Sodium-5-Methoxy Salicylate의 吸收促進 効果에 關한 硏究
金 琪 憲
签山ᄎ學校 藥學ᄎ學 (Received February 13，1985)
A Study on the Absorption-Enhancing Effect of Sodium-5-methoxysalicylate
K i Heun Kim
College o f Pharmacy, Pusan National University, Pusan 607，Korea
Abstract ᅳEffect of sodium-5-methoxysalicylate (5MSA-Na) on the absorptioon of cefmetazol (CMZ) was studied in rectum and duodenum of rats via in situ loop method. Effect of 5MSA-Na on the absorption of CMZ showed markedly different results in rectum and duodenum. Penetration of 5MSA-Na was greater in rectum than in duodenum and water-transfer was markedly increased in duodenum.
消化管에 있어서 難 吸 收 性 藥物의 吸收 를 改 善 하 려 고 하는 硏 究 가 수 행 되 고 있 다 . 1-13) 吸收 促進 劑 를 使 用 했 을 때 直腸에서의 吸收 促 進 效果에 關 해 서 는 N ishihata 等 1 의 報 告 가 있으 나 다른 消 化管 部位에서의 效果에 對 해 서 는 거의 檢討된 바가 없 다 . 直 腸 以外의 消化管에 의 한 吸 收 促 進 效果에 관한 硏 究 는 投與經路의 擴 ᄎ 可 能 性 을 찾을 뿐 만 아니 라 , 지 금까지 많은 知見이 있는 直 腸 과 比較함으로써 吸收 促 進 機構의 解明에 도 움 을 줄 것 으 로 생각되어 rat 의 直 腸 과 12 指膜에 있어서 5-methoxy salicylate (5 M S A - N a ) 가 cefmetazol ( C M Z ) 의 홉수에 미 치 는 영 향을 실험 하 였 다 .
實 驗 方 法
試料 및 試 薬 ᅳ C M Z 는 三 共 株 式 會 社 에 서 提供된 것 을 ， 5 M S A 는 A ld ric h C he m ial C o ■의 것을 使 用 하 였 다 . 다른 有 機 溶 媒 , 試 藥 等 은 市 販 特 級 을 使 用 하 였 다 .
5 M S A - N a 염의 製 法 一 5M S A 0.02m ole 을 無 水 ethanol 20m l 에 搜样 하 면 서 溶 解 한 후 , 이 용액 에 sodium alcoholate 溶 液 (금 속 N a 0.025mole + 무 수 에 탄올 5 0 m l) 을 擾 样 하 면 서 滴 下 하 였 다 . 滴下 종료 後 얻어진 結 晶 性 침 전 을 爐取하여 진 공 乾燥하여 5 M S A - N a 염 (收 得 率 7 6 % ) 을 얻 었다 .
in situ loop method ᅳ Sprague-Dawley 系 rat(250~300g) 를 24 時間 絕 食 시 킨 後 實驗에 使 用 하 였 다 . 絕 食 中 에 도 물은 자유로이 마실 수 있게 하 였 다 . Sodium pentobarbital 50mg/kg 을 腹 腔 內 에 注射하여 麻醉시킨 後 下 腹 部 를 切 開 한 다 음 항 문 部 로 부터 약 4cm 위의 直 腸 部 分 을 실 로 묶고 開 腹 部 를 縫 合 하 였 다 . 肛 門 部 로 부터 藥 液 을 投 與 한 다음 肛門 에 서 의 약 물 漏 出 을 防 止 하 기 위하여 prima bond 로 막아 직 장 loop 를 만 들 었 다 . 12 指 腸 loop 는 腹 部 를 開 腹 後 膽 管 口 아
랫쪽 部位에서 약 4cm 의 길 이 가 되 게 끔 下 端 을 실 로 묶어 두 었 다 . 上 端 에 는 실 로 통해 두 고
microsyringe 로 藥 液 을 投 與 하 고 곧 묶었 다 . 採 血 時 間 은 10 ， 25 ， 45 ， 60, 90,120 ， 150 分의 7 回로 하
112 5MSA-Na 의 흡수촉진 효과
고 1 回 250 피씩 鎖骨下靜脈 에 서 採 血 하 였 다 .
Loop內 溶液量의 測定一Loop 롤 적출하여 浦紙로 가볍게 水分을 닦고 种 量 하 였 다 . 다 음 , loop
를 切開하여 20 倍 로 희 석 한 1/15M pH7.4 인 산 완 충 액 으 로 loop 內外를 씻은 다음 全 量 을 100ml 로 하 였 다 . 다 음 , loop 롤 가볍게 爐 紙 로 水 分 을 닦고 种量하여 切開 前後의 무게 차이로 부터 loop 內 溶 液 量 을 계 산 하 였 다 .
