Immunostimulatory Effect of Wild-Cultivated Ginseng Extract via the Increase in Phagocytosis and Cytokine Secretions in RAW264.7 Macrophages

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RAW264.7 대식세포에서 산양삼 추출물의 탐식능과 사이토카인 분비 증가에 의한 면역 활성 증진 효과

⁃ 연구노트 ⁃

정재인¹․김정미²․김희성²․김형서²․김은지¹

1한림대학교 식의약품의 효능평가 및 기능성소재개발센터

2(주)다움푸드앤케어 부설연구소

Immunostimulatory Effect of Wild-Cultivated Ginseng Extract via the Increase in Phagocytosis and Cytokine Secretions in RAW264.7 Macrophages

Jae In Jung

¹

, Jung Mi Kim

²

, Hee Sung Kim

²

, Hyung Seo Kim

²

, and Eun Ji Kim

¹

1

Center for Efficacy Assessment and Development of Functional Foods and Drugs, Hallym University

2

Research Institute, Daoom Food and Care Ltd.

ABSTRACT Cultivated wild ginseng is used as an herbal medicine because of its variety of pharmacological effects.

This study examined the immunostimulatory effects of an aqueous extract of wild-cultivated ginseng extract (WCGE) on RAW264.7 mouse macrophages. The cytotoxicity, phagocytic activity, nitric oxide (NO) production, and production of cytokines in RAW264.7 cells were measured. WCGE increased the phagocytic activity of RAW264.7 cells sig- nificantly within the concentration range of 0 to 100 μg/mL. In addition, WCGE increased the production of tumor necrosis factor (TNF)-α, interleukin (IL)-1β, and IL-6 significantly. On the other hand, WCGE had no effect on NO production of RAW264.7 cells. These results suggest that WCGE exhibits immunostimulatory activity by increasing the phagocytic activity and the production of TNF-α, IL-1β, and IL-6 in RAW264.7 cells. These findings highlight the potential of WCGE as an immunostimulatory agent.

Key words: wild-cultivated ginseng, macrophage, phagocytosis, cytokine, nitric oxide

Received 13 April 2019; Accepted 13 May 2019

Corresponding author: Eun Ji Kim, Center for Efficacy Assessment and Development of Functional Foods and Drugs, Hallym Universi- ty, Chuncheon, Gangwon 24252, Korea

E-mail: [email protected], Phone: +82-33-248-3106

Author information: Jae In Jung (Researcher), Jung Mi Kim (Research- er), Hee Sung Kim (Researcher), Hyung Seo Kim (Researcher), Eun Ji Kim (Professor)

서 론

현대사회는 국민소득의 증대, 생활 패턴과 식생활의 서구 화 및 환경적 스트레스 등으로 다양한 만성질환의 발병률이 증가하고 있다. 이러한 질병들의 예방 및 개선을 위해 면역 활성 증진 효능을 가진 식품 및 천연물을 소재로 하여 건강 기능성 식품의 개발 연구가 활발히 이루어지고 있다.

면역 반응은 감염 등과 같이 자기 성분 이외의 물질이 체 내에 들어왔을 때 자신을 보호하고자 하는 생체방어 반응이 다. 면역 반응은 호중구, 호산구, 호염구 및 단핵구 등의 백혈 구, 자연살해세포 및 대식세포(macrophage)로 구성되어 외 부 자극에 가장 먼저 반응하는 비특이적 면역과 특정 병원체 가 생체의 최초 방어선을 뚫고 침입 시 B림프구 및 T림프구 등에 의해 특정 병원체를 항원으로 인식하여 선별적으로 제

거하는 특이적 면역으로 구분된다(London 등, 2016). 대식 세포는 체내의 모든 조직에 분포하면서 선천 면역뿐만 아니 라 적응 면역 등 다양한 숙주 반응에 관여하여 숙주 방어와 항상성 유지에 관여한다. 또한 박테리아와 바이러스 등의 병원체뿐만 아니라 노화된 정상 세포와 암세포 등에 대한 탐식 작용을 일으키거나, 다양한 사이토카인을 생산하여 생 체 방어에 중요한 역할을 한다(Higuchi 등, 1990). 더불어 대식세포는 활성화되면 산화질소(nitric oxide, NO)의 분비 가 증가하여 각종 유해균의 증식을 억제한다(McDaniel 등, 1996). 최근 다양한 식품 및 천연물 소재가 대식세포의 활성 을 증진해 산화질소 및 사이토카인(cytokines)의 생성을 촉 진하여 선천 면역 활성을 증진함이 보고되고 있다(Hibbs 등, 1998; Yoo 등, 2014; Park 등, 2017).

