대한소화기학회지 2007;49:72-78
Hel ic ob a c t er p y l or i 감염 위점막에서 P er ox is om e P r ol if er a t or -a c t iv a t e d R ec ep t or ( P P A R ) γ의 발현
가톨릭대학교 의과대학 내과학교실, 임상병리학교실*
손성현·김형근·지정선·조영석·김성수·채현석·최명규·한석원·최규용·정인식·신옥란*
E x p r e s s i o n o f P e r o x i s o m e P r o l i f e r a t o r -a c t i v a t e d R e c e p t o r ( P P A R ) γ i n H e l i c o b a c t e r p y l o r i -i n f e c t e d G a s t r i c E p i t h e l i u m
S e o n g Hy u n S o n , M . D. , H y u n g K e u n K i m , M . D. , J e o n g S e o n J i, M . D. , Y o u n g S e o k Ch o, M . D. , S u n g S o o K i m , M . D. , H i u n S u k C h a e , M . D. , M y u n g G y u Ch o i , M . D. , S o k Wo n H a n , M . D. , K y u Y o n g C h o i , M . D. ,
I n S i k Ch u n g , M . D. , a n d Ok R a n S h i n , M . D. *
Departments of Internal Medicine and Clinical Pathology*, The Catholic University of Korea College of Medicine, Seoul, Korea
Background/Aims: Peroxisome proliferator-activated receptorγ (PPARγ), a nuclear transcription factor, plays a
critical role in the regulation of gene expression associated with inflammation and cancer. PPARγ is expressed in human gastric cancer as well as in colon cancer. Activation of PPARγ by ligand produces pro-apoptotic effect and ameliorate growing of cancer cells. Helicobacter pylori (H. pylori) is a main etiologic agent for gastric inflammation, and raises cell turnover in gastric epithelium. Longstanding infection with this organism is related with the development of non-cardiac gastric cancer. The aim of this study was to investigate the effect of H.
pylori on the expression of PPARγ protein and mRNA in chronic gastritis. Methods: Gastric biopsy samples
were taken from H. pylori infected (n=18) and non-infected (n=21) patients during endoscopic examination. PPARγ expressions were assessed by real time polymerase chain reaction and immunohistochemistry. Results: PPARγ was localized to the nuclei of the foveolar epithelial cells in both infected and non-infected mucosa. PPARγ protein expression was higher in H. pylori infected patients than in non-infected patients (3.8±0.4 vs. 2.6±1.0, H. pylori infected and non-infected, respectively; p＜0.05). However, PPARγ mRNA levels were not significantly different between the two groups (24±18 vs. 29±25, H. pylori infected and noninfected, respectively). Conclusions:
PPARγ expression is increased in the gastric mucosa of H. pylori infected chronic gastritis, which suggests a certain role of PPARγ in the mucosal inflammatory reaction to H. pylori infection. (Korean J Gastroenterol
2007;49:72-78)Key Words: Helicobacter pylori; Peroxisome proliferator-activated receptor γ
접수: 2006년 2월 16일, 승인: 2007년 1월 3일
연락처: 조영석, 480-717, 경기도 의정부시 금오동 65-1번지 가톨릭대학교 의정부성모병원 소화기내과
Tel: (031) 820-3658, Fax: (031) 847-2719 E-mail: [email protected]
*위 연구는 2004년도 가톨릭대학교 암센터 연구비 지원으로 이 루어졌음.
Correspondence to: Young-Seok Cho, M.D.
