The Effects of Acupuncture by Needle Manipulation at LR1, KI1 on the Blood Pressure<br /> in Hypertensive Rat induced by Two Kidney One Clip (2K1C).

⋅교신저자 : 나창수, 동신대학교 한의과대학 경혈학교실, Tel.

061-330-3522, E-mail: [email protected]

⋅본 연구는 한국한의학연구원의 2007년 침구경락연구거점 기반구 축 사업 기초연구의 위탁연구에 의하여 수행되었음.

⋅투고 : 2007/09/02 심사 : 2007/09/05 채택 : 2007/09/10

大敦·湧泉 捻轉 및 迎隨 補瀉手技法이 2K1C에 의하여 誘發된 高血壓 白鼠에 미치는 影響

윤대환¹․한정희²․김선희²․나창수¹

1동신대학교 한의과대학 경혈학교실, ²전북대학교 의학과 생리학교실

The Effects of Acupuncture by Needle Manipulation at LR1․KI1 on the Blood Pressure in Hypertensive Rat induced by Two Kidney One Clip (2K1C).

Dae-Hwan Youn¹, Jeong-Hee Han², Suhn-Hee Kim², Chang-Su Na¹

1Dept. of Meridian and Acupoint, College of Oriental Medicine, Dongshin University

2Department of Physiology, Medical School, Institute for Medical Sciences, Chonbuk National University Abstract

Objectives : The purpose of this study was to examine effects of acupuncture by needle manipulation at LR1․KI1 on the blood pressure, plasma levels of ANP(atrial natriuretic peptide), renin and cardiomegalic index in hypertensive rat induced by two kidney one clip (2K1C).

Material and methods : The groups divided into 7 groups; Control, no treatment. Acu-1, acupuncture at LR1․KI1 bilaterally and the needle was twirled and rotated forward with the thumb of the right hand 6 times. Acu-2, acupuncture at LR1․KI1 bilaterally and the needle was twirled and rotated forward with the forefinger of the right hand 6 times. Acu-3, acupuncture at LR1․KI1 bilaterally and the needle was inserted in the opposite direction(body direction) as the channel runs, Acu-4, acupuncture at LR1․KI1 bilaterally, the needle was inserted in the opposite direction(body direction) as the channel runs and the needle was twirled and rotated forward with the forefinger of the right hand 6 times. The acupuncture treatments by needle manipulation were started on the 4 week after inducing 2K1C, and executed 5times for 2 weeks.

Results : Systolic blood pressure was decreased significantly in Acu-2, Acu-3 and Acu-4. Plasma renin was decreased significantly in Acu-2 and Acu-4. Plasma ANP was increased significantly in Acu-2, however was decreased significantly in Acu-4. Cardiac hypertrophy index was decreased significantly in Acu-1, Acu-2, Acu-3 and Acu-4.

Conclusions : These results suggest that acupuncture by needle manipulation at LR1․KI1 is effective in hypertension by renal blood problem.

Key words : acupuncture, LR1․KI1, 2K1C, hypertension, plasma ANP & renin, cardiac hypertrophy index

Ⅰ. 緖 論

針刺療法은 經絡의 穴位 刺戟을 통해 經

絡 臟腑의 有餘 및 不足의 不均衡狀態를 조 절하는 것으로

¹⁾

, 그 중 四肢肘膝以下에 있 는 井滎輸經合의 다섯 特定穴인 五輸穴을 應用한 鍼刺療法을 五行鍼法이라 한다

^1-3)

.

五行鍼法은 難經의 “瀉南補北”과 “虛則補 其母, 實則瀉其子”의 기본원리에 “虛則抑其

官, 實則補其官”의 원리를 추가하여 정형을 이룬 것으로 補瀉의 개념 또한 중요시하고 있다

⁴⁾

.

고혈압에 대한 실험적 모델로는 Okamoto 등에 의해 제시된 본태성고혈압 실험모형인 spontaneously hypertensive rat (SHR)

⁵⁾

, 병 태생리학적으로, renin-angiotensin system (RAS)의 변동, 말초 혈관 저항성의 변동, 자율신경계의 변조, vasopressin 농도의 변 동, kallikrein-kinin계 및 prostaglandin계의 변동 등 다수가 연구되어지고 있다

⁶⁾

. 이 중 2kidney 1clip(2K1C) 모델은 RAS에 의해 혈압이 급격히 하강할 때 사구체여과율을 유지하여 혈압을 상승시키는 기전을 응용하 였다

⁷⁾

.

최근 2K1C 고혈압에 대한 최근 刺鍼연구 로는 문등

⁸⁾

은 心實證에 응용하는 太白·神門 과 腎實證에 大敦·湧泉에 竹茹藥鍼 5회 處 置가 수축기 혈압․심장비대지수, 혈장 ANP(atrial natriuretic peptide) 및 renin 등 에서 유의한 효과가 있음을 보고하였고, 박 등

⁹⁾

은 肝實證에 응용하는 行間․少府와 大 敦․少府의 鍼刺 전후 혈압변화에서 혈압과 혈장 ANP의 유의한 효과를 보고하였으나, 大敦·湧泉에 대한 침자 연구는 현재까지 이 루어지지 않았다.

이에 본 연구에서 실험적으로 유발된 2K1C 고혈압 동물 모델에 대하여 腎實證에 활용되는 腎勝格 穴位 중 ‘實則瀉其子’의 穴 位인 大敦·湧泉을 취하여 捻轉 및 迎隨補瀉 法에 따른 혈압 변동, 혈장 renin, ANP 및 심장비대지수를 비교 관찰한 바 다음과 같 은 지견을 얻었다.

Ⅱ. 재료 및 방법 1. 실험 재료

1) 동물

체중이 약 180～200g의 Sprague Dawley계 의 白鼠를 사육장(실내온도, 24～26℃)내에 서 물과 사료를 충분히 섭취하게 하면서 사 육하였다가 실험에 사용하였다.