산양삼(wild-cultivated ginseng, Korean

Panax gin- seng

)은 오가피과에 속하는 다년생 숙근초로, 야생상태에 서 자연적으로 발아한 산삼의 종자나 묘삼을 인위적으로 산 삼의 생육환경과 유사한 깊은 산속의 그늘지고 습기가 많은 곳에 뿌려두고 자연환경에서 수년 동안 자생시킨 후에 캐낸 삼을 말한다. 산양삼은 밭에서 재배된 인삼과 야생상태에서 재배된 장뇌삼과 구별되어 사용되고 있다(Lim 등, 2007).

야생의 환경에서 성장한 산양삼은 인위적으로 생육한 재배

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삼보다 methionine, cysteine 및 tryptophan 같은 아미노 산 함량이 1.9배 높으며(Kim 등, 2012a), 재배삼에서는 발 견되지 않는 항암 관련 ginsenoside Rh2와 칼슘 수산화 결 정이 함유되어 있음이 보고되었다(Choi 등, 2007). 또한, 산양삼과 재배삼의 인삼 사포닌 비교연구에서(Ko, 2009) total saponin, ginsenoside Rb1과 Rg1의 비율, ginsenoside Rd, ginsenoside Re 등이 전반적으로 재배삼보다 산 양삼에서 현저히 높은 함량을 나타냄이 보고되었다. 최근 생산량이 적고 매우 값비싼 산삼을 산양삼이 대체할 수 있을 것으로 생각되면서 산양삼에 대한 관심이 증가하고 있고, 산양삼의 건강 기능성에 대한 연구가 활발히 이루어지고 있 다. 다양한 연구들을 통해 산양삼은 항산화(Choi 등, 2006;

Jang 등, 2008; Rhim 등 2009), 항염(Kim과 Son, 2012), 간기능 개선(Lee 등, 2008; Kim 등, 2009), 항비만(Kim과 Kwon, 2007), 항암(Ahn 등, 2007; Jang 등, 2010) 효능이 있음이 보고되었고, 최근에는 산양삼이 혈관신생을 촉진하 고(Kim 등, 2018b), 피부 주름을 개선(Kim 등, 2018a)하는 효능이 있음이 보고되었다. 산양삼은 산삼이나 인삼처럼 면 역증진 효능이 있을 것으로 유추되나 현재까지 산양삼의 면 역증진 효능에 대해 연구된 바가 없다.

본 연구에서는 산양삼의 면역증진 효능을 알아보기 위하 여 대식세포인 RAW264.7 세포에 산양삼 추출물을 처리한 후 세포의 탐식능과 산화질소 및 사이토카인 생성을 측정했 으며, 이를 통해 산양삼을 면역증진 효능을 갖는 건강 기능 성 식품 소재로서의 개발 가능성을 검토하고자 하였다.

재료 및 방법

산양삼 추출물 제조

본 연구에 사용한 산양삼은 강원도 춘천에서 재배된 3년 근을 구입하여 사용하였다. 산양삼을 흐르는 물에 세척한 후 동결건조기(FDG400, Mycom, Seoul, Korea)를 사용하여 -40°C에서 동결 건조하여 분쇄하였다. 분쇄하여 분말로 만 든 산양삼 100 g에 1 L의 물을 가하여 90°C에서 4시간 열수 추출하였다. 추출을 2회 반복한 후 추출물을 여과지로 여과 하고 -40°C에서 동결 건조하여 건조 분말 형태의 산양삼 추출물(WCGE)을 얻어 시료로 사용하였다.

세포 배양

생쥐에서 유래한 대식세포인 RAW264.7 세포는 Ameri- can Type Culture Collection(ATCC, Manassas, VA, USA) 에서 구입하여 사용하였다. RAW264.7 세포는 Dulbecco’s modified Eagle’s medium(DMEM, Welgene, Gyeongsan, Korea)에 10% fetal bovine serum(FBS), 100 units/mL penicillin과 100 μg/mL streptomycin을 첨가한 세포 배양 액을 사용하여 37°C 습윤한 CO2 배양기(5% CO2/95% air) 에서 배양하였다. 세포가 배양접시의 80% 정도 차면 phos- phate buffer saline(pH 7.4)으로 세포 단층을 씻어낸 후

세포 배양액을 첨가하여 세포를 떼어내어 계대 배양하였고, 배지는 2일마다 교환하였다.