Loop內 殘存量의 測定一 上記의 100ml 의 溶液을 3 倍 희 석한 액에 대하여 CMZ 를 정량하여 殘
存 量 을 算 出 하 였 다 . Scheme I-HPLC assay of CMZ.
Sample preparation plasma 50/J add. 50찌 6N HC1 add. 1, 500 i fil ethyl acetate
•
. 1 .
centrifuge at 3,000 r.p.m. for 10 min.
organic layer 1，000 evaporate add. 60 i {A methanol
1 inject. 40 //I Eluent
MeOH: 5 x 103M tetra-n-butyl-ammonium bromide in acetate buffer (pH 4. 5) = 2 I 3
Scheme II-HPLC assay of 5MSA.
Sample preparation plasma 50//1 add. 50 1 til 6N HC1 add. 1，500/il ethyl acetate i
centrifuge at 3,000 r.p.m. for 10 min.
1
organic^ layer 1， 000fA evaporate add. 60찌 methanol
. . i inject. 40찌 Condition Apparatus Column Detector Wave length Flow rate Sample size Temperature Internal standard Eluent
組織 蓄稱量의 測 定 ᅳ Loop 내 용액량의 測定 操 作 을 한 後 組 織 片 을 메어서 种 量 한 다 음 ，20 倍 희 석 한 1/15M pH7.4 인산완충액 5ml 를 넣 은 유리 容器에 組 織 片 을 넣고 homogenizer(Ika Wark Ultra Turrax) 에서 약 50 秒 間 homogenize 하 였 다 . 1 分間 靜置하여 2 層으로 分離된 下層을 取하여 CMZ 를 定 量 하 였 다 .
Loop內 投與 藥液의 조제 ᅳ CMZ, 5MSA-Na
를 1/15M pH 7.4 인산 완충액에 녹여서 各各
0.6M 용액으 로 하여 사 용 하 였 다 .
Jasco Lcp-150 4. 6 x 250mm
Uvidec-100 (range=0. 04) 235nm
1. Oml/min
： 40//1 I Room
! phenacetin
: methanol ： 10~2M H3P 04- NaH2PC)4 buffer, pH 2.8=2 : 3
1—HPLC chromatogram of CMZ.
: Trirotar- II
•• 4.6 X 250mm Fine SIL-Cis-5 : Uvidec 100-ffl
： 1. 3ml/min 40^1
Room temperature Fig.
Apparatus Column Detector Flow rate Sample size Temperature A ： CMZ
B •• Phenacetin (internal standard)
J. Pharm. Soc. Korea
CMZ, 5MSA 의 定 量 一 이 定 量 法 은 對 ion 으 로 tetra-n-butyl ammonium bromide 를 使 用 한 逆 相 이온對 크로마토 그라 피 에 의 한 것으로서 Scheme I 및 II 에 試料의 조제 및 eluent 의 組 成 을 , F ig. 1 에 C M Z 에 대한 chrom atogram 과 조 건 을 나 타 내 었 다 .
實 驗 結 果 및 考 察
直 腸 과 12 指腸에 있어서 5M SA -N a 의 吸收 促 進 效果에 對하여 檢討하기 위하여 먼저 의 loop 에 投與된 C M Z 의 血 中 濃 度 를 測 定 한 결 과 는 F ig . 2 와 같 다 . 直 腸 ， 12 指 腸 모 두 單 獨 投 與 했 을 때 는 ， 血中에 C M Z 가 檢出되지 않 았 다 . 直 腸 에 서 는 5 M S A - N a 의 添 加 量
1 0 0
兩 部 位 C M Z 을 增加에
Fig. 2—Effect of 5-MSA on rectal and duodenal absorption of CMZ(15mg/kg).
Each point and bar represent the mean土 S.D. (N = 5 〜 6)
dose of 5MSA-Na:
—O — 60 mg/kg rectum —▲ — 30 mg/kg
—A — 7. 5 mg/kg duodenum ••.願… 60 mg/kg
Fig. 3ᅳRemaining amount of CMZ.
錢 rectum □ duodenum (5MSA-Na 60 mg/kg)
Each value represents the mean±S.D.
(N =5)
.따라서 C M Z 의 血 中 濃 度 는 높게 나 타 났 고 , 最高 血中濃度에 달 하는 시 간은 단축되 었 다 . 12 指 腸 에서 는 5 M S A _N a 60 m g/k g 을 添 加 하 였 을 때 25 분에서 최고 혈중농도에 달 했 다 .