Department of Internal Medicine, Uijeongbu St. Mary's Hospital The Catholic University of Korea, 65-1, Geumo-dong, Uijeongbu 480-717, Korea
Tel: + 82-31-820-3658, Fax: + 82-31-847-2719 E-mail: [email protected]
손성현 외 10인. Helicobacter pylori 감염 위점막에서 Peroxisome Proliferator-activated Receptor (PPAR)γ의 발현 73
서 론
Peroxisome proliferator-activated receptor (PPAR)는 핵 수용 체군(nuclear receptor superfamily)의 하나로 배위자(ligand)에 의하여 활성화되는 전사인자다.1 PPAR에는 PPARα, PPARδ (또는 PPARβ라고 불림), PPARγ의 3가지 종류가 있다.2 PPAR은 여러 가지 유전자 발현을 조절하여 지방대 사, 지방세포의 분화 및 인슐린 작용 등에 관여한다.3 그중 PPARγ는 배위자가 알려지지 않은 orphan receptor였으나 인 슐린 저항을 개선시키는 약제로 각광을 받고 있는 thiazoli- dinedione이 그 배위자 중의 하나라는 것이 밝혀지면서 그 기능에 대해서 관심이 커지고 있다.4 PPARγ는 지방세포뿐 만 아니라 장상피세포에도 고농도로 분포하며, 림프구, 간 세포, 근육세포, 유방, 전립선 등에서 발현한다.5,6 이외에 PPARγ는 지방육종, 유방암, 전립선암, 대장암 등 여러 암 세포에서도 발현한다.7 암세포에서 PPARγ 배위자에 의해 조절되는 유전자들이 항증식작용을 나타내는 기전은 명확 하게 밝혀지지 않았지만, PPARγ는 지방육종세포와 유방암 세포의 마지막 분화를 유도하며, 유방암, 전립선암과 폐암 세포의 성장을 억제한다.8-11
PPARγ는 위암세포에서도 발현되며, 위암세포에 PPARγ 배위자를 투여할 때 농도에 비례하여 세포 성장이 억제되고 세포자멸사가 유도된다.12 PPARγ는 위암 세포와 위암 조직 에서 분화도에 상관없이 발현되고, 장상피화생 조직과 정상 조직에서도 발현된다. PPARγ의 활성화는 위암 세포의 G1 세포주기에서 세포 분열을 정지시키고, 세포자멸사를 유도 하여 증식을 억제한다.13
Helicobacter pylori (H. pylori) 감염이 만성 위염과 소화성 궤양을 일으키고, 위암 발생과 연관된다는 사실은 여러 역 학 조사, 실험 연구와 동물 실험을 통하여 증명되었다.14 H.
pylori에 의한 위점막 염증반응은 중성구, 림프구, 형질세포 및 대식세포로 구성되어 있고, 다양한 정도의 상피세포 변 성과 손상을 동반한다.15 H. pylori가 염증반응을 일으키는 기전은 첫째, H. pylori가 위점막 염증을 자극하는 물질을 분 비하는 것이고,16 둘째, 위상피세포와 직접 접촉하여 사이토 카인 분비를 촉진하는 것이다.17 한편 H. pylori의 지속적인 감염의 또 다른 결과는 세포 전환율(cell turnover) 변화이다.
세포자멸사 수치(apoptosis score)가 상당히 다양하지만, 여러 보고에서 H. pylori에 감염된 환자에서 위상피세포의 세포자 멸사가 증가되어 있었다.18
최근 대장암과 PPARγ의 관련에 대해서 연구가 활발히 진행되고 있지만, H. pylori에 의한 위염이나 위암 발생에서 PPARγ 역할에 대한 연구는 많지 않다. H. pylori 감염에서 PPARγ 역할에 대한 시험관 내 실험에서 PPARγ 배위자는 NF-κB를 통해 H. pylori에 의해 유발되는 세포자멸사를 유
의하게 감소시켰다.19 이는 PPARγ가 정상 위점막에서 항염 증작용과 세포자멸사의 억제를 통해 보호 작용을 할 수 있 다는 사실을 제시한다. PPARγ는 다양한 숙주반응을 조절 하기 때문에 이 수용체 활성화가 만성 H. pylori 감염에 의 해 발생하는 여러 병리 소견과 세포 전환율에 영향을 미칠 것이다. H. pylori 감염군은 비감염군에 비하여 소화성궤양 의 발병률이 4배 더 높고,20위궤양의 80%, 십이지장 궤양의 95% 이상에서 H. pylori가 검출된다.21 저자들은 내시경 검 사에서 소화성궤양을 앓았거나 현재 활동 소화성궤양을 갖 고 있는 환자에서 비감염군과 비교하여 H. pylori 감염이 위 점막에서 PPARγ 발현에 미치는 영향을 알아보고자 하였 다.