세포 생존율 측정

RAW264.7 세포를 5×10⁴cells/well로 24-well plate에 분주하여 24시간 배양한 후 다양한 농도(0~1,000 μg/mL) 의 산양삼 추출물이 함유된 배지로 세포배양액을 교환하여 세포를 배양하였다. 산양삼 추출물을 처리하여 세포를 24시 간 또는 48시간 배양한 후 MTT assay(Denizot과 Lang, 1986)로 세포 생존율을 측정하여 산양삼 추출물의 세포독 성을 조사하였다.

탐식능(phagocytosis) 측정

RAW264.7 세포의 탐식능은 phagocytosis assay(zymosan substrate) 키트(Abcam, Cambridge, UK)를 사용 하여 제조회사가 제시한 방법에 따라 측정하였다. RAW 264.7 세포를 96-well plate에 1×10⁵ cells/well로 분주하 여 24시간 배양한 후 다양한 농도(0, 25, 50, 100 μg/mL)의 산양삼 추출물이 함유된 배지로 세포배양액을 교환하여 24 시간 동안 배양하였다. 이후 pre-labeled zymosan 입자를 1시간 동안 처리한 후 substrate를 첨가하여 반응시킨 후 405 nm에서 흡광도를 측정하였다.

NO 생성량 측정

RAW264.7 세포로부터 생성된 NO의 양은 Griess reagent system(Promega, Madison, WI, USA)을 사용하여 제조회사가 제시한 방법에 따라 측정하였다. RAW264.7 세 포를 5×10⁴cells/well로 24-well plate에 분주하여 24시 간 배양한 후 다양한 농도(0, 25, 50, 100 μg/mL)의 산양삼 추출물 또는 1 μg/mL lipopolysaccharide(LPS, Sigma- Aldrich Co., St. Louis, MO, USA)가 함유된 배지로 세포배 양액을 교환하여 세포를 24시간 동안 배양하였다. 세포배양 액을 수거하여 세포배양 상등액과 동일한 양의 Griess re- agent를 혼합하여 실온에서 10분간 반응시킨 후 540 nm에 서 흡광도를 측정하였고 sodium nitrate로 표준곡선을 작성 하여 NO 함량을 산출하였다.

사이토카인 분비량 측정

RAW264.7 세포가 생성 분비한 사이토카인을 측정하기 위해 세포를 5×10⁴cells/well로 24-well plate에 분주하 여 24시간 배양한 후 다양한 농도의 산양삼 추출물 또는 1 μg/mL LPS가 함유된 배지로 세포배양액을 교환하여 세포 를 배양하였다. 세포를 24시간 배양한 후 세포배양액을 수 거하여 5,000 rpm에서 10분 동안 원심분리 한 후 상층액을 취하여 -70°C에 보관하였다. 세포배양액 내의 tumor necrosis factor(TNF)-α, interleukin(IL)-6 및 IL-1β의 함량 은 각각의 측정 키트(R&D Systems, Minneapolis, MN, USA) 를 사용하여 제조회사가 제시한 방법에 따라 측정하였다.

(3)

a

b

c

d

e e

fg f

0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5

0 24 48

Hours of treatment Cell viability . (absorbance at 570 nm) .

0 μg/mL 25 μg/mL 50 μg/mL 100 μg/mL 200 μg/mL 400 μg/mL 600 μg/mL 800 μg/mL 1000 μg/mL

Fig. 1. Effect of wild-cultivated ginseng extract (WCGE) on the

cell viability in RAW264.7 cells. RAW264.7 cells were plated at a density of 50,000 cells/well in 24-well plates with DMEM supplemented with 10% FBS. Twenty-four hours after plating, the cells were then incubated for 24 or 48 h in medium containing 0∼1,000 μg/mL WCGE. Cell numbers were estimated by the MTT assay. Each bar represents mean±SEM (n=5). Means at a time without a common letter differ at P<0.05.

a b b

c

0 0.5 1 1.5 2 2.5 3

0 0 25 50 100

WCGE (μg/mL)

Phagocytosis . (absorbance at 405 nm) . ^***

Zymosan

Fig. 2. Effect of WCGE on phagocytosis induced by zymosan.