2. 실험 방법

1) 2 Kidney, 1 Clip(2K1C) 고혈압 유발

고혈압을 유발시키기 위하여 白鼠를 대상 으로 Entobar

^TM

(pentobarbital sodium, 50

㎎/㎏)를 복강 내 주사하여 마취시킨 후 복 부를 절개하여 왼쪽 신동맥을 노출시켜 주 위 조직들을 깨끗이 제거한 다음 간격이 0.2

㎜되는 silver clip을 신동맥에 끼워 넣고 봉 합하였다. 수술 4주 후에 혈압을 측정하여 수축기 혈압이 150㎜Hg 이상인 경우를 고혈 압 백서로 사용하였다.

2) 군 분리

모든 군은 2K1C 방법으로 수술을 시행하 여 4주 후 고혈압이 유발된 상태를 확인하였 으며, 이후 대조군(Control, n=5)은 침자를 시행하지 않은 군이고, 大敦·湧泉 拇指向前 捻轉 手技群(Acu-1, n=5)은 大敦·湧泉에 침 자한 후 拇指向前(시계방향)으로 6회 捻轉 手技한 군이고, 大敦·湧泉 食指向前 捻轉 手

技群(Acu-2, n=5)은 大敦·湧泉에 침자한 후 食指向前(반시계방향)으로 6회 捻轉 手技한 군이고, 大敦·湧泉 迎隨 瀉法 手技群(Acu-3, n=5)은 大敦·湧泉에 경락 반대 방향인 발가 락 방향으로 침자한 군이고, 大敦·湧泉 迎隨

瀉法․食指向前 捻轉 手技群(Acu-4, n=5)은 大敦·湧泉에 경락 반대 방향인 발가락 방향 으로 침자한 후 食指向前(반시계방향)으로 6 회 捻轉 手技한 군이며, 이와 같이 5개 군으 로 군을 분리하여 실험 하였다(Table 1).

군분류 내용 2K1C 고혈압 유발 유발 후 처치 내용

(Control)대조군 2K1C 방법으로 수술을 시행하여 4주

후 고혈압 유발 확인 침자를 시행하지 않은 군

大敦·湧泉 拇指向前

捻轉 手技群 (Acu-1) 2K1C 방법으로 수술을 시행하여 4주

후 고혈압 유발 확인 大敦·湧泉에 침자한 후 拇指向前(시계방

향)으로 6회 염전 手技를 시행함 大敦·湧泉 食指向前

捻轉 手技群 (Acu-2) 2K1C 방법으로 수술을 시행하여 4주

후 고혈압 유발 확인 大敦·湧泉에 침자한 후 食指向前(반시계

방향)으로 6회 手技를 시행함 大敦·湧泉 迎隨 瀉法

手技群 (Acu-3) 2K1C 방법으로 수술을 시행하여 4주

후 고혈압 유발 확인 大敦·湧泉에 경락 반대 방향인 발가락

방향으로 침자를 시행함 大敦·湧泉 迎隨

瀉法․食指向前 捻轉 手技群 (Acu-4)

2K1C 방법으로 수술을 시행하여 4주 후 고혈압 유발 확인

大敦·湧泉에 경락 반대 방향인 발가락 방향으로 침자한 후 食指向前(반시계방 향)으로 6회 手技를 시행함

Table 1. Distribution of Groups

3) 취혈 및 침자

大敦(LR1)은 lower limb의 1st distal phalanx의 nail의 lateral side에 취하였고, 용천(KI1)은 hind-limb의 sole부위에서 2번 째와 3번째 phalanges가 만나는 곳과 발뒤꿈 치를 이은 가상선에서 전방 1/3지점으로 취 하여, 모두 인체에 상응하는 부위로 정하였 다. 鍼刺는 2K1C 수술 후 4주째에 고혈압이 유발된 白鼠를 선별하고 난 후, 4½, 5, 5½, 6, 6½주째에 각각 1회씩 白鼠의 양측의 穴位에 30초 동안 각 군별로 침자 수기법을 시행하 였다. 鍼은 毫鍼(No.3-0.5, haenglim, Korea) 을 이용하였으며, 鍼刺 深度는 피하를 통과 하여 捻轉 및 迎隨 手技法 시행이 가능할

수 있는 정도의 깊이로 하였다. 침자 手技法 시행은 전 실험기간 동안 숙련된 전문가 1 인이 계속하여 시술하였다.

4) 혈압 측정

백서의 혈압 변동 관찰은 non-invasive blood pressure 측정기인 rat tail blood pressure system(RTBP2003, WPI, USA)을 활 용하여 관찰하였다. 백서를 animal warming restrainer에 넣고, 백서의 tail에 piezoelectric pulse sensor와 occlusion cuff를 위치시킨 다 음 컴퓨터에 연결된 pulse signal의 size가 적당한 정도로 관찰되면, 이때 기기를 작동 시켜 수축기 혈압을 관찰하였다. 혈압의 측

정은 2K1C 유발 후 4주째에는 침자를 시행 하지 않고 혈압을 측정하였고, 4½, 5, 5½, 6, 6½주째에는 먼저 침자를 시행하고 1시간 후 에 혈압을 각각 측정하였다.

5) Plasma Renin 측정

각 군들의 백서들을 단두한 후 혈액 5㎖를 얻었으며, 혈액 채취시 tube에 EDTA(50㎎/

㎖) 100㎕를 넣고 원심 분리하여 plasma를 분 리하였다. Angiotensinogen(renin substrate) 은 maleate buffer(1.5M, pH5.88) 50㎕, 8- Hydroxyquinoline(3.4mM) 10㎕, neomycin sulf-ate(20%) 10㎕, phenylmethylsulfonyl- fluoride(PMSF 305mM) 10㎕, plasma 200

㎕, D․W 170㎕로 만들었다. Renin의 radioimmuno assay는 plasma 50㎕에 450㎕

substrate (angiotensinogen)를 넣은 후 37℃

에서 3시간정도 incubation하였다.

