.5:1:0.3% 이었으며, CD8 single posirive
(CD8+) 세포는 3.2 土0.2% 이었다. KJS 를 투여하고 분
리한 생쥐 thymocyres 의 CD4+ 세포는 12.9 土0.5% 로, CD8+ 세포는 3.6:1:0.5% 로 대조군과 별 차이가 없었 다{Table X)
대조군의 splenocyres 중 Thy 1 positive 세포( 까lyl +) 는 37.8:1:2.5% 이었으며. B220 따ItIve 세포(B220 +) 세 포는 22.7:!:l.8% 이었다. KJS 를 투여하고 분리한 생쥐
splenocytes 중 까lyl+ 세포는 36.4:1: 1.9% 로 B220+ 세
포는 16.5 :!:l.5% 로 대조군에 비해 B220+ 세포가 감
소하였다 Splenic T-lymphocytes 중 대조군의 CD4+
세포는 13.1:1:0.7% 이었으며, CD8+ 세포는 4.1:1:0.6%
이었으나, KJS 를 투여하고 분리한 생쥐 splenic
T-Iymphocytes 중 CD4+ 세포는 11.6 土 0.9% 로 대조군