投 與 部 位 가 다른 경 우 에 는 吸收 後 * 循環에 옮 기 는 經 路 도 마 찬 가 지 로 다르게 된 다 . rat 에 있 어서 直 腸 部 位 는 中 下 部 와 上部에서 血 管 系 가 틀 린 다 . 15) 中 下 部 로 부 터 는 下 * 靜 脈 을 通해서 心 臟 으 로 이 어 진 다 . 12 指腸에서의 靜 脈 은 全 部 門脈에 연결되어 있 다 . 그 때문에 直 腸 部 位 에 서 의 吸收 와 12 指腸部 位에서의 吸 收는 肝臟에서 初 回 通 過 效 果 를 받는 比率이 전혀 다 르 다 고 한 다 . 16>
이와 같이 吸收 後의 經 路 가 다른 경 우 에 는 ， 血中濃度의 차이 가 곧 吸 收 m echanism 의 차 이 , 혹 은 膜透過性의 차 이 라 고 단 언 할 수 는 없 다 . 또 C M Z 는 m t 에 있어서 皮 下 注 射 2 時間 以內에 約 6 0 % 가 膽汁에 排 泄 된 다 는 報 告 가 있 다 . 17> 이와 같은 것 으 로 보 아 , 12 指腸에서 C M Z 는 吸收 後
즉시 膽汁中에 排泄되기 때문에 순 환 血中에 移行하지 않았을 수 도 있 다 . 그래서 5 M S A - N a 의
吸收 促 進 效 果 를 直 腸 과 12 指腸內의 殘 存率로 부 터 비 교 할 必 要 가 있 다 . F ig . 3 은 投 與 後 10 分 ,
30 分 ， 150 分에 있어서 rat 룰 도살하여 C M Z 의 殘 存 率 을 測 定 한 結果이 다 . 12 指 腸 에 서 는 2 時 間
半 後에 도 거의 吸收되어 있지 않은 것이 明 確 하 였 다 . 直 腸 에 서 는 經 時 的 으 로 C M Z 가 吸 收 되 어
있는 것을 알 수 있 었 다 .
114 5MSA-Na 의 흡수촉진 효과
m m
in i n
F ig. 4—Tissue accumulation of CMZ and 5MSA-Na.
想 rectum 口 duodenum
(5MSA-Na 60 mg/kg. Each value represents the mean 土 S.D. (N = 4 〜 6).
'^100
r c c turn duodenum
CMZ 에 대 한 5MSA-Na 의 吸 收 促 進 效 果 는 直 腸 과 12 指腸에 서 큰 差 異 가 認 定되었 다 . 兩 部位 에서의 效果의 差 異 가 무엇에 의 한 것 인 가 를 檢討하기 전에 直 腸 과 12 指腸에서의 主藥 또는 吸 收 促 進 劑 가 어 떠 한 動 態 를 나 타 내 는 가 를 調 查 하 였 다 . 먼저 CMZ 와 5MSA-Na 의 組 織 蓄積性이 直 腸 과 12 指腸에서 差 異 가 있 는가 를 調 査 하 였 다 . Fig. 4 는 直 腸 과 12 指腸組織의 homogenate 로 부터 檢出되 는 主 藥 과 吸收促進劑의 總量의 經 時 變 化 이 다 .
200 - Fig- 4 를 보면 알 수 있는 바와 같이 CMZ ，
5MSA-Na 모두 直腸 組織內에 많이 蓄積되
어 있다 .
앞서의 實 驗 을 할 때 , 5MSA ᅳ Na 自身의 吸 收 상 태 는 두 部位에서 어 떠 했 는 가 를 調查하였 다 . Fig. 5 는 CMZ 15mg/kg, 5MSA-Na 60 mg/kg 投 與 後의 5MSA-Na 의 血中動態이 다 . 最高 血 中 漠 度 는 直 腸 , 12 指 腸 모두 같은 程度 로 나 타 났 다 . 그 러 나 初期의 30 分 까 지 는 直腸 쪽이 12 指 腸 보 다 빠른 傾向이 認 定 되 었 다 . Fig.
6 은 5MSA-Na 의 消化管內 殘存量이 다 . 여 기 서 2 時間半後의 直 腸 과 12 指腸에서의 잔존량 이 거의 같은 値 를 나타 내 는 것 으로 보 아 ， 吸 것으 로 생 각 된 다 . 10 分 ， 30 分의 5MSA-Na 의 殘 이 러한 것으로 보 아 初期의 30 分까지의 5MSA-Na F ig.
T im e ' (m in).