Incubation된 시료는 4℃에 보관하였다. 시 료 50㎕에 renin buffer 50㎕, AI* tracer 100

㎕, AI․Ab 100㎕를 넣고 4℃에서 24시간 incubation 후, charcoal 1㎖을 넣고 3,000 rpm 15분간 원심분리 후 gamma counter (COBRA, Packard, USA)로 radioactivity를 측정하였다.

6) Plasma ANP 측정

각 군들의 백서들을 단두한 후 혈액 5㎖를 얻었으며, 혈액 채취시 tube에 anticoagulant

＆ converting inhibitor(EDTA 50㎎/㎖) 100

㎕, proteolytic enzyme inhibitor mixture (Soybean trypsin inhibitor:SBTI 50units/ml,

Aprotinin 200KIU/㎖, Phenylmethylsulfonylfluoride:

PMSF 600M/ml) 100㎕를 넣고 4℃상태를 유지하였다. Blood는 4℃에서 3500rpm으로 20분간 원심 분리 후 상층액을 분리하여 1

㎖ plasma를 준비하였다.

Sep-Pak C

18

Cartridge(Waters Associates, Milford, MA, USA)에 100% acetonitrile 5㎖를 syringe로 통과시킨 후 0.1% TFA (Trifluoroacetic acid) 5㎖로 통과시키고 plasma 1㎖을 천천히 통과시킨 후, 0.1%

TFA(Trifluoroacetic acid) 5㎖를 통과시키고 60% acetonitrile 2㎖을 천천히 통과시켜 tube 에 sample을 받아 Speed Vaccum으로 완전히 건조시켰다. 건조된 tube에 ANP buffer 150㎕

를 넣고 4℃에서 10분 정도 incubation후, 4℃

에서 10,000rpm 5분간 원심분리해서 상층액 100㎕를 tube에 분리해 ANP Ab 100㎕를 넣고 4℃에서 24시간 incubation 후, ANP tracer 100㎕를 넣고 4℃에서 24시간 incubation 후 Charcoal 1㎖을 넣고 3000 rpm 15분간 원심분 리 후 gamma counter(COBRA, Packard, USA)로 radioactivity를 측정하였다.

7) 체중 및 심장비대지수 측정

각 군들의 백서들은 고혈압 유발 후 6½주째 에 5회의 처치가 끝난 후 체중을 측정하였고, 단두한 후 심장을 적출하였으며, 적출 후 심장 에 연결된 혈관과 근막 등과 혈흔을 각 흰쥐 에게 동일한 정도로 제거한 후 balance(Metler toledo, d=0.1mg, Switzerland)로 무게를 측정 하였다. 심장비대지수는 측정된 심장무게를 체중으로 나누어 심장비대지수를 산출하였 다. 이에 관한 식은 다음과 같다.

Cardiac hypertrophy

index = Heart Weight

× 1,000 Body Weight

3. 통계처리

모든 측정값은 Excel statistic program (Excel 2002, Microsoft)을 이용하여 평균치와 표준오차(mean±SE)로 표시하였고, 각 실험 군 간의 통계학적 분석은 Windows용 SPSS(ver10.0.5, SPSS)을 사용하여 비모수적 방법으로 Mann-Whitney U test를 시행하였 다. 각 실험군은 대조군에 비하여 α〓0.05 수 준 (P<0.05)과 α〓0.01 수준 (P<0.01)에서 유 의성을 검정하였으며, 다만 0.1<α<0.05인 경우 에는 한계적으로 유의한 경우로 검정하였다.

Ⅲ. 結 果 1. 혈압 변화에 미치는 효과

2K1C로 고혈압을 유발시킨 백서에게 大 敦·湧泉 혈위에 수기법에 따라 침자를 시행 하여 혈압변화를 관찰한 결과, 대조군에 있 어서는 시간의 경과에 따라 0, 1, 2, 3, 4, 5회 째에 수축기 혈압이 각각 160.4±2.81mmHg, 159.2±1.86mmHg, 166.8±5.60mmHg, 169.4±6.07mmHg, 176.2±7.32mmHg, 176.0±7.69mmHg로 증가하 는 경향을 보였으며, 이에 비하여 수기법에 따라 침자한 각 실험군들은 시간의 경과에 따라 대조군에 비하여 수축기 혈압이 상승

의 폭이 줄어들거나 하강하는 경향을 보였는 데, 大敦·湧泉 食指向前 捻轉 手技群인 Acu-2 군의 5회째에 151.4±4.69mmHg (P<0.05)를 보 여 유의한 감소를 나타내었고, 大敦·湧泉 迎 隨 瀉法 手技群인 Acu-3군의 4회째에 154.8±4.00mmHg(0.1<P<0.05)를 보여 한계적 으로 유의한 감소를 나타내었고, 大敦·湧泉 迎隨 瀉法․食指向前 捻轉 手技群인 Acu-4 군의 5회째에 156.8±3.87mmHg (0.1<P<0.05) 를 보여 한계적으로 유의한 감소를 나타내 었다(Table 2, Fig. 1).

0회째를 베이스라인으로 삼아 각 회차별 변화를 백분율로 나타내었을 시에 대조군에 서는 0회째인 100%에 비하여 1회째에 99.3±1.05%, 2회째에 104.0±3.02%, 3회째에 105.6±3.32%, 4회째에 109.8±4.31%, 5회째에 109.6±4.21%를 각각 보여 혈압 상승이 지속 됨을 나타내었으며, 鍼刺 및 捻轉手技가 시 행된 각 군에서는 대조군에 비하여 혈압의 상승 폭이 줄어들거나 감소하는 경향을 보 다 분명하게 확인할 수 있었으며, 즉 大敦·

湧泉 拇指向前 捻轉 手技群인 Acu-1군에서 2회째에 94.2±2.76%(P<0.05), 大敦·湧泉 食 指向前 捻轉 手技群인 Acu-2군에서 5회째에 92.2±3.06%(P<0.01), 大敦·湧泉 迎隨 瀉法 手技群인 Acu-3군에서 4회째에 92.4±4.69

%(P<0.05), 大敦·湧泉 迎隨 瀉法․食指向前 捻轉 手技群인 Acu-4군에서 2회째에 94.2±2.76%(P<0.05) 및 5회째에 95.5±4.47

%(P<0.05)를 나타내어 혈압이 유의하게 감소 함을 나타내었다(Table 3, Fig. 2).