대상 및 방법
1. 대상
2002년 1월부터 2002년 7월까지 상부 위장관 증상으로 가 톨릭대학교 의정부성모병원에 내원한 39명을 대상으로 하 였다. 전신질환을 앓고 있거나, 비스테로이드 진통제를 복 용한 경우, 미주신경 절단술 등의 위수술을 받았거나 최근 2주일 이내에 항생제나 궤양치료제를 복용한 경우는 대상 에서 제외하였다. 조직학적으로 위암으로 진단된 5명에서 PPARγ 단백의 발현을 면역조직화학염색으로 알아보았다.
또한 위점막에서 PPARγ mRNA 발현을 PPARγ mRNA가 지방조직 수준으로 발현되는 것으로 알려진 대장암에서의 발현 정도와 비교하기 위하여 5명의 진행 대장암 환자에서 대장내시경 검사 중 2개씩 조직 절편을 채취하여 실시간 중 합효소연쇄반응을 시행하였다.
2. 위내시경검사와 병리조직검사
모든 대상자에서 상부위장관내시경검사 때 전정부와 체 부에서 각각 1개씩 조직 절편을 채취하여 신속요소분해효 소검사(CLOtest, Delta West Pty Ltd., Bentley, Western Aust- railia)를 하였다. 전정부와 체부에서 각각 2개씩 조직 절편 을 채취하여 10% 중성 포르말린에 고정하고 파라핀 포매한 후 5μm로 절단하고 Hematoxyllin-Eosin (H-E) 염색을 시행 하여 관찰하였다. H. pylori에 대해서는 Warthin-Starry 은염 색을 시행하였다. 신속요소분해효소검사와 병리검사에서 모두 H. pylori가 검출되었을 때 양성으로 판정하였다. 각각 의 검체는 내시경검사 결과를 모르는 한 명의 병리의사가 조직 검사를 하였고, H. pylori 감염 정도, 호중구 침윤, 단핵 세포의 침윤, 위축, 장상피화생의 정도를 시드니 분류법에 따라 기술하였다.22 전정부에서 채취한 2개의 조직 절편은 실험이 이루어질 때까지 -70oC에 동결 보관하였다.
74 The Korean Journal of Gastroenterology: Vol. 49, No. 2, 2007
3. 면역조직화학염색과 결과 판정
파라핀 포매조직을 4μm 두께로 박절한 후 probe-on plus slide (Fisher Scientific, Pittsburg, PA, USA)에 부착하여 충분 히 건조시켰다. 탈파라핀과 함수과정을 거친 파라핀 절편은 항원 복구를 위해 0.001 M citrate 완충액(pH 6.0)을 이용해 microwave oven에 15분간 전처리하였다. 조직 내 과산화효 소 작용을 억제하기 위하여 3% H2O2에 10분간 처리한 후 Tris 완충액(pH 7.6)으로 수세하였다. PPARγ (Santa Cruz, CA, California)에 대한 일차항체를 실온에서 120분간 작용 시켰다. Biotin과 결합한 이차항체(labeled streptavidin biotin kit, DAKO, Carpenteria, CA)를 실온에서 10분간 작용시켜 biotin-avidin 특이결합을 유도하고 AEC (3-amino-9-ethyl carbazole, Zymed, South San Fransisco, CA)를 가하여 적색 반응을 확인한 후에 헤마톡실린으로 대조염색을 시행한 뒤 Universial Mount (Research Genetics, Huntsville, AL)로 봉입 하였다. 음성 대조군은 일차항체 대신 mouse IgG1 myeloma protein MOPC-21 (Sigma, St. Louis, MO)를 이용하였다.
PPARγ 발현에 대한 평가는 Inoue 등23의 방법에 따라 염색 강도와 양성세포의 수에 따라 0에서 4+로 구분하였다. 염 색 강도가 항체를 사용하지 않은 경우와 같이 음성이면서 염색 면적의 백분율에 따라 염색이 되지 않으면 0, 1∼25%
는 1+, 26%∼50%는 2+, 51∼75%는 3+, 75% 이상은 4+
로 정의하였다.
