Phytochemical Constituents and Antioxidant Activities of the Aerial Parts of Hibiscus manihot

월 후 총 학

황촉규 지상부의 성분분리 및 항산화활성

박 은 영

양 기 숙

숙 명 여 자 대 학 교 약 학 대 학

(Received December 30, 2009; Revised March 20, 2010; Accepted March 20, 2010)

Phytochemical Constituents and Antioxidant Activities of the Aerial Parts of Hibiscus manihot

Eun Young Park and Ki Sook Yang^

College of Pharmacy, Sookmyung Women's University, Seoul 140-742, Korea

A b s tra c t — Column chromatographic separation of the MeOH extract from the aerial parts of Hibiscus manihot led to the isolation o f four compounds. T heir structures were characterized to be hentriacontane (1), palmitic acid (2), daucosterol (3) and 3-dihydrocaffeonyl-5-p-coumaroylquinic acid (4) by spectroscopic methods. The compounds (1—4) were for the firs t tim e reported from this plant. The solvent fractions were tested for their antioxidant activities by free radical scavenging and superoxide dismutase (SOD).

K eyw ords □ Hibiscus manihot, Hentriacontane, daucosterol, 3-dihydrocaffeonyl-5-p-coumaroylquinic acid

황 촉 규 (Hibiscus manihot Linne)는 아욱과(Malvaceae)에 속하 는 중국 원산의 식물로서 민간에서 뿌리는 점활제 또는 위염, 위 궤양, 인후염치료에 쓰이고 종자는 이뇨 및 유즙분비 촉진 등에 이용된다. 뿌러에 D-galactose, L-alvinose, L-rhamnose, xylose, glucose, D-galacturonic acid, aldovionic acid, rhamnogalac- turonic acid 등의 당류와 점액질이 풍부하고녀 꽃은 flavonoid를 함유하는 것■•로 알려져 었다.^^

천연물의 항산화 물질에 대한 연구가 활발히 진행되고 있고, ascorbic acid 및 그 유도체, coenzyme Q10 등의 항산화 물질의 ROS 소거능에 관한 연구가 알려졌으며, isoacetosidi, ellagic acid 등의 SOD 활성 억제물질이 보고되고 었다.^^

본 식물의 지상부는 자원이 풍부하고 예비검색에서 뿌리나 중 자보다 항산화직■용이 우수하나 거의 연구된 바 없으므로 지상부 의 M eOH 추출물을 상법에 의하여 용매분획물을 만들어 항산화 작용을 실험하였으며, 컬럼크로마토그라피를 통하여 4종의 화합 물을 분리동정 하였다.

"는 논문에 관한 문의는 저자서1게로 (전화) 02-710-9578 (팩스) 02-715-9498 (E-mail) [email protected]

실험방법

실험재료

본교 약초원에서 채취하여 옴건 후 세말로 한 황촉규의 지상 부 3.0 kg§r 100% MeOH로 70°C에서 4회 환류냉각 추출 후 여 과하고 감압 농축하여 MeOH 추출물 210.0폼을 얻었다. 이 MeOH 추출물에 대하^ 용매률 이용한 계통적 추출방법을 실시 하여 hexane 분획물 31.0 g, dichloromethane 분획물 1.8 g, ethylacetate 분획물 1.0 g, butanol 분획물 1.6 g 및 물 분획물 2.0 ^{g i： 각각 얻었다.}

텍산 분획으로부터 화함물 1 ~ 3의 분리

핵산 분획 1 5 담을 silicagel 컬럼 크로마토그래피 (CHCI3

：

)률

률

을

률

]•토

하늬

A c e to n = l: 1) H M -2(13m g)