Times

Group 0 1 2 3 4 5

Control 160.4±2.81 159.2±1.86 166.8±5.60 169.4±6.07 176.2±7.32 176.0±7.69 Acu-1 166.2±10.76 163.0±5.69 155.8±6.57 176.8±9.10 161.6±7.01 166.4±5.69 Acu-2 165.0±7.78 160.2±4.18 169.6±8.81 167.4±5.64 172.2±10.24 151.4±4.69*

Acu-3 169.2±9.22 171.8±7.31 159.2±1.15 164.6±5.52 154.8±4.00(*) 178.2±5.60 Acu-4 166.2±10.7 163.0±6.73 155.8±7.77 167.8±5.01 161.6±8.30 156.8±3.87(*) Table 2. Changes of systolic blood pressure on acupuncture by needle manipulation at LR1․KI1 in

2K1C rats.

100 120 140 160 180 200 220 240

0 1 2 3 4 5

Control Acu-1

Acu-2 Acu-3

Acu-4

(*) (*)

*

Sy st ol ic B lo od P re ss ur e (m m Hg )

Acupuncture Treatment (Times)

Fig. 1. The fluctuation of systolic blood pressure on acupuncture by needle manipulation at LR1-KI1 in 2K1C rats for 2 weeks.

The treatments were started on the 4 week after inducing 2K1C. Control, no treatment. Acu-1, acupuncture at LR1․KI1 bilaterally and the needle was twirled and rotated forward with the thumb of the right hand 6 times.

Acu-2, acupuncture at LR1․KI1 bilaterally and the needle was twirled and rotated forward with the forefinger of the right hand 6 times. Acu-3, acupuncture at LR1․KI1 bilaterally and the needle was inserted in the opposite direction(body direction) as the channel runs, Acu-4, acupuncture at LR1․KI1 bilaterally, the needle was inserted in the opposite direction(body direction) as the channel runs and the needle was twirled and rotated forward with the forefinger of the right hand 6 times. 0,1,2,3,4,5 times mean 4, 4½, 5, 5½, 6, 6½weeks.

Results are shown as means ± S.E. (*) 0.1<P<0.05, * P<0.05, as compared with the corresponding data of control group.

Times

Group 0 1 2 3 4 5

Control 100.0±0.00 99.3±1.05 104.0±3.02 105.6±3.32 109.8±4.31 109.6±4.21 Acu-1 100.0±0.00 98.7±2.97 94.2±2.76^* 107.3±6.31 98.5±7.41 101.3±5.65 Acu-2 100.0±0.00 97.5±2.20 102.9±4.43 101.8±3.00 104.3±5.07 92.2±3.06^**

Acu-3 100.0±0.00 101.8±2.92 95.4±6.24 97.9±3.65 92.4±4.69^* 106.1±4.58 Acu-4 100.0±0.00 98.7±2.97 94.2±2.76^* 102.3±5.99 98.5±7.41 95.5±4.47^* Table 3. Percent change of systolic blood pressure on acupuncture by needle manipulation at LR1․KI1

in 2K1C rats.

60 70 80 90 100 110 120 130 140

0 1 2 3 4 5

Control Acu-1

Acu-2 Acu-3

Acu-4

Acupuncture Treatment (Times)

Sy st ol ic B lo od P re ss ur e (% b as el in e)

*

*

**

* *

Fig. 2. The percent fluctuation of systolic blood pressure on acupuncture by needle manipulation at LR1-KI1 in 2K1C rats for 2 weeks.

The treatments were started on the 4 week after inducing 2K1C. Control, no treatment. Acu-1, acupuncture at LR1․KI1 bilaterally and the needle was twirled and rotated forward with the thumb of the right hand 6 times. Acu-2, acupuncture at LR1․KI1 bilaterally and the needle was twirled and rotated forward with the forefinger of the right hand 6 times. Acu-3, acupuncture at LR1․KI1 bilaterally and the needle was inserted in the opposite direction(body direction) as the channel runs, Acu-4, acupuncture at LR1․KI1 bilaterally, the needle was inserted in the opposite direction(body direction) as the channel runs and the needle was twirled and rotated forward with the forefinger of the right hand 6 times. 0,1,2,3,4,5 times mean 4, 4½, 5, 5½, 6, 6½weeks. Results are shown as means ± S.E.

** P<0.01, * P<0.05, as compared with the corresponding data of control group.

2. Plasma renin에 미치는 효과

2K1C로 고혈압을 유발시킨 백서에게 大 敦·湧泉 혈위에 수기법에 따라 침자를 시행 하여 plasma renin에 미치는 영향을 비교 관 찰한 결과, 대조군에서는 47.2±0.78(ng*100/

㎖), Acu-1군은 48.6±3.60(ng*100/㎖), Acu-2 군은 41.4±2.16(ng*100/㎖), Acu-3군은 44.3±1.38 (ng*100/㎖), Acu-4군은 44.5±0.82(ng*100/

㎖)를 나타내었다. 즉 대조군에 비하여 大 敦·湧泉 食指向前 捻轉 手技群인 Acu-2군과 大敦·湧泉 迎隨 瀉法․食指向前 捻轉 手技 群인 Acu-4군에서 유의한 감소(P<0.05)를 보였다(Fig. 3).