4. 실시간 역전사중합효소연쇄반응
동결해 두었던 위 전정부 생검 조직과 대장암 조직을 액 체질소에 담가 급속 냉동시킨 후 막자 사발을 이용하여 조 직들을 파쇄하였다. 파쇄된 조직에 Trizol 용액(Invitrogen, Carlsbad, CA) 1 mL과 200μL 클로로포름(chloloform)을 혼 합한 후 4oC, 12,000 rpm에서 15분간 원심분리하여 상층액 을 얻었다. 분리된 상층액을 RNA isolation kit (Qiagen, Valenica, CA)를 이용하여 총 RNA를 분리한 후, 추출된 총 RNA의 농도를 분광광도계(spectrophotometer, GeneQuant pro, Amersham pharmaceutica Biotech)를 이용하여 측정하였으며, 0.8% 아가로스젤에서 RNA의 상태를 확인하였다. 총 RNA 중 1μg에 50 pmol random 9-mer primer (Rakara, Shifa, Japan;
이하 동일), 10x reverse transcriptase buffer, 20 U RNase inhibitor, 5 mM MgCl2, 1 mM dNTPs 및 5 U AMV reverse transcriptase들을 섞어 42oC에서 1시간 동안 cDNA를 합성하 였다. 각 환자의 위 전정부 생검 조직에서, PPARγ 유전자 발현 정도를 ABI Prism 7000 Sequence Detection System (Applied Biosystems, USA)을 이용하여 정량화하였다. 제조 된 3μL cDNA에 SYBR Green I, Tag polymerase, dNTPs 및 MgCl2 등이 포함된 10X Master Mix (Applied Biosystems,
USA)와 primer를 섞어 20μL 부피로 실시간 정량중합효소 연쇄반응을 수행하였다. PPARγ의 forward primer는 TCTC- TCCGTAATGGAAGACC, reverse primer는 GCATTATGAGA- CATCCCCAC로 하였다. 실험 오차를 줄이기 위해 동일 시 료로 실시간중합효소연쇄반응을 3회 반복 시행하였으며, 이 것의 평균값을 구하여 각각의 발현량을 정량화하였다. β- actin 유전자 발현을 기준으로 하여 생성된 각각의 역치주기 값(threshold cycle value, CT value)들을 표준화하였으며, 이 후 표준화된 이 값을 상대치(relative value)로 환산하였다.
5. 통계 분석
연구에서 얻어진 값들은 모두 평균±표준편차로 표시하 였고, SPSS (ver 11.0, SPSS Inc., Chicago, IL) 통계 프로그램 을 이용하였다. H. pylori 감염 유무에 따른 PPARγ 단백 발 현 정도는 Student’s t-test로 검사하였고, PPARγ 단백 발현 정도와 염증 정도의 상관관계는 피어슨 상관계수를 이용하 였다. H. pylori 감염군과 비감염군, 그리고 대장암군 간의 PPARγ mRNA 발현량 비교와 유의 검정은 ANOVA (analysis of variance)를 이용하여 분석하였으며, 두 군 간의 p값이 0.05 미만인 경우에 유의한 것으로 판정하였다.
결 과
1. 대상 환자들의 특성
대상 환자들의 임상 특성은 Table 1과 같다. H. pylori에 감 염된 환자는 총 18명이었다. 이 중 4명은 활동 위궤양 또는 십이지장 궤양 소견을 보였고, 14명은 위궤양 반흔 또는 십 이지장 궤양 반흔이 관찰되었지만, 주된 내시경 소견을 기 준으로 분류하였다. H. pylori 감염은 신속요소분해효소검사 와 병리 검사에서 모두 H. pylori가 검출되었을 때 양성으로 판정하였으며, H. pylori 감염군에서 신속요소분해효소검
Table 1. Patients Characteristics
H. pylori (+) H. pylori (-)
n 18 21
Sex (M/F) 10/8 10/11 Age (years,
42±9.9 47±12.6 mean±SD)
Diagnosis 12 chronic gastritis 15 normal
2 erosive gastritis 6 superficial gastritis 2 gastric ulcer
2 duodenal ulcer
Son SH, et al. Expression of Peroxisome Proliferator-activated Receptor (PPAR)γ in Helicobacter pylori-infected Gastric Epithelium 75
사와 병리검사는 모두 일치하였다.