RAW264.7 cells were plated at a density of 100,000 cells/well in 96-well plates with DMEM supplemented with 10% FBS.

Twenty-four hours after plating, the cells were then pre-treated with incubated for 24 h in medium containing 0, 25, 50, 100 μg/mL WCGE and stimulated with zymosan for 1 h. The values obtained in this study were compared with value of zymosan group as control. Each bar represents mean±SEM (n=6). Means without a common letter differ at P<0.05. ^***

P<0.001 signifi-

cantly different from that of zymosan treated group.

통계처리

모든 결과는 mean±SEM으로 나타내었다. 대조군과 시 험물질 처리군의 차이를 비교하기 위하여 분산분석(ANOVA) 후 SAS software version 9.4(SAS Institute, Cary, NC, USA)를 이용하여 Student’s t-test와 Duncan’s multiple range test를 이용하여 유의성을 검증하였다.

P

<0.05일 때 만 통계적으로 유의성 있는 것으로 판단하였다.

결과 및 고찰

산양삼 추출물의 세포독성

산양삼 추출물이 대식세포의 면역 조절에 미치는 영향을 평가하기 위한 최적 농도를 결정하기 위해서 산양삼 추출물 이 RAW264.7 세포의 생존율에 미치는 영향을 조사하였다.

RAW264.7 세포의 세포배양액에 다양한 농도(0, 25, 50, 100, 200, 400, 600, 800 및 1,000 μg/mL)의 산양삼 추출 물을 처리하여 세포를 배양한 후 MTT assay를 통하여 세포 생존율을 측정하였다. 산양삼 추출물을 24시간 처리했을 때 는 대조군(0 μg/mL)과 비교하여 100 μg/mL의 농도부터, 48 시간 처리했을 때는 200 μg/mL의 농도부터 산양삼 추출물의 처리농도가 증가함에 따라 세포 생존율이 유의적으로 감소하 였다(Fig. 1). 세포독성에 의한 심각한 세포 생존율 감소는 면역 활성에 영향을 미칠 수 있으므로 면역 활성 평가를 위한 산양삼 추출물의 적절한 처리 농도 결정이 필요하다. 본 연구 에서 100 µg/mL 산양삼 추출물을 처리한 경우 24시간에는 대조군에 비해 세포 생존율이 9.5% 감소하였고, 48시간에는 세포 생존율에 영향을 미치지 않았으므로 100 µg/mL 농도로 처리한 경우 세포 생존율 감소에 의한 영향이 미미할 것으로 판단되어 100 µg/mL 농도를 산양삼 추출물 최고 처리 농도 로 설정하여 산양삼 추출물의 면역증진 효능을 평가하였다.

산양삼 추출물이 대식세포의 탐식능에 미치는 영향

대식세포는 거의 모든 조직에 존재하여 체내에 박테리아 나 바이러스 등의 외부 물질이 침입하면 탐식 작용을 함으로 써 선천면역의 일차 방어로 작용한다(Ghosh와 Stuehr, 1995). 대식세포의 탐식 작용은 생체 내에서 일어나는 초기 면역 반응으로 대식세포의 탐식능 증가는 면역 활성 증가를 나타내며, 천연물 유래 성분이 대식세포의 탐식능을 증가하 여 면역 활성을 증진함이 보고되었다(Yoo 등, 2014; Park 등, 2017). 산양삼 추출물이 대식세포의 탐식능에 미치는 영향을 조사하기 위해 RAW264.7 세포에 zymosan par- ticle을 사용하여 대식세포의 탐식능을 조사하였다. Fig. 2 에 나타난 바와 같이 zymosan을 처리하지 않는 세포의 탐식 능은 0.460±0.013%였으나 zymosan을 처리한 경우 세포 의 탐식능은 1.955±0.058%로 현저히 증가하였다. Zymo- san 처리에 의해 활성화된 탐식능은 산양삼 추출물 처리에 의해 증가하였고 산양삼 추출물 처리 농도가 증가할수록 탐 식능은 유의적으로 증가했으며, 100 μg/mL 농도로 산양삼 추출물을 처리한 경우 세포의 탐식능은 2.378±0.059%로 현저히 증가하였다. 이는 산양삼 추출물이 초기 면역 반응인 선천 면역을 증진함을 제시한다.