3. Plasma ANP에 미치는 효과

2K1C로 고혈압을 유발시킨 백서에게 大 敦·湧泉 혈위에 수기법에 따라 침자를 시행 하여 plasma ANP에 미치는 영향을 비교 관찰한 결과, 대조군에서는 4.3±0.30(ng*100/

㎖), Acu-1군은 5.0±0.87(ng*100/㎖), Acu-2 군은 7.5±1.11(ng*100/㎖), Acu-3군은 3.3±0.66 (ng*100/㎖), Acu-4군은 1.5±0.24(ng*100/

㎖)를 나타내었다. 즉 대조군에 비하여 大 敦·湧泉 食指向前 捻轉 手技群Acu-2군 (P<0.05)에서 유의한 증가를, 大敦·湧泉 迎 隨 瀉法․食指向前 捻轉 手技群인 Acu-4군 (P<0.01)에서 유의한 감소를 보였다(Fig. 4).

0 10 20 30 40 50 60

Control Acu-1 Acu-2 Acu-3 Acu-4

Plasma Renin (ng*100/ml) * *

Fig. 3. Effect of acupuncture by needle manipulation at LR1

․KI1 on the plasma renin in experimental

hypertensive rats-induced by 2K1C.

The treatments were started on the 4 week after inducing 2K1C. Control, no treatment. Acu-1, acupuncture at LR1․KI1 bilaterally and the needle was twirled and rotated forward with the thumb of the right hand 6 times. Acu-2, acupuncture at LR1․ KI1 bilaterally and the needle was twirled and rotated forward with the forefinger of the right hand 6 times. Acu-3, acupuncture at LR1․KI1 bilaterally and the needle was inserted in the opposite direction(body direction) as the channel runs, Acu-4, acupuncture at LR1․KI1 bilaterally, the needle was inserted in the opposite direction(body direction) as the channel runs and the needle was twirled and rotated forward with the forefinger of the right hand 6 times. 0,1,2,3,4,5times mean 4, 4½, 5, 5½, 6, 6½weeks. Results are shown as means ± S.E. * P

<0.05, as compared with the corresponding data of control group.

0.0 2.0 4.0 6.0 8.0 10.0

Control Acu-1 Acu-2 Acu-3 Acu-4

Plasma ANP(ng*100/ml)

*

**

Fig. 4. Effect of acupuncture by needle manipulation at LR1․KI1 on the plasma ANP in experimental hypertensive rats-induced by 2K1C.

The treatments were started on the 4 week after inducing 2K1C. Control, no treatment. Acu-1,

acupuncture at LR1․KI1 bilaterally and the needle was twirled and rotated forward with the thumb of the right hand 6 times. Acu-2, acupuncture at LR1․ KI1 bilaterally and the needle was twirled and rotated forward with the forefinger of the right hand 6 times. Acu-3, acupuncture at LR1․KI1 bilaterally and the needle was inserted in the opposite direction(body direction) as the channel runs, Acu-4, acupuncture at LR1․KI1 bilaterally, the needle was inserted in the opposite direction(body direction) as the channel runs and the needle was twirled and rotated forward with the forefinger of the right hand 6 times. 0,1,2,3,4,5times mean 4, 4½, 5, 5½, 6, 6½weeks. Results are shown as means ± S.E. ** P

<0.01, * P<0.05, as compared with the corresponding data of control group.

4. 심장비대지수에 미치는 효과

2K1C로 고혈압을 유발시킨 백서에게 大 敦·湧泉 혈위에 수기법에 따라 침자를 시행 하여 심장비대지수에 미치는 영향을 비교 관찰한 결과, 대조군에서는 4.0±0.26(index), Acu-1군은 3.1±0.19(index), Acu-2군은 3.1±0.06 (index), Acu-3군은 3.2±0.12(index), Acu-4 군은 3.2±0.06(index)를 나타내었다. 즉 대조 군에 비하여 大敦·湧泉 拇指向前 捻轉 手技 群인 Acu-1군, 大敦·湧泉 食指向前 捻轉 手 技群인 Acu-2군, 大敦·湧泉 迎隨 瀉法 手技 群인 Acu-3군, 大敦·湧泉 迎隨 瀉法․食指向 前 捻轉 手技群인 Acu-4군 모두에서 유의한 감소(P<0.05)를 보였다(Fig. 5).

0.0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0

Control Acu-1 Acu-2 Acu-3 Acu-4

*

Cardiac Hypertrophy Index (Heart weight/body weight x 1,000)

* * *

Fig. 5. Effect of acupuncture by needle manipulation at LR1-KI1 on the cardiac hypertrophy index in experimental hypertensive rats-induced by 2K1C.

The treatments were started on the 4 week after inducing 2K1C. Control, no treatment. Acu-1, acupuncture at LR1․KI1 bilaterally and the needle was twirled and rotated forward with the thumb of the right hand 6 times. Acu-2, acupuncture at LR1․KI1 bilaterally and the needle was twirled and rotated forward with the forefinger of the right hand 6 times.

Acu-3, acupuncture at LR1․KI1 bilaterally and the needle was inserted in the opposite direction(body direction) as the channel runs, Acu-4, acupuncture at LR1․KI1 bilaterally, the needle was inserted in the opposite direction(body direction) as the channel runs and the needle was twirled and rotated forward with the forefinger of the right hand 6 times.

0,1,2,3,4,5times mean 4, 4½, 5, 5½, 6, 6½weeks.

Results are shown as means ± S.E. * P<0.05, as compared with the corresponding data of control group.

Ⅳ. 考 察

五輸穴은 十二正經의 四肢肘膝以下에 각 井滎輸經合의 다섯 가지 특정 兪穴들을 약 칭하는 것으로 四支末端으로부터 肘膝방향 으로 배열하여 있고 그 脈氣는 小에서 大로, 淺部에서 深部로, 遠位에서 近位로 진행되어

‘所出爲井 所溜爲滎 所主爲兪 所行爲經 所入 爲合’의 특징을 가지고 있으며

⁴⁾

, 五行學說과 結合되어 木火土金水 風熱濕燥寒의 性質을 가지게 되여 서로 相生相克함으로써 경락기

능을 조절한다

¹⁰⁾

.

