Flavonoid 함량 측정

Flavonoid는 페놀 화합물과 같이 항산화 작용을 하며 항염, 항암, 항혈전, 항 알레르기 작용 등의 생리활성이 있는 것으로 알려져 있다. 본 실험에서 사용된 우엉뿌리 발효추출물, 황칠나무잎 발효추출물, 우엉뿌리와 황칠나무잎 발효배합 추출물의 농도별 총 플라보노이드함량은 Figuer 16에 나타내었다. 본 실험에서 우엉뿌리 발효추출물, 황칠나무잎 발효추출물, 우엉뿌리와 황칠나무잎 발효배합 추출물을 100, 50, 25, 1%의 농도에서 플라보노이드 함량을 측정한 결과 황칠 나무 발효추출물 103.738, 70.0196, 43.17915, 9.96398 ㎍/ml, 우엉뿌리와 황칠나 무잎 발효추출물, 68.67765, 24.8940, 17.17738, 7.61544 ㎍/ml, 우엉뿌리 발효추 출물, 28.75236, 15.83535, 11.80927, 6.94442 ㎍/ml, 순으로 총 플라보노이드 함 량을 나타내었다. 각각의 추출물의 농도별 추출물과 비교하여 황칠나무 발효추 출물의 플라보노이드함량이 상대적으로 높은 것을 확인 할 수 있었으며 우엉뿌 리와 황칠나무잎 발효배합 추출물, 우엉뿌리 발효추출물 순으로 플라보노이드 함량이 높게 나타났다.

Figure 16. Total flavonoid.

3.3. DPPH 활성 소거능 측정

DPPH는 화학적으로 안정화된 free radical을 가지고 있는 물질로 ascorbic acid, tocopherol, polyhydroxy 방향족 화합물 등에 의해 환원되어 보라색에서 노란색으로 탈색되는 원리를 이용하여 다양한 천연소재로부터 항산화물질을 검 색하는데 많이 이용되고 있다. 본 실험에서 우엉뿌리 발효추출물, 황칠나무잎 발효추출물, 우엉뿌리와 황칠나무잎 발효배합추출물의 항산화 효능을 알아보기 위하여 DPPH radical 소거능을 측정하였으며, 대조군은 ascorbic acid를 사용하 였다. 측정 결과 대조군과 비교하여 황칠나무잎 발효추출물, 우엉뿌리와 황칠나 무잎 발효배합추출물, 우엉뿌리 발효추출물 순으로 항산화 효능이 높게 나타났 다. DPPH radical 소거능은 Figure 17에 나타내었다.

Figure 17. DPPH radical 소거능.

4. 세포독성

Macrophage 세포인 RAW 264.7 에서 우엉뿌리 발효추출물, 황칠나무잎 발 효추출물, 우엉뿌리와 황칠나무잎 발효배합추출물의 농도별 세포독성 확인을 위해 최종 배합비를 100%로 정하고 1/2씩 희석하여 처리한 후 24시간 배양하 였다. 결과적으로 우엉뿌리 발효추출물과 우엉뿌리 및 황칠나무잎 배합발효추 출물의 경우 25% 이하의 농도에서 높은 세포 생존율을 보였고, 우엉뿌리 발효 추출물은 최종 배합비의 3% 이상 처리 시 86%의 이하의 세포 생존율을 보였 다. 본 실험을 통해 우엉뿌리 발효추출물은 그 자체에 독성이 있음을 확인하였 고 황칠나무잎 발효추출물, 우엉뿌리 및 황칠나무잎 배합 발효추출물의 경우 농도 의존적으로 세포생존율이 감소함을 알 수 있었다.(Figure 18)

Figure 18. 세포 독성.

Ⅴ. 요약 및 결론

본 연구는 최근 여러 연구에서 약리적 활성이 우수하고 식용으로써 오랫동안 사용되어 안전성이 확보된 기능성 소재의 우엉뿌리와 항암, 항산화, 최근 미백 과 탈모방지 효과 등 약용식물로 새로운 가치가 부여 되고 있는 황칠나무잎이 모발 성장과 탈모 방지에 어떠한 영향을 미치는지 알아보기 위해 실험동물을 통하여 실험적 연구를 수행하였다. 본 연구에서는 발효를 이용하여 기존의 유 용 성분 외에 발효시키는 과정에서 생기는 유효성분들을 함께 추출함으로써 두 피에 도포시 두피의 발모, 양모, 탈모방지 및 두피의 문제에도 영향을 줄 것으 로 판단된다.

실험은 실험군에 우엉뿌리 발효, 황칠나무잎 발효, 우엉뿌리와 황칠나무 발효 배합을 3군으로 나누어 실험하였고 대조군에 무시료, 효소와 증류수, 미녹시딜 (minoxidil) 3%로를 도포하였다. 실험은 6주된 암컷 Mouse를 총 6군으로 나누 어 실험하였다. Mouse의 등판을 제모한 한 뒤 5주(35일)동안 시료에 따른 양모 효과를 육안으로 관찰하였고 경피적출 후 조직학적인 검사를 수행하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 모발의 성장정도를 알아보기 위해 mouse의 외형을 육안 적으로 관찰한 결과, 미녹시딜(minoxidil) 3%, 우엉뿌리와 황칠나무잎 발효배합, 황칠나무잎발효, 우엉뿌리발효 순으로 모발의 성장이 이루어짐이 관찰되었다. 5 주(35일)째 mouse를 희생한 후 얻은 피부 안쪽 경피 내측을 육안적으로 관찰 한 결과 경피 내측의 검은색이 우엉뿌리와 황칠나무잎 발효배합, 황칠나무발효, 미녹시딜(minoxidil) 3%, 우엉뿌리발효, 효소와 증류수, 무시료 순으로 색이 진 하게 관찰되었다. 시료의 항산화 실험결과 총 페놀함량, 총 플라보노이드함량, DPPH 라디칼 소거능 실험에서 황칠나무잎 발효, 우엉뿌리와 황칠나무잎 발효

배합, 우엉뿌리 발효, 효소와 증류수의 순서로 항산화능이 높은 것으로 나타났 다.

이러한 결과는 항산화능이 높은 황칠나무잎 발효보다 두 물질의 배합이 효능이 높은 것으로 나타나므로 발효 시 모발성장에 영향을 주는 유효 성분이 함유 되 어 있을 것을 판단할 수 있다. 또한 우엉뿌리 발효 함량에 따른 추후 연구가 필요하며 우엉뿌리와 황칠나무잎 발효배합의 유효 성분 분석에 대한 연구가 이 루어진다면 기능성 소재로써 가치를 기대할 수 있을 것으로 판단된다. 시료의 독성실험 결과는 농도 간의 세포 생존율의 차이가 나타남에 따라 추후 연구자 료로써 활용가치가 있다고 판단된다. 우엉뿌리와 황칠나무잎 배합발효가 C57BL/6 mouse의 제모 된 등 쪽 부위에 처리한 결과 육안적 외형 분석과 경 피 내측 분석 결과 양성대조군의 미녹시딜(minoxidil) 3%에는 미치지는 못하나, 모발성장에 효능이 있는 것으로 사료된다.

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