산양삼 추출물이 NO 생성에 미치는 영향

NO는 생체 내 NO synthase(NOS)에 의해 산소분자와 L-arginine의 guanidino nitrogen으로부터 생성되는 물질 로 대식세포를 비롯한 신체 내 다양한 세포에서 생성되며, 생체 내의 여러 가지 기능을 매개하거나 조절 작용을 한다.

대식세포는 탐식 작용을 하는 동안 탐식된 병원균을 죽이기 위해 NO를 생성하고, 생성된 NO는 병원균을 죽이는 매개체 로써 중요한 역할을 한다. 하지만 염증 상태에서 inducible

(4)

***

0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5

0 25 50 100 LPS

WCGC (μg/mL)

Nitrate (μM) .

(1 μg/mL)

Fig. 3. Effect of WCGE on the nitric oxide production in RAW

264.7 cells. RAW264.7 cells were plated at 50,000 cells/well in 24-well plates with DMEM supplemented with 10% FBS.

Twenty-four hours after plating, the cells were then incubated for 24 h with various concentration of WCGE or/and 1 μg/mL LPS. Conditioned media were collected 24 h after WCGE treatment. The concentrations of NO in the conditioned media were measured using the Griess reagent system. Each bar represents mean±SEM (n=5). ^***

P<0.001 significantly different from that

of control (0 μg/mL) group.

***

a

b c

d 0 20 40 60 80 100 120

0 25 50 100 LPS

WCGE (μg/mL)

TNF-α (ng/L) .

(1 μg/mL)

A

***

a a b b

0 5 10 15 20 25

0 25 50 100 LPS

WCGE (μg/mL)

IL-6 (ng/L) .

(1 μg/mL)

B

***

ab a c bc

0 2 4 6 8 10 12

0 25 50 100 LPS

WCGE (μg/mL)

IL-1β (ng/L) .

(1 μg/mL)

C

Fig. 4. Effects of WCGE on the production of TNF-α (A), IL-6

(B), and IL-1β (C) in RAW264.7 cells. The cells were treated various concentrations of WCGE as described in Fig 3. Condi- tioned media were collected after 24 h. The concentrations of TNF-α, IL-6, and IL-1β in the conditioned media were measured using the relevant ELISA kits. Each bar represents mean±SEM (n=4). Means without a common letter differ at P<0.05. ^***

P<

0.001 significantly different from that of control (0 μg/mL) group.

NOS에 의해 과량 생성된 NO는 혈관 투과성 증가와 부종 등의 염증반응을 촉진할 뿐만 아니라 염증 매개체의 생합성 을 촉진하여 염증을 심화시키고 심한 경우 염증 질환 및 자 가면역질환 등의 면역 관련 질환과 패혈성 쇼크를 일으킬 수 있다(Ghosh와 Stuehr, 1995; McMicking 등, 1997). 산 양삼 추출물이 대식세포에서 NO 생성에 미치는 영향을 조 사하여 Fig. 3에 나타내었다. 대식세포에 endotoxin의 일종 인 LPS를 가하면 NO의 생성이 현저히 증가한다(Yoo 등, 2014; Park 등, 2017). 본 연구에서 RAW264.7 세포에 1 μg/mL LPS를 처리한 경우 LPS를 처리하지 않은 대조군에 비해 NO의 생성이 현저히 증가함을 관찰하였고(Fig. 3), 이 는 본 실험에 사용한 RAW264.7 세포가 정상적인 면역 반응 을 나타냄을 보여준다. RAW264.7 세포에 산양삼 추출물을 25, 50 및 100 μg/mL의 농도로 처리한 경우 세포배양액 내 NO 함량은 산양삼 추출물을 처리하지 않은 대조군에 비 해 감소하는 경향을 나타내었으나 유의적인 차이를 나타내 지 않았다(Fig. 3). 대식세포의 포식과정은 부착(adhesion), 위족 뻗기(pseudopod extension), 내부화(internalization) 의 절차로 진행되는데, 이때 NO는 활성화된 대식세포의 위 족 형성을 억제하여 대식세포의 탐식 작용을 저해한다고 보 고되었다(Jun 등, 1996). 본 연구에서 산양삼 추출물은 대식 세포의 NO 생성을 다소 억제해 위족 형성 억제를 감소함으 로써 탐식능 증가에 기여했으리라 생각되나, 자세한 기전은 추후 연구되어야 할 것이다.