五輸穴을 응용한 五行鍼法은 明代의 高武 는 《鍼灸聚英》에서 相生關係에 따라 自經 내의 五輸穴의 五行의 穴性에 따라 取穴하 는 自經補瀉法을 최초로 서술하였고 張世賢 은 《校訂圖註難經》에서 相生關係에 따른 五輸穴의 取穴法을 他經까지 확대하였으며, 이를 조선 중기에 舍巖에 의해 難經 등에 의거하여 더욱 발전되었다. 이는 陰陽五行의 원리에 입각하여 自經과 他經 補瀉法을 相 生關係 뿐만 아니라 相剋關係까지 결합시킨 鍼法으로 虛則補하는데 自經의 母穴과 母經 의 母穴을 補하고 해당 經의 賊邪가 되는 賊性經의 賊性穴과 해당 경의 賊性穴을 瀉 하고, 實則瀉하는데 自經의 賊性穴과 賊性經 의 賊性穴을 補하고 自經의 自性穴과 自經 의 自性穴을 瀉하게 된다.

¹¹⁾

본 연구에서 응용된 五輸穴은 大敦·湧泉 으로, 大敦은 足厥陰肝經의 井穴로 疏泄厥 氣, 調經和營, 理下焦, 回厥逆, 淸神志 등의 穴性을 가지고 있고, 湧泉은 足少陰腎經의 井穴로 回陽九針穴 중의 하나이며, 淸腎熱 降陰火 安神志, 疏厥逆의 穴性을 가지고 있 어, 五行鍼法에서는 腎實證에 응용되는 腎勝 格을 구성하는 穴位들 중의 하나이다

¹²⁾

. 즉 腎臟 계통의 鬱症으로 오는 頭痛, 眩暈, 高 血壓, 耳鳴, 耳聾 등의 氣逆證에 응용될 수 있다.

더불어 五行鍼法은 “虛者補其母, 實者瀉其 者”의 이론을 바탕으로 五行의 특성을 이용 하여 각 經絡 臟腑를 조절하므로 이에 혈위 자극방법인 補瀉法의 개념이 중요시 되고 있다

^13,14)

.

補瀉法은 虛實을 철저하게 파악하여, 虛할 때 自經의 母穴과 母經의 母穴을 補하고 해 당 經의 賊邪가 되는 賊性經의 賊性穴과 해 당 경의 賊性穴을 瀉하여 체내의 각 기능을 회복시키고, 實할 때는 自經의 賊性穴과 賊 性經의 賊性穴을 補하고 自經의 自性穴과 自經의 自性穴을 瀉하여 병사를 정상적인 생리상태로 회복시키는 방법이다

^11,12)

.

補瀉法에는 鍼向, 手技法, 刺入順序 및 方 法 등에 따라 여러 가지 종류가 있지만 흔 히 迎隨補瀉, 捻轉補瀉, 九六補瀉가 임상에 서 함께 응용되고 있는데, 현재까지도 그 효 과와 방법이 여러 연구에 의하여 보고되어 있지만 그에 대한 일관성은 미흡한 실정이 다.

본 연구에서 사용된 고혈압에 대한 실험 적 모델은 renin-angiotensin system(RAS)에 작용하는 혈압조절기전을 이용하는 것으로 renal artery의 혈류 감소를 통하여 혈압상 승을 유도하였다. 이는 혈압이 급격히 하강 할 때 사구체여과율을 유지하는 기전으로

⁷⁾

신장에서 생성되는 단백질분해효소인 renin은 간장에서 만들어진 혈중의 angiotensinogen을 분해하여 angiotensinⅠ을 만들고 혈중의 converting enzyme는 이를 angiotensin Ⅱ로 만드는데 angiotensin Ⅱ는 모세혈관을 수축 시켜 혈압을 상승시킨다

^7,15)

.

본 연구에서 2K1C에 의해 실험적으로 유 발된 고혈압은 腎의 鬱症로 인한 氣逆證으 로 생각할 수 있어, 舍岩鍼法의 腎勝格 중

‘實則瀉其子’의 穴位인 大敦·湧泉을 취하여 捻轉 및 迎隨補瀉 手技法에 따른 강압 작용 을 침자 기간(횟수)별 혈압 변동을 관찰하

였고, 아울러 혈장 renin, ANP 및 심장비대 지수를 비교 관찰 하였다.

혈압 변동을 手技法에 따라 침자하여 치 료한 기간(횟수)별로 관찰한 결과 대조군에 비하여 각 실험군들은 수축기 혈압이 상승 의 폭이 줄어들거나 하강하는 경향을 보였 는데, 특별히 大敦·湧泉 食指向前 捻轉 手技 群(Acu-2군) 5회째, 大敦·湧泉 迎隨 瀉法 手 技群(Acu-3군)의 4회째, 그리고 大敦·湧泉 迎隨 瀉法․食指向前 捻轉 手技群(Acu-4군) 의 5회째에 각각 유의한 감소를 보여 사법 으로 적용한 수기법에 있어서 각각 의미있 는 감소가 유도되었음을 나타내고 있다.

한편 2K1C에 의하여 유도된 백서들 각각 은 수축기 혈압 초기의 베이스라인 값이 약 간의 차이를 보일 수 있음은 주지의 사실이 다. 이에 수축기 혈압 초기의 베이스라인 값 을 기준으로 하여 치료한 기간(횟수)별 변 화 값을 퍼센트로 환산하여 나타내어 보았 을 시에 역시 대조군에 비하여 각 실험군들 은 수축기 혈압이 상승의 폭이 둔화되고 하 강하는 경향을 보다 분명하게 볼 수 있었으 며, 또한 유의성을 검증하였을 시에도 각 실 험군 모두 치료 기간에 따라 일정하게 유의 한 상태를 나타내었는데, 즉 大敦·湧泉 拇指 向前 捻轉 手技群(Acu-1군)의 2회째 -5.8%(P<0.05), 大敦·湧泉 食指向前 捻轉 手 技群(Acu-2군)에서 5회째에 -7.8%(P<0.01), 大敦·湧泉 迎隨 瀉法 手技群(Acu-3군)의 4 회째에 -7.6%(P<0.05), 大敦·湧泉 迎隨 瀉 法․食指向前 捻轉 手技群(Acu-4군)의 2회 째에 -5.87%(P<0.05) 및 5회째에 -4.5%