2. PPARγ 면역조직화학염색
모든 생검 조직에서 PPARγ는 선와상피세포의 핵에서 발 현되었다. 위암 조직에서 분화도에 상관 없이 암세포 핵에 서 발현되었고, 암조직 주변의 장상피화생이 관찰되는 정상 조직의 상피에서도 발현되었다(Fig. 1). H. pylori 감염군과 비감염군에서 PPARγ 단백 발현 정도를 비교하였을 때 H.
pylori 감염군에서 3.8±0.4, 비감염군에서 2.6±1.0으로 의미 있는 차이를 보였다(p=0.012)(Fig. 2).
H. pylori 감염에 의한 위염 환자에서 위점막 검체의 염증 정도를 시드니 분류법에 따라 분류하였고, 그 염증 정도를 PPARγ 단백 발현과 비교하였다. 만성 염증세포 침윤과 다 형백혈구의 침윤 정도, 위축 변화, 장상피화생과 유의한 상 관관계는 없었다.
3. PPARγ mRNA 발현
39명의 대상 환자 중 RNA 회수가 가능하였던 H. pylori 감염군 15명과 비감염군 10명에서 얻은 위점막 검체를 이용하 였다. 위점막 검체와 대장암 환자 5명에서 얻은 암조직 검체로 실시간 중합효소연쇄반응을 시행하였다. PPARγ mRNA 발현 은 β-actin 유전자 발현을 기준으로 하여 생성된 각각의 역
치주기값(CT value)들을 표준화하였으며, 이후 표준화된 이 값을 상대치로 환산하였다.
PPARγ mRNA 발현은 대장암군(175±47)에서 H. pylori 감염군(24±18)과 비감염군(29±25)에 비하여 유의하게 증가 하였으나(p＜0.05), H. pylori 감염군과 비감염군에서는 유의 한 차이가 없었다(p＞0.05)(Fig. 3).
Fig. 1. Immunohistochemical staining of PPARγ expression in various tissues (×400). (A) Strong nuclear staining is ob- served in foveolar epithelial cells of H. pylori infected pa- tient. (B) Weak nuclear stain- ing is observed in foveolar epi- thelial cells of H. pylori non- infected patient. (C) PPARγ protein is expressed in non- cancerous tissue with intestinal metaplasia. (D) PPARγ immu- noreactivity is predominantly shown in the nucleus of the tumor cells in gastric adenocar- cinoma.
Fig. 2. Comparison between the grade of PPARγ immuno- histochemical staining in H. pylori infected patients and in H.
pylori non-infected patients (H. pylori infected, 3.8±0.4; H.
pylori non-infected, 2.6±1.0; p=0.012).
76 대한소화기학회지: 제49권 제2호, 2007
고 찰
저자 등은 H. pylori 감염이 내인성의 PPARγ 발현에 미 치는 영향을 조사하였다. PPAR는 핵 수용체군의 하나로, 이 중 PPARγ 활성화는 지방세포 분화, 세포자멸사, 인슐린 감 수성 및 포도당 항상성에 중요한 역할을 한다.2
위암에서 PPARγ 역할에 대한 연구를 살펴보면 위암 세 포에서 PPARγ가 발현되며, PPARγ 활성화는 위암 세포 성장을 억제하고 세포자멸사를 유도하였다.12 수술로 얻은 인체 위암 조직에서 면역조직화학염색을 이용하여 PPARγ 단백 발현을 관찰한 또 다른 연구에서는 PPARγ 단백이 위 암 분화도에 관계없이 발현되었고, 위암 조직뿐만 아니라 장 상피화생 조직과 정상 조직에서도 발현되며, PPARγ 배위자 를 위암 세포에 투여하였을 때 농도에 비례하여 증식을 억 제하는 효과가 있었다.13 최근에 PPARγ가 위암 세포 성장 을 억제하는 기전에 대한 연구들이 활발히 진행되고 있는데 c-MET 전사 억제,24 변위 개시(translation initiation) 억제를 통한 G1 세포주기 정지,25프로테아좀 활성도 감소와 p27Kip1 발현 증가에 기인한 G1 세포주기 정지,26cyclin D 발현 감소 와 p27Kip1 발현 증가에 기인한 G1 세포주기 정지 등27을 기 전으로 제시하고 있다.