산양삼 추출물이 사이토카인 생성에 미치는 영향

외부의 자극에 의해 활성화된 대식세포는 스스로 TNF- α, IL-1β 및 IL-6 등의 다양한 사이토카인을 분비하여 면역 계를 조절하는 다양한 세포를 활성화하고 적응면역반응을

유도함으로써 감염인자를 제거하는 염증반응을 활성화한다.

정상 범위 내에서 사이토카인의 생성 증가는 면역 활성이 증진됨을 나타내며, 다양한 천연물이 사이토카인의 생성을 증가하여 면역 활성을 증진함이 보고되었다(Yoo 등, 2014;

Park 등, 2017; Kim 등, 2012b; Nam 등, 2012). RAW264.7 세포에 산양삼 추출물의 처리가 사이토카인(TNF-α, IL-6 및 IL-1β)의 생성에 미치는 영향을 조사하였다. TNF-α는 대식세포에서 주로 생성되는 사이토카인으로 주로 염증반응

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을 담당하며, 미생물 감염 시 발현량이 증가하고 대식세포의 사이토카인 생성 증가를 유도하여 미생물에 대한 숙주의 항 상성을 유지하는 데 중요한 방어 역할을 한다(Agarwal 등, 1988). 본 연구 결과 LPS를 처리했을 때 대조군에 비해 유 의적으로 높은 TNF-α를 생성했고, 산양삼 추출물 처리에 의해서도 생성 분비된 TNF-α 함량이 유의적으로 증가했으 며, 100 μg/mL 산양삼 추출물을 처리한 경우 대조군에 비해 776.1% 증가하였다(Fig. 4A). IL-6는 감염과 조직 손상에 따른 면역 초기 반응에서 생성되는 주요한 매개 물질로 TNF -α 등에 의해 유전자 발현이 자극되어 대식세포에서 생성되 어 염증반응을 조절한다(Tanaka 등, 2016). 또한 B세포 자 극인자로 면역글로불린의 합성을 증진하며, 다른 사이토카 인과 함께 상승작용을 나타낸다(Cha 등, 2010). IL-1β는 TNF-α와 함께 대식세포 및 다양한 면역세포에서 생성되어 염증반응 매개자로서 역할을 하며(Freidin 등, 1992), B세 포의 성숙, NK세포의 활성화, T세포 활성화 및 T세포에서 분비되는 IL-2와 같은 사이토카인의 활성을 증진하는 등 사이토카인 네트워크에 중요한 역할을 한다(Cha 등, 2010).

산양삼 추출물을 RAW264.7 세포에서 처리 시 농도가 증가 할수록 생성 분비한 IL-6와 IL-1β의 함량은 유의적으로 증 가하였다(Fig. 4B, 4C). 이는 산양삼 추출물이 대식세포를 활성화해 TNF-α, IL-6 및 IL-1β의 생성 분비를 증가시키 고 이들 사이토카인들의 상호작용으로 T세포와 B세포를 자 극하여 체내면역체계를 활성화해 면역증강에 기여할 수 있 을 것이라 사료된다.

요 약

본 연구에서는 산양삼 추출물의 면역증진효능을 조사하기 위해 선천성 면역에 중요한 역할을 하는 대식세포를 이용하 여 실험하였다. 마우스 대식세포인 RAW264.7 세포에 0, 25, 50 및 100 µg/mL로 처리한 경우 산양삼 추출물은 산화 질소의 생성에 아무런 영향을 미치지 않았다. Zymosan 처 리에 의해 활성화된 RAW264.7 세포의 탐식능은 산양삼 추 출물 처리에 의해 현저히 증가하였다. 또한 산양삼 추출물은 대식세포에서 분비되는 사이토카인인 TNF-α, IL-6, IL-1 β의 생성 분비를 대조군에 비해 농도 의존적으로 증가시켰 다. 본 연구의 결과 면역반응 활성화를 위한 대식세포의 활 성화에 산양삼 추출물이 매우 유용하게 사용될 수 있음을 제시한다. 본 연구 결과를 바탕으로 산양삼 추출물의 활성 물질에 대한 추가 연구 및

in vivo

후속연구를 통하여 산양삼 추출물의 면역증진에 대한 추가적인 기전연구가 필요할 것 으로 생각된다.

감사의 글

본 연구는 산업통상자원부 지역혁신센터사업(한림대학교 식의약품의 효능평가 및 기능성소재개발센터, B0008864)

의 지원에 의해 이루어진 것으로 이에 감사드립니다.

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