(P<0.05)를 나타내어 각 실험군 모두 수축

기 혈압이 유의하게 감소하였으며, 이에 鍼 刺의 手技法은 일정하게 혈압을 낮추는 작 용을 발휘함을 알 수 있었다. 그러나 大敦·

湧泉 拇指向前 捻轉 手技群(Acu-1군)의 경 우 비교적 초기에 해당하는 2회째에만 혈압 감소가 유도되었고 이후 상승의 경향을 나 타낸 것으로 보아 그 효과가 일시적이었다 고 생각된다. 따라서 大敦·湧泉 穴位에 手技 法 중 食指向前 捻轉 手技法, 迎隨 瀉法 그 리고 食指向前 捻轉․迎隨 瀉法을 시행한 경우가 수축기 혈압을 下降시키는 작용이 좀더 효과적으로 발현된 것으로 추론된다.

혈장 renin의 변화에서도 대조군에 비하여 大敦·湧泉 食指向前 捻轉 手技群(Acu-2군) 과 大敦·湧泉 迎隨 瀉法․食指向前 捻轉 手 技群(Acu-4군)에서 유의한 감소를 보였는 데, 이는 혈압강하 효과와 함께 일치된 결과 로 大敦·湧泉 穴位에 手技法 중 食指向前 捻轉 手技法, 그리고 食指向前 捻轉․迎隨 瀉法手技法에 의하여 시술된 침자가 RAS에 영향을 미쳐 renin을 감소시킴을 의미한다고 사료된다. 즉 실험군 중 Acu-2군과 Acu-4군 에서 주요하게 감소함을 나타낸 것으로 보 아 大敦·湧泉에 침자한 경우 瀉法을 시행함 이 혈압을 하강하는 작용이 좀더 효과적으 로 발휘될 수 있음을 시사하고 있으며, 또한 捻轉 사법 수기법이 보다 주요함을 나타낸 다고 사료된다.

혈장 ANP(atrial natriuretic peptide)는 1981년 De Bold에 의해 처음 발견된 물질로 심방세포에서 분비되는 28개의 아미노산으 로 구성된 분자인데 이는 강한 이뇨와 Na

⁺

배설항진, 혈압강하 작용이 있으며,

angiotensinⅡ에 의해 유리되는 aldosterone 의 분비 차단에 의해서 수분저류를 억제하 고 신장으로부터의 renin 분비억제, 혈관이 완 작용을 한다. 즉 심방에서 분비되는 혈장 ANP는 고혈압의 발생과 유지에 중요한 기 전인 renin-angiotensin 계와는 반대의 역할 을 한다고 볼 수 있다

^7,16)

. 본 연구에서 혈장 ANP 변화에 미치는 영향을 관찰한 결과, 대조군에 비하여 大敦·湧泉 食指向前 捻轉 手技群(Acu-2군)에서 유의한 증가를 보여 혈압 강하의 작용을 발휘함을 나타내어 혈 압변동과 혈장 renin의 결과와 일치되는 결 과를 나타내었다. 그러나 대조군에 비하여 大敦·湧泉 迎隨 瀉法 手技群(Acu-3)에서는 감소 경향을, 大敦·湧泉 迎隨 瀉法․食指向 前 捻轉 手技群(Acu-4군)에서는 오히려 유 의하게 감소함을 보여 반대의 작용이 발현 시킴을 나타내었는데, Acu-3군과 Acu-4군은 迎隨 瀉法이 시행된 경우로서 大敦·湧泉에 迎隨 瀉法 手技法이 시행될 시 혈장 ANP의 감소 작용을 발휘하는 것으로 사료되며, 추 후 이에 대하여서는 추적 연구가 필요할 것 으로 사료된다.

심장비대는 고혈압이나 폐동맥 협착증, 대 동맥 협착증 등 심판막 질환이 있을 때 나 타나며 특히 고혈압 환자에게는 대동맥의 높은 압력에 대항하여 좌심실이 비대해지는 경우가 많으며

¹⁷⁾

, neutral endopeptidase 억 제제를 고혈압 백서에 투여하였을 시 혈압 이 강하되며 ventricular mass와 cardiac fibrosis가 감소된다

¹⁸⁾

. 본 연구에서 심장비대 지수에 미치는 영향을 관찰한 결과 大敦·湧 泉 拇指向前 捻轉 手技群(Acu-1), 大敦·湧泉

食指向前 捻轉 手技群(Acu-2), 大敦·湧泉 迎 隨 瀉法 手技群(Acu-3) 그리고 大敦·湧泉 迎隨 瀉法․食指向前 捻轉 手技群(Acu-4) 모두에서 유의한 감소를 나타내어 大敦·湧 泉에 手技法을 시행할 시에 혈압 상승으로 인한 부담이 가중된 심장을 안정화시키는 작용이 발휘되는 것으로 사료된다.

본 연구에서 補瀉 手技法의 효과를 실험 적으로 규명하고자 실험적으로 유발된 2K1C 고혈압 동물 모델에 대하여 腎實證에 활용되는 腎勝格 穴位 중 ‘實則瀉其子’의 穴 位인 大敦·湧泉을 취하여 捻轉 및 迎隨補瀉 手技法을 시행한 바 기간(횟수)이 오래될수 록 보다 효과적인 혈압 강하가 유도되어 기 간(횟수)이 주요한 의미를 갖는 것으로 사 료되며, 또한 大敦·湧泉에 대하여서는 瀉法 手技法이 보다 효과적으로 혈압 강하 작용 이 발현됨을 나타내는 것으로 사료되며, 또 한 迎隨 瀉法를 겸하는 것에 대한 특이성은 분명하지 않은 것으로 나타났다. 앞으로 補 瀉 手技法을 보다 규격화하여 시술함으로써 그 발현 특성을 비교 관찰하는 연구가 요구 되며, 그리고 留鍼時間, 强度, 治療回數 등에 대한 심도있는 관찰이 필요하리라고 사료된 다.