H. pylori 감염에서 PPARγ의 역할에 대한 실험에서 PPARγ 배위자는 NF-κB를 통해 H. pylori에 의해 유발되는 세포자멸사를 유의하게 감소시켰다.19 이는 PPARγ 활성화 가 조직 형태에 따라 다른 역할을 할 수 있다는 사실을 제 시한다. 따라서 정상 위점막에서는 항염증작용과 세포자멸
사 억제를 통해 보호 작용을 하고 위암 조직에서는 PPARγ 배위자가 세포자멸사를 유도하고 세포 증식을 억제하는 작 용을 한다.
이번 연구에서 H. pylori 감염군은 모두 소화성궤양을 앓 았거나 활동성 소화성궤양 과거에 환자여서 대상군 선정에 비뚤림으로 작용했을 가능성이 있으나, 활동궤양의 환자 수 가 많지 않고 PPARγ 발현에 이용한 조직 생검은 궤양이 없 는 부위에서 시행하였으므로 활동 궤양이 PPARγ 발현에 미치는 영향은 없었을 것이다.
이번 연구에서 H. pylori 감염 유무에 관계없이 PPARγ mRNA 발현에는 차이가 없었다. 그러나 면역조직화학염색 을 이용한 PPARγ 단백 발현이 H. pylori 감염군에서 비감 염군에 비해 유의하게 증가하였다. 일부 환자에서만 RNA 회수가 가능하여 mRNA 발현을 비교하였지만, 두 군 간의 PPARγ 단백 발현에는 유의한 차이가 있었기 때문에 검체 선택의 비뚤림은 없었을 것으로 생각한다. PPARγ 단백 발 현은 H. pylori 감염 유무에 관계없이 모든 검체에서 위점막 의 선와상피세포에서만 관찰되었다. 이러한 결과는 수술로 얻은 인체 위암 조직의 주변 정상 조직과13 쥐에서 위암을 유 발한 후 PPARγ 배위자의 화학예방 효과를 관찰한 Lu 등28의 연구에서도 관찰되었다. 그러나, PPARγ가 림프구를 포함 한 혈구세포에서도 발현되는 것으로 알려져 있는데,5,6 이번 연구에서 사용한 위점막 생검 조직에서는 림프구가 충분히 포함되어 있지 않아 발현이 관찰되지 않았을 가능성을 배제 할 수 없다. PPARγ mRNA와 단백 발현 결과의 차이는 H.
pylori 감염이 내인성의 PPARγ 발현에 대해 전사후 수준 (post-transcriptional level)에서 영향을 미칠 가능성이 있는 것 으로 설명할 수 있다. 그러나 PPARγ가 주로 선와상피세포 에서 발현되므로 생검 조직에서 laser capture microdissec- tion 방법을 이용하여 선와상피세포에서 RNA를 분리하여 PPARγ mRNA 발현을 비교하는 연구가 필요하다.
Cyclooxygenase-2 (COX-2)에 의해 생성된 프로스타글란딘 중 PGD2는 PGJ2, △12-PGJ2를 거쳐 15d-PGJ2를 형성한다. 이 러한 15d-PGJ2는 PPARγ를 활성화시키는 배위자이다. COX-2 는 여러 종류의 소화기암에서 과발현하며, COX-2 발현은 위암의 진행 단계와 관계를 가지고 있어 정상 위점막이나 만 성위염 또는 만성위축성위염에서는 발현하지 않지만 장상피 화생, 형성이상, 장상피형 위선암종에서 발현이 증가하며 위 암의 예후와 밀접한 관련이 있다.29 위암 세포에서 PPARγ 배위자에 의한 PPARγ 수용체 활성화가 세포자멸사를 유도 하고 COX-2 발현 억제를 통해 세포성장 억제를 일으키며,30 H. pylori를 감염시킨 mogolian gerbil에서 대조군에 비해 PPARγ와 COX-2의 발현이 증가되는 것으로 알려져 있어31 COX-2와 PPARγ는 밀접한 관련이 있을 것으로 생각한다.