룰

률

률

을

164

황촉규 지상부의 성분분ill 및 항산화휠성 165

디클로로메탄 분획으로부터 화합물 4의 분러

디 클 로 로 메 탄 분획

담을

칼럼 크 로 마 토 그 래 피

률 실 시 하 고

다시

칼럼 크로마토그래피

로 분 러 한

^{이 분획 을} 다시

칼럼 크로마토그래피률 실시하여

화합물

률 단 리 하 였 다

DPPH를 이용한 용매분획물의 항산화 활성 측정

각 시료률 농 도 별 로 조 제 한 후 시 료

에

용 액

에 탄 올 에 용 해

을 가 한 후

•로

초 간 진 탕 하 고

에서

분 동 안 배 양 시 켰 다

이 후

를 이용하여

에서 흡 광 도 를 죽 정하였 다

시료의 항산화 활성을 측정하기 위초

전자 공 여 능

에 의 한 환 원 력 으 로 표 시 하 였 다

앙성 대조약물로는

를 농도별 로 용시 조제하여 사용하였 으며 각 시료의 항 산 화 활 성 을 비 교 검 토하기 위해서

가

에 이르도록 하는 데 필요한 시료의 양

측정하였다

SOD 활성의 측정

SOD

에 의해

가 소거된 정도롤 바 탕으로

활 성을 간 접 적 으 로 측 정 하 였 다

농 도 별 로 시 료 용 액 을 가 하 고 각 각

을 넣어 반 응 시 킨 후

생 성 된

^{에 의 한}

toxyline

의 탈색된 정도률 분광학적 방 법으 로 측 정 하 였 다

농 도 벌 로 조 제 한 시 료 를

씩 취 하 고

파

용 액 을 가 한 후 진 탕 한 다

살온에 방처 하■여

분 후에

를 이용히긴

면고에 서 흡 광 도 를 측 정 하 였 다

통계학적 분석

모 든 실 험 결 과 는

로 나 타 내 었 으 며 자 료 분 석 은

률 이용하여 유 의성 을 검 정 하 였 다

실험결과 및 고찰

화합물의 착인 동정

HM-1

은

로써

에서

에서

률

^에서

^{가 탈 락 된}

률 관 찰 할 수 있 었 다

실 험 결 과 및 문 헌과 의 비교로

을 분 자 량

분자식

^의

으 로 확인 동 정 하 였 다

HM-2

는

에서

^에서

룰

그 러 고

에서

률 관 찰 할 수 있 었 다

는 분 자 량

분 자 식 인

로 확인 동 정 하 였 다

H M - 1： hentriacontane H M - 2： p alm itic acid

H M - 3： daucosterol

H M - 4： 3 -d ih yclro ca ffe o n yl-5 -p -ccH JiT ia ro ylq u in ic acid

Fig. 1 - Structures of the compound 1—4 from Hibiscus manihot.

Vol. 54, No. 3, 2010

30.00 25.00 20.00

15.00

10.00

5.00

0.00

n , ._fX_

Fig. 2 - The radical scavenging effects of solvent fractions from Hibiscus manihot (A: ascorbic acid, H: hexane, D:

dichloromethane, E: ethylacetate, B: butanol, W: H2O) Each value represents the mean±S.D (n=3). IC50

：

J. Pharm. Soc. Korea

화합물 4의 물러화학적 성상 W hite power, C25H24O12 (M .W 516)

조

1.96(m, 2H, H -18), 2.6(m, 2H, H-19), 419(1H , H -3), 4.6 (IH , H-4), 4.85(1H, H-29), 6.31(d, IH , H -8"), 6.62(d, H-5'),

6.6 6(dd, H-5"), 6.89(dd, H -6"), 7.03(d, H -2'), 7.26(d, H-2"), 7.59(d, H-72")

또 크

30.42(C-2), 31.9KC -6), 63.98(C-3), 65.0(C-4, 5), 86.0(C-1), 114.99(C-8',8"), 115.21(C-2',2"), 116.14(C-5',5"), 123.51(C-6',6"), 130.2(C-7',7"), 147.26 (C-4',4"), 167.11(0-1'), (167.19(C-1"), 167.7(C-9'9").

항산화농에 미치는 영향

노화와 성인병 질환의 원인이 활성산소에 기인된 것이라는 학 설이 점차 인 정 되 어 짐 에 따 라 체내에서 활 성 산 소 률 조 절 하 는

등의 효 에 대한 연구와 천연 항 산화제인 셀 레 늄

토 코 페 롤

아 스 코 르 빈 산

베 타 카 로 틴

글 루 타 처 온 및 합성 항산화제인

등 많은 항산화제 의 개발 연구가 보고 되어 있다

천연물로서 앙 파

류

등과 같은 식용으로 쓰이는 식물을 비롯하여 물 냉 이

오 가 피

박 하 동오하 억 용으 로 이용되 는 다 양 한 추출물에 대한 연 구 가 알 려져 있다

시료를 첨가하지 않온

용액

을

환원 시키는데 필 요한 시료의 앙

을 측 정 한 결과는 다옴과 같 다

H M -3

은

에서

^에서

를

그 리 고

^에서

률 관 찰 할 수 있 었 다

을 분 자 량

분자식

의

인

로 확인 동정하였다.이

H M -4

은

에서

^에서

률

그 러 고

^에서

률 관 찰 할 수 었었 다

을 분자광

분자식

의

로 확인 동 정 하 였 다

화합물 1의 몰리화학적 성상 W hite powder, C31H64 (M .W 436)