Ⅴ. 結 論

실험적으로 유발된 2K1C 고혈압 동물 모 델에 대하여 腎實證에 활용되는 腎勝格 穴 位 중 ‘實則瀉其子’의 穴位인 大敦·湧泉을 취하여 捻轉 및 迎隨補瀉 手技法에 따른 혈 압 변동, 혈장 renin, ANP 및 심장비대지수

를 비교 관찰한 바 다음과 같은 결론을 얻 었다.

1. 수축기 혈압변화에서는, 대조군에 비하여 大敦·湧泉 食指向前 捻轉 手技群인 Acu-2군의 5회째, 大敦·湧泉 迎隨 瀉法 手技群인 Acu-3군의 4회째, 大敦·湧泉 迎 隨 瀉法․食指向前 捻轉 手技群인 Acu-4 군의 5회째에 각각 유의한 감소를 나타내 었으며, 초기값을 기준으로 백분율로 비 교하였을 시에는, 大敦·湧泉 拇指向前 捻 轉 手技群인 Acu-1군에서 2회째, 大敦·湧 泉 食指向前 捻轉 手技群인 Acu-2군에서 5회째, 大敦·湧泉 迎隨 瀉法 手技群인 Acu-3군에서 4회째, 大敦·湧泉 迎隨 瀉 法․食指向前 捻轉 手技群인 Acu-4군에 서 2회째 및 5회째에 각각 유의한 감소함 을 나타내었다.

2. 혈장 renin의 변화에서는, 대조군에 비하 여 大敦·湧泉 食指向前 捻轉 手技群인 Acu-2군과 大敦·湧泉 迎隨 瀉法․食指向 前 捻轉 手技群인 Acu-4군에서 유의한 감소를 나타내었다.

3. 혈장 ANP의 변화에서는, 대조군에 비하 여 大敦·湧泉 食指向前 捻轉 手技群 Acu-2군에서 유의한 증가를, 大敦·湧泉 迎隨 瀉法․食指向前 捻轉 手技群인 Acu-4군에서 유의한 감소를 나타내었다.

4. 심장비대지수의 변화에서는, 대조군에 비 하여 大敦·湧泉 拇指向前 捻轉 手技群인 Acu-1군, 大敦·湧泉 食指向前 捻轉 手技 群인 Acu-2군, 大敦·湧泉 迎隨 瀉法 手技 群인 Acu-3군, 大敦·湧泉 迎隨 瀉法․食

指向前 捻轉 手技群인 Acu-4군 모두에서 유의한 감소를 나타내었다.

參考文獻

1. 전국한의과대학 침구경혈학교실 편저. 침 구학(下). 서울 : 집문당. 1991 : 1017, 1082-4, 1119-32.

2. 전국한의과대학 침구경혈학교실 편저. 침 구학(上). 서울 : 집문당. 1991 : 184.

3. 김완희. 고혈압치료의 변증에 관한 연구.

대한한의학회지. 1982 ; 3(2) : 3-15.

4. 김진수. 오행침의 체질운용. 부천 : 전국 의학사. 2002 : 9-11, 67.

5. Okamoto K, Aoki K. Developement of a strain of spontaneously hypertensive rat.

Jap Circ J. 1963 ; 27 : 282-93.

6. Yamori Y. Physiopathology of the various strains of spontaneously hypertensive rats. In: Genest J, Kuchel O, Hamet P, Cantin M (eds) Hypertension. New York : McGraw-Hill. 1983 : 556-81.

7. 강두희. 생리학. 서울 : 신광출판사. 1992 : 6-87.

8. 문경숙, 류충렬, 조명래. 태백·신문 및 대 돈·용천에 시술한 죽여 약침이 2K1C 고 혈압 백서의 혈압에 미치는 영향. 대한침 구학회지. 2006 ; 23(3) : 165-72.

9. 박은주, 나창수 , 윤여충 , 조명래.《 난경 》 오사론을 적용한 침법이 2K1C 고혈압 백 서의 혈압에 미치는 영향. 대한침구학회 지. 2003 ; 20(1) : 1-12.

10. 김영진. 맥진을 통한 고혈압의 목화혈 치료. 맥진학회지. 2000 ; 5 : 70-94.

11. 윤여충, 장경선, 이해룡. 오행침법 효과 에 대한 정량적 연구. 대한침구학회지.

1998 ; 15(2) : 211-25.

12. 주현욱, 이경상, 이재황, 김성균. 사암침 법 임상강좌. 고양 : 대성의학사. 2005 : 122-3, 149-50, 189-200, 258-9.

13. 최승훈. 난경입문. 서울 : 법인문화사.

1998 : 310-2, 331-4.

14. 한창현, 박경호, 신미숙, 신선화, 최선미.

고혈압 환자에서 화침법(和鍼法)의 혈압 강하 효과. 대한침구학회지. 2006 ; 23(6) : 165-76.

15. 대한의학협회분과학회협의회. 고혈압. 서 울 : 여문각. 1986 : 39-52.

16. 조경우, 김선희, 소준노, 류훈, 설경환. 신 성 고혈압 백서에서 Atrial Natriuretic Peptide의 신장기능에 미치는 효과. 대한 생리학회지. 1989 ; 23(1) : 67-78.

17. Zhang CL, McKinsey TA, Chang S, Antos CL, Hill JA, Olson EN. Class II histone deacetylases act as signal-responsive repressors of cardiac hypertrophy. Cell.

2002 ; 110(4) : 479-88.

18. Farina NK, Johnston CI, Burrell LM.

Reversal of cardiac hypertrophy and fibrosis by S21402, a dual inhibitor of neutral endopeptidase and angiotensin converting enzyme in SHRs. J Hypertens. 2000 ; 18(6) : 749-55.