이번 연구에서 PPARγ와 COX-2의 상관관계를 관찰하지 않 Fig. 3. Expression of PPARγ mRNA. PPARγ mRNA
expression is higher in colon cancer (175±47) compared to H.
pylori infected group (24±18) (p＜0.05) and H. pylori non-infected group (29±25) (p＜0.05). However, there is no significant difference between H. pylori infected group and H.
pylori non-infected group (p＞0.05).
손성현 외 10인. Helicobacter pylori 감염 위점막에서 Peroxisome Proliferator-activated Receptor (PPAR)γ의 발현 77
았지만, 한 연구에서 COX-2와 이의 대사 산물인 PGE2가 위 암 환자의 위암 조직에서 주변 비위암 조직에 비해 현저하게 과발현되었고, 이에 반해 PPARδ, PPARγ와 그의 배위자인 15d-PGJ2의 생성은 상관관계가 없었다.32 이로써 PPARγ와 COX-2는 주된 역할을 하는 단계가 서로 다를 가능성을 생 각해 볼 수 있다.
이번 연구에서 H. pylori 감염에 의한 위염과 소화성궤양 에서 PPARγ 발현과 만성 염증세포 침윤과 다형백혈구 침 윤 정도, 위축 변화, 장상피화생과의 상관성은 유의하지 않 았다. 이는 대상 수가 적었던 것이 중요한 이유라고 생각한 다. 향후 많은 환자를 대상으로 PPARγ 발현과 H. pylori 감 염에 의해 발생하는 여러 병리 소견과의 상관관계를 규명해 야 하며, PPARγ 발현에 따른 세포자멸사 변화 결과를 측정 하여 세포 전환율에 미치는 영향에 대한 연구가 필요하다.
요 약
목적: Peroxisome proliferator-activated receptorγ (PPARγ) 는 핵 전사인자로 염증과 악성종양에 관련된 여러 유전자의 발현을 조절한다. PPARγ는 대장암뿐만 아니라 위암에서도 발현되며, PPARγ 배위자는 암세포의 분화와 세포자멸사를 유도한다. H. pylori의 지속적인 감염은 만성위염과 소화성 궤양을 일으키고, 세포 전환율을 변화시킨다. 또한 H. pylori 는 위암의 주요한 원인 인자이다. 이에 저자들은 H. pylori 감염이 위점막에서 PPARγ 발현에 미치는 영향에 대해 알 아보고자 하였다. 대상 및 방법: 상부위장관내시경검사를 시행한 39명에서 위점막 검체를 얻었다. H. pylori 감염 여부 확인을 위한 신속요소분해효소검사와 조직 검사를 시행하 여 H. pylori 감염 정도와 염증세포들의 침윤 정도를 확인하 였다. 면역조직화학염색을 시행하여 위점막 검체에서 PPAR γ 단백의 발현 위치, 발현 정도와 강도를 확인하였다. 또한 PPARγ의 특이 primer를 이용하여 real time PCR을 시행하 여 mRNA의 발현 정도를 확인하였다. 결과: PPARγ 단백은 선와상피세포의 핵에서 발현되었고, 장상피화생 조직과 위 암 조직에서도 발현되었다. PPARγ 단백 발현은 H. pylori 감염 군에서 3.8±0.4, 비감염군에서 2.6±1.0으로 의미있는 차이를 보였다(p=0.012). PPARγ mRNA 발현은 대장암군에 서 H. pylori 감염군과 비감염군에 비하여 유의하게 증가하 였으나(p＜0.05), H. pylori 감염군과 비감염군에서는 유의한 차이가 없었다(p＞0.05). 결론: H. pylori 감염이 위점막에서 PPARγ 단백 발현을 증가시킴을 확인하였고, PPARγ가 H.
pylori에 의해 유발되는 일련의 염증반응에 중요한 역할을 하는 것으로 생각한다. 추후 이에 대한 더 많은 연구가 필요 하다.
색인단어: Helicobacter pylori,
Peroxisome proliferator-ac- tivated receptor γ
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