효

0.81(s, 3H, CH3), 1.23(m, J= 7.0 Hz, 2H, CH2), 1.96(m, J=4.95 Hz, 2H, CH3CH2)

N M R(CD Cl3, 125MHz) 6

13.84(CH3), 20.54(C-230 CH2), 22.48(C-3,29 CHg), 29.16 (C-4,28 CH2), 31.74(C-5,27 CH2), 38.71(C-6,26 CHg), 38.88 (C-7,25 CH2), 39.05(C-8,24 CHg), 39.21(C-9,23 CH2X 39.38 (C-10,22 CH2), 39.55(0-11.21 CHg)

화합물 2의 물리화학적 성상 W hite powder, C16H32O2 (M .W 256)

N M R (C D C l3, 500M Hz) 6

0.88(s, 3H , CH3), L63(m , 2H, CH2), 1.63(m, 2H, COCH2CH2), 2.34(t, J= 7 .5 Hz, 2H, COCHg)

N M R(CD Cl3, 125 M H z) 5

I9.8K C H3), 28.67(C-15X 28.83(C-14), 28.93(C-13), 31.45 (C-2), 173.28(C-1)

화합물 3의 물러화학적 성상

W hite powder, C35H60O6 (M .W 576) N M R (pyridine-d5, 500M Hz) 6

0.68(s, 3H, H-18), 0.88(d, J=6.96 Hz, 3H, H -26), 0.89(d, J= 2 .8 Hz, 3H , H-27), 0.91(t, J=9.33 Hz, 3H, H-29), 0.92(d, J=3.15 Hz, 3H, H-29), 0.93(s, 3H, H-19), 4.01(m, J=5.39 Hz, IH , H -5'), 4.09(m, IH , H -3), 4.31(t, J= 4 .1 7 H z, IH , H - 2'X 4.33(t, J -3 .7 5 Hz, IH , H -3'), 4.46(t, J=5.25 Hz, IH , H - 4'), 4.58(dd, J=2.01 Hz, 5.95, IH , H -6'), 5.09(d, J=7,72 Hz, IH , H -D , 5.37(d, J=2.3 Hz, IH , H -6)

N M R (pyridine-d5, 125 M H z) 5

12.48(C-18), 12.66(C-29), 19.52(C-21), 19.72(C-19), 19.92 (C-26), 20.48(C-27), 21.79(C-11), 23.9(C-28), 25.0KC-15), 26.9KC -23), 29.04(C-16), 30.09(C-25), 30.47(C-2), 32,57(C-8), 32.68(C-7), 34.72(C-22), 36.89(C-20), 37.43(C-10), 37.99(C-1),

박은영

잉키숙

1

cf

Fig. 3 - The SOD activities of solvent fractions from Hibiscus manihot (A: ascorbic acid, H: hexane, D: dichloromethane, E: ethylacetate, B: butanol, W: H2O). Each value represents the mean±S.D (n=3).

항산화제로 잘 알려진 아스코르빈산의

은

으로 우 수 한 항 산 화 능 을 보 였 으 며

황촉규 의 디 클 로 로 메 탄 분 획 은

에 틸 아 세 테 이 트 분 획 은

항 산화능을 보여 아스코르번신:에 비해 그다지 효과률 나타내지 못 하 였 다

또 한

에 의해

가 소거된 정도룰 바 탕 으 로

활성을 간접적으로 측 정 하 였 다

강력 한 항산 화제 인 아 스 코 르 빈 산 을 비 교 물 질 로 하여

활 성 을 측 정 한 결 과

아스코르빈산의 활 성을

%로 할 때

디클 로로메란분획

에 틸 아 세테 이 트 분획

의 활 성 을 나 타 내 었 다

결 론

황 족 규

분 획 으 로 부 터

그리고

분획으로부터

틀 분리하였으며 이 돌 성 분들 은 본 식 물 에 서 는 처 음 으 로 보 고 하 였 다

메 탄 을 추 출 물 을

및

분 획 으 로 나누어 유리기소거작용

활성을 통 한 항산화활성을 측 정한 결과 유 리 기 소 거 작 용 은 벌 로 크지 않 았 으 나 에 틸 아 세 테 이 트 분획에서 가장 큰

활성을 나 타냄 을 확 인 하 였 다

감사의 말씀

본 연구는 숙 명 여 자 대 학 교

여성질환연구센터 지 원

으 로 이루어졌으며 이에 감 사 드 럽 니 다

Vol. 54, No. 3, 2010

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