5—Rectal and duodenal absorption of 5MSA- Na. Each point and bar represent the mean 士 S.D. (N = 6 〜 7) 60mg/kg of 5MSA- Na was coadministered with 15mg/kg of CMZ in each loop.
收 促 進 劑 는 直 腸 ， 12 指腸 모 두 같은 量 透過된 存量에 關 해 서 는 12 指腸쪽이 直 腸 보 다 많 았 다 .
■의 透 過 는 直腸쪽이 빠른 傾 向 을 보임 이 認 定 되 었 다 .
이 實驗에서 一 定 時 間 經 過 後 loop 를 적 출 하 였 을 때 ， 12 指腸 loop 는 부풀어 류 브 狀 으 로 되어
5 - M S A
1 5 0 . 1 0 3 0 . 1 5 0
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J. Pharm. Soc. Korea
F ig. 6—Remaining amount of 5-MSA. Tinje mi_n)
B rectum □ duodenum F ig . 7—The relation between fluid movement Each value represents the mean 士 S. D. and time for rectal and duodenal ligated
(N = 6 ) For Experimental condition, See loop. Each point and bar represent the
Fig. 5. mean 士 S.D. (N = 4 )
있는 현상을 볼 수 있 었 다 . 이에 비해 直腸 loop 는 거의 변하지 않은 것처럼 보 였 다 . 이 것 은 아 마도 投與溶液이 대 단히 高張 이 므 로 삼투압에 의해 兩部位에서의 水 分 移動의 차이 가 나기 때 문 이 라 추정 된 다 . 그래 서 10 分 ， 30 分， 2 時間 半 後의 loop 內의 용액 량을 측정 하였 다 . 그 結 果 를 Fig. 7 에 나 타 내 었 다 .
12 指 腸 은 投 與 10 分 後에 이미 최대 치에 가 까운 용 액 량 으 로 되 었다 . 投 與 後 30 分 , 2 時間 半 이 되어 도 10 分에서의 용액량에서 거의 변 화 가 없 었 다 . 直 腸 에 서 는 10 分 , 30 分 ， 2 時間 半 後 모 두 投與量에 가까운 値 를 나 타내고 있음을 알 수 있 었 다 . 이와 같이 直 腸 과 12 指 腸 에 서 는 삼투 압차이에 의하여 組 織 으 로 부터 loop 로의 水 分 移動에 차이가 생 기 는 것 으 로 생 각 되 었 다 . 이 水 分 移動에 관 해 서 는 지금까지 많은 報 告 가 있 고 ， 藥物의 吸收에 큰 影 響 을 준 다 는 것이 이미 알 려져 있 다 .
in « •야 還 流 法 을 使 用 한 小腸의 實驗에 의 하면 還 流 液 을 低 張 으 로 했을 때 는 , 藥物의 吸 收 가 增 加 하 고 高 張 으 로 했 을 때 는 低 下 된 다 는 報 告 가 있 다 . 181， 19) 이 것 은 삼투압에 의해서 생 기 는 물 의 흐 름 (water flow ) 에 따라서 藥物이 移動하기 때 문 (solvent drag ) 이 라고 한 다 . 直 腸 과 12 指 腸 에서의 물의 흐름이 다 르 다 고 認定된 것 으 로 보 아 吸收 促進劑의 效 果 차이 는 이 水 分 移 動 과 어떠한 관 계 가 있는 것으 로 생 각 된 다 . CMZ 單 獨 投與時의 水 分 量 은 실험 開 始 時 와 거의 變함이 없 었 다 . 이러 한 것으 로 보아 12 指腸에서의 溶 液 增 量 은 CMZ 에 의 한 것이 아님 을 알 수 있 었 다 .
結 論
5MSA-Na 는 12 指 腸 과 直腸에서 吸收되지 않던 CMZ 의 直腸에서의 吸 收 를 현저히 증 가 시 킴 을
in situ loop 法 으 로 확 인 하 였 다 . 그 러 나 5MSA-Na 는 이년고의 12 指腸에서의 吸 收 는 그다지 촉 진 하 지 못 하 였 다 . 5MSA-Na 자체도 12 指腸에서 보 다 直腸에서 더 잘 吸 收 되 는 傾 向 을 보 였 으 며 ， loop 內 溶 液 量 도 12 指 腸 loop 쪽 만이 증 가 하 는 傾 向 을 보 였 다 . 비록 이 러 한 차 이 가 有 意 性 있 는 것은 아니 었지만 5MSA-Na 의 CMZ 흡 수 촉 진 효 과 가 12 指 腸 과 直腸에서 다르게 나 타 나 는 이 유 와 관련이 있을 것 으 로 思料되 었다 .
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